高效液相色谱法及其在中药分析中的应用

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高效液相色谱法在中药含量测定方面的应用

高效液相色谱法在中药含量测定方面的应用

高效液相色谱法在中药含量测定方面的应用高效液相色谱技术(HPLC)是一种重要的分离与分析技术,其具有高压、高速、高效、高灵敏度、消耗样品少、色谱柱可反复使用、测定样品量少,容易回收等优势。

近年来,高效液相色谱检测中药的研究非常多,本文就HPLC在不同药物类型的中药活性成分中的应用进行综述,以供临床参考。

1.生物碱类成分含量测定生物碱结构复杂在植物界分布较广,大多具有生理活性,为许多中草药及药用植物的有效成分。

郑丽娜等人[1]表明高效液相色谱法测定山豆根中苦参碱和氧化苦参碱的含量,此方法线性关系良好,精密度、稳定性、重现性均较好,回收率较高.2.中药甙类成分的含量测定甙类在高等植物较为普遍,其种类繁多,结构不一,生理活性具有多样性,已成为目前研究天然药物很重要的一大类成分。

黄秋妹[2]采用高效液相色谱法,以甲醇:0.1%磷酸溶液(17∶83)为流动相,检测波长为233nm,流速为1mL?min-1. 结果,线性范围为0.08445~42.225mg,r值均为0.9999;回收率为99.46%,RSD分别为1.93%,1.74%。

3 .蒽醌类成分含量测定中药中以蒽醌及其衍生物为主的蒽醌类成分较为普遍,其中何首乌及制何首乌中以蒽醌类活性成分为主。

彭贵龙等[3]人表明高效液相色谱法对大黄酸、大黄素和大黄酚分别在0.0001~12.50μg/mL、0.0002~25.00μg/mL、0.00018~22.50μg/mL 范围内线性关系良好,相关系数(r)均大于0.9999,定性检测限(S/N=3)依次是:0.0703 ng/mL、0.0282 ng/mL、0.0871 ng/mL;样品回收率为88.39%~107.2%。

高效液相色谱法操作简单快速、定量准确、灵敏度高、成本低,为何首乌中蒽醌类化合物的检测分离及含量测定提供了一个有效的科学方法.4 .黄酮类成分含量测定酮类化合物数量之多位列天然酚性中化合物之首,植物体内其主要与糖结合成甙,小部分以甙元形式存在。

高效液相色谱—质谱联用技术在中药研究中的应用进展

高效液相色谱—质谱联用技术在中药研究中的应用进展

高效液相色谱—质谱联用技术在中药研究中的应用进展高效液相色谱一质谱联用(LC-MS)将高效液相色谱的高分离效能与质谱的强大结构测定功能组合起来,不仅实现对复杂混合物更准确的定量和定性分析,而且简化了样品的前处理过程,样品分析更简便,为中药组分的分析及结构的鉴定提供了一个重要和全新的技术支撑。

该技术对中药化学成分的分析及鉴定,中药指纹图谱的研究,中药药代动力学的研究有应用价值。

论述了高效液相色谱-质谱联用(LC-MS)在中药领域的应用进展,阐述了各方法的特点、应用范围及研究现状,旨在为中药研究者提高参考依据。

促进中药研究向现代化的发展。

标签:高效液相色谱质谱联用;中药;指纹图谱;药代动力学作为一种新的现代技术分析手段,高效液相色谱-质谱(LC-MS)联用技术在分离效能、灵敏度和专属性等方面都有着巨大的优势,展现出强大的定性、定量分析能力,从而在药物分析特别是中药分析得到广泛的运用。

本文就近年来HPLC-MS联用技术在中药成分分析及结构的鉴定、中药指纹图谱研究、中药药代动力学研究3个方面的应用作一论述。

1高效液相色谱-质谱(LC-MS)联用技术有独到的优势和特点当用传统的高效液相色谱(HPLC)测定样品时,样品中的杂质对主成分有较大的干扰,主峰不易分离,峰型也不好,准确性有影响但却找不到好的办法时,高效液相色谱一质谱(LC-MS)可以排除其他杂质的干扰,即使主成分在色谱上没有完全分离开,但通过MS的特征离子质量色谱图也能给出它的色谱图来进行定性定量。

采用高效液相色谱-质谱(LC-MS)分析时其流动相主份相对于传统高效液相色谱(HPLC)法更少更简单,色谱柱更短更小(常用规格是2.1mm×50mm,1.8μm),出峰时间大大缩短,却可以得到很好的分离效果,短时间内可完成对一个样品的分析,操作简单、重复性好。

更适合于大批量样品的测定。

高效液相色谱一质谱(LC-MS)还可以用相对简单的色谱条件对中药中多种成分的定性、定量分析,比如分析西青果中的诃子酸、诃黎勒酸、鞣云实精、原诃子酸等化合物,方法简便,分析时间短。

高效液相色谱在中草药质量控制中的应用

高效液相色谱在中草药质量控制中的应用

高效液相色谱在中草药质量控制中的应用一、本文概述随着现代科技的进步,中草药的质量控制已成为中医药领域研究的热点和难点。

高效液相色谱(HPLC)作为一种高效、精确的分析技术,在中草药质量控制中发挥着越来越重要的作用。

本文旨在探讨高效液相色谱在中草药质量控制中的应用,包括其原理、方法、优势以及在实际操作中的案例分析,以期为提高中草药质量控制水平提供理论支持和实践指导。

本文将对高效液相色谱技术的基本原理和特点进行简要介绍,以便读者对该技术有一个初步的了解。

接着,将重点分析高效液相色谱在中草药质量控制中的应用,包括中草药的成分分析、质量标准制定、以及质量控制过程中的关键环节等。

同时,还将探讨高效液相色谱技术在中草药质量控制中的优势,如分离效果好、分析速度快、灵敏度高等。

本文还将通过具体案例分析,展示高效液相色谱在中草药质量控制中的实际应用效果。

通过对不同中草药样品的分析和比较,揭示高效液相色谱技术在中草药质量控制中的潜力和前景。

本文将总结高效液相色谱在中草药质量控制中的优势和挑战,并提出相应的建议和展望,以期为中草药质量控制领域的进一步发展提供参考和借鉴。

二、高效液相色谱技术原理及特点高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography, HPLC)是一种重要的分离分析技术,广泛应用于中草药质量控制领域。

