第三章糖和苷类分析

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苷元——酸水解 原生苷——防止水解 次生苷——酶解
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苷类的提取和分离流程(系统溶剂提取法 )
中 药 EtOH EtOH 提取物 减压回收 EtOH 浓缩物 石油醚提取
水沉
石油醚部分 （多为油脂）
残留物 Et2O 或 CHCl3 提取
水层
Et2O 或 CHCl3 提取物（苷元） 残留物 EtOAc 提取
溶质可被极性强的溶剂洗脱 溶质可被极性弱的溶剂洗脱
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极性及强弱判断

一般物质：官能团的种类、数目、位置、碳链长短
R-COOH﹥Ar-OH﹥R-OH﹥R-NH-﹥R-CO-NH-﹥
R-CHO﹥R-CO-R﹥R-COO-R﹥R-O-R﹥R-X﹥R-H
溶剂：介电常数ε，极性
环己烷（1.88） 苯（2.29） 无水乙醚（4.47）
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提取苷元时，先用适当方法彻底水解 苷类（酶解或酸水解），再用乙酸乙酯、 氯仿、石油醚等极性小的有机溶剂提出 苷元；也可先提取总苷，再水解成苷元 例如：大豆苷元（葛根）
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提取苷应注意问题
1) 破坏酶的活性 :
80℃以上加热 60％以上醇提取 加入CaCO3后沸水煮
2) 注意酸碱条件防止苷水解 3) 根据需要采取不同方法提取苷
第三章
糖和苷类化合物
王 纠 zhiziangel@163.com
湖北医药学院药学院
Wednesday, January 02, 2019
本章基本内容
一、概述 二、糖和苷的结构与分类 三、糖和苷的理化性质 四、糖和苷的提取与分离
五、糖和苷的检识
六、苷结构的研究
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第三讲

苷的提取与分离 苷的检识 苷的结构研究
硅胶——生物碱 碱性氧化铝——黄酮、蒽醌等
半化学吸附：氢键，选择性较弱，多可逆
Hale Waihona Puke Baidu聚酰胺
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物理吸附的基本规律：极性相似者易于吸附
极性吸附剂：硅胶、氧化铝
对极性物质亲和力强 溶剂极性 非极性吸附剂：活性炭
对非极性成分吸附强
溶剂极性 吸附剂对溶质的吸附力
吸附剂对溶质的吸附力
先用水 饱和
EtOAc 提取液 （含单糖苷或含糖较少的苷）
残留物
n-BuOH 提取 n-BuOH 提取液（含糖较多的苷）
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2、分离
经初步提取得到的苷类通常极性较大，且多为非
结晶性物质，同时不同程度地混有其他物质，分离 困难，一般需先除去杂质，再进一步分离纯化。
除杂：可用溶剂沉淀法，也可用大孔树脂吸附法来富集、
吸附原理：分子间
力、氢键 分子筛
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影 响 吸 附 力 强 弱 的 因 素
树脂的性质：非极性树脂
纯化总苷。 粗提物溶于少量 甲醇或水，加丙 酮或乙醚使较纯 的苷类沉淀析出
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粗提物溶于水,上大孔 树脂柱,先用水洗去无 机盐、糖、多肽等杂 质,再用逐步增加浓度 的稀醇洗脱苷类
分离：综合应用各种色谱法
•硅胶：多用氯仿-甲醇系统洗脱。 （常用，适用大多数苷） •反相硅胶：水-甲醇或水-乙腈系统。 （皂苷、某些亲水性苷） •凝胶：Sephadex LH-20、Sephadex G系列。水-醇系统洗脱。
各种溶剂在聚酰胺柱上的洗脱能力

水 甲醇 乙醇 氢氧化钠水溶液 甲酰胺 二甲基甲酰胺 尿素水溶液
弱
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强
应 用
醌类、黄酮类等酚性的制备和分离。 脱鞣处理 生物碱、萜类、甾类、糖类、氨基酸等极性
与非极性化合物的分离也有用途
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4）大孔吸附树脂
性质
原理
高分子聚合物 白色球形颗粒 多孔网状结构 不溶于酸、碱、有机溶剂
高分子聚合物 不溶于常见有机溶剂 对碱稳定 对酸特别是无机酸稳定性差
可溶于浓盐酸、冰乙酸、甲酸中
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吸附原理
分子间氢键——半化学吸附
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影 响 吸 附 力 的 因 素
化合物在含水溶剂中大致有以下规律：
形成氢键的基团数目：越多，越强。 形成氢键的基团所处的位置：
处于易形成分子内氢键者，减弱。
分子中芳香化程度：高，增强。
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OH
OH
OH
HO
OH
OH
OH OH
OH
OH
OH OH
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影 响 吸 附 力 强 弱 的 因 素
化合物在不同溶剂中的吸附力，随溶剂极性增强而增强

水中最强———常以水装柱、样品以水溶解上样 含水醇中次之

醇中最弱———常以浓度渐高的含水醇梯度洗脱
EtOH-H2O最常用
（适于分子量不同的苷类，如蒽醌、二蒽酮类）
•大孔树脂、活性炭、纤维素、聚酰胺、离子交换树脂等 •大孔树脂法、溶剂法等通常可除掉其他杂质，获得总苷；柱
色谱法可得到单体化合物
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根据物质吸附性差异进行分离
物理吸附：
分子间力，无选择性，可逆。
硅胶、氧化铝、活性炭
化学吸附：化学键，选择性较强，常不可逆。
甲醇（31.2）
氯仿（5.20）
水（81.0）
乙酸乙酯（6.11） 乙醇（26.0）
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1）简单吸附法用于物质的浓缩与精制
活性炭吸附法
结晶、重结晶中脱色、脱臭
从大量稀水液中浓缩微量物质
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2）吸附柱色谱法
硅胶吸附柱色谱
B．装柱：
C．上样： D．洗脱： E．托尾：
氧化铝吸附柱色谱
A．吸附剂：30～60倍，有时100～200倍
径高比（d/h）1:15～1:20
干法装柱/湿法装柱 干法上样/湿法上样 等度/梯度（洗脱剂极性递增） 化学吸附：硅胶—碱性成分 Rf=0.2～0.3 洗脱剂中加入碱
氧化铝—酸性成分 洗脱剂中加入酸
F．洗脱系统的选择： TLC
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3）聚酰胺柱色谱
性 质
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掌握：苷的分类提取及其常用分离方法 熟悉：苷的结构研究方法。 了解：苷的检识方法
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四、苷的提取分离
1、提取：
苷的种类不同，性质不同，提取分离方 法也不同
苷：极性随着糖基的增多而增大。糖基增多，
苷元所占比例相应变小，亲水性增大。
苷元：一般可溶于低极性有机溶剂。
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原生苷：先要设法抑制或破坏酶的活性,常 用的方法是采用甲醇、乙醇或沸水提取 , 或 在药材中拌入CaCO3, 在提取过程中要尽量 避免与酸或碱接触，以防苷类被酸或碱水解 次生苷：可利用发酵、酶解、酸碱水解等 方法处理药材，选择性部分水解以提高目标 物产量。提取前将药材粗粉加适量水拌匀， 加热至35℃左右保持24～48小时，再用有机 溶剂（醇、苯、氯仿、石油醚）进行提取