SSI沙门氏诊断血清
沙门氏菌的检验原理
沙门氏菌的检验原理沙门氏菌是一类常见的细菌，广泛存在于自然界中的土壤、水体和动物体内。
它们可以引起人类和动物的食物中毒和感染性疾病，给人们的生活和健康带来了威胁。
为了及时发现和控制沙门氏菌的感染，科学家们开发了许多检验方法，其中最常用的是PCR技术和血清学检测。
PCR（聚合酶链反应）是一种基于DNA复制的技术，可以在短时间内扩增目标DNA片段。
沙门氏菌的PCR检测主要是通过检测其特异性基因进行的。
科学家们根据沙门氏菌特异性基因的序列设计引物，然后将引物与待检样品中的DNA反应，通过一系列的温度变化，使DNA在体系中进行复制。
经过多轮的复制过程，待检样品中的沙门氏菌特异性基因片段会被扩增成大量的复制产物。
最后，通过电泳分析，可以确定待检样品中是否存在沙门氏菌。
PCR技术具有灵敏度高、特异性强、快速等优点，但是需要实验室设备和专业技能的支持。
为了方便大规模的沙门氏菌检测，科学家们还开发了一种基于血清学的检测方法。
这种方法主要是通过检测人体或动物体内产生的特异性抗体来判断是否感染了沙门氏菌。
血清学检测主要分为血清凝集试验和酶联免疫吸附检测。
血清凝集试验通过将待检血清与沙门氏菌的抗原混合，观察是否产生凝集反应来判断是否感染了沙门氏菌。
酶联免疫吸附检测则是将待检血清与沙门氏菌的抗原结合，然后通过添加特异性酶标记的抗体来检测是否有免疫反应发生。
这两种方法都可以通过观察结果的变化来判断是否感染了沙门氏菌。
沙门氏菌的检验原理主要是通过检测沙门氏菌特异性基因或特异性抗体来判断是否感染了沙门氏菌。
这些检验方法具有高灵敏度、高特异性和快速的优点，可以有效地帮助人们及时发现和控制沙门氏菌的感染。
但是需要实验室设备和专业技能的支持，所以在进行沙门氏菌检测时，应该选择合适的方法，并且由专业人员进行操作，以确保结果的准确性和可靠性。
通过科学家们的不断努力和创新，相信在未来，我们将能够更加有效地预防和控制沙门氏菌感染，保障人们的生活和健康。
沙门氏菌诊断血清说明书
有效期24个月。
参考文献
1.《中国生物制品检定规程》
2.Ewing.W.H. Edwards & Ewing’s Identification ofEnterobacteriaceae.
3.Carpenter K.P. (1968) Association of Clinical Pathologists Broadsheet 60.
2.本产品应避免冷冻。反复冻融会使血清产生沉淀。
3.本产品在保存过程中可能会产生浑浊或沉淀，这并不表示该产品已被污染。离心或者过膜去掉浑浊或沉淀后，可以正常使用。
4.本产品含有0.3%叠氮化钠作为防腐剂，丢弃时需倒入下水管，并用大量的水冲洗下水管。
5.若待检菌株与本产品均无明显凝集现象，应将可疑菌落经2YT固体斜面培养基培养12-16小时，用1ml生理盐水洗下培养物，于121℃高压15分钟或水浴煮沸30分钟，再进行血清凝集反应。
沙门氏菌属（3种）诊断血清学试验
注册证编号：国械注准20163401706
目的
制定沙门氏菌属诊断血清使用程序，指导对沙门氏菌属进行血清学分型。
原理
用沙门氏菌属的代表菌株制成灭活菌抗原分别或混合免疫家兔所得的血清，经吸收出去非特异性凝集素后制成，通过凝集试验原理供沙门氏菌属常见菌型定型。
