001.纯化水微生物限度检查法操作规程

合集下载

001.纯化水微生物限度检查法操作规程

SOP/QC(09)001－01纯化水微生物限度检查法操作规程文件类别：标准操作规程审批表江西中兴汉方药业有限公司1.目的规范纯化水微生物检查的操作方法，确保药品检验的准确性。

2.适用范围适用于纯化水的微生物检查。

3.责任人QC：负责按此规程执行。

4.程序4.1 概述本规程是以营养琼脂培养基作为细菌培养基，采用平板表面涂布法测定纯化水菌落总数。

其操作环境和全部过程应严格遵守无菌操作，防止微生物污染。

4.2 仪器与用具电热恒温培养箱（30～35℃）霉菌培养箱（23～28℃）超净工作台无菌双碟移液管0.45μm微孔滤膜过滤器抽滤泵4.3 试药与试剂营养琼脂培养基玫瑰红钠培养基pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液4.4 纯化水的取样4.4.1取样时，须先开启取样阀门，用工艺用水本身冲冼取样口，约冲水1升以上，而后以无菌具塞10ml试管取水，取水量约为试管高度的1/2～2/3。

4.4.2检测周期：见“工艺用水监测规程（SMP-ZL-016-）”规定。

4.4.3取样后的水样应立即检验。

4.5 检查方法量取9ml纯化水置盛有90ml pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液的锥形瓶中混匀，作为供试液；量取供试液10 ml供试液置安装好的无菌抽滤装置，进行过滤。

用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗滤膜，冲洗后取出滤膜，菌面朝上贴于营养琼脂培养基平板及玫瑰红钠培养基平板上，盖好，倒置培养皿，分别将营养琼脂培养基平板及玫瑰红钠培养基平板置电热恒温培养箱（30～35℃）及霉菌培养箱（23～28℃）中培养。

细菌培养3天后进行菌落计数，霉菌培养5天后进行菌落计数。

计数结果即为每ml水中含细菌及霉菌的菌落数。

4.6 结果判定每1ml纯化水中的细菌数及霉菌数之和应不得过100个。

5 相关记录6变更履历表。

001纯化水微生物限度检查法操作规程

001纯化水微生物限度检查法操作规程操作规程：001纯化水微生物限度检查法一、目的和适用范围本操作规程适用于纯化水微生物限度检查法的操作流程。

检查目的是为了评估纯化水中微生物的数量和种类，确保纯化水的质量符合相关法规和标准。

二、设备和试剂1.无菌工作台2.显微镜3.火焰消毒器4.纯化水样品5.温度控制设备6.无菌试剂瓶7.营养基培养物8.细菌计数板三、操作步骤1.检查前准备1.1确保工作区域干净整洁，并进行必要的消毒。

