盐酸吉西他滨降解实验研究

摘要

目的研究抗肿瘤药物盐酸吉西他滨降解趋势。方法用盐酸吉西他滨USP含量和杂质检测方法来检测盐酸吉西他滨在酸，碱，避光，光照，氧化，高温，高湿条件下的稳定性及降解趋势。结果与结论盐酸吉西他滨在氧化条件下是不稳定的。在光照条件下是很不稳定性。在碱降解条件下不是很稳定。在酸降解，高温降解，高湿降解，避光条件下相对稳定。

关键字：盐酸吉西他滨，降解，稳定性，抗肿瘤药物。

目录

一、文献综述 (4)

（一）盐酸吉西他滨的化学名和药理作用及药代动力学 (4)

（二）药品稳定性研究的重要性 (4)

（三）盐酸吉西他滨稳定性研究的方法 (4)

二、实验部分 (5)

（一）实验仪器和试剂 (5)

（二）盐酸吉西他滨HPLC降解实验方法的建立 (6)

（三）盐酸吉西他滨HPLC降解实验的操作步骤 (7)

（四）实验数据的计算与汇总对比 (10)

三、实验的结果和方法可行性的分析 (12)

（一）含量及相关物质的系统适应性及专属性分析 (12)

（二）各降解条件下的稳定性数据分析 (12)

四、结论 (13)

五、典型图谱 (14)

六、参考文献 (16)

一、文献综述

（一）盐酸吉西他滨的化学名和药理作用及药代动力学

盐酸吉西他滨英文名为Gemcitabine Hydrochloride。化学名为：4-氨基-1-(3,3-二氟-4-羟基-5-羟甲基四氢呋喃-2-基)-1H-嘧啶-2-酮盐酸盐。

盐酸吉西他滨作为一种前药在细胞内是脱氧胸苷激酶磷酸化的良好底物，在酶的作用下转化成下列代谢物：吉西他滨一磷酸盐（dFdCMP）、吉西他滨二磷酸盐（dFdCDP）和吉西他滨三磷酸盐（dFdCTP）其中dFdCDP和dFdCTP为活性产物。dFdCDP抑制核糖核苷酸还原酶，从而减少了DNA合成的修复所需的脱氧核苷酸的量（尤其是dCTP），低水平的dCTP逆转了脱氧苷激酶正常的负反馈抑制，导致dFdCTP更多的积聚。同时dFdCDP抑制了dCTP诱导的脱氧胞氨酶对dFdCMP的脱氨作用，且dFdCTP直接抑制脱氧胞苷脱酶，从而使更多的dFdCMP转化成活性代谢物dFdCMP的脱氨作用，且dFdCTP直接抑制脱氧胞苷脱氨酶，从而使更多的dFdCMP 转化成活性代谢物dFdCDP，dFd-CTP而dFdCTP则与dCTP竞争结合进入DNA链，插入至DNA 链中脱氧胞苷的位点，并允许鸟苷与其配对,盐酸吉西他滨分子就被此鸟苷“掩蔽”使其免受核糖核酸外切酶的移除修复，然后DNA链合成停止，进而DNA断裂、细胞死亡。

盐酸吉西他滨在静注后，很快的分布到全身各组织，输注时间越长，就越广，越深入，半衰期也就越长。在短时间输注下，半衰期约为32min~94min,在结束输注5min内，本品血浆浓度为3.2 ~45.5ug/ml,本品仅有少数与蛋白质结合，能被胞苷脱氨酸在肝脏，肾，血液和其他组织中快速完全的代谢，只有不到10%原药与代谢物从尿中排泄。

（二）药品稳定性研究的重要性

药品作为一种特殊的商品，它特殊性主要表现在专属性、两重性、质量的重要性和稳定性。药品质量的优劣性直接关系到用药者的健康与生命安全。因此，必须对药品质量实行全面的控制，以确保人们用药的安全、合理和有效。

（三）盐酸吉西他滨稳定性研究的方法

为确保药品质量稳定性、安全性和有效性，参考各文献及海正内部的标准操作程序开展降解实验。使用DAD 检测器对主峰纯度进行分析。说明在主峰中、各降解产物峰中有没有包含其它峰,其重要性体现在：一可以了解降解产物的特性；二是可以有效地检出和控制杂质。判断此方法是否适用于降解杂质的检测，是否具有稳定性指示性；同时探索盐酸吉西他滨在经过酸，碱，高温，氧化，光照，避光等条件下的稳定性特性，如降解途径，降解机制；鉴别和制备降解产物；探索盐酸吉西他滨在储藏过程中可能遇到的剧烈条件下的降解趋势；还可以为样品的包装及储存条件的选择提供依据。

二、实验部分

（一）实验仪器和试剂

电子分析天平：METTLER XP205 高效液相色谱仪：Agilent 1100

色谱柱信息Agilent ZORBAX SB-C8

250*4.6mm 5µm 货号：880975-906 实验室ID：F0134

水：纯化水，当日有效来源：海正药业制备

甲醇批号：I589107119 来源：MERCK

磷酸：批号：T20101202 来源：国药集团化学试剂有限公司双氧水批号：20100517 来源：国药集团化学试剂有限公司磷酸二氢钠：批号：F20110524 来源：国药集团化学试剂有限公司

盐酸吉西他滨标准品：批号及含量：HOI101

99.8%

来源：USP

胞嘧啶：批号及含量：115k1742

85.5%

来源：SIGMA

（二）盐酸吉西他滨HPLC降解实验方法的建立

通过研究盐酸吉西他滨在酸，碱，加热，光照，氧化，高温，高湿条件下的稳定性，探索盐酸吉西他滨在这些条件下可能的降解趋势。

1、方法描述

[含量]

①色谱系统

流动相：取13.8g磷酸二氢钠、2.5ml磷酸加1000ml水混合，此溶液pH为2.4～2.6。

色谱柱：Agilent，ZORBAX SB-C8，5µm，4.6mm×250mm或者相当

检测波长：275nm

流速：1.2ml/min

进样量：20µl

②溶液配制

标准溶液：取盐酸吉西他滨对照品25mg，加水溶解并稀释制成250ml溶液。

样品溶液：取盐酸吉西他滨样品25mg，加水溶解并稀释制成250ml溶液。

系统适用性溶液：取盐酸吉西他滨约10mg，置一小容器中，加0.168g/ml的氢氧化钾甲醇溶液4ml，加盖紧闭，超声，并于55℃加热6至16小时，冷却，用1%(V/V)的磷酸溶液淋洗移至100ml量瓶中，加1%(V/V)的磷酸溶液稀释至刻度，混匀（此溶液中а－异构体浓度约为0.02mg/ml）。