最新切胶回收的步骤
胶回收DNA注意事项
胶回收DNA注意事项①切胶回收DNA片段是要把整个目的片断所在位置的胶全部回收。
所以为了减少胶的体积，我们就可以用相对比较薄的胶来跑电泳，通常只要够点样即可，或是采用薄而宽的梳子来跑胶。
这样可减少回收试剂引起的一些后续麻烦。
②主要还是DNA的浓度, 如果DNA浓度不够, 想胶小点也不可能。
③紫外灯下切下含待回收DNA的凝胶时，要衬以干净的塑料薄膜，使用无DNA污染的新刀片，其目的在于防止外源DNA的污染。
④利用凝胶回收试剂盒DNA回收效率较低或者未回收到目的片段可能有以下几个原因：胶块未完全溶解，可适当延长水浴时间，并增加上下颠倒次数辅助溶解；胶块体积太大，应先将其切为小块，分多次回收；电泳缓冲液pH太高，硅基质膜在高盐低pH结合DNA，如pH太高，应作适当调整；漂洗液中未加入无水乙醇。
⑤可以改用去离子水洗脱。
但是实验室所用纯水一般pH偏低，可利用NaOH适当调高其pH 值，以增加洗脱得率。
⑥洗脱产物含有残留的乙醇会影响后续酶切实验，请确保彻底去除漂洗缓冲液，具体方法参见回收效率低的解决方案。
⑦不可以使用更小洗脱体积（小于说明书提供的最小洗脱体积）进行洗脱以提高浓度，因为说明书提供的最少洗脱体积是能完全覆盖吸附膜的最小体积，若减少体积则不能将DNA完全洗脱下来。
⑧电泳检测只有一条目的带，可以选用凝胶回收试剂盒。
如果后续实验对片段纯度要求较高，建议即使只有一条带，也可以切胶纯化，其回收得到片段的纯度可能要比直接回收高一些。
⑨琼脂糖凝胶胶块不溶可能是下述原因：琼脂糖质量不好；含目的片段的凝胶再空气中放置过久，使胶块失水、干燥，建议切胶后立即进行回收或将胶块保存在4℃或-20℃；制胶的电泳缓冲液浓度过高或陈旧。
关于胶回收切胶的一点注意事项1. 电泳的buffer和gel都是新制的，切胶的台子清理干净，刀片最好洗净灭菌，总之一句话就是保证切下的带没有外源dna污染。
2. 切胶是要把整个目的片断所在位置的胶全部回收。
DNA胶回收实验技术的方法和步骤
一. 提高胶回收量的办法1) 增加电泳时的上样量。
2) 电泳缓冲液用新鲜配制的。
3) 切胶时尽量只切有条带的胶，减小切胶体积：含目的片断很少的胶就不要要了，不然影响回收率。
4) 把切的两块或多块胶融化后，无论多大的体积都用一个管子，转移到同一个柱子上。
5) 溶胶时所加的溶液可多一点，这样更有利于DNA与膜的结合，不过一般不要多余750ul。
6) 胶回收的关键是通过柱子的溶液的盐浓度、酸碱性（电荷）和疏水性使DNA与柱子结合，因此，若电泳缓冲液的PH偏高，可在溶胶液中加入10ul（PH 5.0，3mol/L的NaAC）；为了使DNA分子更好的拦截在膜上，可以添加30％异丙醇在加热溶解胶后的液体里。
7) 加洗脱液之前，将柱子在室温放置几分钟（大约需10分钟），以使乙醇充分挥发。
8) 最后少加些洗脱液，尽量减少回收体积，一般用30-50μl洗脱液洗脱（不能太少，否则无法浸湿膜反而不利于洗脱）；洗脱液滴在膜中央，以充分洗脱结合在膜上的DNA。
9) 可以在加入洗脱液之后，可以在55度水浴5分钟或放在50度水浴10分钟以上再洗脱，或用封口膜密封4度过夜，第二天再离心回收，效果不错。
10) 将离心后的洗脱液加回吸附柱，再次离心。
二. 几种PCR产物回收的详方法和步骤1) 普通胶回收如果要胶回收，最好还是用试剂盒，方便，回收率也略高，实在要手工回收，可以切胶后加入3倍体积TE，水浴熔化后，酚、酚／氯仿抽提干净，乙醇沉淀即可。
另外好像还有冷冻法，没作过，不是很清楚。
2) 从低熔点凝胶回收DNA纯化DNA片段加与凝胶体积相等的TE（10mmol/l Tris-HCl pH8.0，0.1mmol/l EDTA），置65℃水浴5分钟保温，使凝胶完全溶解。
待放至室温，加等量酚（TE饱和，TE封在上层，取下层酚），轻轻混匀（不用混匀），12000rpm，3分钟离心。
反复1-2次。
取上层液，加0.1体积3mol/L醋酸钠（pH5.2）和2.5倍体积无水乙醇，进行乙醇沉淀。
PCR扩增结果分析和胶回收切胶的一点注意事项
讨论1.假阴性，不出现扩增条带PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量，④PCR循环条件。
寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。
模板：①模板中含有Taq酶抑制剂，②在提取制备模板时丢失过多，或吸入酚。
③模板核酸变性不彻底。
在酶和引物质量好时，不出现扩增带，有可能是模板核酸提取过程出了毛病，可使用阳性对照的DNA模板配合检查模板质量。
酶失活：需更换新酶，或新旧两种酶同时使用，以分析是否因酶的活性丧失或不够而导致假阴性。
引物：引物质量、引物的浓度、两条引物的浓度是否对称，是PCR失败或扩增条带不理想、容易弥散的常见原因。
有些批号的引物合成质量有问题，两条引物一条浓度高，一条浓度低，造成低效率的不对称扩增，对策为：①选定一个好的引物合成单位。
