病毒的检测病毒感染微生物的方法ch26PPT.ppt
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病毒感染的检查方法及防治原则课件
分子生物学技术 PCR
Northern blot
中和试验
血凝抑制试验
补体结合试验 免疫扩散等
病毒的血清学诊断
第二节 病毒感染的防治
免疫预防
人工主动免疫 灭活疫苗： 乙脑疫苗 狂犬疫苗 流感灭活疫苗
HAV，HBV疫苗等 减毒活疫苗： 脊髓灰质炎疫苗 麻疹疫苗
HAV疫苗 腮腺炎疫苗 风疹疫苗
亚单位疫苗：
病毒感染的检查 方法及防治原则
法方养培大三
2、常规分离与鉴定 动物接种 鸡胚接种 组织培养 器官培养 移植培养 原代细胞培养 细胞培养 二倍体细胞培养 传代细胞培养
1、CPE
病毒在细胞内增殖的指标
ห้องสมุดไป่ตู้
正常细胞 病变细胞
2、红细胞吸附
光镜-----包涵体 电镜 免疫荧光
病毒的快速诊断
ELISA
Southern blot 杂交
药物防治
金刚烷胺-------抑制病毒脱壳-----预防感冒
RNA或DNA类似物 ------治疗疱疹性脑炎等疱疹病毒感染
阿糖腺苷类、 无环鸟苷、 二羟丙氨甲基鸟嘌呤 迭氮酰氨胸苷
抑制人类 HIV 逆转录作用
治疗AIDS
干扰素 干扰素诱生剂
中草药
病毒学- 病毒的检验PPT课件
病毒学- 病毒的检验
常用的病毒检验方法包括：
一、病毒的分离鉴定 二、病毒感染性的检测 三、病毒颗粒检测 四、病毒的血清学检查 五、病毒的分子(蛋白和核酸)检测
一、病毒的分离鉴定
病毒的分离与鉴定可为病毒感染提供最为直 接的病原学证据，同时可为进一步的病毒学 研究提供材料。 病毒的分离和鉴定（含义）：指从病人、带 毒者、外界环境中采集标本经过适当的处理, 采用一系列物理、化学、生物学等手段,将病 毒从标本中分离出来,并通过有关特异性方法 鉴定属于何种病毒,这一方法称为病毒的分离 与鉴定。
（2）鸡胚培养法
鸡胚对多种病毒敏感。 不同病毒在鸡胚的不同部位的生长特性差异 很大,因此选择适当的接种途径是病毒分离成 功的关键。 一般采用孵化9～14天的鸡胚，根据病毒种类 不同，将病毒标本 接种于鸡胚的不同部位， 最常用的鸡胚接种部位有：尿囊腔、绒毛尿 囊膜、卵黄囊和羊膜腔等。
（3）细胞培养 (cell culture)法或 组织培养法 (tissue culture)
病毒的分离与鉴定包括：
1病毒的形态学观察→4、 病毒的理化特性测定→5、病毒的血清
学鉴定及病毒的分子生物学鉴定等基本
过程。
（一）标本的采取与送检
病料采集适当与否,直接影响病毒的检测结果。 一般可采集发病或死亡动物的组织病料、分泌 物或粪便等,主要因动物及病毒的种类而异, 例如检测犬细小病毒或轮状病毒,一般应采腹泻 幼犬或犊牛的粪便;
标本处理：
采集样本在接种细胞、鸡胚或动物之前,都需要做适 当的处理,以保证病毒分离的成功几率。 采集的器官或组织样本：如肺脏、脑、肝、脾、淋巴 结等,可取一小块进行充分研磨,加入含青、链霉素的 Hanks液,离心取上清液作为接种物; 鼻液、脓汁、乳汁等分泌物或渗出液、粪便,应加入 高浓度的抗生素,充分混匀后,置4℃冰箱内处理2~4h 或过夜,离心后取上清做接种用; 咽喉拭子在取样后应迅速将其浸泡入含有2%小牛血 清和一定浓度的青、链霉素的Hanks液中,充分刷洗 棉拭子,反复冻融3~5次,离心后取上清液作为接种材料。
常用的病毒检验方法包括：
