药物敏感试验 PPT课件

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药物过敏试验法 ppt课件

药物过敏试验法 ppt课件

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过敏性休克
特点 反应迅速、强烈、消失快。 可发生于用药后5-20分钟 甚至在用药数秒内发生 可发生于皮内试验过程中 多发生于初次注射时(皮试阴性) 也可发生于连续用药过程中
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过敏性休克的表现
● 呼吸道阻塞症状 ● 循环衰竭症状 ● 中枢神经系统症 状 ● 其它过敏反应
支气管痉挛, 由于周围血管扩 张导致有效循环 渗出。 因喉头 荨麻疹 因脑组织缺氧所 血量不足 水肿、肺水肿 致 表现为 恶心 所引起 表现为 面色苍白、冷汗、 呕吐 表现为 头晕眼花、面及 紫绀、 脉细弱、 胸闷、气促、 四肢麻木、意识 腹痛 血压下降、烦躁 丧失、抽搐或大 哮喘与呼吸困 不安 腹泻 小便失禁等 难 发热
半合成青霉素(如阿莫西林、氨苄西林、羧苄西 林等)与青霉素之间有交叉过敏反应,用药前同 样要做皮肤过敏试验
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青霉素皮内试验液
● 皮内试验药液 100-500u/1ml ● 注入剂量 10-50u/0.1ml
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皮内试验液配制方法
80万u青霉素+生理盐水4ml,稀释后含青霉素 20万u /1ml ● 取0.1ml+NS至1ml, 含PC2万u/ 1ml ● 取0.1ml+NS至1ml, 含PC2000u /1ml ● 取0.1ml/0.25mlNS至1ml,含PC200u/1ml ● 500u/1ml ●
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头孢菌素
头孢菌素(先锋霉素) 是高效、低毒 、广谱,广泛应用的抗菌素。因可致 过敏用反应,用药前需做皮肤过敏性 试验。
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过敏反应的原因
● 头孢菌素过敏反应的机理与青霉素相似 ● 主要由于抗原与抗体的相互作用而引起 ● 对青霉素过敏者约有10%~30%对头孢菌素过敏 ,而对头孢菌素过敏者绝大多数对青霉素过敏。

药敏试验

药敏试验

判定标准
清晰无细菌生长的试管对应的药物浓度为该药
的MIC;
以MIC前2支试管液体涂培养基
培养 菌落少于5个的试管对应的药物浓度为该 药的MBC。
试 材
试管、移液管、营养琼脂和营养肉汤
方 法
(1)制备药液、菌液、培养基; (2)向第1支试管中加入0.9mL营养肉汤、其 余各试管中加入0.5mL; (3)向第1支试管中加0.1mL药液 取0.5mL 加到第2支试管中……至13支试管,取0.5mL涂 平板 向1-14试管中各加0.5mL菌液 培养。
耐药:直径<10mm液、牛津杯、钢管放置器、陶瓦盖 步 骤 (1)制备菌液:106-7 (2)制备药液:1280μg/mL (3)制备培养基 (4)涂菌液 (5)放置牛津杯 (6)加菌液 (7)盖陶瓦盖 (8)培养 (9)量直径
三、液体试管二倍稀释法
药敏实验
一、药敏纸片法
试 材
培养皿、培养基、菌种(病料)、药敏片、 培养箱
方 法
(1)制备药敏片 (2)制备培养基:营养琼脂、营养肉汤 (3)涂菌:菌液105 CFU (4)贴药敏片 (5)培养:37℃ 24小时 (6)量直径:
判定标准
敏感:直径>15mm
中度敏感: 10~15mm

《解读药敏报告》课件

《解读药敏报告》课件

药敏报告的重要性
指导临床用药
药敏报告为临床医生提供了致病微生物对各种抗菌药物的敏感性和耐药性信息,有助于医生选择 合适的药物。
提高治疗效果
通过药敏报告,医生可以选择对致病微生物敏感的抗菌药物,提高治疗效果,缩短病程。
控制耐药性的产生
药敏报告有助于医生及时发现和防止耐药性的产生,保护抗菌药物的有效性。
患者情况
一位65岁男性,因尿路感染住院 治疗。
病原体
耐万古霉素肠球菌。
药敏报告
显示该菌对多种抗生素耐药。
治疗过程
采用替加环素治疗,同时根据药 敏报告调整剂量和疗程。
THANKS
告并合理选用敏感药物。
加强与实验室的沟通合作
03
临床医生和实验室之间应加强沟通合作,及时反馈和解决药敏
试验中出现的问题。
05
实际案例分享
案例一:耐药菌感染治疗失败
01
患者情况
一位70岁女性,因
肺部感染住院治疗
02

