透析袋的选择和使用方法
透析袋选择标准
透析袋选择标准
透析袋是用于肾透析治疗的重要设备,正确选择透析袋能够保证治疗效果。
以下是透析袋选择的标准:
1. 材质:透析袋材质应该符合医疗器械的规定,具有的物理化学性能应该稳定。
目前市场上常见的透析袋材质包括聚砜膜、聚氨酯膜、纳米孔膜等。
2. 透析效果:选择透析袋时应根据病情及透析目的,确定透析效果是否符合要求。
透析袋的透析效果可以通过试验、计算或者使用临床效果进行评估。
3. 透析袋尺寸:透析袋的尺寸应该根据患者的体重、肾功能情况以及透析目的等因素来选择。
透析袋尺寸不合适会导致血液透析不充分,影响治疗效果。
4. 包装清洁度:透析袋的包装应该符合食品卫生安全法规定,保证透析袋的清洁度,避免交叉感染。
5. 正规厂家:透析袋应当从正规厂家购买,避免购买劣质产品或者过期产品。
6. 价格:透析袋的价格应该在合理范围内,价格过高或者过低都应该引起注意,以防购买到伪劣产品。
总之,选择透析袋应该从材质、透析效果、尺寸、包装清洁度、正规厂家、价格等多个方面考虑从而保证透析治疗的效果。
您身边的透析专家--透析袋知识详解
透析袋相关知识原理:透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
是利用小分子能够通过而大分子不能够通过半透膜的原理将分子分离。
通常是将小分子和大分子的混合物放进用半透膜制成的透析袋并浸入大量的缓冲液中,袋内小分子就不断通过膜,大分子则被截留。
透析袋选择:1. 材质选择,多考虑蛋白吸附性:CE纤维素酯<RC再生纤维素<PVDF聚偏氟乙烯。
其次是化学耐受性及热稳定性,顺序CE <RC <PVDF。
PVDF为疏水膜,目前已停产。
市场上CE 膜也只有为数不多的厂家生产,如Spectrum Labs(俗称美国光谱)。
RC膜比较普遍。
2.分子量:为保证收率,一般选择的分子量至少为需要截留分子量的50%-80%,只有当需要分离的集中分子的分子量差至少5倍,才能使用透析有效达到分离的目的。
目前RC膜分子量规格较少,不过能满足大部分用户需求。
CE膜的分子量较为齐全,从0.1 KD到1000KD 都有。
3.前处理类型:廉价的膜出厂时都会有甘油并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,对蛋白及其他活性物质有害,使用前需去除。
即用型的膜生产工艺改进后基本不含上述杂质,可纯水浸泡活化后直接使用。
4.品牌选择:建议选择专业的能提供支持的厂商,要是一问三不知那就不好了,有些商家连自己卖的品牌都不清楚,更别提什么认证之类的了。
实际上膜的材料并不值钱,制作工艺比较重要。
不同厂家生产的膜孔径均一性差别很大,样品截留效率相应不同,而这些并不是肉眼所能观察出来的,如若选择不当,很浪费时间,样品如果珍贵就后悔莫及。
Some tips助您提高透析效率:1.采用直径较小的透析膜:透析速度正比于透析浓度梯度差及膜比表面积。
同样长度的膜,扁平宽小的比表面积大。
2.透析温度升高可加快透析:根据布朗运动原理,温度越高,液体分子运动越剧烈,分子的扩散速度也越快。
此条仅限于对温度不敏感的膜及样品。
3.搅拌加速:使用搅拌棒或者磁力搅拌器,加速膜两侧的分子浓度差,能有效提高透析效率。
透析袋使用前如何处理
透析袋使用前如何处理透析袋是透析治疗过程中不可或缺的设备,在使用前需要进行一系列的处理措施,以确保其安全和有效性。
下面将详细介绍透析袋使用前的处理步骤。
1.检查透析袋的包装和外观。
在使用透析袋之前,首先需要检查其包装是否完好无损,并查看外观是否有明显的破损或污染。
如果发现袋子被损坏或污染,应立即更换新的袋子。
2.检查透析袋的有效期。
每个透析袋都有一定的有效期限,使用前应确认透析袋是否在有效期内。
过期的透析袋可能会导致治疗效果不佳或产生不良反应。
3.消毒双手和操作区域。
在开始处理透析袋之前,需要彻底洗手并消毒双手和操作区域,以避免引入细菌或其他病原体。
4.打开透析袋的包装。
将透析袋放在干净的工作台上,然后撕开包装。
在打开包装时应尽量避免触碰内层透析袋的表面,以防止袋子被污染。
5.检查透析袋的封口。
仔细检查透析袋的封口是否完好,并确保没有明显的泄漏或破损。
如发现问题,应立即更换新的袋子。
6.清洁透析袋的连接部位。
透析袋的连接部位是与透析机器相连接的部分,需要确保其干净和无污染。
可以使用消毒酒精或其他适当的清洁剂擦拭连接部位,然后用无菌纱布擦干。
8.检查透析袋的气体泄漏和渗漏。
在连接透析袋到透析机器之前,可以通过轻轻按压透析袋来检查是否有气体泄漏。
此外,还可以通过检查透析袋表面是否有潮湿或药液渗漏来确定袋子是否完好。
9.连接透析袋到透析机器。
根据透析机器的使用说明,将透析袋正确连接到机器上,并确保连接处紧密且无泄漏。
在连接完成后,再次检查连接处是否牢固。
10.验证透析袋的压力和温度。
在开始透析治疗之前,需要验证透析袋中的液体是否具有正确的压力和温度。
透析袋的压力和温度应符合医生或透析治疗师的建议。
综上所述,透析袋使用前的处理步骤非常重要,可以确保透析治疗的安全和有效性。
正确处理透析袋可以避免袋子污染和损坏,同时也可以减少不必要的风险。
在使用透析袋前,请务必严格按照上述步骤进行处理,以保障患者的健康和治疗效果。
透析袋 分子量
透析袋 分子量
透析袋是一种用于分离和浓缩生物大分子的工具。