试剂及实验设备
生产企业天津生物芯片技术有限责任公司
1，沙门氏菌属诊断血清：天津生物芯片技术有限责任公司生产的规格为13种的沙门氏菌属诊断血清
2，试剂保存：2~8°C避光保存，防止冻结，在有效期内使用。
实验步骤
1，产品在使用前最好恢复温度到室温。
2，由患者粪便或其他材料分离的革兰氏阴性杆菌，经初步生化检查，疑似沙门氏菌时，应先分别用各种多价血清做玻片凝集试验，阳性反应时，再与相应的单价血清做玻片凝集试验，作出诊断。在洁净玻片上用接种环滴加两滴彼此分离的生理盐水。
SSI丹麦国家血清研究院沙门氏菌血清分型
SSI丹麦国家血清研究院沙门氏菌血清分型SSI是丹麦国家血清研究院（Statens Serum Institut）的简称，是丹麦政府在1892年建立的一个公共研究机构，主要负责公共卫生领域的疫苗和血清制造、流行病学研究、医学微生物学研究等工作。
SSI是丹麦最主要的疫苗制造者和研究机构之一，其沙门氏菌血清分型工作是其重要的研究方向之一沙门氏菌（Salmonella）是一类能引起人和动物肠道感染的细菌，严重的感染可导致沙门氏菌感染症（Salmonellosis），症状包括腹泻、呕吐、发烧等。
沙门氏菌血清分型是通过对沙门氏菌菌株进行血清学试验，将其分为不同的血清型，在疫情调查和研究中起到重要作用。
沙门氏菌的血清分型主要依据是它们的抗原结构差异。
沙门氏菌细胞表面有两种主要类型的抗原，一种是血清棒状抗原（O抗原），另一种是H抗原。
O抗原为细菌细胞壁的组分，主要通过鉴定细菌细胞壁上的多糖抗原来进行分型；H抗原则是由鞭毛上的蛋白质决定的。
因此，在沙门氏菌的血清分型中，通常使用血清凝集试验或酶联免疫吸附试验（ELISA）来检测不同血清型的O、H抗原。
SSI作为拥有丰富经验和技术的研究机构，在沙门氏菌血清分型方面有着较高的权威性和可靠性。
他们通过多年的研究和实践，建立了一套完善的沙门氏菌血清分型方法和标准，为丹麦和其他国家的沙门氏菌感染病例的监测和研究提供了重要的技术支持。
沙门氏菌血清分型的结果对于疫情的控制和流行病学研究具有重要意义。
通过血清分型，可以确定不同的沙门氏菌流行株，了解病原菌的变异性和分布情况，以指导针对性的疫苗研制和制定干预措施。
此外，沙门氏菌血清分型结果还可以为沙门氏菌感染源的溯源和追踪提供重要依据，有助于公共卫生部门做出相应的防控措施。
总之，SSI作为丹麦国家血清研究院在沙门氏菌血清分型方面具有丰富的经验和技术优势，他们的研究工作对于沙门氏菌感染的监测、防控和流行病学研究具有重要的意义，对于保障公众健康和控制传染病的传播起到了积极的作用。
沙门菌分型血清比对研究-许学斌
鉴定沙门菌血清型（3要素）
专业技术人员和标准化方法 分型血清品牌（优化配置） 足够的菌株数（检测和监测、EQAS质控或 水平测试？）
标准化的方法（材料）
经过清洗的合格玻璃片 使用蜡笔划线分区（4~6格） 内径2.5接种环（长度为10cm左右） 黑色背景的垫板 固定配方针对O抗原生长的培养基 固定配方针对H抗原生长的培养基 血清配置：多价、因子和相位诱导血清
标准化的方法（方法）
