(完整版)技能操作考试细菌平板划线分离技术技能操作评分标准

消毒供应中心技能考核操作评分标准

CSSD技能考核操作标准目录1.全自动喷淋清洗机操作技术---------------------------------22.环氧乙烷灭菌器操作技术-----------------------------------43.压力蒸汽灭菌器使用技术-----------------------------------64.3M Steri-Sealing II封口机使用技术-----------------------85.快速生物监测阅读器使用技术------------------------------106.六步洗手法----------------------------------------------127.器械物品包装操作法--------------------------------------148.手工清洗器械操作法--------------------------------------169.管腔类器械清洗操作法------------------------------------1810.防护服穿脱法--------------------------------------------201.全自动喷淋清洗机操作技术科室姓名考试日期监考人得分一、技术操作方法及评分标准 100%P3程序上清洗剂不上润滑油适用于轻微污染且需预洗的碗和弯盘P4程序上清洗剂不上润滑油适用于麻醉管道P5程序上清洗剂不上润滑油适用于重度污染的碗和弯盘P6程序上清洗剂上润滑油适用于重度污染的的器械9、按“”开始键（2%），黄灯将闪烁10秒，如果此时须停止程序，再按一下“”，屏幕将显示初始状态（1%），否则10秒钟后机器将自动运行所选程序步骤（6%）（预冲洗主洗漂洗（中和冲洗）终末漂洗（冲洗）消毒（最后冲洗）干燥）。

在程序循环过程中观察有无泄漏（1%）。

做好清洗机日常维护及清洗消毒运行情况记录，便于追溯（3％）10、程序完成后，绿灯亮，此时可从清洁侧打开门（绿灯灭）（1%），用洁净的手取出消毒物品（2%），然后关上舱门并锁好（1%），清洁侧门关闭后将无法再打开（1%）。

食品微生物检验技能操作考核方案与评分标准

食品微生物检验技能操作考核方案与评分标准一、食品微生物检验技能操作试题本次考试有五组技能测试题供学生随机抽取，每一组题满分均为100分，占该门课程总成绩的70,。

第一组:使用高压灭菌锅进行培养基的灭菌，并回答相关问题。

第二组:微生物划线分离技术操作，并回答相关问题。

第三组:食品中细菌总数的测定操作，并回答相关问题。

第四组:食品中大肠菌群测定，并回答相关问题。

第五组:常用仪器的使用二、考试程序1、组织学生抽取考试序号，按照此序号依次进行技能考试。

2、按照考试序号组织学生在考前5分钟抽取试题，拿到试题后可以准备5分钟，然后开始操作和回答。

其他学生集中在另一教室等待。

3、考试完的学生不允许与等待考试的学生接触，要迅速离开考场，防止学生利用通讯工具交流试题内容。

三、评分标准第一组湿热灭菌操作一、一、操作用具及物品:高压灭菌锅、试管培养基、三角瓶、线绳、报纸或牛皮纸等。

二、操作过程及评分标准1(首先将内层灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面与三角搁架相平为宜。

(10分)2(放回灭菌桶，并装入待灭菌物品。

注意不要装得太挤，以免防碍蒸汽流通而影响灭菌效果。

三角烧瓶与试管口端均不要与桶壁接触，以免冷凝水淋湿包口的纸而透入棉塞。

(10分)3(加盖，并将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内。

再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，勿使漏气。

(10分) 4(用电炉或煤气加热，并同时打开排气阀，使水沸腾以排除锅内的冷空气。

(或等压力上升到0.5时，打开放气阀排出冷空气)待冷空气完全排尽后，关上排气阀，让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐渐上升。

当锅内压力升到所需压力时，控制热源，维持压力至所需时间。

本实验用 1(05kg/cm2，121(3?，20分钟灭菌。

(10分) 提问:1.为什么要放出冷空气,答:因空气是热的不良导体，当高压锅内的压力升高后，它聚集在锅的中下部，使饱和热蒸汽难与被灭菌物品接触。

分区划线法评分标准

分区划线法评分标准
1、过程评价标准
操作
操作标准
评分标准（分）
准备
着实验服；检查实验器材是否齐全，并有序合理摆放；平板标注清晰合理
5
无菌操作
手、台面、菌种试管口的擦拭、接种环灼烧是否彻底
5
取种和划线时是否离开无菌区
5
接种完毕是否灼烧试管塞、接种环
5
划线
接种环与平板表面的角度应在30°至45°之间
5
要有明显的旋转平板进行分区划线的操作，每次旋转弧度在90°以内，单手旋转
10
培养基不可被划破
5
培养
倒置放入适宜温度的培养箱
5
结束操作
物品归位，带走废弃物
5
总分
50
2、结果评价标准
操作
操作标准
评分标准（分）
无菌检查
无杂菌污染
10
划线
线型清晰，线距合理，较为美观
5
有明显的分区
5
各区细菌分布有明显的梯度
5
菌落菌苔分布:1至2区为菌苔为主,3区为菌落为主,4区为菌落
10
单菌落
出现单菌落，且多于10个
10
原始记录
原始记录完整清晰，操作报告结果正确，简

