小鼠支气管哮喘模型的研究现状
BALB／c小鼠阴虚型过敏性哮喘模型的建立与评价
BALB／c小鼠阴虚型过敏性哮喘模型的建立与评价目的建立BALB/c小鼠阴虚型过敏性哮喘模型并进行评价。
方法采用腹腔注射与皮下注射卵清白蛋白（OV A）致敏、雾化吸入OV A激发的方法复制过敏性哮喘BALB/c小鼠模型，激发后期合并灌胃甲状腺素复制阴虚型过敏性哮喘模型。
在监测饮食、饮水及体质量的基础上，对支气管激发过程中哮喘行为学、肺功能及肺组织病理学等哮喘相关指标进行观测，同时对cAMP、cGMP及肺液清除功能等阴虚证相关指标进行考察。
结果阴虚哮喘模型组小鼠出现明显的哮喘症状，哮喘行为学综合评分明显升高，吸气峰流量、呼气峰流量、潮气量明显下降，呼吸频率增加，肺组织病理学可见明显的炎症反应；同时，阴虚哮喘模型组小鼠进食与饮水量明显增加，而体质量增长缓慢，肺组织湿重/干重比值下降，血清cAMP及cAMP/cGMP升高，cGMP下降，显示小鼠处于阴虚而阳相对亢盛的状态。
结论在OV A致敏、激发的基础上给予甲状腺素，可成功复制BALB/c 小鼠阴虚型过敏性哮喘模型。
Abstract：Objective To establish and evaluate a BALB/c mouse model of anaphylactic asthma with yin-deficiency syndrome. Methods Ovalbumin （OV A）was injected to sensitize and was inhaled to stimulate to replicate the BALB/c mouse model of anaphylactic asthma. Thyroxin was used for gavage during late stimulation to replicate the BALB/c mouse model of asthma with yin-deficiency syndrome. On the basis of monitoring food and water intake and body weight，asthma related indexes，such as asthmatic behaviors，respiratory function，lung histopathology，were detected，and yin-deficiency syndrome related indexes，such as cAMP and cGMP，and pulmonary fluid clearance were examined. Results The BALB/c mouse model of asthma with yin-deficiency syndrome showed obvious asthma symptoms；comprehensive scores of asthmatic behaviors increased significantly；inhaling peak flow，exsufflation peak flow，and tidal volume decreased significantly；lung tissue histopathology showed obvious inflammatory response. Meanwhile，food and water intake of BALB/c mouse model of asthma with yin-deficiency syndrome increased significantly；body weight increased slowly；wet/dry ratio of lung tissue decreased；cAMP and cAMP/cGMP increased，while cGMP decreased，which showed that the mice were in the condition of yin-deficiency and yang-excess. Conclusion Combining thyroxin at the basis of sensitivity induced by OV A is a good pattern to successfully replicate the BALB/c mouse model of anaphylactic asthma with yin-deficiency syndrome.Key words：anaphylactic asthma with yin-deficiency syndrome；animal model；BALB/c mice近年来，随着环境污染与过敏体质人群的增加，过敏性哮喘（以下简称“哮喘”）的发病率明显增加[1]；另一方面，随着社会观念的变化，偏瘦体质的人（特别是女性）越来越多，导致阴虚质偏颇体质人群迅速增加[2]。
中性粒细胞性支气管哮喘小鼠模型的建立及其气道高反应规律的研究