菌液乳化：均匀的抗原-抗体比 判断凝集强度：+~++++ 技术路线：OMA（O4,O9：O10(15),O19）： OMB（O7,O8：O11,O24,25）； HMA:HE+G:HMC:HMD H多价凝集者需同步对H因子血清进行凝集（例如： H:a,b,c,d,i,z10;H:h,x,z15;H:k,y,r,v,w和 H:2,5,6,7）-注意交叉凝集反应 结果标记和详细的原始记录 相位诱导：双相诱导和单相诱导
宁波天润沙门菌分型血清与丹麦血清 比对
2009年236株沙门菌腹泻株经2种沙门菌 诊断血清比对确认共有199株血清型的报告 结果一致（符合率84.3%，199/236）， 有23株为C1、C2~3群的诊断分歧 2009年170株沙门菌食源株经2种沙门菌 诊断血清比对确认共有122株血清型的报告 结果一致（符合率71.8%，122/170）， 有12株为C1、C2~3群的诊断分歧
背景和现状
国内的微生物实验室 国产血清 进口血清 CLIN实验室（3、2级） ★★★
CIQ实验室
CDC实验室（省级）
★★★★
★
★★★★★ ★★
沙门氏菌的生物学特性及鉴定要点
甲型副伤寒
乙型副伤寒 丙型副伤寒 伤寒沙门氏菌 其它沙门氏菌
K K K K K
A + -/+ A + ++ A + ++ A - +/A + +
6.血清凝集步骤
6.1 筛选： 取营养琼脂斜面（或KIA斜面）培养物与AFO多价抗血清作玻片凝试 验，若呈明显凝集，提示被检菌可能属于AFO6个0群范围内，再 按0抗原血清凝集定群。若与多价0抗血清不凝集，有如下3种可 能：（1），含有Vi抗原 （2），AFO群之外的沙门氏菌 （3），沙门氏菌以外的细菌，按下述方法进一步检验。 将营养琼脂斜面培养物用1ml无菌生理盐水或蒸馏水洗下，制成浓厚 菌液，再合成2份，1份不经处理，为洗菌液，另一份放100℃水 浴中30分钟，为加热菌液。
6.2 定群
取O2（A群），O4（B群），O7（C1群），O8
（C2群），O9（D群），O3.10（E群），O11（F
群）分别进行玻片凝集试验。若与其中1种因子血 清凝集，可报告为阳性。
6.3 血清型分析：
菌群确定后先分析第1相鞭毛抗原，再分析第2相鞭毛 抗原。
A：第1相鞭毛抗原分析：根据菌群分析结果，分别选用第 1相鞭毛因子血清进行玻片凝集试验。
取活菌与Vi抗血清，取加热菌与Vi抗血清，AFO多价抗血清分别进行 玻片凝集试验。
根据结果作如下分析： （1）活菌与Vi抗血清凝集，加热菌与Vi抗菌，按下述定 群用O7和O9抗血清定群； （2）活菌与Vi抗血清不凝集，可能属于AFO群意外的沙
门氏菌或其他菌属细菌，应进行全面生化试验定属，若符
合沙门氏菌属细菌特征，宜送专门机构鉴定； （3）加热菌也与Vi抗血清凝集，而与AFO多价O抗血清 不凝集者，可报告为阴性。
沙门氏菌血清型的正确书写格式
一、概述沙门氏菌是一种寄生在动物肠道内的细菌，可以通过食物和水传播给人类，引起食物中毒和胃肠道疾病。
由于沙门氏菌的血清型众多，正确书写其血清型成为临床医学和科研中的重要问题。
本文将介绍沙门氏菌血清型的正确书写格式及相关注意事项。
二、沙门氏菌血清型的基本概念1. 沙门氏菌的分类沙门氏菌属于革兰氏阴性菌，是一类食源性病原菌，可引起沙门氏菌病和肠炎等疾病。
根据O抗原和H抗原的组合形式，沙门氏菌可分为不同血清型。