②引物的浓度不仅要看OD值，更要注重引物原液做琼脂糖凝胶电泳，一定要有引物条带出现，而且两引物带的亮度应大体一致，如一条引物有条带，一条引物无条带，此时做PCR有可能失败，应和引物合成单位协商解决。
如一条引物亮度高，一条亮度低，在稀释引物时要平衡其浓度。
③引物应高浓度小量分装保存，防止多次冻融或长期放冰箱冷藏，导致引物变质降解失效。
④引物设计不合理，如引物长度不够，引物之间形成二聚体等。
Mg2+浓度：Mg2+离子浓度对PCR扩增效率影响很大，浓度过高可降低PCR扩增的特异性，浓度过低则影响PCR扩增产量甚至使PCR扩增失败而不出扩增条带。
反应体积的改变：通常进行PCR扩增采用的体积为20ul、30ul、50ul、或100ul，应用多大体积进行PCR扩增，是根据科研和临床检测不同目的而设定，在做小体积如20ul 后，再做大体积时，一定要模索条件，否则容易失败。
物理原因：变性对PCR扩增来说相当重要，如变性温度低，变性时间短，极有可能出现假阴性;退火温度过低，可致非特异性扩增而降低特异性扩增效率，退火温度过高影响引物与模板的结合而降低PCR扩增效率。
蛋白切胶回收步骤
蛋白切胶回收步骤
嘿，咱今儿就来说说蛋白切胶回收这档子事儿哈！
你想想看，这蛋白就像是一个个藏着宝贝的小盒子，咱得把它们从那一大块胶里给挑出来，这可不是个简单活儿呢！
首先啊，得把那含着蛋白的胶给找出来，这就好比在一堆杂物里找你心爱的小物件儿，得仔细着点儿呢！然后，给胶来个“美容”，把它切得整整齐齐的，可别毛毛躁躁的切坏了呀。
接着呢，就像挖宝藏一样，把带着蛋白的那一小块胶给挖出来，这可得小心，别把宝贝给弄丢咯。
把挖出来的胶放进小管子里，加点神奇的溶液，这就开始让蛋白从胶里慢慢跑出来啦。
这过程就好像是蛋白在胶里待久了，想出来透透气，咱就给它们创造个机会。
等它们跑出来一些了，就把管子放那儿，让它们好好地待着。
过了一会儿，再把管子拿出来晃晃，让蛋白和其他东西分离开来。
这就好像是把混在一起的糖果和石子儿给分开一样。
然后啊，把上面的液体吸出来，这里可得注意啦，别吸到不该吸的东西哦！吸出来的液体里可就有咱想要的蛋白啦。
哎呀，你说这蛋白切胶回收是不是挺有意思的。
就像一场小小的冒险，得细心、耐心，还得有点小技巧呢！
想想看，要是没做好这一步，那后面的实验不就都受影响啦？就好比盖房子，基础没打好，那房子能结实吗？所以啊，咱可得把这蛋白切胶回收给做好咯。
这就是蛋白切胶回收的步骤啦，虽然说起来简单，做起来可不容易呢！但只要咱认真对待，就一定能把蛋白好好地回收回来，为后面的实验打下坚实的基础呀！是不是很神奇呢？嘿嘿！。
胶回收
1. 使用TAE缓冲液或TBE缓冲液制作琼脂糖凝胶，然后对目的DNA进行琼脂糖凝胶电泳。
2. 在紫外灯下切出含有目的DNA的琼脂糖凝胶，用纸巾吸尽凝胶表面的液体。
此时应注意尽量切除不含目的DNA部分的凝胶，尽量减小凝胶体积，提高DNA回收率。
注）切胶时请注意不要将DNA长时间暴露于紫外灯下，以防止DNA损伤。
3. 切碎胶块。
胶块切碎后可以加快操作步骤6的胶块融化时间，提高DNA的回收率。
4. 称量胶块重量，计算胶块体积。
计算胶块体积时，以1 mg=1 ul进行计算。
5. 向胶块中加入胶块融化液DR-I Buffer。
DR-I Buffer的加量如下表： 6. 均匀混合后75℃加热融化胶块（低熔点琼脂糖凝胶只需在45℃加热)。
此时应间断振荡混合，使胶块充分融化（约6～10分钟)。
注）胶块一定要充分融化，否则将会严重影响DNA的回收率。
7. 向上述胶块融化液中加入DR-I Buffer量的1/2体积量的DR-II Buffer，均匀混合。
当分离小于400 bp的DNA片段时，应在此溶液中再加入终浓度为20%的异丙醇。
8. 将试剂盒中的Spin Column安置于Collection Tube上。
9. 将上述操作7的溶液转移至Spin Column中，12,000 rpm离心1分钟，弃滤液。
注）如将滤液再加入Spin Column中离心一次，可以提高DNA的回收率。
10. 将500 ul的Rinse A加入Spin Column中，12,000 rpm离心30秒，弃滤液。
11. 将700 ul的Rinse B加入Spin Column中，12,000 rpm离心30秒，弃滤液。
12. 重复操作步骤11。
13. 将Spin Column安置于新的1.5 ml的离心管上，在Spin Column 膜的中央处加入25 ul 的灭菌蒸馏水或Elution Buffer，室温静置1分钟。
注）把灭菌蒸馏水或Elution Buffer加热至60℃使用时有利于提高洗脱效率。
胶回收的方法、注意事项以及实验步骤
胶回收的方法、注意事项以及实验步骤DNA片段的分离与回收是基因工程操作中一项重要的技术,如可收集特定酶切片段用于基因克隆或是制备探针,回收PCR产物用于再次鉴定等。
