透析袋原理、分子量的选择、使用方法步骤
透析袋用法
透析袋使用前处理方法透析袋的使用方法透析原理透析是指溶质从半透膜的一侧透过膜至另一侧的过程,任何天然的(如腹膜)或人造的半透膜,只要该膜含有使一定大小的溶质通过的孔径,那么这些溶质就可以通过弥散和对流从膜的一侧移动到膜的另一侧。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
人体内的毒物包括代谢产物,药物,外源性毒物,只要其原子量或分子量大小合适,就能够通过透析清除体外。
其基本原理是弥散和对流。
弥散就是半透膜两侧液体各自所含溶质浓度梯度及它所形成的不同渗透浓度,溶质从浓度高的一侧通过半透膜向浓度低的一侧移动。
对流也称超滤,是指溶质和溶剂因透析膜两侧的静水压和渗透压梯度的不同而跨膜转运的过程。
自ThomasGraham1861年发明透析方法至今已有一百多年。
透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。
在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。
透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜,目前常用的是美国Union Carbide(联合碳化物公司)和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量,缩写为MwCO)通常为1万左右。
透析袋的使用方法使用前处理:1. 把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段。
透析袋使用说明
透析袋使用说明自Thomas Graham1861年发明透析方法至今已有一百多年。
透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。
在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。
1技术指标MWCO(截留分子量),单位:Diatoms。
透析时,小于MWCO的分子在透析膜二边溶液浓度差产生的扩散压作用下渗过透析膜,其速度与浓度梯度、膜面积及温度成正比。
欲快速透析可采用直径较小的透析袋以增加膜面积。
常用温度:4℃,升温、更换袋外透析液或用磁力搅拌器,均能提高透析速度。
2使用须知某些化学物质会破坏透析袋微孔且不可逆转。
计有:烃、卤化烃、醇、酮、酯、胺、丙酮、甲基乙基酮、二氧杂环乙烷、环已烷等。
酸(甲酸、乙酸、稀强酸如5%HCI),10%苯酚,30%双氧水。
甲醇、乙醇:浓度小于5%时,透析功能在,而MWCO变化。
2.1前处理为防干裂,出厂时都用10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
2.1.1方法一将透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段。
在NaHCO3-EDTA处理液中煮沸10min后用蒸馏水彻底清洗干净,然后在EDTA处理液煮沸10min。
冷却后,置于30%乙醇中,放于4℃冰箱,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。
使用前戴手套取用透析袋并用蒸馏水将透析袋内外清洗干净。
[1]2.2.2方法二将透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段,沸水煮5至10分钟,再用蒸馏[1]乙二胺四乙酸二钠(EDTA)0.2mol/L储备液称取7.4448g乙二胺四乙酸二钠,少量蒸馏水溶解,转至100mL容量瓶中,摇匀并定容。
EDTA处理液(1mmol/L pH8.0)取2.5mL EDTA储备液,加蒸馏水并用1mol/LNaOH调节pH为8.0,定容至500mL。
NaHCO3-EDTA处理液称取4.0g碳酸氢钠至200mLEDTA处理液中,配制成(2%)NaHCO3-(pH值8.01mmol/L)EDTA处理液。
透析袋原理、分子量的选择、使用方法步骤
透析袋原理、分子量的选择、使用方法步骤透析袋原理自1861年发明透析方法至今已有一百多年。
透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。
在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内。
分子量的选择透析是一个简单的扩散过程,溶质中小分子物质从高浓度溶液通过半透性膜扩散到低浓度溶液中,直至渗透压达到平衡。
由于多孔膜的选择性,使得溶质中小分子物质可以通过,而较大物质则被截留,从而分离出不同大小分子量的物质,依据分子量大小截留,可高效用于分离工艺,改变或控制透析的条件,可在多种透析应用中得到预期效果,通过截留分子量(MWCO)可使目标分子得到分离。
所以透析袋分子量的选择就决定了实验的成败。
这篇文章就详细介绍了如何选择合适的透析袋。