论著中性粒细胞性支气管哮喘小鼠模型的建立及其气道高反应规律的研究刘晓微 蒋敏 农光民 刘宏涌 彭方 刘静 【摘要】 目的 通过建立中性粒细胞性哮喘（neutrophilic asthma，NA）模型，检测NA、嗜酸粒细胞性哮喘（eosinophilic asthma，EA）小鼠模型气道阻力、气道高反应的变化，探讨不同气道炎症状态下哮喘小鼠气道高反应性（airway hyperreactivity，AH R）的特点。
方法 BALB／c小鼠，随机分成NA组、EA组、正常组（NS组）。
NA组给予卵蛋白、脂多糖气道滴入致敏，EA组给予卵蛋白腹腔注射致敏，两组均于第２１天起给予卵蛋白雾化激发。
NS组用生理盐水致敏与激发，方法同NA组。
采用Buxco小鼠肺功能仪于雾化第１、７、１４天检测气道阻力的变化。
肺组织HE染色及PAS染色，观察肺组织病理改变及杯状细胞增生变化。
收集支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid，BALF），进行细胞总数及分类计数。
结果 ①３．１２５～５０mg／ml乙酰甲胆碱（methacholine，Mch）NA组、EA组激发第１天AHR高于NS组；１２．５～５０mg／ml Mch NA组AHR高于EA组（P值均＜０．０５）。
②５０mg／ml Mch NA组、EA组激发第１天AHR高于激发第７、第１４天（P＜０．０５）。
③激发第１天NA组、EA组BALF细胞总数及分类计数与NS组无差异（P＞０．０５）；激发第７、第１４天NA组、EA组BALF中细胞总数较NS组、激发第１天升高（P＜０．０５）。
NA组BALF中中性粒细胞（NEU）％高于EA组、NS组和激发第１天，嗜酸粒细胞（EOS）％高于NS组、激发第１天而低于EA组（P值均＜０．０５）。
EA组BALF中EOS％、NEU％均高于NS组和激发第１天（P值均＜０．０５）。
④激发第７、１４天NA组、EA组均可见肺泡间隔炎症细胞浸润；NA组以NEU浸润为主，EA组EOS浸润明显。
支气管哮喘小鼠气道反应性无创检测方法的建立
支气管哮喘小鼠气道反应性无创检测方法的建立李斌恺赖克方洪燕华王法霞陈如冲林少建钟南山【摘要】目的目前国内对支气管哮喘(简称哮喘) 小鼠的评价多数仅立足于气道炎性指标,不能完全反映哮喘的病理生理特征。
本所率先从国外引进了小动物无创检测和有创检测肺功能仪。
无创法检测时小鼠不必麻醉,而且每次可以同时检测多只小鼠,具有较大的优越性,但能否取代有创法尚需更多的数据。
本研究旨在建立无创检测小鼠气道高反应性的检测方法,并与有创检测方法进行比较。
方法根据动物模型和气道反应性检测方法不同,动物分为: ①无创哮喘组; ②无创对照组; ③有创哮喘组; ④有创对照组。
采用卵白蛋白致敏和激发,建立BALB/ c 小鼠哮喘模型,生理盐水作为对照,分别用无创和有创的方法测定气道反应性。
哮喘动物雾化吸入0 . 2～50 g/ L 倍增浓度的乙酰甲胆碱( Mch) ,测定相应浓度下的增强呼气间歇( Pe nh) 值或气道阻力( RL ) 值等指标。
将小鼠吸入Mc h 后RL 或Penh 增加 2 倍的激发浓度以PC100 来表示。
所有动物都行支气管肺泡灌洗, 收集灌洗液, 涂片染色后分类计数。
结果无创哮喘组PC100 均≤6 . 25 g/ L ,对照组PC100 均≥12 . 5 g/ L 。
其Lo g2 ( 10 PC100 ) 值( 5 . 36 ±0 . 84) 显著低于对照组( 7 . 97 ±0 . 82)( P < 0 . 01) 。
无创哮喘组从Mc h 浓度3 . 12 g/ L 开始, 其Pe nh 值明显高于对照组。
有创哮喘组RL 值从Mc h 浓度0 . 39 g/ L开始就明显高于相应对照组( P < 0 . 05) 。
无创组与有创组的气道反应性相关系数R =0 . 96 ( P < 0 . 01) 。
无创哮喘组和有创哮喘组的嗜酸粒细胞分别为( 54 . 00 ±5 . 96) % , ( 55 . 93 ± 5 . 92) % ,显著高于各自对照组的( 0 . 38 ±0 . 52) % , ( 0 . 63 ±0 . 74) %( P < 0 . 01) 。
平喘药实验报告
平喘药实验报告平喘药实验报告引言：哮喘是一种常见的呼吸系统疾病，患者在遇到刺激或过敏原时，呼吸道会出现痉挛、水肿和分泌物增多等症状，导致呼吸困难。
为了寻找有效的治疗方法，我们进行了一项平喘药的实验研究。
实验设计：我们选取了30只小鼠作为实验对象，将它们分为三组，每组10只。
第一组是正常对照组，第二组是哮喘模型组，第三组是治疗组。
我们首先在哮喘模型组和治疗组的小鼠体内注射过敏原，诱发哮喘症状。
然后，治疗组的小鼠口服平喘药，观察其对哮喘症状的缓解作用。
实验过程：首先，我们制备了过敏原混悬液，将其注射到哮喘模型组和治疗组的小鼠体内。
注射后，我们观察小鼠的呼吸情况，记录呼吸频率和呼吸困难的程度。
哮喘模型组的小鼠呼吸困难明显，呼吸频率加快。
而正常对照组的小鼠没有呼吸困难。
接下来，我们给治疗组的小鼠口服平喘药。
平喘药的成分是一种β2受体激动剂，可以扩张呼吸道，减轻痉挛和水肿。
我们观察到，在口服平喘药后，治疗组的小鼠呼吸困难明显减轻，呼吸频率恢复正常。
这表明平喘药对哮喘症状有明显的缓解作用。
实验结果：通过对实验数据的统计分析，我们得出了以下结论：1. 哮喘模型组的小鼠在注射过敏原后呼吸困难明显，呼吸频率加快。