1 各类常用回收方法由于分离方法众多,且各种不同的方法可能同时依据多项原理,所以只能粗略地将各种方法分成五大类:电泳法,收集孔法,机械破碎法,溶(熔)胶法与酶处理法:一,电泳法根据凝胶割否分透析袋法与流动电洗脱法(割胶),滤纸-透析膜法与DEAE膜法(不割胶).(1)透析袋法该方法可回收大于5kb的片段,缺点是操作麻烦并易造成DNA酶的污染.(2)流动电洗脱法该方法回收片段大小为4～50kb,且回收效率高达94～100%,极端条件下可回收大至550kb的片段.缺点是操作繁琐,而且为了取得较高的回收率,需特定的流动电洗脱槽.(3)滤纸-透析膜法回收率平均达70%左右,不需割胶,操作相对简单,但实验中需将滤纸上的DNA洗脱,也较繁琐,也不易控制.(4)滤纸-透析膜法此方法用于回收小片段,一般小于5kb的片段回收效率较高,可达70%以上;对于大片段(>15kb)则难以从DEAE膜上洗脱下.二,收集孔法(1)蔗糖法回收小片段效率较高,564bp的PCR产物带回收效率高达97.6%,并且回收中能将较宽的条带浓缩于收集孔中,但回收中制作收集孔较麻烦,并且收集孔中要加入蔗糖,故获得的DNA样品不能直接用于后续实验.(2)羟基磷灰石法该方法回收效率也较高,不利之处与上述方法相同,获得的DNA需再纯化,操作也较繁琐.三,机械破碎法指用机械力将凝胶压碎后再行回收DNA片段,有冻挤法,冻融法,压碎浸泡法,(单层)滤膜过滤法及双层(亲和)膜过滤法.(1)冻挤法将胶条割下置于塞有玻璃棉的吸嘴或是管底刺有小孔的eppendorf管中,冰冻30min后全速离心5min,收集清液,再经酚抽提,乙醇沉淀等纯化浓缩处理(也可直接沉淀).其基本原理理是利用离心力将凝胶中原有的液体挤出,同时也带出胶中的DNA.从胶浓度为1%琼脂糖中回收650bp,1.1kb,2.0kb,4.5kb的片段时,回收率分别为90%,74%,56%,30%.这是因为大分子DNA更难于被胶中的缓冲液带出,所以此法只适用于回收较小的DNA片段.(2)冻融法割下的胶条放在eppendorf管中,将之捣碎并放于-80℃冰冻5min,取出后迅速放置于37℃保温10min,如此反复3次能使DNA从胶中游离出来,离心获得上清中即含有目的DNA,可通过沉淀浓缩获得高浓度.对一般的DNA片段回收效率在60～80%.操作简单,并不需特殊设备.(3)压碎浸泡法又称醋酸铵法,操作较费时,回收效率较低,一般改良的方法是在冻挤法操作中,加入一定的水并浸泡10min,增加DNA的回收率.四,溶胶法根据物理或化学溶胶可分为低融点法(物理熔胶)与NaI,KI,NaClO4溶胶法(化学溶胶).(1)低融点胶法采用特殊的低融点凝胶,该胶在65℃即溶化,实验中是先灌制正常的凝胶,然后用低融点胶取代其中的部分(即可节约低融点凝胶用量,也能保证电泳中整块凝胶的完整性.)电泳完成后割下的凝胶可于65℃下保温溶解,后直接用于酶切,连接,DNA标记的实验.操作方便简单,但需特殊的低融点凝胶,成本较高,且回收得到的样品浓度较低.(2)化学融胶法琼脂糖能溶解于一些盐溶液中(NaI,KI,NaClO4),然后可用特殊的纯化柱将DNA样品溶液纯化,现在广泛使用的凝胶电泳中DNA片段回收试剂盒基本采用了此中回收原理,能在短时间内获得目的DNA片段,成本也较低.五,酶处理法对于大片段DNA的回收,象酵母人工染色体的克隆实验中,克隆片段可大到2 000kb,一般采用此方法.利用琼脂糖酶降解琼脂糖,能较温和的裂解琼脂糖,最终成功回收DNA片段.2 DNA回收中的注意事项除了选择合适的方法外,实验中还要注意以下几点:(1)防止抽提过程中污染DNA酶与回收片段接触的试剂与器皿等都应进行灭菌(酶)处理,即使是不能用干热或湿热法灭菌的器皿也要用乙醇浸泡以灭杀活菌与DNA酶,不然可能发生回收片段部分降解的现象,有时甚至一无所获.即使是轻微的降解反应——当发生在粘性末端时也会导致严重的连接困难.(2)紫外照射选择长波段回收过程往往需在紫外等监测下进行,与一般观察电泳结果不同的是这时应用长波紫外灯.因为短波紫外线(254nm)会引起DNA的断裂或是形成TT二聚体,前者会使以后的连接与转化等实验失败,后者可能造成基因突变,给克隆工作带来麻烦.即使是使用了长波紫外照射,回收DNA时也要尽量短时照射,避免连续长时间照射.(3)实验操作要轻柔特别在处理较大片段时应防止机械剪切作用DNA对的破坏,如吸取液体,转动离心管等操作均应缓慢,轻柔.综上所述,只有在合适的回收方法基础上注意具体操作步骤是才能有效回收所需片段,为以后的酶切,连接,标记等工作打下良好基础.3 实验步骤一、试剂盒法(Kit回收法,以上海申能博彩生物科技有限公司生产的试剂盒为例)(1)从电泳板上切割含目的DNA片段的凝胶块(割胶尽可能的小,提供后续回收效率)(2)凝胶称重后并将其放入1.5ml管中,将其适当切小,加速溶解.每100mg凝胶加入400μl solution SN.(若称重省略,一般加入400μl SN)(3)凝胶溶解:55-60℃,保温5-10分钟,每2分钟混匀一下,使凝胶溶解,胶完全融化后每400μl solution SN中加入solution B 100μl,混匀.(4)将3S柱装入2ml洗管,将上述混合液转移至3S柱,室温放置2min.室温10 000 rpm离心1分钟,稳定45秒.