透析袋的预处理
透析袋使用前如何处理
透析袋在使用前如何处理透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一.在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。
透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的.透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素(再生纤维素RC、纤维素酯CE、PVDF等)制成的透析膜,目前常用的是美国美国光谱医学公司(spectrum,上海欧韦达仪器科技有限公司是中华区特约总经销)和美国Union Carbide (联合碳化物公司,上海欧韦达仪器科技有限公司是华东区特约经销商)生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量,缩写为MwCO)大概有100、500、1000、2000、3500、8000、10000、15000、20000、25000、50000、100000、250000、500000、1000000等种类,单位为道尔顿(D)。
商品透析袋制成管状,其扁平宽度为8 mm~77 mm不等.为防干裂,出厂时都用10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜,目前常用的是美国Union Carbide (联合碳化物公司)和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量)通常为1万左右。
透析袋的使用方法
透析袋的使用方法透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,这种由半透膜制成的袋状容器即透析袋。
将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。
透析袋预处理:透析袋一般制成管状,其扁平宽度为16 mm~50 mm不等。
为防干裂,已用10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
可先用50%乙醇煮沸1小时,再依次用50%乙醇、0.01 mol/L碳酸氢钠和0.001 mol/L EDTA溶液洗涤,最后用蒸馏水冲洗即可使用。
新透析袋如不作如上的特殊处理,则可用沸水煮五至十分钟,再用蒸馏水洗净,即可使用。
使用时,一端用橡皮筋或线绳扎紧,也可以使用特制的透析袋夹夹紧,由另一端灌满水,用手指稍加压,检查不漏,方可装入待透析液,通常要留三分之一至一半的空间,以防透析过程中,透析的小分子量较大时,袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。
含盐量很高的蛋白质溶液透析过夜时,体积增加50%是正常的。
实验过程小技巧:检查透析效果可用1% BaCl2检查(NH4)2SO4,用1% AgNO3 检查NaCl、KCl等。
为了加快透析速度,除多次更换透析液外,还可使用磁子搅拌。
透析的容器要大一些,可以使用大烧杯、大量筒和塑料桶。
小量体积溶液的透析,可在袋内放一截两头烧园的玻璃棒或两端封口的玻璃管,以使透析袋沉入液面以下。
使用者也可以自行设计与制作各种简易的透析装置。
透析袋用后处理:使用后的透析袋洗净后可存于4℃蒸馏水中,若长时间不用,可加少量NaN2,以防长菌。
洗净凉干的透析袋弯折时易裂口,用时必须仔细检查,不漏时方可重复使用。
透析袋使用前如何处理
透析袋在使用前如何处理透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。
在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。
透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素(再生纤维素RC、纤维素酯CE、PVDF等)制成的透析膜,目前常用的是美国美国光谱医学公司(spectrum,上海欧韦达仪器科技有限公司是中华区特约总经销)和美国Union Carbide (联合碳化物公司,上海欧韦达仪器科技有限公司是华东区特约经销商)生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量,缩写为MwCO)大概有100、500、1000、2000、3500、8000、10000、15000、20000、25000、50000、100000、250000、500000、1000000等种类,单位为道尔顿(D)。
商品透析袋制成管状,其扁平宽度为8 mm~77 mm不等。
为防干裂,出厂时都用10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜,目前常用的是美国Union Carbide (联合碳化物公司)和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量)通常为1万左右。
透析袋使用前如何处理
透析袋在使用前如何处理透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。
在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。
透析只需要使用专用的半透膜即可完成.通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素(再生纤维素RC、纤维素酯CE、PVDF等)制成的透析膜,目前常用的是美国美国光谱医学公司(spectrum,上海欧韦达仪器科技有限公司是中华区特约总经销)和美国Union Carbide (联合碳化物公司,上海欧韦达仪器科技有限公司是华东区特约经销商)生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量,缩写为MwCO)大概有100、500、1000、2000、3500、8000、10000、15000、20000、25000、50000、100000、250000、500000、1000000等种类,单位为道尔顿(D)。