2. 治疗组的小鼠在口服平喘药后呼吸困难减轻，呼吸频率恢复正常。
3. 正常对照组的小鼠没有呼吸困难。
讨论与分析：我们的实验结果表明，平喘药对哮喘症状有明显的缓解作用。
这是因为平喘药中的β2受体激动剂可以扩张呼吸道，减轻痉挛和水肿。
然而，我们也需要注意到，平喘药只是暂时缓解症状，并不能根治哮喘。
对于长期患有哮喘的患者，还需要综合运用其他治疗方法，如激素治疗和免疫疗法。
结论：通过本次实验，我们证实了平喘药对哮喘症状的缓解作用。
平喘药可以扩张呼吸道，减轻痉挛和水肿，从而减轻呼吸困难。
然而，我们也需要进一步研究，探索更有效的治疗方法，以提高哮喘患者的生活质量。
总结：哮喘是一种常见的呼吸系统疾病，给患者带来了许多困扰。
哮喘动物模型及平喘药物的研究进展
哮 喘动 物模 型 及 平 喘药 物 的研 究进展
赵 建 美， 志 杰 ， 娄 林红伍 （ 津 市塘 沽 中 医医院 ， 天 天津 ３０ ５ ） ０ ４ １
［ 键词］ 哮喘 ； 关 动物 模 型 ； 平喘 药 ［ 图分 类 号 ］ Ｒ ３２ 中 ３ ［ 文献 标 识 码 ］ Ａ ［ 章 编号 ］ １０ —８ ４ （０ ７ ２ ～４ ５ ０ 文 ０ ８ ８ ９ ２ ０ ）８ ２ ０ ２ １２ ２ 用尘 螨 诱 发 的 哮 喘 模 型 哮 喘 患 者 ８ ％ 对 尘 螨 过 ．． ０
的主 要 进展 综 述 如 下 。 １ 哮 喘动 物 模 型 的研 究
敏 ， 螨 是 哮 喘 的 重要 变应 原 ， 用 尘螨 诱 发 的 的哮 喘 模 型 应 尘 使
能更 好 地 反 映哮 喘 特 征 。 所 用 动 物 有 小 鼠 （ Ｂ ／ ） 豚 鼠 ， Ｃ Ｌ６、 也 有 大 鼠和 兔 。变应 原 主 要使 用屋 尘 螨 （ ｅ． Ｄ ｒＰＩ）而 粉 尘 螨 ， （ ｅ．） 用 较 少 。 国 内有 人 将 Ｄ ｒｐ和 Ｄ ｒｐ 用 Ｐ Ｓ稀 释 为 Ｄ ｒｆ使 ｅ． Ｉ ｅ．ｌ Ｉ Ｂ １０ｇＬ， 予 Ｂ Ｌ ／ 小 鼠第 １天腹 腔 注射 ２ ｊ ０ 尘 螨 ． ／ 给 Ａ Ｂｃ ％Ａ （ Ｈ） 提 取 液 ５ Ｌ 并 在第 １— １ ０ ， ４ ６天 每 天 １次用 尘 螨 提 取 液 ５ Ｌ ０ 缓 慢 滴 鼻 ＿ ， 而 用 较 少 量 的尘 螨 提 取 液 建 立 了 Ｂ Ｌ ／ 小 ５从 Ｊ Ａ Ｂｃ 鼠尘螨 诱 发 的典 型哮 喘 模 型 。 １ ２３ 其 他 方 法 诱 发 的哮 喘 模 型 如用 病 原 体 诱 发 的 哮 喘 ．． 模 型 、 基 因技 术 诱 发 的 哮 喘 模 型等 都 因 发 病 率 较 低 或 费 用 用 过 高而 限制 了其 应 用 。
小鼠哮喘气道重构模型的建立及组织形态计量学定位定量初步研究
实验 Ｂ Ｌ ／ 小 鼠哮 喘模 型 的诱 导是成 功 的。而且 ， 实验 Ａ Ｂｃ 本
通过 该 标 志 性 部 位 进 行 的 Ａ Ｂ—Ｐ Ｓ染 色 下 形 态 计 量 学 测 量 Ａ
Ｒａ ｓ— Ｂ ｒ６ ｍｏ ａｂ ｎ Ｄ，Ｌ ｄ ｉ ｕ ｗｇ ＭＳ，Ｍａｔｎ Ｊ Ａｉ ｙ ｒ— ｒ Ｇ． ｒ ｅ ｉ ｗａ
Ｔ ｂｅ２ Ｐ ｔｏｏｉａ ｃ ａ ｇ ｆｌｎ ａ ｌ ． ａｈ ｌｇｃｌ ｈ ｎ ｅｏ ｇｉ ＡＢ—Ｐ ｔｉｉｇ ±ｓ ｕ ｎ ＡＳｓａｎｎ （ ．ｎ：１ ０）
Ｐ ＜０ ０ ． ５．
Ｐ ＜０ ０ ． １
ｎ ｉｅ ｇ ｏ ｐ； △ Ｐ ＜０ Ｏ 伽 ｃ ｎ ｒ ｌ ｒ ｕ ａｖ ｒ ｕ △ １ ｏｔ ｏｐ ｏ ｇ
细 漫性 的， 以累积整个气道。孔祥永等 的研究 提示较 大支 如 杯 状 细 胞 是逐 级 减 少 的 ， 小 支 气 管 通 常 没 有 杯 状 细 胞 ， 可 而平 滑肌 的量则 是逐级 增 多， 以 ， 所 在不 能保证 每个切 片横 气管 的平滑肌细胞 和上皮细胞增 生活性 强于小支 气管 ， 原 其 截面上支气管数 目和类型相 同的前提下 ， 即使选取 多个支气 因可能为 ： １ 肥大细 胞在 大气 道 聚集的密 度明显 高于小 气 （） 管横 断面也不能避免这些本质差异所带来 的误差 。 道， 已证明肥大细胞类 胰蛋白酶可 以促 进平滑肌 细胞和上 皮 本实验 的创新之处在于利 用肺 组织外 部标 志 （ 门 ） 肺 进 细胞 的有丝分裂 ］ ２ １ ；（ ）卵蛋 白在 吸入过程 中首先 在大 气 ０ 行有效 的定位 ， 后在 固定 范 围内进行病 理切 片 的制作 ， 然 并 道沉积 ， 使大气道的炎症反应强 于小气道 ； ３ 由于平滑肌 细 （） 且选定的形态计量学测 量标 志性部位 只有 １ ， 个 操作更加 简 胞的异质性 ， 在较 大支气管 的平 滑肌细胞 表现 出与小 气道所 单、 可重 复性 和可 比性强 ， 而且在具体 的形态学测 量方法上 ， 不 同 的增 生 活 性 。也 就 是说 ， 大 支 气 管 病 理 形 态 计 量 学 上 较 本实验结合了 Ｉ ａｅ ｒ ｌｓ ． ｍ ｇ —ＰｏＰｕ ０图像分析软件 中的 Ｉ ｅｕ ６ ｒ ｇ－ ｒ 的改 变 能 够 很 好 地 反 映 哮 喘 气 道 重 构 的病 理 特 征 。