医学检验专业技能考核

观察仪器外观并说明结构及功能
说明测试带各模块对应的检测内容
开机、预热
0.5
调试
检测仪器性能和测试带质量
根据结果,判断能否使用该仪器检测标本
测定
按start键后,按仪器提示,适时、正确把测试带浸入尿中,浸入时间(2秒）准确
放置测试带到仪器检测槽内,完成检测,打印结果
取出测定完的测试带,放入指定地点
正确说明打印结果代码的中文含义（每错1个扣0。5分）
消毒灭菌
1
结果及报告（1分）
报告书写规范、整洁,无笔误
1
总分(10分)
二、尿液常规检验技术评分标准
考核项目
评分标准
标准
分数
得分
备注
实验用品准备
（2分）
滴管、质控带、测试带、质控尿液、尿液分析仪、10ml刻度离心管、载玻片、盖玻片、离心机、显微镜
每缺一样扣0.2分
实验过程（7分）
尿液仪器分析（3分）
准备
2
收场
整理清场(试剂、器材归位、实验台面清理）
消毒灭菌
0。5
完成时间
30min内完成,每延时2min扣0.5分
1
结果及报告（1分）
报告书写规范、整洁,无笔误
1
总分（100分）
三、细菌接种培养技术评分标准
考核项目
评分标准
标准
分数
得分
备注
实验用品准备
(2分)
普通平板、菌种、接种环、酒精灯、打火机、记号笔
0.5
完成时间
全过程12min内完成,每延长2min扣0。5分
1
白细胞计数(3分）
计数结果准确
白细胞计数结果评分方法:
变异百分率V＝│X测－X靶│/ X靶×100

平板划线分离_实验六平板划线法分离菌种

实验六平板划线法分离菌种一、实验目的1、了解平板划线法分离菌种的基本原理2、练习平板划线法分离菌种的基本操作，掌握无菌操作技术二、实验原理平板划线法是指把杂菌样品通过在平板表面划线稀释而获得单菌落的方法。

一般是将混杂在一起的不同种微生物或同种微生物群体中的不同细胞，通过在分区的平板表面上作多次划线稀释，形成较多的独立分布的单个细胞，经培养而繁殖成相互独立的多个单菌落。

通常认为这种单菌落就是某微生物的“纯种”。

实际上同种微生物数个细胞在一起通过繁殖也可形成一个单菌落，故在科学研究中，特别是在菌种鉴定等工作中，必须对实验菌种的单菌落进行多次划线分离，才可获得可靠的纯种。

平板划线分离对细菌、酵母菌较为适宜，而霉菌和放线菌的分离多采用稀释分离法进行菌种的分离纯化。

具体的划线形式有多种，这里仅介绍一种经过长期实践并证明可获得良好实验效果的方法将一个平板分成A、B、C、D4个面积不同的小区进行划线，A区面积最小，作为待分离菌的菌源区，B和C区为经初步划线稀释的过渡区，D区则是关键的单菌落收获区，它的面积最大，出现单菌落的概率也最高。

由此可知，这4个区的面积安排应做到D>C>B>A。

鉴别培养基是在培养基中加入某种试剂或化学药品，使难以区分的微生物经培养后呈现出明显差别，因而有助于快速鉴别某种微生物。

这样的培养基称之为鉴别培养基。

例如用以检查饮水和乳品中是否含有肠道致病菌的伊红美蓝培养基就是一种常用的鉴别性培养基。

（参考GB47838-2012食品安全国家标准食品微生物学检验大肠埃希氏菌计数）其配方中含有乳糖、伊红和美蓝，用以鉴别肠道病原菌及其他杂菌。

伊红、美蓝作为指示剂，伊红系酸性染料，当大肠埃希氏菌或产气肠杆菌分解乳糖产酸时，由于细菌带正电荷，所以被伊红着色。

在大肠埃希氏菌中因为伊红与美蓝结合，所以菌落不呈红色，而是蓝紫黑色，且具有绿色金属光泽；菌落呈棕色者为产气肠杆菌；不分解乳糖的肠道病原菌则不着色，有时因产生碱性物质较多，细菌带负电荷，被美蓝着色后，菌落并不呈蓝色，因美蓝与伊红结合，所以菌落为淡紫色。