商品透析袋制成管状,其扁平宽度为8 mm~77 mm不等.为防干裂,出厂时都用10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去.透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜,目前常用的是美国Union Carbide (联合碳化物公司)和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量)通常为1万左右。
透析袋使用前如何处理
透析袋在使用前如何处理透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。
在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。
透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为保留液”袋(膜)外的溶液称为渗出液” 或透析液”透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4C透析,升高温度可加快透析速度。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素(再生纤维素RC、纤维素酯CE、PVDF等)制成的透析膜,目前常用的是美国美国光谱医学公司(spectrum ,上海欧韦达仪器科技有限公司是中华区特约总经销)和美国Union Carbide (联合碳化物公司,上海欧韦达仪器科技有限公司是华东区特约经销商)生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO (即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量,缩写为MwCO )大概有100、500、1000、2000、3500、8000 、10000 、15000 、20000 、25000 、50000 、100000 、250000 、500000 、1000000 等种类,单位为道尔顿(D )。
商品透析袋制成管状,其扁平宽度为8 mm〜77 mm不等。
为防干裂, 出厂时都用10 %的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜,目前常用的是美国Union Carbide (联合碳化物公司)和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO (即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量)通常为1万左右。
透析袋原理介绍及使用方法步骤
透析袋原理介绍及使用方法步骤透析袋原理介绍及使用方法步骤自1861年发明透析方法至今已有一百多年。
透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。
在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内。
下面分别介绍透析袋和透析膜使用方法和步骤透析袋使用前处理方法:1. 把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段。
2. 在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和10mmol/L EDTA(pH8.0)中将透析袋煮沸10分钟。
3. 用蒸馏水彻底清洗透析袋。
4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟。
5.冷却后,存放于4度,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。
从此时起取用透析袋是必须戴手套。
6. 用前在透析袋内装满水然后排出,将之清洗干净。
透析膜使用前处理方法:1. 戴手套把透析膜剪成适当长度,浸在蒸馏水中 15 min 泡软。
2. 浸入 10 mM sodium bicarbonate 中,并加热至80℃,一边搅拌至少 30min。
3. 换到 10 mM Na2ull;EDTA 中浸泡 30 min,以新鲜的 EDTA 同样方法处理三次。
4. 再用80℃蒸馏水洗 30 min,然后换到 20% 酒精中,放在4℃冰箱中保存。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
通常在试验前需要确定透析袋的截留分子量。
透析袋使用前如何处理
透析袋在使用前如何处理透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。
在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。
透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素(再生纤维素RC、纤维素酯CE、PVDF等)制成的透析膜,目前常用的是美国美国光谱医学公司(spectrum,上海欧韦达仪器科技有限公司是中华区特约总经销)和美国Union Carbide (联合碳化物公司,上海欧韦达仪器科技有限公司是华东区特约经销商)生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量,缩写为MwCO)大概有100、500、1000、2000、3500、8000、10000、15000、20000、25000、50000、100000、250000、500000、1000000等种类,单位为道尔顿(D)。
商品透析袋制成管状,其扁平宽度为8 mm~77 mm不等。
为防干裂,出厂时都用10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜,目前常用的是美国Union Carbide (联合碳化物公司)和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量)通常为1万左右。
透析袋使用前如何处理
透析袋在使用前如何处理透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。
在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。
透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素(再生纤维素RC、纤维素酯CE、PVDF等)制成的透析膜,目前常用的是美国美国光谱医学公司(spectrum,上海欧韦达仪器科技有限公司是中华区特约总经销)和美国Union Carbide (联合碳化物公司,上海欧韦达仪器科技有限公司是华东区特约经销商)生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量,缩写为MwCO)大概有100、500、1000、2000、3500、8000、10000、15000、20000、25000、50000、100000、250000、500000、1000000等种类,单位为道尔顿(D)。
商品透析袋制成管状,其扁平宽度为8 mm~77 mm不等。
为防干裂,出厂时都用10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜,目前常用的是美国Union Carbide (联合碳化物公司)和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量)通常为1万左右。
透析袋的处理方法及注意事项
透析袋的处理方法及注意事项1. 介绍透析袋是一种用于肾脏透析的重要设备,它能够帮助患有肾功能不全的人维持生命。
在使用透析袋后,正确的处理方法和注意事项对于保证患者健康非常重要。
本文将详细介绍透析袋的处理方法及注意事项。
2. 透析袋的处理方法2.1 清洗使用完透析袋后,首先需要进行清洗。
具体步骤如下: 1. 将透析袋从机器上取下,小心地将残留液体倒入废液容器中。
2. 将透析袋内部用清水反复冲洗,直至冲洗液变清。
3. 使用中性洗涤剂和清水进行二次清洗,确保彻底去除残留物质。
4. 最后用纯净水进行最后一次冲洗,以确保没有任何污染物残留在透析袋内。
2.2 消毒清洗完成后,需要对透析袋进行消毒。
消毒步骤如下: 1. 准备好消毒液,常用的消毒液有含氯消毒剂和过氧化氢消毒剂。
2. 将透析袋浸入消毒液中,确保透析袋完全浸泡。
3. 按照消毒液的说明时间进行浸泡,通常为15-30分钟。
4. 取出透析袋后,用清水彻底冲洗干净。
2.3 干燥透析袋在清洗和消毒后需要进行干燥,以便下次使用。
干燥步骤如下: 1. 使用干净的纱布或纸巾将透析袋外表面擦干。
2. 将透析袋倒立放置在通风良好的地方,让其自然晾干。
3. 确保透析袋内外都完全干燥后,可收起用于下次使用。
3. 注意事项3.1 定期更换透析袋是一次性使用品,不可重复使用。
每次使用后都应当更换新的透析袋,以确保卫生安全。
3.2 避免污染在处理透析袋时,应注意避免污染。
具体措施包括: - 使用手套、口罩等个人防护用品,以减少对透析袋的污染。
- 将透析袋放置在干净的工作台上进行处理,避免接触到污染物。
3.3 定期检查定期检查透析袋的外观和质量,确保其没有破损或变形。
如发现任何异常情况,应立即更换透析袋。
3.4 储存方式透析袋在未使用时需要妥善储存,以防止受到污染或损坏。
建议: - 将透析袋存放在干燥、通风良好的地方。
- 避免阳光直射和高温环境。
结论正确处理透析袋并遵守注意事项对于保证患者健康至关重要。
透析袋前处理
透析袋预处理方法-(1)将透析管剪成适当长度,10-20cm的小段,即形成透析袋(2)在大体积2%(m/V)碳酸氢钠和1mmol/LEDTA(PH*8.0)中将透析袋煮沸10min(3)将透析袋用蒸馏水彻底漂洗(4)将透析袋置1mmol/L EDTA(PH*8.0)中煮沸10min(5)将透析袋冷却,存放于4摄氏度,应确保透析袋始终浸没在液体中。
重要:从此步起用透析袋时一定要带手套操作(6)在使用前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗。
透析和透析袋的处理保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为"保留液",袋(膜)外的溶液称为"渗出液"或"透析液"。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
目前常用的是美国Union Carbide (联合碳化物公司)和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量,缩写为MwCO)通常为1 万左右。
为防干裂,出厂时都用10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物(0.1%)、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
可先用50%乙醇煮沸1小时,再依次用50%乙醇、0.01 mol/L碳酸氢钠和0.001 mol/L EDTA溶液洗涤,最后用蒸馏水冲洗即可使用。
实验证明,50%乙醇处理对除去具有紫外吸收的杂质特别有效。
(也可先在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟,用蒸馏水彻底清洗后,再放在1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟。
)使用后的透析袋洗净后可存于4℃蒸馏水中,确保透析袋始终浸没在溶液内。
若长时间不用,可加少量NaN3,以防长菌。
透析袋使用前如何处理
透析袋在使用前如何处理透析已成为生物化学实验室最简便最常用得分离纯化技术之一。
在生物大分子得制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质与浓缩样品等都要用到透析得技术。
透析只需要使用专用得半透膜即可完成。
通常就是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中得大分子量得生物大分子被截留在袋内,而盐与小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边得浓度达到平衡为止。
保留在透析袋内未透析出得样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外得溶液称为“渗出液"或“透析液”。
ﻫ透析得动力就是扩散压,扩散压就是由横跨膜两边得浓度梯度形成得。
透析得速度反比于膜得厚度,正比于欲透析得小分子溶质在膜内外两边得浓度梯度,还正比于膜得面积与温度,通常就是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
ﻫ透析膜可用动物膜与玻璃纸等,但用得最多得还就是用纤维素(再生纤维素RC、纤维素酯CE、PVDF等)制成得透析膜,目前常用得就是美国美国光谱医学公司(spectrum,上海欧韦达仪器科技有限公司就是中华区特约总经销)与美国Union Carbide(联合碳化物公司,上海欧韦达仪器科技有限公司就是华东区特约经销商)生产得各种尺寸得透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内得生物大分子得最小分子量,缩写为MwCO)大概有100、500、1000、2000、3500、8000、10000、15000、20000、25000、50000、100000、250000、500000、1000000等种类,单位为道尔顿(D)。
商品透析袋制成管状,其扁平宽度为8 mm~77 mm不等。
为防干裂,出厂时都用10%得甘油处理过,并含有极微量得硫化物、重金属与一些具有紫外吸收得杂质,它们对蛋白质与其它生物活性物质有害,用前必须除去。
ﻫ透析膜可用动物膜与玻璃纸等,但用得最多得还就是用纤维素制成得透析膜,目前常用得就是美国Union Carbide (联合碳化物公司)与美国光谱医学公司生产得各种尺寸得透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内得生物大分子得最小分子量)通常为1万左右。
透析袋使用前如何处理
透析袋在使用前如何处理透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。
在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。
透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素(再生纤维素RC、纤维素酯CE、PVDF等)制成的透析膜,目前常用的是美国美国光谱医学公司(spectrum,上海欧韦达仪器科技有限公司是中华区特约总经销)和美国Union Carbide (联合碳化物公司,上海欧韦达仪器科技有限公司是华东区特约经销商)生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量,缩写为MwCO)大概有100、500、1000、2000、3500、8000、10000、15000、20000、25000、50000、100000、250000、500000、1000000等种类,单位为道尔顿(D)。
商品透析袋制成管状,其扁平宽度为8 mm~77 mm不等。
为防干裂,出厂时都用10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜,目前常用的是美国Union Carbide (联合碳化物公司)和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量)通常为1万左右。
透析袋处理及透析操作protocol
透析袋处理及透析操作protocol 代谢物组学团队操作指南protocol,1透析袋处理与蛋白透析操作指南版本: v1.0整理时间 2010-4-16整理者:崔球透析原理一.透析常用于蛋白质样品的除盐或更换缓冲液。
自Thomas Graham 1861年发明透析方法至今已有一百多年。
透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。
在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。
透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4?透析,升高温度可加快透析速度。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜,目前常用的是美国Union Carbide (联合碳化物公司)和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量,缩写为MwCO)通常为1 万左右。
商品透析袋制成管状,其扁平宽度为23 mm,50 mm不等。
为防干裂,出厂时都用10,的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须进行预处理除去。
使用注意事项:1某些化学物质会破坏透析袋微孔且不可逆转。
计有:烃、卤化烃、醇、酮、酯、胺、丙酮、甲基乙基酮、二氧杂环乙烷、环已烷等。
酸(甲酸、乙酸、稀强酸如5%HCI),10%苯酚,30%双氧水。
透析袋使用前如何处理之欧阳理创编
透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。
在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。
透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素(再生纤维素RC、纤维素酯CE、PVDF等)制成的透析膜,目前常用的是美国美国光谱医学公司(spectrum,上海欧韦达仪器科技有限公司是中华区特约总经销)和美国Union Carbide (联合碳化物公司,上海欧韦达仪器科技有限公司是华东区特约经销商)生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量,缩写为MwCO)大概有100、500、1000、2000、3500、8000、10000、15000、20000、25000、50000、100000、250000、500000、1000000等种类,单位为道尔顿(D)。
商品透析袋制成管状,其扁平宽度为8 mm~77 mm不等。
为防干裂,出厂时都用10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜,目前常用的是美国Union Carbide (联合碳化物公司)和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量)通常为1万左右。
透析袋使用前如何处理
透析袋在使用前如何处理透析已成为生物化学实验室最简便最常用的别离纯化技术之一。
在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。
透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度到达平衡为止。
保存在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保存液〞,袋〔膜〕外的溶液称为“渗出液〞或“透析液〞。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素〔再生纤维素RC、纤维素酯CE、PVDF等〕制成的透析膜,目前常用的是美国美国光谱医学公司〔spectrum,XX欧韦达仪器科技XX是中华区特约总经销〕和美国Union Carbide 〔联合碳化物公司,XX欧韦达仪器科技XX 是华东区特约经销商〕生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO 〔即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量,缩写为MwCO〕大概有100、500、1000、2000、3500、8000、10000、15000、20000、25000、50000、100000、250000、500000、1000000等种类,单位为道尔顿〔D〕。
商品透析袋制成管状,其扁平宽度为8 mm~77 mm不等。
为防干裂,出厂时都用10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜,目前常用的是美国Union Carbide 〔联合碳化物公司〕和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO〔即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量〕通常为1万左右。
透析和凝胶过滤的操作方法
透析和凝胶过滤的操作方法透析和凝胶过滤是生物化学实验中常用的方法。
透析是一种分离物质的方法,通过利用溶液中溶质的分子量和大小的差异,使较小的溶质从溶液中扩散到较大的溶液中。
而凝胶过滤是一种通过物质在凝胶中的扩散和筛分作用实现分离的方法。
接下来,我将分别介绍透析和凝胶过滤的操作方法。
透析的操作方法:透析是一种用半透膜分离和去除溶质的方法。
透析具体操作步骤如下:1. 准备透析袋:将透析袋浸泡在去离子水中,洗涤几次以去除残留的药物或其他污染物。
2. 预先处理溶液:将待透析溶液与所需的缓冲液调整至适当的pH和浓度。
3. 充填透析袋:将预处理好的溶液注入透析袋中,须留出透析袋内部的一定空间,避免溶液漫出。
4. 定量浸泡:将充填好的透析袋放入容器中,加入足够量的缓冲液以覆盖整个透析袋。
5. 进行透析:将容器放入摇床或温箱中,以适当的速度和时间进行透析。
透析速度应根据具体的实验条件而定。
6. 换液:透析过程中,溶质将通过透析袋的半透膜扩散到缓冲液中,透析袋外的缓冲液中溶质浓度逐渐接近溶液中溶质浓度。
此时,需要定期换液,将缓冲液中的溶质排除,以保持透析的效果。
7. 结束透析:根据实验需要,透析时间为几个小时或几天。
在透析结束后,取出透析袋中的溶液并进行深度处理和分析。
凝胶过滤的操作方法:凝胶过滤是利用凝胶晶体的筛分作用将不同分子大小的物质分离开的方法。
凝胶过滤具体操作步骤如下:1. 准备凝胶:根据实验要求,选择合适的凝胶材料。
例如,用于蛋白质分离可以选择聚丙烯酰胺凝胶或聚丙烯酰胺葡萄糖凝胶等。
2. 制备凝胶过滤装置:将凝胶与缓冲液浸泡在盒子中,确保凝胶不受气泡或异物的影响。
3. 加载样品:将待分离的样品加至凝胶上,注意避免样品溶液与凝胶初始接触。
4. 开始过滤:根据溶质的分子大小,调整过滤装置中缓冲液的流速。
较小分子的溶质较容易通过凝胶,溶质分子较大的则难以通过凝胶,因此能实现分离。
5. 收集分离物:根据实验要求,选择合适的分离物收集方法,例如,使用收集管收集出流液,在适当的时间间隔收集不同分子大小的分离物。
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我打算做蛋白的透析复性,透析袋买来了,但是不知道怎么做预处理在网上搜了预处理的步骤,但是有几点不明白。
我搜索的步骤如下:
1. 把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段,注意带手套。
2. 在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟。
3. 用蒸馏水彻底清洗透析袋。
4. 放在1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟。
5. 冷却后,存放于4度,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。
从此时起取用透析袋是必须戴手套。
6. 用前在透析袋内装满水然后排出,将之清洗干净。
我有以下几点不明白:
1.步骤一中,为什么要戴手套操作?