耐药菌株
肺炎克雷伯菌,对 多种抗生素耐药。
04
结果
患者死亡,诊断为
03
多重耐药菌株感染
02
药敏报告解读步骤
确定病菌种类
01
确定病菌种类是解读药敏报告的第一步,因为 不同病菌对药物的敏感性不同。
02
通过查看报告中的细菌名称或编号,可以确定 感染的病菌类型。
03
了解病菌种类有助于医生选择合适的药物进行 治疗。
判断是否耐药
耐药性是指病菌对某些药物产 生抵抗力,导致药物无法有效 杀死或抑制病菌的生长。
04
药敏报告的局限性及未来展 望
药敏报告的局限性
01
培养基的局限性

药敏试验简介ppt课件

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– 使用CLSI 方法记录 – 采用其他方法时使用CLSI做参照方
法进行比对
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CLSI M100 “表格” 内容
更新信息
M100
词汇表 I & II & III
M2 表格 扩散法
M7 表格
附录
•抗生素的测试与报告
MIC法
•S I R 折点 •质控
•抗生素的测试与报告 •S I R 折点
– 见后面的幻灯:
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常量稀释法
•药敏试验的参考方法: 将标准接种物加入含対倍稀释抗生素的MH肉汤 管中. 过夜培养. MIC 即是能抑制细菌生长的含最低抗生素的浓度的那一 管所标示的浓度值(琼脂稀释法是将対倍稀释后的抗生素加入融化后平衡 到50℃的MHA中再倾制平皿,接种物为一定大小的斑点,浓度也为 104CFU/ml). 解释标准(S or R) 是建立在体内可达到的抗生素浓度水平上
梅里埃产品习惯采用的CLSI以外的标准
• 英国BSAC标准;
欧洲应用比较广泛的标准
• 德国DIN标准 …pp…t课件..
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CLSI药敏解释标准
• CLSI (Clinical Laboratory standard institution)药敏指南
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CLSI 药敏文件
• M100-S22 常见菌 (2012)** • M11-A7 厌氧菌 (2007) • M39-A3 积累抗菌谱(2009) • M24-A 分枝杆菌, 奴卡菌, 以及其他需氧放
• 培养时间:18小时
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测量方法
• 透射光
− 葡萄球菌
利奈唑胺 苯唑西林 万古霉素

微生物实验七药物敏感试验

微生物实验七药物敏感试验

三、实验器材


1.菌种 大肠埃希菌。 2.培养基 牛肉膏蛋白胨培养基。 3.试剂 无菌生理盐水,抗菌药物纸片: 包括青霉素、氨苄西林、土霉素、链霉 素等。 4.其他 无菌棉拭子、镊子、毫米尺、接 种环。
四、实验方法和步骤 1.菌液制备 菌浓合适,一般为106 2.接种 细菌悬液制备后15min内接种至倒好的 牛肉膏蛋白胨培养基平板中,接种量0.10.2mL。涂布均匀。
抗生素 青霉素 链霉素 土霉素 氯霉素 红霉素 抑菌圈大小(单位,mm)
量取不同药物的各抑菌圈大小,记录
六、思考题

1.圆纸片药敏试验操作时应注意什么事项? 2. 试述药敏试验的意义
全部实验完毕
(一) 操 作 方 法
期末考试安排 革兰氏混合染色(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌)
二、实验原理

将含有定量抗菌药物的纸片(药敏纸片)贴在已 接种待检菌的琼脂平板表面特定部位。药物借其 分子的扩散力向周围琼脂中扩散,形成了随着离 纸片距离加大,琼脂中的药物浓度逐渐减少的梯 度浓度。其纸片周围一定区域琼脂内的药物浓度 高于抑制待检菌所需浓度时,则该区域内细胞不 能生长,形成透明抑制圈。抑菌圈的大小可以反 映待检对测定药物的敏感程度,抑菌圈愈大,说 明该菌对此药物越敏感

四、实验方法和步骤



3.贴药敏纸片 涂布后的平板在室温下干燥3~5min,用纸片 分配器或无菌镊子将纸片贴于琼脂表面并轻压, 使纸片与琼脂表面完成接触。各纸片中心相距 应大于24mm,纸片贴上后就不能再移动位置。 4.培养 将平板倒置放入37℃培养箱培养,16~18h读取 结果。

五、实验结果
22了解药敏试验在实际生产中的重要意义了解药敏试验在实际生产中的重要意义将含有定量抗菌药物的纸片药敏纸片贴在已将含有定量抗菌药物的纸片药敏纸片贴在已接种待检菌的琼脂平板表面特定部位