一、病毒的分离鉴定 二、病毒感染性的检测 三、病毒颗粒检测 四、病毒的血清学检查 五、病毒的分子(蛋白和核酸)检测
一、病毒的分离鉴定
病毒的分离与鉴定可为病毒感染提供最为直 接的病原学证据，同时可为进一步的病毒学 研究提供材料。 病毒的分离和鉴定（含义）：指从病人、带 毒者、外界环境中采集标本经过适当的处理, 采用一系列物理、化学、生物学等手段,将病 毒从标本中分离出来,并通过有关特异性方法 鉴定属于何种病毒,这一方法称为病毒的分离 与鉴定。
（2）鸡胚培养法
鸡胚对多种病毒敏感。 不同病毒在鸡胚的不同部位的生长特性差异 很大,因此选择适当的接种途径是病毒分离成 功的关键。 一般采用孵化9～14天的鸡胚，根据病毒种类 不同，将病毒标本 接种于鸡胚的不同部位， 最常用的鸡胚接种部位有：尿囊腔、绒毛尿 囊膜、卵黄囊和羊膜腔等。
（3）细胞培养 (cell culture)法或 组织培养法 (tissue culture)
病毒的分离与鉴定包括：
1病毒的形态学观察→4、 病毒的理化特性测定→5、病毒的血清
学鉴定及病毒的分子生物学鉴定等基本
过程。
（一）标本的采取与送检
病料采集适当与否,直接影响病毒的检测结果。 一般可采集发病或死亡动物的组织病料、分泌 物或粪便等,主要因动物及病毒的种类而异, 例如检测犬细小病毒或轮状病毒,一般应采腹泻 幼犬或犊牛的粪便;
标本处理：
采集样本在接种细胞、鸡胚或动物之前,都需要做适 当的处理,以保证病毒分离的成功几率。 采集的器官或组织样本：如肺脏、脑、肝、脾、淋巴 结等,可取一小块进行充分研磨,加入含青、链霉素的 Hanks液,离心取上清液作为接种物; 鼻液、脓汁、乳汁等分泌物或渗出液、粪便,应加入 高浓度的抗生素,充分混匀后,置4℃冰箱内处理2~4h 或过夜,离心后取上清做接种用; 咽喉拭子在取样后应迅速将其浸泡入含有2%小牛血 清和一定浓度的青、链霉素的Hanks液中,充分刷洗 棉拭子,反复冻融3~5次,离心后取上清液作为接种材料。
病毒学- 病毒的检验ppt课件
动物的接种途径要根据病毒种类、实验动物 种类、接种材料等选择合适的接种途径。动 物接种途径的选择正确与否对提高病毒分离 成功率也起到重要作用。
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10
常见病毒常用实验动物及接种途径
P37
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11
实验动物采血
在动物实验的期间或结束时采集动物血液检测病毒或特 异性抗体。
实验动物采血分为致死性采血和非致死性采血两种。
5
应注意下列原则：
1.对本身带有杂菌 (如咽喉拭子、粪便) 或易 受污染的标本，要进行病毒分离培养时，应 使用抗生素。
2.因病毒在室温中易失去活性，标本应低温 保存并尽快送检。
3.血清学诊断标本的采取应在发病初期和病 后2～3w内各取1份血清，以便对比双份血清 抗体效价的动态变化。
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致死性采血是指尽量采集动物血,直至动物死亡。
非致死性采血是指采集一定量的动物血而不致动物死亡。
对采血动物,应在禁食24h后采血。采血应无菌操作。
不同动物采用不同的采血方法。常用的有心脏采血法、 眼眶采血法、颈静脉采血法、颈动脉采血法、耳静脉采 血法等。根据实验动物和实验条件灵活选用。
