生化第十三章

第十三章RNA的生物合成一、填空题1．基因转录的方向是从端到端。

2．大肠杆菌RNA聚合酶由和因子组成，其中前者由亚基、____亚基和____亚基组成，活性中心位于_____亚基上。

3.使用_____可将真核细胞的三种RNA聚合酶区分开来。

4．所有真核细胞的RNA聚合酶Ⅱ的最大亚基的C端都含有一段高度保守的重复序列，这段重复序列是_____，它的功能可能是____。

5．第一个被转录的核苷酸一般是_____。

6．原核细胞启动子-10区的序列通常被称为_____，其一致序列是_____。

7．tRNA基因的启动子最重要的特征是______。

8．真核细胞转录因子的功能是_____和______。

9．逆转录酶通常以_____为引物，具有______、_____和______三种酶的活性，使用该酶在体外合成cDNA时常用_____为引物。

10．真核细胞的热鸡蛋白（HSP）上游除了启动子序列以外，还应具有_____、______、____和_____序列。

11．真核细胞Pre-mRNA的后加工方式主要_____、_____、_____、_____、和_____5种。

12．大肠杆菌RNaseP由_____和_____组成，其中_____能独立完成催化，该酶参与_____的后加工。

13．四膜虫Pre-RNA的剪接需要______作为辅助因子。

14．存在于真核细胞Pre-mRNA上的加尾信号是_____，剪接信号是_____。

15．原核细胞基因转录的终止有两种机制，一种是______，另一种是______。

16．核不均一RNA（hnRNA）实际上就是______。

17．使用______技术可以确定一个蛋白质基因是不是断裂基因。

18．所有的反转录病毒的基因都含有______ 、______和______三种基因。

19．HIV的宿主细胞是______。

20．真核细胞三种RNA聚合酶共有的转录因子是______。

21．RNA病毒的进化速度远高于它的宿主细胞是因为_______。

22．SnRNA即是______，它的功能主要是______。

23．SnoRNA即是______，它的主要功能是______。

24．同一种基因在肝细胞中表达的终产物是ApoB-100，而在小肠上皮细胞中表达的终产物是相对分子质量较小的ApoB-48，这种差别是通过______机制实现的。