透析膜的材质透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜,主要有再生纤维素(RC)、纤维素酯(CE)、聚偏二氟乙烯(PVDF)。
但随着生物技术发展,对透析袋处理样品更多更严格的要求,根据生产工艺有可以分为标准膜和生物技术级膜。
生物技术纤维素酯(CE)膜生物学惰性和超纯的生物技术CE膜,用于带电荷分子的分离及大分子纯化。
生物技术CE膜对条件及溶剂要求较高。
一般而言,CE膜能够抗弱的或稀的酸碱溶液和轻微乙醇,MWCO只有轻微改变。
**直接与有机溶剂接触会破坏CE膜。
生物技术CE膜能在pH2-9与4-37℃下使用。
即用透析装置中也可使用CE膜。
生物技术再生纤维素(RC)膜生物技术RC膜通过再生过程制得,物理抗性与化学相容性得到改良,具有与生物技术CE膜一样高纯度与均一的MWCO。
RC膜能够与高浓度的弱酸碱、低浓度的强酸碱、大多数醇类及一些温和的或低浓度有机溶剂共用,**直接与强极性或有机溶剂接触会破坏RC膜。
透析袋的使用方法
透析袋在使用前如何处理透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。
在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。
透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析袋未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素(再生纤维素RC、纤维素酯CE、PVDF等)制成的透析膜,目前常用的是美国美国光谱医学公司(spectrum,欧韦达仪器科技是中华区特约总经销)和美国Union Carbide (联合碳化物公司,欧韦达仪器科技是华东区特约经销商)生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋的生物大分子的最小分子量,缩写为MwCO)大概有100、500、1000、2000、3500、8000、10000、15000、20000、25000、50000、100000、250000、500000、1000000等种类,单位为道尔顿(D)。
商品透析袋制成管状,其扁平宽度为8 mm~77 mm不等。
为防干裂,出厂时都用10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜,目前常用的是美国Union Carbide (联合碳化物公司)和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋的生物大分子的最小分子量)通常为1万左右。
透析袋使用说明及注意事项
用到透析的技术。
透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
纤维素酯CE、PVDF等)制成的透析膜,目前常用的是美国美国光谱医学公司(spectr um,上海欧韦达仪器科技有限公司是中华区特约总经销)和美国Uni on Carbid e (联合碳化物公司,上海欧韦达仪器科技有限公司是华东区特约经销商)最小分子量,缩写为MwC O)大概有100、500、1000、2000、3500、8000、10000、15000、20000、25000、50000、100000、250000、500000、1000000等种类,单位为道尔顿(D)。
商品透析袋制成管状,其扁平宽度为8 mm~77 mm不等。
为防干裂,出厂的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
1.将透析管剪成适当长度(10-20cm)的小段,即成透析袋。
10mi n。
3.将透析袋用蒸馏水彻底漂洗。
4.将透析袋置1mmol/LEDTA(PH=8)中煮沸10m in。
5.透析袋冷却后存放于4度,应确保透析袋始终浸没在液体中。
注:从此步起用透析袋时一定要戴手套操作。
6.在使用之前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗。
透析袋原理
透析袋原理
透析袋是一种常用于生物化学实验室中的实验工具,它通过半透膜的特性,实现了对生物分子的分离和纯化。
透析袋原理是基于半透膜对不同分子大小和性质的选择性透过性,从而实现对混合物中目标分子的分离和富集。
在生物化学实验中,透析袋的原理被广泛应用于蛋白质纯化、离子浓度调节等领域。
透析袋的半透膜是其实现分离的关键。
半透膜是一种特殊的薄膜,它具有对溶质分子的选择性透过性。
当混合物与半透膜接触时,溶质分子将根据其大小和性质被选择性地透过或阻挡。
这种选择性透过性使得透析袋能够实现对混合物中不同分子的有效分离。
在透析袋中,混合物被置于半透膜的内部,然后将透析袋悬浮在适当的缓冲液中。
由于半透膜的存在,混合物中的小分子溶质可以通过半透膜,而大分子溶质则被阻挡在透析袋内部。
这样,经过一段时间的透析,我们可以得到缓冲液中富集了小分子溶质的溶液,而透析袋内部则富集了大分子溶质。
透析袋原理的应用不仅局限于生物化学实验室,它在生物医药领域也有着重要的应用。
