透析袋使用说明
透析袋使用前如何处理
透析袋使用前如何处理透析袋是透析治疗过程中不可或缺的设备,在使用前需要进行一系列的处理措施,以确保其安全和有效性。
下面将详细介绍透析袋使用前的处理步骤。
1.检查透析袋的包装和外观。
在使用透析袋之前,首先需要检查其包装是否完好无损,并查看外观是否有明显的破损或污染。
如果发现袋子被损坏或污染,应立即更换新的袋子。
2.检查透析袋的有效期。
每个透析袋都有一定的有效期限,使用前应确认透析袋是否在有效期内。
过期的透析袋可能会导致治疗效果不佳或产生不良反应。
3.消毒双手和操作区域。
在开始处理透析袋之前,需要彻底洗手并消毒双手和操作区域,以避免引入细菌或其他病原体。
4.打开透析袋的包装。
将透析袋放在干净的工作台上,然后撕开包装。
在打开包装时应尽量避免触碰内层透析袋的表面,以防止袋子被污染。
5.检查透析袋的封口。
仔细检查透析袋的封口是否完好,并确保没有明显的泄漏或破损。
如发现问题,应立即更换新的袋子。
6.清洁透析袋的连接部位。
透析袋的连接部位是与透析机器相连接的部分,需要确保其干净和无污染。
可以使用消毒酒精或其他适当的清洁剂擦拭连接部位,然后用无菌纱布擦干。
8.检查透析袋的气体泄漏和渗漏。
在连接透析袋到透析机器之前,可以通过轻轻按压透析袋来检查是否有气体泄漏。
此外,还可以通过检查透析袋表面是否有潮湿或药液渗漏来确定袋子是否完好。
9.连接透析袋到透析机器。
根据透析机器的使用说明,将透析袋正确连接到机器上,并确保连接处紧密且无泄漏。
在连接完成后,再次检查连接处是否牢固。
10.验证透析袋的压力和温度。
在开始透析治疗之前,需要验证透析袋中的液体是否具有正确的压力和温度。
透析袋的压力和温度应符合医生或透析治疗师的建议。
综上所述,透析袋使用前的处理步骤非常重要,可以确保透析治疗的安全和有效性。
正确处理透析袋可以避免袋子污染和损坏,同时也可以减少不必要的风险。
在使用透析袋前,请务必严格按照上述步骤进行处理,以保障患者的健康和治疗效果。
透析袋使用说明及注意事项
用到透析的技术。
透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
纤维素酯CE、PVDF等)制成的透析膜,目前常用的是美国美国光谱医学公司(spectr um,上海欧韦达仪器科技有限公司是中华区特约总经销)和美国Uni on Carbid e (联合碳化物公司,上海欧韦达仪器科技有限公司是华东区特约经销商)最小分子量,缩写为MwC O)大概有100、500、1000、2000、3500、8000、10000、15000、20000、25000、50000、100000、250000、500000、1000000等种类,单位为道尔顿(D)。
商品透析袋制成管状,其扁平宽度为8 mm~77 mm不等。
为防干裂,出厂的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
1.将透析管剪成适当长度(10-20cm)的小段,即成透析袋。
10mi n。
3.将透析袋用蒸馏水彻底漂洗。
4.将透析袋置1mmol/LEDTA(PH=8)中煮沸10m in。
5.透析袋冷却后存放于4度,应确保透析袋始终浸没在液体中。
注:从此步起用透析袋时一定要戴手套操作。
6.在使用之前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗。
蛋白质透析的实验报告
一、实验目的1. 了解蛋白质透析的原理和方法。
2. 掌握透析袋的使用和操作技巧。
3. 学习如何通过透析分离蛋白质混合物。
二、实验原理蛋白质透析是一种利用半透膜的选择透过性来分离和纯化蛋白质的方法。
半透膜允许小分子物质(如盐、小分子有机物)自由通过,而大分子物质(如蛋白质)则被阻挡在膜的一侧。
通过改变透析袋内外的离子浓度,可以调节蛋白质的溶解度,从而实现蛋白质的分离。
三、实验材料与试剂1. 实验材料:透析袋、磁力搅拌器、剪刀、移液枪、试管、烧杯、蒸馏水、氯化钠、鸡蛋清等。
2. 实验试剂:0.1M氯化钠溶液、0.01M氯化钠溶液、蒸馏水、10%硫酸铵溶液等。
四、实验步骤1. 准备透析袋:将透析袋剪成适当大小,用蒸馏水冲洗干净,晾干备用。
2. 配制蛋白质溶液:将鸡蛋清用移液枪吸取一定量,加入适量蒸馏水,搅拌均匀。
3. 透析袋预处理:将透析袋浸入0.1M氯化钠溶液中,浸泡30分钟,以去除透析袋中的杂质。
4. 透析操作:将预处理好的透析袋放入烧杯中,加入10%硫酸铵溶液,搅拌均匀。
将配制好的蛋白质溶液用移液枪加入透析袋中,确保蛋白质溶液充满透析袋。
5. 透析过程:将透析袋放入烧杯中,加入适量蒸馏水,使透析袋悬浮在水中。
用磁力搅拌器缓慢搅拌,保持透析袋内外液体充分接触。
6. 透析时间:根据实验需求,选择适当的透析时间。