1.2准备所需的设备和试剂。

1.3校验设备的准确性和完整性。

2.样品取样2.1使用无菌容器取样纯化水样品。

2.2尽量避免样品接触到空气。

2.3快速将样品送至检测实验室。

3.样品处理3.1使用无菌器具将样品分配到多个无菌试剂瓶中。

3.2确保样品的稀释比例符合标准要求。

4.培养试验4.1取一定量的样品，将其滴入细菌计数板的每个孔中。

4.2使用无菌移液器将细菌计数板放入孔内的细菌培养基中。

4.3将细菌计数板密封，并标注好样品信息。

4.4将细菌计数板放置于设定好的温度和湿度下进行培养。

4.5培养时间根据实验要求确定。

5.计数和分析5.1培养结束后，取出细菌计数板，使用显微镜在指定区域进行微生物计数。

5.2统计每个孔中微生物的数量，并记录下来。

5.3分析结果，与相关法规和标准进行比较。

5.4如结果符合要求，则纯化水样品通过检查；如结果不符合要求，则需进行进一步处理。

6.结果记录和报告6.1将检查结果记录在检测报告中，包括样品信息、检测日期、微生物数量等。

6.2将报告存档，并按要求进行归档保存。

四、操作注意事项1.操作过程必须保持无菌状态，避免样品的污染。

2.使用的设备和试剂必须保持干净和完整。

3.细菌计数板的培养条件必须按标准要求进行控制。

4.操作人员应熟悉操作流程和相关法规和标准，严格遵守操作规程。

五、操作记录1.操作人员应按要求记录操作流程、设备校验、样品信息等重要数据。

2.操作记录应包括操作日期、操作人员、操作步骤和结果等信息。

微生物限度检查操作规程

微生物限度检查操作规程《微生物限度检查操作规程》一、目的微生物限度检查是用于确认产品是否符合微生物水平要求的一种分析方法。

本操作规程的目的是制定微生物限度检查的操作步骤，确保检查结果的准确性和可靠性。

二、适用范围本操作规程适用于所有需要进行微生物限度检查的产品，包括食品、医药和化妆品等。

三、操作步骤1. 准备工作：清洁实验室工作台面和仪器设备，准备所需的培养基和试剂，并确保仪器设备的正常运转。

2. 取样：按照产品的取样标准，从不同批次或不同位置进行取样，并确保取样的代表性。

3. 样品制备：将取样的产品进行样品制备，包括稀释、搅拌和过滤等步骤，以便于后续的微生物检查。

4. 培养：将样品接种在适当的培养基上，根据不同的微生物种类和要求进行培养，并进行恒温培养一定时间。

5. 计数：在培养一定时间后，对培养基上的菌落进行计数，并按照标准方法进行结果的记录和确认。

6. 结果判定：将检查结果与产品的微生物限度标准进行比对，根据结果作出是否合格的判定。

7. 结果记录：将微生物限度检查的结果进行记录，包括样品信息、操作步骤、检查结果和判定等信息，并将结果报告给相关部门或供应商。

四、注意事项1. 操作人员应具备一定的微生物检测知识和操作技能，严格按照操作规程执行。

2. 实验室应保持清洁、卫生，并进行定期消毒和验证。

3. 实验室设备应定期维护和校准，确保设备的准确性和可靠性。

4. 所使用的培养基和试剂应符合相关标准，存放在干燥、阴凉、避光的环境中。

5. 检查结果应及时报告，并根据结果采取相应的控制措施。

以上就是《微生物限度检查操作规程》的主要内容，希望能够帮助大家更好地进行微生物限度检查，确保产品质量和安全。

微生物限度检查法标准操作规程完整

2、计数方法本法包括平皿法、薄膜过滤法。
3、计数培养基适用性检查和供试品计数方法适用性检查供试品微生物计数中所使用的培养基应进行适用性检查。供试品的微生物计数方法应进行方法适用性试验，以确定采用的方法适合于该产品的微生物计数。
4、菌种及菌液的制备
试验用菌株的传代次数不得超过5代（从菌种保藏中心获得的干燥菌种为第0袋），并采用适宜的菌种保藏技术进行保藏。计数培养基适用性检查和计数方法适用性试验。
铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)[CMCC(B) 10104]
大肠埃希菌(Escherichia coli)[CMCC(B) 44102])
乙型副伤寒沙门菌(Salmonella paratyphi B)[CMCC(B) 50094]
白色念珠菌(Candida albicans)[CMCC(F) 98001]
薄膜过滤法采用的滤膜孔径不大于。滤膜直径一般为50mm。滤器及滤膜使用前应采用适宜的方法灭菌。使用时，应保证滤膜在过滤前后的完整性。水溶性供试液过滤前先将少量的冲洗液过滤以润湿滤膜。为发挥滤膜的最大过滤效率，应注意保持供试品溶液及冲洗液覆盖整个滤膜表面。供试液经薄膜过滤后，若需要用冲洗液冲洗滤膜，每张滤膜每次冲洗量不超过100ml，总冲洗量不得超过1000m1；以免滤膜上的微生物受损伤。取照上述“供试液的制备”和“接种和稀释”制备的供试液适量（一般取相当于1g、1ml、10cm2的供试品，若供试品中所含菌数校对，供试液可酌情减量），加至适量的稀释液总，混匀，过滤，用适量的冲洗液冲洗滤膜。测定需氧菌总数，转移滤膜菌面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基平板上；测定霉菌和酵母菌总数，转移滤膜菌面朝上贴于沙氏葡萄糖琼脂培养基平板上，按规定条件培养、技术。每株试验菌每种培养基至少制备1张滤膜。同法测定供试品对照组和菌液对照组菌数。

微生物限度检查操作规程

微生物限度检查操作规程1、目的建立微生物限度检查操作规程，规范操作以保证结果的准确性。

2、范围适用于成品、原辅料、包材及纯化水的检验。

3、职责质检部负责制定本规程，质检部微生物限度检查人员负责本规程的具体实施。

4、工作程序4.1微生物计数法微生物计数法系用于能在有氧条件下生长的嗜温细菌和真菌的计数。

当本法用于检查非无菌制剂及其原、辅料等是否符合相应的微生物标准时，应按规定进行检验，包括样品的取样量和结果的判断等。

另外，本方法不适于活菌制剂的检查。

本试验应在洁净工作台高效层流保护下进行。

4.1.1计数方法计数方法包括平皿法、薄膜过滤法供试品检查时，应根据供试品理化特性和微生物限度标准等因素选择计数方法，检测的样品量应能保证所获得的试验结果能够判断供试品是否符合规定。

所选方法的适用性须经确认。

4.1.2计数培养基适用性检查和供试品计数方法适用性试验菌种及菌液制备菌种试验用菌株的传代次数不得超过5代（从菌种保藏中心获得的干燥菌种为第0代），并采用适宜的菌种保藏技术进行保存，以保证试验菌株的生物学特性。

计数培养基适用性检查和计数方法适用性试验用菌株见表1。

菌液制备按表1 规定程序培养各试验菌株。

取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌的新鲜培养物，用PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的菌悬液；取黑曲霉的新鲜培养物加入3〜5ml含0.05% (ml/ml)聚山梨酯80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。

然后，采用适宜的方法吸出孢子悬液至无菌试管内，用含0.05%(ml/ml)聚山梨酯80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0. 9%无菌氣化钠溶液制成适宜浓度的黑曲霉孢子悬液。