4.抗菌药物的敏感性试验

4.抗菌药物的敏感性试验

肠球菌属:青霉素 、万古霉素 、甲氧苄啶/磺胺异
噁唑 、庆大霉素、环丙沙星、红霉素、氨苄西林
不动杆菌属:头孢他啶 、亚胺培南、阿米卡星、哌拉 西林/他唑巴坦、头孢吡肟 、头孢曲松 、环丙沙 星、米诺环素; 洋葱伯克霍德菌:头孢他啶 、米诺环素、甲氧苄啶/磺 胺异噁唑 、美罗培南 ;
嗜麦芽窄食单胞菌:甲氧苄啶/磺胺异噁唑、左氧氟沙 星、米诺环素 ;
嗜血杆菌属:氨苄西林、甲氧苄啶/磺胺异噁唑、头孢
他啶、美罗培南、阿奇霉素、环丙沙星、头孢克洛;
淋病奈瑟菌:头孢曲松、环丙沙星、青霉素、大观霉素、
四环素 ;
肺炎链球菌:红霉素 、苯唑西林 、甲氧苄啶/磺胺异噁唑、 克林霉素、左氧氟沙星、四环素、万古霉素 ; 除肺炎链球菌外的其他链球菌:红霉素、青霉素、克 林霉素、万古霉素、头孢曲松、左氧氟沙星。
5.盖上平板的盖子,放置培养箱内孵育,放置3~10分钟 后贴上标准抗生素纸片。
6.根据选择的菌株挑选相应的抗菌纸片。
肠杆菌科:氨苄西林、阿米卡星、哌拉西林/ 他唑巴坦、头孢噻肟、环丙沙星、亚胺培 南、氨曲南、庆大霉素; 铜绿假单胞菌:头孢他啶、庆大霉素、哌拉西林、 阿米卡星、环丙沙星、头孢吡肟、亚胺培南; 葡萄球菌属:头孢西丁、青霉素、红霉素、万古霉 素、环丙沙星、庆大霉素、利福平 ;
操作方法:1.抗菌药物的稀释和融解
2.抗菌药物母液的稀释
3.在微量聚乙烯微板孔中加入各种不同浓度的抗生素
100μ l,从低浓度往高浓度加样,不需要更换吸管。
4.挑选18~24小时的菌落置M-H肉汤增菌4~6小时。
5.制备0.5麦氏比浊管,然后1:200稀释,使之最终 浓度105 CFU/ml。
6.孵育后形成一椭圆形抑菌圈,抑菌圈和试条的相交

药物过敏反应PPT课件

药物过敏反应PPT课件
• ⑤临床征群表现明显,均有血压降低的表现,而 后相继出现一系列诸如微循环障碍、意识减弱、 呼吸困难等症状,用以进行临床鉴别诊断。
• ⑥死亡率高,其中由抗菌药物引起的过敏性休克 第14页/共32页
DAS的特点
• ⑧青霉素类与头孢菌素类、乙酞水杨酸及磺胺类为 易致敏药物,青霉素在人体内迅速水解为青霉烯酞 等约10种代谢产物,乙酞水杨酸中常有杂质乙酞水 杨酸醉,它们均易与蛋白质分子形成不可逆共价结 合成为复合抗原。磺胺类的苯胺核有较强的化学活 性,易致敏。另外有些药物间有交叉过敏性,对某 一药物的过敏反应一旦发生,就存在对化学结构相 似药物或其代谢产物发生交叉过敏反应的可能。如 磺胺类药物之间、某些氨基糖甙类之间、磺胺类与 普鲁卡因、青霉素类与头孢菌素类等均有交叉过敏 性。
• 其过敏性休克反应率也最高,占用药人数的0.004%~0.015%。
第5页/共32页
药物过敏
• 药物的不良反应与过敏反应 • 像药物的胃肠道反应如一些对胃肠道粘膜或迷走神经感受器有刺激作用的药
物都可引起恶心、呕吐均为药物不良反应不是过敏反应。
第6Байду номын сангаас/共32页
药物过敏性休克-概念 • 药物过敏性休克(drug anaphylactic shock ,DAS)是以药物作为特异性过敏原作用于过敏患者而导致周围 循环障碍为主的全身速发型变态反应,抢救不及时极易造成死亡。 第7页/共32页
内容提要
※概念 ※临床表现 ※药物过敏性休克 ※急救与护理
第1页/共32页
药 物过 敏 “过敏”(Allergy)这个词源于希腊,原意是“不正常的反应”。
现代医学认为是由于免疫系统错把一些原本无害的物质当作危险的外来入侵者,反应过度形成了过敏。统计显 示,生活中有1/3的人发生过不同程度的过敏,过敏己经成了一个很普及的话题。