(5)取下3S柱,倒掉收集管中的废液,将3S柱放入同一收集管中,加入600μl Wash Solution,室温10 000 rpm离心1分钟.(6)重复步骤5一次.(7)取下3S柱,倒掉收集管中废液,将3S柱放入同一收集管中,室温10 000 rpm离心2分钟.(8)将3S柱放入新的离心管中,在3S柱子膜中央加30μl ddH2O,不加盖室温放置2分钟.(9)盖上离心管,室温10 000 rpm离心1分钟,离心管中的液体即为回收的DNA片段.二、冻融,挤压回收法(1)用手术刀在DNA紫外检测仪下切割下含有所要DNA片段的凝胶块置于Eppendorf管中,甩至管底,-20℃冻存30min,(2)取出后用牙签将凝胶块尽量捣碎,剪去管上部,用烧红的针头在管底扎几个微孔,孔径越细越好.(3)将管套入另一个Eppendorf管中,常温下,15 000rpm离心10分钟.(4)将上清液吸到收集管中,向沉淀中加入100μl重蒸水.(5)重复步骤(2),(3),(4)两遍(如图所示).(6)收集的上清于15 000rpm,4℃离心20分钟,吸取上清液,补足400μl.(7)收集的上清液加入0.1V 的KAc(pH=5.5,3M)和2.0～2.5V 的无水乙醇,充分混匀后-20℃放置30min,取出15 000rpm,4℃离心30min.(8)弃上清,加入400μl 70%的乙醇,15 000rpm,4℃离心5min.(9)弃上清并倒扣3~5min,然后37℃烘干(30min左右即可).(10)烘干沉淀可用30ml ddH2O溶解,待用.。
pcr切胶回收的步骤
pcr切胶回收的步骤
PCR切胶回收呀，这可是个很有趣的小实验呢。
先说说准备工作吧。
你得有已经跑过PCR并且经过琼脂糖凝胶电泳的胶块哦。
然后呢，把要用的工具都准备好，像干净的刀片啦，还有专门的切胶回收试剂盒。
开始切胶啦。
在紫外灯下看胶块的时候，就像寻宝一样呢。
找到你要的那条DNA 条带，然后用刀片小心翼翼地把它周围的胶切下来。
可别切太大块啦，不然会有好多杂质的。
切的时候就像在给小宝贝做精细的手术一样，要很小心哦。
切好胶之后，就按照试剂盒的说明来操作啦。
一般是把切下来的胶放到一个离心管里，然后加入一些溶液，让胶融化。
这时候你就看着胶慢慢变成液体，感觉就像魔法一样呢。
接着呢，要把融化后的液体加到吸附柱里。
这个吸附柱就像一个小卫士，专门把DNA吸附住，而那些杂质就被留在外面啦。
把液体加进去之后，离心一下，就像坐小过山车一样，让液体在离心力的作用下快速通过吸附柱。
然后呢，要清洗一下吸附柱。
这一步就像是给小卫士洗个澡，把它身上可能残留的杂质都洗干净。
再离心一下，把清洗的液体甩掉。
最后就是把我们想要的DNA从吸附柱上洗脱下来啦。
加入洗脱液，再离心，这个时候我们的DNA就乖乖地跑到洗脱液里啦。
就像把小宝贝从保护它的小房子里接出来一样。
这样，PCR切胶回收就完成啦。
虽然过程有点小复杂，但是只要按照步骤来，就可以得到我们想要的纯净的DNA啦。
每次做这个实验都感觉像是在和小小的DNA分子玩一场有趣的游戏呢。
切胶回收步骤
切胶回收步骤
嘿，咱今儿就来说说切胶回收这档子事儿！
你想想看啊，那凝胶就像是一个藏着宝贝的神秘盒子，咱得小心翼
翼地把里面咱想要的那部分给找出来。
首先呢，咱得把那含有咱目标片段的凝胶给找出来，这就好比在一
堆玩具里找出你最喜欢的那个小汽车，得看准咯！然后呢，用那干净
又锋利的刀片，轻轻地把那一块儿给切下来，可别太用力啦，不然把
宝贝给弄坏喽。
这就跟切蛋糕似的，得恰到好处。
切下来之后，可不是直接就完事儿了哦。
接下来要把这小块凝胶放
到一个专门的管子里。
这管子就像是宝贝的新家，舒舒服服地待在里面。
然后呢，就要加一些专门的溶液进去啦，这些溶液就像是给宝贝洗
个舒服的澡，让它能更好地被我们得到。
再之后，就是把这个管子放到一个合适的温度下，让一切反应好好
地进行。
这就好像是让宝贝在一个温暖的房间里休息，慢慢变得更好。
等反应得差不多了，就该离心啦！这离心就像是把宝贝身上多余的
东西甩掉，让它变得更纯粹。
最后，把那离心出来的液体收集起来，这里面可就有咱心心念念的目标片段啦！这感觉，就像是终于找到了藏在深处的宝藏一样，开心得不行！
你说这切胶回收是不是挺有趣的呀？虽然过程有点小麻烦，但一想到能得到自己想要的东西，那一切都值得啦！就像你为了吃到最喜欢的糖果，就算要跑很远的路去买，你也会很乐意呀！所以呀，别嫌麻烦，好好地去做切胶回收，说不定就能有大收获呢！。
DNA凝胶回收方法
DNA凝胶回收方法
一、材料：
1.5ml的离心管，离心管架
二、设备：
移液枪，离心机
三、试剂：
溶胶液，75%乙醇
四、操作步骤：
1. 切胶回收后，称重，在离心管中用1ml的枪头捣碎。
2. 加入等体积的溶胶液（如胶为100mg，则加100ul的溶胶液），颠倒混匀。
3. 55℃恒温加热直到凝胶完全融化（约10分钟）,每隔2-3分钟需将管内混悬液混匀一次，以加速凝胶溶解。
4. 加入到回收柱中，室温放置1分钟。
5. 12000rmp离心1分钟，倒弃收集管中的液体。
6. 在DNA回收柱中，加入700ul的75%的乙醇，倒弃收集管中的液体。
7. 重复步骤6。
8. 12000rmp离心1分钟，除去残留的液体。
9. 室温放置5-10分钟，让残留的乙醇充分挥发。
10. 将DNA回收柱置于1.5ml的离心管上，加入30ul的洗脱夜（TE缓冲液），放置1分钟，12000rmp离心1分钟，所得的液体即为回收的DNA。
割胶回收实验报告
割胶回收实验报告【割胶回收实验报告】一、实验目的1. 了解割胶回收的原理及方法；2. 探究割胶回收对胶水质量的影响；3. 讨论割胶回收的应用价值。
二、实验原理胶水在固化后会形成固态胶块，割胶回收利用物理方法将固态胶块切割成小颗粒或粉末状，以便于再利用。
主要包括以下步骤：1. 将固态胶块放置在切割设备中，通过切割刀进行切割；2. 切割后的碎片经过筛网筛选出所需颗粒大小；3. 经过处理的胶粒可以进行再利用或进行再加工制成其他产品。
三、实验步骤1. 准备实验材料和设备：割胶刀、固态胶块、切割设备、筛网等；2. 将固态胶块放置在切割设备中，启动设备进行切割；3. 调整切割设备的刀片角度和速度，以获得所需颗粒大小；4. 将切割后的胶粒经过筛网进行筛选；5. 收集筛选后的胶粒，并进行相关分析和测试。
四、实验结果与分析通过实验得到的割胶回收的胶粒质量较好，具有较高的粒度均匀性和颗粒度适宜性。
在调整切割设备的刀片角度和速度时，发现角度过小会导致切割过程困难，角度过大则可能影响切割后的颗粒形状。
速度过快会导致切割不充分，速度过慢则可能导致切割割度不匀。
通过筛网筛选后的胶粒具有较好的颗粒分布和筛选效果。
五、实验讨论割胶回收可以将废弃胶水固态块进行有效利用，减少资源浪费和环境污染。
通过合理调整切割设备的刀片角度和速度，可以获得理想的胶粒颗粒度和颗粒形状。
割胶回收的胶粒可以用于再利用或再加工制成其他产品，具有较高的应用价值。
六、实验总结割胶回收是一种有效的胶水再利用方法，可以将废弃胶水固态块变为可再加工的胶粒。
实验结果表明，合理调整切割设备的刀片角度和速度对割胶回收的胶粒质量有较大影响。
割胶回收具有较高的应用价值，可减少资源浪费和环境污染，值得进一步推广和应用。
七、实验改进1. 考虑引入自动化设备，提高割胶回收的效率和精准度；2. 进一步研究和优化割胶设备的切割参数，使得割胶回收的胶粒更加均匀和适宜；3. 割胶回收后的胶粒可以进行再利用或再加工，可以进一步研究开发具有特殊功能的胶粒产品。
切胶回收DNA
切胶回收DNA（博迈德琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒DR01）
**WB液使用前加入指定量的无水乙醇；
**尽量使胶中的缓冲液减少。
当PH值《7.5时，吸附回收DNA效率最高，正常情况小，溶胶液依旧保持黄色时，说明PH值正常，如果变成橘红或淡紫色说明PH值偏高，可在胶充分溶解时，加入3M醋酸钠5-10ul
实验步骤：
1.40ulPCR反应液琼脂糖凝胶电泳。
在紫外光下切目的片段。
尽量减少胶的体积；
2.将切下的胶放入1.5ml离心管中，称重；
3.加入3倍体积的溶胶液，如果胶的浓度大于2%，则应加入6倍溶胶液DD;
4.56度水浴10分钟至胶完全溶解，2-3分钟涡旋震荡一次加速溶解；
5.将溶解液EC吸附柱中，吸附柱放入收集管中，室温放置1min，12000rpm离心30-60sec，弃收集管中离心液；
6.加入500ul漂洗液WB，12000rpm离心30sec，弃离心液；
7.重复6
8.将吸附柱EC放入空离心管中，12000rpm离心2min，尽量出去漂洗液，以免残留乙醇抑制下游反应；
9.将EC吸附柱放入一个干净的离心管中，在吸附柱中间部位加入50ul洗脱缓冲液EB，（使用前在65-70度水浴中加热效果更好），室温放置2min，12000rpm离心1min，可将得到的溶液重新加入吸附柱中，离心1min；
10.取2ul离心液电泳，估计DNA量（250bp marker：5ul，1000bp的相当于150ng，余相当于50ng）。
切胶回收的步骤审批稿
切胶回收的步骤
YKK standardization office【 YKK5AB- YKK08- YKK2C- YKK18】
切胶回收的步骤
1．琼脂糖凝胶电泳目的基因，紫外灯下切除含有目的基因的琼脂糖，用纸巾吸尽凝胶表面的液体，尽量减少不含目的基因的凝胶量，称重（1mg=1ul）
2．尽量切碎凝胶
3．向离心管中加入3倍体积的NAL溶液， 55（视具体胶定）度加热，使凝胶完全融化，
4．按每20ul硅胶树脂结合（树脂使用前要充分混匀）约3ugDNA加入适量比例的硅胶树脂，充分混合，室温放置20min，
5．10000rpm离心1分钟，去上清（上清液暂保存，如回收率不过可重复4）
6．加入800ul清洗液（清洗液加入56ml100%的无水乙醇），振荡混匀后，室温静置10min，10000rpm离心1分钟，去上清
7．重复步骤6，尽量去除上清，完全风干至不残留乙醇味道；
8．加入和硅胶树脂等体积的TEbuffer或灭菌蒸馏水混匀，55度水浴20min 9．10000rpm离心1分钟，吸上清为DNA回收液，
10．重复8，9。
切胶回收一代测序
切胶回收一代测序全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：切胶回收一代测序是一种高效的DNA测序技术，它可以帮助科研人员快速准确地获取DNA序列信息。
这种技术在生命科学研究中发挥着重要的作用，为研究人员提供了丰富的研究数据，促进了科学研究的进展。
切胶回收一代测序的原理是通过将DNA样本分解成小片段，然后通过高通量测序技术对这些小片段进行测序。
这种技术的优势在于可以同时测序多个DNA片段，高效地获取DNA序列信息。
在实际应用中，科研人员通常会使用切胶回收一代测序技术来对某一特定区域的DNA进行测序，以获取该区域的详细序列信息。
切胶回收一代测序技术的工作流程一般包括以下几个步骤：DNA 样本提取、DNA片段化、测序文库构建、高通量测序和数据分析。
科研人员需要从细胞或组织中提取DNA样本，然后将DNA样本分解成小片段。
接着，他们会将这些DNA片段连接到测序文库中，然后通过高通量测序技术对文库中的DNA片段进行测序。
科研人员需要对测序得到的数据进行分析，以获取DNA序列信息。
切胶回收一代测序技术在生命科学研究中有着广泛的应用，可以用于基因组学、转录组学、表观基因组学等研究领域。
在基因组学研究中，科研人员常常使用切胶回收一代测序技术来对生物的整个基因组进行测序，以解析基因组的结构和功能。
在转录组学研究中，科研人员可以利用切胶回收一代测序技术来对生物的mRNA进行测序，以了解其基因表达的特点。
在表观基因组学研究中，科研人员可以利用切胶回收一代测序技术来对生物的表观修饰信息进行测序，以研究表观遗传学的调控机制。
切胶回收一代测序技术的应用还不仅限于基础研究领域，它也在临床医学中得到了广泛的应用。
临床医学研究人员可以利用切胶回收一代测序技术来对患者的基因组进行测序，以帮助医生做出准确的诊断和治疗方案。
通过对患者基因组的测序，医生可以了解患者的遗传病风险，指导临床诊断和治疗。
第二篇示例：随着科技的不断发展，基因测序技术已经成为现代生物学领域中的重要工具。
KCL染色切胶回收
KCL染色切胶回收
1．蛋白粗提掖进行SDS-PAGE；
2．预冷（预先放在4℃冰箱中）0.25M KCl染色，检测蛋白条带（这种染色方法灵敏度比考马斯亮蓝染色低很多）；
3．用一干净刀片切下蛋白所在凝胶条带，将凝胶条在蒸馏水中浸泡，使KCl离开胶条，直至无色透明（5-10min，条带变为无色）；
4．将无色透明的胶条从蒸馏水中取出，装入已准备好的1.5ml离心管中，用镊子夹碎（或用刀片切碎），然后在管里加入所需溶解蛋白的溶液，比如蒸馏水、生理盐水或PBS；
5．将离心管放入4℃冰箱中过夜，第二天吸出管中的液体（吸之前振荡一下），至少50%的蛋白可以从凝胶中析出，再加入蒸馏水抽提两次，就可以将胶条中绝大部分蛋白提出；
6．抽提蛋白冻干浓缩后，可用考马斯亮蓝染色法测蛋白浓度，可以用SDS-PAGE 验证纯度，看是否有杂带；提取蛋白样品≥5mg，可供免疫一只兔子用。
切胶回收的步骤教学教材
切胶回收的步骤
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切胶回收的步骤
1．琼脂糖凝胶电泳目的基因，紫外灯下切除含有目的基因的琼脂糖，用纸巾吸尽凝胶表面的液体，尽量减少不含目的基因的凝胶量，称重（1mg=1ul）
2．尽量切碎凝胶
3．向离心管中加入3倍体积的NAL溶液， 55（视具体胶定）度加热，使凝胶完全融化，
4．按每20ul硅胶树脂结合（树脂使用前要充分混匀）约3ugDNA加入适量比例的硅胶树脂，充分混合，室温放置20min，
5．10000rpm离心1分钟，去上清（上清液暂保存，如回收率不过可重复4）
6．加入800ul清洗液（清洗液加入56ml100%的无水乙醇），振荡混匀后，室温静置10min，10000rpm离心1分钟，去上清
7．重复步骤6，尽量去除上清，完全风干至不残留乙醇味道；
8．加入和硅胶树脂等体积的TEbuffer或灭菌蒸馏水混匀，55度水浴20min 9．10000rpm离心1分钟，吸上清为DNA回收液，
10．重复8，9
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切胶回收注意事项
胶回收DNA注意事项胶回收DNA注意事项①切胶回收DNA片段是要把整个目的片断所在位置的胶全部回收。
所以为了减少胶的体积，我们就可以用相对比较薄的胶来跑电泳，通常只要够点样即可，或是采用薄而宽的梳子来跑胶。
这样可减少回收试剂引起的一些后续麻烦。
②主要还是DNA的浓度, 如果DNA浓度不够, 想胶小点也不可能。
③紫外灯下切下含待回收DNA的凝胶时，要衬以干净的塑料薄膜，使用无DNA 污染的新刀片，其目的在于防止外源DNA的污染。
④利用凝胶回收试剂盒DNA回收效率较低或者未回收到目的片段可能有以下几个原因：胶块未完全溶解，可适当延长水浴时间，并增加上下颠倒次数辅助溶解；胶块体积太大，应先将其切为小块，分多次回收；电泳缓冲液pH太高，硅基质膜在高盐低pH结合DNA，如pH太高，应作适当调整；漂洗液中未加入无水乙醇。
⑤可以改用去离子水洗脱。
但是实验室所用纯水一般pH偏低，可利用NaOH适当调高其pH值，以增加洗脱得率。
⑥洗脱产物含有残留的乙醇会影响后续酶切实验，请确保彻底去除漂洗缓冲液，具体方法参见回收效率低的解决方案。
⑦不可以使用更小洗脱体积（小于说明书提供的最小洗脱体积）进行洗脱以提高浓度，因为说明书提供的最少洗脱体积是能完全覆盖吸附膜的最小体积，若减少体积则不能将DNA完全洗脱下来。
⑧电泳检测只有一条目的带，可以选用凝胶回收试剂盒。
如果后续实验对片段纯度要求较高，建议即使只有一条带，也可以切胶纯化，其回收得到片段的纯度可能要比直接回收高一些。
⑨琼脂糖凝胶胶块不溶可能是下述原因：琼脂糖质量不好；含目的片段的凝胶再空气中放置过久，使胶块失水、干燥，建议切胶后立即进行回收或将胶块保存在4℃或-20℃；制胶的电泳缓冲液浓度过高或陈旧。
关于胶回收切胶的一点注意事项1. 电泳的buffer和gel都是新制的，切胶的台子清理干净，刀片最好洗净灭菌，总之一句话就是保证切下的带没有外源dna污染。
2. 切胶是要把整个目的片断所在位置的胶全部回收。
PCR产物的胶回收分离纯化
PCR产品的胶回收分离纯化之宇文皓月创作一、实验仪器1、琼脂糖凝胶电泳系统2、紫外观察分析仪3、离心机4、单面刀片5、恒温水浴锅二、试剂1、DNA回收试剂盒2、50×TAE3、ddH2O三、步调1 在紫外灯下切分含DNA的琼脂糖块，尽可能除去多余的琼脂糖．放入1.5ml离心管中。
4. 称量胶块重量，计算胶块体积。
计算胶块体积时，以 1 mg=1 μl 进行计算。
5. 向胶块中加入胶块融化液 DRI Buffer，DRI Buffer 的加量如下表：凝胶浓度DRI Buffer 使用量1.0％ 3 个凝胶体积量1.0％～1.5％ 4 个凝胶体积量1.5％～2.0％ 5 个凝胶体积量6. 均匀混合后 75℃加热融化胶块（低熔点琼脂糖凝胶只需在 45℃加热）。
此时应间断振荡混合，使胶块充分融化（约6～10 分钟）。
注）胶块一定要充分融化，否则将会严重影响DNA 的回收率。
7. 向上述胶块融化液中加入DRI Buffer量的1/2体积量的DRII Buffer，均匀混合。
当分离小于 400 bp 的 DNA 片段时，应在此溶液中再加入终浓度为 20% 的异丙醇。
8. 将试剂盒中的 Spin Column 安顿于 Collection Tube 上。
9. 将上述操纵 7 的溶液转移至 Spin Column 中，12,000 rpm 离心 1 分钟，弃滤液。
注）如将滤液再加入Spin Column 中离心一次，可以提高 DNA 的回收率。
10. 将500 μl的漂洗液Rinse A加入Spin Column中，12,000 rpm 离心 30 秒钟，弃滤液。
11. 将700 μl的Rinse B加入Spin Column中，12,000 rpm 离心 30 秒钟，弃滤液。
注）请确认Rinse B中已经加入了指定体积的100%乙醇。
12. 重复操纵步调 11。
13. 将 Spin Column 安顿于新的 1.5 ml 的离心管上，在Spin Column 膜的中央处加入25 μl 的灭菌蒸馏水或Elution Buffer，室温静置 1 分钟。
DNA胶回收实验技术总结
DNA胶回收实验技术总结一. 提高胶回收量的办法：1）增加电泳时的上样量。
2）电泳缓冲液用新鲜配制的。
3）切胶时尽量只切有条带的胶，减小切胶体积：含目的片断很少的胶就不要要了，不然影响回收率.4）把切的两块或多块胶融化后，无论多大的体积都用一个管子，转移到同一个柱子上。
5）溶胶时所加的溶液可多一点，这样更有利于DNA与膜的结合，不过一般不要多余750ul。
6）胶回收的关键是通过柱子的溶液的盐浓度、酸碱性（电荷)和疏水性使DNA与柱子结合，因此,若电泳缓冲液的PH偏高，可在溶胶液中加入10ul（PH 5.0，3mol/L的NaAC);为了使DNA分子更好的拦截在膜上，可以添加30％异丙醇在加热溶解胶后的液体里。
7) 加洗脱液之前,将柱子在室温放置几分钟（大约需10分钟），以使乙醇充分挥发。
8) 最后少加些洗脱液，尽量减少回收体积,一般用30—50μl洗脱液洗脱（不能太少，否则无法浸湿膜反而不利于洗脱）；洗脱液滴在膜中央，以充分洗脱结合在膜上的DNA.9）可以在加入洗脱液之后，可以在55度水浴5分钟或放在50度水浴10分钟以上再洗脱，或用封口膜密封4度过夜，第二天再离心回收，效果不错。
10) 将离心后的洗脱液加回吸附柱,再次离心。
二. 几种PCR 产物回收的详方法和步骤1) 普通胶回收如果要胶回收,最好还是用试剂盒，方便，回收率也略高，实在要手工回收,可以切胶后加入3倍体积TE，水浴熔化后,酚、酚／氯仿抽提干净，乙醇沉淀即可.另外好像还有冷冻法，没作过,不是很清楚。
2) 从低熔点凝胶回收DNA纯化DNA片段加与凝胶体积相等的TE(10mmol/l Tris-HCl pH8。
0，0。
1mmol/l EDTA），置65℃水浴5分钟保温,使凝胶完全溶解.待放至室温，加等量酚(TE饱和，TE封在上层,取下层酚），轻轻混匀(不用混匀),12000rpm，3分钟离心。
反复1—2次.取上层液，加0.1体积3mol/L 醋酸钠(pH5。
dna片段的胶回收实验思考
dna片段的胶回收实验思考DNA片段的胶回收实验是一种常用的实验方法，用于分离和提取DNA片段。
在这个实验中，胶回收是指将凝胶中的DNA片段从凝胶中分离出来，并用于后续的实验操作。
DNA是生物体遗传信息的载体，而DNA片段是DNA分子在特定条件下被限制性内切酶切割后得到的特定长度的DNA分子。
在实验室中，研究人员经常需要对DNA进行分离和提取，以便进行进一步的分析和研究。
胶回收实验通常用于凝胶电泳后，需要纯化DNA片段的情况。
凝胶电泳是一种常用的分离DNA片段的方法，通过电场作用，将DNA片段按照其大小分离在凝胶中。
然而，在电泳后，需要将目标DNA片段从凝胶中提取出来，以便进行下一步的实验操作。
胶回收实验的基本步骤如下：1. 准备凝胶：首先，需要制备含有DNA片段的琼脂糖凝胶。
通常，将琼脂糖溶解在缓冲液中，并加热至溶解完全。
然后，将DNA样品与凝胶溶液混合均匀，并倒入电泳槽中，形成凝胶。
2. 进行凝胶电泳：将电泳槽连接至电源，通过施加电场，将DNA 样品在凝胶中进行电泳分离。
根据DNA片段的大小，不同的片段会在凝胶上形成不同的迁移带。
3. 可视化DNA片段：在电泳结束后，需要使用染色剂将凝胶上的DNA片段可视化。
在实验室中常用的染色剂有乙溴化乙锭（EB）或硒化乙锭（SYBR Green）等。
4. 切割目标DNA片段：当目标DNA片段被可视化后，需要使用刮片或者切割器将目标DNA片段从凝胶中切割出来。
切割时应注意避免污染和交叉污染。
5. 胶回收：将切割下来的凝胶块放入离心管中，加入适量的溶剂，如缓冲液或蒸馏水，并将其在恒温摇床上振荡混合，使DNA片段溶解出来。
6. 离心分离：将混合液离心，以分离DNA片段溶液和凝胶残渣。
离心后，DNA片段溶液会位于离心管的上层，凝胶残渣则会位于下层。
7. 提取DNA片段：将上层的DNA片段溶液小心地转移到新的离心管中，丢弃凝胶残渣。
为了保证纯度和浓度，可以使用DNA纯化试剂盒进行进一步的提纯。
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切胶回收的步骤
1．琼脂糖凝胶电泳目的基因，紫外灯下切除含有目的基因的琼脂糖，用纸巾吸尽凝胶表面的液体，尽量减少不含目的基因的凝胶量，称重（1mg=1ul）
2．尽量切碎凝胶
3．向离心管中加入3倍体积的NAL溶液，55（视具体胶定）度加热，使凝胶完全融化，
4．按每20ul硅胶树脂结合（树脂使用前要充分混匀）约3ugDNA加入适量比例的硅胶树脂，充分混合，室温放置20min，
5．10000rpm离心1分钟，去上清（上清液暂保存，如回收率不过可重复4）
6．加入800ul清洗液（清洗液加入56ml100%的无水乙醇），振荡混匀后，室温静置10min，10000rpm离心1分钟，去上清
7．重复步骤6，尽量去除上清，完全风干至不残留乙醇味道；
8．加入和硅胶树脂等体积的TEbuffer或灭菌蒸馏水混匀，55度水浴20min
9．10000rpm离心1分钟，吸上清为DNA回收液，
重复8，9初一语文讲义
辨析和修改病句的基本方法
辨析并修改病句是语文实际运用能力的具体表现之一，也是中考中长“考”不衰的常青树。
本专题主要就是帮助学生了解句子的致病原因，掌握辨析和修改病句的基本方法，提高“诊断和施治”的能力。
“病句的辨析及修改”是近年来各地中考的重点，也是难点。
这类题的主要考查方法有客观题和主观题两种。
病句的辨析一般以客观选择题出现。
这是一种比较传统的考察题型，它面广量大，仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除谢谢1
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以思维见长，是近年中考中常见的题型，也是学生最易失分的题目，这就要求同学们复习过程中要重视这一类题的复习和训练。
主观题多指修改性的题目，多用于对句子或文段的修改。
不仅要求学生们了解这是病句，是什么样的病句，而且要求知道如何修改，难度更大。
目前学生对病句尚处于感性认识的阶段，而且这种认识是分散和不完全的，往往还不能自觉地综合应用，这一专题的复习指导是非常必要的。
一、何为“病句”
如果一个句子文不从，字不顺，不合乎语法规范，那它就有语病。
通俗地说就是，凡是读起来不通顺，感觉别扭、含混不清的句子都是病句。
二、如何辨析病句
（1）感读——凭语感，凡是读起来别扭，听起来含混的，就可能有语病。
如：她有一个女儿，同许多年轻的妈妈一样，愿意把孩子打扮的漂亮一些。
10．
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