菌液制备后若在室温下放置，应在2小时内使用；若保存在2〜8℃，可在24小时内使用。

黑曲霉孢子悬液可保存在2〜8℃,在验证过的贮存期内使用。

阴性对照为确认试验条件是否符合要求，应进行阴性对照试验，阴性对照试验应无菌生长。

纯化水的检验流程

纯化水的检验流程1.微生物限度检测实验前准备：实验所用的仪器（培养皿和玻璃杯薄膜过滤器所用的三角瓶、各种试管、镊子过滤用的薄膜用纯化水浸泡）高压蒸汽器121℃灭菌15分。

转移到生物实验室放在试验台后打开风机和紫外灯二次灭菌30分。

培养基的准备：玫瑰红钠（用于霉菌和酵母菌培养时间3—5天、23—28℃）、营养琼脂（用于细菌的培养，培养时间18—24小时、温度30—35℃）实验流程：首先取样。

在车间、实验室、每个用水点按序取样250ml每个取样点取样三次、微生物检测应在取样1小时内进行。

或者冷藏4小时内进行。

薄膜过滤法检测，一个样过滤一份，就是200ml的纯化水通过滤膜，（将该滤膜浸泡在纯化水（屈臣氏的蒸馏水）中后灭菌）然后把过滤后的薄膜、分别放入有培养基的平皿中铺平中间不能有气泡，一支放于玫瑰红钠培养基内（用于霉菌和酵母菌培养时间3—5天、23—28℃）一支放于营养琼脂（用于细菌的培养，培养时间18—24小时、温度30—35℃）检测结果判定！以1ml供试品的菌落数报告菌数，供试品菌落数1ml、不得超过100cfu 霉菌和酵母菌1ml不得超过100cfu参照依据：参照《中华人民共和国药典》2010版第二部微生物限度检查及（附录XI J）微生物限度标准和GB/T14233.2医用输液、输血、注射器具检验方法第二部分生物学试验方法。

纯化水微生物检测报告2.酸碱度：取本品1ml加甲基红2滴不得显示红色，另取本品10ml加溴麝香草酚蓝5滴不得显示蓝色。

3.硝酸盐：取本品5ml放冰浴中冷却，加入10%氯化钾溶液0.4ml与0.1%二苯胺硫酸溶液0.1ml摇匀缓缓的加入（用直管加优级纯硫酸）5ml摇匀（反复颠倒几次）将试管放入50度水浴中15分钟，溶液产生的蓝色，与标准硝酸盐溶液0.3ml、加无硝酸盐的水4.7ml、用同一种方法（指的是摇匀后放入50℃水浴中15分钟）处理后的颜色对照不得更深（0.000006%）4.亚硝酸盐：取本品10ml放置纳试比色管加对氨基本磺酰胺的稀盐酸溶液与盐酸萘乙二胺产生的粉色，与标准亚硝酸盐溶液0.2ml，加无亚硝酸盐的水9.8ml用同一方法处理后的颜色比较不得更深。

微生物限度检查法标准操作规程

目的建立微生物限度检查法标准操作规程，规操作，保证结果的准确性。

围成品、辅料、包装袋及纯化水的检验。

责任微生物限度检验人员容本检验操作规程依据中国药典2015年版四部《通则1105非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法》和《通则1106非无菌产品微生物限度检查：控制菌检查法》进行检查。

微生物计数法一、计数方法1、微生物计数法系用于能在有氧条件下生长的嗜温细菌和真菌的计数。

2、计数方法本法包括平皿法、薄膜过滤法。

3、计数培养基适用性检查和供试品计数方法适用性检查供试品微生物计数中所使用的培养基应进行适用性检查。

供试品的微生物计数方法应进行方法适用性试验，以确定采用的方法适合于该产品的微生物计数。

4、菌种及菌液的制备4.1试验用菌株的传代次数不得超过5代（从菌种保藏中心获得的干燥菌种为第0袋），并采用适宜的菌种保藏技术进行保藏。

计数培养基适用性检查和计数方法适用性试验。

4.2菌液制备按规定培养各试验菌株。

取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌的新鲜培养物，用PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的菌悬液；取黑曲霉的新鲜培养物加入3-5ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。

采用适宜的方法吸出孢子悬液至无菌试管中，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的黑曲霉孢子悬液。

菌液制备后若在室温下放置，应在2小时使用；若保存在2-8℃，可在24小时使用。

黑曲霉孢子悬液可保存在2-8℃，在验证过的贮存期使用。

4.3阴性对照为确认试验条件是否符合要求，应进行对照试验，阴性对照试验应无菌生长。

4.4培养基适用性检查按照表规定，接种不大于100cfu的菌液至胰酪大豆胨液体培养基或胰酪大豆胨琼脂培养基平板或沙氏葡萄糖琼脂培养基平板，置规定的条件下培养。

微生物限度检查标准操作规程

微生物限度检查标准操作规程《微生物限度检查标准操作规程》一、目的微生物限度检查是药品、食品、化妆品等产品质量的重要指标之一，其目的是为了保障产品的安全性和稳定性。