2. 沙门氏菌血清型的意义沙门氏菌血清型的不同代表了不同的致病菌株，对于流行病学调查、病原菌追踪及疫苗研制等具有重要意义。
正确书写沙门氏菌血清型是保证实验结果准确性的前提。
三、沙门氏菌血清型的正确书写格式1. 沙门氏菌血清型的表示方法沙门氏菌血清型的表示方法通常为“O抗原+H抗原”，其中O抗原代表细菌的外膜抗原，H抗原代表细菌的鞭毛抗原。
如O4:H12表示该沙门氏菌株的O抗原为4型，H抗原为12型。
2. O抗原和H抗原的书写规范（1）O抗原的书写规范O抗原应以大写字母“O”开头，后跟阿拉伯数字表示型号，如O4。
（2）H抗原的书写规范H抗原应以大写字母“H”开头，后跟阿拉伯数字表示型号，如H12。
3. 血清型书写格式示例正确的沙门氏菌血清型书写格式应为“O抗原+H抗原”，如：O4:H12。
在正式文献、研究报告和临床诊断中，应严格遵循这一格式。
四、关于沙门氏菌血清型书写的注意事项1. 注意大小写在书写沙门氏菌血清型时，应注意O抗原和H抗原的大小写格式。
大写的“O”和“H”有助于准确识别并避免歧义。
2. 注意数字和符号在表示O抗原和H抗原的型号时，应使用阿拉伯数字，并用英文冒号“:”分隔，避免使用其他符号或文字造成混淆。
3. 注意全称和缩写在一些场合，为了简洁与准确，人们可能会采用缩写形式表示沙门氏菌血清型，例如“4:12”表示O4:H12。
但在正式书面文献中，应尽量使用全称以确保准确无误。
五、结语正确书写沙门氏菌血清型对于科研工作和临床诊断具有重要意义。
沙门氏菌属诊断血清说明书
xx属诊断血清学试验操作程序1.目的制定沙门氏菌属诊断血清使用程序，指导对沙门氏菌属进行血清学分型。
2.原理用沙门氏菌属的代表菌株制成灭活菌抗原分别或混合免疫家兔所得的血清，经吸收出去非特异性凝集素后制成，通过凝集试验原理供沙门氏菌属常见菌型定型。
3.试剂及实验设备3.1xx属诊断血清：宁波天润生物药业有限公司生产的规格为11种的沙门氏菌属诊断血清3.2试剂保存：2~8°C避光保存，防止冻结，在有效期内使用。
3.3实验设备：玻片、吸样枪、接种环、水浴箱、玻璃管、血平板、营养琼脂、电热高温接种灭菌器。
4.程序步骤4.1将诊断血清于冰箱取出后平衡至室温。
4.2选择经初步生化检测符合沙门菌生物特性的疑似菌落。
4.3菌群分析将经18~24h血平板上纯培养的待检菌，先用O多价A~F群血清进行凝集试验，如阳性，提示待检菌可能属于A~F群范围内，因97%以上的沙门菌都包括在A~F6个O群之内，如果不凝再使用其他O抗血清进行凝集试验，如与其中一种抗血清凝集，待检菌即属于相应的菌群。
若与多价O抗血清不凝集，有如下3种可能：①含有Vi抗原；②A~FO群之外的沙门菌；③沙门氏菌属以外的细菌。
可按下述方法进一步检测，将纯菌落用无菌生理盐水洗下，制成浓菌液，再分成2份。
1份不经处理，为活菌液，另1份放100°C水浴中30min，为加热菌液。
取活菌与Vi抗血清，取加热菌与Vi抗血清凝集，加热菌与Vi抗血清、A~F多价O 抗血清分别进行玻片凝集试验。
根据结果作如下分析：①活菌与Vi抗血清凝集，加热菌与Vi抗血清凝集者，可能属于C群或D 群菌，用O7和O9抗血清定群；②活菌与Vi抗血清不凝，可能属于A~FO群之外的沙门菌或其他菌属细菌，需进行生化试验定属，若符合沙门氏菌属细菌特征，可送CDC鉴定；③加热菌与Vi抗血清凝集，而与A~F多价O抗血清不凝集者，可报告为阴性。
