透析袋的选择和使用方法

透析只需要使用专用的半透膜即可完成。通常是将半透膜制成袋状，就叫做透析袋。

自ThomasGraham1861年发明透析方法至今已有一百多年。透析已成为生物化学实

验室最简便最常用的分离纯化技术之一。在生物大分子的制备过程中，除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。

透析只需要使用专用的半透膜即可完成。通常是将半透膜制成袋状，将生物大分子样品溶液置入袋内，将此透析袋浸入水或缓冲液中，样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内，而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外，直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”，袋（膜）外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。

透析的动力是扩散压，扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度，正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度，还正比于膜的面积和温度，通常是4℃透析，升高温度可加快透析速度。

透析膜可用动物膜和玻璃纸等，但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜，目前常用的是美国UnionCarbide（联合碳化物公司）和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管，

截留分子量MwCO（即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量，缩写为MwCO）通常为

1万左右。

商品透析袋制成管状，其扁平宽度为23mm～50mm不等。为防干裂，出厂时都用10％

的甘油处理过，并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质，它们对蛋白质和其它生物活性物质有害，用前必须除去。可先用50％乙醇煮沸1小时，再依次用50％乙醇、0.01mol/L碳酸氢钠和0.001mol/LEDTA溶液洗涤，最后用蒸馏水冲洗即可使用。实

验证明，50％乙醇处理对除去具有紫外吸收的杂质特别有效。使用后的透析袋洗净后可存

于4℃蒸馏水中，若长时间不用，可加少量NaN2，以防长菌。洗净凉干的透析袋弯折时易

裂口，用时必须仔细检查，不漏时方可重复使用。

新透析袋如不作如上的特殊处理，则可用沸水煮五至十分钟，再用蒸馏水洗净，即可使用。使用时，一端用橡皮筋或线绳扎紧，也可以使用特制的透析袋夹夹紧，由另一端灌满水，用手指稍加压，检查不漏，方可装入待透析液，通常要留三分之一至一半的空间，以防透析过程中，透析的小分子量较大时，袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。含盐量很高的蛋白质溶液透析过夜时，体积增加50％是正常的。为了加快透析速度，除多次更换透析液外，还可使用磁子搅拌。透析的容器要大一些，可以使用大烧杯、大量筒和塑料桶。小量体积溶液的透析，可在袋内放一截两头烧园的玻璃棒或两端封口的玻璃管，以使透析袋沉入液面以下。

检查透析效果的方法是：用1％BaCl2检查(NH4)2SO4，用1％AgNO3检查NaCl、

KCl等。

为了提高透析效率，还可以使用各种透析装置。使用者也可以自行设计与制作各种简易的透析装置。美国生物医学公司（BiomedInstrumentsInc.）生产的各种型号的Zeineh透

析器，由于使用对流透析的原理，使透析速度和效率大大提高。

根据个人使用经验，建议使用透析袋效果比较好，还有具体需要什么规格的

要看你的目的蛋白量有多大，才能决定使用多大的截留分子量的透析袋，一般截

留量越大价格也就会越高，还有就是透析袋宽度的选择，要看你的实验一次需要

透析多少量来决定。目前我的实验室使用的是上海生工的透析袋，宽度70mm普

通型的！

透析袋的规格和使用方法

默认分类2009-12-1612:11:02阅读931评论0字号：大中小

直径mm压平宽度（半周长）mm截留分子量Da

22343500

22347000

61014000

162514000

223414000

284414000

355514000

497714000

透析袋：

技术参数：

◎PH稳定范围:5-9

◎污染物水平：硫化物<0.3％，重金属<50ppm

◎化学兼容性：与很多盐兼容，比如CaCl2,(NH4)2SO4，还可与分子生物学及酶学中常用的水溶剂、有机溶剂兼容，如异丙醇、乙醇和丙酮。

◎温度抵抗性：可煮沸，可高压灭菌

◎蛋白吸附：每克透析袋吸附蛋白量小于1ng

使用前处理：

1、将透析袋剪成适当长度（10－20cm）的小段

2、在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/LEDTA（PH8.0）中将透析袋煮沸10分钟

3、用蒸馏水彻底清洗透析袋

4、放在1mmol/LEDTA（PH8.0）中将透析袋煮沸10分钟

5、冷却后，存放于4度，必须确保透析袋始终浸没在溶液内。从此时起取用透析袋是必须带手套的。

6、用前在透析袋内装满水然后排出，将之清洗干净。

储存条件：

透析袋可存放于10－29度；每次使用后将余下的膜放回袋子并密封好，以防干裂

透析即用半透膜（透析袋）将大分子蛋白质分离出来。在生物大分子制备过程中除去盐、少

量有机溶剂、生物小分子杂质和浓缩样品，透析法最简便。

技术指标：MWCO（截留分子量），单位：Diatoms。

透析时，小于MWCO的分子在透析膜二边溶液浓度差产生的扩散压作用下渗过透析膜，

其速度与浓度梯度、膜面积及温度成正比。欲快速透析可采用直径较小的透析袋以增加膜面

积。常用温度：4℃，升温、更换袋外透析液或用磁力搅拌器，均能提高透析速度。

使用须知

1某些化学物质会破坏透析袋微孔且不可逆转。计有：

烃、卤化烃、醇、酮、酯、胺、丙酮、甲基乙基酮、二氧杂环乙烷、环已烷等。

酸（甲酸、乙酸、稀强酸如5%HCI），10%苯酚，30%双氧水。

甲醇、乙醇：浓度小于5%时，透析功能在，而MWCO变化。

2蛋白质吸附量，小于1ug/克，（以透析袋干重计）。

正常使用PH值5-9（可重复使用）。

极限使用PH值2-12（一次性使用）。

3前处理：煮沸5分钟后用蒸馏水60℃洗冲2分钟，置4℃蒸馏水中待用。

长期保存液：0。05%-0。1%叠氮钠，1mMEDTA或50%甘油，温度（4℃），使用前以

蒸馏水洗净。

4即用型透析袋毋须前处理，使用前用蒸馏水洗净即可。

5透析袋装液时应留1/3-1/2空间，以防透析过程中，袋外的水和缓冲液过量进入袋内

将袋涨破（含盐量高的蛋白质溶液透析过夜时，体积增加50%系正常情况）。

6使用时须戴手套。

7透析效果检查用1%氯化钡检查硫酸铵、硫酸钠

1%硝酸银检查氯化钠、氯化钾

透析袋的物理抗力：透析袋由再生纤维素构成，可以煮沸或消毒。一旦已呈湿状即不可完全

干燥，除非使用甘油重处理，内含有液体的透析袋可冷冻，另外，透析袋的生物学抗力决定

着透析袋的保存。

透析袋的使用后保存：透析袋对于纤维素活性是敏感的，尤其在湿状时，可以避免溶纤维素

的微生物生长，通过将透析袋保存在4摄氏度含有0.05%叠氮钠溶液，也可保存在50%甘油

溶液。