其技术原理基于不同物质在固定相和流动相之间的分配平衡,通过高压泵将流动相推动通过固定相,使样品中的各组分因分配系数的差异而实现分离。

高分离效能:HPLC具有高分辨率和高灵敏度,能够实现对中草药中复杂成分的有效分离和检测,为质量控制提供了准确的数据支持。

高选择性:通过选择合适的固定相和流动相,以及调整分离条件,HPLC能够实现对特定组分的选择性分离,有助于中草药中特定活性成分的定量分析。

快速分析:HPLC的分析速度快,通常能在较短时间内完成样品的分离和检测,提高了分析效率。

高效液相色谱法在中药质量检测中的应用

高效液相色谱法在中药质量检测中的应用

高效液相色谱法在中药质量检测中的应用中药具有悠久的历史,随着当代社会的不断发展,中药的研究行业也取得了不断的进步。

由于中药在对患者进行治疗时对人体的伤害较小,且具有较好的效果。

中医对中药进行质量检测中的传统方法是通过长久以往的经验进行的,主要是中医通过感官接触例如闻、看、嗅等,这种方法在我国已经有非常悠久的历史,被绝大部分中医所使用。

但是,社会在不断发展进步,传统的方法已经不能满足当代社会的要求,且传统方法的科学性较低,很容易发生失误。

因而,中药行业的专家学者也在不断研究探讨新型的检测方法。

高效液相色谱法符合现代社会的要求,在中药的质量检测中发挥了巨大的作用。

一、高效液相色谱法1.1高效液相色谱法的概念及特征HPLC是在经典液相色谱法的基础上的更进一步发展,适用单一或多种溶液混合而成的溶剂。

在具体操作中,首先要将溶剂调制完成,然后用泵将溶液注入到色谱柱中,因为溶液具有流动性,所以当溶液进入色谱柱内会产生分离现象,分离后的成分会进入到检测器中。

然后利用相关的检测设备和仪器进行检测,从而得出最终结果。

整个操作流程比较迅速,效率较高,并且具有很高的灵敏度和准确度,广泛的应用于中药的质量检测中。

1.2高效液相色谱法的分析原理HPLC与传统的经典液相色谱法相比并没有根本上的区别,是根据传统的方法再结合现代社会的科学技术的进一步的发展,所以高效液相色谱法更加具有科学性和现代性,在操作过程中应用了更多现代化的机械设备和测试仪器,使中药质量的检测结果更加具有说服性和科学性。

除此以外,随着社会经济、科技的不断发展,高效液相色谱法的操作技术和使用工具也在更新。

在具体操作中使用小口径柱,相比传统经典液相色谱法来说,具有更高的效率和分离速度,最快的速度可以达到经典液相色谱法的1000倍,在具体的质量检测中具有更好的便利性,因而HPLC在具体检测操作中的效率更高,更加受到中医的欢迎。

二、高效液相色谱法在中药质量检测中的应用2.1应用于测定和分析中药中的有效成分测定和分析中药中的有效成分,是衡量中药质量的重要指标,在整个中药的质量检测中是重要一环。

高效液相色谱法应用于中药成分分离分析

高效液相色谱法应用于中药成分分离分析

高效液相色谱法应用于中药成分分离分析中药是我国传统的药物治疗方式,由于其独特的药效和可靠性,受到了越来越多人的青睐。

随着科学技术的不断发展,为了更好地发掘中药的药效,研究中药中的物质成分已经成为了学术界和医学界的研究热点。

中药中复杂的化学成分对分离和定量分析的要求越来越高,而高效液相色谱法(HPLC)作为一种常见的分离分析技术,已被广泛应用于中药成分分离分析。

一、HPLC基本原理高效液相色谱法的基本原理是利用液相中流动的分离剂,将样品物质分离开来,通过对流动的分离相进行流量的调节、载波的单纯或混合、分离剂的选用等调节方法,来达到分离物质的目的。

而如何选择流动相,使分离效果更加突出,HPLC技术中最关键的问题则是如何调整流动相。

在HPLC分析中,流动相一般是有机溶液和水溶液混合配制而成的。

有机溶液主要是甲醇、乙腈、2-丙醇等有机化合物,而水溶液则是各种酸、碱、盐等。

在使用HPLC进行分离时,根据各种物质的分子结构、理化性质等不同特点,选择不同的流动相进行合理配比,进而实现目标物质的有效分离。

二、HPLC在中药分析中的应用HPLC在中药成分分析和定量分析中具有多方面的优势:可以对样品中的多种成分进行宽谱分析,分离得到纯度高的目标化合物,并能利用多种检测技术直接检测分离物质。

在中药成分分析中,HPLC对于研究中药的药效和药理机制十分关键,比如能够去分离和提纯中药中的有效成分,从而更好地研究药效、药理及中药活性成份等。

同时,HPLC对于中药的评价和质量保障也具有重要意义,例如监测中药的质量、提高中药质量控制标准、发现中药的新有效成分等。

在HPLC分析中,流量是一个非常关键的因素。

从理念上说,若样品流速较慢,则在适当时间内需要提高温度和压力,从而使液体通过狭窄而长的分离柱,并使分离效果更佳。

而当流量过高时,则可能影响到样品的质量,甚至影响HPLC技术的分离与检测效果。

因此,我们通常应试图找到一个合理的流量范围,以保证最佳的样品分离效果和分析结果。

高效液相色谱-质谱法在中药的应用研究

高效液相色谱-质谱法在中药的应用研究

高效液相色谱-质谱法在中药的应用研究摘要:液质联用技术将液相色谱(HPLC)的高分离效能与质谱(MS)的强大结构鉴定功能结合起来,逐渐成为中药现代化研究的强有力手段。

本文对我国科学工作者应用液质联用技术在中药化学成分分析、中药质量控制、中药体内代谢、药代动力学、药效学、中药材指纹图谱及在复方中成药分析的方面进行的研究工作作一综述。

关键字:HPLC-MS 质量控制药代动力学药效学指纹图谱中成药分析HPLC是目前分离复杂体系最为有效的分析工具,由于其仪器自动化、普及化程度愈来愈高,已成为中药分析最常用的仪器之一。

但目前中药分析中运用的HPLC仪器绝大多数与UV或DAD检测器相联接,对于单个色谱峰仅能提供保留时间及紫外图谱等信号,而对未知成分所能提供的结构信息相当有限,对中药等复杂体系的定性结果可能给出错误的结论[1]。

MS是一种高灵敏度的检测器,且不同化合物的特征性强,可用于部分解析未知化合物的结构。

中草药是一个非常复杂的化学体系,其中含有大量的次生代谢产物,其结构复杂,性质相似,有的化合物还不稳定。

HPLC-MS将HPLC的高分离效能与MS的强大结构测定功能组合起来,为中药化学成分的快速分析提供了一个重要的新技术。

一、中药化学成分研究中药化学成分是其发挥药效作用的物质基础,它的深入研究是中药现代化的关键和核心。

以往中药成分研究主要采用传统提取分离方法,从复杂体系中分离提取单一化学物质,再通过光谱和质谱等分析技术进行鉴定。

而且对环境极不友好。

HPLC-MS在使化学成分达到有效分离的基础上,提供丰富的化合物结构信息,在中药化学成分分析中发挥了重要作用。

中药中某些常见的化学成分已经有对照品,通过与对照品的色谱和质谱特征进行对照可以快速、准确地对化学成分进行鉴定。

刘瑞等[2]采用HPLC-MS2鉴定大青叶水提液中的5种化学成分,通过与对照品的保留时间、色谱增益、紫外光谱图和特征离子碎片进行比较,鉴定出大青叶水提液图谱中的5个色谱峰分别为胞苷、尿苷、鸟苷、黄嘌呤和次黄嘌呤。