一般透析时间为4-8小时。
7. 检测透析效果:在透析过程中,定时取样,用比色法检测透析袋内外的蛋白质浓度,以评估透析效果。
8. 透析结束:透析结束后,将透析袋内的蛋白质溶液倒入试管中,用比色法检测蛋白质浓度。
五、实验结果与分析1. 透析过程中,透析袋内外的蛋白质浓度逐渐降低,说明蛋白质通过透析膜逐渐进入蒸馏水中。
2. 透析结束后,透析袋内的蛋白质浓度与透析前的蛋白质浓度相比,有显著降低,说明透析过程有效分离了蛋白质。
3. 比色法检测结果显示,透析后的蛋白质溶液中蛋白质浓度较低,说明透析过程实现了蛋白质的分离。
透析袋 量子点-概述说明以及解释
透析袋量子点-概述说明以及解释1.引言1.1 概述透析袋和量子点是两种在生物科学和纳米技术领域具有重要应用价值的材料。
透析袋是一种用于分离和纯化生物分子的薄膜袋,常用于生物分子的富集和浓缩。
量子点是一种具有特殊电学和光学性质的纳米颗粒,常被用于标记和追踪生物分子在细胞中的运动和相互作用。
本文将探讨透析袋和量子点的原理、特性以及它们结合应用的潜在优势,旨在全面了解这两种材料在生物领域的重要性和未来发展趋势。
1.2 文章结构文章结构部分是要概述整篇文章的框架和内容安排,让读者对全文有一个整体的把握。
在本篇文章中,我们将首先介绍透析袋和量子点的基本概念和原理,包括透析袋的作用和应用范围,以及量子点在材料科学和生物医学领域中的特性和应用。
接着,我们将探讨透析袋与量子点的结合应用,分析它们在科学研究和实际应用中的潜力和优势。
最后,我们将总结透析袋和量子点在科学和技术领域的重要性,展望它们未来的发展方向,以及对读者的一些启发和思考。
通过对透析袋和量子点的介绍和分析,我们希望读者能够更加深入地了解这两种材料的特性和应用,同时也能够启发读者对未来科学技术发展的思考和探索。
愿本篇文章能为读者带来启示和帮助,让我们一起探索透析袋和量子点在未来的发展之路。
1.3 目的目的部分的内容:本文的目的是探讨透析袋与量子点在生物医学领域中的应用,分析透析袋和量子点的原理和特性,并探讨它们结合应用的潜在优势。
通过对这两种材料的深入了解和研究,我们可以更好地认识它们在生物医学领域中的作用,为未来的研究和发展提供参考和指导。
希望通过本文的介绍,读者能够对透析袋和量子点有一个全面的了解,并认识到它们在医学领域中的重要性和潜力。
2.正文2.1 透析袋的原理透析袋是一种生物学实验中常用的实验工具,它的工作原理是利用半透膜的特性来分离和纯化生物分子。
透析袋通常由人工合成的半透膜材料制成,这种膜具有选择性透过性,可以通过分子大小和分子电荷来筛选分子。
腺病毒包装操作手册
汉恒重组腺病毒操作手册目录腺病毒安全使用和注意事项腺病毒储存与稀释的注意事项一、整体实验流程二、实验材料三、腺病毒包装和浓缩四、重组腺病毒滴度(PFU)的测定五、重组腺病毒感染目的细胞六、重组腺病毒用于动物实验附1:汉恒生物腺病毒载体附2:腺病毒感染细胞最佳MOI的摸索(表达荧光的病毒) 附3:汉恒生物常见三种病毒感染目的细胞比较腺病毒安全使用和注意事项➢腺病毒安全使用注意事项(*非常重要*)1) 腺病毒相关实验请在生物安全柜(BL-2级别)内操作。
2) 操作病毒时请穿实验服,佩戴口罩和手套,尽量不要裸露双手及手臂的皮肤。
3) 操作病毒时需要特别小心病毒溅出。
如果操作时超净工作台有病毒污染,请立即用70%乙醇加 1%的SDS溶液擦拭干净。
4) 接触过病毒的枪头、离心管、培养板及培养瓶请用84消毒液浸泡后统一处理。
5) 如实验过程中需要离心,应使用密封性好的离心管,必要时请用封口膜封口后离心。
6) 病毒相关的废弃物需要特殊收集,统一经高温灭菌后处理。
7) 实验完毕后请用香皂清洗双手。
➢腺病毒储存与稀释的注意事项1)腺病毒的储存收到病毒液后若在短期内使用,可将病毒放置于 4℃保存(一周内使用完最佳);如需长期保存请分装后放置于 -80 ℃ 。
注:a.反复冻融会降低病毒滴度(每次冻融会使病毒滴度降低10%~50%),因此在病毒使用过程中尽量避免反复冻融。
汉恒生物对病毒已进行分装(200 μl/tube),收到后请直接放置-80℃冰箱保存即可。
b.若病毒储存时间超过6个月,汉恒生物建议在使用前重新测定病毒滴度(参见附表2-慢病毒滴度测定方法)。
2)腺病毒的稀释需要稀释病毒时,请将病毒取出置于冰浴融解后,使用PBS或培养目的细胞用的无血清培养基(含血清或含双抗不影响病毒感染)混匀分装后置于 4℃保存(一周内使用完最佳)。
重组腺病毒是一种复制缺陷的腺病毒载体系统,在基因治疗、基础生命科学研究等领域被广泛应用。
中药透析实验报告
一、实验目的1. 掌握中药透析的基本原理和方法。
2. 了解中药透析在中药制剂中的应用。
3. 分析中药透析对中药成分的影响。
二、实验原理中药透析是利用半透膜的选择透过性,将中药中的有效成分与杂质分离的一种方法。