微生物技能测试评分标准

脱色
1.倾斜玻片，连续滴加95%乙醇
2.脱色30s~1min至流出液无色，水洗。
1分
2分
1.玻片未倾斜，扣一分
2.脱色不彻底，扣一分；未冲洗扣一分
复染
滴加沙黄染液覆盖整个菌面复染1min，水洗
2分
未覆盖菌面或染液过多扣一分；时间不足扣0.5；未冲洗扣一分
晾干
将染好的涂片于空气中晾干或用吸水纸吸干
1分
未完全干燥，扣一分
镜检
1.检查显微镜
2.用低倍镜调出清晰图像
3.使用油镜观察
1分
2分
5分
1.缺此步骤，扣一分
2.未使用低倍镜，扣二分
3.换高倍镜后，用粗准焦螺旋扣三分；图像不清晰扣二分。
若用显微镜在5min之内调不出图像，此项分值全扣。
清场
1.试剂及玻片清洗
2.显微镜恢复原状
1分
1分
1.此项未做扣一分
2.此项未做扣一分
革兰氏染色法操作考核评分标准
项目
技术操作要求
标准分
扣分标准
备注
准备
1.检查试剂药品是否齐全，
2.检查仪器是否完好。
1分
1分
缺一项扣一分
涂片
1.接种环及玻片灭菌
2.滴加半滴生理盐水用接种环取单菌落涂菌，直径不超过1cm
3.接种环灭菌
2分
3分
2分
1.一项不符合要求扣一分
2.生理盐水过多扣一分；菌落不纯扣一分；直径过大扣一分
3.未灭菌扣一分
干燥、固定
1.于空气中自然干燥
2.手拿一端过火2~3次，不烫手为宜。
2分
过火离火焰太近，扣2分；
结晶紫染色
1.滴加结晶紫染液盖满菌面

临床微生物学检验技术考试题库及答案(二)

临床微生物学检验技术考试题库及答案2、（正常菌群）条件致病性微生物——临床上多引起内源性感染。

3、G+菌特有成分：磷壁酸（重要表面抗原，可用于细菌血清学分型）（外毒素）4、G-菌特有成分：外膜层（由脂多糖（内毒素）、脂质双层（磷脂）、脂蛋白）5、G+菌和G-菌细胞壁的共同成分是肽聚糖。

结构由聚糖骨架、四肽侧链和五肽交联桥（G-菌无。

是溶菌酶、青霉素作用部位）6、细菌的主要遗传物质：核质（染色体）、质粒（存在于胞质，双链闭合环状DNA分子）、转位因子7、细菌特殊结构：荚膜（保护，致病，抗原性，鉴别）、芽胞、鞭毛（运动器官）、菌毛（普通菌毛—粘附，致病性；性菌毛—接合方式转移遗传物质）*将芽胞是否被杀死而作为判断灭菌效果的指标8、L型（细胞壁缺陷）菌落：①“油煎蛋”（荷包蛋）样菌落（典型L型细菌）。

②颗粒型菌落（简称G型菌落）③丝状菌落（简称F型菌落）。

高渗环境生长。

（环丙沙星）9、自营菌：以无机物为原料；异营菌(腐生菌：以无生命的有机物质为营养物质；寄生菌：以宿主体内有机物为原料),所有致病菌都是异营菌。

10、细菌营养物质：水、碳源、氮源、无机盐类和生长因子。

11、细菌个体的生长繁殖方式：无性二分裂，在对数期以几何级数增长12、细菌分类（伯杰）等级依次为界、门、纲、目、科、属、种（最小分类单位）。

13、常用的细菌培养方法是：需氧培养法、二氧化碳培养法和厌氧培养法；14、通常由正常无菌部位采取的标本接种血平板，置于空气或含5%～10%CO2的气缸中培养，大部分细菌可于24～48h生长良好。