例如,在蛋白质纯化过程中,透析袋可以帮助实现对目标蛋白的纯化和富集,从而为后续的实验和研究提供了可靠的样品。
此外,在生物药物制剂中,透析袋也常被用于调节药物的离子浓度,以确保药物的稳定性和安全性。
总的来说,透析袋原理是基于半透膜的选择性透过性,通过将混合物置于透析袋中,利用溶质分子的大小和性质差异,实现对混合物中目标分子的分离和富集。
透析袋原理在生物化学实验和生物医药领域有着广泛的应用,为科研和生产提供了重要的技术支持。
希望通过对透析袋原理的深入理解,能够更好地应用于实验和生产实践中,推动生物化学领域的发展和进步。
透析袋处理及透析操作
透析袋处理及透析操作透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为"保留液",袋(膜)外的溶液称为"渗出液"或"透析液"。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜,目前常用的是美国Union Carbide (联合碳化物公司)和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量,缩写为MwCO)通常为1万左右。
商品透析袋制成管状,其扁平宽度为23 mm~50 mm不等。
为防干裂,出厂时都用10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物(0.1%)、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
透析袋的处理:可先用50%乙醇煮沸1小时,再依次用50%乙醇、0.01 mol/L碳酸氢钠和0.001 mol/L EDTA溶液洗涤,最后用蒸馏水冲洗即可使用。
实验证明,50%乙醇处理对除去具有紫外吸收的杂质特别有效。
(也可先在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟,用蒸馏水彻底清洗后,再放在1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟。
)使用后的透析袋洗净后可存于4℃蒸馏水中,确保透析袋始终浸没在溶液内。
若长时间不用,可加少量NaN2,以防长菌。
从此时起取用透析袋必须戴手套。
透析袋说明
透析袋使用说明产品介绍一、高精度、即用型透析袋,使用前无需处理(生物级,去除了硫化物和重金属离子,保存于防腐液中)即用型透析袋的制造过程没有重金属污染及硫化物,无需预处理,只需用去离子水清洗即可使用,满足对截留分子量精确性和膜纯度的应用。
优点:1. 韧性膜材料,不易破损2. 杂质含量极少,可无需预处理,只需用去离子水清洗即可使用3. 孔径标准均一4. 对溶质的吸附性小5. 可选分子量范围广 100-3000006. 多种扁平宽度可选7. 特有生物技术膜,不含硫化物及金属杂质二、普通干型透析袋(美国联合碳化,甘油涂层,使用前需处理)技术参数:1. PH 稳定范围 : 5-92. 污染物水平: 硫化物<0.3%; 重金属<50ppm3. 化学兼容性: 与很多盐兼容,比如 CaCl2, (NH4)2SO4;还可与分子生物学及酶学中常用的水溶剂、有机溶剂兼容,比如异丙醇、乙醇和丙酮。
4. 温度抵抗性:可煮沸,可高压灭菌。
5. 蛋白吸附:每克透析袋吸附蛋白量小于 1ng。
干型透析袋使用前处理方法:1. 把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段。
2. 在大体积的 2%(W/V)碳酸氢钠和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸 10 分钟。
3. 用蒸馏水彻底清洗透析袋。
4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸 10 分钟。
5. 冷却后,存放于 4 度,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。
从此时起取用透析袋是必须戴手套。
6. 用前在透析袋内装满水然后排出,将之清洗干净。
实验要求不高的可以用简易处理方法:在沸水中煮 10min 即可使用。
透析袋的应用:去除盐类、表面活性剂和溶剂样品溶液的缓冲液置换和 PH 值的调节浓缩蛋白质、多肽和抗体 DNA 电洗脱电泳前稀释蛋白的制备小分子污染物清除结合研究组织培养的提取纯化透析袋的选择1.正确选择合适的截留分子量截留分子量的选择是以预留在膜内的大分子的分子量和将要被除去的小分子污染物的分子量为基础的。
蛋白质透析法的原理
蛋白质透析法的原理
蛋白质透析是一种分离和纯化蛋白质的常用方法,其原理基于分子大小的差异。
透析通过膜的孔径选择性地将较小的分子(如溶剂、盐和小分子物质)与较大的蛋白质分离开来。
这种方法常用于去除溶液中的杂质、离子或小分子物质,以获取纯净的蛋白质样品。
蛋白质透析的实验操作通常涉及以下步骤:
1. 准备透析袋:选择适当的透析膜袋,将其切割为所需长度,并用透析缓冲液润湿。
2. 收集蛋白质溶液:将待透析的蛋白质溶液收集到管中,注意避免任何可能的污染。