现代色谱分析—液相色谱在中药分析中的应用论文

现代色谱分析—液相色谱在中药分析中的应用论文

现代色谱分析—液相色谱在中药分析中的应用论文近年来,随着现代科学技术的发展以及人们对中药的深度研究,液相色谱成为了中药分析中常用的一种技术手段。

液相色谱作为一种高效、准确、快速、灵敏的分析方法,已经在中药分析领域取得了广泛的应用和有重要的意义。

液相色谱是以液相为固定相,以其种类及其物理化学特性与柱填充物的物理化学特性相适应的固定相为动相,通过色谱柱的固定相与液相之间的气固界面相互作用,对物质进行分离的一种色谱分析技术。

在中药分析中,液相色谱的应用主要包括高效液相色谱(HPLC)和超高效液相色谱(UPLC)。

首先,液相色谱可以用于中药中活性成分的分离和定量分析。

中药复杂的成分成分组成,不同的成分对人体的药效也不同。

通过液相色谱技术,可以将中药中的不同成分进行分离,并通过检测器准确地测量出各个成分的含量。

这对于深入了解中药的药理学作用以及指导合理用药具有重要意义。

另外,液相色谱还可以用于中药中新药物的发现与研究。

中草药是中医药领域非常重要的一个组成部分,其中很多草药中存在着未知的化学成分,这些成分可能隐藏着新的药理学活性。

液相色谱配合质谱等分析技术可以对中草药进行全面的分析,快速地发现中草药中的潜在新药物,并对其进行深入研究。

综上所述,液相色谱在中药分析中具有非常重要的应用价值。

它可以对中药中的活性成分进行分离和定量分析,帮助我们深入了解中药的药理学作用。

同时,液相色谱还可以用于中药中有害成分的检测,保障中药的质量安全。

此外,液相色谱还可以用于中药中新药物的发现与研究,对推动中医药现代化起到积极作用。

因此,液相色谱在中药分析中的应用有着广阔的前景,并且仍然有待进一步的发展和完善。

超高效液相色谱法在中药分析领域中的应用现状及展望

超高效液相色谱法在中药分析领域中的应用现状及展望

超高效液相色谱法在中药分析领域中的应用现状及展望一、本文概述随着科技的不断进步和人们对中药认识的深入,中药分析领域正面临着前所未有的发展机遇。

超高效液相色谱法(UPLC)作为一种先进的色谱分析技术,以其高分辨率、高灵敏度、高分离效能和快速分析等特点,在中药分析领域中的应用日益广泛。

本文旨在综述超高效液相色谱法在中药分析领域的应用现状,探讨其发展前景,为中药的现代化和国际化提供技术支持。

本文将首先介绍超高效液相色谱法的基本原理和优势,阐述其在中药成分分析、质量控制、药物代谢等方面的应用案例。

然后,我们将重点分析超高效液相色谱法在中药分析领域中的优势和挑战,包括其对于复杂中药体系的处理能力、对于痕量成分的检测能力以及在实际应用中可能遇到的问题。

我们将展望超高效液相色谱法在中药分析领域的未来发展,包括技术创新、方法优化、多技术联用等方面,以期推动中药分析技术的不断进步和发展。

二、超高效液相色谱法在中药分析领域的应用现状超高效液相色谱法(UPLC)作为一种先进的色谱分析技术,近年来在中药分析领域得到了广泛应用。

其高效的分离能力和高灵敏度,使得UPLC成为中药复杂成分分析的有力工具。

在中药指纹图谱的构建中,UPLC发挥了关键作用。

通过优化色谱条件和选择适当的检测器,UPLC能够实现对中药中多种成分的快速、准确分离和检测。

这不仅有助于中药质量控制,还可以为中药的药效物质基础研究和质量控制提供科学依据。

UPLC在中药有效成分的分析中也表现出色。

通过精确测量中药中有效成分的保留时间和峰面积,可以实现对中药中有效成分的定量分析。

这为中药的质量评价、药效研究以及新药开发提供了有力支持。

同时,UPLC在中药代谢产物的分析中也有着重要应用。

通过分析中药在体内的代谢产物,可以深入了解中药的药效机制和药代动力学过程。

这对于中药的临床应用和新药研发具有重要意义。

然而,尽管UPLC在中药分析领域的应用取得了显著进展,但仍面临一些挑战。

高效液相色谱法在中药质量检测中的应用

高效液相色谱法在中药质量检测中的应用

高效液相色谱法在中药质量检测中的应用作者:温文杰来源:《科学与财富》2016年第35期摘要:中医对于中药质量检测的方法有口尝、鼻闻、眼观、水试、手摸和火试等方法,以上的这些方法是经过了中医前辈的经验积累,而流传下来的宝贵财富经过了一代又一代将其传承。

但是伴随着科技的发展,上述这些检测方法在中药质量检测的过程中是很难满足人们对于中药的了解和要求的。

因此,必须要使用现代化的检测方法来进行中药质量检测。

本文就是对高效液相色谱法在中药质量检测中的应用进行分析,为相关的研究提供借鉴。

关键词:高效液相色谱法;中药质量检测;应用随着医疗水平的不断提高,人们对医学的了解也越来越多,人们有着较强的保健意识,这样就会有很多的人进行疾病的治疗和身体的调理,在治疗疾病的过程中有很多的人就会选择中药,因为中药毒副作用小,而且治疗效果也是极其独特的。

中药的组份是极其复杂的,这样就制约了中药在临床中的应用,无法对中药质量进行科学的检测。

本文是对高效液相色谱法在中药质量检测中的应用进行分析,为中药事业的发展做出贡献。

1 高效液相色谱法的概述高效液相色谱法又被叫做HPLC法,这是在经典液体柱色谱的基础上来进行的,参照的是色谱理论,需要进行相应的改进,也是一种现代液体色谱法,这种液体色谱法就是将有着一定极性的单一溶液或者是混合溶剂当做流动相,之后就可以使用泵将具体的流动相注入到色谱柱中,色谱柱是装有填充剂的,在这样的情况下,注入的一些试样就会被相应的流动相带到柱内,会产生分离,之后将各个成分按照先后的顺序来将其注入到检测器中,之后使用数据处理装置,或者是记录仪来进行相应的处理,在这样的情况下,就能够获取相应的数据。

