细菌的药物敏感性试验

细菌的药物敏感性试验

目的要求掌握圆纸片扩散法测定细菌对抗生素等药物的敏感试验的操作方法和结果判定，明确药敏试验在实际生产中的应用。

仪器及材料接种环、酒精灯、试管架、眼科镊子、温箱、普通琼脂平板、抗菌药物纸片、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的培养物。

方法与步骤

1．制备固体培养基磺胺类药物用无蛋白胨的培养基。

2．涂菌或涂病料无菌操作取细菌培养物或病料，在

培养基平板上均匀密集划线。

3．放置药物纸片用灭菌小镊子夹取抗菌药物圆纸片

（每次取一片），轻轻贴在已接种细菌的琼脂培养基表面，

一次放好，不能移动，放好后轻压纸片以固定。

纸片间的距离：约为2-4cm。

纸片距平皿边缘的距离：约为1.5cm。

4.培养、观察平皿倒置，37℃温箱中培养18～24h，观察结果。根据纸片周围有无抑菌圈及其直径大小，按下列标准确定细菌对抗生素等药物的敏感度及药物间的相互关系。

细菌对不同抗菌药物敏感度标准

药物名称抑菌圈直径（mm）敏感度

青霉素（50μg/ml）无抑菌圈

＜10

11～26

＞26

不敏感

低度敏感

中度敏感

高度敏感

链霉素（500μg/ml）无抑菌圈

＜10

11～15

＞15

不敏感

低度敏感

中度敏感

高度敏感

新霉素（300μg/ml）无抑菌圈

＜10

11～25

＞25

不敏感

低度敏感

中度敏感

高度敏感

附：干燥抗菌纸片的制备

取直径6mm的无菌滤纸片，浸于一定浓度的抗菌药液中，一般每毫升抗菌药液中，装滤纸片100片，浸泡1～2h后，37℃干燥或真空干燥，密封冷藏备用，药剂可维持1～2月有效。