那 么 ， 本 ｌ Ｏ 和 Ｓｇ ｅｔｔｎ功 能 ， 用 Ｉｅｕａ 的 自动 循 迹 功 ａＡ Ｉ ｒ ｅｍ ｎａｏ ｉ 利 ｒ ｇｌ ｒ ｒ中 实验通过采用前文 中所述方 法得 到 的形 态计 量学 测量标 志 能精确地界定 上皮层边界 ， 通过测量 上皮层和平 滑肌层面积 性部位的病理变化 ， 也能够代表 和反 映哮喘气 道重构肺组 织 来计 算各 自的平均厚度 ， 也减小 了人 为界定上皮层边 界的误 的病 理 变 化 。 差。此外 ， 考虑到支气 管上皮层 边缘皱褶 而平滑肌层 较光滑 由本 实验结果可 以看 出， 所有 经 Ｏ Ａ致敏 的 Ｂ Ｌ ／ Ｖ Ａ Ｂ ｅ小 等特点 ， 在具体指标 的计算 时 ， 有选用周长作 为换算指标 ， 没 鼠在吸入同一致敏原后均 出现程 度不等 的哮喘发作 ； 模型 组 而使用 的是统一界定区域面积作 为换 算指标 ， 使实验结果 更 小 鼠肺组织气道 上皮肿 胀 、 平滑 肌增厚 ， 道壁 及周 围有 大 气 加 科 学 、 具 有说 服 力 。 更 量 以 Ｅ Ｓ和淋 巴 细 胞 为 主 的 炎 性 细 胞 浸 润 。 这 些 改 变 与 文 Ｏ ［ 参 考 文 献］ 献报道的哮喘气道重塑的病理 改变基本一 致。可 以肯定 ， 本
066_支气管哮喘动物实验模型的研究现状
支气管哮喘（哮喘）是一种常见病、多发病。近 二十年来，世界范围内哮喘的发病率呈上升趋势。 哮喘的发病原因尚不清楚，大量研究表明变应原引 起的变态反应性炎症是哮喘发作的基本机制。此 外，病毒等生物因素和一些物理因素在哮喘的发生 发展中也起重要作用。迄今，研究人员已建立了多 种哮喘动物模型，对哮喘发病原因、诱发因素、发病 机制、药物防治等的研究起到了推动作用。现将近 几年来的进展综述如下。 ｌ基于变态反应性炎症的动物模型
变态反应性炎症是哮喘发作的基本机制，至少 ２／３的哮喘患者气道炎症属于变应性炎症“Ｊ。近年 研究认为，暴露于变应原对哮喘基因表达是必需的， 暴露水平决定基因表达水平Ｌ２ Ｊ。特异性支气管激 发实验中，哮喘反应可分为速发相与迟发相。速发 相于吸人变应原后数分钟至数十分钟出现，迟发相 于数小时至２４小时左右出现。速发相的主要机制 是体液免疫介导的Ｉ型变态反应，中心环节是肥大 细胞释放介质；迟发相则以嗜酸粒细胞（ＥｏＳ）浸润 气道为特征。近年来的研究发现，肥大细胞分泌与
ＩＬ－９、ＩＬ一１３等细胞因子。ｌＬ广４协助Ｂ细胞台成变 应原特异性Ｉ啦，ＩＬ一４基因敲除的小鼠【６一不能产生 特异性ＩｇＥ抗体，不出现Ｅｏｓ气道浸润，长期吸人 雾化抗原不引起气道反应性增高；ＩＬ一３调节肥大细 胞和嗜碱粒细胞的成熟：ＩＬ一５、ｌＬ一３、粒细胞巨噬细
胞集落刺激因子（ＧＭ一鸥Ｆ）选择性地促使骨髓和师
Ｔｍ细胞相似的细胞因子，还释放蛋白酶类包括胰 蛋白酶和胃促胰酶，参与气道炎症的发生和气道重 塑过程【３ Ｊ。有学者观察到哮喘患者和实验动物在 变应原激发后气道感觉神经和迷走神经周围有 ＥｏＳ聚集，ＥＯｓ释放的主碱蛋白（加ＢＰ）是Ｍ２蕈碱
受体拮抗剂，ⅧＰ通过拮抗抑制性受体的功能增加
建立小鼠哮喘模型两种不同方法的比较
建立小鼠哮喘模型两种不同方法的比较哮喘是一种慢性呼吸系统疾病，特征为阵发性呼吸困难、喘息、咳嗽和胸闷，严重影响患者的生活质量。
为了深入研究哮喘的发病机制和寻找有效的治疗方法，科学家使用小鼠建立了哮喘模型。
目前，有多种方法可以建立小鼠哮喘模型，其中最常用的包括感染性哮喘模型和变态反应性哮喘模型。
本文将对这两种方法进行比较。
感染性哮喘模型是通过感染细菌或病毒引发哮喘样症状。
首先，科学家选择一种感染性病原体，如肺炎克雷伯菌或呼吸道合胞病毒。
然后，将这些病原体通过吸入或直接注射等方式引入小鼠的呼吸道。
之后，小鼠的免疫系统就会开始产生炎症反应，导致呼吸道狭窄和气道高反应性。
这种方法的优点是可以真实地模拟感染性哮喘的病理过程，更符合人类疾病的特点。
但是，此方法需要使用病原体，存在一定的安全风险，并且操作比较繁琐。
与感染性哮喘模型相比，变态反应性哮喘模型更常用且操作相对简单。
变态反应是导致哮喘发生的主要原因之一，患者的免疫系统对特定的抗原物质产生过敏反应，导致气道炎症和收缩。
在小鼠中建立变态反应性哮喘模型，科学家首先选择一个合适的抗原物质，如牛血清白蛋白（BSA）或植物花粉等。
然后，将抗原物质与辅助剂混合，并通过皮下或鼻腔注射的方式给小鼠。
随着时间的推移，小鼠的免疫系统会对该抗原物质产生过敏反应，导致气道炎症和收缩。
此方法的优点是操作相对简单，不需要使用病原体，安全性较高。
但是，由于变态反应的机制相对复杂，该模型无法完全模拟感染性哮喘的病理过程。
除了以上两种方法，小鼠哮喘模型还可以通过化学物质诱导方法来建立。
例如，通过酸性盐类或花粉等刺激物来诱导小鼠产生气道高反应性和炎症反应。
这种方法的优点是操作简单，结果稳定，但是不能真实地模拟人类哮喘的病理特点。
综上所述，感染性哮喘模型和变态反应性哮喘模型是目前小鼠哮喘研究中最常用的两种方法。
感染性哮喘模型能够更真实地模拟人类的哮喘病理特点，但操作繁琐且存在一定的安全风险；而变态反应性哮喘模型操作简单且安全性较高，但不能完全模拟感染性哮喘的病理过程。
激素抵抗型哮喘小鼠动物模型的实验性研究
关 键 词 ： 支 气 管 ；哮 喘 ；小 鼠 ； 模 型 ，动 物 ；激 素 类 ； 气 管 中 图分 类 号 ： Ｒ３ ９ ２ ． １ ；Ｒ ５ ６ ２ ． ２ ５ ； Ｒ９ １ ６ ． ４ ；Ｒ ９ ７ ７ ． １ 文献标志码 ： Ａ 文章编号 ： １ ６ ７ ２ — ４ １ ９ ４ （ ２ ０ １ ５ ） Ｏ ４ ０ ２ １ １ Ｏ ４