半透膜允许小分子物质通过,而阻止大分子物质通过,从而实现分离纯化。
本实验采用聚砜膜作为半透膜,透析液为蒸馏水。
三、实验材料1. 药材:黄连、黄芩、黄柏、黄连素、黄芩苷、小檗碱等。
2. 试剂:聚砜膜、蒸馏水、盐酸、氢氧化钠等。
3. 仪器:透析袋、磁力搅拌器、电子天平、pH计、紫外-可见分光光度计等。
四、实验方法1. 制备中药水提液:将黄连、黄芩、黄柏等药材按一定比例混合,加水煎煮,过滤,浓缩至一定体积,得到中药水提液。
2. 配制透析液:将蒸馏水用盐酸调节pH至6.8,备用。
3. 设置透析实验:将中药水提液加入透析袋中,放入盛有透析液的烧杯中,磁力搅拌,保持一定温度。
4. 收集透析液:定时更换透析液,收集透析液。
5. 分析透析液:采用紫外-可见分光光度计测定透析液中黄连素、黄芩苷、小檗碱等成分的含量。
五、实验结果1. 透析液与原中药水提液比较:透析液中的黄连素、黄芩苷、小檗碱等成分含量明显降低,说明透析实验有效。
2. 透析液成分分析:透析液中黄连素、黄芩苷、小檗碱等成分含量与原中药水提液相比,含量差异显著。
3. 透析液pH变化:在透析过程中,透析液pH逐渐降低,说明透析液中有酸性物质。
六、实验分析1. 透析实验对中药成分的影响:透析实验可以有效去除中药中的杂质,提高中药制剂的纯度。
2. 透析液pH变化原因:在透析过程中,中药中的酸性物质进入透析液,导致透析液pH降低。
3. 透析液成分分析结果:透析液中的黄连素、黄芩苷、小檗碱等成分含量降低,说明透析实验对中药成分有一定影响。
七、实验结论1. 本实验采用中药透析方法,有效分离了中药中的有效成分与杂质。
2. 透析实验对中药成分有一定影响,但可通过优化实验条件降低影响。
透析袋使用方法
透析袋前处理方法:方法一:1、把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段。
2、在大体积(500mL)的2%(W/V)的碳酸氢钠和1mmol/L EDTA.2Na (pH=8.0)中将透析袋煮沸10min。
3、用蒸馏水彻底清洗透析袋。
4、放在500mL的1 mmol/L EDTA.2Na (pH=8.0)中将之煮沸10min。
5、冷却后,置于30%或者50%的酒精中,放于4℃冰箱,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。
从此时起取用透析袋必须戴手套。
6、在使用前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗干净。
说明:透析液的配置:10g NaHCO3 + 186.6mg EDTA.2Na + 500mL蒸馏水1 mmol/L EDTA.2Na:即373.2mg/L方法二:可用沸水煮5至10分钟,再用蒸馏水洗净,即可使用。
方法三:可先用50%乙醇煮沸1小时,再依次用50%乙醇、0.01 mol/L碳酸氢钠和1 mmol/L EDTA (pH=8.0)溶液洗涤,最后用蒸馏水冲洗即可使用。
说明:1.EDTA煮主要是为了除去生产时附着在透析袋上的金属离子。
2.透析袋的截留分子量3000kd。
使用后的透析袋保存方法:1.用生理盐水浸泡以去掉蛋白,并用蒸馏水清洗干净,然后置于50%乙醇中保存即可;2.用完以后,要彻底洗干净,透析袋也可以保存在0.1%叠氮钠(可防止微生物生长)里;0.05%-0.1%叠氮钠,或者1mM EDTA,或者50%甘油中4度保存,公司的人建议前两种保存比较好!3.使用后的透析袋洗净后可存于4℃蒸馏水或者30%乙醇中,确保透析袋始终浸没在溶液内。
若长时间不用,可加少量NaN2,以防长菌。
从此时起取用透析袋必须戴手套。
洗净凉干的透析袋弯折时易裂口,用时必须仔细检查,不漏时方可重复使用。
透析膜前处理方法:1. 戴手套把透析膜剪成适当长度,浸在蒸馏水中15 min 泡软。
2. 浸入10 mM sodium bicarbonate 中,并加热至80℃,同时不断搅拌至少30 min。
透析袋说明
透析袋使用说明产品介绍一、高精度、即用型透析袋,使用前无需处理(生物级,去除了硫化物和重金属离子,保存于防腐液中)即用型透析袋的制造过程没有重金属污染及硫化物,无需预处理,只需用去离子水清洗即可使用,满足对截留分子量精确性和膜纯度的应用。
优点:1. 韧性膜材料,不易破损2. 杂质含量极少,可无需预处理,只需用去离子水清洗即可使用3. 孔径标准均一4. 对溶质的吸附性小5. 可选分子量范围广 100-3000006. 多种扁平宽度可选7. 特有生物技术膜,不含硫化物及金属杂质二、普通干型透析袋(美国联合碳化,甘油涂层,使用前需处理)技术参数:1. PH 稳定范围 : 5-92. 污染物水平: 硫化物<0.3%; 重金属<50ppm3. 化学兼容性: 与很多盐兼容,比如 CaCl2, (NH4)2SO4;还可与分子生物学及酶学中常用的水溶剂、有机溶剂兼容,比如异丙醇、乙醇和丙酮。