它主要由半透膜材料制成,具有选择性地筛选分子量小于其孔径的分子,从而将分子量大的溶质留在袋内。
在选择透析袋时,分子量是一个非常重要的参数。
通常,透析袋的孔径会根据待处理溶液中目标溶质的分子量来选择。
较小的分子量通常需要使用较小的孔径
的透析袋,而较大的分子量则需要使用较大的孔径的透析袋。
因此,透析袋的分子量大小通常是由其孔径大小来决定的。
常见的透析袋分子量包括1000Da、3000Da、5000Da、10000Da、20000Da等不同规格,用户可以根
据需要选择合适的规格以达到最佳的透析效果。
需要注意的是,由于透析袋的选择性,不同分子量的透析袋不仅可以用于分离和浓缩不同大小的溶质,还可以用于分离和浓缩不同分子量的蛋白质、核酸等生物大分子。
因此,在使用透析袋时,需要根据具体的实验要求选择合适的分子量规格,以达到最佳的实验效果。
透析袋使用方法和注意事项
透析袋使用方法和注意事项透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,就叫做透析袋。
自Thomas Graham 1861年发明透析方法至今已有一百多年。
透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。
在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。
透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜,目前常用的是美国Union Carbide (联合碳化物公司)和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量,缩写为MwCO)通常为1万左右。
商品透析袋制成管状,其扁平宽度为23 mm~50 mm不等。
为防干裂,出厂时都用10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
可先用50%乙醇煮沸1小时,再依次用50%乙醇、0.01 mol/L碳酸氢钠和0.001 mol/L EDTA溶液洗涤,最后用蒸馏水冲洗即可使用。
实验证明,50%乙醇处理对除去具有紫外吸收的杂质特别有效。
使用后的透析袋洗净后可存于4℃蒸馏水中,若长时间不用,可加少量NaN2,以防长菌。
洗净凉干的透析袋弯折时易裂口,用时必须仔细检查,不漏时方可重复使用。
透析袋原理
透析袋原理
透析袋是一种常用于生物化学实验室中的实验工具,它通过半透膜的特性,实现了对生物分子的分离和纯化。
透析袋原理是基于半透膜对不同分子大小和性质的选择性透过性,从而实现对混合物中目标分子的分离和富集。
在生物化学实验中,透析袋的原理被广泛应用于蛋白质纯化、离子浓度调节等领域。
透析袋的半透膜是其实现分离的关键。
半透膜是一种特殊的薄膜,它具有对溶质分子的选择性透过性。
当混合物与半透膜接触时,溶质分子将根据其大小和性质被选择性地透过或阻挡。
这种选择性透过性使得透析袋能够实现对混合物中不同分子的有效分离。
在透析袋中,混合物被置于半透膜的内部,然后将透析袋悬浮在适当的缓冲液中。
由于半透膜的存在,混合物中的小分子溶质可以通过半透膜,而大分子溶质则被阻挡在透析袋内部。
这样,经过一段时间的透析,我们可以得到缓冲液中富集了小分子溶质的溶液,而透析袋内部则富集了大分子溶质。
透析袋原理的应用不仅局限于生物化学实验室,它在生物医药领域也有着重要的应用。
例如,在蛋白质纯化过程中,透析袋可以帮助实现对目标蛋白的纯化和富集,从而为后续的实验和研究提供了可靠的样品。
此外,在生物药物制剂中,透析袋也常被用于调节药物的离子浓度,以确保药物的稳定性和安全性。
总的来说,透析袋原理是基于半透膜的选择性透过性,通过将混合物置于透析袋中,利用溶质分子的大小和性质差异,实现对混合物中目标分子的分离和富集。
透析袋原理在生物化学实验和生物医药领域有着广泛的应用,为科研和生产提供了重要的技术支持。
希望通过对透析袋原理的深入理解,能够更好地应用于实验和生产实践中,推动生物化学领域的发展和进步。
透析袋说明
透析袋使用说明产品介绍一、高精度、即用型透析袋,使用前无需处理(生物级,去除了硫化物和重金属离子,保存于防腐液中)即用型透析袋的制造过程没有重金属污染及硫化物,无需预处理,只需用去离子水清洗即可使用,满足对截留分子量精确性和膜纯度的应用。
优点:1. 韧性膜材料,不易破损2. 杂质含量极少,可无需预处理,只需用去离子水清洗即可使用3. 孔径标准均一4. 对溶质的吸附性小5. 可选分子量范围广 100-3000006. 多种扁平宽度可选7. 特有生物技术膜,不含硫化物及金属杂质二、普通干型透析袋(美国联合碳化,甘油涂层,使用前需处理)技术参数:1. PH 稳定范围 : 5-92. 污染物水平: 硫化物<0.3%; 重金属<50ppm3. 化学兼容性: 与很多盐兼容,比如 CaCl2, (NH4)2SO4;还可与分子生物学及酶学中常用的水溶剂、有机溶剂兼容,比如异丙醇、乙醇和丙酮。
4. 温度抵抗性:可煮沸,可高压灭菌。
5. 蛋白吸附:每克透析袋吸附蛋白量小于 1ng。
干型透析袋使用前处理方法:1. 把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段。