Ｓ Ｓ Ａ） 组、 气管重塑 （ ａ ｉ ｒ ｗａ ｙ ｒ ｅ ｍｏ ｌ ｄ ｉ ｎ ｇ ， ＡＲ） 组 及 Ｓ Ｒ Ａ 组 。参 照 文 献 ［ ４ ］ 中建立 哮 喘模 型 的方 法 ，
ＮＴＡ 组 、 Ｓ Ｓ Ａ组 、 ＡＲ 组 及 Ｓ ＲＡ 组 均 于 实 验 第 ０ ， ７
和ｌ ４天腹 腔注射 含 ５ Ｏ／ ｌ ｇ ＯＶＡ 及 ２ ｍｇ氢 氧 化 铝 的致 敏 液 ， 第 ２ １天 起 ， 采 用 百 瑞 压 缩 型 雾 化 器 将 １ ％的 ＯＶ Ａ溶液进行雾 化吸人激发 ， 每天３ ０ ｍｉ ｎ ， 连续 ５ ｄ 。Ｓ Ｓ Ａ、 Ｓ ＲＡ组 于第 ２次 雾 化前 ３ ０ ｍｉ ｎ腹
地塞米松 （ ｄ ｅ ｘ ａ ｍｅ ｔ ｈ ｓ ｏ ｎ ｅ ， ＤＥ Ｘ） 中断 性 治 疗 ， 寻 求
有 效建 立 Ｓ Ｒ Ａ 小 鼠模 型 的 方 法 。
１ 材 料 与 方 法
组连 续雾 化 ９周 。ＮＴ Ａ组 、 ＡＲ组 分 别 用 ０ ． ９ ％的 生理 盐水 代 替 Ｄ Ｅ Ｘ腹 腔 注 射 。ＮＣ组 不 施 加 任 何
糖皮质激 素 （ ｇ １ ｕ ｃ ｏ ｃ ｏ ｒ ｔ ｉ ｃ ｏ ｉ ｄ ｓ ， Ｇ Ｓ ） 是 临 床 上 治 疗 支 气 管哮 喘 （ 以下 简 称 “ 哮喘” ） 的有 效 药 物 ， 随着 Ｇ Ｓ在 临床 上 的广 泛 应 用 ， 以及 环 境 、 精神 、 心 理 等 因素 的影 响 ， 部分 哮 喘患 者 哮喘症 状 反复 发作 ， 并对 Ｇ Ｓ的敏 感 度 明显 降 低 ， 因 此 一 种 新 的哮 喘 类 型一 激素 抵抗 型 哮喘 （ ｓ ｔ ｅ ｒ ｏ ｉ ｄ ｒ ｅ ｓ ｉ ｓ ｔ ａ ｎ ｔ ａ ｓ ｔ ｈ ｍａ ， Ｓ Ｒ Ａ） 也
三种哮喘小鼠动物模型的对比研究
•论著.三种哮喘小鼠动物模型的对比研究黄超文赵强钟莲娣钟雪莺仝金斋黄炎明【摘要】目的探讨三种哮喘小鼠造模方式在病理改变、灌洗液中细胞组分、气道反应性、气道炎症指标等方面的差异。
方法分别采用屋尘蠕提取物（HDM）、卵清蛋白（OVA）和甲苯二异氧酸酯（TDI）构建小鼠哮喘模型,检测小鼠肺病理改变、肺泡灌洗液（BALF）中炎症细胞和上皮细胞数量、气道高反应性、炎症因子表达情况。
结果HDM、OVA所诱导的哮喘小鼠BALF中细胞组分主要以嗜酸性粒细胞为主。
三组哮喘小鼠在接受不同浓度的乙酰甲胆碱雾化后气道阻力明显增高，与浓度呈正相关，而HDM和OVA诱导的哮喘小鼠气道阻力较TDI组更高。
三组小鼠的血清IgE和BALF中嗜酸性粒细胞炎症指标IL-4、IL-5JL-13明显增高，TDI组所诱导的IgE和BALF IL-4JL-5JL-13均分别低于HDM组和OVA组。
结论不同造模方式建立的哮喘小鼠动物模型在气道反应性、气道炎症和病理特点各有不同，HDM哮喘小鼠和OVA哮喘小鼠具有典型的嗜酸性粒细胞哮喘表现，而TDI哮喘小鼠表现为混合细胞性哮喘动物模型。
【关键词】哮喘；动物模型；屋尘螭提取物；卵清蛋白；甲苯二异氤酸酯［中图分类号］R562.2［文献标识码］A DOI:10.3969/j.issn.1002-1256.2019.11.001支气管哮喘是一种由多种炎症细胞和炎症组参与的慢性气道变应性炎症,并以气道黏液高分泌、气道高反应性和气道重塑为主要特征⑴。
Brown Norway、Wistar大鼠、Sprague Dawly大鼠为常见的大鼠哮喘动物模型，而BALB/c小鼠、C57BIV6小鼠则是常见的哮喘小鼠动物模型⑷。
目前造模方式常采用屋尘蟻提取物（HDM）、卵清蛋白（OVA）、甲苯二异氤酸酯（TDI）、灭活的呼吸道合胞病毒（RSV）等刺激诱导哮喘动物模型⑶。
本研究拟建立HDM、OVA、TDI分别诱导的三种哮喘小鼠动物模型，对比其在气道反应性、气道炎症和病理方面的差异，评价各模型的优劣。
支气管哮喘动物模型建立及研究现状
支气管哮喘动物模型建立及研究现状陈一平【摘要】支气管哮喘是一种由多种细胞和细胞组分参与的气道慢性炎症性疾病,是全球范围内严重威胁公众健康的慢性疾病,其发病机制包括气道慢性炎症、气道高反应、不可逆性的气道重塑、神经反应、变态反应、遗传等等,多种机制之间相互关联、错综复杂,建立动物模型有助于研究其病因及发病机制.啮齿类动物模型是最常使用的支气管哮喘动物模型.该文主要通过对近年来不同种系的啮齿类实验动物在哮喘动物模型方面新研究的总结,为进一步开展哮喘相关研究提供帮助.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2014(020)005【总页数】4页(P840-843)【关键词】支气管哮喘;模型;动物【作者】陈一平【作者单位】广西医科大学第一附属医院呼吸内科,南宁,530021【正文语种】中文【中图分类】R562.25支气管哮喘是由多种细胞和细胞组分参与的气道慢性炎症性疾病。
近年来随着生活方式改变及环境因素的影响，特别是在发达国家，哮喘发病、防治成本及疾病负担有逐年增高的趋势，据WHO最新报告，目前约有2.35亿人受哮喘疾病影响[1]，因此哮喘的相关研究越来越受到医学界的重视和关注。
哮喘发病机制复杂，鉴于人体试验的局限性，有关哮喘发病机制的探索、新治疗方法的评价、新药研究与开发都主要依赖于动物实验。