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病毒的分离和鉴定（含义）：指从病人、带 毒者、外界环境中采集标本经过适当的处理, 采用一系列物理、化学、生物学等手段,将病 毒从标本中分离出来,并通过有关特异性方法 鉴定属于何种病毒,这一方法称为病毒的分离 与鉴定。
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3
病毒的分离与鉴定包括：
1、病毒材料的采集与准备 →2、病毒的 分离与培养→3、病毒的形态学观察→4、 病毒的理化特性测定→5、病毒的血清 学鉴定及病毒的分子生物学鉴定等基本 过程。
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常见病毒常用实验动物及接种途径
P37
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11
实验动物采血
在动物实验的期间或结束时采集动物血液检测病毒或特 异性抗体。
实验动物采血分为致死性采血和非致死性采血两种。
5
应注意下列原则：
1.对本身带有杂菌 (如咽喉拭子、粪便) 或易 受污染的标本，要进行病毒分离培养时，应 使用抗生素。
2.因病毒在室温中易失去活性，标本应低温 保存并尽快送检。
3.血清学诊断标本的采取应在发病初期和病 后2～3w内各取1份血清，以便对比双份血清 抗体效价的动态变化。
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致死性采血是指尽量采集动物血,直至动物死亡。
非致死性采血是指采集一定量的动物血而不致动物死亡。
对采血动物,应在禁食24h后采血。采血应无菌操作。
不同动物采用不同的采血方法。常用的有心脏采血法、 眼眶采血法、颈静脉采血法、颈动脉采血法、耳静脉采 血法等。根据实验动物和实验条件灵活选用。
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病毒的分离和鉴定（含义）：指从病人、带 毒者、外界环境中采集标本经过适当的处理, 采用一系列物理、化学、生物学等手段,将病 毒从标本中分离出来,并通过有关特异性方法 鉴定属于何种病毒,这一方法称为病毒的分离 与鉴定。
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3
病毒的分离与鉴定包括：
1、病毒材料的采集与准备 →2、病毒的 分离与培养→3、病毒的形态学观察→4、 病毒的理化特性测定→5、病毒的血清 学鉴定及病毒的分子生物学鉴定等基本 过程。
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病毒学-病毒的检验PPT
分子生物学检验
基因测序
对病毒基因组进行测序分析，可精确 鉴定病毒种类和变异情况，为病毒溯 源和防控提供重要依据。
基因芯片技术
利用芯片上固化的探针与病毒核酸进 行杂交，实现对病毒基因组的快速检 测和分型。
免疫学检验
血清学试验
通过检测血清中的病毒抗体，了解机体对病毒的免疫应答和病毒感染状态，如抗 体效价检测、中和试验等。
病毒的纯化与鉴定
纯化方法
采用物理、化学或免疫学方法对病毒 进行纯化，以去除杂质。
鉴定方法
纯化与鉴定注意事项
确保纯化的病毒具有代表性，且无交 叉污染，同时要选择适当的鉴定方法， 以保证结果的准确性和可靠性。
通过电镜观察、免疫学检测、分子生 物学等方法对病毒进行鉴定。
04 病毒的基因组与蛋白质组 研究
免疫荧光技术