抗微生物药物和敏感性试验-精品医学课件

抗微生物药物和敏感性试验-精品医学课件
物体表面,用浸湿无菌生理盐水的棉拭子在规格板内来回 涂抹10次,然后在平板上进行涂布接种。 计算公式为:
菌落数(CFU)/ cm2 = 菌落数/ 采样面积
2.压印法
用直径5cm的特制平皿(Rodac平皿),倾注于16.5ml琼 脂后可使培养基高出平皿口1~2mm,凝固后将平皿上的琼 脂直接压贴于物体表面10~20s,接触面积为19.63平方厘米。
2.对居住环境、特殊病房、实验室、无菌车间等场所空气质量 的细菌学评价。
实验目的
掌握医院感染的微生物监测方法
目的与要求
器材与试剂
器材与试剂
普通琼脂平板(直径90mm及60mm)、无菌生理盐水、无菌 棉拭子等。
步骤与方法
一、空气中细菌含量的检测
1.检测对象:医院各个科室的空气,手术室、新生儿室、产房、 烧伤病房、重症监护室等空气污染的检测,应成为医院感染 管理中特别关注的重点。
2. 用无菌棉拭子蘸取菌液,在管内壁将多余菌液旋转 挤去后在琼脂表面均匀涂布接种3次,每次旋转平板 60度,最后沿平板内缘涂抹1周。
3. 平板置室温下3-5分种后,用纸片分离器或无菌镊 将含药纸片贴于琼脂表面,各纸片中心相距应大于 24mm,纸片距平板内缘应大于15mm。(纸片选 择参照实验书p39)
药敏实验与医院感染的检测
一、抗菌药物敏感试验
抗菌药物敏感性试验
纸片琼脂扩散法
经世界卫生组织推荐,目前各国临床微生物学实验 室广泛采用的标准纸片扩散法是由Kirby和Bauer 所建立的纸片琼脂法,即Kirby-Bauer法(K-B法纸 片琼脂扩散法)
实验原理
将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板 上,纸片中所含的药物吸收琼脂中的水分溶解后不断向纸片 周围扩散形成递减的梯度浓度,在纸片周围抑菌浓度范围内 测试菌的生长被抑制,从而形成无菌生长的透明圈即为抑菌 圈.抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度。

药敏试验(扩散法)操作方法PPT课件

药敏试验(扩散法)操作方法PPT课件
(2)为方便临床给药,根据MIC提供一个定性的结果是 必要的。临床医师根据敏感、中介、耐药的提示结合 MIC可以方便地制定用药方案。
敏感(S):表示该药物对细菌的MIC值低于常规剂量下的抗菌 药物血液浓 度或组织浓度4-8倍,可以用常规剂量治愈。
中介(I):表示该药物对细菌的MIC值接近于常规剂量给药后的血药浓度 或组织药物浓度,细菌对该药的敏感性降低,但仍可用于生理性浓集部位的 感染或使用高剂量药物进行治疗(注:必须考虑高剂量的安全性)。
二、常用的药敏测定方法
1、扩散法:纸片法、牛津杯法、打孔法等。
纸片法 手工测试的方法,通过测试药物纸片在固体培养基 上的抑菌圈的大小,判断细菌对该种药物是否敏感。目前临床上 广泛使用此法。定性
2、稀释法:琼脂稀释法、液体稀释法(试管、微量)
通过测试细菌在含不同浓度药物培养基内的生长情况,判断 其最低抑菌浓度(MIC)。自动化仪器均采用液体稀释法为药敏 试验的方法。 定量
2、药片吸水量的测定 在上述药片用微量移液器进行滴 加蒸馏水,最可使药片完全浸透又不滴水为宜,最终计 算出每片药片的吸水量。一般常用直经6mm的定性滤纸 药片吸水量为0.01ml。
药液的制备(用于商品药的试验):
按兽药说明书(或标签)上标明的治疗量的10-20倍比例配制药液。 如某药品:100g兑水100kg,表明该药治疗量为1ห้องสมุดไป่ตู้兑水1L,配制 药液时就是1g加50-100ml水或1L水加10-20g药品,即为配制药敏 片所用的药液浓度。
2、成药(复方成分) 多种联合 的抗菌药物制剂应以其成分中某种 含量最高的抗菌药物为标准稀释成 有效浓度。但多数厂家由于产品配 方机密,多按产品用量进行配制。 药敏片可由厂家提供,也可自制。

抗菌药物敏感试验

抗菌药物敏感试验

操作方法:1.抗菌药物的稀释和融解
2.抗菌药物母液的稀释
3.在微量聚乙烯微板孔中加各种不同浓度的抗生素 100μl,从低浓度往高浓度加样,不需要更换吸管。
4.挑选18~24小时的菌落置M-H肉汤增菌4~6小时。
5.制备0.5麦氏比浊管,然后1:200稀释,使之最终 浓度105 CFU/ml。
除肺炎链球菌外的其他链球菌:红霉素、青霉素、克 林霉素、万古霉素、头孢曲松、左氧氟沙星。
7.用无菌镊子或纸片分配器将抗菌纸片粘贴于M-H琼脂 的表面,一旦纸片贴上,不能移动;各抗菌纸片中 心距离应大于24mm,纸片距平板内缘应大于15mm。
8.经过35℃16~24h孵育。
9.取抑菌环直径,根据 CLSI(clinical and laboratory standards institute )标准,报 告细菌对该抗生素 敏感(susceptible,S)、 耐药(resistant,R)、 中介(intermediate,I)。
纸片扩散法(KirbyBauer法)
原理:
将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测 试菌的琼脂平板上,纸片中所含的药物吸收琼 脂中水分溶解后不断向纸片周围扩散形成递减 的梯度浓度,在纸片周围抑菌浓度范围内测试 菌的生长被抑制,从而形成无菌生长的透明圈 即为抑菌圈。
抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏 感程度,并与该药对测试菌的MIC呈负相关。
第四章 抗菌药物的敏感性试验
药敏试验的意义
1、可预测抗菌治疗的效果 2、指导临床抗菌药物的使用 3、发现或提示细菌耐药机制,帮助临床医生合理使 用抗菌药物 4、监测细菌的耐用性,分析耐药菌的变化,预防和 控制耐药菌感染的发生和流行
抗菌药物的敏感性试验
常用方法:

细菌药敏试验 ppt课件

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8
4
2
重要误差
12
258
1
1
12
小误差
敏感 5
1 0.5
1
25
9
0.25 6
8 10 12 细1菌4药敏1试8 验2p0pt课件22 24 26 28 30 32 349
不同国家的判定折点 -可能不同
原因:
用药剂量不同,服药的间隔不同 评价敏感时较保守 更强调检测出耐药株(即特定的耐药群) 技术因素:接种、培养基
* M100 每年更新一次
**M2, M7 每三年更细新菌一药敏次试验 ppt课件
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药物分组
判断折点
标准菌株质控范围
特殊的耐药监测
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敏感性分类(CLSI的定义)
敏感(Susceptible)
用常规用量治疗有效 常规用药时达到的平均血药浓度超过细菌的
缓冲区:防止操作的系统误差造成重 大结果的判定错误
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药敏试验的方法学
半定量…纸片扩散法 (抑菌圈直径) MIC法:
稀释法(肉汤、琼脂) 自动化仪法 抗生素连续梯度法 (Etest ) 流式细胞仪
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纸片扩散法(Kirby-Bauer法)
将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼 脂平板上,纸片中所含的药物吸收琼脂中水分溶解后 不断向纸片周围扩散形成递减的梯度浓度,在纸片周 围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制,从而形成无 菌生长的透明圈即为抑菌圈。
细菌药敏试验 ppt课件
7
MIC与抑菌圈直径的线性关系
Log2. MIC R I

实验三_药物敏感试验和消毒灭菌 2 ppt课件

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3
ppt课件 (2)
二.培养+药敏的目的
1、 确定导致感染的病原菌的种类,对于不 同的病原菌(G-杆菌或G+球菌,条件致病 菌或急性传染病病原菌)需要采取不同的 治疗措施。
2 、 确定病原菌对各种抗生素的敏感性, 指导临床根据病人情况合理用药。由于细 菌耐药性的快速增长,单纯依赖经验选用 药物经常无效,在更多的时候需要参考药 敏实验的结果。
影响药敏结果的因素
培养基
应根据试验菌的营养需要进行配制。倾注平板时,厚度合适(约56mm),不可太薄,一般90mm直径的培养皿,倾注培养基1820ml为宜。培养基内应尽量避免有抗菌药物的拮抗物质,如钙、 镁离子能减低氨基糖苷类的抗菌活性,胸腺嘧啶核苷和对氨苯甲 酸(PABA)能拮抗磺胺药和TMP的活性。
– 耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的检测 – β-内酰胺酶、超广谱β-内酰胺酶检测等
实验三_药物敏感试验和消毒灭菌
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ppt课件 (2)
五、纸片扩散法(K-B法)
• 原理:
– 含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上, 纸片所含的药物吸取琼脂中的水分溶解后便不断向纸片周 围区域扩散,形成递减的梯度浓度。在纸片周围抑菌浓度 范围内的细菌生长被抑制,形成透明的抑菌圈。
– 涂布接种:无菌棉拭蘸取菌液,在试管壁旋转挤去多 余菌液后在MH琼脂表面均匀涂布接种3次,每次旋转 平板60º,最后沿平板内缘涂抹1周;
– 贴含药纸片:平板在室温下干燥3-5min,用无菌镊子 将含药纸片紧贴于琼脂表面,各纸片中心相距应大于 24mm,纸片距平板内缘应大于15mm;
– 孵育:35ºC 16-18h,量取抑菌圈直径。
实验三_药物敏感试验和消毒灭菌
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抗菌药物敏感性试验(药敏试验)PPT课件