高效液相色谱法有着高灵敏、高效率、高速度和高压力等特点,基于这一特点,在重中药中得到了广泛的应用。

高效液相色谱法在中药质量检测中的应用较多,有许多的实例进行了相应的证实,尤其是在对中药质量检测的应用中,要求使用人员对于高效液相色谱法有着相应的了解,这样才能够选择正确的色谱分离方法,除此之外,也要了解产品的相关性质,在了解产品相关性质的基础上,才能够对中药产品进行科学的检测,对于色谱法的应用范围与特点也要详细的了解,保证这一系列环节的顺利进行。

液相色谱质谱联用技术进展及其在中药中的应用

液相色谱质谱联用技术进展及其在中药中的应用

中药作用机制和药效研究
总结词
液相色谱质谱联用技术有助于深入探究中药的作用机制和药效,为中药的通过分析中药在体内代谢产物的变化,可以探究中药的作用机制和代谢途径。同时,利用该技术可以 检测中药对生物体内各种代谢产物的调控作用,从而全面了解中药的药效和作用特点。这有助于推动 中药的现代化研究和临床应用,为中药的国际化和普及化奠定基础。
随着技术的不断发展,LC-MS 逐渐应用于环境、食品、药物等 领域,成为一种重要的分离和检
测手段。
近年来,LC-MS在仪器设备、 分离效果、检测灵敏度等方面取 得了显著进展,为复杂样品的分
析提供了有力支持。
技术的主要突破和进步
高通量分析
高分离效果
通过自动化和快速进样技术,LC-MS可以 实现高通量分析,提高了分析效率。
液相色谱质谱联用技术进 展及其在中药中的应用
• 引言 • 液相色谱质谱联用技术的进展 • 液相色谱质谱联用技术在中药研究中
的应用 • 案例分析:液相色谱质谱联用技术在
中药研究中的应用实例 • 结论
01
引言
目的和背景
液相色谱质谱联用技术是一种重要的分离分析技术,广泛应 用于生物医药、环境监测、食品安全等领域。随着科技的发 展,该技术在中药领域的应用也日益广泛,为中药质量控制 、药效物质基础研究等方面提供了有力支持。
采用新型色谱填料和优化色谱条件,LCMS的分离效果得到显著提高,能够更好地 解决复杂样品中的分离难题。
高灵敏度检测
多维度分析
通过采用新型离子源和质谱检测器,LCMS的检测灵敏度得到显著提升,能够检测 低浓度的目标物。
通过串联质谱技术,LC-MS可以实现多维 度分析,提供更多的结构信息和分子量信 息。

高效液相色谱在中药研究中的应用

高效液相色谱在中药研究中的应用

高效液相色谱在中药研究中的应用高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)是在本世纪60年代末期,在经典液相色谱法和气相色谱法的基础上发展起来的新型分离分析技术,它具有快速、高效、灵敏、准确等优点,在医药卫生、食品、环保等各个领域已得到了广泛的应用。

本文主要分析探讨了高效液相色谱在中药研究中的应用情况,以供参阅。

标签:高效液相色谱;中药;应用引言高效液相色谱技术是一种重要的分离分析方法,于20世纪60年代末在经典液相柱色谱的基础上引进气相色谱的理论与技术,采用高压输液泵、高效固定相和高灵敏度的检测器并加以改进而发展形成。

HPLC可分析高沸点、难挥发和对热不稳定的化合物,离子型化合物和高聚物乃至生物大分子等物质。

HPLC具有分离效能高、分析速度快、灵敏度高、色柱可反复使用、流动相可选择范围宽、流出组易收集、操作自动化、适用范围广和安全的优点。

1高效液相色谱在中药研究中的应用1.1在中药含量测定方面的应用中药材及中成药的成分十分复杂,其有效成分不一,对不同药物,其活性成分可能是单一的,也可能有多种成分共同作用,这就对控制药品质量提出了较高的要求。

传统的薄层色谱分析方法在精密度,准确度和重现性方面都不能满足中药现代化的需求。

高效液相色谱法以其建立含量测定方法简便易行、结果准确可靠、重现性好、便于对各类药物进行质量控制等众多优点,逐渐成为中药材及各类制剂含量测定的首选方法。

段启等采用高效液相色谱法测定不同产地栀子中藏红花素的含量所建立的方法,为中药栀子的质量评价提供了科学依据。

在中成药制剂方面,黄权芳等建立的壮药清热颗粒中木犀草素的含量测定方法,加样回收率较高,重现性好,为其质量控制标准化提供了参考资料。

阮桂平等建立的HPLC 可同时测定珠黄吹喉散中两种有效成分儿茶素和盐酸小檗碱的含量,可用于该制剂的质量控制。

1.2在中药指纹图谱中的应用利用I-WLe技术进行中药的标准化,建立药材或中成药特征的色谱或光谱的图谱是一种有效的方法。

快速高效液相色谱分离技术在中药分析中的应用分析

快速高效液相色谱分离技术在中药分析中的应用分析

快速高效液相色谱分离技术在中药分析中的应用分析作者:张守军来源:《数字化用户》2013年第20期【摘要】中药作为我国治疗疾病的重要药物,其成分分析在研制工作中尤为重要。

中药成分复杂性较高,其分离工作方面一直是研究人员长期研究的主题。

在这种背景下,高效液相色谱技术应运而生,为研究打下了基础。

本文基于这类技术的作用特点,分析了三种液相色谱的应用要点,旨在提高这种技术在中药成分分析中的应用程度,优化中药分析效果。

【关键词】液相色谱中药分析应用高效液相色谱是基于经典色谱与气相色谱产生发展的。

目前,研究者将高效液相色谱分为了几个种类,包含高温液相色谱、高压液相色谱以及基于整体柱的高效液相色谱等。

中药在我国运用时间较久,从古至今,中药通过其植物药这种天然药物的特点在医药体系中占据重要地位,但由于中药本身成分并不简单,因此分析时间较长,难度也较大。

近年来,研究人员采用快速高效液相色谱分离技术,成功改善了传统分析中的缺陷,通过色谱分离参数的改进让中药分析更加方便快捷。

本文从这种方法的几个方向分析了应用要点。

一、高温液相色谱分离技术采用高温来对中药展开分析是研究者长期以来使用最频繁的方式,在高压力状态下,分离能够实现高效、快捷的效果。

相对于此方面传统分离技术而言,以往不高的压力并不能在短时间内将成分有效分离。

当温度持续上升并达到某一程度时,流动相的黏度也会随之产生改变。

例如,将温度从80摄氏度逐渐上升到200摄氏度,在这一过程中,流动相黏度会逐渐降低,直至降到原有的10%-20%。

黏度下降可以让溶质在相液中提升扩散速度,流动阻力下降。

在系统柱后压没有明显上升的基础上,分离可以在高流速状态下实现其高效性。

在对中药分析的中,高温不仅可以让分离速度明显提升,还能够针对中药中含有的碱性化合物着重分析,让其色谱峰形得以改善,从而减少实验中需要用到的有机溶剂。

在近年来的研究中,越来越多的热稳定性色谱原料被研发,例如氧化锆、多孔石墨化碳以及聚合物等,这些填料的出现实际上为高温液相色谱分离技术提供了一个良好的发展平台,使得这一技术成为了色谱发展的新兴代表。