4.4血清型分析菌群确定后，分析被检菌的鞭毛抗原成分。
沙门菌血清学分型的依据
沙门菌血清学分型的依据沙门菌是一类常见的革兰氏阴性杆菌，可以引起人和动物的沙门菌感染。
沙门菌的分类和鉴定是研究者进行流行病学调查和疫情监测的重要手段，其中沙门菌血清学分型是一种常用的鉴定方法。
沙门菌血清学分型是根据沙门菌菌株表面的抗原性质进行分类的。
沙门菌的抗原主要分为两类：鞭毛抗原（H抗原）和荚膜抗原（Vi 抗原）。
根据H抗原的差异，沙门菌可分为A、B、C等多个血清型。
根据Vi抗原的有无，沙门菌可分为Vi阳性和Vi阴性两种。
因此，沙门菌血清学分型可以根据H抗原和Vi抗原的特性进行鉴定。
H抗原是沙门菌鞭毛上的抗原，通过鞭毛抗原的差异来进行血清学分型。
H抗原的命名是根据发现该抗原的次序进行编号的。
目前已知的H抗原有54种，分别命名为H1到H54。
通过血清学试验，可以检测出菌株是否有特定的H抗原，从而确定其H抗原型。
Vi抗原是沙门菌荚膜上的抗原，通过Vi抗原的有无来进行血清学分型。
Vi抗原在某些沙门菌菌株上会表达，而在另一些菌株上不会表达。
通过血清学试验，可以检测出菌株是否有Vi抗原，从而确定其Vi抗原型。
沙门菌血清学分型的方法主要有凝集试验和补体结合试验。
凝集试验是通过将某特定抗原与相应的抗体混合，观察是否发生凝集反应来判断抗原的有无。
补体结合试验则是通过将某特定抗原与补体结合试剂混合，观察是否发生补体结合反应来判断抗原的有无。
沙门菌血清学分型的结果可以提供一些有关菌株的信息，如其毒力、菌株来源、菌株间的关系等。
这对于研究人员来说是非常有价值的。
通过对不同血清型的沙门菌进行比较和分析，可以揭示其在流行病学中的传播途径和感染机制，为预防和控制沙门菌感染提供科学依据。
沙门菌血清学分型是一种常用的沙门菌鉴定方法，通过检测沙门菌菌株的H抗原和Vi抗原，可以确定其血清学分型。
这一方法在流行病学调查和疫情监测中具有重要意义，可以为沙门菌感染的预防和控制提供科学依据。
SSI 丹麦国家血清研究院 沙门氏菌血清分型
SSI肠道致病菌国家参比实验室
玻片凝集实验操作方法
• 于洁净载玻片的测试区域及对照区域分别滴一滴抗 血清和一滴生理盐水； • 用铂金丝蘸取新鲜培养物单菌落一环，于载玻片上 的抗血清和生理盐水中； • 分别将培养物和抗血清、培养物和生理盐水充分混 匀，来回倾斜晃动载玻片10s； • 观察凝集现象： O抗原为颗粒状凝集 H抗原为絮状或绒毛状凝集
拥有齐全的沙门血清产品可使用Kauffmann-White表对所有已知 沙门氏菌进行完整分型。 玻片凝集用抗血清 多价血清 Vi 血清 O 多群抗血清 (OM) O 群抗血清 O 因子血清 H 多相抗血清 (HM) H 单相抗血清 H 因子血清 H:R-相抗血清 相诱导用抗血清 SG 相诱导血清 H 相抗血清 抗血清试剂盒 Salmonella Sero-Quick ID Kit Salmonella Group Kit
•所有的抗血清 – 除了Vi 抗血清 – 都来自兔子（多 克隆）。 •Vi抗血清产自老鼠（单 克隆）。
沙门氏菌抗血清简介