4. 温度抵抗性:可煮沸,可高压灭菌。
5. 蛋白吸附:每克透析袋吸附蛋白量小于 1ng。
干型透析袋使用前处理方法:1. 把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段。
2. 在大体积的 2%(W/V)碳酸氢钠和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸 10 分钟。
3. 用蒸馏水彻底清洗透析袋。
4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸 10 分钟。
5. 冷却后,存放于 4 度,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。
从此时起取用透析袋是必须戴手套。
6. 用前在透析袋内装满水然后排出,将之清洗干净。
实验要求不高的可以用简易处理方法:在沸水中煮 10min 即可使用。
透析袋的应用:去除盐类、表面活性剂和溶剂样品溶液的缓冲液置换和 PH 值的调节浓缩蛋白质、多肽和抗体 DNA 电洗脱电泳前稀释蛋白的制备小分子污染物清除结合研究组织培养的提取纯化透析袋的选择1.正确选择合适的截留分子量截留分子量的选择是以预留在膜内的大分子的分子量和将要被除去的小分子污染物的分子量为基础的。
仕必纯(Spectrumlabs)生物技术级透析膜操作说明
Spectra/Por®生物技术级透析膜纤维素酯(CE)再生纤维素(RC)产品信息和操作说明Spectra/Por®生物技术级纤维素酯膜和再生纤维素膜目录简介 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .2应用 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .2规格 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .3选择膜类型(纤维素酯和再生纤维素) . . . . . . . . . . . . . . . . .4截留分子量(MWCO) 和膜渗透性 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .5选择膜的截留分子量 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .6选择膜管的扁平宽度 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .7选择膜夹 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .7通用膜夹(尼龙) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .7 Spectra/Por®膜夹(聚丙烯) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .7灭菌 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .8膜准备与储藏 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .9使用说明 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .10膜化学相容性表格 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .12订购信息 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .14生物技术级纤维素酯膜管和试验包. . . . . . . . . . . . . . . . .14生物技术级再生纤维素膜管和试验包 . . . . . . . . . . . . . . . .14生物技术级纤维素酯即用型透析设备 . . . . . . . . . . . . .15 Float-A-Lyzer®G2 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .15 Micro Float-A-Lyzer® . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .16Spectra/Por®生物技术级膜是最新一代的透析膜。
(整理)腺病毒载体操作手册1407-R2