随着动物模型研究的进步和基因敲除及转基因等技术的出现，使模型动物的选择和动物模型的建立方法逐步改进以达到尽可能模拟人类哮喘疾病过程的目的，下面就支气管哮喘的动物模型的建立进展进行综述。
1 小鼠其免疫遗传背景清楚，品系纯，来源广，相关生物学试剂及抗体易获得。
可复制产生与人类相似的气道高反应、气道慢性炎症、黏液增多等症状,并已有反应气道慢性炎症过程的气道重构模型,虽然有体积小、操作及取材较困难，制作往往需要多次致敏和激发等缺点，目前仍为支气管哮喘研究最为常用的动物模型。
常用的小鼠品系为BALB/c、C57BL/6，A/J、CBA、C3H等，以前两种品系最常用。
慢性支气管炎及支气管哮喘动物模型复制的研究进展
为 了进一步 阐明 Ｃ 、Ａ发 病 的遗传 背景 、 ＢＢ 诱发 因素 、 发
病机制 ， 由此进行防治药 物的探索 。近年来 ，许多 学者纷 并
纷通过构建 和研究 动物模 型来模 仿 Ｃ 、 Ａ的病理特 征 。本 ＢＢ
标准
由于 Ｃ 、 Ａ的发病机制复杂 ， ＢＢ 模拟其病 理变 化和临床特
征变得异常 困难 。一 个理想 的 Ｃ 、 Ａ动物模 型应 具有 与人 ＢＢ
类疾病相一致 的以气 流受限为特征 的肺功 能改变 ，同时还伴 有肺 内中性粒 细胞 占优势 的炎症反 应和气 道 、 肺实质 及肺血 管 的损伤 。因此 ， 建 Ｃ 、 Ａ动 物模型 是否 成功 应 以此 为 所 ＢＢ 重要判 断标 准 。郑 鸿 翱 认 为 ， 个 符 合 临床 实 际的理 想 一 Ｃ 、 Ａ动物模 型应 具备 的标准 是 ： 伤 因素 与 临床 Ｃ Ｂ ＢＢ 致 Ｂ、 Ａ 常见诱 因基 本一致 ； 必须 有气 流阻塞 存在 ， 小气道 阻力增 高 、 肺动态顺应性下 降 ； 气道重塑 （ ； 建） 可伴 有气 道高反应性 。
一
高模 型复制的成功率 。
（ ） 管 内 注 入脂 多 糖 法 ２气 马楠 将雄 性健康 Ｓ Ｄ成 年 大
鼠随机 分组 后 ， 将慢支组大 鼠用 １ ％戊 巴比妥钠 （０ ｍ ／ ｇ ， ５ ｇＫ ） 腹 腔注 射麻 醉 ， 仰卧位 固定 于操作 台 ， 出舌体 ， 拉 暴露声 门 ， 用 聚乙烯 静脉套管针来替代气管导管 ， 除针芯 ， 拔 快速将套管插 入气 管 ， 将脂多糖 （ Ｐ ）０ ２ ｌ Ｌ Ｓ ２０ ０ 注入气管 内， 饲养 ３周 。表现 出人 类慢支 的病 理改 变 ， Ａ Ｆ中 白细胞 总数 及 中性粒 细胞 显著 ＢＬ 增高 ， 也与文献报道 的人类慢 支所见 相符 。此种 造模方 法简
国内支气管哮喘气道重塑动物模型的研究进展
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导鳍瀚 学
国 内支气 管哮喘气 道重 塑动 物模型 的研 究进展
钱振福 崔芳 囡 ，
（ １北京密云县中医医院内科 ， 北京 １１０ ； ０５ ｏ ２中国中医科学院望京医院电热针门诊 ， 北京 ｌｏ ０ ） ｏ １２
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所查 文 章 中采
用雄性 动 物 的 占 １ ７篇 ， 性 动 雌
ｍａ ｍ ｄ ｌ ｎａｔｍ ｉ ａ ｅ ｌｉ ｈｃ ｅｅｐ ｂｉ ｅ ｏ ｅｔ ｕ ｌ ｗ ｒ ｌ ｔａ ａ ｓ ， ｌ ｏ ｅ Ｉ ｓ ａａ ｗ ｙｒ ｄｎ ｈ ｒ ｍｏ ｗ ｉ ｗ ｒ ｕ ｌ ｈ ｄｉ ｄ ｍ ｓ ｃｊ ｍａ ｅｅｓ ｅ ，ｎ ｌ ｉ ｈ ｓ ｎ ｉ ｏ ｓ ｅｃ ｖｓ
哮喘动物模型研究现状(精)
哮喘动物模型研究现状【摘要】支气管哮喘是呼吸系统一种常见病与多发病。
其发病机制复杂,建立合适的动物模型有助于开发治疗人类变应性疾病的新药。
本文主要就哮喘动物模型的研究现状进行综述。
【关键词】哮喘动物模型Abstract:Bronchial asthma is a common disease and frequently encounter ed disease of respiratory apparatus.The pathogenesy is complicated,establishing suitable animal models of asthma benefits th e development of new drug to treat humans'allergic disease.A brief review on the establishment of animal modles on asth ma was made in this *****.Key words:asthma;animal modle支气管哮喘是呼吸系统一种常见病与多发病。
有关哮喘发病机制的探索、新治疗方法的评价、新药研究与开发都主要依赖于动物实验。
但是,动物自发形成的变应性哮喘很少,目前,哮喘的动物模型还很难完全模拟人类哮喘,只能在动物身上模拟哮喘的某些特征。
本文主要就哮喘动物模型的研究现状进行综述。
用于模拟人类支气管哮喘的动物种类很多,常用的如豚鼠、大鼠、小鼠、家兔等,用猫、狗、猪等动物复制哮喘模型也有报道。
1 豚鼠豚鼠是使用最广泛的变应性疾病动物模型。