抗菌药物敏感性试验(药敏试验)PPT课件
治疗对基本药物过敏的患者
治疗少见菌的感染
流行病学调查为目的向感染控制部门报告
试验方法—纸片扩散法
改良Kirby-Bauer法(K-B法)
试验材料
培养基 非苛氧菌用Mueller- Hinton(M-H)琼脂 药物纸片 直径6mm纸片,每片吸水量约20μl 菌液比浊管 0.5号麦氏(McFarland)标准比浊管,
抗菌药物敏感性试验(药敏 试验)
目的
指导临床医生针对各类临床感染患者选择 最佳抗菌药物
一定区域内积累对公共卫生有关的重要耐 药的微生物流行病学资料
根据细菌对药物敏感谱进行菌种鉴定
药敏试验原理
纸片扩散法
把含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测 试细菌的琼脂平板上
纸片中药物吸收琼脂水分溶解后通过弥散 作用形成递减的浓度梯度
纸片周围一定距离范围内试验菌生长受抑 制,从而形成无菌生长的透明圈即抑菌环。
抑菌环大小反映测试菌对测定药物的敏感 程度
抑菌环大小除与细菌的敏感性有关外还与 其它诸因素相关。
稀释法
定量测定抗菌药物活性 抗菌药物与肉汤或琼脂培养基混合稀释后
种入试验细菌,孵育过夜。 以能抑制细菌生长的最低浓度为最低抑菌
变形杆菌属的菌株可扩散到某些抗菌药物 的抑菌环内,故在明显抑菌环内有薄膜状 爬行生长可以忽略。
加贴纸片
将接种好的平板敞开盖子倒置在室温下干 燥3-5min 使平板上的水分被琼脂完全吸 收。
用镊子取纸片一张贴在琼脂平板表面,轻 压使其与琼脂完全接触。纸片中心间距 ≥24mm,纸片中心距平皿边缘≥15mm。 直径90mm的平板最好贴6张。
15min内将平板倒置放温箱孵育。
注意
纸片一旦贴下就不可再挪动位置,因纸 片中的药物已扩散到琼脂中。 需要时应在适当的地方贴新纸片

药敏试验结果的正确解读 PPT

药敏试验结果的正确解读 PPT
clsi折点mic检测范围抗菌药物32氨苄西林舒巴坦32213216哌拉西林他唑巴坦16128441284头孢唑啉64头孢曲松64头孢他啶64头孢吡肟64头孢西丁64亚胺培南166464庆大霉素16妥布霉素16呋喃妥因3212816512甲氧苄氨嘧啶磺胺甲恶唑16测试抗菌药物菌种可被推测的抗菌药物药敏结果苯唑西林耐药葡萄球菌属所有内酰胺类及与酶抑制剂复合药耐药四环素敏感所有菌属红霉素敏感和耐药链球菌属罗红霉素克拉霉素阿奇霉素地红霉素敏感和耐氨苄西林敏感和耐药肠球菌属不产内酰胺酶的肠球菌对阿莫西林哌拉西林及其与酶抑制剂的复合剂敏感和耐药氨苄西林敏感粪肠球菌亚胺培南敏感青霉素敏感葡萄球菌属淋病奈瑟菌所有内酰胺类及与酶抑制剂复合药敏感青霉素敏感和耐药肠球菌不产内酰胺酶的肠球菌对氨苄西林阿莫西林哌拉西林及与酶抑制剂复合剂敏感和耐药头孢噻吩敏感和耐药肠杆菌科头孢匹林头孢拉啶头孢氨苄头孢克罗头孢头孢羟氨苄敏感和耐药氨苄西林敏感和耐药所有菌属阿莫西林巴氨西林氨环已西林敏感和耐药磺胺异恶唑敏感和耐药所有菌属所有磺胺类敏感和耐药萘啶酸耐药肠杆菌科所有喹诺酮类耐药头孢噻吩头孢唑林敏感肠杆菌科所有头孢菌敏感青霉素敏感链球菌属对绝大多数内酰胺类药物敏感二了解抗菌药物的pkpd参数与分类抗菌药物类别pkpd参数药物时间依赖性内酰胺类红霉素克林霉素时间依赖性长paeaucmic替加环素万古霉素阿奇霉素噁唑烷酮类四环素类氟康唑浓度依赖性aucmic或cmaxmic氨基糖苷类氟喹诺酮甲硝唑两性霉素hourgmlcmax
厄他培南 亚胺培南 ESBL筛选 美罗培南
4 4 ≥4 ≥8 ≥16 ≥64 ≥64 4 8 8 ≤0.5 ≤1
28
S μg/ml S μg/ml R μg/ml R μg/ml R μg/ml R μg/ml R μg/ml S μg/ml I μg/ml S μg/ml