利用荧光物质标记抗体或抗原，与细胞或组织中的相应抗原或抗体结合，通过荧 光显微镜观察实现病毒的定位和定性检测。
03 病毒的分离与培养
病毒的分离
01
02
03
分离方法
根据病毒的特性，选择合 适的分离方法，如细胞培 养、鸡胚接种、动物接种 等。
分离过程
将病毒从感染的细胞、组 织或动物中分离出来，并 进行初步的纯化。
病毒基因组的结构与功能
病毒基因组的结构
病毒基因组通常由单链或双链DNA或RNA构成，具有特定的 基因排列顺序。
病毒基因组的功能
病毒基因组通过编码蛋白质和调控蛋白来行使复制、转录、 翻译等功能，以实现病毒的增殖和感染过程。
病毒蛋白质的结构与功能
病毒蛋白质的结构
病毒蛋白质具有特定的空间构象和氨 基酸序列，决定了其生物学功能。
病毒培养
将病毒接种在敏感细胞或动物中 ，观察病毒的繁殖过程和细胞病 变，是形态学检验的重要手段。
病毒感染的实验诊断PPT课件
（2） 组织培养的类型 A 器官培养：如气管、肠段。器官保存了原
功 能，用于分离某些有器官特异性的病毒。
B 组织块培养：如肝组织块培养肝炎病毒。
（3）细胞培养的种类和法
根据细胞的来源、染色体特性和传代次数的 不同可分为三类：
1． 原代和次代细胞培养
离体的新鲜组织或器官，机械处理
胰
蛋白
洗 吹打
酶消化 单个细胞悬液
涤
加入营养液
1-3次
细胞计数 、调整细胞浓度
分
装在培养
生长
胰酶消化 形成单层
转种新的培养瓶
细胞，称为次代细胞培养
2． 二倍体细胞株
原代细胞多次连续传代后仍保持二倍 体染色体特性（即含23对染色体），称之为二 倍体细胞。传代细胞寿命一般为40~50代，大 多数为成纤维细胞,如人胚肺细胞。广泛用于 病毒分离和疫苗制备。
3．传代细胞系
来源于肿瘤细胞或细胞株传代过程的 变异细胞。细胞增殖特征和染色体均类似于肿 瘤细胞。不宜用于疫苗的制备，常用于病毒的 分离和鉴定。
（4）组织培养的特点
优点：A．来源广；B．不受机体免 疫因素影响，个体差异小，敏感范围广； C．易于观察病变；D．可用于病毒的分离、鉴 定、疫苗的制备；E．易管理，相对比较经济。
（4） 粪便标本 取2~4g粪便标本在无菌的容
器中，加8~10ml运送液立即送检。
（5） 含漱液 可用无菌生理盐水，让患者
含漱几次取得，与运送液等量混合。
（6） 喉拭子：用生理盐水湿润的拭子 采
中，注意
取咽喉部表面，置运送液
避免唾液污染。 （7）尿道拭子及尿液标本：尿道拭子伸
以获
入尿道4cm轻轻转动2~3次，
病毒分离培养
功 能，用于分离某些有器官特异性的病毒。
B 组织块培养：如肝组织块培养肝炎病毒。
（3）细胞培养的种类和法
根据细胞的来源、染色体特性和传代次数的 不同可分为三类：
1． 原代和次代细胞培养
离体的新鲜组织或器官，机械处理
胰
蛋白
洗 吹打
酶消化 单个细胞悬液
涤
加入营养液
1-3次
细胞计数 、调整细胞浓度
分
装在培养
生长
胰酶消化 形成单层
转种新的培养瓶
细胞，称为次代细胞培养
2． 二倍体细胞株
原代细胞多次连续传代后仍保持二倍 体染色体特性（即含23对染色体），称之为二 倍体细胞。传代细胞寿命一般为40~50代，大 多数为成纤维细胞,如人胚肺细胞。广泛用于 病毒分离和疫苗制备。
3．传代细胞系
来源于肿瘤细胞或细胞株传代过程的 变异细胞。细胞增殖特征和染色体均类似于肿 瘤细胞。不宜用于疫苗的制备，常用于病毒的 分离和鉴定。
（4）组织培养的特点
优点：A．来源广；B．不受机体免 疫因素影响，个体差异小，敏感范围广； C．易于观察病变；D．可用于病毒的分离、鉴 定、疫苗的制备；E．易管理，相对比较经济。