用于玻片凝集反应 快速 • 10秒之内判读结果 Vi来自单克隆抗体 带滴管瓶装 1或3 ml包装，即用型 每毫升可用于50次实验 没有交叉反应
+
-
SSI血清相对其他品牌血清的不同 沙门氏菌O + H血清
________________________________________________________________________
其它 O:51 – O:67
(O:64 = O:48)
在沙门氏菌血清分型之前
1. (粪便)标本采集
2. 在SSI肠道培养基上 培养并分离沙门氏菌 3. 生化鉴定
沙门氏菌诊断血清30支套装
沙门氏菌检验详细流程
新的血清型名称的批准必须有巴斯德研究所、德国汉 堡卫生研究所及美国CDC 3个实验室的一致同意。
精品课件
沙门氏菌检验程序
精品课件
前增菌
目的：修复损伤的细菌细胞； 方法：25 g（mL）样品＋225 mL BPW的无菌均
57个O抗原 116个H抗原 Vi抗原
被分成2500多个血清型 。
Vi抗原 O抗原 H抗原
精品课件
沙门氏菌命名与书写方式
目前的命名方法规定：
肠道沙门菌肠道亚种（亚种Ⅰ）给予专用名，并采用 标本分离地址的地名。菌名的第一个字母需大写，且 亚种Ⅰ的所用菌名不能用斜体。例如：肠道沙门菌鼠 伤寒血清型应书写为Salmonella enterica subsp.enterica serotype Typhimurium，但在实际工 作中，可简写为S. Typhimurium。
精品课件
血清学鉴定时的注意要点：
做血清凝集时，同时应用生理盐水做对照。 O血清不凝集时，可将菌株转接于琼脂量较高(如
2.5%-3%)的斜面上，再做凝集。 如果由于Vi抗原的存在而阻止了O抗原的凝集反应
时，应挑取菌苔于1mL生理盐水中做成菌悬液。煮 沸后再检查。(常见于伤寒沙门菌)。 有极少数的二相沙门菌会同时出现2相H抗原，也 有一些沙门氏菌在培养过程中H抗原会出现第1项 和第2项之间的转变，所以血清诱导实验要用新鲜 的培养物进行诱导。
GB 4789.4-2010 食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验
精品课件
沙门菌概况
沙门菌是1885年由Salmon氏等在猪霍乱流行 时，分离出的猪霍乱沙门菌，由于Salmon氏 对本属细菌的发现贡献卓越，故定名为沙门 菌属。
肉鸡死胚中沙门氏菌的分离及血清学鉴定
中图分类号 ：￥ ８ ５ ８ ． ３ １
沙 门 氏菌 是 一 种 重 要 的 革兰 氏 阴性 。细 胞 内寄 生 的 ，形态 、生化特性 和抗 原 结构相似 的 人畜共 患的肠 道 病原菌 ，其型别繁多 ，定型复 杂ｌ ｌ 】 。 目前 ，有关沙 门氏菌
的分类 已有 改进 ，依 据新 的分类 方法 ，沙 门氏菌可分 为
个 主要 原 因 。
购 自于青海 省地 方研究所 ） 。
１ ． ２ 方 法
目前 ，国 内外学者 已建 立 了多种快 速检 测沙 门 氏菌 的方法 ，有Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ、气相色 普、生物发光技术 、放射 免疫 测定法 等高新技 术及Ａ Ｐ Ｉ 、Ｒ ． Ｂ、Ｅ ． １ ５ 等 简易 生化诊 断技 术［ １ ０ ， １ １ ， １ ２ 】 。这 些方 法虽能准确 、快速 地检测 出沙 门氏菌 ，