高效液相色谱在中药分析中的应用

高效液相色谱在中药分析中的应用

高效液相色谱在中药分析中的应用中药是一种有悠久历史的药物资源,它们源于广泛的植物、动物和矿物质资源。

在中国和其他亚洲国家,中药已成为主要的疾病治疗方法之一。

现代科技的发展使得人们能够从中药中提取有益的成分,并通过先进的技术对其进行分离和定量。

高效液相色谱(HPLC)是目前常用的一种分析技术,它在中药分析中发挥了重要作用。

一、高效液相色谱的基本原理高效液相色谱是一种基于分子大小、分子形状、分子结构和极性等因素对物质进行分离的技术。

它的基本原理是将样品溶液通过一个充有分离剂的管柱,并通过一定的流动速度,使得不同成分在分离剂中呈现不同的滞留时间。

在滞留时间一定的条件下,可利用不同色谱法对溶液中的各种物质进行识别、鉴定和定量。

二、1.复杂中药有效成分的分离中药中存在许多类似结构的化合物,这些化合物主要是提高药物效力的有效成分。

而这些化合物之间的差异很小,容易混合。

这就需要用高效液相色谱分析技术进行区分和分离,并进一步寻找其中的有效成分。

例如,中药杜仲中含有大量的triterpene saponin类成分,这些成分可用高效液相色谱技术进行有效分离和鉴定。

2.中药药材的定量分析在中药制备过程中,药材的质量控制非常重要。

使用HPLC技术可以定量分析中药药材的有效成分含量,进一步控制其质量。

例如,中药丹参中含有多种有效成分,其中以丹参酮B的含量来衡量丹参的品质。

使用高效液相色谱技术可以更加准确地测定丹参酮B的含量,以保证丹参的质量。

3.中药制剂中有效成分含量的调节中药制剂是应用于一定疾病的一种药物组合,其中含有多种有效成分。

而这些有效成分的比例和含量对疾病治疗的效果有着重要影响,因此需要使用HPLC技术进行适当的调节。

例如,中药健脾益气片中含有多种有效成分,其中黄柏中的膦烯醇、腺嘌呤等成分的含量需要进行适当调节以达到治疗效果。

三、高效液相色谱技术的优势和挑战高效液相色谱是一种高效、高灵敏度、高选择性和多功能的分析技术,不仅适用于中药分析,还可以用于食品、化妆品和环境等领域的分析。

LCMS及CEMS技术在中药分析中的应用

LCMS及CEMS技术在中药分析中的应用

LCMS及CEMS技术在中药分析中的应用一、本文概述近年来, 随着科学技术的发展, LCMS (液相色谱质谱联用技术) 及CEMS (连续电化学检测技术) 在中药分析领域的应用越来越广泛。

这些技术的结合为中药材的鉴别、质量控制和安全性评估提供了强有力的工具。

LCMS技术将液相色谱的分离能力与质谱的鉴定能力相结合,在中药分析中可用于中药材中活性成分的分离和鉴定,以及中药复方中各成分的定性和定量分析。

通过深入研究中药材及其制剂中的化学成分,有助于理解中药的药效物质基础及其作用机制。

LCMS技术还可用于中药材及制剂的质量控制,通过对特征化学成分的检测,判断中药材的来源和质量,从而保证中药制剂的稳定性和有效性。

CEMS技术在色谱分离过程中结合电化学检测器进行定性和定量分析,可用于检测和鉴定中药材及其制剂中的生物活性物质。

这些活性成分通常是具有电活性的化合物,如生物碱、黄酮类化合物等。

通过CEMS技术,可以深入研究这些活性成分在中药材中的作用,有助于理解中药的药理作用机制。

CEMS技术还可用于研究中药材及其制剂在体内的代谢过程,为中药药代动力学研究提供有力的技术支持。

总之, LCMS及CEMS技术在中药分析中的应用对于提高中药材的质量、保证中药制剂的安全性和有效性、深入理解中药的作用机制以及推动中药现代化具有重要意义。

随着科学技术的发展, 这些技术将进一步得到优化和提升, 为中药分析领域带来更多的突破和创新。

二、技术在中药分析中的应用液相色谱质谱联用技术(LCMS)和毛细管电泳质谱联用技术(CEMS)在中药分析中具有广泛的应用。

这两种技术的高分辨率、高灵敏度和高准确性,使其成为中药复杂体系中成分分析、质量控制和药物代谢研究的重要工具。

在中药分析中,LCMS技术主要用于中药复方中多种成分的定性和定量分析。

通过液相色谱对中药提取物进行分离,然后结合质谱技术进行成分鉴定和含量测定。

这不仅可以提高分析的准确性,还可以为中药的质量控制提供有力的数据支持。

制备型高效液相色谱法及其在中药研究中的应用

制备型高效液相色谱法及其在中药研究中的应用

制备型高效液相色谱法及其在中药研究中的应用一、本文概述制备型高效液相色谱法(Preparative High Performance Liquid Chromatography, Prep-HPLC)是一种重要的色谱分离技术,以其高效、快速、自动化的特点在多个领域,特别是中药研究中发挥着越来越重要的作用。

本文旨在全面介绍制备型高效液相色谱法的基本原理、技术特点以及其在中药研究中的应用情况。

文章将概述制备型高效液相色谱法的基本原理和操作流程,包括色谱柱的选择、流动相的优化、样品的制备和分离等关键环节。

文章将重点讨论制备型高效液相色谱法在中药研究中的应用,包括中药成分的分离纯化、质量控制、药物代谢动力学研究等方面。

文章还将对制备型高效液相色谱法在未来的发展趋势和挑战进行展望,以期为相关领域的科研人员提供有益的参考和启示。

二、制备型高效液相色谱法的基本原理与技术制备型高效液相色谱法(Preparative High Performance Liquid Chromatography,Prep-HPLC)是高效液相色谱法(HPLC)的一个重要分支,它主要用于大规模分离、纯化和制备样品。

其基本原理基于混合物中各组分在固定相和流动相之间的分配平衡,通过高压泵将流动相推动,使待测样品在固定相和流动相之间不断进行吸附、解吸、再吸附的分配过程,从而实现各组分的有效分离。