2. 在大体积的 2%(W/V)碳酸氢钠和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸 10 分钟。
3. 用蒸馏水彻底清洗透析袋。
4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸 10 分钟。
5. 冷却后,存放于 4 度,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。
从此时起取用透析袋是必须戴手套。
6. 用前在透析袋内装满水然后排出,将之清洗干净。
实验要求不高的可以用简易处理方法:在沸水中煮 10min 即可使用。
透析袋的应用:去除盐类、表面活性剂和溶剂样品溶液的缓冲液置换和 PH 值的调节浓缩蛋白质、多肽和抗体 DNA 电洗脱电泳前稀释蛋白的制备小分子污染物清除结合研究组织培养的提取纯化透析袋的选择1.正确选择合适的截留分子量截留分子量的选择是以预留在膜内的大分子的分子量和将要被除去的小分子污染物的分子量为基础的。
透析袋的使用方法
透析袋的使用方法透析袋是一种用于肾脏透析治疗的重要工具,它能够有效地清除体内的代谢废物和多余的液体,帮助肾脏患者维持体内的水电解质平衡。
正确的使用方法对于透析治疗的效果至关重要。
下面我们将详细介绍透析袋的使用方法,希望能够帮助医护人员和患者正确地进行透析治疗。
首先,使用透析袋前需要做好充分的准备工作。
医护人员应该先检查透析袋的包装是否完好,确认透析袋的有效期,避免使用过期的产品。
同时,还需要准备好透析液和其他辅助工具,确保透析治疗的顺利进行。
接下来,打开透析袋的包装,注意不要损坏袋体。
在使用透析袋之前,医护人员需要先检查袋体是否有漏洞或损坏,确保透析过程中不会发生泄漏。
同时,还需要注意检查透析袋上的标识和参数,确保选择的透析袋符合患者的治疗需求。
然后,将透析袋连接到透析机或其他透析设备上。
在连接过程中,需要注意透析袋和透析机的连接口是否牢固,避免在治疗过程中出现脱落或松动的情况。
同时,还需要按照设备的操作说明正确地设置透析参数,确保透析治疗的安全进行。
在透析治疗过程中,医护人员需要密切关注患者的情况,定期检查透析袋和透析机的运行状态。
如果发现透析袋出现漏洞或其他异常情况,需要及时更换新的透析袋,避免影响治疗效果。
同时,还需要根据患者的情况调整透析参数,确保治疗的有效性和安全性。
最后,在透析治疗结束后,需要将用过的透析袋进行正确的处理和清洁。
医护人员应该按照规定的程序将透析袋进行分类和包装,避免对环境造成污染。
同时,还需要对透析设备进行彻底的清洁和消毒,确保下次使用时的安全性。
总之,透析袋的使用方法对于透析治疗的效果和患者的健康至关重要。
医护人员和患者在使用透析袋时需要严格按照操作规程进行,确保透析治疗的安全和有效。
希望本文介绍的透析袋使用方法能够对大家有所帮助,帮助大家更好地进行透析治疗。
透析和凝胶过滤的操作方法
透析和凝胶过滤的操作方法透析和凝胶过滤是生物化学实验中常用的方法。
透析是一种分离物质的方法,通过利用溶液中溶质的分子量和大小的差异,使较小的溶质从溶液中扩散到较大的溶液中。
而凝胶过滤是一种通过物质在凝胶中的扩散和筛分作用实现分离的方法。
接下来,我将分别介绍透析和凝胶过滤的操作方法。
透析的操作方法:透析是一种用半透膜分离和去除溶质的方法。
透析具体操作步骤如下:1. 准备透析袋:将透析袋浸泡在去离子水中,洗涤几次以去除残留的药物或其他污染物。
2. 预先处理溶液:将待透析溶液与所需的缓冲液调整至适当的pH和浓度。
3. 充填透析袋:将预处理好的溶液注入透析袋中,须留出透析袋内部的一定空间,避免溶液漫出。
4. 定量浸泡:将充填好的透析袋放入容器中,加入足够量的缓冲液以覆盖整个透析袋。
5. 进行透析:将容器放入摇床或温箱中,以适当的速度和时间进行透析。
透析速度应根据具体的实验条件而定。
6. 换液:透析过程中,溶质将通过透析袋的半透膜扩散到缓冲液中,透析袋外的缓冲液中溶质浓度逐渐接近溶液中溶质浓度。
此时,需要定期换液,将缓冲液中的溶质排除,以保持透析的效果。
7. 结束透析:根据实验需要,透析时间为几个小时或几天。
在透析结束后,取出透析袋中的溶液并进行深度处理和分析。
凝胶过滤的操作方法:凝胶过滤是利用凝胶晶体的筛分作用将不同分子大小的物质分离开的方法。
凝胶过滤具体操作步骤如下:1. 准备凝胶:根据实验要求,选择合适的凝胶材料。
例如,用于蛋白质分离可以选择聚丙烯酰胺凝胶或聚丙烯酰胺葡萄糖凝胶等。
2. 制备凝胶过滤装置:将凝胶与缓冲液浸泡在盒子中,确保凝胶不受气泡或异物的影响。
3. 加载样品:将待分离的样品加至凝胶上,注意避免样品溶液与凝胶初始接触。
4. 开始过滤:根据溶质的分子大小,调整过滤装置中缓冲液的流速。
较小分子的溶质较容易通过凝胶,溶质分子较大的则难以通过凝胶,因此能实现分离。
5. 收集分离物:根据实验要求,选择合适的分离物收集方法,例如,使用收集管收集出流液,在适当的时间间隔收集不同分子大小的分离物。
透析袋的使用流程
透析袋的使用流程1. 准备工作在使用透析袋进行透析治疗之前,需要进行一些准备工作。
如下所示:•确保透析袋的完整性和有效性。
检查透析袋是否有损坏或过期,必要时更换透析袋。
•检查透析设备是否正常运转。
确保透析机正常工作且各项参数调整到正确的数值。
•为患者准备安全、洁净的透析环境。
清洁透析椅和周围的工作区,更换透析椅上的床单和垫子。