15、血清学诊断时，一般要在病程早期和晚期分别采血清标本2～3份检查，抗体效价呈4倍或以上增长才有价值。

16、透射电子显微镜适于观察细菌内部的超微结构；扫描电子显微镜适于对细菌表面结构及附件的观察。

17、细菌染色的基本程序：涂片（干燥）→固定→初染→染色（媒染）→（脱色）→（复染，使脱色菌体着色）。

18、胃部细菌喜酸，肠道细菌喜碱19、SS琼脂有较强的抑菌力，用于志贺菌和沙门菌的分离。

微生物学实验操作考核试题及评分标准

10分
实验四：
活菌计数法和显微镜直接计数
步骤
考核目标及评分细则
满分值
一
浏览整个实验目的、原理和操作步骤。
二
实验需要的仪器和药品
显微镜、血细胞计数板、凹载玻片、盖玻片、擦镜纸、软布、接种环、毛细滴管、度管、脱脂棉和三角烧瓶等。
香柏油、二甲苯、生理盐水和凡士林等。
酿酒酵母、米曲霉、铜绿假单胞菌、枯草芽胞杆菌等。
10分
六
实验后整理：
无菌操作台、无菌操作室进行清理。洗涤仪器并使其归位。保持台面和地面整洁，实验后洗手。
10分
实验二：
培养基制备
步骤
考核目标及评分细则
满分值
一
浏览整个实验目的、原理和操作步骤。
二
实验需要的仪器和药品
试管、三角烧瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、天平、自动式高压灭菌锅、封口膜、记号笔、皮筋、pH试纸等。
7、混合涂片染色
在载玻片同一区域用大肠杆菌和金黄色葡萄球菌混合涂片，其他步骤同上。（10分）
70分
四
得出结论：
掌握革兰氏染色法，以及两种菌的颜色、形态。
10分
五
实验后整理：
显微镜放置好，洗涤仪器并使其归位。保持台面和地面整洁，清理垃圾，实验后洗手。
10分
实验七：
环境因素对微生物生长的影响
步骤
考核目标及评分细则
70分
四
得出结论：
掌握环境因素如温度、渗透压、pH值等对微生物生长的影响。
10分
五
实验后整理：
无菌操作台、无菌操作室进行清理。洗涤仪器并使其归位。清除垃圾，保持台面和地面整洁，实验后洗手。
10分
实验八：
平板分离技术

微生物技能考核标准

编号（试管、培养皿），贴标签
5
都编号且正确，得5分
每漏编（贴）一个，扣1分
每错编一个，扣1分；标签信息不全，一个扣1分
样品稀释
(30分)
样品混匀(原始样品、稀释样品)
10
进行且操作正确（平摇样品瓶、手心震摇试管），得10分
原始样品没有混匀，扣2分
稀释样品没有混匀，一个扣2分
手心震摇试管时没塞塞子，扣2分
清理用物，环境卫生
5
清扫实验台及收拾产生垃圾，少1环节扣1分
10
时间（10分）
操作时间
15
要求10分钟内完成，每超过1分钟，扣5分。
总分
制备无菌平板评分标准（时间5分钟）
班级：姓名：学号：
项目
考核内容
分值
评分细则
扣分
备注
得分
准备 (10分)
物品准备、摆放及酒精擦拭
8
物品摆放合理、酒精擦手正确，材料准备齐全，得8分
3
整理，得3分
未整理，扣3分
器皿破损
2
未破损，得2分
破损，扣2分
完成时间 (5)
共用（）分钟
开始：
结束：
0
提前，不加分不扣分
按时，不加分不扣分
超时：每超1分钟，扣1分（最多扣5分）
合计
高压蒸汽灭菌锅的使用与维护
班级：姓名：学号：
序号
内容
实验后台面整理
1
整理，得1分
未整理，扣1分
器皿破损
1
未破损，得1分
破损，扣1分
完成时间 (0)
共用（）分钟
开始：
结束：
0
提前，不加分不扣分
按时，不加分不扣分

护理专业技能评分标准

4、排气：一次成功，不浪费药液
排气一次不成功-2
浪费药液-1
5、连接留置针与输液器:打开套管针外包装，将留置针连接于输液器，排尽针头内空气
未排留置针空气-2
6、将小垫枕置于穿刺部位下，铺治疗巾，在穿刺点上方8-10cm处扎止血带
选择血管不当-1
扎止血带松紧、高度不合适
-1
7、常规消毒注射部位皮肤，消毒直径大于8cm，待干。准备无菌透明敷贴，打开放置适当处
进针速度宜慢，见回血后降低角度再顺静脉走行继续进针0.2cm
右手持住针翼，左手将套管一起送入静脉，拔出针芯，且穿刺一次成功
未旋转松动外套管-1
未再次排气-2
未嘱患者握拳-1
未绷紧皮肤-1
穿刺点选择不当-1
进针速度过快-1
见回血后未降低角度再进针少许-1
右手未固定针翼-1
左手未持针座Y接口-1
穿刺时回针-5
皮肤消毒范围不合格-2
未打开无菌透明敷帖-1
穿
刺
时
操
作
步
骤
45
1、二次核对患者的床号、姓名、药液瓶签（药名、浓度、剂量）及给药时间和给药方法
未二次核对-2
少查对一项-1
2、静脉穿刺
取下针套，旋转松动外套管
右手拇指与示指夹住两翼，再次排气于弯盘中
嘱患者握拳，绷紧皮肤，固定静脉，在消毒范围内部1/2—2/3处直刺静脉
穿刺一次不成功-20
3、松开止血带，打开调节器，嘱患者松拳
未松开止血带-1
未打开调节器-1
未嘱患者松拳-1
4、用无菌透明敷贴固定
固定方法不当-1
5、在透明胶布上记录日期和时间
未记录日期时间-1
6、根据患者的年龄，病情及药物性质调节滴速