制备型高效液相色谱法通常使用更粗的色谱柱和更高的流速,以实现更大规模的分离和制备。

与分析型高效液相色谱法相比,制备型高效液相色谱法更注重样品的纯度和回收率,而不仅仅是各组分的定性和定量分析。

在制备型高效液相色谱法中,选择合适的固定相和流动相至关重要。

固定相的选择应根据样品的性质和目标组分的特性来确定,常用的固定相包括硅胶、氧化铝、聚合物等。

流动相的选择则要考虑其与固定相的相容性、对目标组分的洗脱能力以及分离效果等因素。

制备型高效液相色谱法还涉及到柱层析、梯度洗脱、循环洗脱等技术。

高效液相色谱法在中药制剂有效成分含量测定中的应用

高效液相色谱法在中药制剂有效成分含量测定中的应用

北方药学2016年第13卷第2期高效液相色谱法在中药制剂有效成分含量测定中的应用陈华(鄂尔多斯市中心医院鄂尔多斯017000)摘要:中药所含成分多样复杂,为质量标准的研究带来挑战。

高效液相色谱法以其高效准确、灵敏、应用范围广等特点,在中药含量测定中发挥着重大作用。

本文对高效液相色谱法在中药制剂有效成分含量测定中的应用展开介绍,其中包括生物碱类、中药苷类、黄酮类、萜类成分含量测定。

关键词:高效液相色谱法中药制剂有效成分含量测定中图分类号:R927.1 文献标识码:A 文章编号:1672-8351(2016)02-0019-01近年来,高效液相色谱法(HPLC)在多种结构类型的中药活性成分含量测定中的应用较为广泛。

这是由于HPLC与其他分离分析方法相比,具有灵敏度高、柱效高、分离速度快、重现性好、用范围广、操作方便等优点。

因此,HPLC成为中药制剂有效成分质量控制的重要手段。

以下对其在生物碱类、中药苷类、黄酮类、萜类有效成分含量测定中的应用进行介绍。

1生物碱类成分含量测定生物碱在中药界分布较广、种类较多、化学结构复杂,大多数生物碱化合物具有药理活性,成为中药的有效成分之一。

目前,临床中的生物碱成分大约80多种,由于生物碱存在形式不同(游离型与成盐型),碱性强弱不同。

采用HPLC法能够准确测定生物碱的有效成分含量。

侯伟雄等[1]利用HPLC法测定苦参碱分散片中苦参碱的含量,得出的结论是HPLC测定苦参碱含量准确、操作简便、结果可靠、方法可行。

朱丹妮等[2]采用蒸发光散射检测器和Shimadzu-10A高效液相色谱仪,对贝母类药材中生物碱成分进行了测定,结果表明,贝母类生物碱HPLC-ELSD 图谱有明显差异,样品制备简便,分离度较好,重现性佳,可用于贝母类药材的质量控制。

2中药苷类成分的含量测定苷类在中药界分布广泛,生理活性多种多样,如芍药苷、苯甲酰芍药苷类具有抗氧化、抗炎、抗肝损害、调节免疫等作用。

高效液相色谱法及其在中药研究中的应用

高效液相色谱法及其在中药研究中的应用

一、概述高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)是一种应用广泛的分离和分析技术,其在中药研究中扮演着重要角色。