2. 透析袋的准备透析袋的准备是透析治疗中的重要环节。
下面是透析袋的准备流程:•洗手。
在进行透析袋的准备之前,务必进行彻底的手部卫生,使用肥皂和温水洗手至少20秒,并用纸巾擦干。
•打开透析袋包装。
根据透析袋包装上的指示,打开透析袋的包装。
注意不要触摸内部连接管道和透析液口。
3. 透析袋的连接透析袋的连接是透析治疗中的关键步骤。
下面是透析袋的连接流程:•连接导管。
将透析袋的导管插入透析机的连接口。
确保插入正确且连接牢固。
•连接透析机。
将透析袋连接到透析机上。
根据透析机的指示,将透析袋固定在透析机上。
4. 透析治疗过程透析袋的连接完成后,即可开始透析治疗。
透析治疗是一个时间较长的过程,需要密切观察患者的情况并根据需要进行调整。
下面是透析治疗过程中需要注意的事项:•监测透析液的流速。
在透析机上设置透析液的流速,根据患者的情况进行调整。
•观察患者的症状和反应。
透析过程中,密切观察患者的症状和反应,如头晕、恶心等,并及时报告给医护人员。
•定期监测患者的生命体征。
透析过程中,定期监测患者的心率、血压等生命体征,确保患者的状况稳定。
5. 透析治疗结束透析治疗通常在一定的时间内完成,当透析时间到达时,即可结束透析治疗。
结束透析治疗时,需要进行以下步骤:•关闭透析机。
按照透析机的操作步骤,将透析机关闭,停止透析液的输送。
•断开透析袋连接。
在确保透析袋内没有透析液的情况下,将透析袋从透析机上断开。
•清理工作区。
结束透析治疗后,清理工作区,包括透析椅和周围的设备。
6. 透析袋的处理透析治疗结束后,需要妥善处理透析袋,避免污染和传播疾病。
蛋白质透析法的原理
蛋白质透析法的原理
蛋白质透析是一种分离和纯化蛋白质的常用方法,其原理基于分子大小的差异。
透析通过膜的孔径选择性地将较小的分子(如溶剂、盐和小分子物质)与较大的蛋白质分离开来。
这种方法常用于去除溶液中的杂质、离子或小分子物质,以获取纯净的蛋白质样品。
蛋白质透析的实验操作通常涉及以下步骤:
1. 准备透析袋:选择适当的透析膜袋,将其切割为所需长度,并用透析缓冲液润湿。
2. 收集蛋白质溶液:将待透析的蛋白质溶液收集到管中,注意避免任何可能的污染。
3. 外滤:将收集的蛋白质溶液倒入透析袋中,并将袋子的两端扎紧。
4. 放入透析缓冲液:将含有透析缓冲液的容器放入离心机中,离心以去除气泡。
5. 将透析袋浸入缓冲液中:将装有蛋白质溶液的透析袋悬挂在含有透析缓冲液的容器中。
6. 换液:缓冲液通过透析膜进入透析袋,小分子物质则从透析袋中扩散出去。
通过以上步骤,较小的分子可从蛋白质溶液中移除,而蛋白质则保留在透析袋内。
透析过程中,缓冲液需定期更换,以保持浓度梯度,促进小分子物质的扩散。
透析的时间取决于溶液中小分子的浓度和大小,以及蛋白质的分子量。
常见的透析膜孔径范围为1-10 kDa,透析时间通常从几小时到过夜不等。
蛋白质透析方法广泛应用于分离、纯化或去除杂质等实验操作中。
这种方法相对简单且高效,适用于小规模的蛋白质样品处理。
但需要注意的是,透析过程中可能会存在蛋白质流失的问题,因此需要合理控制透析时间和缓冲液的组成,以确保透析效果的最大化。
透析袋的使用方法
透析袋的使用方法透析袋是一种常用于肾脏透析治疗的医疗器械,它能够有效地清除体内的代谢废物和多余水分,帮助患者维持体内的水电解质平衡。
正确使用透析袋对于治疗效果和患者的健康都至关重要。
下面将介绍透析袋的使用方法。
首先,准备工作。
在使用透析袋之前,需要先准备好透析液、注射器、消毒酒精棉球、手套等物品。
确保透析袋的包装完好无损,没有破损或污染。
然后,洗手并戴上手套,用消毒酒精棉球擦拭透析袋的连接口和周围皮肤,保持清洁。
接着,连接透析袋。
将透析袋连接到导管上,并确保连接口处紧固可靠,不漏液。
在连接过程中,要小心操作,避免造成污染或感染。
连接好后,检查一遍连接处是否牢固,以确保透析液不会泄漏。
然后,填充透析液。
使用注射器将透析液缓慢地注入透析袋内,避免产生气泡。
填充透析液的过程中,要注意透析袋的容量,不要超出其承载范围。
填充完毕后,轻轻挤压透析袋,将残留在导管中的气泡排出,确保透析袋内无气泡。
接下来,进行透析治疗。
将连接好的透析袋放置在透析机中,按照医生的建议和治疗方案进行透析治疗。
在治疗过程中,要密切观察透析袋的情况,确保透析液的流速和温度符合要求,同时留意患者的生命体征和不适症状。
最后,处理透析袋。
在治疗结束后,将透析袋从导管上取下,用消毒酒精棉球擦拭连接口和周围皮肤,保持清洁。
然后,将透析袋进行正确的处置,避免造成污染和环境污染。
总之,正确使用透析袋对于患者的治疗效果和健康至关重要。
在使用透析袋的过程中,要严格按照操作规程进行,确保操作的安全和准确性。
同时,定期对透析袋进行检查和维护,确保其性能和质量符合要求。
希望本文所介绍的透析袋使用方法能够为医护人员和患者提供参考,确保透析治疗的安全和有效性。
透析袋透析法的原理
透析袋透析法的原理
透析袋透析法是一种通过半透膜进行溶质分离的方法,透析袋是一种半透膜袋,在其中的溶质可以通过膜孔而不通过水分子移动,从而实现溶质的分离。
透析袋透析法的原理基于溶质的扩散。
当将溶液放入透析袋中时,膜孔的大小可以选择性地阻止大分子或离子通过,而允许小分子通过。
透析袋通过选择合适的半透膜来实现分离。
在透析过程中,溶质的浓度不同于透析袋内外溶液的浓度。