本标准操作规程旨在规范微生物限度检查的操作流程，确保检查结果的准确性和可靠性。

二、范围本标准操作规程适用于药品、食品、化妆品等产品的微生物限度检查，包括大肠菌群、金黄色葡萄球菌、霉菌和酵母菌等微生物指标的检查。

三、检查设备和试剂1. 培养基：根据不同的微生物指标选择适当的培养基，如大肠培养基、Mannitol盐琼脂、Sabouraud葡萄糖琼脂等。

2. 培养皿：使用符合规定的试验培养皿。

3. 培养箱：保证培养条件的恒温培养箱。

4. 其他常用实验用具：包括无菌采样容器、吸管、移液器、无菌培养皿等。

四、操作流程1. 样品采集：从产品中采集适量样品，保持无菌状态。

2. 制备稀释液：根据样品的特性，选择适当的稀释液将样品进行适当稀释。

3. 接种培养：将稀释后的样品接种在适当的培养基上，并在符合条件的培养箱中进行培养。

4. 观察和统计：观察培养皿中微生物的生长情况，统计出微生物的数量。

5. 结果判定：根据标准规定的微生物限度标准，判断检测结果是否符合规定。

五、质量控制1. 实验员必须进行严格的无菌操作训练，并使用正确的个人防护用具。

2. 培养基的质量必须符合规定，避免培养基带有细菌污染。

3. 检查设备必须经过定期的检查和校准，保持正常的工作状态。

4. 标本的采集、处理、保存和运送必须符合规定，避免外界的污染和干扰。

六、结果报告根据检测结果和规定的限度标准，出具检测报告，标明产品的微生物限度是否符合规定，以及具体的检测结果数据。

七、总结微生物限度检查是产品质量检验的重要环节，严格按照标准操作规程进行操作，可以保证检测结果的准确性和可靠性。

实验员在操作过程中也需严格遵守规程，做好个人防护措施，确保实验室的安全和卫生。

纯化水微生物限度检查标准操作规程

纯化水微生物限度检查标准操作规程1目的规定纯化水微生物限度检查操作。

2适用范围本文件适用于纯化水微生物限度检查操作。

3职责微生物限度检查操作人员。

4微生物限度检查方法纯化水采用薄膜过滤法进行检查。

滤膜孔径应不大于0.45μm，直径一般为50mm。

5内容5.1设备洁净工作台、恒温培养箱（30~35℃）、恒温水浴锅、电热干燥箱（250~300℃）、高压蒸汽灭菌器（使用时要进行灭菌效果检查并应定期请有关部门检定）。