药敏试验PPT资料PPT课件

药敏试验PPT资料PPT课件
在感染初期或症状明显时 采集样本,以提高检出率。
采集部位
选择病原体含量较高的部 位进行采集,如痰液宜选 自肺部。
样本处理
样本保存
样本量
采集后的样本应尽快送至实验室进行 检测,如不能及时送检,应妥善保存。
保证足够的样本量,以满足后续实验 需求。
样本处理方法
对采集的样本进行适当的处理,如离 心、过滤等,以去除杂质和无关细胞。
结果判断
根据病原体的生长情况,判断其对不同药物的敏 感程度。
报告发布
将实验结果及时报告给临床医生,为治疗提供参 考依据。
04
药敏试验的应用
抗生素选择
抗生素选择
药敏试验能够确定病原体对各种 抗生素的敏感程度,帮助医生选 择最有效的抗生素进行治疗,提 高治愈率并减少耐药性的产生。
耐药性检测
通过药敏试验可以检测病原体对 抗生素的耐药性,了解耐药机制 和传播情况,为制定防控策略提 供科学依据。
在琼脂平板上接种细菌,然后滴 加抗生素溶液,观察抑菌圈的大 小,判断细菌对药物的敏感性。
稀释法
将不同浓度的抗生素与细菌混合培 养,观察细菌的生长情况,确定药 物的最小抑菌浓度(MIC)。
纸片扩散法
将含有一定量抗生素的纸片贴在琼 脂平板上,观察纸片周围抑菌圈的 大小,判断细菌对药物的敏感性。
02
药敏试验的种类
详细描述
E试验法是一种新型的药敏试验方法,通过在药敏试纸上施加连续变化的压力,使药物浓度与细菌生 长曲线呈线性关系,从而快速准确地判断细菌对药物的敏感程度。该方法操作简便,结果准确可靠。
03
药敏试验的步骤
样本采集
采集方法
根据感染部位和病原体类 型,选择合适的采集方法, 如咽拭子、痰液、尿液等。
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细菌耐药概念
多重耐药(MDR): 指细菌同时对三种以上结构
不同(作用机制不同)抗菌药物耐药,如头孢菌 素、喹诺酮类、氨基糖苷类;
泛耐药( PDR):细菌对本身敏感的所有药物耐
药; 超级细菌:并非科学概念,一般指PDR与部分MDR,
没有确切定义,以下细菌属于此列:
MRSA/VRSA; VRE; MDR-PA,PDR-AB; ESBL(+)+AmpC(+) 肠杆菌 产碳青霉烯酶肠杆菌(产KPC酶、包括产NDM-1细菌)
MRSA:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 VRSA: 耐万古霉素金黄色葡萄球菌 VRE: 耐万古霉素肠球菌 ESBLs: 超广谱β-内酰胺酶 KPC酶: 产碳青霉稀酶的一种KPC型 NDM-1:Ⅰ型新德里金属β-内酰胺酶
下面就以上几种情况分别解读
与临床沟通中常见问题
1、我们想用的药物在药敏试验中 没有做?
3、某些细菌对某类抗生素天然耐药, 则不需要做药敏试验。
4、试验的药物代表一类药,而不是一 种药。
解读注意事项
5、对葡萄球菌一代比三代头孢治疗效 果好。
6、有些药物不适用于单独使用,仅用 于联合用药,如利福平。
7、因为是体外药敏试验,有些药体外 试验敏感,可能临床治疗无效。
8、同一菌株可能出现亚种,导致连续 药敏结果不吻合。
12.明显稀便,培养结果为何正常?
大便普通培养,通常只能鉴定志贺菌、沙 门菌感染,致病性大肠杆菌我们没有鉴定 血清。
怀疑霍乱时,需开霍乱弧菌培养。
可能病毒感染(轮状病毒)。
小结
耐药菌,尤其是多重耐药菌的出现, 使临床抗感染治疗面临着困物种类上 为临床提供参考(经验治疗);可以 指导临床个体化治疗。
与临床沟通中常见问题
10、一般培养不是三天出结果吗, 今天第四天了怎么还没出来?
一般培养经48小时后,即第三天出报 告,若需分离致病菌的则第四天出报 告。
与临床沟通中常见问题
11、今天的培养结果怎么与前天的 不一样?
取材是否规范。 痰标本,有时选优势菌做,就可能导
致两次不一样。
与临床沟通中常见问题
忽略20%或更低生长的薄菌苔,测量抑菌圈 直径较为明显的细菌生长界限
下列细菌均注意:肠杆科、不动、伯克、 葡萄、嗜血、肺链、弧菌属、脑膜炎奈瑟 菌
应注意变形杆菌属的阅读
生长呈迁移性 在一些抗菌药物抑菌环可见雾霾样迁徙生
长的菌苔 雾霾样生长忽略不计 忽略迁移性
应注意溶血性细菌的结果阅读
重要
• 改善患者全身情况:器官功能支持,纠正酸碱平衡,
电解质紊乱,低蛋白血症,高血糖等
与临床沟通中常见问题
6、选择药敏报告敏感的药物,为 什么临床治疗无效?
体外药敏试验只能预测体内治疗效果,并不等同; 一般来说,耐药=治疗无效; 敏感≠治疗有效。 • 可能不是真正的致病菌(污染或定植菌) • 细菌本身因素(如诱导耐药,生物被膜) • 感染部位与药代动力学因素 • 细菌的MIC,给药剂量和用药方式 • 药敏试验药物中有些药物单独使用无效,但可以与其
抗菌药物敏感试验
细菌室 李巍
抗菌药物敏感试验
定义、目的、方法 培养基、接种菌量、培养条件 结果阅读 判断标准
什么是抗菌药物的敏感性试验
测定抗菌药物在体外抑制病原微生物生 长的效力,称为抗菌药物对细菌的抑制试 验,或称为细菌对药物的敏感性试验。
为什么要做药敏试验?
供医师选用抗菌药物时的参考 细菌耐药性检测和耐药性变迁 评价新抗菌药物的药效学特征 对细菌耐药谱分析和分型有助于某些菌种
临界浓度 根据MIC,结合常用剂量时该药所能达到的
血药浓度,划定细菌对各种抗菌药物敏感 或耐药的界限
如何制备菌悬液?
如何取菌落? 为什么至少取3个菌落?
可能丢失耐药细菌(携带有耐药质粒的 耐药菌株)
扩散法:K-B
操作: -制备0.5麦氏度菌液 -无菌棉签蘸取菌液,在管壁将多余菌液旋转
挤去,在琼脂表面均匀涂布3次,最后沿着 平板内缘涂抹一周 -室温或35度干燥5—10分钟 -将纸片紧贴于表面 -纸片间距20厘米,离平板内缘15厘米
临床实验室检验有自身的局限性 各科室间交流非常重要!!!
谢谢大家的 聆听!
的鉴定 作为医院内感染流行病学调查的手段之一
如何进行药敏试验
方法学 1. 稀释法
--试管稀释法 --平板稀释法
2. 扩散法(纸片法) 3. E-TEST 4.自动化仪器
几个重要的指标
MIC(最低抑菌浓度) 在体外能够抑制细菌生长的最低药物浓度 MBC(最低杀菌浓度) 在体外能够使细菌的总数减少或杀灭99.9% 以上的最低药物浓度
• 没有必要:通过耐药机制和标志性药物可
以预测其他抗菌药物的敏感性
• 没有可能:不是所用药物都可以做药敏试
验(需要药物在体外稳定,需要有操作标 准和解释标准)
与临床沟通中常见问题
4、在药敏试验报告中MIC越小的 抗菌药物效果越好吗?如何根据 MIC联合用药?
• 感染菌对同一种药物的MIC越小,效果越