25．LTR即是______，其中含有______序列和______序列，由它控制反转录病毒的基因转录。

26．gRNA（guide RNA）的功能是______。

27．使用_______方法可以确定真核细胞基因转录的起始点。

二、是非题1．原核细胞和真核细胞的RNA聚合酶都能够直接识别启动子。

2．在原核细胞基因转录的过程中，当第一个磷酸二之间形成以后，σ因子即与核心酶解离。

3．大肠杆菌所有的基因转录都由同一种RNA聚合酶催化。

4．大肠杆菌染色体DNA由两条链组成，其中一条链充当模板链，另外一条链充当编码链。

5．由于RNA聚合酶缺乏校对能力，因此RNA生物合成的忠实性低于DNA的生物合成。

6．真核细胞四种rRNA的转录由同一种RNA聚合酶，即RNA聚合酶Ⅰ合成。

7．所有的RNA聚合酶都需要模板。

8．利福霉素和利链霉素都是原核细胞RNA聚合酶的抑制剂，两者都抑制转录的起点。

9．RNA病毒因为不含有DNA基因组，所以根据分子生物学中心法则，它必须先进行反转录，然后才能复制和增殖。

10．反转录病毒都是肿瘤病毒。

11．原核细胞中，构成RNA聚合酶的σ因子的浓度低于核心酶的浓度。

12．逆转录病毒的基因组RNA实际上是一种多顺反子mRNA。

13．到现在为止，还没有正常的或者受病毒感染的原核细胞中发现反转录现象。

14．ribozyme只能以RNA作为底物。

15．与蛋白质酶不同的是，ribozyme的活性不需要特定的三维结构。

16．帽子结构是真核细胞mRNA所特有的结构。

17．TRNA的3′端所具有的CCA序列都是通过后加工才才加上的。

18．线粒体内的RNA聚合酶由细胞核基因编码。

19．四膜虫Pre-mRNA的剪接并不需要消耗A TP。

20．基因的内含子没有任何功能。

21．真核细胞mRNA编码区不含修饰核苷酸。

22．有的tRNA的反密码子由四个核苷酸组成。

21．线粒体内的RNA聚合酶组成与原核细胞的RNA聚合酶相似，也是由几个亚基组成的寡聚酶。

22．放线菌素D既可以抑制原核细胞的基因转录，又可以抑制真核细胞的基因转录。

23．DNA聚合酶、RNA聚合酶和逆转录酶一般都含有Zn离子。

24．DNA病毒的生活史中不可能具有反转录事件。

三、选择题（下列各题均有五个备选答案，试从其中选出一个）1．7SL RNA的转录受到（）（A）高浓度的的α-amanitin的抑制（B）低浓度的α-amanitin的抑制（C）中等浓度的的α-amanitin的抑制（D）利福霉素的抑制（E）AZT（3′叠氮胸苷）的抑制2．使用纤维素-Oligo dT分离真核生物的mRNA时，哪一种条件比较合理？（）（A）在有机溶剂存在下上柱，低盐溶液洗脱（B）低盐条件下上柱，高盐溶液洗脱（C）高盐溶液上柱，低盐溶液洗脱（D）酸性溶液上柱，碱性溶液洗脱（E）碱性溶液上柱，酸性溶液洗脱3．四种真核mRNA后加工的顺序是（）（A）带帽、运输出细胞核、加尾、剪接（B）带帽、剪接、加尾、运输出细胞核（C）剪接、带帽、加尾、运输出细胞核（D）带帽、加尾、剪接、运输出细胞核（E）运输出细胞核、带帽、剪接、加尾4．你认为酵母细胞TBP基因的突变为什么是致死型的？（）（A）TBP是转录终止所必须的蛋白质（B）缺乏有功能的TBP的酵母细胞只能转录rRNA基因（C）与TBP相关联的蛋白质因子结合抑制DNA聚合酶σ的活性（D）缺乏TBP的酵母细胞对光敏感（E）TBP为RNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ所负责的基因转录必须的转录因子5．在动物细胞的剪接体中，负责识别3′剪接点的SnRNP是（）（A）U1 SnRNP （B）U2 SnRNP （C）U3 SnRNP （D）U4 SnRNP （E）U5 SnRNP6.在剪接体中，SnRNP上的蛋白质的功能之一似乎是（）（A）在第一步转酯反应中，充当核酸内切酶（B）保护SnRNP免受降解（C）识别剪接点交界处的GU-AG序列（D）促进SnRNP的正确折叠，有利于RNA调节的催化（E）促进已加工的mRNA运输处细胞7．具有蛋白质激酶活性的（转录因子）TFⅡ是（）（A）TFⅡB （B）TFⅡE （C）TFⅡHF （D）TFⅡH （E）TFⅡD8.转录真核细胞rRNA的酶是（）（A）RNA聚合酶Ⅰ（B）RNA聚合酶Ⅱ（C）RNA聚合酶Ⅲ（D）RNA聚合酶Ⅰ和Ⅲ（E）RNA聚合酶Ⅱ和Ⅲ9．大肠杆菌RNA聚合酶分子中负责识别启动子的亚基是（）（A）α亚基（B）β亚基（C）β′亚基（D）σ亚基（E）ω亚基10．在RNA聚合酶催化下，某一DNA分子的一条链被完全转录成mRNA。

假定DNA编码链的碱基组成是：G＝24.1%，C＝18.5%，A＝24.6%，T＝32.8%。

那么，新和成的RNA分子的碱基组成应该是（）（A）G＝24.1%，C＝18.5%，A＝24.6%，T＝32.8%（B）G＝24.6%，C＝24.1%，A＝18.5%，T＝32.8%（C）G＝18.5%，C＝24.1%，A＝32.8%，T＝24.6%（D）G＝32.8%，C＝24.6%，A＝18.5%，T＝24.1%（E）不能确定11.AZT（3′-叠氮胸苷）作为胸苷的内似物能够抑制HIV的复制。

抑制的机理是它在细胞内被转变为AZTPP，AZTPP可代替dTTTT掺入到HIV RNA的cDNA之中，从而造成HIV病毒的抑制。

你认为最可能的原因是（）（A）AZT能够与HIV RNA中的A配对，但不能与人DNA中的dA配对（B）在错配修复中被正常的脱氧核苷酸代替（C）不能够进入在进行的DNA复制的细胞（D）被细胞核内的酶水解为胸苷（E）与人细胞内的DNA聚合酶的Km值远大于对HIV逆转录的Km值12.关于某一个基因的增强子的说法哪一种是错误的?（）（A）增强子的缺失可导致该基因转录效率的降低（B）增强子序列与DNA结合蛋白相互作用（C）增强子能够提高该基因mRNA的翻译效率（D）增强子的作用与方向无关（E）某些病毒基因组中也含有增强子13.原癌基因可以通过哪一种机制而转变为癌基因？（）Ⅰ.阅读框架内发生点突变Ⅱ.基因的部分缺失Ⅲ.逆转录病毒整合到阅读框架的上游（A）只有Ⅰ（B）只有Ⅱ（C）只有Ⅲ（D）只有Ⅰ和Ⅱ（E）Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ14.雌激素反应元件（ERE）的一致序列为AGGTCAnnTGACCT。

如果将该序列方向改变，则依赖于雌激素的基因转录将受到什么样的影响？（A）只有3′端基因将被关闭（B）只有5′端基因将被关闭（C）5′端和3′端基因都将被关闭（D）对5′端和3′端基因没有什么影响（E）由ERE编码的所有氨基酸都将改变15．细菌转录过程中RNA合成的正常终止是因为什么造成的?（）Ⅰ.RNA聚合酶与另一个向相反方向转录的RNA聚合酶相遇Ⅱ.RNA聚合酶经过DNA上的一段特殊的碱基序列随后从DNA模板上掉下来Ⅲ.RNA聚合酶与特殊的蛋白质相互作用随后从新和成的RNA链上解离（A）只有Ⅰ（B）只有Ⅱ（C）只有Ⅲ（D）只有Ⅰ和Ⅱ（E）Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ问答题1．设计一个实验确定体内基因转录的链延伸的平均速率（每一个RNA链每分钟掺入的核苷酸数目）2．设计一个实验确定一克隆基因在体外进行转录时RNA链延伸的平均速率。

3．怎样证明基因转录的方向是从5′端→3′端。

4．某些基因在转录过程中，RNA聚合酶会发生暂停的现象，即RNA聚合酶在到达某些位点停止转录，你如何检测到这种暂停现象。

5．RNA聚合酶对NTP的Km值在起始阶段高于在延伸阶段。

你认为这对基因表达的调节有何重要性。

6．假如你想在体外研究一个含有几个基因和几个启动子的DNA上某一基因的转录。

你如何在不慎加特定的调节蛋白的情况下，刺激你的目的基因的转录，而不影响其他基因的转录。

7．在很长一段时间里，人们对乳糖操纵子阻遏蛋白究竟是阻止RNA聚合酶与启动子的结合来抑制乳糖操纵子的结构基因转录的，还是允许基因转录的起始但组织延伸通过与操纵子结合阻遏蛋白而抑制转录的并不清楚。

你如何确定阻遏蛋白是通过以上哪一种机制抑制乳糖操纵子的结构基因的转录的？8．什么是顺式作用元件？什么是反式作用因子？如果你得到一种新的顺式作用元件，你如何让分离纯化到与它结合的反式作用因子？如果你得到一种新的反式作用因子，你又如何鉴别出能够与它结合的未知的顺式作用元件?9．如果你得到一种新的顺式作用元件，你可以使用什么样的方法确定它究竟属于增强子、沉默子还是启动子？10．如何证明第二类内含子和第三类内含子在剪接反应中，形成套索结构？11．SnRNP已被发现有多种，你如何证明U1、U2、U4/U6和U5才是参与第三类内含子的剪接的SnRNP。