5.2仪器及器皿5.2.1薄膜过滤器、放大镜、显微镜。

5.2.2玻璃器皿：蓝盖试剂瓶（250ml）、培养皿（90mm）、吸管（l0ml分度0.l）、载玻片、盖玻片。

玻璃器皿用前应洗涤干净无残留抗菌物质。

吸管口上端距0.5cm处塞入约2cm的适宜疏松棉花，置吸管桶内或用牛皮纸包好。

玻璃器皿，均于高压蒸汽121℃灭菌30min，烘干备用。

5.3用具5.3.1大、小橡皮胶头（放于干净带盖的容器中，并应定期用75%乙醇溶液浸泡）。

纯化水微生物限度检查标准操作规程5.3.2无菌衣、帽、口罩、手套（洗净后配套，用牛皮纸包严）灭菌，备用。

也可用一次性无菌衣、帽、口罩、手套。

5.3.3酒精灯、酒精棉球、灭菌剪刀、灭菌镊子、试管架、无菌滤杯、无菌滤膜、打火机、记号笔、接种环、灭菌抹布等。

5.4消毒液5.4.10.1%苯扎溴铵溶液（供洗手、擦拭操作台面用）。

5.4.275%乙醇溶液5.4.33~5%来苏尔溶液5.5培养基R2A琼脂培养基5.5.1灭菌前后应对培养基的pH值进行校验。

5.5.2配制的培养基不应有沉淀，如有沉淀，应于溶化后趁热过滤灭菌后使用。

5.5.3培养基的分装量不得超过容器的2/3，以免灭菌时溢出。

包装时，塞子必须塞紧以免松动或脱落造成染菌。

5.5.4培养基配制后应在2h内灭菌，避免细菌繁殖。

5.5.5灭菌后的培养基在2~8℃处保存备用，放置时间不能过长，以免水分散失及染菌。

已熔化的培养基应一次用完，开启后不宜再用。

纯化水检验操作规程

纯化水检验操作规程一、目的纯化水是化学实验中常用的一种实验用水，为确保实验结果的准确性和可靠性，需对纯化水进行检验。

本操作规程旨在规范纯化水的检验操作，确保实验结果的准确性和可重复性。

二、操作准备1.准备清洁的试剂瓶、试剂皿和玻璃仪器，确保无杂质。

2.准备所需试剂：PH试纸、铜离子试剂、氧化性试剂等。

3.准备检测仪器：PH计、电导率计、紫外可见分光光度计等。

三、操作步骤1.PH值检测（1）将PH试纸修剪成适当大小，每个PH试纸的长度约为5cm左右。

（2）将PH试纸蘸取纯化水，注意不要用手直接接触试纸。

（3）将PH试纸低浸入纯化水中，保持10秒左右。

（4）观察试纸颜色变化，并与标准PH值比较，确定纯化水的PH值。

（5）记录检测结果，并进行数据分析。

2.电导率检测（1）将电导率计置于检测架上，并调整为合适高度。

（2）将电导率计的电极部分浸入纯化水中，保持10秒左右。

（3）等待电导率计显示稳定的数值，记录检测结果。

（4）将电导率计清洗干净，准备下一次检测。

3.紫外可见光谱检测（1）将纯化水样品放置在玻璃仪器中，确保无空气泡。

（2）将玻璃仪器置于紫外可见分光光度计中，调整合适位置。

（3）设置检测波长和扫描范围，并开始检测。

（4）等待检测结束，记录检测结果。

（5）将玻璃仪器清洗干净，准备下一次检测。

四、操作注意事项1.在进行纯化水检验操作前，要彻底清洗实验仪器，以避免任何杂质的干扰。

2.执行试验过程中，要注意操作规范、纯化水样品的保存和标识。

3.检测过程中要保持仪器的精确度和准确性，确保实验结果的可靠性。

4.实验人员要遵循安全操作程序，佩戴个人防护用品，禁止饮食等。

5.报告检验结果时，需完整准确记录每次检测的结果，以备后续数据分析。

五、操作结果分析1.PH值检测结果分析：根据实验需求，判断纯化水的酸碱性。

2.电导率检测结果分析：根据实验需求，判断纯化水中溶质的浓度。

3.紫外可见光谱检测结果分析：根据实验数据，分析溶质在纯化水中的分布和浓度。

纯化水检验操作规程

c)测定步骤
取两只25ml纳氏比色管放于试管架上，用100ml量筒量取本品100ml于100ml烧杯中，用20m量筒量取19ml水加入该烧杯，于电炉上加热使蒸发至20ml，放冷，倒入第一只比色管，用1ml移液管量取铅标准使用液1ml于第二只比色管中，用量筒量取19ml水再加入该管，用2ml移液管分别量取醋酸盐缓冲液（PH3.5）2ml加入两比色管中，用滴管加水至25ml刻度线，用2ml移液管分别量取硫代乙酰胺试液2ml加入两比色管中，摇匀，放置2分钟后，置白纸上观察两管颜色。
取上述溶液，照总有机碳分析仪标准操作规程操作，测定完后打印出图谱并注明页码和测定人。响应系数应介于85%～115%之间，蔗糖对照品溶液3次的TOC值的相对标准偏差（RSD）应不大于5.0%。
c)测定步骤：
用50ml量筒量取50ml本品置于50ml烧杯中，用2ml移液管量取碱性碘化汞钾试液2ml加入其中，放置15分钟，如显色，另取一50ml烧杯，加1.5ml氯化铵溶液，48ml无氨水（灭菌注射用水）与碱性碘化汞钾试液2ml制成对照液，颜色比较。
d)结果判定：
样品溶液的颜色比对照溶液的颜色浅（≤0.00003%），即为合格。
1.1.不挥发物
a)仪器及用具
100ml量筒、水浴锅、电热干燥箱、蒸发皿、干燥器、电子天平、坩埚钳
b)实验前准备：
蒸发皿使用前用蒸馏水清洗干净、放在105℃±2℃的烘箱中烘干2小时，放在干燥器内冷却至室温称重，再次烘干，冷却，再称量，直至恒重。每次烘干时间不少于1小时连续两次称量的重量差不超过0.3mg视为恒重，放在干燥器内备用。称量蒸发皿时要求精确到0.0001g。
1.目的
为QC检验人员提供检验依据。
2.适用范围
适用于纯化水的检验操作。

微生物限度检查法标准操作规程

微生物限度检查法标准操作规程一、目的：建立一个微生物限度检查标准操作规程，规范质检员的操作，保证实验的安全性、准确性。

二、范围：适用于微生物限度检查的产品。

三、责任：QC部质检员对本规程实施负责。

四、内容1.检验依据：《中国药典》2010年版二部。

2. 简述2.1.微生物限度检查法系检查非规定灭菌制剂及其原料、辅料受微生物污染程度的方法。

检查项目包括细菌数、霉菌数、酵母菌数及控制菌数检查。

2.2.微生物限度检查应在环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内进行。

检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染，防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。

单向流空气区域、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。

2.3.供试品检查时，如果使用了表面活性剂、中和剂或灭活剂，应证明其有效性及对微生物无毒性。

2.4.除另有规定外，本检查法中细菌及控制菌培养温度为30～35℃；霉菌、酵母菌培养温度为23～28℃2.5.检验结果以1g、1ml、10g、10ml或10cm2为单位报告，特殊品种可以最小包装单位报告。