菌种划线平板标准操作规程

菌种划线平板标准操作规程菌种划线平板是一种常用的微生物学实验方法，主要用于菌种的分离和纯化。

为了保证实验的准确性和结果的可靠性，需要按照一定的操作规程进行操作。

如果存在多个菌种，则需准备相应数量的平板。

2. 准备培养基：根据菌种的生长特性选择合适的培养基，并按照菌种需求配制。

常用的培养基包括营养琼脂、肉汤葡萄糖琼脂平板等。

3. 准备培养器具：清洁培养皿、培养管、移液器、吸球等，并对其进行高温高压灭菌处理，确保无菌。

4. 暴露培养器具：开盖的培养皿、培养管等暴露在空气中易被细菌污染，使用前需进行烧烤消毒。

5. 准备菌种：选择需要划线的菌种，将其提取到无菌环境下，用吸液器或移液器进行分装，分装至不同的培养皿中。

二、实验操作步骤1. 消毒操作台：将操作台表面擦拭，用75%酒精喷洒，待酒精挥发后进行紫外线照射消毒，照射时间约15-30分钟。

2. 划线操作：将已经配制好的培养基倒入无菌平板中，使其均匀分布，待其固化后（约15-30分钟），开始划线。

(1) 布置待划线的培养平板：将待划线的培养平板放在炉盘或搁板上，不要弄湿培养平板。

(2) 取菌种：取一支已分装好的菌种，用吸球或移液器吸取适量的菌液，然后轻轻地均匀涂抹于培养平板上。

(3) 用划线针划线：用消毒的划线针，在培养平板上进行划线操作。

先将划线针消毒，再从菌液中取菌，然后从培养皿的一个角划至另一个角，最后将划线针消毒。

(4) 过程控制：整个划线操作应迅速、准确，并且尽量避免划重叠线。

3. 清理操作台：划线操作完成后，用75%酒精擦拭操作台表面，然后喷洒消毒液，待其挥发后，注意再次使用紫外线照射消毒。

三、实验后的处理工作1. 培养平板的封存：将培养平板进行密封，避免外界细菌的污染。

可使用透明胶带或锡纸进行包裹。

2. 培养平板的保存条件：将密封好的培养平板放入恒温培养箱中，设定适当的温度（如37℃），使其进行培养。

3. 培养结果的观察和分析：经过一定时间的培养后，观察培养平板上的菌落情况，分析并鉴定相应的菌种。

平板划线分离_实验六平板划线法分离菌种

平板划线分离_实验六平板划线法分离菌种平板划线法分离菌种一、实验目的1、了解平板划线法分离菌种的基本原理2、练习平板划线法分离菌种的基本操作，掌握无菌操作技术二、实验原理平板划线法是指把杂菌样品通过在平板表面划线稀释而获得单菌落的方法。

一般是将混杂在一起的不同种微生物或同种微生物群体中的不同细胞，通过在分区的平板表面上作多次划线稀释，形成较多的独立分布的单个细胞，经培养而繁殖成相互独立的多个单菌落。

通常认为这种单菌落就是某微生物的“纯种”。

实际上同种微生物数个细胞在一起通过繁殖也可形成一个单菌落，故在科学研究中，特别是在菌种鉴定等工作中，必须对实验菌种的单菌落进行多次划线分离，才可获得可靠的纯种。

平板划线分离对细菌、酵母菌较为适宜，而霉菌和放线菌的分离多采用稀释分离法进行菌种的分离纯化。

具体的划线形式有多种，这里仅介绍一种经过长期并证明可获得良好实验效果的方法：将一个平板分成A、B、C、D4个面积不同的小区进行划线，A区面积最小，作为待分离菌的菌源区，B和C区为经初步划线稀释的过渡区，D区则是关键的单菌落收获区，它的面积最大，出现单菌落的概率也最高。

由此可知，这4个区的面积安排应做到DCBA。

鉴别培养基是在培养基中加入某种试剂或化学药品，使难以区分的微生物经培养后呈现出明显差别，因而有助于快速鉴别某种微生物。

这样的培养基称之为鉴别培养基。

例如用以检查饮水和乳品中是否含有肠道致病菌的伊红美蓝培养基就是一种常用的鉴别性培养基。

（参考GB4789.38-2012食品安全国家标准食品微生物学检验大肠埃希氏菌计数）其配方中含有乳糖、伊红和美蓝，用以鉴别肠道病原菌及其他杂菌。

伊红、美蓝作为指示剂，伊红系酸性染料，当大肠埃希氏菌或产气肠杆菌分解乳糖产酸时，由于细菌带正电荷，所以被伊红着色。

在大肠埃希氏菌中因为伊红与美蓝结合，所以菌落不呈红色，而是蓝紫黑色，且具有绿色金属光泽；菌落呈棕色者为产气肠杆菌；不分解乳糖的肠道病原菌则不着色，有时因产生碱性物质较多，细菌带负电荷，被美蓝着色后，菌落并不呈蓝色，因美蓝与伊红结合，所以菌落为淡紫色。

微生物学检验--操作流程及评分标准

5.在显微镜里看到的物像是倒像，因此，要使物像向上移动，就要向下移动玻片；要使物像向左移动，就要向右移动玻片。
注
意
事
项
1.先用低倍镜观察，用低倍镜能看清的，就不再用高倍镜。
2.必须保护好镜头。
3.载物台要保持清洁干燥。
4.转动调焦螺旋不要用力过猛，以防损伤机件。
5.取用显微镜要轻拿轻放，要用右手握镜臂，左手托镜座。
3.过滤
4.分装
二、培养基的灭菌
1.开盖
2.通电
3.加水
4.放样
5.设定温度和时间
注
意
事
项
1．调节PH值时，要边滴氢氧化钠边搅拌，不能一次加太多
2．加热时间控制好，否则培养基会煮糊。
3．灭菌是要注意将灭菌锅里的空气排干净。
4．注意灭菌的时间和温度的控制。
细菌的接种培养法操作流程及评分标准
项目
内容
分值
（4）染色：结晶紫---卢戈碘液---95％乙醇----稀释石炭酸复红---待干、镜检（初染）----（媒染）----（脱色）----（复染）
注
意
事
项
1.革兰氏染色成败的关键是酒精脱色时间。
2.染色过程中勿使染色液干涸。
3.选用幼龄的细菌。G+菌培养12h-16h，E.coli培养24h。
基础培养基的制备与灭菌操作流程及评分标准
5孵育条件,温度和时间பைடு நூலகம்
6抑菌圈测量工具的精度
7质控菌种本身的药敏特性是否合格,有无变异。
糖发酵试验操作流程及评分标准
项目
内容
分值
扣分标准
扣分
目的
熟悉葡萄糖发酵试验的原理和操作方法。
用物

无菌技术操作考核评分标准

无菌技术操作查核评分标准项目评分标准分值准1、衣帽齐整，鞋、仪表切合要求（化淡妆）2、取下腕表，检查指甲洁净备3、评估环境工4、洗手（演示七步洗手法）5、戴口罩作6、用物准备齐备，逐项检查物件名称、质量、有效期、消毒10 分成效，能否完好、有无湿润，无菌溶液报开启时间及有效期，手套大小适合7、物件摆放有序，环境切合要求，摆放治疗盘1、翻开持物钳包，将无菌持物钳容器置于操作台面上，注明翻开时间，拿出指示卡，口述有效期 4 小时2、翻开无菌治疗巾包，按无菌操作步骤逐层翻开，用无菌持物钳夹取无菌包内治疗巾放于治疗盘中3、包内有节余，按原折痕开包反向次序包扎、固定操4、注明开包时间，口述有效期 24 小时5、按无菌原则，将治疗巾双折铺于治疗盘上作6、上边一层向远端扇形折叠，张口边向外流7、翻开无菌治疗碗包，置治疗碗、镊子于无菌盘中8、翻开无菌缸，用持物钳拿出无菌棉球数个，盖无菌缸盖，程置于无菌盘中治疗碗内，拿出治疗碗内指示卡，注明无菌缸80分开启时间、口述有效期24 小时9、取无菌溶液：消毒瓶口，拔出瓶塞，旋转冲瓶，倒液于治疗碗内，盖瓶塞，消毒，注明开瓶日期实时间，口述有效期24小时10、拉平对齐无菌治疗巾，张口处向上翻折两次，两边向下翻折一次，盘面平坦11、注明铺盘名称、时间，口述有效期 4 小时12、翻开手套包，外包装置于黑色废物桶13、取、戴手套方法正确14、出手套方法正确综合仪表大方、动作优美评论手法正确，动作轻稳10 分操作娴熟，无菌观点强总分100分。

无菌技术基本操作考核评分标准表

4
取
核对标签，检查液体质量（述）
4
用
开瓶顺序正确
2
无
倒液方法正确，不污染
3
标签放错扣1分，未冲瓶扣
菌
15
2分
溶
盖瓶塞方法正确，消毒规范
4
液
注明开瓶日期时间，24h有效
2
操作后
3
清理用物、整理环境
3
整体
操作熟练准确、轻巧、符合程
4
严重违反无菌操作原则视本
印象
10
序
6
操作不及格
无菌观念强，操作过程无污染
3
污染扣2分
就近夹取无菌物
1
操
用后放回，打开轴节盖好容器
2
无
查看名称、灭菌日期
1
菌
开盖方法正确、放置正确
3
开盖错扣2分污染扣2分
容
12
取放时不触及无菌容器边缘
2
器
取放物品时不跨越无菌区
3
作
使
用毕盖严，方法正确，无污染
2
用
取出物品不可再放回无菌容器
2
无
核对名称、灭菌时间
2
菌
放于清洁、干燥、宽敞处
1
包
开包解带，揭外、左右、内角
2
解包错误，污染扣2分
过
的
13
取物用无菌钳，不跨越无菌区
4
使
按原折痕包内、左右、外角
2
跨越无菌区扣2分
用
注明开包时间，24h有效
2
盘面清洁干燥
1
铺
取用无菌巾方法正确，无污染
8
污染扣6分，方法错误扣4分
程
无
19

(完整版)技能操作考试细菌平板划线分离技术技能操作评分标准

实验后洗手（操作选手必须洗手）1分
2
实验操作
无菌操作
（15分）
在火焰外焰2-3cm灼烧菌种试管口四周1分
拿接种环的方式与拿毛笔的方式相同1分
利用火焰外焰，先垂直再倾斜30-45度角灼烧圆环2分
细线（灼烧完全）及金属柄1分
打开试管口时用小拇指勾开棉塞1分
试管口与棉塞四周进行灼烧1分
棉塞不得离手1分
接种环接触菌种前要在试管内壁上冷却1分
取菌适量，不得将培养基刮下2分
取菌后要及时灼烧棉塞与试管口，盖好棉塞1分
试管
划线
（21分）
A区酒精灯旁边，点酒精灯方法正确1分
打开酒精灯一侧皿盖角度适宜1分
与涂抹处成30*--40*角1分
腕力3--4条线，1分
立即烧接种环残菌1分
同时盖上培养皿盖1分
细菌平板划线分离技术技能操作评分标准
评审专家：评审时间：座位号：
评审地点：实验内容：
得分
备注
序
评分细则
1
实验习惯与精神面貌（10分）
按时到达考场，遵守考场纪律1分
无仪器设备、玻璃器材损坏3分
无试剂污染，滴管不可放错1分
所用试剂瓶使用后及时归位1分
酒精灯不使用时及时关灭2分
实验过程中保持安静，无手机铃声响动1分
B区接种环冷却B区转到灯前（60度）从a带到b划线3分
立即烧接种环残菌1分
同时盖上培养皿盖1分
C区d区与b相同各5分
熟练程度及整理归位
（4分）
器具整归位，卫生2分熟练程度2分

手术室常见基本技能操作评分标准

附件33手术室常见基本技能操作评分标准一、无菌器械台的建立二、外科刷手评分标准三、遮背式手术衣、无接触戴无菌手套评分标准四、常用手术体位摆放（一）常用手术体位摆放评分标准1、平卧位（腹部手术、胸部手术）2、垂头仰卧位3、侧卧位4、俯卧位5、膀胱截石位（二）手术体位的安置原则体位摆放正确（体位垫不能裸露使用），保证患者安全、舒适，无体位并发症，手术野暴露充分，便于手术医师操作，固定牢固、不易移动，不影响呼吸循环功能。

附件33-1 无菌器械台的建立评分标准无菌器械台建立的目的：1、建立无菌屏障，防止无菌手术器械及敷料再污染；2、加强手术器械管理，防止手术器械、敷料遗漏、遗失。

注意事项：1、器械车放置位置与手术台的角度应呈钝角；2、无菌操作时环境清洁，操作区域相对宽敞。

外科刷手评分标准目的:1、去除手和手臂皮肤上的暂存菌和部分寄居菌；2、预防交叉感染。

注意事项：1、洗手时应控制水流，以防水溅湿洗手衣；2、刷洗后的手、臂、肘部不可触及其他部位，如误触其他部位应视为污染，必须重新刷手；3、手消毒后应双手合拢置于胸前，肘部抬高外展，远离身体，迅速进入手术间，以免污染。

附件33-3遮背式手术衣、无接触戴无菌手套评分标准目的：防止手术过程中皮肤深部的常驻菌随汗液带到手的表面。

注意事项：1、已戴手套的手不可触及手套内面，未戴手套的手不可触及手套外面；2、参加手术前，应用无菌生理盐水冲净手套表面的滑石粉；3、协助他人戴手套时，器械护士应戴好手套，避免触及术者皮肤；4、穿好无菌手术衣、戴无菌手套后，手臂应保持在胸前，高不过肩，低不过腰，双手不可交叉放于腋下。

附件33-4 常用手术体位摆放评分标准—平卧位（腹部手术）适应证：妇产科手术，前列腺、膀胱手术，肝、胆、胰、脾手术，胃、肠手术，头面部手术。

注意事项：1、若手臂外展不可超过90°，远端关节高于近端关节；2、手术时间过长，足跟须有保护措施。

附件33-5常用手术体位摆放评分标准—平卧位（胸部手术）适应证：前纵隔、心脏、乳腺手术。

无菌技术操作评分标准

8
操作过程中物品掉地一件扣2分,顺序颠倒一次扣2分.跨越无菌区一次扣1分，违反无菌技术操作原则一次扣2分，不符合全过程要求酌情扣1-8分，态度不严肃、不认真各扣2分
提
问
无菌技术原则
4
回答不全或少答、答错两项扣1分
注：
1.无菌盘内放置弯盘一个，纱布一块，注射器一副
2.取用无菌溶液时可将溶液瓶铝盖先打开
消毒瓶塞上方，盖好橡胶塞，记录开瓶日期、时间
3
污染瓶塞未消毒扣2分，未盖好橡胶盖扣1分,不记录开瓶日期及时间扣1分
4。带无菌手套
取出无菌手套包，核对号码、查看灭菌日期、化学指示胶带
2
不核对扣2分，手套不合适（过大，过小）扣1分
打开手套带,取出时滑石粉,身体侧向治疗桌外，将粉擦于手上，将滑石粉包放于手套袋一角
取放无菌持物钳时，将容器盖打开，钳端闭合，不可再盖孔中取、放，不可触及容器口缘及页面以上的容器内壁
3
未开容器盖、钳端不闭合、在孔中取、放、触及容器口缘及液面以上内壁各扣1分
取出后钳端向下,用后放回原处，加盖
2
钳端朝上一次扣一分，用后不放回原处、不加盖各扣1分
取放无菌持物钳未触及非无菌物品
2
触及非无菌物品被污染后继续使用扣2分
程序
项目
分值
评分标准
扣分
准备
仪表
4
衣、帽、口罩、鞋不整洁各扣1分
指甲符合要求、洗手、戴口罩
3
指甲不符合要求、不洗手、不戴口罩各扣1分，戴首饰扣2分
环境、用物
4
环境不洁,不宽敞各扣1分,不检查名称、灭菌日期各扣1分,用物少一样扣1分，无菌物品与非无菌物品混乱一件扣1分
操
作
流
程

微生物技能考核标准

数据处理过程不正确，扣4分
数据处理结果不正确，扣4分
数据不合理，扣1分
报告结果规范、正确
2
报告清楚、准确、无涂改，得2分
结果报告不准确，扣0.5分
报告填写每改1次，扣0.5分
清洗（2分）
血球计数板清洗，归位
2
血球计数板清洗，并干燥归位2分
清洗方法不正确，扣1分
干燥方法不合理，扣1分
未将血球计数板归位，扣1分
5分
有其他杂菌污染，扣5分
5
用时
5
5分钟，超过1分钟扣1分
平板涂布分离考核标准（20min）
班级：姓名：学号：
项目
考核内容
分值
考核记录（扣分）
备注
得分
准备(10分)
物品摆放及酒精擦手
5
物品准备合适，不多不少，得3分
物品摆放合理、酒精擦手正确，得2分
摆放的物品影响操作，扣1分
取菌前未用酒精擦手，扣1分
移液过程其他问题，一次扣2分
吸管或移液器使用(打开方式、取液、调节液面、放液、稀释顺序)
10
吸管或移液器使用正确，得5分
打开吸管包扎纸时手碰到管尖至吸管的1/3处，一次扣2分；枪头盒每取一次都要迅速盖上，注意无菌操作，未盖一次扣2分
放液时若吸管（或移液器）外壁碰到试管口却没有灼烧试管口，一次扣2分
吸取刻度不准确，一次扣2分
考核内容
分值
考核记录（扣分）
备注
得分
题目
配制50mL牛肉膏蛋白胨培养基，全部分装入试管中，灭菌完毕摆斜面
准备(10分)
药品准备
2
药品齐全，类别准确
天平准备
4
水平，干净
其他
4