• 不同种抗菌药物之间MIC无可比性 • 目前很多仪器报告的是检测折点,而不
是真正的MIC
与临床沟通中常见问题
5、培养阳性的细菌都需要用抗菌药 物治疗吗?
• 不是的 • 培养阳性感染,可能为污染(血培养),可能为
定植(痰培养)
• 任何结果必须结合临床情况进行评价(很重要) • 感染部位的清创、引流、换药比使用抗菌药物更加
链球菌 --β-溶血链球菌 --草绿色链球菌 --肺链 应忽略溶血区,读取生长完全被抑制处
注意产色素细菌的结果阅读
有些细菌在生长的过程中产生色素 --铜绿 --黄杆菌 --沙雷菌
应忽略色素分泌圈,读取生长完全被抑制处
解读注意事项
1、药敏试验是参照美国的CLSI推荐的 标准制定的。
2、细菌全自动分析仪的药敏组合是固 定的。
如何阅读结果(纸片法)
工具:游标卡尺、尺子 光源:反射光、透射光 阅读:背衬不反光的黑色背景用肉眼观察,
也可用BIOMIC机器阅读
纸片法结果的正确阅读
反射光 不反光的黑色背景 完全抑制的抑菌圈直径,包括纸片的直径 抑菌圈的界限应该是以肉眼观察没有明显
的可见细菌生长区域 在抑菌圈边缘微弱生长的、仅能在放大镜
• 可能是天然耐药 • 可能是药物的敏感性被其他药物所预

与临床沟通中常见问题
2.为什么有的菌报告很多种药物, 有 的仅报告几种药物?
• 报告的药物种类根据细菌种类的不同而
有所不同,如铜绿假单胞菌报告的药物 较多,而嗜麦芽窄食单胞菌报告的药敏 较少
CLSI药敏建议
与临床沟通中常见问题
3、是否能将所用的药都做药敏试验?
他药物联合用药
• 药物剂型及生物利用度(纯品、商品)
与临床沟通中常见问题
7、涂片镜检结果与培养结果不吻合?
涂片镜检是报告所有检见的细菌,而培养 的目的是检出致病菌。
一些苛氧菌需在特殊的环境或培养基上才 能生长。
与临床沟通中常见问题
8、取的明显就是脓液标本,为何 鉴定报告为无菌生长?
我们做的是有氧培养,脓液可能为厌 氧菌感染。
下才能观察到的细小菌落应忽略
应注意葡萄球菌、肠球菌的阅读
苯唑西林、利奈唑胺和万古对葡萄球菌的 抑制圈
万古霉素对肠球菌的抑制圈 任何有可见的菌落生长均视作对上述抗菌
药物耐药 需在透视光下阅读,遇不敏感的结果需用
稀释法测MIC确证
应注意磺胺类药物的结果阅读
培养基可能含有拮抗物如胸腺嘧啶、核苷 类物质,允许有轻微生长的薄菌苔
可能细菌被大量的中性粒细胞吞噬。
与临床沟通中常见问题
9、鉴定结果明明写着四联球菌、革兰 氏阳性杆菌,为何没有药敏结果?
四联球菌为微球菌,一般不引起人体致病,为非 致病菌,故考虑污染可能。
药敏结果参照CLSI标准,目前革兰氏阳性菌没有 参照标准,故暂不能做药敏试验,若需治疗可参 照阳性球菌用药。
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