本文将对HPLC技术及其在中药研究中的应用进行介绍和探讨。

二、高效液相色谱法的原理及技术特点高效液相色谱法是一种基于液相为分离介质的色谱分析技术。

其原理是将待分析物质溶解于流动相中,在固定的色谱柱中经过固定相的分离。

HPLC技术具有分离效率高、分析速度快、灵敏度高、分析准确等特点,因此在中药研究中得到了广泛应用。

三、高效液相色谱法的应用1. 中药质量控制HPLC技术可以对中药中的有效成分进行定量分析,为中药的质量控制提供了重要手段。

通过HPLC技术可以对中药中的多种成分进行快速、准确的分析,实现对中药质量的快速检测。

2. 药效成分分离HPLC技术可以有效分离药效成分中的杂质,提高药效成分的纯度。

通过HPLC技术可以对药效成分进行快速分离和检测,为药物研发提供了有力支持。

3. 药物代谢动力学研究HPLC技术可以对药物在体内的代谢过程进行分析,为药物代谢动力学研究提供了重要手段。

通过HPLC技术可以对药物在体内的代谢产物进行快速分离和检测,为药物代谢过程的研究提供了有力支持。

四、当前HPLC技术在中药研究中的挑战与发展1. 检测方法的标准化当前HPLC技术在中药研究中仍面临着检测方法标准化的问题,各种方法的标准化程度有待提高。

2. 技术发展趋势随着科学技术的不断发展,HPLC技术在分辨率、分析速度、检测灵敏度等方面仍有进一步提升的空间。

未来HPLC技术有望在中药研究中发挥出更大的作用。

3. 多样性应用未来HPLC技术有望在中药研究中实现多种成分同时分析、高通量检测等多样化应用,为中药研究提供更全面的支持。

五、结论HPLC技术作为一种高效、准确、灵敏的分析技术,在中药研究中发挥着重要作用。

当前HPLC技术仍面临着标准化、技术发展等问题,但未来有望在中药研究中发挥更大的作用,为中药研究提供更全面的支持和保障。

高效液相色谱法在中药研究中的应用

高效液相色谱法在中药研究中的应用
关键 词 : 技术是一种重 要的分离分析方 法 , 于2 O世 纪 6 O 藏红花素的含量来进行栀子饮片的炒制程度具有科学依据 。汪洋 年代末在经典液相柱色谱 的基础上 引进气 相色谱的理论与技术 , 采 采用 H P L C法测定样品中的厚朴酚 、 和厚朴 酚的含量及其 含量 的变 用高压输液泵 、 高效固定相和高灵敏度的检测器并加 以改 进而发展 化规律 , 结 果表明不 同炮制方法 对厚朴酚 、 和厚朴酚 的含量存在 着 形成 。H P L C可分析高沸点 、 难挥 发和对热不稳定 的化合物 , 离子型 较 大影 响, 其生品中厚朴 酚、 和厚朴酚的含量最高 , 其余依 次为水制 化合物和高聚物乃至生物大分子等物质。 H P L C具有分离效能高 、 分 厚朴 、 姜炙厚朴 、 酒炙厚朴 、 醋制厚朴 、 姜浸厚朴 。 析速 度快 、 灵敏 度高 、 色柱可反 复使 用 、 流动相可选择 范 围宽 、 流 出 5 H P L C在中药药物动力学 中的应用 组易收集 、 操 作 自动化 、 适用范围广和安全的优点。 本 文就 H P L C在 赵 淑红等㈣采 用 H P L C测定血浆 药物浓度 , 采用 S H I M— P A C K — 中药有效 成分 的含 量测定 、 中药指纹 图谱 、 中药炮制和 中药药物 动 V P — O D S色谱 柱 , 流 动相为 甲醇 一乙腈 一水 ( 5 : 1 0 : 8 5 ) , 检 测波 长为 力学方面的应用 , 综述 如下 。 2 7 1 n m, 流速 1 . O M 1 / m i n , 用D A S软件计算药物动 力学 参数 。通过此 1 H P L C 的分 类 方法 , 研究 了秦 艽中龙胆苦苷在家兔体 内的药代动力学规律并建立 按功能用途分为 : 分析 型和制备 型 ; 按分离原理 分为 : 分配色谱 了家兔血浆 中龙胆苦苷的 H P L C检测方法 。贾巍等『 1 1 用 H P L C测大 ( 包括正 相分配色谱 与反 向分 配色谱) 、 离子色谱 、 离 子对 色谱 、 离子 鼠 血 浆 中 红 景 天 苷 的 浓 度 ,色 谱 柱 A l l t i m a C 。 柱 ( 1 5 0 m m X 交换色谱 、 吸附色谱 、 尺寸排阻色谱 和胶束 色谱 等l 】 】 。 4 . 6 mm , 5 m ) , 流动相 为甲醇 一水( 2 0 : 8 0 ) , 柱温室温 , 流速 1 . 0 mL/ mi n , 2 HP L C在 中药有效成分的含量测定 中的应用 检测波长 2 7 5 n m, 应 用 Wi n N o l i n药物动力学 软件处理实验数据 , 并 H P L C已被广泛应用 于中药有效成分 的含量测定 , 包 括生 物碱 、 探讨在大鼠体内红 景天苷 的药物动力学过程 , 研究为红景天的新药 黄酮 、 三萜皂苷 、 蒽醌 、 挥发油 、 木脂 素等。黄松闭 等选用 C 1 8 色谱柱 设计 、 剂 型评价及临床应用提供了科学 的依据 。 并 以 甲醇 一乙腈 一醋 酸铵缓冲液为 流动 相 , 采用 R P — H P L C法测定 结 束 语 妇科栓剂 中氧化苦参碱 、 苦参碱和小檗碱含量 , 结果氧化苦参碱 、 苦 此外 , HP L C在 中药鉴定 、 中药 有效部位测 定 、 中药有效成 分提 参 碱 和小檗碱 三种 有效成 分 的线性均 良好 , R S D分别 为 1 0 0 . 2 %, 取工艺研究 、 中药及其制剂生产的质量监控等方面的应用也越来越 9 9 . 2 %及 9 8 . 9 %, 为妇科栓剂 的质量控制提供 了良好 的依 据。郭星 广泛。随着 HP L C研究工作 的迅速发展 , 各 种先进的检测仪器和方 等1 3 1 建立 H P L C测定不 同产地 的钩藤 中钩藤碱 和异钩藤碱 的方法 , 法、 联用检测技术 、 自动化技术也不断更新改进 。H P L C会以更 加高 结果 显示 平均 回收率异 钩藤碱为 9 7 . 0 3 % ,钩藤碱为 9 8 . 9 5 %, R S D 速、 高效 、 准确 、 灵 敏及 自动化等优点 , 在 中药 各研 究领域 中发 挥更 H P L C将成为中药分离 、 鉴定和含量测定等研究领域的 分别 为 1 . 7 9 %和 2 . 5 5 %, 表明 H P L C为钩藤质量控制标 准的制定提 重要的作用 。 供可靠 的依据 。 首选 手段 , 有着广泛 的应用前景 。 参 考 文 献 3 H P L C在中药 指纹图谱中的应用 中药 指纹 图谱 主要 用于评价 中药材 以及 中药制剂 半成 品质量 【 1 ] 陈仁 兴. H P L C及其在 中药研 究 中的应 用和展 望『 J 1 . 蛇志 , 2 0 1 1 , 2 3 4 ) : 3 7 5 . 的真 实性 、 优 良性和稳定 性 , 它是建立在 中药化学成分 系统研究 的 ( 基础上 的一种综合 的、 可量化的鉴定手段 。中药指 纹图谱一般是以 『 2 ] 黄松 , 陈 占航 , 陶艳 , 等. R P — P L C法测定妇科 栓剂 中氧化 苦参碱 、 HP L C指纹 图谱为基础 ,以建立方法对 中药材或制剂进 行质 量控制 苦参碱 和小檗碱含量『 J 1 . 药物分析杂志 2 0 1 0 , 3 0 ( 1 ) : 1 1 0 — 1 1 3 . 【 【 3 】 郭星 , 曾常青. HP L C法测定不同产地钩藤 中异钩藤碱 和钩藤碱 的 唐旭 利等【 5 1 对九个地 区的 1 8 批 丹参样 品建立丹参 药材水溶 性 含 量 I J 1 . 河南 中医, 2 0 1 0 . 3 o ( 1 ) : 4 0 — 4 1 . 成分 的 H P L C指纹 图谱 , 1 2个共有 峰 , 三个特征峰 ( 丹参 素钠 、 表 儿 『 4 1 汪建龙. H P L C在 中药分析 中的应 用进展 『 J J . 现代 中西医结合 杂志 , 茶醛 、 丹酚酸 B) , 色谱 图中各峰分离度较好 , 特征 明显 , 方法 的精 密 2 0 1 1 , 2 0 ( 1 6 ) : 2 0 7 2 . 度、 重珊 性试 验的 R S D值 <5 %, 可作为丹参药材质量控制标准 。吴 【 5 】 唐旭利 , 刘静 , 李国强, 等. 丹参药材水溶性成分 H P L C化学指纹图 涛等t 6 j f j H P L C对管花 肉苁蓉药材 进行指纹 图谱研究 , 建立 的方 法 谱研 究【 J 1 . 中成药 , 2 0 0 8 , 3 0 ( 3 ) : 3 1 3 — 7 . 可用于不同来源的管花 肉苁蓉药材的质量控制 。孙 国祥 等1 7 ] 提 出指 【 6 】 昊涛 , 张娟 , 卿德 刚 , 等. 管花 肉苁蓉 H P L C指 纹 图谱研 究[ J ] . 新 疆 2 0 1 0 , 4 7 ( 3 ) : 4 9 9 — 5 0 2 . 纹图谱分离信息指数理论 , 对六 味地 黄丸 H P L C指纹 图谱试验条件 农 业科 学, 和结果进行评价 , 为六 味地 黄丸全面的质量控制提供 了又一新 的参 f 7 1 4 , 1 、 国祥 , 杨 婷婷. 基于分 离信 息量指数评 价的 系统指 纹定量 法鉴 考依据。 别六味地黄丸质量【 J ] . 中南药学, 2 0 1 0 , 2 ( 8 ) : 1 4 3 — 1 4 8 . 4 HP L C在 中药炮制 中的应用 【 8 1 陈红 , 肖永庆. 炒制对栀子 中藏红花 素含 量的影 响[ J 】 . 辽宁 中医药 合理制 定炮 制工艺 是 中药 炮制研 究 和 中药 生产 的重要 环节 。 大学报 , 2 0 0 9 , 1 1 ( 6 ) : 2 2 2 — 2 2 3 . 9 】 汪 洋. 不 同炮制 方法对厚 朴主要 成分 的影响分析 『 J ] . 中国现 代 药 H P L C在筛选 炮制工艺 、 评价炮制 品质量 、 检测 中药炮制前后有效成 [ 分 的含 量变化方面 的应用 日趋广泛 。H P I C的检测结果可为革新和 用 , 2 0 0 9 , 3 ( 2 1 ) : 1 8 2 - 1 8 3 . 提高传 统炮 制工艺 、 科学使用辅料提供依据 。 陈红等『 8 1 用 HP L C法 比 [ 1 0 】 赵淑红 , 蒋袁絮 , 马学琴 , 等. 家兔 血浆中龙胆 苦苷浓度的 高效液 J ] . 时珍 国 医 国药 , 2 0 1 0 , 2 1 ( 5 ) : 1 l 3 1 - I 1 3 2 . 较 栀子与饮 片中藏红 花素含量 , 结果测得 不同产地十批次样 品的生 相 色谱 测 定 『 栀子、 炒栀��
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高效液相色谱仪器
1. 储存和输送液体设备 2. 进样系统 3. 柱系统 4. 检测器 5. 控制和数据处理系统
选择流动相的原则: •保持色谱柱的稳定性 •化学惰性 •适合所用的检测器 •对样品有一定的溶解能力 •清洗、更换方便、毒性小 •沸点、粘度等物理性质合适
反相色谱最常用的流动相: 水、甲醇、乙腈、四氢呋喃、异丙醇等。 水-甲醇体系:大约50%水的时候粘度最大 水-乙腈体系:35%水的时候粘度最大。
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电学和电化学检测器:
安培检测器 电导检测器 库仑检测器 介电常数检测器 极谱检测器
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工作站: 完成数据采集和对仪器的控制。
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超高效液相色谱仪( UPLC)
超高效液相色谱是分离科学 中的一个全新类别,它给实 验室带来了新奇而强大的能 力。UPLC™借助于HPLC的 理论及原理,涵盖了小颗粒 填料、非常低系统体积及快 速检测手段等全新技术,增 加了分析的通量、灵敏度及 色谱峰容量。
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紫外吸收检测器有三种类型: 固定波长紫外吸收检测器:低压汞灯提供固定 254nm或280nm紫外光。
可变多波长检测器:氘灯做光源,光栅分光
光二极管阵列检测器photo-diode-array detector(PDAD,PDA, DAD):钨灯和氘灯组合 光源,进入检测池的不是单色光,而是一段紫外 波长上的光。
存放流动相的容器一定要惰性的,并且 有机溶剂要避光。
输液泵要求流量平稳,可以调节的流量 范围宽,耐高压。
一般是柱塞往复泵。
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流动相的混合输入和洗脱方式
离线混合 配制 滤过 脱气
在线混合 低压在线混合 高压在线混合
洗脱 等度洗脱 梯度洗脱
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高效液相色谱仪器——泵系统
色谱分离
慢 中等