余种 ，其 中传 染病 占７ ５ ． ２ １ ％，非传 染性疾 病 占２ ４ ． ７ ９ ％Ｌ ８ 】 ，
海 大学农牧 学院动物医学系传染病实验室 自制。
据估计 我 国家禽死亡 损 失年 均 约百亿 元 ，鸡沙 门 氏菌病 是 由沙 门 氏菌 属细菌 引起 的一种 常见 的肠 道传染 病 。严
醇、蔗糖 、乳糖 、ＭＲ 、Ｈ ２ Ｓ 、Ｖ － Ｐ 、枸橼酸 、尿素酶 、靛 基质 、硝酸 盐、三糖 铁（ Ｔ Ｓ Ｉ ） 等 各种 生化培养基 。均 由青
中 国是世界 上养鸡最 多 的国家 ，多年 以来 ，禽病 一直 是
困扰我 国养 禽业 的关键 问题之 一 。 目前我 国禽 病约有 ８ ０
２ ０ １ ３年第 ５期 （ 总第 １ ９ ６
。 。。 。 。 。 。 …
试验研 究
试验研 究
沙门氏菌检测标准、方法及实验关键点
．检验沙门氏菌的原因和意义：据统计我国细菌性食物中毒中70%～80%是由沙门氏菌引起的，人一旦摄入含有大量沙门氏菌(105～(106个/g)的动物性产品，就会引起细菌性感染，进而在毒素作用下发生食物中毒导致胃肠炎、伤寒和副伤寒且沙门氏菌的传播媒介众多，肉、蛋以及食品从加工到出售的过程中都十分容易发生污染。
因此对沙门氏菌的检验事关重大。
二、检测及鉴定：沙门氏菌的检测要在二级生物安全实验室及二级生物安全柜(在负压情况下防止致病微生物气溶胶飘离实验室对实验人员及环境造成污染)中进行。
沙门氏菌典型菌落形态：生化鉴定显示：API20E 生化鉴定是根据快速酶促反应及代谢产物的检测技术发展的一种细菌编码鉴定法，广泛应用于临床、食品中革兰氏阴性杆菌的快速鉴定。
限值要求：参考CAC、ICMSF、欧盟、澳大利亚和新西兰、美国、加拿大、香港、台湾等国际组织、国家和地区的即食食品中沙门氏菌限量标准及规定，《GB29921-2013食品中致病菌限量》按照二级采样方案对所有11类食品设置沙门氏菌限量规定，具体为n=5，c=0，m=0（即在被检的5份样品中，不允许任一样品检出沙门氏菌）。
三、沙门氏菌传统检测方法的关键控制点1、样品处理尽可能缩短解冻时间，使竟争菌群生长最少，并减小对沙门氏菌的损伤致病菌取样一定要均匀并具有代表性（蛋黄蛋清混匀取样）。
2、培养基及培养方面（1）没有一种培养基可疑准确无误的筛选出沙门氏菌，必须选择多种选择性培养基同时筛选，只能说显色培养基综合选择性更强。
（2）试剂和培养基的配置一定要严格按照说明书配置，是否需要高压灭菌，添加剂用量及培养基保存条件。
（3）有1%沙门氏菌乳糖发酵阳性，为了避免漏检乳糖阳性菌必须选择不依赖乳糖的培养基，目前BS 培养基认为是最适合的。
（4）BS培养基是分离沙门氏菌的高效培养基，特别适用于伤寒类的沙门氏菌，不是所有的选择性培养基都能有效分离出伤寒沙门氏菌和副伤寒沙门氏菌，BS是分离伤寒类沙门氏菌的首选培养基。
沙门氏菌血清学鉴定
竭诚为您提供优质文档/双击可除沙门氏菌血清学鉴定篇一：沙门氏菌生化鉴定沙门氏菌生化试验判定步骤三糖铁琼脂原理分析：本培养基适合于肠杆菌科的鉴定。
用于观察细菌对糖的利用和硫化氢（变黑）的产生。