腺病毒载体操作手册一、实验流程制备腺病毒穿梭质粒,分别高纯度无内毒素抽提腺病毒穿梭质粒和骨架质粒,共转染293A细胞,转染后6h更换为完全培养基,培养十几天,在中间四五天左右更换一次新鲜培养基,然后收集细胞和1ml培液置于15ml离心管后,液氮/37度冻融三次(冻-融要彻底),2000rpm离心5分钟,取上清即为病毒液初代原液。
连续三代反复扩增收集病毒后,行病毒的大量扩增,然后通过CsCl密度梯度离心-透析联用法纯化病毒。
二、实验材料(一)腺病毒载体、包装细胞和菌株该病毒包装系统为两质粒系统,组成为穿梭质粒(包括pHBAd-CMV-IRES-GFP,pHBAd-CMV-IRES-RFP,pHBAd-U6-GFP, pHBAd-U6-RFP)和骨架质粒pBHGlox(delta)E1,3Cre。
其中穿梭质粒pHBAd-CMV-IRES-GFP和pHBAd-U6-GFP能表达绿色荧光蛋白(GFP)。
pHBAd-CMV-IRES-RFP和pHBAd-U6-RFP能表达红色荧光蛋白(RFP)。
1、载体信息1) 腺病毒克隆载体图谱如下:各载体用途如下表:2)骨架质粒信息如下:2、细胞株293A,腺病毒的包装细胞,为贴壁依赖型成上皮样细胞,经培养生长增殖形成单层细胞,生长培养基为DMEM(含10% FBS)。
3、菌株大肠杆菌菌株DH5α。
用于扩增腺病毒载体和腺病毒骨架载体质粒。
三、包装细胞293A细胞的培养(一)293A细胞的冻存293A细胞来源于一个用作空斑测定的亚克隆,具有易使用和易转染的特性。
该细胞株对于高细胞密度很敏感,当细胞超过70%汇合时,一些细胞可能会丢失它们的表型。
若细胞密度持续在70%以下,QBI-293A细胞则能连续培养3~4个月维持原有细胞特性。
若以购买得到的293A作为第一代,则30代内能得到最佳结果。
随着传代的次数增加,293A细胞会出现生长状态下降、突变等。
为了防止此类现象的出现,我们需要在开始就对细胞进行大量冻存,以保证实验的稳定性和持续性。
腹膜透析换液操作流程
腹膜透析换液操作流程腹膜透析是一种通过腹膜进行透析的治疗方法,它可以有效清除体内多余的水分和代谢产物,帮助肾脏完成排泄功能。
腹膜透析换液操作是腹膜透析治疗的重要环节,正确的操作流程能够保证治疗效果,避免并发症的发生。
下面将介绍腹膜透析换液的操作流程。
1. 准备工作。
在进行腹膜透析换液前,首先要准备好所需的器材和药物。
包括腹膜透析袋、导管连接器、透析液、消毒液、手套、棉签等。
同时要确保操作环境整洁,避免交叉感染的发生。
2. 洗手消毒。
在进行换液操作前,操作人员必须进行洗手消毒,穿戴好手套,保持操作环境的清洁。
这是防止感染的重要措施,也是换液操作的第一步。
3. 连接透析袋。
将透析袋连接到导管连接器上,并确保连接处密封良好,避免透析液外泄。
在连接过程中要注意操作轻柔,避免造成导管损伤。
4. 排出旧液。
在连接好透析袋后,需要将旧的透析液排出。
患者需要采取适当的体位,通常是仰卧位或侧卧位,然后打开导管连接器,让旧液顺着导管流出。
排出旧液的时间通常在15-30分钟左右,直到透析袋内的液体排空为止。
5. 注入新液。
排出旧液后,需要将新的透析液注入到腹腔内。
在注入新液前,要先用消毒液清洁导管连接器,然后将新液连接到导管上,缓慢注入新液。
注入新液的速度要适中,避免过快或过慢。
6. 固定导管。
在注入新液后,需要将导管固定在患者的腹部,避免导管脱落或移位。
通常可以使用透明敷料或者导管固定带进行固定,同时要确保固定处无皱褶,避免导致压迫性损伤。
7. 完成换液。
当新液注入并导管固定好后,即可完成换液操作。
在此过程中要观察患者的反应,确保换液过程中没有不适症状的出现。
8. 清理整理。
换液操作完成后,要对操作环境进行清理整理,包括清洁器材、处理医疗废物、整理患者的床铺等工作。
确保操作环境整洁,避免交叉感染的发生。
通过以上操作流程,我们可以完成腹膜透析换液的操作。
正确的操作流程能够保证治疗效果,避免并发症的发生,对于腹膜透析治疗来说具有重要的意义。
糖类的透析实验报告
实验日期:2023年X月X日实验地点:化学实验室实验目的:1. 了解透析的基本原理及其在分离混合物中的应用。
2. 掌握透析实验的操作步骤和注意事项。
3. 通过实验观察糖类分子在不同浓度溶液中的透过情况,分析其分子大小。
实验原理:透析是一种利用半透膜选择性透过小分子物质而阻止大分子物质通过的方法。
半透膜具有选择性,只能让小分子物质(如糖类)通过,而阻止大分子物质(如蛋白质、DNA等)的通过。
本实验中,我们通过透析实验观察不同分子大小的糖类(如葡萄糖、蔗糖)在透析过程中的透过情况,以此来分析其分子大小。
实验材料:1. 葡萄糖(分子量180)2. 蔗糖(分子量342)3. 透析袋(半透膜)4. 生理盐水5. 离心管6. 电子天平7. 移液器8. 恒温水浴锅实验步骤:1. 准备透析袋:将透析袋放入装有生理盐水的离心管中,浸泡30分钟,使透析袋充分浸润。