3.设备、仪器3.1.设备：3.1.1.洁净实验室：微生物限度检查应有单独的洁净实验室，每个洁净实验室应有独立的净化空气系统。

结构和要求：洁净室应采光良好，避免潮湿、远离厕所及污染区。

操作间与缓冲间应有样品传递窗，出入操作间和缓冲间的门不应直对。

洁净实验室内应六面光滑平整，能耐受清洗消毒。

墙壁与地面、天花板连接处无缝隙，不留死角。

操作间不应安装下水道。

洁净实验室内的照明灯应嵌装在天花板内，室内光照应分布均匀，光照度不低于300LX。

●温度、湿度：洁净实验室内温度应控制在18～26℃，相对湿度最好在40％～60％。

●操作间：操作间应安装空气除菌过滤层流装置。

洁净度不应低于10000级，局部洁净度为100级（或放置同等级净化工作台）。

纯化水检验标准操作规程

1. 目的规范体外诊断试剂用纯化水理化检验与微生物限度检验操作。

2. 范围适用于体外诊断试剂用纯化水理化与微生物限度检验。

3. 职责3.1专职检验员负责本规程实施及出具检验报告。

3.2 质量监督员负责监督本规程的执行。

4.内容4.1 理化检验4.1.1性状采用感官评判，目测鼻闻，该物品应为无色的澄清液体；无臭，无味。

4.1.2酸碱度取待检纯化水10mL，加甲基红指示液2滴，目测不得显红色；另取10mL待检纯化水，加溴麝香草酚蓝（溴百里酚蓝）指示液5滴，目测不得显蓝色。

4.1.3易氧化物取待检纯化水100mL，加10%稀硫酸10mL，煮沸后，加（0.02moL/L）高锰酸钾滴定液0.10mL，再煮沸10分钟，粉红色不得完全消失。

4.1.4电导率选择电导精度达0.1μS/cm的仪器，在25℃下检测，电导率不超过0.1mS/m。

可以选用适当的保温装置，控制水温在25℃检测，也可以选择用有温度补偿功能的电导率仪，进行检测。

4.1.5试液的配制4.1.5.1甲基红指示液：取甲基红0.1g，加0.05mol/L NaOH溶液7.4mL使溶解，再加水稀释至200mL。

变色范围：PH4.2~6.3（红→黄）。

4.1.5.2溴麝香草酚蓝指示液：取溴麝香草酚蓝0.1g加入0.05mol/L NaOH溶液3.2mL溶解，再加水稀释至200mL。

变色范围：PH6.0~7.6（黄→ 蓝）4.1.5.3稀硫酸：10%硫酸，700mL水中缓慢加入55.46mL98%浓硫酸，并不断地搅拌，最后用水定容至1000mL。

4.2微生物限度检验4.2.1打开微生物限度室洁净空调系统通风20-30min。

4.2.2将待检纯化水水及检验要用相关器具包括培养基、无菌滤器，无菌培养皿等，准备好后经培养室传递窗传入微生物限度室，传递窗传物品前后各照15min紫外。

4.2.3 专职检验员进入微生物限度室换鞋进行换鞋脱实验服，进入一更进行手清洗，进入二更带上口罩、头套穿万级洁净工作服、工作鞋，手消毒后带无菌手套。

微生物限度检查法操作规程

微生物限度检查法操作规程1．范围本规程适用于微生物限度的检查。

2．设备、仪器及用具、试液、培养基2.1 无菌室：温度18～26℃，相对湿度45～60%，洁净度不应低于10000级。

2.2 其他设备：净化工作台（洁净度为100级）、生化培养箱（23～28℃）、恒温培养箱（30～35℃）、电热恒温水浴锅、高压蒸汽消毒器、电热恒温干燥箱（最高工作温度300℃）、冰箱。

2.3 托盘天平、显微镜。

2.4 玻璃器皿2.4.1 锥形瓶、吸管、试管、培养皿90mm、量筒、烧杯、研钵、载玻片、盖玻片。

2.4.2 洗涤：吸管、锥形瓶、培养皿、烧杯等用清洁液浸泡，用清水冲洗干净再用蒸馏水冲洗2～3遍，晾干。

使用过后如与细菌接触，应121℃湿热灭菌20分钟，倒出内容物，然后清洗、晾干。

2.5 酒精灯、灭菌剪刀、接种环、灭菌镊子、大小橡皮乳头（放于干净带盖的容器中，并定期用70～75%乙醇溶液浸泡）、记号笔。

2.6 无菌衣、帽、口罩（用牛皮纸包严）灭菌，备用。

2.7 试液2.7.1消毒液：0.1%新洁尔灭或络合碘、75%乙醇溶液、5%来苏溶液。

2.7.2 稀释剂： PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液取磷酸二氢钾3.56g，磷酸氢二钠7.23g、氯化钠4.30g、蛋白胨，加水1000ml，微温溶解，滤清，分装于锥形瓶或试管内，每瓶100ml或每管9ml，加塞，121℃灭菌20分钟备用。

2.7.3 靛基质试液（柯凡克试剂或欧-波氏试剂）、结晶紫染液、碘液、95%乙醇、溴麝香草酚蓝指示剂、酸性品红指示剂、沙黄染液、甲基红指示液、α-萘酚乙醇试液、40%氢氧化钾。

2.8 培养基2.8.1 选择：营养琼脂培养基（细菌计数用）；玫瑰红钠琼脂培养基（霉菌及酵母菌计数用）；胆盐乳糖培养基；MUG培养基、曙红亚甲蓝琼脂培养基（EMB）、麦康凯琼脂培养基、乳糖培养基、枸橼酸盐培养基、磷酸盐葡萄糖胨水培养基、蛋白胨水培养基、四硫磺酸钠亮绿培养基、胆盐硫乳琼脂（DHL）。

微生物限度操作规程

微生物限度操作规程1.目的建立微生物限度标准操作规程，确保微生物限度检测的准确性。

2.范围适用于本公司纯化水，注射用水，饮用水，原辅料中微生物限度的检查。

3.定义微生物限度检查法系指检查非规定灭菌制剂及其原料、辅料受微生物污染程度的方法。

检查项目包括细菌数、霉菌数及控制菌检查。

4.职责4.1.QC负责本规程的起草、修订、培训及执行；4.2.QA、QC组长质量管理部经理负责本规程的审核；4.3.质量总监负责批准本规程；4.4.QA负责本规程执行的监督。

5.引用标准《中华人民共和国药典》2020年版二部6.材料6.1.房屋、设备、实验用具6.1.1.房屋：微生物限度实验室。

6.1.2.设备100级洁净工作台，30～35℃培养箱，20～25℃培养箱，台式灭菌器，三联式不锈钢滤器。

6.1.3.实验用具：隔离服、洁净工作服、工作鞋、口罩、帽子、10ml刻度吸管、毛巾、吸耳球、记号笔、酒精灯、镊子、酒精棉、托盘、电子天平、药勺、镊子、量筒等。

6.2.试剂：pH7.0氯化钠–蛋白胨缓冲液（无菌稀释液）6.3.实验用培养基（灵敏度实验合格）6.3.1.营养琼脂平皿（Ф90mm），用于细菌计数。

6.3.2.玫瑰红钠平皿（Ф90mm），用于霉菌及酵母菌计数。

6.3.3.胰酪胨大豆琼脂培养基平皿（Ф90mm），用于沉降菌检测。

6.3.4.品红亚硫酸钠琼脂平皿（Ф90mm），用于饮用水、水源中总大肠菌群的选择分离和鉴别。

6.3.5.培养基制备好后置30～35℃恒温培养房中预培养24～48小时，若培养基确无菌落生长方可用于实验。

如预培养后暂不用，培养基保存于2～8℃最长不超过21天。

6.4.实验用消毒液：0.2%洗必泰消毒液；75%酒精；0.5％84消毒液。

7.流程图无8.程序8.1.抽、取样8.1.1.水样采集：采样前所用的容器应无菌，应在采样、实验的全过程中实行无菌操作，保证水质不受污染。

用水样采集袋（无菌）或的蓝盖采样瓶，每个取样点取样前应放水1分钟，一个水点至少取样 1000ml，取样后将瓶盖拧紧，进行下一步操作，防止微生物污染；8.1.2.纯化水取水样不小于10ml，注射水取水样不小于200 ml，饮用水取水样不小于10ml。

纯化水微生物限度检查方法

纯化水微生物限度检查方法1. 纯化水微生物限度检查方法纯化水是指经过特殊处理后去除了多种杂质和微生物的水，主要用于实验室、制药、电子工业等领域。

为确保纯化水的质量，需要进行微生物限度检查。

以下为纯化水微生物限度检查方法及其详细描述。

2. 样品采集要选择好样品采集点。

在采集前要将取样的操作员的手洗净，然后用70%的酒精或其他消毒剂在取样点上喷洒并擦拭，等待其干燥。

样品可以用无菌的容器，如无菌烧杯或无菌注射器采集。

3. 检查项目常规情况下，对于纯化水的微生物限度检查主要包括大肠杆菌、菌落总数和霉菌的检测。

4. 大肠杆菌检测大肠杆菌是一种重要的致病菌，其检测可以反映样品是否受到粪便污染。

根据GMP规定，1毫升纯化水中的大肠杆菌不应超过10个。

5. 菌落总数检测菌落总数是指在一定条件下，菌落形成的总数。

对纯化水进行菌落总数检测，可以评估其细菌含量及其污染情况。

普遍认为，1毫升纯化水中的细菌菌落总数不应超过100CFU （菌落形成单位）。

6. 霉菌检测霉菌是一种常见的微生物，常常伴随着水污染。

过多的霉菌会对人体健康造成危害。

对于纯化水，检测霉菌可以评估其存在程度和可能的污染源。

GMP规定，1毫升纯化水中的霉菌不应超过10CFU。

7. 检测方法目前，常用的检测方法有培养法、分子生物学方法和流式细胞仪法。

培养法是一种较为传统的方法，通常通过在培养基上进行菌落总数检测，可以获得较为准确的结果。

分子生物学方法则是一种新兴的技术，可以通过检测DNA、RNA或蛋白质，进行微生物的检测。

流式细胞仪则是一种高通量的技术，可以进行密集的细胞计数和分类。

8. 注意事项在进行微生物限度检查时，要特别注意以下几点。

所有的操作应当严格按照GMP要求进行，确保检测的结果准确可靠。

其次要加强检测设备的维护及保养，确保设备的准确性和稳定性。

最后需要注意的是，纯化水的质量与检测方法密切相关，应根据不同领域的需求，选择相应的检测方法和标准。

纯化水微生物限度培养基适用性检查流程

纯化水微生物限度培养基适用性检查流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor.I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!纯化水微生物限度培养基的适用性检查流程详解在制药、食品和饮料等行业，纯化水的质量控制是至关重要的，其中微生物限度检测是关键环节之一。