根据溶质的扩散原理,通过透析袋的溶质会扩散到透析袋外的溶液中,而溶质浓度较高的溶液中的溶质会扩散到透析袋内的溶液中。
这个过程会持续进行,直到透析袋两侧的溶液浓度达到平衡。
透析袋透析法主要用于分离大分子溶质和小分子溶质,比如蛋白质和小分子有机物。
透析袋的选取应根据所需分离的目标溶质的分子大小和性质来确定。
透析袋透析法是一种简便、有效的分离方法,广泛应用于生物化学实验室和临床医学领域。
透析操作实验报告
透析操作实验报告1.了解透析操作的原理和方法;2.掌握透析操作的步骤和注意事项;3.熟悉透析操作的常见问题及解决方法。
实验原理:透析是一种通过半透膜隔离来使得溶液中的小分子通过,而较大分子不能通过的分离技术。
透析操作一般用于去除生物样品中的低分子量溶质、去除污染物或富集部分分子等。
实验仪器和试剂:1.透析袋:透析袋是一种半透膜材料,可隔离不同分子量的溶质。
2.透析缓冲液:用于维持透析液的pH和温度稳定。
实验步骤:1.准备透析袋:将透析袋浸泡在去离子水中,排出其中的气泡,并将其封两头。
2.制备透析样品:将待透析的溶液或混悬液放入透析袋中,封好。
3.加入透析缓冲液:将封好的透析袋放入透析缓冲液中,注意不要让透析液中透析袋碰撞到容器壁。
4.透析搅拌:启动搅拌装置,保证透析袋内外液体充分混合,有助于溶质的扩散。
5.透析时间控制:透析时间根据实验需求进行控制,通常需要数小时至数天不等。
6.透析完毕:透析完成后,取出透析袋中的溶液样品,进行进一步的分析或处理。
实验注意事项:1.透析袋的选择:应根据实验需求选择适当的透析袋,确保目标溶质能够通过透析袋。
2.透析液的选择:透析液的选择要考虑目标溶质的性质,如pH、离子浓度等。
3.透析温度的控制:透析温度应在实验所需范围内进行控制,常见的温度为室温或37C。
4.透析液的准备:透析液的配制要准确,避免出现溶质浓度变化大的情况。
5.透析搅拌的控制:透析搅拌要稳定,以确保透析袋内外液体充分接触,溶质扩散快速进行。
6.透析时间的控制:透析时间的长短要根据目标溶质的分子量和透析效率进行控制。
实验结果分析:通过透析操作,溶质的扩散通过透析袋进行,使得溶质从高浓度透析液逐渐扩散到低浓度透析液中,达到富集或去除溶质的目的。
实验结果应根据实验目的进行分析,可以使用各种分析方法进行定量或定性分析。
常见问题及解决方法:1.透析过程中透析袋破裂:应检查透析袋的质量,确保没有破损或变形情况;若透析液中存在固体颗粒,应先过滤再透析,避免堵塞透析袋。
透析纯化蛋白_实验报告
一、实验目的1. 理解透析法在蛋白质纯化中的应用原理。
2. 掌握透析纯化蛋白质的操作步骤。
3. 评估透析纯化蛋白质的效果。
二、实验原理透析法是一种利用半透膜将蛋白质与分子量较小的杂质(如无机盐、小分子有机物等)分离的方法。
半透膜具有选择性透过性,允许小分子物质通过,而大分子蛋白质则被截留在膜内。
通过不断更换透析液,可以逐步去除蛋白质中的杂质,从而实现蛋白质的纯化。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 蛋白质溶液(如鸡蛋清、牛血清白蛋白等)- 透析袋(孔径约为10kD)- 缓冲液(pH 7.4,0.1M Tris-HCl)- 离心机- 烧杯- 移液器- 恒温水浴锅- 紫外-可见分光光度计2. 实验仪器:- 透析袋- 移液器- 烧杯- 离心机- 恒温水浴锅- 紫外-可见分光光度计四、实验步骤1. 准备透析袋:将透析袋放入烧杯中,用蒸馏水冲洗干净,然后用缓冲液浸泡,以去除透析袋内的杂质。
2. 配制蛋白质溶液:取适量蛋白质溶液,用缓冲液稀释至一定浓度。
3. 透析:将配制好的蛋白质溶液转移至透析袋中,然后将透析袋放入另一装有缓冲液的烧杯中,确保透析袋完全浸没在缓冲液中。
4. 更换透析液:每隔一段时间,更换烧杯中的缓冲液,直至透析袋内溶液的颜色基本不变。
5. 收集透析后的蛋白质溶液:将透析袋内的蛋白质溶液收集至离心管中,离心去除透析袋。
6. 蛋白质浓度测定:取一定量的透析后的蛋白质溶液,用紫外-可见分光光度计测定其浓度。
7. 结果分析:对比透析前后的蛋白质浓度,评估透析纯化蛋白质的效果。
五、实验结果与分析1. 透析前蛋白质浓度为1.0mg/mL,透析后蛋白质浓度为0.8mg/mL。
2. 透析过程中,蛋白质溶液颜色逐渐变浅,说明杂质被去除。
3. 透析后的蛋白质溶液经过离心后,无明显沉淀,说明蛋白质未发生变性。
六、实验结论通过本实验,我们成功地将蛋白质溶液中的杂质去除,实现了蛋白质的纯化。
透析法是一种简单、有效的蛋白质纯化方法,适用于分离和纯化分子量较大的蛋白质。
透析袋的选择和使用方法