尽管这种动物与人类有极大差异,但致敏豚鼠的过敏性支气管收缩在研究抗过敏、支气管扩张药物方面仍然是最常使用的模型。
致敏豚鼠的支气管过敏反应是常用的“速发型”变态性支气管收缩模型[1],这类模型的发病机制与人类的哮喘症相仿,同属Ⅰ型变态反应,其模型发病快,阳性率极高,但病程短,有些动物可发生急性过敏性休克而死亡,为防止动物过度反应死亡,可在激发前给豚鼠腹腔注射适量抗组胺药。
哮喘小鼠动物模型的建立与评价
哮喘小鼠动物模型的建立与评价郑凌霄;于芬芳;刘曼曼;尹灿灿;张莺莺;孙恩涛【摘要】哮喘是一种慢性炎症性疾病.借助哮喘动物模型不仅可用于哮喘疾病发生原因和发病机制研究,也可用于相关药物的药效研究.人类和动物之间存在物种差异,因此,全面、成功地建立一个与临床发病机制相似的、稳定可靠的哮喘动物模型非常重要.本文就哮喘模型的品系选择、模型建立及评价指标作简要分析.【期刊名称】《热带病与寄生虫学》【年(卷),期】2017(015)004【总页数】4页(P244-247)【关键词】哮喘;小鼠模型;模型建立;评价指标【作者】郑凌霄;于芬芳;刘曼曼;尹灿灿;张莺莺;孙恩涛【作者单位】241002安徽芜湖市,皖南医学院公共卫生学院;241002安徽芜湖市,皖南医学院公共卫生学院;241002安徽芜湖市,皖南医学院公共卫生学院;241002安徽芜湖市,皖南医学院公共卫生学院;皖南医学院弋矶山医院;241002安徽芜湖市,皖南医学院公共卫生学院【正文语种】中文支气管哮喘是一种常见的慢性呼吸道疾病，给患者及其家庭和社会带来沉重的负担。
全球约有3亿哮喘患者，我国哮喘发病率呈上升趋势，已成为全球哮喘病死率最高的国家之一。
因此，对哮喘的发生原因和发病机制的深入研究具有重要的价值。
由于人体研究的局限性和伦理学上的要求，需通过哮喘动物模型的建立提供有关哮喘发病机制和治疗上的有价值的信息。
在众多模拟人类支气管哮喘的动物模型中，虽兔、猫、犬、羊及灵长类动物也可用于复制哮喘模型，但都不是理想的选择对象，目前鼠类哮喘模型应用最多[1]。
一、动物选择1.豚鼠豚鼠易被致敏，是最早选用的哮喘动物模型。
接触致敏原后反应程度强，产生Ⅰ型变态反应，故常用于研究抗过敏、支气管哮喘药物方面的研究，也用于职业性哮喘模型的制作。
但是在用卵清蛋白复制豚鼠动物模型时，因其个体反应差异大，对致敏原或无反应或产生过敏性休克死亡。
通常在激发前需注射抗组胺药物，不仅费用高，而且缺乏相关免疫学和分子生物学试剂[2]。
制作简易实验动物雾化箱建立小鼠哮喘模型研究
第37卷第5期2020年10月实验动物科学LABORATORY ANIMAL SCIENCEVol.37 No.5October 2020《研究简报i制作简易实验动物雾化箱建立小鼠哮喘模型研究田丹许虎峰(首都医科大学附属北京友谊医院科研实验中心北京市临床医学研究所移植耐受与器官保护北京市重点实验室王松灵院士口腔与全身健康免疫研究实验室北京100050)摘要：目的应用简单易操作的方法将家用型医疗雾化吸入装置改造为实验动物雾化箱，为实验动物呼吸道疾病的研究提供便利。
方法利用家用型雾化器和动物实验室常见的独立通气鼠笼组合改造为实验动物雾化箱。
应 用自制实验动物雾化箱和鸡卵清白蛋白建立小鼠过敏性哮喘模型。
结果实验动物雾化箱能同时为1~20只小鼠实验快速稳定地产出雾化吸人气体，利用该雾化箱成功建立起小鼠过敏性哮喘模型。
结论我们利用该实验动物雾化箱建立小鼠过敏性哮喘模型并观察到明显的肺组织炎症表现。
该方法为简便和低成本地进行实验动物雾化实验提供具有操作性的指导。
关键词：雾化箱；动物模型；哮喘；小鼠中图分类号：Q95-337 文献标识码：A文章编号：1006-6179(2020)05-0071-03D O I；10. 3969/j.issn. 1006-6179. 2020. 05. 013哮喘在全世界的发病率正在逐步上升，目前已 经成为全球人类健康的巨大威胁m。
雾化吸人给药是临床治疗呼吸道相关疾病的重要治疗手段，也 是实验室进行呼吸道相关疾病研究的重要实验方法12]。
目前越来越多的医疗厂商开发出小巧高效的药物雾化吸人仪器用于各种呼吸道患者的居家给 药。
相对家用型雾化器，用于动物研究的特制雾化箱可选型号少、价格偏高且便携性偏低。
因此，应用 简单易操作的方法将家用型医疗雾化吸人装置改造 为实验动物雾化箱将为呼吸道疾病的顺利研究提供 便利。
本研究将利用家用雾化器和动物实验室常见的 独立通气鼠笼改造为实验动物用雾化箱，并进行小 鼠过敏性哮喘造模。
哮喘动物模型的制作及注意事项
哮喘动物模型的制作及注意事项哮喘是一种常见的慢性炎症性疾病，可以影响人类和动物。
为了深入了解哮喘的病理机制和寻找新的治疗方法，研究人员经常使用动物模型来模拟哮喘病理过程。
下面介绍一种常用的哮喘动物模型制作方法，并提供一些注意事项。
1.哮喘动物模型制作方法：（1）选择合适的动物：大多数实验室使用小鼠作为哮喘模型的动物，因为小鼠更容易操作，并且基因解析的种类较多。
（2）感染准备：将小鼠分成两组，一组为实验组，一组为对照组。
在实验组中，使用合适的方法感染小鼠，如使用孵化的混浊液鼻腔喷射感染，或者使用刺激性药物吸入。
（3）模型监测：在感染后的不同时间点，对小鼠进行病理学分析，如病理性炎症指标的测定，呼吸道超声检测等。
（4）治疗方法：可以使用不同的治疗方法来治疗实验组的小鼠，如药物治疗或其他新的治疗方法。
然后对治疗效果进行评估。
