透析袋使用说明
透析袋使用说明及注意事项
用到透析的技术。
透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状，将生物大分子样品溶液置入袋内，将此透析袋浸入水或缓冲液中，样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内，而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外，直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”，袋（膜）外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。
透析的动力是扩散压，扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度，正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度，还正比于膜的面积和温度，通常是4℃透析，升高温度可加快透析速度。
纤维素酯CE、PVDF等）制成的透析膜，目前常用的是美国美国光谱医学公司（spectr um，上海欧韦达仪器科技有限公司是中华区特约总经销）和美国Uni on Carbid e （联合碳化物公司，上海欧韦达仪器科技有限公司是华东区特约经销商）最小分子量，缩写为MwC O）大概有100、500、1000、2000、3500、8000、10000、15000、20000、25000、50000、100000、250000、500000、1000000等种类，单位为道尔顿（D）。
商品透析袋制成管状，其扁平宽度为8 mm～77 mm不等。
为防干裂，出厂的杂质，它们对蛋白质和其它生物活性物质有害，用前必须除去。
1.将透析管剪成适当长度（10-20cm）的小段，即成透析袋。
10mi n。
3.将透析袋用蒸馏水彻底漂洗。
4.将透析袋置1mmol/LEDTA(PH=8)中煮沸10m in。
5.透析袋冷却后存放于4度，应确保透析袋始终浸没在液体中。
注：从此步起用透析袋时一定要戴手套操作。
6.在使用之前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗。
蛋白质透析的实验报告
一、实验目的1. 了解蛋白质透析的原理和方法。
2. 掌握透析袋的使用和操作技巧。
3. 学习如何通过透析分离蛋白质混合物。
二、实验原理蛋白质透析是一种利用半透膜的选择透过性来分离和纯化蛋白质的方法。
半透膜允许小分子物质（如盐、小分子有机物）自由通过，而大分子物质（如蛋白质）则被阻挡在膜的一侧。
通过改变透析袋内外的离子浓度，可以调节蛋白质的溶解度，从而实现蛋白质的分离。
三、实验材料与试剂1. 实验材料：透析袋、磁力搅拌器、剪刀、移液枪、试管、烧杯、蒸馏水、氯化钠、鸡蛋清等。
2. 实验试剂：0.1M氯化钠溶液、0.01M氯化钠溶液、蒸馏水、10%硫酸铵溶液等。
四、实验步骤1. 准备透析袋：将透析袋剪成适当大小，用蒸馏水冲洗干净，晾干备用。
2. 配制蛋白质溶液：将鸡蛋清用移液枪吸取一定量，加入适量蒸馏水，搅拌均匀。
3. 透析袋预处理：将透析袋浸入0.1M氯化钠溶液中，浸泡30分钟，以去除透析袋中的杂质。
4. 透析操作：将预处理好的透析袋放入烧杯中，加入10%硫酸铵溶液，搅拌均匀。
将配制好的蛋白质溶液用移液枪加入透析袋中，确保蛋白质溶液充满透析袋。
5. 透析过程：将透析袋放入烧杯中，加入适量蒸馏水，使透析袋悬浮在水中。
用磁力搅拌器缓慢搅拌，保持透析袋内外液体充分接触。
6. 透析时间：根据实验需求，选择适当的透析时间。
一般透析时间为4-8小时。
7. 检测透析效果：在透析过程中，定时取样，用比色法检测透析袋内外的蛋白质浓度，以评估透析效果。
8. 透析结束：透析结束后，将透析袋内的蛋白质溶液倒入试管中，用比色法检测蛋白质浓度。
五、实验结果与分析1. 透析过程中，透析袋内外的蛋白质浓度逐渐降低，说明蛋白质通过透析膜逐渐进入蒸馏水中。
2. 透析结束后，透析袋内的蛋白质浓度与透析前的蛋白质浓度相比，有显著降低，说明透析过程有效分离了蛋白质。
3. 比色法检测结果显示，透析后的蛋白质溶液中蛋白质浓度较低，说明透析过程实现了蛋白质的分离。
透析袋 量子点-概述说明以及解释
透析袋量子点-概述说明以及解释1.引言1.1 概述透析袋和量子点是两种在生物科学和纳米技术领域具有重要应用价值的材料。
透析袋是一种用于分离和纯化生物分子的薄膜袋，常用于生物分子的富集和浓缩。
量子点是一种具有特殊电学和光学性质的纳米颗粒，常被用于标记和追踪生物分子在细胞中的运动和相互作用。
本文将探讨透析袋和量子点的原理、特性以及它们结合应用的潜在优势，旨在全面了解这两种材料在生物领域的重要性和未来发展趋势。
1.2 文章结构文章结构部分是要概述整篇文章的框架和内容安排，让读者对全文有一个整体的把握。
在本篇文章中，我们将首先介绍透析袋和量子点的基本概念和原理，包括透析袋的作用和应用范围，以及量子点在材料科学和生物医学领域中的特性和应用。