2.步骤二中,用“大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(pH 8.0)煮沸”,是分别煮沸、还是两种溶液混到一块煮沸?
3.步骤四中,“透析袋必须浸没在溶液中”此处的溶液是指什么?1mmol/L EDTA(pH 8.0)?
第一点ls说了
第2点配一个溶液,含2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(pH 8.0)
第3点2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(pH 8.0)
(1)将透析管剪成适当长度,10-20cm的小段,即形成透析袋
(2)在大体积2%(m/V)碳酸氢钠和1mmol/LEDTA(PH*8.0)中将透析袋煮沸10min (3)将透析袋用蒸馏水彻底漂洗
(4)将透析袋置1mmol/L EDTA(PH*8.0)中煮沸10min
(5)将透析袋冷却,存放于4摄氏度,应确保透析袋始终浸没在液体中。
重要:从此步起用透析袋时一定要带手套操作
(6)在使用前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗。
我也做过透析袋相关实验,我们平时就是把剪好的透析袋保存于无水乙醇中,用的时候用蒸馏水洗净,然后在烧杯里面加入蒸馏水没过透析袋微波炉加热煮沸10分钟就可以了
丁香园方法
透析膜(前处理方法如下): 1. 戴手套把透析膜剪成适当长度,浸在蒸馏水中15 min 泡软。
2. 浸入10 mM sodium bicarbonate 中,并加热至80℃,一边搅拌至少30 min。
3. 换到10 mM Na2•EDTA 中浸泡30 min,以新鲜的EDTA 同样方法处理三次。
4. 再用80℃蒸馏水洗30 min,然后换到20% 酒精中,放在4℃冰箱中保存。
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你可按下述方法处理:
i. 将透析袋剪为适当长度:一般为10,20和30cm。
ii. 将透析袋浸入50ml 5mM EDTA/200mM NaHCO3透析液中。
iii. 煮沸5min。
将透析液弃掉。
用去离子水简单冲洗透析袋。
iv. 再将透析袋浸入50ml 5mM EDTA/200mM NaHCO3透析液中。
v. 煮沸5min。
将透析液弃掉。
用大量去离子水彻底冲洗透析袋。
用铝箔包起来。
vi. 高压灭菌10min。
vii. 4℃保存。
可加入0.02%叠氮化钠避免长菌。
viii. 使用时,戴手套取所用透析袋,用去离子水将其里外全部冲洗。
透析袋买来后最好再处理一下,因为其中可能含有防腐剂及其他小分之化学物从而影响透析效果,先献上我常用的改良后的处理方法:
1 0.5M EDTA-2Na 1 毫升加10克碳酸氢钠,补蒸馏水至500毫升,调PH至8.0
2 透析袋放上述液体中煮沸10分钟
3 取出透析袋蒸馏水清洗干净,再放蒸馏水中煮沸10 分钟
4 冷却后就可以用了,如果暂时不用的话,可以放苯钾酸钠或叠氮化钠中保存
5 用过的透析袋同法处理,放50%甘油或50%乙醇中保存,下次用前蒸馏水洗净即可
6 注意取透析待一定要戴手套哦。