2. 配制溶液:取一定量的葡萄糖和蔗糖,分别溶解于生理盐水中,配制成一定浓度的溶液。
3. 装液:将配制好的葡萄糖溶液和蔗糖溶液分别装入透析袋中,并确保透析袋内液面高于离心管液面。
4. 透析:将装有透析袋的离心管放入恒温水浴锅中,保持温度恒定,进行透析实验。
5. 采样:在透析过程中,定时用移液器从离心管中取出一定量的透析液,用电子天平称量其质量,并记录数据。
6. 结果分析:根据采样数据,绘制葡萄糖和蔗糖在不同透析时间内的透过曲线,分析其分子大小。
实验结果:1. 葡萄糖的透过曲线显示,在透析过程中,葡萄糖的透过量随着时间逐渐增加,说明葡萄糖分子能够透过透析袋。
2. 蔗糖的透过曲线显示,在透析过程中,蔗糖的透过量随着时间几乎没有变化,说明蔗糖分子不能透过透析袋。
结论:1. 通过本实验,我们了解了透析的基本原理及其在分离混合物中的应用。
2. 实验结果表明,葡萄糖分子能够透过透析袋,而蔗糖分子不能透过透析袋。
这表明葡萄糖分子比蔗糖分子小,符合分子大小与透过性之间的关系。
透析袋使用说明及注意事项
用到透析的技术。
透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
纤维素酯CE、PVDF等)制成的透析膜,目前常用的是美国美国光谱医学公司(spectrum,上海欧韦达仪器科技有限公司是中华区特约总经销)和美国Union Carbide (联合碳化物公司,上海欧韦达仪器科技有限公司是华东区特约经销商)最小分子量,缩写为MwCO)大概有100、500、1000、2000、3500、8000、10000、15000、20000、25000、50000、100000、250000、500000、1000000等种类,单位为道尔顿(D)。
商品透析袋制成管状,其扁平宽度为8 mm~77 mm不等。
为防干裂,出厂收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
1.将透析管剪成适当长度(10-20cm)的小段,即成透析袋。
10min。
3.将透析袋用蒸馏水彻底漂洗。
4.将透析袋置1mmol/LEDTA(PH=8)中煮沸10min。
5.透析袋冷却后存放于4度,应确保透析袋始终浸没在液体中。
注:从此步起用透析袋时一定要戴手套操作。
6.在使用之前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗。
注:也可以将透析袋放在广口瓶中充满水,松动瓶盖,于20psi(1.40kg/cm2)高压灭菌10min,代替第四步用1mmol/LEDTA(PH=8)中煮沸10min的操作。
蛋白浓缩方法详解
利用透析袋浓缩蛋白质溶液是应用最广的一种。将要浓缩的蛋白溶液放入透析袋(无透析袋可用玻璃纸代替),结扎,把高分子(6000-12000)聚合物如聚乙二醇(碳蜡)、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。也可将吸水剂配成30%-40%浓度的溶液,将装有蛋白液的透析袋放入即可。吸水剂用过后,可放入温箱中烘干或自然干燥后,仍可再用。
主要针对小体积蛋白质溶液(几ml)此法更不易引起变性,不过得有浓缩器,不是哪个实验室都有的。
5,凝胶浓缩法
选用孔径较小的凝胶,如SephadexG25或G50,将凝胶直接加入蛋白溶液中。根据干胶的吸水量和蛋白液需浓缩的倍数而称取所需的干胶量。放入冰箱内,凝胶粒子吸水后,通过离心除去。
6,浓缩胶浓缩法
强调低温(0-4度以下)是因为10度时蛋白会在有机溶剂中变性,可用乙醇,丙酮等。注意:Mg2++离子,pH值。
11,聚乙二醇(PEG)沉淀法:
PEG是一个水溶性非离子多聚体,使用PEG时旨在个别情况下才会是蛋白质稍有变性!他溶解是散热低,形成沉淀的平衡时间短,通常达到30%时蛋白质就会达到最大量的沉淀。
浓缩胶是一种高分子网状结构的有机聚合物,具有很强的吸水性能。每克干胶可吸水120ml~150ml。它能吸收低分子量的物质,如水、葡萄糖、蔗糖、无机盐等,适宜浓缩10000分子量以上的生物大分子物质。浓缩后,蛋白质的回收率可达80%~90%。比凝胶应用方便,直接加入被浓缩的溶液中即可。必须注意,浓缩溶液的pH值应大于被浓缩物质的等电点,否则在浓缩胶表面产生阳离子交换,影响浓缩物质的回收率。
7,丙酮沉淀法:
试验要求的仪器简单,但是常常导致蛋白质变性。
8,免疫沉淀法:
通过免疫沉淀法,用蛋白质特异性能够定量能够分离目的蛋白。有三个步骤组成:首先将特异性抗体加入细胞提取物,第二步加入经化学固定的金黄色葡萄球菌,以确保形成大量沉淀。这些细菌通过蛋白质A和抗体形成复合物,蛋白质A与免疫球蛋白的Fc部分有高度的亲和性。或者说,纯化的蛋白A结合Sephrarose树脂,为从细胞提取物中分离出抗原抗体复合物,提供一个固体基质。最后通过洗脱,除去尚未沉淀的杂质。