2.注意事项：（1）伦理问题：在进行动物模型研究时，需要遵循动物实验的伦理原则，确保动物的福利和保护动物权益。
确保合适的实验动物数量，提供适当的饲养环境和食物，并定期检查它们的身体状况。
（2）模型选择：选择合适的动物模型对哮喘研究非常关键，因为不同的动物可能对特定的刺激物或治疗方法有不同的反应。
确保选择的动物模型能够准确地模拟人类哮喘的病理过程，并具有相似的症状和结果。
（3）技术和方法选择：在制作哮喘动物模型时需要使用适当的技术和方法，如感染方法、病理学分析方法等，以确保实验结果的准确性和可靠性。
可以参考相关文献和专家的建议，以获得最佳的实验条件和结果。
（4）数据分析和解释：在进行哮喘动物模型实验后，需要对实验结果进行数据分析和解释。
统计学方法和模型评估技术可以用来分析数据，确保实验结果的可靠性和科学性。
同时，对实验结果进行合理的解释，明确实验结果对哮喘病理机制和治疗方法的贡献。
总之，制作哮喘动物模型是研究哮喘病理机制和治疗方法的重要工具。
在制作哮喘动物模型时，需要注意伦理问题，选择合适的动物模型和技术方法，并合理地分析和解释实验结果。
哮喘动物模型研究现状
哮喘动物模型研究现状哮喘是一种常见的慢性炎症性疾病，在世界范围内都有一定的发病率。
为了深入了解哮喘的发病机制和寻找有效的治疗方法，科学家们广泛使用动物模型进行研究。
这些动物模型能够模拟人类哮喘的病理特点，并为新药的开发提供参考。
本文将对哮喘动物模型的研究现状进行探讨。
常见的哮喘动物模型包括小鼠、大鼠、豚鼠、猴子等。
其中，小鼠是最常用的哮喘模型动物，因其容易获取、养殖成本低、繁殖能力强等优点。
小鼠模型主要通过吸入致敏物质诱导过敏性支气管炎来模拟人类哮喘。
常用的致敏物质包括植物花粉、真菌孢子、家居尘螨等。
通过注射或吸入这些过敏原，可以使小鼠产生类似于人类哮喘的病理特征，如支气管痉挛、炎症细胞浸润、黏液高度分泌等。
在小鼠哮喘模型的研究中，研究人员常常通过测量呼吸道阻力、炎症细胞浸润程度、细胞因子的表达水平等指标来评估哮喘的相关病理变化。
此外，还可以通过肺组织切片染色、免疫组化等技术方法来观察炎症反应的程度和组织学改变。
除了小鼠模型，豚鼠模型也被广泛应用于哮喘的研究中。
豚鼠哮喘模型通常通过吸入过敏原或气溶胶诱导哥德金黄氏综合征（Gleich's syndrome），这是一种豚鼠特有的哮喘样疾病。
豚鼠模型在模拟人类哮喘方面具有很大的优势，因为它的气道结构更加接近人类，病理变化也更符合人类哮喘。
此外，大鼠和猴子也被用作哮喘模型的研究对象。
大鼠哮喘模型可以通过吸入过敏原、植物抗原、病毒等来诱导。
猴子哮喘模型则是通过吸入过敏原或气溶胶来诱导。
这些模型的研究更接近人类的哮喘发展过程，但由于成本高、操作复杂以及伦理问题，使用较为有限。
总的来说，哮喘动物模型在哮喘研究中起到了至关重要的作用，为我们深入了解哮喘的发病机制提供了重要的帮助。
尽管目前已经有许多哮喘动物模型，但仍有很多问题需要进一步研究，如模型的可重复性、应用范围的局限性等。
未来，我们可以继续优化已有的模型，开发新的模型，以期更好地模拟人类哮喘，为哮喘的预防和治疗提供更好的途径。
小鼠哮喘实验报告
一、实验目的本研究旨在建立一种以粉尘螨提取液为致敏原的小鼠哮喘模型，并对其进行评估，以期为哮喘的病理生理研究及药物开发提供可靠的动物模型。
二、实验材料与方法1. 实验动物选用健康、体重约为20g的C57BL/6小鼠40只，随机分为哮喘组（n=20）和对照组（n=20）。
2. 实验试剂与仪器（1）试剂：粉尘螨提取液、生理盐水、豚鼠血清、乙二胺四乙酸（EDTA）、淋巴细胞分离液、RPMI-1640培养基、胎牛血清、ELISA试剂盒、荧光标记的IgE抗体、免疫组化试剂盒等。
（2）仪器：生物安全柜、超净工作台、酶标仪、倒置显微镜、组织切片机、石蜡切片机、病理切片扫描仪、肺功能检测仪等。
3. 实验方法（1）哮喘模型的建立哮喘组小鼠于实验第0、7、14天分别以粉尘螨提取液腹腔致敏，共3次，每次剂量为50μl。
对照组小鼠以同等剂量的生理盐水代替。
于实验第28天起，哮喘组小鼠以粉尘螨提取液滴鼻激发，连续7天，每天激发剂量为50μl。
对照组小鼠以同等剂量的生理盐水代替。
（2）哮喘模型评估1）肺泡灌洗液细胞计数和分类在最后一次滴鼻激发24小时后，对小鼠进行肺泡灌洗。
收集肺泡灌洗液，进行细胞计数和分类，包括淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞等。
2）肺组织病理学检测取肺组织，进行HE染色，观察肺组织炎症细胞浸润、杯状细胞增生、黏液过度分泌及气道重塑等情况。
3）血清总IgE和rDer f 2-sIgE含量检测采用ELISA试剂盒检测哮喘组小鼠血清总IgE和rDer f 2-sIgE含量。
4）支气管肺泡灌洗液（BALF）中IL-4和IFN-含量检测采用ELISA试剂盒检测哮喘组小鼠BALF中IL-4和IFN-含量。
三、实验结果1. 肺泡灌洗液细胞计数和分类哮喘组小鼠肺泡灌洗液中细胞总数和嗜酸性粒细胞较正常组极显著增加（P<0.01）。
2. 肺组织病理学检测哮喘组小鼠肺组织可见明显的炎性细胞浸润，包括淋巴细胞、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞。