BKV病毒的检测-2017
肾移植术后血和尿中BKV、JCV的检测及意义
肾移植术后血和尿中BKV、JCV的检测及意义尚丽红;游瑞君;武小桐;王振兴;张文艳【期刊名称】《实验与检验医学》【年(卷),期】2015(000)004【摘要】目的:在临床上,及时对肾移植患者体内多瘤病毒BK病毒(BKV)和JC病毒(JCV)进行定性、定量监测,对多瘤病毒相关性肾病(PVAN)的早期发现、诊断和治疗具有重要的指导意义。
方法我们分别收集肾移植术后患者尿液标本153例、血液标本155例。
采用实时荧光定量PCR技术,检测患者血液和尿液中BKV和JCV表达水平。
结果 BKV DNA在尿中的检出率为33.3%(51/153),血液中检出率为34.8%(54/155);JCV DNA在尿中的检测率为31.3%(47/150),血液中检出率为34.6%(54/156)。
肾移植术后患者BKV和JCV检测的最低检测限为2×103copies/ml,具有较高的特异性和灵敏度。
结论实时荧光定量PCR方法,简单、快速、易行。
在临床上,利用PCR方法对肾移植术后患者体内BKV和JCV 实时监测,可作为肾移植术后多瘤病毒相关性肾病(PVAN)的早期诊断和筛选的方法,也为诊断和治疗方案提供重要依据。
【总页数】4页(P414-417)【作者】尚丽红;游瑞君;武小桐;王振兴;张文艳【作者单位】山西省第二人民医院肾移植中心,山西太原030012;山西省第二人民医院肾移植中心,山西太原030012;山西省第二人民医院肾移植中心,山西太原030012;山西省第二人民医院肾移植中心,山西太原030012;山西省第二人民医院肾移植中心,山西太原030012【正文语种】中文【中图分类】R617;R446.12+2;R446.5【相关文献】1.联合检测血Cys C及尿微量蛋白在体外循环术后急性肾损伤早期诊断中的意义[J], 孙晖;肖九长;罗列;吉灵;钟丰文;蔡隆仁;吴澄;唐志洁2.血、尿β2-m和尿Alb检测在2型糖尿病早期肾损伤检测中的临床意义 [J], 陈光华3.肾移植术后RT-PCR动态检测巨细胞病毒尿的临床意义 [J], 何小舟;许贤林;叶青;罗光华;朱江;董选4.RT-PCR检测肾移植术后血浆、尿及白细胞中巨细胞病毒感染的临床意义 [J], 许贤林;何小舟;罗光华;叶青;朱江;徐宁;巢志复;董选5.肾移植术后尿α1-微球蛋白、超氧化物歧化酶和丙二醛的检测及意义 [J], 祝卿;胡正杨;金建国;赵喜越;朱梅帧;林丽娜因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
移植手术后的病毒监测-鑫诺美迪
JC病毒
一、概述: 全球均有 JC病毒感染病例,JC病毒感染可以出现在童年时期,且随着年 龄的增长感染率相应增加。调查表明,10-14岁的儿童感染率约为65%,50-59 岁的成人感染率达75%,80%以上成年人JC病毒抗体阳性。大多数人感染 JC病 毒后没有明显症状,健康成年人的免疫系统能够使 JC病毒处于休眠状态,但 对于免疫力缺陷和长期服用免疫抑制药物的患者,可引起进行性多灶性脑白 质病。 40%以上的肾移植患者可检测到JCV的复制。与BK病毒一样,JCV的感 染也可致肾移植患者的多瘤病毒相关性肾病(PVAN)。PVAN被认为是影响肾移 植手术成功与否最关键的因素之一。 二、方法学: 1、检测血清中特异性VP1抗体 2、对活组织进行原位杂交及免疫组化检测 3、定量PCR检测 三、临床治疗: 目前尚无有效的针对 JC病毒的抗病毒药物。最好的治疗方法是应用高效 抗反转录病毒治疗(HAART)来获得免疫重建来减少JC病毒的复制。
BK病毒
一、概述: BK病毒原发感染发生在儿童时期,一般存在于人体泌尿道及外周血白细 胞中,约0.5%~20%感染者会出现BKV激活,导致病毒复制,一般不会引起 肾功能损害。但在接受免疫抑制治疗的人群中,特别是肾移植术后患者,BKV 再激活率会明显增高,并可能导致BKV相关性肾病(BKVAN)。10%~60%肾移 植术后患者可在尿液中检测到BKV,其中多数患者表现为无症状病毒血症或暂 时的移植肾功能异常,偶可在切除的移植肾标本中发现病毒引起的组织损伤。 BKVAN相关研究发现,肾移植术后数小时即可检测出BKV,约5%的肾移植受者 可发生BKVAN,其中约45%会出现移植肾失功。 二、方法学: 1、细胞学检查-尿中诱饵细胞检测 2、病理穿刺活检 3、定量PCR检测 三、临床治疗: 1、谨慎减少免疫抑制剂用量或更换免疫抑制剂 2、抗病毒治疗,BKV活性药物主要有来氟米特和西多福韦。
BK病毒监测
BK病毒(BKV)
• BK病毒是一种无包膜病毒,衣壳为二十面体结构; • 环状双链DNA病毒DNA包含约5300bp 碱基对; • 属于多瘤病毒 • 以人为自然宿主,宿主细胞核内复制; • 机会性病毒,宿主免疫力低下时被激活。
BKV和JCV的同源性高达~75%
Trofe, J, et al. "Polyomavirus in kidney and kidney-pancreas transplantation: a defined protocol for immunosuppression reduction and histologic monitoring. " Transplantation Proceedings 34.5(2002):1788-9. 刘航等. "BK病毒与肾移植." 中国医学科学院学报 31.3(2009):269-275.
BKV感染途径
口腔/呼吸道/食 初次感染 潜伏在泌尿道/外周血白
道
细胞
15-20% 75-80%
免疫力降低/肾移植患者
肾小管/尿道上皮细 胞内激活
10-68%
BKV低量激活 潜伏
出血性膀胱炎
BKV再激活
1-7% BK病毒相关肾病(BKVAN)
Hirsch H H. BK virus: opportunity makes a pathogen.[J]. Clinical Infectious Diseases, 2005, 41(3):354. Hariharan S. BK virus nephritis after renal transplantation[J]. Kidney International, 2008, 69(4):655-662.
《器官移植受者BK病毒感染和BK病毒性肾病临床诊疗规范(2019版)》要点
《器官移植受者BK病毒感染和BK病毒性肾病临床诊疗规范(2019版)》要点BK病毒(BK virus,BKV)是一种人群普遍易感的多瘤病毒。
近年来,随着实体器官移植手术的广泛开展,新型强效免疫抑制剂的广泛应用以及检测手段的革新,BKV感染率不断升高。
肾移植术后BKV感染率升高尤为突出,由其导致的BKV性肾病(BKVN)已成为移植肾失功的重要原因之一。
BKVN的临床表现缺乏特异性,容易与移植物排斥反应或其他疾病相混淆,尤其是急性排斥反应,后者治疗需要增加免疫抑制强度以降低机体免疫导致的排斥反应,而BKVN恰恰相反,必须降低免疫抑制强度,以期部分恢复机体抗病毒免疫能力。
所以在疾病早期若判断错误,采用不恰当的治疗方法,会加速疾病对移植器官的损害,严重者导致移植器官失功。
正确诊断和及时干预有助于改善移植受者的预后。
尽管我们对BKV及其相关疾病的认识在不断提高,但由于目前尚缺乏有效的抗病毒治疗手段,对于实体器官移植受者BKVN 的早期筛查和诊断非常重要。
1 概述及流行病学BKV是乳头状多瘤空泡病毒科、多瘤病毒家族的一种亚型,原发感染多在10 岁之前,传播机制仍不清楚,可能经由呼吸道或口腔传播。
健康成人中的感染率高达82%。
当机体免疫力低下,尤其是器官移植后,潜伏在尿路上皮和肾小管上皮中的BKV被激活,开始高水平复制,大量复制的病毒颗粒从尿路中排泄,造成BKV尿症。
在肾移植受者中,随着病程进展,BKV 会进入肾小管上皮细胞细胞核并复制大量子代病毒,引起细胞坏死、松解,使组织发生免疫性、炎症性浸润;当肾小管上皮细胞脱落和局部基底膜暴露时,病毒开始破坏肾小管毛细血管进入血液,形成BKV血症。
BKV 在血液中持续高载量表达,进一步破坏移植肾组织导致肾小管萎缩和间质纤维化,最终形成BKVN。
其他器官移植受者罕见BKV血症和BKVN。
肾移植受者BKVN的发生率为1%~10%,大部分出现在术后1年内,50%的BKVN患者最终会发展为不可逆的移植肾衰竭。
《器官移植受者BK病毒感染和BK病毒性肾病临床诊疗规范(2019版)》要点
《器官移植受者BK病毒感染和BK病毒性肾病临床诊疗规范(2019版)》要点BK病毒(BK virus,BKV)是一种人群普遍易感的多瘤病毒。
近年来,随着实体器官移植手术的广泛开展,新型强效免疫抑制剂的广泛应用以及检测手段的革新,BKV感染率不断升高。
肾移植术后BKV感染率升高尤为突出,由其导致的BKV性肾病(BKVN)已成为移植肾失功的重要原因之一。
BKVN的临床表现缺乏特异性,容易与移植物排斥反应或其他疾病相混淆,尤其是急性排斥反应,后者治疗需要增加免疫抑制强度以降低机体免疫导致的排斥反应,而BKVN恰恰相反,必须降低免疫抑制强度,以期部分恢复机体抗病毒免疫能力。
所以在疾病早期若判断错误,采用不恰当的治疗方法,会加速疾病对移植器官的损害,严重者导致移植器官失功。
正确诊断和及时干预有助于改善移植受者的预后。
尽管我们对BKV及其相关疾病的认识在不断提高,但由于目前尚缺乏有效的抗病毒治疗手段,对于实体器官移植受者BKVN 的早期筛查和诊断非常重要。
1 概述及流行病学BKV是乳头状多瘤空泡病毒科、多瘤病毒家族的一种亚型,原发感染多在10 岁之前,传播机制仍不清楚,可能经由呼吸道或口腔传播。
健康成人中的感染率高达82%。
当机体免疫力低下,尤其是器官移植后,潜伏在尿路上皮和肾小管上皮中的BKV被激活,开始高水平复制,大量复制的病毒颗粒从尿路中排泄,造成BKV尿症。
在肾移植受者中,随着病程进展,BKV 会进入肾小管上皮细胞细胞核并复制大量子代病毒,引起细胞坏死、松解,使组织发生免疫性、炎症性浸润;当肾小管上皮细胞脱落和局部基底膜暴露时,病毒开始破坏肾小管毛细血管进入血液,形成BKV血症。
BKV 在血液中持续高载量表达,进一步破坏移植肾组织导致肾小管萎缩和间质纤维化,最终形成BKVN。
其他器官移植受者罕见BKV血症和BKVN。
肾移植受者BKVN的发生率为1%~10%,大部分出现在术后1年内,50%的BKVN患者最终会发展为不可逆的移植肾衰竭。
肾移植前后BK病毒监测的意义及护理干预
·专科护理·肾移植前后BK 病毒监测的意义及护理干预张鸾,董环(天津市第一中心医院移植中心,天津 300192) DOI :10.3969/j.issn.2095-5332.2019.03.011 通讯作者:张鸾,Email :zhangluan1231@随着器官移植技术的发展和新型免疫抑制剂的不断出现,肾移植已经成为终末期肾病的主要治疗方法。
随着每年肾移植手术例数的不断增多, 如何减少肾移植术后并发症的出现,延长移植肾的生存时间,也成为了移植工作者需要解决的难题。
BK 病毒(BK virus ,BKV )属多瘤病毒家族成员,是导致肾移植术后移植肾肾病的重要危险因素之一。
由BK 病毒感染导致移植物功能受损,进展为BK 病毒性肾病(BK virus-associated nephropathy ,BKVN )而导致移植肾丢失的病例报道逐渐增多[1],由此引起了移植界学者的高度重视。
由于目前对于BK 病毒感染缺乏有效的治疗方法,对于肾移植受者进行BK 病毒监测,避免患者出现BK 病毒感染,成为护理所要研究解决的重点问题。
现将本器官移植中心近年来在肾移植前后对BK 病毒感染的监测情况及所进行的相关护理干预总结如下。
1 病例资料1.1 临床资料:选择2014年6月—2016年8月在本器官移植中心登记系统中登记,准备进行肾移植的终末期肾病患者及肾移植术后不明原因肌酐升高的患者共105例。
其中,男性72例,女性33例,年龄16~76岁。
其中肾移植术后不明原因肌酐升高者16例,慢性肾小球肾炎例36例,糖尿病肾病24例,高血压性肾病18例,多囊肾5例,肾移植术后失能6例,除18例无尿患者未进行尿液BK 病毒检测,其余病例均进行血、尿BK 病毒检测,在观察期内有69例患者进行了肾移植手术,在移植前再进行一次血、尿BK 病毒检测,术后跟综 监测。
1.2 方法:尿标本采集,用无菌方法采集清洁晨尿标本5~10 ml ,送检验科,采用聚合酶链反结合测序方法检测尿中BKV DNA 。
HIV感染者中BKV感染率的调查研究
s e tnla d ftlh atrt b omaie: o bebid f n na i n ea er ae a n r l t a du l.l , i n
d u l , o l lc b ・o to e ra o a ig t o fr o e d u e p a e o c n rl d t l c mp rn w o ms b b l i o o i e p n le iu a ag s i p d rla ag sa fc mb n d s ia p d r la l e i w t e i u a n le i n a h
A as ei,03 ,8 5 :8 4 8 net s 2 0 5 ( )4 7— 8 . h a
f l r l [ ] L tsJ Hi , o e E. lc ma a se n  ̄n t 8 o u R, l H C h n S P ae lt n fra dn aa
( )30—38 2 : 0 0.
1 l [] Va e Ved , wun e s A, nse s M , ta.I tah e 9 n d le M T k n Ha s n e n r te a
iui t o c o yJ . ns n g19 ,3 2 : n snae t r o m []A ehA a , 68 ( ) f o frh a t t l 9
D A, 巢式 P R方 法扩增 B V 的保 守 区编码 序 列 , N 用 C K 统计 分 析 HI 染 组及 健 康 体检 组 B VD A检 出率 。 V感 K -N
结果 H V感染组及健康体检组外周血白细胞( B s 样品中 B V D A序列检 出率分别为 8 .%和5 .% , I P L) K .N 45 80 差异有统计学意义( 00 ) P< .5 。结论 B V在 HV感染者 P L 存在较 高的感染率, K I B s中 免疫缺陷程度与 B K多 瘤病毒复活密切相关,K B V威胁着 H 感染者 , Ⅳ 应引起临床足够的重视 。
BK病毒的检测方法、试剂盒及其应用[发明专利]
专利名称:BK病毒的检测方法、试剂盒及其应用专利类型:发明专利
发明人:叶锋,刘明坤,余荣
申请号:CN201610615999.X
申请日:20160729
公开号:CN106065420A
公开日:
20161102
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本申请公开了BK病毒的检测方法,包括如下步骤:采用磁珠法从人类尿液样本提取BKV DNA,获得待测样本;PCR扩增反应;采用荧光定量PCR仪检测反应结果,荧光信号收集时设定为Taqman荧光探针BKV‑FP5’端荧光基团对应的荧光素,在60℃收集荧光信号。
本申请还公开了检测BK病毒的试剂盒。
本发明的检测方法、试剂盒敏感性高,最低检出可达到500copies/mL;同时,本发明的检测方法的特异性很好,不和其他的病毒发生交叉反应,例如JC病毒(JCV),丙肝病毒(HCV),人巨细胞病毒(HCMV)和乙型肝炎病毒(HBV)。
申请人:北京思尔成生物技术有限公司
地址:100176 北京市大兴区经济技术开发区经海四路156号院11号楼4层401
国籍:CN
代理机构:北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙)
代理人:何自刚
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一种检测BK病毒和JC病毒的试剂及应用[发明专利]
专利名称:一种检测BK病毒和JC病毒的试剂及应用专利类型:发明专利
发明人:朱同玉,曹懿睿
申请号:CN202111298569.7
申请日:20211104
公开号:CN113999937A
公开日:
20220201
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本发明涉及一种检测BK病毒和JC病毒的试剂及应用,属于生物医药技术领域。
BKV和JCV 高度保守区中存在一段JCV片段缺口的区域。
通过在缺口区域以外适合位置设计同时靶向BKV和JCV 的引物探针体系,且仅在缺口区域设计反向引物特异性靶向BKV或JCV。
通过本发明用于初筛,同时靶向BKV和JCV,有利于节约资源;且又可精准判断BKV或JCV,适合临床推广。
通过本发明可预防BKV和JCV活化和及时评估相关疾病的治疗效果,弥补现有检测体系的缺陷和不足,使检测结果更加可靠。
本发明兼顾BKV和JCV,可同时靶向二者进行初筛,且又可精准判断BKV或JCV,有利于及时的免疫抑制调整。
申请人:复旦大学附属中山医院
地址:200032 上海市徐汇区医学院路136号
国籍:CN
代理机构:上海申汇专利代理有限公司
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多瘤病毒SV40、BKV及JCV在健康成人中的感染率
多瘤病毒SV40、BKV及JCV在健康成人中的感染率摘要】目的:了解多瘤病毒SV40、BKV及JCV在健康人群外周血白细胞中的感染率情况。
方法:采用聚合酶链式反应(PCR)技术,扩增健康成人的多瘤病毒SV40-DNA、BKV-DNA及JCV-DNA血液标本各1000例,并统计分析不同性别组、不同年龄组中多瘤病毒SV40、BKV及JCV的检出率。
结果:健康成人中SV40-DNA、BKV-DNA、JCV-DNA血液检测阳性率分别为:23.5%、57.2%、32.1%,不同性别组、不同年龄组,差异无统计学意义。
结论:多瘤病毒SV40、BKV及JCV在健康成人血液标本中存在较高的感染率,证实了PBLs是多瘤病毒在体内的潜伏细胞及传播载体,应加强对多瘤病毒条件致病性的认识,积极防治、减少多瘤病毒相关性疾病的发生率。
【关键词】多瘤病毒SV40、BKV及JCV;感染率【中图分类号】R373 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2019)20-0249-02多瘤病毒是一类可以感染人类的、无囊膜的正二十面体小DNA病毒[1],主要包括猴多瘤病毒(SV40)、人多瘤病毒(BKV)和JC病毒(JCV)等3种病毒[2]。
多瘤病毒呈全球性分布,在人群中广泛传播[3]。
我院研究室调查研究显示BKV在广西瑶、侗、苗、壮等少数民族外周血白细胞中存在较高感染率[4]。
为了进一步了解多廇病毒SV40、BKV及JCV在健康人群血液标本中的感染率情况,我们收集了1000例健康成人的血液标本,用巢式PCR方法扩增多瘤病毒的保守区编码序列,现报道如下。
1.资料与方法1.1 一般资料随机选取到我院参加健康体检的健康成人1000例,男女各半,年龄不限,收集上述研究对象静脉血3ml存于EDTA抗凝管。
1.2 仪器设备材料设备:DNA核酸分析仪、DNA电泳仪、Pe5700-PCR仪、日立低温高速离心机、日立低湿超速离心机旋涡混旋器、及凝胶成像系统等分子生物学仪器,BKV-DNA、SV40-DNA、及JCV-DNA定性试剂。
多瘤病毒的检测
多瘤病毒的检测多瘤病毒是一类广泛存在的病毒,它们可以感染人类和其他动物,并可能引发多种疾病。
对于多瘤病毒的检测,是诊断相关疾病、评估病情以及制定治疗方案的重要环节。
接下来,让我们详细了解一下多瘤病毒检测的相关知识。
多瘤病毒的种类繁多,常见的有人多瘤病毒 BK 病毒(BKV)、JC 病毒(JCV)等。
这些病毒在人群中的感染较为普遍,但在大多数情况下,人体的免疫系统能够有效地控制病毒,不会导致明显的疾病症状。
然而,在某些特定的条件下,如免疫系统受损(如器官移植患者、艾滋病患者等),多瘤病毒可能会重新激活并引发严重的疾病,如肾病、脑炎等。
多瘤病毒检测的方法多种多样,每种方法都有其特点和适用范围。
首先是病毒分离培养。
这是一种传统的检测方法,通过将患者的样本(如尿液、脑脊液等)接种到特定的细胞培养体系中,观察是否有病毒生长。
但这种方法操作复杂、耗时较长,且敏感性相对较低,因此在临床应用中并不常用。
其次是血清学检测。
通过检测患者血清中针对多瘤病毒的特异性抗体来判断是否感染。
常见的检测指标包括 IgM 和 IgG 抗体。
IgM 抗体通常在感染的早期出现,提示近期感染;而 IgG 抗体在感染后较长时间内都可检测到,提示既往感染或慢性感染。
血清学检测方法相对简便,但对于免疫功能低下的患者,由于其抗体产生可能受到影响,检测结果的准确性可能会受到一定限制。
聚合酶链反应(PCR)技术是目前多瘤病毒检测中应用最为广泛的方法之一。
它能够特异性地扩增病毒的核酸片段,具有极高的敏感性和特异性。
通过设计针对多瘤病毒特定基因序列的引物,可以快速准确地检测出样本中是否存在病毒核酸。
实时荧光定量 PCR 还能够对病毒的载量进行定量分析,对于监测病情的进展和治疗效果的评估具有重要意义。
另外,还有一些新兴的检测技术,如数字 PCR、基因芯片等。
数字PCR 能够实现对核酸分子的绝对定量,具有更高的准确性和灵敏度;基因芯片则可以同时检测多种病原体,提高检测效率。
BK病毒感染诊断与治疗的研究现状
BK病毒感染诊断与治疗的研究现状张志刚;曹璐;王鑫;赵勤俭【期刊名称】《检验医学》【年(卷),期】2017(032)005【摘要】BK病毒(BKV)属于人类多瘤病毒中的一个亚型.BKV在普通人群中隐性感染率高达80%.近年来,随着器官移植术的广泛开展以及强效免疫抑制剂的大量使用,在免疫抑制和免疫低下的人群中,由潜伏于体内的BKV重新被激活而引起的BKV 相关肾病(BKVAN)、出血性膀胱炎、输尿管狭窄等疾病越来越受到医学界的关注.目前对BKV感染缺乏明确有效的预防措施及抗病毒药物,因此早期监测器官移植术后患者体内的BKV载量、减少免疫抑制剂的使用量、及时调整免疫抑制剂治疗方案并辅助使用其他抗病毒药物对预防BKV相关疾病的发生尤为重要.文章就BKV 感染相关的疾病及其临床症状、生物学特征、感染机制以及当前国内外诊断及治疗研究现状进行综述.【总页数】6页(P440-445)【作者】张志刚;曹璐;王鑫;赵勤俭【作者单位】厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门大学公共卫生学院,福建厦门 361102;厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门大学公共卫生学院,福建厦门 361102;厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门大学公共卫生学院,福建厦门 361102;厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门大学公共卫生学院,福建厦门 361102【正文语种】中文【中图分类】R446.5【相关文献】1.器官移植受者BK病毒感染和BK病毒性肾病临床诊疗规范(2019版) [J], 中华医学会器官移植学分会2.肾移植术后BK病毒感染与人肾小管上皮细胞的相关性研究进展 [J], 许瀚仁;王继纳;杨橙;许明3.异基因造血干细胞移植后出血性膀胱炎及BK、JC病毒感染 [J], 杨蕊雪;陈刚;玛丽娅·木哈什;古力巴旦木·艾则孜;丁凌陆;张乐;张友弟;袁海龙4.肾移植术后BK病毒感染诊疗单中心研究 [J], 刘德川;周洪澜;王钢;刘俊彦;朱亚香;于迪;王金国5.BK病毒感染与移植肾阻力指数及凝血系统的关系 [J], 仇炜;王思旭;田野;苏明因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
肾移植患者术后BK病毒感染的检测及危险因素分析
肾移植患者术后BK病毒感染的检测及危险因素分析陆明;朱有华;王皓;韩澍;冀俊峰【期刊名称】《第二军医大学学报》【年(卷),期】2007(28)1【摘要】目的:检测肾移植患者术后BK病毒(BKV)感染率,分析BKV感染的危险因素。
方法:收集63例肾移植患者术后第1、2、3、4、6和8个月的尿液和血液标本,实时荧光定量PCR方法检测标本中BKVDNA含量,并根据检测结果进行分组:尿液、血液BKVDNA均阳性者为UV^+PV^+组,尿液阳性而血液阴性者为UV-PV组,尿液、血液均阴性者为UV^-PV^-组。
尿沉渣涂片寻找含有病毒包涵体的脱落尿路上皮细胞(Decoy细胞),并对Decoy细胞进行细胞免疫学检测;对临床高度怀疑为BK病毒相关性肾病患者(BKVAN)行移植肾活检。
比较3组患者的年龄、术前冷缺血时间、术前血透时间、免疫抑制方案、群体反应性抗体(PRA)致敏程度、术后是否合并其他病毒感染等临床指标的差异,应用Logistic回归法分析筛选BKV感染和BKVAN发生的危险因素。
结果:UV^+PV^-组19例(30.1%)。
UV^+PV^+组患者9例(14.3%),UV^-PV^-组患者35例;前两组首次发现BKV的中位时间分别为术后4个月和3个月。
63例患者Decoy细胞检出率为39.7%,Decoy细胞免疫染色阳性率为54.3%。
1例移植肾活检未见BKVAN表现。
Logistic回归法发现BKVDNA感染与冷缺血时间有显著联系(P=0.048;OR=1.151),与其他指标无显著相关(P=0.069)。
结论:实时荧光定量PCR能较好地监测术后BKV感染,术后3~4个月是BKV排泄高峰,术前冷缺血时间可能是BKV感染的危险因素之一。
而术后免疫抑制方案对BKV感染可能无明显影响。
【总页数】6页(P71-76)【关键词】BK病毒;肾移植;Decoy细胞【作者】陆明;朱有华;王皓;韩澍;冀俊峰【作者单位】第二军医大学长征医院器官移植科解放军器官移植研究所;长征医院实验诊断科解放军临床免疫中心【正文语种】中文【中图分类】R692【相关文献】1.DCD供肾肾移植术后BK病毒感染情况及危险因素分析 [J], 龙建华;谢娟娟;钱坤;李志军;李建军2.活体肾移植术后BK病毒感染情况及危险因素分析 [J], 李纪岗;钱叶勇;石炳毅;范宇;解俊杰3.肾移植患者BK病毒感染的诊断和危险因素分析 [J], 屠国伟;朱同玉;唐群业;许明;戎瑞明;王国民4.肾移植术后BK病毒感染及危险因素分析 [J], 李平;程东瑞;季曙明;文吉秋;谢轲楠;李雪;倪雪峰;陈劲松5.肾移植术后BK病毒感染的危险因素分析 [J], 付迎欣;沈中阳;宋文利;莫春柏;冯钢;郭雪西;张海明;王政禄;郑卫平;郑虹因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
多瘤病毒BK的监测在肾移植中的应用
多瘤病毒BK的监测在肾移植中的应用曾涛;万建新【期刊名称】《检验医学与临床》【年(卷),期】2007(4)10【摘要】目的探讨血浆中多瘤病毒BK(BKV)检测在肾移植后患者发生BKV感染以及多瘤病毒相关性肾病(PAN)中的诊断价值.方法对80例行同种异体肾移植术的患者和20例健康对照血浆中BKV DNA进行聚合酶链反应检测和序列分析,对检测结果进行对比分析.结果扩增出的目的DNA片段长度为181 bp,与预期的病毒基因片段大小一致,测序结果与该病毒大T抗原的保守区域完全同源.80例肾移植后患者BKV检测为阳性12例(15.0%),最终发展为PAN的患者2例(2.5%);20例健康人BKV检测结果全部为阴性.结论血浆BKV DNA监测是反映肾移植后患者是否发生病毒复制感染,并评价其患肾病的高危性的一个良好指征.对肾移植后患者发生PAN的确诊,需要结合临床上各种因素来综合分析.【总页数】3页(P947-948,950)【作者】曾涛;万建新【作者单位】广东医学院检验学院,广东湛江,524023;中山大学附属一院检验医学部,广州【正文语种】中文【中图分类】R692.39【相关文献】1.多瘤病毒BK DNA监测在肾移植中的临床应用 [J], 万建新;曾涛;崔颖鹏;姜傥2.BK多瘤病毒在肾移植受者中的感染特征 [J], 周易;刘如敏;于立新;苗芸;姚雷雨;于哲;崔乃千;符芳翔;叶悦典;邓文锋;徐健;付绍杰3.霉酚酸血药浓度监测在肾移植受者中的应用进展 [J], 王华彬; 满江位; 胡伟; 任小山; 付生军; 杨立4.多瘤病毒BKDNA监测在肾移植中的临床应用 [J], 万建新;曾涛;崔颖鹏;姜傥5.扫描式葡萄糖监测系统在肾移植病人术后血糖管理中的应用研究 [J], 路星星;刘静因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
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许多证据表明,BK病毒与出血性膀胱炎、肾炎相关,BK病毒容易侵犯免疫缺 陷患者,特别是实体器官移植和骨髓移植的接收者。
在儿童早期病毒血清阳性率60%~100%。原发性 BKV感染常发生于4~5岁时,成年人抗体阳性率为 46%~94% ;
儿童感染一般无症状,典型症状是发烧和非特异性
上呼吸道感染;
中枢神经系统疾病;
到目前为止,关于眼部感染仅有的报告 为双侧非典型视网膜炎。
免疫抑制状态下,潜伏在体内的BKV可再次激活; 肾移植术后BKV再次激活发生率高:10%~68%,BKV相关肾病患病率:1~7%; 移植肾丧失功能几率高:50% 的BKVN会导致移植肾失功; BKV和JCV具有75% 的同源性,区分BKV和JCV还是非常重要的,因为JCV很少 引起多瘤病毒相关肾病,与肾脏损伤不相关。
早期检测对控制BK病毒的复制,早期干预具有重大意义。
研究发现,尿BKV阳性出现在血BKV阳性之前,约有33%的肾移植受者 中会发现有BK病毒尿症。
注:拷贝数阈值可以根据所使用的测定法而变化
ห้องสมุดไป่ตู้
Deepali Kumar , Atul Humar ,et.al. The AST Handbook of Transplant Infections,1st edition. 2011,51-54.
免疫组化可用于检测石蜡包埋、冰冻组织或细胞学标本中的BKV
目前对BKV感染还缺乏特效的治疗方法,肾移植术后经穿刺确诊 BKVN
的患者,目前有几种治疗措施:
适当减少免疫抑制剂的用量来控制BKV的复制或转换为其他免疫抑制剂 应用来氟米特治疗
应用抗病毒药物治疗
Thank you !
初次感染后,此病毒在正常人体内呈潜伏状态,在 器官移植病人中,BKV病毒经常激活导致疾病;
传播途径:暴露的体液,例如唾液,或是通过胎盘
传播。
感染肾:表现为出血性膀胱炎(出血性
膀胱炎则增加住院时间和病人死亡率)、
非出血性膀胱炎、输尿管狭窄和肾炎;
感染肺:肺炎和急性非特异性上呼吸道
感染;
在各种肿瘤样本中检测到BKV病毒,主 要是神经胶质和神经元脑瘤;
BKV感染在临床上经常被误诊为急性排斥或是药物毒性。
Deepali Kumar , Atul Humar ,et.al. The AST Handbook of Transplant Infections,1st edition. 2011,51-54.
VS
尿液 BKV-DNA
荧光定量pcr法 人员要求不高,易于培训 灵敏度高、特异性强 可实现自动化,客观性强 重复性好 需要有经验的病理学专家,主观性较强 依据形态不能区分BK病毒和其他病毒
所谓 decoy 细胞指脱落尿中的含有病毒包涵体的移行细胞。在沉渣尿涂
片巴氏染色下, decoy细胞很容易辩认。
含病毒包涵体的细胞核有三种表现:典型最多见为不透明的毛玻璃(或冻胶) 样改变,或颗粒状嗜硷性包涵体占据整个细胞核,周围无明显的晕圈;或仅
核周围存在高密度的染色质;少见可出现鹰眼样改变即核中央出现着色过
注:拷贝数阈值可以根据所使用的测定法而变化
Deepali Kumar , Atul Humar ,et.al. The AST Handbook of Transplant Infections,1st edition. 2011,51-54.
临床上,确诊BKVN必须通过肾穿刺标本的组织学检查。 光镜下表现为由浸润的单核淋巴细胞、小管炎和核内包涵体组成 的间质性肾炎。
能够实时反映病毒感染的状 优点 态,无窗口期 抽取病人外周血即可,无需 肾穿刺 BKVN确诊金标准 可鉴别排斥反应
组织学活检
有一个数周~数月的
缺点 无法确诊 窗口期 需要取肾穿刺标本, 具有创伤性
美国器官移植手册建议:肾移植后,成人前3个月至少每月检测一次,之后
两年内每3个月检测一次;儿童前六个月每月检测一次,两年内每3个月检测
深的包涵体。
尿细胞学检测与尿液BKV-DNA 荧光定量PCR对BKVN的筛选一样具有重
要临床意义,但是灵敏度和特异性较低。
在组织学检查阴性而PCR阳性的病人最终约有半数以上病人发展为BKVAN ,
一般认为从血PCR阳性到组织学证实BKVN有一个数周至数月的窗口期。
方法 PCR法血浆BKV-DNA
一次;
浓度<104 copies/mL,一个月之内重复检测;推荐减少免疫抑制剂用量,建
议进行活检。
浓度>104 copies/mL,推荐减少免疫抑制剂用量。至少每两周检测一次血 浆BKV-DNA,建议进行移植物活检。
监测血浆中BKV病毒的负荷量可作为调查免疫抑制剂用量、维持治疗时间的
一项临床指标。
尿液 Decoy细胞
感染,例如:JCV
灵敏度低特异性差
美国器官移植手册建议:肾移植后,成人两年内至少每3个月检测一次; 儿童前六个月每月检测一次,两年内每3个月检测一次;
BKV-DNA浓度<107 copies/mL ,建议三个月内复查。 BKV-DNA浓度>107 copies/mL,建议检测BKV病毒血症。 BK病毒尿是病毒开始活动复制的第一标志。
1971年,在肾移植接受者的尿液样本中首次发现; 多瘤科病毒,BKV、JCV 及 SV40是目前所知的多瘤病毒家族所有成员;
人体的肾、肺、眼、肝、脑等器官都可作为BK病毒的生长部位,并引起相关
的疾病;
无包膜,含有二十面体、直径45nm的衣壳,病毒基因组为5300bp的环形双 链DNA。其基因组可分为调控基因、早期基因、晚期基因三部分;