透析袋的预处理

我打算做蛋白的透析复性，透析袋买来了，但是不知道怎么做预处理在网上搜了预处理的步骤，但是有几点不明白。我搜索的步骤如下：

1. 把透析袋剪成适当长度（10-20cm）的小段，注意带手套。

2. 在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟。

3. 用蒸馏水彻底清洗透析袋。

4. 放在1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟。

5. 冷却后，存放于4度，必须确保透析袋始终浸没在溶液内。从此时起取用透析袋是必须戴手套。

6. 用前在透析袋内装满水然后排出，将之清洗干净。

我有以下几点不明白：

1.步骤一中，为什么要戴手套操作？

2.步骤二中，用“大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(pH 8.0)煮沸”，是分别煮沸、还是两种溶液混到一块煮沸？

3.步骤四中，“透析袋必须浸没在溶液中”此处的溶液是指什么？1mmol/L EDTA(pH 8.0)？

第一点ls说了

第2点配一个溶液，含2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(pH 8.0)

第3点2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(pH 8.0)

（1）将透析管剪成适当长度，10-20cm的小段，即形成透析袋

（2）在大体积2％（m/V）碳酸氢钠和1mmol/LEDTA（PH*8.0）中将透析袋煮沸10min （3）将透析袋用蒸馏水彻底漂洗

（4）将透析袋置1mmol/L EDTA（PH*8.0）中煮沸10min

（5）将透析袋冷却，存放于4摄氏度，应确保透析袋始终浸没在液体中。

重要：从此步起用透析袋时一定要带手套操作

（6）在使用前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗。

我也做过透析袋相关实验，我们平时就是把剪好的透析袋保存于无水乙醇中，用的时候用蒸馏水洗净，然后在烧杯里面加入蒸馏水没过透析袋微波炉加热煮沸10分钟就可以了

丁香园方法

透析膜(前处理方法如下)： 1. 戴手套把透析膜剪成适当长度，浸在蒸馏水中15 min 泡软。2. 浸入10 mM sodium bicarbonate 中，并加热至80℃，一边搅拌至少30 min。

3. 换到10 mM Na2•EDTA 中浸泡30 min，以新鲜的EDTA 同样方法处理三次。

4. 再用80℃蒸馏水洗30 min，然后换到20% 酒精中，放在4℃冰箱中保存。：：

你可按下述方法处理:

i. 将透析袋剪为适当长度：一般为10，20和30cm。

ii. 将透析袋浸入50ml 5mM EDTA/200mM NaHCO3透析液中。

iii. 煮沸5min。将透析液弃掉。用去离子水简单冲洗透析袋。

iv. 再将透析袋浸入50ml 5mM EDTA/200mM NaHCO3透析液中。

v. 煮沸5min。将透析液弃掉。用大量去离子水彻底冲洗透析袋。用铝箔包起来。

vi. 高压灭菌10min。

vii. 4℃保存。可加入0.02%叠氮化钠避免长菌。

viii. 使用时，戴手套取所用透析袋，用去离子水将其里外全部冲洗。

透析袋买来后最好再处理一下，因为其中可能含有防腐剂及其他小分之化学物从而影响透析效果，先献上我常用的改良后的处理方法：

1 0.5M EDTA-2Na 1 毫升加10克碳酸氢钠，补蒸馏水至500毫升，调PH至8.0

2 透析袋放上述液体中煮沸10分钟

3 取出透析袋蒸馏水清洗干净，再放蒸馏水中煮沸10 分钟

4 冷却后就可以用了，如果暂时不用的话，可以放苯钾酸钠或叠氮化钠中保存

5 用过的透析袋同法处理，放50%甘油或50%乙醇中保存，下次用前蒸馏水洗净即可

6 注意取透析待一定要戴手套哦