3. 外滤:将收集的蛋白质溶液倒入透析袋中,并将袋子的两端扎紧。
4. 放入透析缓冲液:将含有透析缓冲液的容器放入离心机中,离心以去除气泡。
5. 将透析袋浸入缓冲液中:将装有蛋白质溶液的透析袋悬挂在含有透析缓冲液的容器中。
6. 换液:缓冲液通过透析膜进入透析袋,小分子物质则从透析袋中扩散出去。
通过以上步骤,较小的分子可从蛋白质溶液中移除,而蛋白质则保留在透析袋内。
透析过程中,缓冲液需定期更换,以保持浓度梯度,促进小分子物质的扩散。
透析的时间取决于溶液中小分子的浓度和大小,以及蛋白质的分子量。
常见的透析膜孔径范围为1-10 kDa,透析时间通常从几小时到过夜不等。
蛋白质透析方法广泛应用于分离、纯化或去除杂质等实验操作中。
这种方法相对简单且高效,适用于小规模的蛋白质样品处理。
但需要注意的是,透析过程中可能会存在蛋白质流失的问题,因此需要合理控制透析时间和缓冲液的组成,以确保透析效果的最大化。
透析袋的使用方法
透析袋的使用方法透析袋是一种常用于肾脏透析治疗的医疗器械,它能够有效地清除体内的代谢废物和多余水分,帮助患者维持体内的水电解质平衡。
正确使用透析袋对于治疗效果和患者的健康都至关重要。
下面将介绍透析袋的使用方法。
首先,准备工作。
在使用透析袋之前,需要先准备好透析液、注射器、消毒酒精棉球、手套等物品。
确保透析袋的包装完好无损,没有破损或污染。
然后,洗手并戴上手套,用消毒酒精棉球擦拭透析袋的连接口和周围皮肤,保持清洁。
接着,连接透析袋。
将透析袋连接到导管上,并确保连接口处紧固可靠,不漏液。
在连接过程中,要小心操作,避免造成污染或感染。
连接好后,检查一遍连接处是否牢固,以确保透析液不会泄漏。
然后,填充透析液。
使用注射器将透析液缓慢地注入透析袋内,避免产生气泡。
填充透析液的过程中,要注意透析袋的容量,不要超出其承载范围。
填充完毕后,轻轻挤压透析袋,将残留在导管中的气泡排出,确保透析袋内无气泡。
接下来,进行透析治疗。
将连接好的透析袋放置在透析机中,按照医生的建议和治疗方案进行透析治疗。
在治疗过程中,要密切观察透析袋的情况,确保透析液的流速和温度符合要求,同时留意患者的生命体征和不适症状。
最后,处理透析袋。
在治疗结束后,将透析袋从导管上取下,用消毒酒精棉球擦拭连接口和周围皮肤,保持清洁。
然后,将透析袋进行正确的处置,避免造成污染和环境污染。
总之,正确使用透析袋对于患者的治疗效果和健康至关重要。
在使用透析袋的过程中,要严格按照操作规程进行,确保操作的安全和准确性。
同时,定期对透析袋进行检查和维护,确保其性能和质量符合要求。
希望本文所介绍的透析袋使用方法能够为医护人员和患者提供参考,确保透析治疗的安全和有效性。
透析袋使用说明及注意事项
用到透析的技术。
透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
纤维素酯CE、PVDF等)制成的透析膜,目前常用的是美国美国光谱医学公司(spectrum,上海欧韦达仪器科技有限公司是中华区特约总经销)和美国Union Carbide (联合碳化物公司,上海欧韦达仪器科技有限公司是华东区特约经销商)最小分子量,缩写为MwCO)大概有100、500、1000、2000、3500、8000、10000、15000、20000、25000、50000、100000、250000、500000、1000000等种类,单位为道尔顿(D)。
商品透析袋制成管状,其扁平宽度为8 mm~77 mm不等。
为防干裂,出厂收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
1.将透析管剪成适当长度(10-20cm)的小段,即成透析袋。
10min。
3.将透析袋用蒸馏水彻底漂洗。
4.将透析袋置1mmol/LEDTA(PH=8)中煮沸10min。
5.透析袋冷却后存放于4度,应确保透析袋始终浸没在液体中。
注:从此步起用透析袋时一定要戴手套操作。
6.在使用之前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗。
注:也可以将透析袋放在广口瓶中充满水,松动瓶盖,于20psi(1.40kg/cm2)高压灭菌10min,代替第四步用1mmol/LEDTA(PH=8)中煮沸10min的操作。
透析袋的使用及注意事项
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在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。
透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素(再生纤维素RC、纤维素酯CE、PVDF等)制成的透析膜,目前常用的是美国美国光谱医学公司(spectrum,上海欧韦达仪器科技有限公司是中华区特约总经销)和美国Union Carbide (联合碳化物公司,上海欧韦达仪器科技有限公司是华东区特约经销商)生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量,缩写为MwCO)大概有100、500、1000、2000、3500、8000、10000、15000、20000、25000、50000、100000、250000、500000、1000000等种类,单位为道尔顿(D)。
商品透析袋制成管状,其扁平宽度为8 mm~77 mm不等。
为防干裂,出厂时都用10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
1.将透析管剪成适当长度(10-20cm)的小段,即成透析袋。
2.在大体积的2%(m/v)碳酸氢钠和1mmol/LEDTA(PH=8)中将透析袋煮沸10min。
透析袋
用透析袋前,首先你肯定知道原理,以及材料的截留分子量。
至于透析什么时候算彻底,这个无法一概而论。
你可以参考如下思路:1. 如果被透析的杂质分子量和你的目的物差距很大,且水中有一定溶解度(几十微克就行),那么你可以选择截留分子量尽可能大的透析袋(但不能目的物分子量),勤换水,一天三次,三天就可以了。
2. 如果杂质和目的物分子量差别不大,理论上不适合透析,如果非得用,截留分子量一定要靠近杂质,如果物质水溶性不好,而缓冲盐有不会破坏目的物,可以用缓冲盐体系透析。
这需要五六天。
3. 透析是不可能把杂质透干净的,毕竟是一种温和平衡纯化方法,其最大的优势在于简单和温和。
如果你不要求样品绝对纯净,样品又比较娇气,这是首选,如果不是,则另想办法。
4. 还有一个鉴定是否透析完全的办法,就是测透析液中杂质的浓度,(紫外吸收,荧光谱,HPLC都行,如果杂质有色,目测也行,哈哈)透析袋处理方法:透析袋一般来讲,最好一次性利用。
但是考虑到我们都是小实验室,科研经费紧张,如果对样品的纯度没有很严格的要求,还是可以重复利用的。
但是不要重复利用太多次,一般5次就差不多了,而且透析时尽量避免有机溶剂(乙醇除外),因为重复多次利用或经有机溶剂腐蚀,虽然从宏观上看袋子完好,但是有可能微观上已有破损或者孔径已经改变,截留分子量(MWCO)已经不可靠。
具体的处理流程,我经常用的,供参考:1. 将用过的袋子用清水冲洗3遍2. 加600ml纯净水,0.18g EDTA,10g NaHCO3,煮沸15min3. 纯净水洗3遍4. 加600ml纯净水,煮沸15min5. 纯净水洗3遍6. 净化的袋子置75%乙醇中,浸泡待用(乙醇兼有抑菌和保持袋的韧性双重功能)7.再次使用时,用纯净水洗一到两遍就可以了。
透析袋透析法的原理
透析袋透析法的原理
透析袋透析法是一种通过半透膜进行溶质分离的方法,透析袋是一种半透膜袋,在其中的溶质可以通过膜孔而不通过水分子移动,从而实现溶质的分离。
透析袋透析法的原理基于溶质的扩散。
当将溶液放入透析袋中时,膜孔的大小可以选择性地阻止大分子或离子通过,而允许小分子通过。
透析袋通过选择合适的半透膜来实现分离。
在透析过程中,溶质的浓度不同于透析袋内外溶液的浓度。
根据溶质的扩散原理,通过透析袋的溶质会扩散到透析袋外的溶液中,而溶质浓度较高的溶液中的溶质会扩散到透析袋内的溶液中。
这个过程会持续进行,直到透析袋两侧的溶液浓度达到平衡。
透析袋透析法主要用于分离大分子溶质和小分子溶质,比如蛋白质和小分子有机物。
透析袋的选取应根据所需分离的目标溶质的分子大小和性质来确定。
透析袋透析法是一种简便、有效的分离方法,广泛应用于生物化学实验室和临床医学领域。
透析袋分子量
透析袋分子量一、什么是透析袋?透析袋是一种用于分离和纯化生物大分子的实验室工具。
它由半透膜制成,可以让小分子通过但阻止大分子通过。
透析袋通常用于去除溶液中的杂质,或将溶液中的目标蛋白质浓缩到特定的分子量范围内。
二、透析袋的分类根据不同的半透膜材料和孔径大小,透析袋可以分为不同类型。
1.纤维素膜透析袋纤维素膜透析袋是最常见的一种。
它由纤维素制成,孔径大小通常在10,000到20,000道尔顿(Dalton)之间。
这种类型的透析袋可以用于去除溶液中大部分小分子杂质,如盐、糖等。
2.聚酰胺膜透析袋聚酰胺膜透析袋孔径大小通常在100到1,000道尔顿之间。
这种类型的透析袋可以用于去除更小的杂质,如小肽、核苷酸和其他小分子。
3.聚乙烯醇膜透析袋聚乙烯醇膜透析袋孔径大小通常在1到20道尔顿之间。
这种类型的透析袋可以用于去除非常小的杂质,如离子、小分子药物和其他低分子量化合物。
三、透析袋的分子量透析袋的分子量是指它可以阻止通过的最大分子量。
不同类型的透析袋具有不同的分子量截止范围。
1.纤维素膜透析袋纤维素膜透析袋通常有几种不同的分子量截止范围可供选择。
其中一些包括:- 3,500道尔顿:这种类型的纤维素膜透析袋可以用于去除小肽和核苷酸等较小的生物大分子。
- 8,000道尔顿:这种类型的纤维素膜透析袋可以用于去除更大一些的生物大分子,如酶和抗体。
- 12,000道尔顿:这种类型的纤维素膜透析袋可以用于去除更大一些的生物大分子,如血浆蛋白。
2.聚酰胺膜透析袋聚酰胺膜透析袋通常有几种不同的分子量截止范围可供选择。
其中一些包括:- 100道尔顿:这种类型的聚酰胺膜透析袋可以用于去除小肽和核苷酸等较小的生物大分子。
- 300道尔顿:这种类型的聚酰胺膜透析袋可以用于去除更大一些的生物大分子,如蛋白质和多肽。
3.聚乙烯醇膜透析袋聚乙烯醇膜透析袋通常有几种不同的分子量截止范围可供选择。
其中一些包括:- 1,000道尔顿:这种类型的聚乙烯醇膜透析袋可以用于去除离子和小分子药物等低分子量化合物。
透析袋原理
透析袋原理
袋式膜透析(dialysis bag)是一种生物分离技术,它主要利用固定离子交换膜
的特点,实现对液体中的两种成分的有选择的过滤和分离。
该技术的原理是将带有生物活性的生物分子,如蛋白质、碱基、糖类等,封装在细膜之外,使其得以长时间的存活,而不受外界环境的影响。
袋式膜透析是一种高效、结构简单、操作安全、成本低廉的生物分离技术。
袋式膜透析是由一层膜和一个空气密封袋组成的。
膜是用含有高分子材料的半透膜制成的,它可以吸附大分子物质,而不吸附小分子物质。
一般来说,这种膜的尺寸在10μm到200μm之间,有的也可以达到1000μm。
袋式膜透析的工作原理是
将袋子置于容器内,然后在膜的表面和容器内安装表面电极。
通过外部电源,在膜表面和液体中形成电势差,使溶质在膜两侧进行扩散,从而实现滤除、分离和洗涤等多种功能。
由于袋式膜透析具有许多优点,因此它在生物学研究、分析检测和各个生产领域得到了广泛应用,如蛋白质纯化、有机溶剂抽提和协同吸附分离等。
它的结构简单,操作简便,具有高效的活性物质活性分离效果,为生物分离其他过程的应用提供了有利的技术支持。
袋式膜透析技术的出现,为研发和生产提供了科学、安全、快捷的分离技术,它对于改善生物工程技术水平具有重要意义,在医学、食品和农业领域都有重要应用价值。
袋式膜透析技术以其准确、快速、简单、可靠等特点在众多行业间逐渐受到重视,它是一种常用的分离技术,广泛应用于分子生物学、生物活性分析、可溶性蛋白分离领域,具有广阔的应用前景。
透析袋 分子量
透析袋 分子量
透析袋是一种用于分离和浓缩生物大分子的工具。
它主要由半透膜材料制成,具有选择性地筛选分子量小于其孔径的分子,从而将分子量大的溶质留在袋内。
在选择透析袋时,分子量是一个非常重要的参数。
通常,透析袋的孔径会根据待处理溶液中目标溶质的分子量来选择。
较小的分子量通常需要使用较小的孔径
的透析袋,而较大的分子量则需要使用较大的孔径的透析袋。
因此,透析袋的分子量大小通常是由其孔径大小来决定的。
常见的透析袋分子量包括1000Da、3000Da、5000Da、10000Da、20000Da等不同规格,用户可以根
据需要选择合适的规格以达到最佳的透析效果。
需要注意的是,由于透析袋的选择性,不同分子量的透析袋不仅可以用于分离和浓缩不同大小的溶质,还可以用于分离和浓缩不同分子量的蛋白质、核酸等生物大分子。
因此,在使用透析袋时,需要根据具体的实验要求选择合适的分子量规格,以达到最佳的实验效果。
透析袋的使用方法
透析袋在使用前如何处理透析已成为生物化学实验室最简便最常用的别离纯化技术之一。
在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。
透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋外两边的浓度到达平衡为止。
保存在透析袋未透析出的样品溶液称为“保存液〞,袋〔膜〕外的溶液称为“渗出液〞或“透析液〞。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素〔再生纤维素RC、纤维素酯CE、PVDF等〕制成的透析膜,目前常用的是美国美国光谱医学公司〔spectrum,欧韦达仪器科技是中华区特约总经销〕和美国Union Carbide 〔联合碳化物公司,欧韦达仪器科技是华东区特约经销商〕生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO〔即留在透析袋的生物大分子的最小分子量,缩写为MwCO〕大概有100、500、1000、2000、3500、8000、10000、15000、20000、25000、50000、100000、250000、500000、1000000等种类,单位为道尔顿〔D〕。
商品透析袋制成管状,其扁平宽度为8 mm~77 mm不等。
为防干裂,出厂时都用10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜,目前常用的是美国Union Carbide 〔联合碳化物公司〕和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO〔即留在透析袋的生物大分子的最小分子量〕通常为1万左右。
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透析袋原理、分子量的选择、使用方法步骤透析袋原理自1861年发明透析方法至今已有一百多年。
透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。
在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内。
分子量的选择透析是一个简单的扩散过程,溶质中小分子物质从高浓度溶液通过半透性膜扩散到低浓度溶液中,直至渗透压达到平衡。