淋洗液
Temporal course
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液相色谱的分类
按溶质在分离过程中的原理:
• 吸附色谱 • 分配色谱 • 离子交换色谱 • 体积排阻色谱 • 亲和色谱
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液相色谱的分类
按色谱固定相的形式:
• 平板色谱(平面色谱) • 柱色谱
按分离的压力
• 高压液相色谱(高效液相色谱) • 中压液相色谱 • 常压液相色谱
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进样系统包括手动进样和自动进样
无论手动进样还是自动进样,都要通过 六通阀。六通阀进样是高压系统的需要, 既不影响系统的正常运行又能够让样品 进到系统中去。
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高效液相色谱仪器——进样器
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柱系统包括色谱柱和柱温箱
反相键合相色谱柱最常用的就是ODS柱, 也就是C18柱。 柱温箱的温度控制要求比较精确,因为 流体的粘度受温度的影响较大。
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H-dp关系图
液固色谱法
一般也把吸附色谱法称为液固色谱法。液固色 谱法的固定相一般为固体吸附剂,常用的是: 碳酸钙、硅胶、氧化铝、氧化镁、活性炭等。 其中硅胶最为常用。
吸附色谱对中等分子量的油溶性样品可获得最 佳的分离,而对强极性或离子型的样品,有时 会发生不可逆吸附,不能得到满意的结果。
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固定相的其他性能
载体的形状 球形 无定形 粒径 3~10μm, 1.7~2.5μm 孔径 <150Å 分析分子量
<2000的化合物;>300Å 分 析分子量>2000的化合物 表面积 键合基团的表面覆盖度 含碳量
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一般认为键合相色谱的机理分配色谱机理, 也有人认为它是吸附色谱机理,其实应该 是有两种成分在里面,现在又有疏溶剂理 论等机理的提出。
X m nM s 吸附 X s nM m
解吸
X表示溶质分子,下标m为流动相,s为固定相 M表示流动相分子,下标m为流动相,s为固定相 n为被溶质分子取代的流动相分子数目
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键合相液相色谱
键合相固定相:在硅胶的表明用键合反应 把官能基团键合到表面上,解决固定相流 失的问题。
正相色谱:流动相极性比固定相极性小
反相色谱:流动相极性比固定相极性大
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高效液相色谱——固定相 化学键合相硅胶
octadecyl
Si-[CH2]17-CH3 C18
octyl
Si-[CH2]7-CH3 C8
cyanopropyl Si-[CH2]3-CN
CN
aminopropyl Si-[CH2]3-NH2 NH2
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有效成分、指标成分的检测
人参皂苷的检测
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高效液相色谱法在药典中的应用
项目 含量测定
2000版 109
2005版 527
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HPLC与TLC比较(2005版)
含量测定
TLC-SC
药材和提取物 15
中成药
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HPLC 175 352
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HPLC在中药质量分析和检测中的应用
有效成分、指标成分的检测; 杂质或有关物质检查; 添加物或有害残留物质的检测; 中药指纹谱分析
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液相色谱检测器
测量原理不同分类: •光学性质检测器 •电学和电化学性质检测器 •热学性质检测器
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光学性质检测器:
紫外-可见光检测器 示差折光检测器 荧光检测器 蒸发光散射检测器 化学发光检测器
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高效液相色谱仪器——检测器
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PDA 可以辅助定性。
DAD检测器3D图
示差折光检测器(refractive index detector RID): 溶液的折射率等于溶剂及其中所含各组分 溶质的折射率与其各自的摩尔分数的乘积 之和。
RID是通用型的检测器,但是灵敏度不高。
RID不能用于梯度洗脱。
蒸发光散射检测器
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基本原理:
吸附剂一般为多孔性的物质,在它们的表明 存在着分散的吸附中心,溶质分子和流动相 分子在吸附剂表面的活性中心上进行竞争, 同时不同溶质之间和同一溶质的不同官能团 之间液也存在竞争。竞争的综合结果就是形 成不同溶质在吸附剂表面吸附、解吸平衡。
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用一个式子表示如下:
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