透析袋使用前如何处理

透析袋在使用前如何处理

透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。在生物大分子的制备过程中，除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。

透析只需要使用专用的半透膜即可完成。通常是将半透膜制成袋状，

将生物大分子样品溶液置入袋内，将此透析袋浸入水或缓冲液中，样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内，而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外，直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”，袋（膜）外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。

透析的动力是扩散压，扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度，正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边

的浓度梯度，还正比于膜的面积和温度，通常是4℃透析，升高温度可加快透析速度。

透析膜可用动物膜和玻璃纸等，但用的最多的还是用纤维素（再生纤维素RC、纤维素酯CE、PVDF等）制成的透析膜，目前常用的是美国美国光谱医学公司（spectrum，上海欧韦达仪器科技有限公司是中华区特约总经销）和美国Union Carbide （联合碳化物公司，上海欧韦达仪器科技有限公司是华东区特约经销商）生产的各种尺寸的透析管，截留分子量MwCO（即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量，

缩写为MwCO）大概有100、500、1000、2000、3500、8000、10000、15000、20000、25000、50000、100000、250000、500000、1000000等种类，单位为道尔顿（D）。

商品透析袋制成管状，其扁平宽度为8 mm～77 mm不等。为防干裂，出厂时都用10％的甘油处理过，并含有极微量的硫化物、重金属和

一些具有紫外吸收的杂质，它们对蛋白质和其它生物活性物质有害，

用前必须除去。

透析膜可用动物膜和玻璃纸等，但用的最多的还是用纤维素制成的透

析膜，目前常用的是美国Union Carbide （联合碳化物公司）和美

国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管，截留分子量MwCO（即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量）通常为1万左右。

截留分子量越大也就是说透过性越大，一般而言，透析袋截留分子量越小价格越贵，因为截留的分子越小要求透析袋越密，价格越贵。

透析袋使用前处理：

1. 把透析袋剪成适当长度（10-20cm）的小段。

2. 在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟。

3. 用蒸馏水彻底清洗透析袋。

4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟。前处理也可

以将透析袋放在广口瓶中充满水，松动瓶盖，于20psi（1.40kg/cm2)高压灭菌10min，代替第四步用1mmol/LEDTA(PH=8)中煮沸10min的操作。

5. 冷却后，存放于4度，必须确保透析袋始终浸没在溶液内。若长

时间不用，可加少量叠氮钠NaN2，以防长菌。从此时起取用透析袋是必须戴手套。

6. 用前在透析袋内装满水然后排出，将之清洗干净。洗净凉干的透

析袋弯折时易裂口，用时必须仔细检查，不漏时方可重复使用。

这样做可以保证透析袋有良好的透析效果。

7.新透析袋如不作如上的特殊处理，则可用沸水煮五至十分钟，再用蒸馏水洗净，即可使用。

8.佰易聚商城技术说：透析袋不推荐反复使用，如果要反复使用就是用之前怎么处理的，用后也怎么处理。

9.透析袋要看你购买的是可再生的还是一次性的。即使是可再生的也请使用于同种蛋白，避免交叉污染。

10.短时间内再次使用的话，可用去离子水洗净后，浸泡于20%乙醇溶液中，使用时务必将乙醇洗净。

11.使用后的透析袋保存方法：.用生理盐水浸泡以去掉蛋白，并用蒸馏水清洗干净，然后置于50％乙醇中保存即可

美国美国光谱医学公司生产的透析袋大部分是预处理过的，即用型，

使用前只需用蒸馏水冲洗即可使用，spectra/por7系列和生物技术

级的透析袋基本不含硫化物和重金属离子。

使用时，一端用橡皮筋或线绳扎紧，也可以使用特制的透析袋夹夹紧，由另一端灌满水，用手指稍加压，检查不漏，方可装入待透析液，通

常要留三分之一至一半的空间，以防透析过程中，透析的小分子量较大时，袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。含盐量很高的蛋白质溶液透析过夜时，体积增加50％是正常的。为了加快透析速度，

除多次更换透析液外，还可使用磁子搅拌。透析的容器要大一些，可以使用大烧杯、大量筒和塑料桶。小量体积溶液的透析，可在袋内放一截两头烧园的玻璃棒或两端封口的玻璃管，以使透析袋沉入液面以下。

检查透析效果的方法是：用1％ BaCl2检查(NH4)2SO4，用1％ AgNO3 检查NaCl、KCl等。

透析纳米颗粒带有机溶剂的，如何处理透析袋重复使用？先看是美国

光谱医学的还是美国联合碳化的透析袋？美国公司的方法都不一样

的。大多数先用50％乙醇煮沸1小时，再依次用50％乙醇、0.01 mol/L 碳酸氢钠和0.001 mol/L EDTA溶液洗涤，最后用蒸馏水冲洗即可使用。实验证明，50％乙醇处理对除去具有紫外吸收的杂质特别有效。

透析膜 (前处理方法如下)：

1. 戴手套把透析膜剪成适当长度，浸在蒸馏水中 15 min 泡软。

2. 浸入 10 mM sodium bicarbonate 中，并加热至 80℃，一边搅拌至少 30 min。

3. 换到10 mM Na2·EDTA 中浸泡 30 min，以新鲜的 EDTA 同样方法处理三次。

4. 再用 80℃蒸馏水洗 30 min，然后换到 20% 酒精中，放在 4℃冰箱中保存。

透析是利用半透膜的选择性在溶液里分离大分子和小分子的一种分

离技术，常常用于除去蛋白或核酸样品中的盐、变性剂、还原剂之类的小分子杂质，有时也用于置换样品缓冲液。样品在膜的一边，缓冲液在另一边，小分子即向两边扩散直到平衡透析是利用半透膜的选择

性在溶液里分离大分子和小分子的一种分离技术，常常用于除去蛋白或核酸样品中的盐、变性剂、还原剂之类的小分子杂质，有时也用于置换样品缓冲液。样品在膜的一边，缓冲液在另一边，小分子即向两边扩散直到平衡,而大分子则由于半透膜的阻拦而留在一端，通过不

断更换缓冲液，即可将样品中要除掉的小分子稀释到足够低的浓度。

该技术自五十年代发展流行起来，主要使用半透膜制成的透析袋作为工具，一直存在透析时间长、样品回收率不高、无法处理微量样品的难题。如今Pierce公司推出三种不同的透析工具有效解决了部分问题.

这是专为10到100微升的微量样品透析而设计的。把样品加在平底