透析只需要使用专用的半透膜即可完成.通常是将半自Thomas Graham 1861年发明透析方法至今已有一百多年.透析已成为生物化学实验室最简便最经常使用的分离纯化技术之一.在生物年夜分子的制备过程中, 除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术.透析只需要使用专用的半透膜即可完成.通常是将半透膜制成袋状, 将生物年夜分子样品溶液置入袋内, 将此透析袋浸入水或缓冲液中, 样品溶液中的年夜分子量的生物年夜分子被截留在袋内, 而盐和小分子物质不竭扩散透析到袋外, 直到袋内外两边的浓度到达平衡为止.保管在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保管液”, 袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”.透析的动力是扩散压, 扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的.透析的速度反比于膜的厚度, 正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度, 还正比于膜的面积和温度, 通常是4℃透析, 升高温度可加快透析速度.透析膜可用植物膜和玻璃纸等, 但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜, 目前经常使用的是美国Union Carbide (联合碳化物公司)和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管, 截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物年夜分子的最小分子量, 缩写为MwCO)通常为1 万左右.商品透析袋制成管状, 其扁平宽度为23 mm~50 mm不等.为防干裂, 出厂时都用10%的甘油处置过, 并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质, 它们对卵白质和其它生物活性物质有害, 用前必需除去.可先用50%乙醇煮沸1小时,再依次用50%乙醇、0.01 mol/L碳酸氢钠和0.001 mol/L EDTA溶液洗涤, 最后用蒸馏水冲刷即可使用.实验证明, 50%乙醇处置对除去具有紫外吸收的杂质特别有效.使用后的透析袋洗净后可存于4℃蒸馏水中, 若长时间不用, 可加少量NaN2, 以防长菌.洗净凉干的透析袋弯折时易裂口, 用时必需仔细检查, 不漏时方可重复使用.新透析袋如不作如上的特殊处置, 则可用沸水煮五至十分钟, 再用蒸馏水洗净, 即可使用.使用时, 一端用橡皮筋或线绳扎紧, 也可以使用特制的透析袋夹夹紧, 由另一端灌满水, 用手指稍加压, 检查不漏, 方可装入待透析液, 通常要留三分之一至一半的空间, 以防透析过程中, 透析的小分子量较年夜时, 袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破.含盐量很高的卵白质溶液透析过夜时, 体积增加50%是正常的.为了加快透析速度, 除屡次更换透析液外, 还可使用磁子搅拌.透析的容器要年夜一些, 可以使用年夜烧杯、年夜量筒和塑料桶.小量体积溶液的透析, 可在袋内放一截两头烧园的玻璃棒或两端封口的玻璃管, 以使透析袋沉入液面以下.检查透析效果的方法是:用1% BaCl2检查(NH4)2SO4, 用1% AgNO3 检查NaCl、KCl等.为了提高透析效率, 还可以使用各种透析装置.使用者也可以自行设计与制作各种简易的透析装置.美国生物医学公司(Biomed Instruments Inc.)生产的各种型号的Zeineh 透析器, 由于使用对流透析的原理, 使透析速度和效率年夜年夜提高.根据个人使用经验, 建议使用透析袋效果比力好, 还有具体需要什么规格的要看你的目的卵白量有多年夜, 才华决定使用多年夜的截留分子量的透析袋, 一般截留量越年夜价格也就会越高, 还有就是透析袋宽度的选择, 要看你的实验一次需要透析几多量来决定.目前我的实验室使用的是上海生工的透析袋, 宽度70mm 普通型的!透析袋的规格和使用方法默认分类2009-12-16 12:11:02阅读931评论0字号:年夜中小直径mm 压平宽度(半周长)mm 截留分子量Da22 34350070006 101400016 251400022 341400028 441400035 551400014000透析袋:技术参数:◎ PH 稳定范围:5-9◎污染物水平:硫化物<0.3%, 重金属<50ppm◎化学兼容性:与很多盐兼容, 比如CaCl2,(NH4)2SO4, 还可与分子生物学及酶学中经常使用的水溶剂、有机溶剂兼容, 如异丙醇、乙醇和丙酮.◎温度抵当性:可煮沸, 可高压灭菌◎卵白吸附:每克透析袋吸附卵白量小于1ng使用前处置:1、将透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段2、在年夜体积的2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(PH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟3、用蒸馏水完全清洗透析袋4、放在1mmol/L EDTA(PH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟5、冷却后, 寄存于4度, 必需确保透析袋始终浸没在溶液内.从此时起取用透析袋是必需带手套的.6、用前在透析袋内装满水然后排出, 将之清洗干净.贮存条件:透析袋可寄存于10-29度;每次使用后将余下的膜放回袋子并密封好, 以防干裂透析即用半透膜(透析袋)将年夜分子卵白质分离出来.在生物年夜分子制备过程中除去盐、少量有机溶剂、生物小分子杂质和浓缩样品, 透析法最简便.技术指标:MWCO(截留分子量), 单元:Diatoms .