由于多孔膜的选择性,使得溶质中小分子物质可以通过,而较大物质则被截留,从而分离出不同大小分子量的物质,依据分子量大小截留,可高效用于分离工艺,改变或控制透析的条件,可在多种透析应用中得到预期效果,通过截留分子量(MWCO)可使目标分子得到分离。
所以透析袋分子量的选择就决定了实验的成败。
这篇文章就详细介绍了如何选择合适的透析袋。
透析膜的材质透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜,主要有再生纤维素(RC)、纤维素酯(CE)、聚偏二氟乙烯(PVDF)。
但随着生物技术发展,对透析袋处理样品更多更严格的要求,根据生产工艺有可以分为标准膜和生物技术级膜。
生物技术纤维素酯(CE)膜生物学惰性和超纯的生物技术CE膜,用于带电荷分子的分离及大分子纯化。
生物技术CE膜对条件及溶剂要求较高。
一般而言,CE膜能够抗弱的或稀的酸碱溶液和轻微乙醇,MWCO只有轻微改变。
**直接与有机溶剂接触会破坏CE膜。
生物技术CE膜能在pH2-9与4-37℃下使用。
即用透析装置中也可使用CE膜。
生物技术再生纤维素(RC)膜生物技术RC膜通过再生过程制得,物理抗性与化学相容性得到改良,具有与生物技术CE膜一样高纯度与均一的MWCO。
RC膜能够与高浓度的弱酸碱、低浓度的强酸碱、大多数醇类及一些温和的或低浓度有机溶剂共用,**直接与强极性或有机溶剂接触会破坏RC膜。
生物技术RC膜能在pH2-12与4-60℃条件下使用。
生物技术聚偏二氟乙烯(PVDF)膜疏水、惰性及无电抗性,生物技术PVDF膜是实验室透析的革命性进步,能够耐极端高温(130℃)及溶剂条件。
只有生物技术PVDF膜能够经受与大多数的酸碱(包括硝酸)和大多数的有机溶剂(包括DMF)直接接触,**PVDF膜还具有独特的高温高压蒸汽灭菌的能力,可热封进行样品分装。
透析膜的选择1. 选择合适的分子截留量(MWCO):由于透析膜由海绵状横向耦合的聚合物材料构成,截留性能间接的由孔径等级即截留分子量(MWCO)表示,截留率90%的溶质分子大小可更精确的表示膜的MWCO。
然而,溶质的渗透性亦取决于分子形状、水合度、离子电荷与极性,推荐选择膜的MWCO为欲截留物质分子量的一半,两倍于透过物质的分子大小。
2. 选择合适的形状:根据需要,最大程度的方便操作及样品回收。
3. 选择合适的膜:成功进行透析分离的关键是在适当的条件下选用最合适的膜。
选择时可参照下列:o 根据目的选择等级(生物技术或标准);o 根据溶液的化学特性选择膜材质(CE、RC或PVDF);o 根据使用方法选择产品类型(管状、一次性或片状);o 根据溶质分子量在不同种MWCO中选择;o 根据目的选择膜预处理方式;使用方法步骤下面分别介绍透析袋和透析膜使用方法和步骤方法一:透析袋使用前处理方法:1. 把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段。
2. 在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和 10mmol/L EDTA(pH8.0)中将透析袋煮沸10分钟。
3. 用蒸馏水彻底清洗透析袋。
4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟。
5.冷却后,存放于4度,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。
从此时起取用透析袋是必须戴手套。
6. 用前在透析袋内装满水然后排出,将之清洗干净。
透析膜使用前处理方法:1. 戴手套把透析膜剪成适当长度,浸在蒸馏水中 15 min 泡软。
2. 浸入 10 mM sodium bicarbonate 中,并加热至 80℃,一边搅拌至少 30min。
3. 换到 10 mM Na2ull;EDTA 中浸泡 30 min,以新鲜的 EDTA 同样方法处理三次。
4. 再用 80℃蒸馏水洗 30 min,然后换到 20% 酒精中,放在 4℃冰箱中保存。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
通常在试验前需要确定透析袋的截留分子量。
方法二:透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,这种由半透膜制成的袋状容器即透析袋。
将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。
透析袋预处理:透析袋一般制成管状,其扁平宽度为16 mm~50 mm不等。
为防干裂,已用10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
可先用50%乙醇煮沸1小时,再依次用50%乙醇、0.01 mol/L碳酸氢钠和0.001 mol/L EDTA溶液洗涤,最后用蒸馏水冲洗即可使用。
新透析袋如不作如上的特殊处理,则可用沸水煮五至十分钟,再用蒸馏水洗净,即可使用。
使用时,一端用橡皮筋或线绳扎紧,也可以使用特制的透析袋夹夹紧,由另一端灌满水,用手指稍加压,检查不漏,方可装入待透析液,通常要留三分之一至一半的空间,以防透析过程中,透析的小分子量较大时,袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。
含盐量很高的蛋白质溶液透析过夜时,体积增加50%是正常的。
实验过程小技巧:检查透析效果可用1% BaCl2检查(NH4)2SO4,用1% AgNO3 检查NaCl、KCl等。
为了加快透析速度,除多次更换透析液外,还可使用磁子搅拌。
透析的容器要大一些,可以使用大烧杯、大量筒和塑料桶。
小量体积溶液的透析,可在袋内放一截两头烧园的玻璃棒或两端封口的玻璃管,以使透析袋沉入液面以下。
使用者也可以自行设计与制作各种简易的透析装置。
透析袋用后处理:使用后的透析袋洗净后可存于4℃蒸馏水中,若长时间不用,可加少量NaN2,以防长菌。
洗净凉干的透析袋弯折时易裂口,用时必须仔细检查,不漏时方可重复使用。
上海索桥生物科技有限公司备有大量现货透析袋,规格齐全,多种扁宽和截留分子量可供选择,同时还有各种规格的即用型透析袋,用于生化实验中生物大分子的制备过程中,可除去盐、少量有机溶剂、生物小分子杂质和浓缩样品等。
即用型透析袋,使用前只需用蒸馏水冲洗即可使用,生物技术级的透析袋基本不含硫化物和重金属离子。
方法三:产品介绍一、高精度、即用型透析袋,使用前无需处理(生物级,去除了硫化物和重金属离子,保存于防腐液中)即用型透析袋的制造过程没有重金属污染及硫化物,无需预处理,只需用去离子水清洗即可使用,满足对截留分子量精确性和膜纯度的应用。
优点:1. 韧性膜材料,不易破损2. 杂质含量极少,可无需预处理,只需用去离子水清洗即可使用3. 孔径标准均一4. 对溶质的吸附性小5. 可选分子量范围广 100-3000006. 多种扁平宽度可选7. 特有生物技术膜,不含硫化物及金属杂质二、普通干型透析袋(美国联合碳化,甘油涂层,使用前需处理)技术参数:1. PH 稳定范围 : 5-92. 污染物水平: 硫化物<0.3%; 重金属<50ppm3. 化学兼容性: 与很多盐兼容,比如 CaCl2, (NH4)2SO4;还可与分子生物学及酶学中常用的水溶剂、有机溶剂兼容,比如异丙醇、乙醇和丙酮。
4. 温度抵抗性:可煮沸,可高压灭菌。
5. 蛋白吸附:每克透析袋吸附蛋白量小于 1ng。
干型透析袋使用前处理方法:1. 把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段。
2. 在大体积的 2%(W/V)碳酸氢钠和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸 10 分钟。
3. 用蒸馏水彻底清洗透析袋。
4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸 10 分钟。
5. 冷却后,存放于 4 度,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。
从此时起取用透析袋是必须戴手套。
6. 用前在透析袋内装满水然后排出,将之清洗干净。
实验要求不高的可以用简易处理方法:在沸水中煮 10min 即可使用。
透析袋的应用:去除盐类、表面活性剂和溶剂样品溶液的缓冲液置换和 PH 值的调节浓缩蛋白质、多肽和抗体 DNA 电洗脱电泳前稀释蛋白的制备小分子污染物清除结合研究组织培养的提取纯化透析袋的选择1.正确选择合适的截留分子量截留分子量的选择是以预留在膜内的大分子的分子量和将要被除去的小分子污染物的分子量为基础的。
为达到合理有效的分离,需分离的两种物质分子量的比率至少为 25.选择截留分子量的经验法则:选择截留分子量值约为要保留的大分子分子量的一半,以获得至少 90%的保留率。
2.正确选择扁平宽度透析袋扁平宽度的选择取决于样品体积和透析容量。
较小的透析管透析更快;较大的透析管因扩散距离较长透析较慢。
为易于使用,建议使用总长(包括闭合夹和顶部空间)为大约 10-15 厘米的透析袋。
3.透析袋的化学相容性化学相容性主要用作使用指导,不作为化学相容的保证。
温度,浓度,长时间曝光等因素的改变可能影响产品的使用。
建议您自设条件进行测试。
透析袋的使用下述透析程序是一个普遍的基础透析过程。
在开始透析之前应考虑到许多变数。
透析样品溶剂、膜的化学相容性、膜的截留分子量,透析溶剂、透析体积、温度等变量都会影响透析速率,因此,一些应用中下述透析过程可能需要适当的变化。
1.把适量的透析液(缓冲液)加入透析装置。
透析液的体积应为样品体积量的 100 倍。
(例如:在一升透析液中透析 10 毫升的样品)2.裁剪适当长度的透析管。
预留一段额外长度(约占总样品体积量的 20%)作为头部空间。
3.把透析管插入打开的透析夹,在约超出透析夹 3-5 毫米的位置再夹住。
不要折叠透析袋。
4.由透析管开口端将样品装入。
调整一下顶部空间的长度,夹紧透析夹。
5.把透析样品放在合适的透析缓冲液中。
6.透析要根据具体的应用需求。
通常情况下,允许过夜透析。
在持续透析的过程中,至少要进行 3 次全部更换透析液。
建议在(透析后)2-4 小时,6-8 小时和 10-14 小时(第 2 天早晨)更换透析液。