该培养基含有乳糖、蔗糖和葡萄糖的比例为10:10:1，只能利用葡萄糖的细菌，葡萄糖被分解产酸可使斜面先变黄，但因量少，生成的少量酸，因接触空气而氧化，加之细菌利用培养基中含氮物质，生成碱性产物，故使斜面后来又变红，底部由于是在厌氧状态下，酸类不被氧化，所以仍保持黄色。
而发酵乳糖的细菌(e.coli)，则产生大量的酸，使整个培养基呈现黄色。
如培养基接种后产生黑色沉淀，是因为某些细菌能分解含硫氨基酸，生成硫化氢，硫化氢和培养基中的铁盐反应，生成黑色的硫化亚铁沉淀。
底层产酸：是因为细菌分解糖类物质使酚红退色变黄。
斜面产碱，低层产酸：是细菌分解葡萄糖(不能分解乳糖和蔗糖),由于量较少进而分解蛋白胨而产碱变红。
因为底层是厌氧环境，葡萄糖分解慢，２４小时培养后还没分解蛋白胨产碱；而斜面是需氧环境分解较快，一般８小时左右就把葡萄糖分解完（此时斜面也是酸性），但继而分解蛋白胨产碱，斜面又转为碱性。
2－志贺氏菌：都能分解葡萄糖，产酸不产气，大多不发酵乳糖，不产生h2s。
4－大肠杆菌：能分解葡萄糖产酸产气，大多数能分解乳糖，不产生h2s。
3－沙门氏菌：能分解葡萄糖，不发酵乳糖，大多数产生h2s，多数产气。
赖氨酸脱羧酶试验1、试验管及对照管均要加一层约10mm厚的灭菌石蜡或矿物油以覆盖表面，此可使培养基中的溶解氧通过细菌消耗掉，并控制培养基的ph。
2、阳性试验管培养初期（10—12h）因发酵葡萄糖产酸变黄，继续培养由于氨基酸脱羧产生胺类而使培养基由酸变碱，故又由黄变为紫色。
阴性试验管则始终呈黄色。
氨基酸脱羧酶试验(1)原理：某些细菌可产生氨基酸脱羧酶使氨基酸脱羧生成胺和二氧化碳。
由于胺的生成使培养基变为碱性，可用指示剂指示出来。
(2)方法：将待检菌分别接种于1支氨基酸（赖氨酸，鸟氨酸或精氨酸）脱羧酶试验管和1支氨基酸脱羧酶对照管（无氨基酸），各覆盖至少0.5cm高度的无菌石蜡油，35℃孵育1~4d，观察结果。
沙门菌血清学检测标准操作规程
沙门菌血清学检测标准操作规程
1．目的
规范沙门菌的血清学检测标准操作规程。
2．原理
用已知的沙门菌诊断血清在载玻片上直接与细菌培养物或菌悬液混合，若出现肉眼可见的特异性凝集块，表示该菌即为沙门菌。
3．试剂
沙门菌诊断血清，生理盐水。
4．质控
伤寒沙门菌ATCC50096阳性；大肠埃希菌ATCC25922阴性。
5.操作步骤
5.1 首先用可疑菌与沙门菌O多价血清(A-F)进行凝集，若呈明显凝集，提示被检菌株可能属于A-F6个O群范围之内，再用H因子血清第一相（特异相）定型，最后用H因子第二相（非特异相）辅助定型。
5.2 若生化反应符合沙门菌，但A-F多价血清不凝集，首先考虑是否存在表面抗原（Vi抗原），因为Vi抗原能阻断O抗原与相应抗体发生凝集，加热可将其破坏。
应将细菌制成菌悬液，放入沸水中加热15～30分钟，冷却后再次做凝集试验。
若去除Vi抗原后仍不凝集，此时应考虑是否为A-F
以外菌群，应送专业实验室进行鉴定。
6.结果判断
阴性：试验一侧及对照一侧均为混浊。
阳性：对照一侧均为混浊，试验一侧明显凝集。
自凝：试验一侧及对照一侧凝集。
7.注意事项
伤寒沙门菌菌体表面常有一层Vi抗原。
它能阻抑菌体抗原与抗血清的凝集，从而导致假阴性结果。
此时应将菌悬液于100℃中煮沸1小时，以破坏Vi抗原，然后再做试验。
8.临床意义
主要用于沙门菌属的鉴定。