透析时, 小于MWCO的分子在透析膜二边溶液浓度差发生的扩散压作用下渗过透析膜, 其速度与浓度梯度、膜面积及温度成正比.欲快速透析可采纳直径较小的透析袋以增加膜面积.经常使用温度:4℃, 升温、更换袋外透析液或用磁力搅拌器, 均能提高透析速度.使用须知1某些化学物质会破坏透析袋微孔且不成逆转.计有:烃、卤化烃、醇、酮、酯、胺、丙酮、甲基乙基酮、二氧杂环乙烷、环已烷等.酸(甲酸、乙酸、稀强酸如5%HCI), 10%苯酚, 30%双氧水.甲醇、乙醇:浓度小于5%时, 透析功能在, 而MWCO变动.2卵白质吸附量, 小于1ug/克, (以透析袋干重计).正常使用PH值5-9(可重复使用).极限使用PH值2-12(一次性使用).3前处置:煮沸5分钟后用蒸馏水60℃洗冲2分钟, 置4℃蒸馏水中待用.长期保管液:0.05%-0.1%叠氮钠, 1mMEDTA或50%甘油, 温度(4℃), 使用前以蒸馏水洗净.4即用型透析袋毋须前处置, 使用前用蒸馏水洗净即可.5透析袋装液时应留1/3-1/2空间, 以防透析过程中, 袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破(含盐量高的卵白质溶液透析过夜时, 体积增加50%系正常情况).6使用时须戴手套.7透析效果检查用1%氯化钡检查硫酸铵、硫酸钠1%硝酸银检查氯化钠、氯化钾透析袋的物理抗力:透析袋由再生纤维素构成, 可以煮沸或消毒.一旦已呈湿状即不成完全干燥, 除非使用甘油重处置, 内含有液体的透析袋可冷冻, 另外, 透析袋的生物学抗力决定着透析袋的保管.透析袋的使用后保管:透析袋对纤维素活性是敏感的, 尤其在湿状时, 可以防止溶纤维素的微生物生长, 通过将透析袋保管在4摄氏度含有0.05%叠氮钠溶液, 也可保管在50%甘油溶液.。
如何正确选择透析袋
如何正确选择透析袋背景:spectrumlabs提供低蛋白结合的生物技术级纤维素酯(CE) 透析膜管和Float-A-Lyzer® G2即用型透析装置,包括100-1,000,000道尔顿的9种截留分子量规格。
膜截留分子量是指截留90%样品时的膜孔径大小,在蛋白纯化应用中,选择最适截留分子量的透析膜是去除不需要的小分子污染物所必须的。
由于在脱盐、pH值调整及缓冲液置换等应用中,离子物质通常小于膜孔径,且至少比大分子物质小1000倍,所以选择截留分子量在3.5 kD至100kD 之间的膜即可在1-2天内达到所需的分离效果。
唯一需要考虑的是,所选的膜截留分子量应小于需要截留的大分子物质的分子量。
透析是对不稳定的蛋白、敏感的酶以及精细化合物进行温和分离的首选方法,以维持物质的活性、功能以及稳定的水相环境。
但是,需要清除的小分子污染通常只比目标蛋白小10-100倍,所以并不是所有截留分子量规格的膜都可以达到相同的分离效果。
因此,在纯化大分子物质的应用中,选择最佳的膜截留分子量尤为重要。
目的:比较使用截留分子量分别为20kD、50kD和100kD的Float-A-Lyzer® G2 即用型透析装置(FAL-G2)透析24h后的相对分离效果,实验处理目标为截留抗体(IgG,166kD),并清除不需要的小分子物质:分子量比抗体小100倍的维他命B12(Vit B12,1.35kD)以及分子量比抗体小10倍的细胞色素C(Cyt C,12.4kD)。
其次,为透析应用建立通用的最佳截留分子量确定方法,如蛋白纯化。
方法:1. 3种不同分子量溶液制备如下:目标蛋白(IgG-166kD:1 mg/ml 0.9% PBS),1/10分子量污染物(细胞色素C-12.4kD:0.2 mg/ml 0.9%PBS)和1/100分子量污染物(维他命B12-1.35kD:0.2mg/ml 0.9% PBS)。
2. 9个FAL-G2(5ml容量规格)每个上样4ml溶液,具体设置如下:IgG分别上样至20kD、50kD和100kD 截留分子量膜管;Cyt C分别上样至20kD、50kD和100kD截留分子量膜管;Vit B12分别上样至20kD、50kD和100kD截留分子量膜管。
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透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,就叫做透析袋。
自ThomasGraham1861年发明透析方法至今已有一百多年。
透析已成为生物化学实
验室最简便最常用的分离纯化技术之一。
在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。
透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜,目前常用的是美国UnionCarbide(联合碳化物公司)和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管,
截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量,缩写为MwCO)通常为
1万左右。
商品透析袋制成管状,其扁平宽度为23mm~50mm不等。
为防干裂,出厂时都用10%
的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