接着，我们将探讨透析袋与量子点的结合应用，分析它们在科学研究和实际应用中的潜力和优势。
最后，我们将总结透析袋和量子点在科学和技术领域的重要性，展望它们未来的发展方向，以及对读者的一些启发和思考。
通过对透析袋和量子点的介绍和分析，我们希望读者能够更加深入地了解这两种材料的特性和应用，同时也能够启发读者对未来科学技术发展的思考和探索。
愿本篇文章能为读者带来启示和帮助，让我们一起探索透析袋和量子点在未来的发展之路。
1.3 目的目的部分的内容：本文的目的是探讨透析袋与量子点在生物医学领域中的应用，分析透析袋和量子点的原理和特性，并探讨它们结合应用的潜在优势。
通过对这两种材料的深入了解和研究，我们可以更好地认识它们在生物医学领域中的作用，为未来的研究和发展提供参考和指导。
希望通过本文的介绍，读者能够对透析袋和量子点有一个全面的了解，并认识到它们在医学领域中的重要性和潜力。
2.正文2.1 透析袋的原理透析袋是一种生物学实验中常用的实验工具，它的工作原理是利用半透膜的特性来分离和纯化生物分子。
透析袋通常由人工合成的半透膜材料制成，这种膜具有选择性透过性，可以通过分子大小和分子电荷来筛选分子。
诱导表达和纯化
3.2方法3.2.1 PRRSV GPS蛋白的诱导表达（1）将保存的pET-28a-GPS-BL21菌种按1:100接种于含SmL卡那抗性LB的无菌试管中，220r/min, 37 0C振荡培养过夜进行活化。
(2)将活化的菌液按体积比1:20的比例，分别接种于4个含SmL卡那抗性基的试管中，220 r/min, 37 0C振荡培养至OD600nm约为0.6左右。
(3)取1 mL培养物作为诱导前对照，剩余培养物中加入终浓度为1 mmol/L的IPTG后，220 r/min, 37 0C振荡培养4h，取1 mL作诱导后的样品，其余菌液离心收集菌体备用。
(4)将所取的菌液样品12000 r/min离心2min，收集菌体加入1xSDS-PAGE Loading Buffer后煮沸1 Omin再次离心，然后进行12%聚丙烯酞胺凝胶电泳检测目的蛋白是否表达。
3.2.2目的蛋白表达形式鉴定(1)用适量PBS重悬收集的诱导表达的菌体。
(2)在冰浴环境中进行超声粉碎工作时间3s，间隙时间6s，全程时间18min(3)离心分别收集上清和沉淀，按一定比例加入SDS-PAGE Loading Buffer煮沸1 Omin,12% SDS-PAGE凝胶电泳，确定目的蛋白的表达形式。
3.2.4.2目的蛋白的大量诱导与纯化(1)按3.2.1方法诱导1000mL菌液，4 0C , 4000r/min离心l Omin，弃上清，留沉淀;(2)用原菌液1 /20体积的PBS重悬沉淀;(3)超声破碎重悬的菌液，工作时间3s，间隙时间6s，全程时间18min,。
(4 ) 4℃, 12000r/min离心1 Omin收集包涵体沉淀，弃上清。
(5)用原菌液1 /20体积的的Buffer B (500 mmol NaCI; 20 mM Tris; 0.1% TritoriX-100;5%Glycerol; l Ommol Imidazole溶解包涵体，室温下孵育60- 120min(6 ) 4℃, 12000r/min离心3 Omin，弃沉淀，收集上清用0.45um滤膜过滤，收集滤液即为样品A，准备进行纯化，纯化前留部分样品作为未纯化的对照。
腺病毒包装操作手册
汉恒重组腺病毒操作手册目录腺病毒安全使用和注意事项腺病毒储存与稀释的注意事项一、整体实验流程二、实验材料三、腺病毒包装和浓缩四、重组腺病毒滴度（PFU）的测定五、重组腺病毒感染目的细胞六、重组腺病毒用于动物实验附1：汉恒生物腺病毒载体附2：腺病毒感染细胞最佳MOI的摸索（表达荧光的病毒） 附3：汉恒生物常见三种病毒感染目的细胞比较腺病毒安全使用和注意事项➢腺病毒安全使用注意事项（*非常重要*）1) 腺病毒相关实验请在生物安全柜（BL-2级别）内操作。
2) 操作病毒时请穿实验服，佩戴口罩和手套，尽量不要裸露双手及手臂的皮肤。
3) 操作病毒时需要特别小心病毒溅出。
如果操作时超净工作台有病毒污染，请立即用70%乙醇加 1%的SDS溶液擦拭干净。
4) 接触过病毒的枪头、离心管、培养板及培养瓶请用84消毒液浸泡后统一处理。
5) 如实验过程中需要离心，应使用密封性好的离心管，必要时请用封口膜封口后离心。
6) 病毒相关的废弃物需要特殊收集，统一经高温灭菌后处理。
7) 实验完毕后请用香皂清洗双手。
➢腺病毒储存与稀释的注意事项1）腺病毒的储存收到病毒液后若在短期内使用，可将病毒放置于 4℃保存（一周内使用完最佳）；如需长期保存请分装后放置于 -80 ℃ 。
注：a.反复冻融会降低病毒滴度（每次冻融会使病毒滴度降低10%~50%），因此在病毒使用过程中尽量避免反复冻融。
汉恒生物对病毒已进行分装（200 μl/tube），收到后请直接放置-80℃冰箱保存即可。
b.若病毒储存时间超过6个月，汉恒生物建议在使用前重新测定病毒滴度（参见附表2-慢病毒滴度测定方法）。
2）腺病毒的稀释需要稀释病毒时，请将病毒取出置于冰浴融解后，使用PBS或培养目的细胞用的无血清培养基(含血清或含双抗不影响病毒感染)混匀分装后置于 4℃保存(一周内使用完最佳)。
重组腺病毒是一种复制缺陷的腺病毒载体系统，在基因治疗、基础生命科学研究等领域被广泛应用。
透析袋说明
透析袋使用说明产品介绍一、高精度、即用型透析袋，使用前无需处理(生物级，去除了硫化物和重金属离子，保存于防腐液中)即用型透析袋的制造过程没有重金属污染及硫化物，无需预处理，只需用去离子水清洗即可使用，满足对截留分子量精确性和膜纯度的应用。
优点：1. 韧性膜材料，不易破损2. 杂质含量极少，可无需预处理，只需用去离子水清洗即可使用3. 孔径标准均一4. 对溶质的吸附性小5. 可选分子量范围广 100-3000006. 多种扁平宽度可选7. 特有生物技术膜，不含硫化物及金属杂质二、普通干型透析袋(美国联合碳化，甘油涂层，使用前需处理）技术参数：1. PH 稳定范围 : 5-92. 污染物水平: 硫化物<0.3%; 重金属<50ppm3. 化学兼容性: 与很多盐兼容，比如 CaCl2, (NH4)2SO4；还可与分子生物学及酶学中常用的水溶剂、有机溶剂兼容，比如异丙醇、乙醇和丙酮。
4. 温度抵抗性：可煮沸，可高压灭菌。
5. 蛋白吸附：每克透析袋吸附蛋白量小于 1ng。
干型透析袋使用前处理方法：1. 把透析袋剪成适当长度（10-20cm）的小段。
2. 在大体积的 2%(W/V)碳酸氢钠和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸 10 分钟。
3. 用蒸馏水彻底清洗透析袋。
4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸 10 分钟。
5. 冷却后，存放于 4 度，必须确保透析袋始终浸没在溶液内。
从此时起取用透析袋是必须戴手套。
6. 用前在透析袋内装满水然后排出，将之清洗干净。
实验要求不高的可以用简易处理方法：在沸水中煮 10min 即可使用。
透析袋的应用：去除盐类、表面活性剂和溶剂样品溶液的缓冲液置换和 PH 值的调节浓缩蛋白质、多肽和抗体 DNA 电洗脱电泳前稀释蛋白的制备小分子污染物清除结合研究组织培养的提取纯化透析袋的选择1.正确选择合适的截留分子量截留分子量的选择是以预留在膜内的大分子的分子量和将要被除去的小分子污染物的分子量为基础的。
仕必纯(Spectrumlabs)生物技术级透析膜操作说明
Spectra/Por®生物技术级透析膜纤维素酯(CE)再生纤维素(RC)产品信息和操作说明Spectra/Por®生物技术级纤维素酯膜和再生纤维素膜目录简介 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .2应用 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .2规格 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .3选择膜类型（纤维素酯和再生纤维素） . . . . . . . . . . . . . . . . .4截留分子量(MWCO) 和膜渗透性 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .5选择膜的截留分子量 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .6选择膜管的扁平宽度 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .7选择膜夹 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .7通用膜夹（尼龙） . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .7 Spectra/Por®膜夹（聚丙烯） . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .7灭菌 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .8膜准备与储藏 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .9使用说明 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .10膜化学相容性表格 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .12订购信息 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .14生物技术级纤维素酯膜管和试验包. . . . . . . . . . . . . . . . .14生物技术级再生纤维素膜管和试验包 . . . . . . . . . . . . . . . .14生物技术级纤维素酯即用型透析设备 . . . . . . . . . . . . .15 Float-A-Lyzer®G2 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .15 Micro Float-A-Lyzer® . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .16Spectra/Por®生物技术级膜是最新一代的透析膜。
蛋白浓缩方法详解
利用透析袋浓缩蛋白质溶液是应用最广的一种。将要浓缩的蛋白溶液放入透析袋（无透析袋可用玻璃纸代替），结扎，把高分子（6000－12000）聚合物如聚乙二醇（碳蜡）、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。也可将吸水剂配成30%－40%浓度的溶液，将装有蛋白液的透析袋放入即可。吸水剂用过后，可放入温箱中烘干或自然干燥后，仍可再用。
主要针对小体积蛋白质溶液（几ml）此法更不易引起变性，不过得有浓缩器，不是哪个实验室都有的。
5，凝胶浓缩法
选用孔径较小的凝胶，如SephadexG25或G50，将凝胶直接加入蛋白溶液中。根据干胶的吸水量和蛋白液需浓缩的倍数而称取所需的干胶量。放入冰箱内，凝胶粒子吸水后，通过离心除去。
6，浓缩胶浓缩法
强调低温（0-4度以下）是因为10度时蛋白会在有机溶剂中变性，可用乙醇，丙酮等。注意：Mg2++离子，pH值。
11，聚乙二醇（PEG）沉淀法：
PEG是一个水溶性非离子多聚体，使用PEG时旨在个别情况下才会是蛋白质稍有变性！他溶解是散热低，形成沉淀的平衡时间短，通常达到30%时蛋白质就会达到最大量的沉淀。
浓缩胶是一种高分子网状结构的有机聚合物，具有很强的吸水性能。每克干胶可吸水120ml～150ml。它能吸收低分子量的物质，如水、葡萄糖、蔗糖、无机盐等，适宜浓缩10000分子量以上的生物大分子物质。浓缩后，蛋白质的回收率可达80%～90%。比凝胶应用方便，直接加入被浓缩的溶液中即可。必须注意，浓缩溶液的pH值应大于被浓缩物质的等电点，否则在浓缩胶表面产生阳离子交换，影响浓缩物质的回收率。
7，丙酮沉淀法：
试验要求的仪器简单，但是常常导致蛋白质变性。
8，免疫沉淀法：
通过免疫沉淀法，用蛋白质特异性能够定量能够分离目的蛋白。有三个步骤组成：首先将特异性抗体加入细胞提取物，第二步加入经化学固定的金黄色葡萄球菌，以确保形成大量沉淀。这些细菌通过蛋白质A和抗体形成复合物，蛋白质A与免疫球蛋白的Fc部分有高度的亲和性。或者说，纯化的蛋白A结合Sephrarose树脂，为从细胞提取物中分离出抗原抗体复合物，提供一个固体基质。最后通过洗脱，除去尚未沉淀的杂质。
化学透析实验报告
一、实验目的与摘要实验目的：1. 理解透析膜的选择透过性及其在分离混合物中的应用。
2. 掌握透析实验的基本操作方法，包括透析膜的选择、透析液的准备和透析过程的控制。
3. 通过实验验证透析原理，学习如何通过透析分离不同分子量的物质。
摘要：本次实验通过使用透析膜，对含有不同分子量物质的混合溶液进行分离。
实验过程中，我们观察了透析膜的选择透过性，并通过更换不同分子量的透析膜，验证了透析原理在混合物分离中的应用。
实验结果表明，透析膜可以有效分离不同分子量的物质，实现了对混合物的分离纯化。
二、实验器材1. 透析袋（分子量截留值：10000、5000、3000、1000）2. 透析膜（分子量截留值：10000、5000、3000、1000）3. 混合溶液（含有不同分子量物质）4. 透析槽5. 量筒6. 秒表7. 计时器三、实验原理透析是一种利用半透膜的选择透过性，对混合物进行分离纯化的方法。
半透膜允许小分子物质通过，而阻止大分子物质通过。
因此，通过选择合适的透析膜，可以实现混合物中不同分子量物质的分离。
四、实验步骤1. 准备混合溶液：将含有不同分子量物质的溶液（如葡萄糖、淀粉、蛋白质等）按比例混合均匀。
2. 选择透析膜：根据需要分离的分子量，选择合适的透析膜。
3. 将混合溶液倒入透析袋中，确保透析袋内充满溶液，无气泡。
4. 将透析袋悬挂于透析槽中，透析槽中装有蒸馏水，保证透析袋完全浸没在水中。
5. 记录开始透析的时间，观察透析过程中溶液的变化。
6. 定期更换透析液，以保持透析过程的稳定性。
7. 经过一定时间后，观察透析袋内溶液的变化，并取出透析袋，测量其重量。
8. 记录实验数据，分析实验结果。
五、实验结果与分析实验过程中，我们观察到以下现象：1. 在透析初期，透析袋内溶液的浓度逐渐降低，说明小分子物质（如葡萄糖）开始透过透析膜进入透析液中。
2. 随着透析时间的延长，透析袋内溶液的浓度变化逐渐减小，说明大分子物质（如淀粉、蛋白质）的透过率较低。
透析纯化蛋白_实验报告
一、实验目的1. 理解透析法在蛋白质纯化中的应用原理。
2. 掌握透析纯化蛋白质的操作步骤。
3. 评估透析纯化蛋白质的效果。
二、实验原理透析法是一种利用半透膜将蛋白质与分子量较小的杂质（如无机盐、小分子有机物等）分离的方法。
半透膜具有选择性透过性，允许小分子物质通过，而大分子蛋白质则被截留在膜内。
通过不断更换透析液，可以逐步去除蛋白质中的杂质，从而实现蛋白质的纯化。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 蛋白质溶液（如鸡蛋清、牛血清白蛋白等）- 透析袋（孔径约为10kD）- 缓冲液（pH 7.4，0.1M Tris-HCl）- 离心机- 烧杯- 移液器- 恒温水浴锅- 紫外-可见分光光度计2. 实验仪器：- 透析袋- 移液器- 烧杯- 离心机- 恒温水浴锅- 紫外-可见分光光度计四、实验步骤1. 准备透析袋：将透析袋放入烧杯中，用蒸馏水冲洗干净，然后用缓冲液浸泡，以去除透析袋内的杂质。
2. 配制蛋白质溶液：取适量蛋白质溶液，用缓冲液稀释至一定浓度。
3. 透析：将配制好的蛋白质溶液转移至透析袋中，然后将透析袋放入另一装有缓冲液的烧杯中，确保透析袋完全浸没在缓冲液中。
4. 更换透析液：每隔一段时间，更换烧杯中的缓冲液，直至透析袋内溶液的颜色基本不变。
5. 收集透析后的蛋白质溶液：将透析袋内的蛋白质溶液收集至离心管中，离心去除透析袋。
6. 蛋白质浓度测定：取一定量的透析后的蛋白质溶液，用紫外-可见分光光度计测定其浓度。
7. 结果分析：对比透析前后的蛋白质浓度，评估透析纯化蛋白质的效果。
五、实验结果与分析1. 透析前蛋白质浓度为1.0mg/mL，透析后蛋白质浓度为0.8mg/mL。
2. 透析过程中，蛋白质溶液颜色逐渐变浅，说明杂质被去除。
3. 透析后的蛋白质溶液经过离心后，无明显沉淀，说明蛋白质未发生变性。
六、实验结论通过本实验，我们成功地将蛋白质溶液中的杂质去除，实现了蛋白质的纯化。
透析法是一种简单、有效的蛋白质纯化方法，适用于分离和纯化分子量较大的蛋白质。
中药透析实验报告
一、实验目的1. 掌握中药透析的基本原理和方法。
2. 了解中药透析在中药制剂中的应用。
3. 分析中药透析对中药成分的影响。
二、实验原理中药透析是利用半透膜的选择透过性，将中药中的有效成分与杂质分离的一种方法。
半透膜允许小分子物质通过，而阻止大分子物质通过，从而实现分离纯化。
本实验采用聚砜膜作为半透膜，透析液为蒸馏水。
三、实验材料1. 药材：黄连、黄芩、黄柏、黄连素、黄芩苷、小檗碱等。
2. 试剂：聚砜膜、蒸馏水、盐酸、氢氧化钠等。
3. 仪器：透析袋、磁力搅拌器、电子天平、pH计、紫外-可见分光光度计等。
四、实验方法1. 制备中药水提液：将黄连、黄芩、黄柏等药材按一定比例混合，加水煎煮，过滤，浓缩至一定体积，得到中药水提液。
2. 配制透析液：将蒸馏水用盐酸调节pH至6.8，备用。
3. 设置透析实验：将中药水提液加入透析袋中，放入盛有透析液的烧杯中，磁力搅拌，保持一定温度。
4. 收集透析液：定时更换透析液，收集透析液。
5. 分析透析液：采用紫外-可见分光光度计测定透析液中黄连素、黄芩苷、小檗碱等成分的含量。
五、实验结果1. 透析液与原中药水提液比较：透析液中的黄连素、黄芩苷、小檗碱等成分含量明显降低，说明透析实验有效。
2. 透析液成分分析：透析液中黄连素、黄芩苷、小檗碱等成分含量与原中药水提液相比，含量差异显著。
3. 透析液pH变化：在透析过程中，透析液pH逐渐降低，说明透析液中有酸性物质。
六、实验分析1. 透析实验对中药成分的影响：透析实验可以有效去除中药中的杂质，提高中药制剂的纯度。
2. 透析液pH变化原因：在透析过程中，中药中的酸性物质进入透析液，导致透析液pH降低。
3. 透析液成分分析结果：透析液中的黄连素、黄芩苷、小檗碱等成分含量降低，说明透析实验对中药成分有一定影响。
七、实验结论1. 本实验采用中药透析方法，有效分离了中药中的有效成分与杂质。
2. 透析实验对中药成分有一定影响，但可通过优化实验条件降低影响。
透析袋使用前如何处理
透析袋使用前如何处理透析袋是透析治疗过程中不可或缺的设备，在使用前需要进行一系列的处理措施，以确保其安全和有效性。
下面将详细介绍透析袋使用前的处理步骤。
1.检查透析袋的包装和外观。
在使用透析袋之前，首先需要检查其包装是否完好无损，并查看外观是否有明显的破损或污染。
如果发现袋子被损坏或污染，应立即更换新的袋子。
2.检查透析袋的有效期。
每个透析袋都有一定的有效期限，使用前应确认透析袋是否在有效期内。
过期的透析袋可能会导致治疗效果不佳或产生不良反应。
3.消毒双手和操作区域。
在开始处理透析袋之前，需要彻底洗手并消毒双手和操作区域，以避免引入细菌或其他病原体。
4.打开透析袋的包装。
将透析袋放在干净的工作台上，然后撕开包装。
在打开包装时应尽量避免触碰内层透析袋的表面，以防止袋子被污染。
5.检查透析袋的封口。
仔细检查透析袋的封口是否完好，并确保没有明显的泄漏或破损。
如发现问题，应立即更换新的袋子。
6.清洁透析袋的连接部位。
透析袋的连接部位是与透析机器相连接的部分，需要确保其干净和无污染。
可以使用消毒酒精或其他适当的清洁剂擦拭连接部位，然后用无菌纱布擦干。
8.检查透析袋的气体泄漏和渗漏。
在连接透析袋到透析机器之前，可以通过轻轻按压透析袋来检查是否有气体泄漏。
此外，还可以通过检查透析袋表面是否有潮湿或药液渗漏来确定袋子是否完好。
9.连接透析袋到透析机器。
根据透析机器的使用说明，将透析袋正确连接到机器上，并确保连接处紧密且无泄漏。
在连接完成后，再次检查连接处是否牢固。
10.验证透析袋的压力和温度。
在开始透析治疗之前，需要验证透析袋中的液体是否具有正确的压力和温度。
透析袋的压力和温度应符合医生或透析治疗师的建议。
综上所述，透析袋使用前的处理步骤非常重要，可以确保透析治疗的安全和有效性。
正确处理透析袋可以避免袋子污染和损坏，同时也可以减少不必要的风险。
在使用透析袋前，请务必严格按照上述步骤进行处理，以保障患者的健康和治疗效果。
知识剖析
血红蛋白的提取和分离【基础知识】蛋白质分离和提取的原理：根据蛋白质各种特性、的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等等来分离不同种类的蛋白质。
（一）凝胶色谱法1、概念：也称分配色谱法，是根据被分离的蛋白质相对分子质量的大小，利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用，来进行分离蛋白质的有效方法。
2、大多数凝胶是由多糖类化合物（如葡聚糖或琼脂糖）构成的多孔小球体。
3、具体过程：当不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢，而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快，相对分子质量不同的蛋白质因此得以分离。
（二）缓冲溶液1、概念：在一定的范围内，能对抗外来少量强酸、强碱或稍加稀释不引起溶液pH发生明显变化的作用叫做缓冲作用，具有缓冲作用的溶液叫做缓冲溶液。
2、作用：能够抵制外界的酸和碱对溶液的pH的影响，维持pH基本不变。
3、缓冲溶液的配制:通常由1—2种缓冲剂溶解于水中配制而成。
调节缓冲剂的使用比例就可以制得在不同pH范围内使用的缓冲液。
（三）电泳1、概念：带电粒子在电场作用下发生迁移的过程。
2、原理：电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小，形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。
3、分类：琼脂糖凝胶电泳和聚丙稀酰胺凝胶电泳。
（1）蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它所带静电荷的多少以及分子的大小等。
（2）为了消除静电荷对迁移率的影响可以在凝胶中加入SDS。
SDS能使蛋白质发生完全变性。
由几条肽链组成的蛋白质复合体在SDS的作用下会解聚成单条肽链，因此测定的结果只是单条肽链的分子量。
（3）SDS与各种蛋白质形成蛋白质—SDS复合物，SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有电荷量。
因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别，使电泳迁移率完全取决于分子大小。
糖类的透析实验报告
实验日期：2023年X月X日实验地点：化学实验室实验目的：1. 了解透析的基本原理及其在分离混合物中的应用。
2. 掌握透析实验的操作步骤和注意事项。
3. 通过实验观察糖类分子在不同浓度溶液中的透过情况，分析其分子大小。
实验原理：透析是一种利用半透膜选择性透过小分子物质而阻止大分子物质通过的方法。
半透膜具有选择性，只能让小分子物质（如糖类）通过，而阻止大分子物质（如蛋白质、DNA等）的通过。
本实验中，我们通过透析实验观察不同分子大小的糖类（如葡萄糖、蔗糖）在透析过程中的透过情况，以此来分析其分子大小。
实验材料：1. 葡萄糖（分子量180）2. 蔗糖（分子量342）3. 透析袋（半透膜）4. 生理盐水5. 离心管6. 电子天平7. 移液器8. 恒温水浴锅实验步骤：1. 准备透析袋：将透析袋放入装有生理盐水的离心管中，浸泡30分钟，使透析袋充分浸润。
2. 配制溶液：取一定量的葡萄糖和蔗糖，分别溶解于生理盐水中，配制成一定浓度的溶液。
3. 装液：将配制好的葡萄糖溶液和蔗糖溶液分别装入透析袋中，并确保透析袋内液面高于离心管液面。
4. 透析：将装有透析袋的离心管放入恒温水浴锅中，保持温度恒定，进行透析实验。
5. 采样：在透析过程中，定时用移液器从离心管中取出一定量的透析液，用电子天平称量其质量，并记录数据。
6. 结果分析：根据采样数据，绘制葡萄糖和蔗糖在不同透析时间内的透过曲线，分析其分子大小。
实验结果：1. 葡萄糖的透过曲线显示，在透析过程中，葡萄糖的透过量随着时间逐渐增加，说明葡萄糖分子能够透过透析袋。
2. 蔗糖的透过曲线显示，在透析过程中，蔗糖的透过量随着时间几乎没有变化，说明蔗糖分子不能透过透析袋。
结论：1. 通过本实验，我们了解了透析的基本原理及其在分离混合物中的应用。
2. 实验结果表明，葡萄糖分子能够透过透析袋，而蔗糖分子不能透过透析袋。
这表明葡萄糖分子比蔗糖分子小，符合分子大小与透过性之间的关系。
DEAE Sephadex A-50使用说明
DEAE-Sephadex A-50柱层析纯化免疫球蛋白原理试剂和器材操作步骤注意事项(一) 原理DEAE-SephadexA-50(二乙基氨基乙基-葡聚糖A-50)为弱碱性阴离子交换剂。
用NaOH将CL-型转变为OH-型后，可吸附酸性蛋白。
血清中的γ球蛋白属于中性蛋白(等电点为PH6.85～7.5)，其余均属酸性蛋白。
在PH7.2～7.4的环境中，酸性蛋白均被DEAE-Sephadex A-50吸附，只有γ球蛋白不被吸附。
因此，通过柱层析γ球蛋白便可在洗脱中先流出,而其他蛋白则被吸附在柱上,从而便可分离获得纯化的IgG。
DEAE-sephadexA-50柱层析是离子交换层析的一种。
(二)试剂和器材1、试剂:(1)盐析提取的人γ球蛋白；(2)0.5N NaOH，0.5N HCl 2M NaCl，10％NaN3；(3)DEAE-Sephadex A-50，聚乙二醇(PEG)；(4)0.1M, PH7.4 PB(配制见盐析部分)；2、器材:(1)层析玻璃柱(1.3×40cm)，滴定铁架，自由夹，螺旋夹，尼龙纱(200目)；(2)普通冰箱，751桮型紫外分光光度计，电导仪、抽滤装置(包括抽气机、干燥瓶、布氏漏斗、橡皮垫圈、抽滤瓶)，PH计；(3)透析袋、座标纸、滤纸、PH精密试纸；(4)量筒、烧杯、试管、吸管、滴管、灭菌小瓶等。
(三) 操作步骤1、DEAE-Sephadex A-50预处理称DEAE-Sephadex A-50(下称A-50)5克，悬于500ml蒸馏水，1小时后倾去上层细粒。
按每克A-50加0.5N NaOH 15ml的比例，将A-50浸泡于0.5N NaOH中，搅匀，静置30分钟，装入布氏漏斗(垫有2层滤纸)中抽滤，并反复用蒸馏水抽洗至PH呈中性；再以0.5N HCl同上操作过程处理，最后以0.5N NaOH再处理一次。
处理完后，将A-50浸泡于0.1M，PH 7.4 PB 中过夜。
Elisa实验药品步骤及相关材料
本实验室Elisa所需试剂器材1.试剂(1)包被缓冲液碳酸盐缓冲液(PH9.6 0.05M)：Na2CO3 1.59gNaHCO3 2.93g加蒸馏水至1000ml作用：稀释抗原（菌悬浮液）(2)洗涤缓冲液PBST (PH7.4 0.15M)：KH2PO40.2gNa2HPO4·12H2O 2.9gNaCl8.0gKCl0.2gTween-200.05％0.5ml加蒸馏水至1000ml作用：洗涤(3)缓冲液PBS (PH7.4 0.15M)：KH2PO40.2gNa2HPO4·12H2O 2.9gNaCl8.0gKCl0.2g加蒸馏水至1000ml作用：制备封闭液(4)封闭液：牛血清白蛋白(BSA) 0.1g，加缓冲液（PBS）至100ml或PBS加2％BSA 作用：封闭空隙(5) 稀释液：PBST加1％牛血清白蛋白(BSA)作用：稀释抗体及酶标抗体(5)HRP羊抗兔IgG一酶标抗体作用：结合抗体(6)底物缓冲液磷酸盐柠檬酸(PH5.5):0.2M Na2HPO4(28.4g/L) 25.7ml0.1M 柠檬酸(19.2g/L)24.3ml蒸馏水50ml作用：制备TMB(7)TMB(四甲基联苯胺)使用液:TMB(10mg/5ml无水乙醇) 0.5ml底物缓冲液(PH5.5)10ml0.75％H2O232μl作用：显色(8)终止液(2M H2SO4）：蒸馏水178.3ml，逐滴加入浓硫酸(98％)21.7ml作用：终止反应2.器材:聚苯乙烯塑料板(酶标板)96孔抗原制备：以平板划线法将供试菌菌接种于普通营养琼琼脂培养基上，28 ℃培养24 h 后，挑取单菌落接种于LB液体培养基中，过夜培养；5 000 r·min-1离心10 min，弃上清；加入1%的甲醛于37 ℃灭活24 h，通过菌落涂布法检测灭活效果；5 000 r·min-1离心10 min，弃上清，用麦氏比浊法，配制出浓度约为1×109 cells·mL-1的菌悬液作为免疫抗原。
蛋白表达纯化实验步骤
蛋白表达纯化实验步骤〔待改良〕1、取适当相应蛋白高表达的动物组织提total-RNA。
2、设计蛋白表达引物。
引物要去除信号肽，要加上适当的酶切位点和保护碱基。
3、RT-PCR，KOD酶扩增获取目的基因cDNA.4、双酶切，将cDNA.克隆入PET28/32等表达载体。
5、转化到DH5α感受态细菌中扩增，提质粒。
6、将质粒转化入表达菌株，挑菌检测并保种。
表达菌株如Bl21〔DE3〕、Rosetta gami〔DE3〕、Bl21 codon〔DE3〕等。
7、蛋白的诱导表达。
1）将表达菌株在3ml LB培养基中摇至OD=0.6左右，参加IPTG，浓度梯度从25μM到1m M。
37度诱导过夜(一般3h以上即有大量表达)。
2）SDS-PAGE电泳检测目的蛋白的表达。
注：目的蛋白包涵体表达量一般会到达菌体蛋白的50%以上，在胶上可以看到明显的粗大的条带。
3）将有表达的菌株10%甘油保种，保存1ml左右就足够了，并记录IPTG浓度范围。
甘油是用0.22μm过滤除菌的，储存浓度一般是30%-60%，使用时自己计算用量。
4）用上述IPTG浓度范围的最低值诱导10ml表达菌，18度，低转速〔140-180rpm〕，诱导过夜作为包涵体检测样品。
注意：1.如果表达的蛋白对菌体有毒性，可以在加IPTG之前的培养基中参加1%的葡萄糖用来抑制本底表达。
葡萄糖会随着细菌的繁殖消耗殆尽，不会影响后面的表达。
2.保种可以取一局部分成50μl一管，每次用一管，防止反复冻融。
8、包涵体检测。
方案见附件29、如有上清表达，那么扩大摇菌。
1）取保种的表达菌株先摇10ml，37度，300rpm摇至OD>=1.5，约5h左右，视菌种的活性而异，也可过夜摇菌。
2）将上一步中的8ml参加300ml培养基中37度，250rpm摇至OD= 1.0左右〔约2.5h~3h〕，然后加IPTG〔浓度同包涵体检测中使用的浓度。
〕注：菌液浓度要适当的浓一些，否那么第二天收集不到足够的菌体，因为低温低转速细菌生长非常缓慢。
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透析袋使用说明
自Thomas Graham1861年发明透析方法至今已有一百多年。
透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。
在生物大分子的制备过程中，除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。
1技术指标
MWCO（截留分子量），单位：Diatoms。
透析时，小于MWCO的分子在透析膜二边溶液浓度差产生的扩散压作用下渗过透析膜，其速度与浓度梯度、膜面积及温度成正比。
欲快速透析可采用直径较小的透析袋以增加膜面积。
常用温度：4℃，升温、更换袋外透析液或用磁力搅拌器，均能提高透析速度。
2使用须知
某些化学物质会破坏透析袋微孔且不可逆转。
计有：烃、卤化烃、醇、酮、酯、胺、丙酮、甲基乙基酮、二氧杂环乙烷、环已烷等。
酸（甲酸、乙酸、稀强酸如5%HCI），10%苯酚，30%双氧水。
甲醇、乙醇：浓度小于5%时，透析功能在，而MWCO变化。
2.1前处理
为防干裂，出厂时都用10％的甘油处理过，并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质，它们对蛋白质和其它生物活性物质有害，用前必须除去。
2.1.1方法一
将透析袋剪成适当长度（10-20cm）的小段。
在NaHCO3-EDTA处理液中煮沸10min后用蒸馏水彻底清洗干净，然后在EDTA处理液煮沸10min。
冷却后，置于30％乙醇中，放于4℃冰箱，必须确保透析袋始终浸没在溶液内。
使用前戴手套取用透析袋并用蒸馏水将透析袋内外清洗干净。
[1]
2.2.2方法二
将透析袋剪成适当长度（10-20cm）的小段，沸水煮5至10分钟，再用蒸馏[1]乙二胺四乙酸二钠（EDTA）0.2mol/L储备液
称取7.4448g乙二胺四乙酸二钠，少量蒸馏水溶解，转至100mL容量瓶中，摇匀并定容。
EDTA处理液（1mmol/L pH8.0）
取2.5mL EDTA储备液，加蒸馏水并用1mol/LNaOH调节pH为8.0，定容至500mL。
NaHCO3-EDTA处理液
称取4.0g碳酸氢钠至200mLEDTA处理液中，配制成（2%）NaHCO3-（pH值8.01mmol/L）EDTA处理液。
水洗净，即可使用。
2.2.3方法三
先用50％乙醇煮沸1小时，再依次用50％乙醇、0.01mol/L碳酸氢钠和1 mmol/L EDTA（pH=8.0）溶液洗涤，最后用蒸馏水冲洗即可使用。
2.2使用方法
使用时，一端用橡皮筋或线绳扎紧，也可以使用特制的透析袋夹夹紧，由另一端灌满水，用手指稍加压，检查不漏，方可装入待透析液，通常要留三分之一至一半的空间，以防透析过程中，透析的小分子量较大时，袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。
含盐量很高的蛋白质溶液透析过夜时，体积增加50％是正常的。
为了加快透析速度，除多次更换透析液外，还可使用磁子搅拌。
透析的容器要大一些，可以使用大烧杯、大量筒和塑料桶。
小量体积溶液的透析，可在袋内放一截两头烧园的玻璃棒或两端封口的玻璃管，以使透析袋沉入液面以下。
2.3透析袋保存
（1）用生理盐水浸泡以去掉蛋白，并用蒸馏水清洗干净，然后置于50％乙醇中保存即可。
（2）用完以后，要彻底洗干净，透析袋也可以保存在0.1%叠氮钠（可防止微生物生长）里；0.05%-0.1%叠氮钠，或者1mmol/L EDTA，或者50％甘油中4度保存（前2种方法更佳）
（3）使用后的透析袋洗净后可存于4℃蒸馏水或者30%乙醇中，确保透析袋始终浸没在溶液内。
若长时间不用，可加少量NaN2，以防长菌。
2.4检查透析效果的方法
用1％BaCl2检查(NH4)2SO4，用1％AgNO3检查NaCl、KCl等。
即用型透析袋毋须前处理，使用前用蒸馏水洗净即可。
使用时须戴手套。