蛋白表达纯化实验步骤
蛋白表达纯化实验步骤〔待改良〕1、取适当相应蛋白高表达的动物组织提total-RNA。
2、设计蛋白表达引物。
引物要去除信号肽,要加上适当的酶切位点和保护碱基。
3、RT-PCR,KOD酶扩增获取目的基因cDNA.4、双酶切,将cDNA.克隆入PET28/32等表达载体。
5、转化到DH5α感受态细菌中扩增,提质粒。
6、将质粒转化入表达菌株,挑菌检测并保种。
表达菌株如Bl21〔DE3〕、Rosetta gami〔DE3〕、Bl21 codon〔DE3〕等。
7、蛋白的诱导表达。
1)将表达菌株在3ml LB培养基中摇至OD=0.6左右,参加IPTG,浓度梯度从25μM 到1m M。
37度诱导过夜(一般3h以上即有大量表达)。
2)SDS-PAGE电泳检测目的蛋白的表达。
注:目的蛋白包涵体表达量一般会到达菌体蛋白的50%以上,在胶上可以看到明显的粗大的条带。
3)将有表达的菌株10%甘油保种,保存1ml左右就足够了,并记录IPTG浓度围。
甘油是用0.22μm过滤除菌的,储存浓度一般是30%-60%,使用时自己计算用量。
4)用上述IPTG浓度围的最低值诱导10ml表达菌,18度,低转速〔140-180rpm〕,诱导过夜作为包涵体检测样品。
注意:1.如果表达的蛋白对菌体有毒性,可以在加IPTG之前的培养基中参加1%的葡萄糖用来抑制本底表达。
葡萄糖会随着细菌的繁殖消耗殆尽,不会影响后面的表达。
2.保种可以取一局部分成50μl一管,每次用一管,防止反复冻融。
8、包涵体检测。
方案见附件29、如有上清表达,那么扩大摇菌。
1)取保种的表达菌株先摇10ml,37度,300rpm摇至OD>=1.5,约5h左右,视菌种的活性而异,也可过夜摇菌。
2)将上一步中的8ml参加300ml培养基中37度,250rpm摇至OD= 1.0左右〔约2.5h~3h〕,然后加IPTG〔浓度同包涵体检测中使用的浓度。
〕注:菌液浓度要适当的浓一些,否那么第二天收集不到足够的菌体,因为低温低转速细菌生长非常缓慢。
化学透析实验报告
一、实验目的与摘要实验目的:1. 理解透析膜的选择透过性及其在分离混合物中的应用。
2. 掌握透析实验的基本操作方法,包括透析膜的选择、透析液的准备和透析过程的控制。
3. 通过实验验证透析原理,学习如何通过透析分离不同分子量的物质。
摘要:本次实验通过使用透析膜,对含有不同分子量物质的混合溶液进行分离。
实验过程中,我们观察了透析膜的选择透过性,并通过更换不同分子量的透析膜,验证了透析原理在混合物分离中的应用。
实验结果表明,透析膜可以有效分离不同分子量的物质,实现了对混合物的分离纯化。
二、实验器材1. 透析袋(分子量截留值:10000、5000、3000、1000)2. 透析膜(分子量截留值:10000、5000、3000、1000)3. 混合溶液(含有不同分子量物质)4. 透析槽5. 量筒6. 秒表7. 计时器三、实验原理透析是一种利用半透膜的选择透过性,对混合物进行分离纯化的方法。
半透膜允许小分子物质通过,而阻止大分子物质通过。
因此,通过选择合适的透析膜,可以实现混合物中不同分子量物质的分离。
四、实验步骤1. 准备混合溶液:将含有不同分子量物质的溶液(如葡萄糖、淀粉、蛋白质等)按比例混合均匀。
2. 选择透析膜:根据需要分离的分子量,选择合适的透析膜。
3. 将混合溶液倒入透析袋中,确保透析袋内充满溶液,无气泡。
4. 将透析袋悬挂于透析槽中,透析槽中装有蒸馏水,保证透析袋完全浸没在水中。
5. 记录开始透析的时间,观察透析过程中溶液的变化。
6. 定期更换透析液,以保持透析过程的稳定性。
7. 经过一定时间后,观察透析袋内溶液的变化,并取出透析袋,测量其重量。
8. 记录实验数据,分析实验结果。
五、实验结果与分析实验过程中,我们观察到以下现象:1. 在透析初期,透析袋内溶液的浓度逐渐降低,说明小分子物质(如葡萄糖)开始透过透析膜进入透析液中。
2. 随着透析时间的延长,透析袋内溶液的浓度变化逐渐减小,说明大分子物质(如淀粉、蛋白质)的透过率较低。
透析纯化蛋白_实验报告
一、实验目的1. 理解透析法在蛋白质纯化中的应用原理。
2. 掌握透析纯化蛋白质的操作步骤。
3. 评估透析纯化蛋白质的效果。
二、实验原理透析法是一种利用半透膜将蛋白质与分子量较小的杂质(如无机盐、小分子有机物等)分离的方法。
半透膜具有选择性透过性,允许小分子物质通过,而大分子蛋白质则被截留在膜内。
通过不断更换透析液,可以逐步去除蛋白质中的杂质,从而实现蛋白质的纯化。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 蛋白质溶液(如鸡蛋清、牛血清白蛋白等)- 透析袋(孔径约为10kD)- 缓冲液(pH 7.4,0.1M Tris-HCl)- 离心机- 烧杯- 移液器- 恒温水浴锅- 紫外-可见分光光度计2. 实验仪器:- 透析袋- 移液器- 烧杯- 离心机- 恒温水浴锅- 紫外-可见分光光度计四、实验步骤1. 准备透析袋:将透析袋放入烧杯中,用蒸馏水冲洗干净,然后用缓冲液浸泡,以去除透析袋内的杂质。
2. 配制蛋白质溶液:取适量蛋白质溶液,用缓冲液稀释至一定浓度。
3. 透析:将配制好的蛋白质溶液转移至透析袋中,然后将透析袋放入另一装有缓冲液的烧杯中,确保透析袋完全浸没在缓冲液中。
4. 更换透析液:每隔一段时间,更换烧杯中的缓冲液,直至透析袋内溶液的颜色基本不变。
5. 收集透析后的蛋白质溶液:将透析袋内的蛋白质溶液收集至离心管中,离心去除透析袋。
6. 蛋白质浓度测定:取一定量的透析后的蛋白质溶液,用紫外-可见分光光度计测定其浓度。
7. 结果分析:对比透析前后的蛋白质浓度,评估透析纯化蛋白质的效果。
五、实验结果与分析1. 透析前蛋白质浓度为1.0mg/mL,透析后蛋白质浓度为0.8mg/mL。
2. 透析过程中,蛋白质溶液颜色逐渐变浅,说明杂质被去除。
3. 透析后的蛋白质溶液经过离心后,无明显沉淀,说明蛋白质未发生变性。
六、实验结论通过本实验,我们成功地将蛋白质溶液中的杂质去除,实现了蛋白质的纯化。
透析法是一种简单、有效的蛋白质纯化方法,适用于分离和纯化分子量较大的蛋白质。
生物化学实验教案
1.浸泡:用镊子取醋酸纤维薄膜1张(7cm×2cm识别出光泽面与无光泽面,并在角上用笔做上记号)放在缓冲液中浸泡20分钟。
2.点样:把膜条从缓冲液中取出,夹在两层粗滤纸内吸干多余的液体,然后平铺在玻璃板上(无光泽面朝上),将点样器先在放置在白瓷反应板上的血清中沾一下,再在膜条一端1cm处轻轻地水平水平划线(注意样品线两头与膜条两侧保留一定间隙),这样即在膜条上点上了细条状的血清样品。
重点与难点
1.点样的大小,展层剂的配制。
主要内容与课堂安排
实验四氨基酸的薄层层析
一、主要内容
掌握氨基酸的薄层层析操作过程,学习应用薄层层析来分离和鉴定某些物质。
(一)原理:薄层层析法是一种微量而快速的层析方法。一般薄层层析法是把吸附剂如氧化铝或硅藻土涂步于薄板上(玻璃或金属)成一薄板,把要分析的样品溶液滴加到薄层的一端,用适当的溶剂进行展开而达到分离、鉴定和定量物质的目的。因为层析是在薄层上进行的,所以称它为薄层层析法。
3.透析过程中搅拌蒸馏水能加快透析速度。
主要内容与课堂安排
实验三蛋白质的盐析和透析
一、主要内容
(一)了解蛋白质的沉淀作用。
1.原理:向蛋白质溶液中加入中性盐至一定浓度,蛋白质即沉淀析出,这种作用称为盐析。
2.操作:(1)取10%鸡蛋白溶液5ml,加入等量饱和硫酸铵溶液,微微摇动试管,使溶液混合后静置数分钟,蛋白即析出。如无沉淀可再加少许饱和硫酸铵溶液;(2)取少许沉淀混合物,加水稀释,观察沉淀是否会再溶解,另取剩余的混合物,加入过量的硫酸铵粉末,使其成为硫酸铵的饱和液,观察沉淀产生。
(二)蛋白质的透析
1.原理:蛋白质用盐析法沉淀分离后,需脱盐才能获得纯品,脱盐常用的方法为透析法
蛋白质在溶液中因其胶体质点直径较大,不能透过半透膜,而无机盐及其他低分子物质可以透过,故利用透析法可以把经盐析法所得的蛋白质提纯,即把蛋白质溶液装入透析袋内,透析袋可用玻璃纸、火棉胶、动物膜、羊皮纸等制成,将袋口用线扎紧,然后把它放进蒸馏水或缓冲液中进行透析,这时盐离子通过透析袋扩散到水或缓冲液中,蛋白质分子量大,不能透过透析袋而被保留在袋内,通过不断更换袋外蒸馏水或缓冲液,直至袋内盐分透析完为止。
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北京索莱宝科技有限公司
透析袋使用说明
产品介绍
高精度、即用型透析袋,使用前无需特殊处理,满足对截留分子量精确性和膜纯度的应用。
优点:
1,韧性膜材料,不易破损
2,孔径标准均一
3,对溶质的吸附性小
4,可选分子量范围广100-300000
5,多种扁平宽度可选
6,特有生物技术膜,不含硫化物及金属杂质
透析袋使用方法:
①把透析袋剪成适当长度(10cm左右)的小段。
②用60℃去离子水中水浴30分钟,再用去离子水内冲洗3次,洗掉甘油。
③使用时,一端用下沉透析袋夹子夹紧,灌满水后,用手指适当加压,检查不漏,方可装入样品。
通常要留三分之一至一半的空间,以防透析过程中,袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。
装完样品后,用上浮夹子夹紧袋口,可在袋内放一玻璃珠,以使透析袋处于悬浮状态,即可进行透析。
为了加快透析速度,除多次更换透析液外,还可使用磁力搅拌器。
透析的容器要大一些,可以使用大烧杯、大量筒和塑料桶。
保质期:两年。
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