（4） 粪便标本 取2~4g粪便标本在无菌的容
器中，加8~10ml运送液立即送检。
（5） 含漱液 可用无菌生理盐水，让患者
含漱几次取得，与运送液等量混合。
（6） 喉拭子：用生理盐水湿润的拭子 采
中，注意
取咽喉部表面，置运送液
避免唾液污染。 （7）尿道拭子及尿液标本：尿道拭子伸
以获
入尿道4cm轻轻转动2~3次，
病毒分离培养
-病毒感染的检查方法与防治原则PPT课件
可对病毒进行基因分型
灵敏度高、特异性好、快速、简捷
3. 病毒分子生物学检查
方法：
核酸电泳(nucleic acid electrophoresis) 核酸杂交(nucleic acid hybridization) 核酸扩增(PCR） 基因芯片(gene chip) 基因测序(gene sequence)
①原代培养细胞（primary cultural cells)
剪碎 蛋白酶 组织 组织块 分散的单个细胞
培养基 单层细胞
(原代细胞)
单层细胞 传代培养
(次代细胞)
①原代培养细胞（primary cultural cells)
epithelial cells
①原代培养细胞（primary cultural cells) 特点:
4. 病毒的分离培养与鉴定
◙ 病毒的分离培养 : ◙ 病毒的鉴定 ◙ 病毒数量及感染性测定
病毒的分离培养方法：
鸡胚培养
细胞培养
:
动物接种
⑴ 动物接种(animal inoculation)
动物：鼠、兔、猴、黑猩猩等
优点：结果易观察，可建立动物模型
缺点：有饲养条件要求，费用高、动物 体内常带有潜伏病毒。 目前已很少应用。
◙ 对多种病毒敏感
◙ 生长能力有限, 获取成本高 ◙ 可携带潜伏病毒 应用: ◙ 病毒分离与鉴定 ◙ 病毒学实验研究 ◙ 不能用于制备疫苗
②二倍体细胞株 (diploid cell strain)
体外分裂50~100代仍保持二倍染色体数目的单层细胞 特点: ◙ 对多种病毒敏感 ◙ 不带异种蛋白(人源性) ◙ 不带病毒,无致瘤潜能 应用: ◙ 病毒分离与鉴定 ◙ 病毒学实验研究 ◙ 制备疫苗 fibroblastic cells
灵敏度高、特异性好、快速、简捷
3. 病毒分子生物学检查
方法：
核酸电泳(nucleic acid electrophoresis) 核酸杂交(nucleic acid hybridization) 核酸扩增(PCR） 基因芯片(gene chip) 基因测序(gene sequence)
①原代培养细胞（primary cultural cells)
剪碎 蛋白酶 组织 组织块 分散的单个细胞
培养基 单层细胞
(原代细胞)
单层细胞 传代培养
(次代细胞)
①原代培养细胞（primary cultural cells)
epithelial cells
①原代培养细胞（primary cultural cells) 特点:
4. 病毒的分离培养与鉴定
◙ 病毒的分离培养 : ◙ 病毒的鉴定 ◙ 病毒数量及感染性测定
病毒的分离培养方法：
鸡胚培养
细胞培养
:
动物接种
⑴ 动物接种(animal inoculation)
动物：鼠、兔、猴、黑猩猩等
优点：结果易观察，可建立动物模型
缺点：有饲养条件要求，费用高、动物 体内常带有潜伏病毒。 目前已很少应用。
◙ 对多种病毒敏感
◙ 生长能力有限, 获取成本高 ◙ 可携带潜伏病毒 应用: ◙ 病毒分离与鉴定 ◙ 病毒学实验研究 ◙ 不能用于制备疫苗