可先用50%乙醇煮沸1小时,再依次用50%乙醇、0.01mol/L碳酸氢钠和0.001mol/LEDTA溶液洗涤,最后用蒸馏水冲洗即可使用。
实
验证明,50%乙醇处理对除去具有紫外吸收的杂质特别有效。
使用后的透析袋洗净后可存
于4℃蒸馏水中,若长时间不用,可加少量NaN2,以防长菌。
洗净凉干的透析袋弯折时易
裂口,用时必须仔细检查,不漏时方可重复使用。
新透析袋如不作如上的特殊处理,则可用沸水煮五至十分钟,再用蒸馏水洗净,即可使用。
使用时,一端用橡皮筋或线绳扎紧,也可以使用特制的透析袋夹夹紧,由另一端灌满水,用手指稍加压,检查不漏,方可装入待透析液,通常要留三分之一至一半的空间,以防透析过程中,透析的小分子量较大时,袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。
含盐量很高的蛋白质溶液透析过夜时,体积增加50%是正常的。
为了加快透析速度,除多次更换透析液外,还可使用磁子搅拌。
透析的容器要大一些,可以使用大烧杯、大量筒和塑料桶。
小量体积溶液的透析,可在袋内放一截两头烧园的玻璃棒或两端封口的玻璃管,以使透析袋沉入液面以下。
检查透析效果的方法是:用1%BaCl2检查(NH4)2SO4,用1%AgNO3检查NaCl、
KCl等。
为了提高透析效率,还可以使用各种透析装置。
使用者也可以自行设计与制作各种简易的透析装置。
美国生物医学公司(BiomedInstrumentsInc.)生产的各种型号的Zeineh透
析器,由于使用对流透析的原理,使透析速度和效率大大提高。
根据个人使用经验,建议使用透析袋效果比较好,还有具体需要什么规格的
要看你的目的蛋白量有多大,才能决定使用多大的截留分子量的透析袋,一般截
留量越大价格也就会越高,还有就是透析袋宽度的选择,要看你的实验一次需要
透析多少量来决定。
目前我的实验室使用的是上海生工的透析袋,宽度70mm普
通型的!
透析袋的规格和使用方法
默认分类2009-12-1612:11:02阅读931评论0字号:大中小
直径mm压平宽度(半周长)mm截留分子量Da
22343500
22347000
61014000
162514000
223414000
284414000
355514000
497714000
透析袋:
技术参数:
◎PH稳定范围:5-9
◎污染物水平:硫化物<0.3%,重金属<50ppm
◎化学兼容性:与很多盐兼容,比如CaCl2,(NH4)2SO4,还可与分子生物学及酶学中常用的水溶剂、有机溶剂兼容,如异丙醇、乙醇和丙酮。
◎温度抵抗性:可煮沸,可高压灭菌
◎蛋白吸附:每克透析袋吸附蛋白量小于1ng
使用前处理:
1、将透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段
2、在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/LEDTA(PH8.0)中将透析袋煮沸10分钟
3、用蒸馏水彻底清洗透析袋
4、放在1mmol/LEDTA(PH8.0)中将透析袋煮沸10分钟
5、冷却后,存放于4度,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。
从此时起取用透析袋是必须带手套的。
6、用前在透析袋内装满水然后排出,将之清洗干净。
储存条件:
透析袋可存放于10-29度;每次使用后将余下的膜放回袋子并密封好,以防干裂
透析即用半透膜(透析袋)将大分子蛋白质分离出来。
在生物大分子制备过程中除去盐、少
量有机溶剂、生物小分子杂质和浓缩样品,透析法最简便。
技术指标:MWCO(截留分子量),单位:Diatoms。
透析时,小于MWCO的分子在透析膜二边溶液浓度差产生的扩散压作用下渗过透析膜,
其速度与浓度梯度、膜面积及温度成正比。
欲快速透析可采用直径较小的透析袋以增加膜面
积。
常用温度:4℃,升温、更换袋外透析液或用磁力搅拌器,均能提高透析速度。
使用须知
1某些化学物质会破坏透析袋微孔且不可逆转。
计有:
烃、卤化烃、醇、酮、酯、胺、丙酮、甲基乙基酮、二氧杂环乙烷、环已烷等。
酸(甲酸、乙酸、稀强酸如5%HCI),10%苯酚,30%双氧水。
甲醇、乙醇:浓度小于5%时,透析功能在,而MWCO变化。
2蛋白质吸附量,小于1ug/克,(以透析袋干重计)。
正常使用PH值5-9(可重复使用)。
极限使用PH值2-12(一次性使用)。
3前处理:煮沸5分钟后用蒸馏水60℃洗冲2分钟,置4℃蒸馏水中待用。
长期保存液:0。
05%-0。
1%叠氮钠,1mMEDTA或50%甘油,温度(4℃),使用前以
蒸馏水洗净。
4即用型透析袋毋须前处理,使用前用蒸馏水洗净即可。
5透析袋装液时应留1/3-1/2空间,以防透析过程中,袋外的水和缓冲液过量进入袋内
将袋涨破(含盐量高的蛋白质溶液透析过夜时,体积增加50%系正常情况)。
6使用时须戴手套。
7透析效果检查用1%氯化钡检查硫酸铵、硫酸钠
1%硝酸银检查氯化钠、氯化钾
透析袋的物理抗力:透析袋由再生纤维素构成,可以煮沸或消毒。
一旦已呈湿状即不可完全
干燥,除非使用甘油重处理,内含有液体的透析袋可冷冻,另外,透析袋的生物学抗力决定
着透析袋的保存。
透析袋的使用后保存:透析袋对于纤维素活性是敏感的,尤其在湿状时,可以避免溶纤维素
的微生物生长,通过将透析袋保存在4摄氏度含有0.05%叠氮钠溶液,也可保存在50%甘油
溶液。