②二倍体细胞株 (diploid cell strain)
体外分裂50~100代仍保持二倍染色体数目的单层细胞 特点: ◙ 对多种病毒敏感 ◙ 不带异种蛋白(人源性) ◙ 不带病毒,无致瘤潜能 应用: ◙ 病毒分离与鉴定 ◙ 病毒学实验研究 ◙ 制备疫苗 fibroblastic cells
病毒感染的检查PPT模板共34页文档
病毒感染的检查PPT模板
26、机遇对于有准备的头脑有特别的 亲和力 。 27、自信是人格的核心。
28、目标的坚定是性格中最必要的力 量泉源 之一， 也是成 功的利ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ器之一 。没有 它，天 才也会 在矛盾 无定的 迷径中 ，徒劳 无功。- -查士 德斐尔 爵士。 29、困难就是机遇。--温斯顿．丘吉 尔。 30、我奋斗，所以我快乐。--格林斯 潘。
56、书不仅是生活，而且是现在、过 去和未 来文化 生活的 源泉。 ——库 法耶夫 57、生命不可能有两次，但许多人连一 次也不 善于度 过。— —吕凯 特 58、问渠哪得清如许，为有源头活水来 。—— 朱熹 59、我的努力求学没有得到别的好处， 只不过 是愈来 愈发觉 自己的 无知。 ——笛 卡儿
拉
60、生活的道路一旦选定，就要勇敢地 走到底 ，决不 回头。 ——左
26、机遇对于有准备的头脑有特别的 亲和力 。 27、自信是人格的核心。
28、目标的坚定是性格中最必要的力 量泉源 之一， 也是成 功的利ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ器之一 。没有 它，天 才也会 在矛盾 无定的 迷径中 ，徒劳 无功。- -查士 德斐尔 爵士。 29、困难就是机遇。--温斯顿．丘吉 尔。 30、我奋斗，所以我快乐。--格林斯 潘。
56、书不仅是生活，而且是现在、过 去和未 来文化 生活的 源泉。 ——库 法耶夫 57、生命不可能有两次，但许多人连一 次也不 善于度 过。— —吕凯 特 58、问渠哪得清如许，为有源头活水来 。—— 朱熹 59、我的努力求学没有得到别的好处， 只不过 是愈来 愈发觉 自己的 无知。 ——笛 卡儿
拉
60、生活的道路一旦选定，就要勇敢地 走到底 ，决不 回头。 ——左
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六、 感染组织的组织学检查
病毒在光学显微镜下无法看到，但是在某些 病毒感染细胞内出现包涵体，或者细胞形态发生 变化，则对诊断有重要意义。如Negri氏包涵体 是狂犬病犬脑细胞的特征。病理组织或渗出液作 成涂片检查包涵体时，常用苏木紫-伊红染色法。
狂犬病毒包涵体（Negri body）
免疫电镜技术是将抗原抗体反应的特异性与电 子显微镜的高分辨力相结合，在亚细胞和超微 结构水平上对抗原物质进行定位分析的一种高 度精确、灵敏的方法。
（1）免疫凝集电镜技术
抗原与抗体凝集反应后，可使标本中病毒颗粒聚 集成团，再经负染直接在电镜下观察，提高了敏 感性，确定病毒的血清学性质。
（2）免疫电镜定位技术
特异性抗体用电子致密物质，如铁蛋白、过氧化物酶等标 记后，使之与组织超薄切片中的抗原结合，在电镜下观察 到标记物所在位置，即为抗原抗体反应的部位。
酶标记染色
四、 血清学试验
是一种常用的诊断病毒病的方法。可采用 ELISA、琼脂扩散、中和试验、标记抗体技术 等免疫血清学方法检查病畜的抗体消长情况和 发病组织中的病毒抗原。
（1）间接ELISA
（2）夹心ELISA
五、分子生物学技术
1. 聚合酶链反应 2. （PCR）
3′ 5′
3′ 5′
3′ 5′
5′
3′ 3′
3′ 5′ 3′ 5′
5′
模板DNA双链
3′
5′
变性
3′
5′
5′
退火
3′
5′
3′
形成新的双链 5′ DNA
3′
2. 核酸杂交技术
核酸探针（probe）是指能与特定核酸序列 发生特异性互补的已知核酸片段，可检测 待检样品中特定的基因顺序。
2. 血吸附和血凝作用 多见于以出芽方式释放的病毒。
感染细胞具有吸附红细胞的能力 感染细胞的培养液中有许多游离病毒存在，具有凝集红细胞
的作用
（1）血吸附作用
吸附试验可通过特异抗血清抑制来达到鉴定 具有吸附特性的病毒
正常细胞
红细胞吸附
（2）血凝作用
血凝试验
血凝抑制试验
（3）病毒成分的直接检测
透射电子显微镜
1. 正染法：超薄切片法
取材
戊二醛 固定
四氧化锇
清洗与 脱水
切片
染色
铀染 铅染
浸透 包埋 聚合
鸡痘病毒（超薄切片）
超薄切片法的优缺点：
优点：可观察病毒形态和形态发生过程 缺点：操作复杂，费时，但标本可长时间保存
2.负染技术
负染是指通过重金属盐在样品四周的堆积而 加强样品外周的电子密度，使样品显示负的 反差，衬托出样品的形态和大小。
样品
染液（常用磷钨酸）
铜网
滤纸
1-2分钟后电镜观察
口蹄疫病毒的电镜负染
负染法的优缺点：
优点：快速简易（10-20min）；分辨率高；图象清晰
地病毒结构 缺点：敏感性低，要求病毒量在107以上；所有样品应处
于悬浮状态
3.免疫电镜技术(Immune electron microscopy，IEM)
用免疫学或分子生物学技术直接检查感染 细胞或其上清液中病毒抗原（或核酸）。
三、 电子显微镜检查
病毒的很多特征如大小、形态、结构等必须借 助电子显微镜进行检查。对于目前尚难培养而形态 又非常典型的病毒，可直接从感染组织或分泌液， 或者接种病料的鸡胚和细胞培养收获的材料作电子 显微镜检查，直接观察病毒粒子。
病毒的检测(病毒感染微生物的方法)ch26
一、标本采集与送检
（一）供分离病毒、检出核酸及抗原的标本
原则： 1.尽早采取：发病初期 2.部位适宜：由感染部位采取 3.冷藏速送：装有冰块或干冰的容器内
（二）检测特异性抗体 的标本
采集双份血清，4-20℃保存
病毒材料采集与检验结果的关系
采取标本的时期 检查病毒及其成分 测定抗体
潜伏期及前驱期 刚发病或急性期
较难查见 最多查见
未增多
未增多或增 多不明显
恢复期及康复期
很难查见
明显增多 （常超过4倍）
二、常规分离与鉴定
病毒分离是诊断病毒感染的金标准，一旦阳性，即 可确诊。
不适用于快速诊断，操作复杂，实验成本高，阳性 检出率低等
有时不得不分离病毒，例如发现了一种新的病毒病， 必须分离病毒进行研究，或者分离株的鉴定对流行 病学有很大作用（如流感病毒），或者需要培育疫 苗，或者希望获得天然弱毒株等。
1.中和反应
观察特异性抗体能否保护易感的试验动物死亡，能否 抑制病毒的细胞病变效应。凡能与病毒结合，使其失 去感染力抗体又称中和抗体。
virus
2.补体结合反应
Ag
补体
Ab
红细胞
溶血素
溶血 （-）
Ag
补体
红细胞
不溶血 （+）
Ab
溶血素
3.免疫扩散
4.酶联免疫吸附试验 （ELISA）
将已知的抗体或抗原结合在某种固相裁体上，并 保持其免疫活性。测定时，将待检标本和酶标抗 原或抗体按不同步骤与固相载体表面吸附的抗体 或抗原发生反应。然后加入酶的作用底物催化显 色，进行定性或定量测定。