纯化水微生物限度标准操作规程

1.目的：建立一个纯化水微生物限度检测方法的标准操作规程。

2. 适用范围：适用于纯化水的微生物限度检测。

3. 责任者：微生物限度检测人员。

4. 操作规程：
本操作过程应在无菌环境下进行，操作前用紫外光灯照射30分钟以上进行灭菌。

将待测纯化水样品、培养基及其他所需用具放入无菌室中。

纯化水稀释：
取6支已灭菌的试管，分别加入9ml无菌水，并按10-1～10-6的顺序编号。

用移液枪吸取1ml纯化水样品，注入10-1倍稀释的试管中。

用移液枪吹吸三次，使纯化水样品与无菌水水充分混匀。

?
从10-1倍稀释的试管中吸取1ml稀释液，注入10-2倍稀释的试管中，重复第2步的混匀操作。

依次类推，直达完成最后一支试管的稀释。

涂布平板操作：
将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。

取100μl稀释液，滴加到培养基表面；
将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8～10s；
用涂布器将稀释液均匀地涂布在培养基表面。

涂布时可转动培养皿，使涂布均匀。

按上述方法依次将10-1～10-6的稀释液涂布于平板上，每个稀释度的样品涂布两个平板。

将涂布好的培养基置于36±℃培养箱中培养，连续培养3～5天。

培养3～5天后对所有培养基进行菌落计数。

水的微生物限度检查标准操作规程

1. 主题内容为了保证水的微生物限度检查法的正确操作，特制订本文件。

2. 适用范围适用于水的微生物限度检查法的操作。

3.责任本文件由QC负责起草，QC主管负责审核，质量部长负责批准。

QC人员负责本文件的执行。

4.内容4.1.简述微生物限度检查法系检查非规定灭菌制剂及其原、辅料受微生物污染程度的方法。

检查项目包括细菌数、霉菌数、酵母菌数及控制菌检查。

细菌、霉菌和酵母菌计数除另有规定外均采用平板菌落计数法，这是活菌计数的方法之一。

4.2. 设备要求4.2.1. 微生物限度检查应有单独的无菌室，每个无菌室应有独立的净化空气系统，应在洁净度100级的单向流空气区域内进行，其环境的洁净度为10000级。

检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染。

隔离系统按相关的要求进行验证，其内部环境的洁净度须符合无菌检查的要求。

4.2.2.阳性菌试验应另设单独的净化工作台，不得在供试品检验用的无菌室内或净化工作台上操作。

4.3. 取样4.3.1. 在各取水口用已灭菌好的封闭的250ml 空三角瓶取水，并将瓶子做上标记或贴上标签，标明日期和取样点名称。

4.3.2. 取样前洗手并消毒。

4.3.3. 将取样阀消毒。

4.3.4. 打开阀门，放水3~5分钟。

4.3.5. 已灭菌好的封闭的空三角瓶在取水前用75％的酒精棉球擦拭外壁。

4.3.6. 用待检测的水淋洗检验用取样瓶和瓶塞3次，每取样点取2瓶,共约1000ml.4.3.7. 微生物检验应在取样后的1h内，进行，否则将样品冷藏并在4h内进行检验。

4.3.8. 待检验的水在检验之前，应保持原包装状态，严禁开启。

包装已开启的样品不得作为供试品。

4.4. 试验准备4.4.1.将供试品及所有已灭菌的玻璃器皿经传递窗移至无菌室内。

编号后将全部外包装（牛皮纸）去掉。

4.4.2. 开启紫外杀菌灯后，操作人员用肥皂洗手，进入缓冲间，换工作鞋。

再用消毒液洗手或用乙醇棉球擦手，穿戴无菌衣、帽、口罩、手套。

纯化水微生物限度检测

1. 目的
本规程旨在为微生物限度检查提供一个标准化方法。

2. 适用范围
微生物限度实验室
3. 责任者
QC主管生测员
4. 安全注意事项
严格无菌操作，防止微生物污染。

5. 规程
5.1 取样
a．在车间、实验室所有用水点按序取样，标明日期和取样点位置，一个监测点取水3次，一次250mL，送检验室按中国药典2010年版二部标准进行全检。

b．取样前将直接接触样品的容器用75%酒精棉球进行擦拭，采用灭菌后瓶收集样品。

c．取样时，取样人洗手并消毒，取样前用纯化水淋洗检验用取样瓶和瓶塞3次。

灭菌瓶至少取200mL用于微生物检验用水，微生物检验应在取样后的1小时内进行，或将样品冷藏并在4小时内进行检验。

5.2 微生物限度检查
纯化水检验标准微生物限度检查采用平皿法和薄膜过滤法。

5.3 微生物培养
（1）除另有规定，本检查法中细菌培养温度为30-35℃，霉菌、酵母菌培养温度为23-28℃.
（2）一般营养琼脂培养基用于细菌计数，培养18-24h；玫瑰红钠琼脂培养基用于霉菌及酵母菌计数，培养3-5天。

6．结果判断
以1mL供试品的菌落数报告菌数。

供试品细菌数每1ml不得过100cfu；霉菌与酵母菌总数每1ml不得过100cfu。

阴性对照不得有菌落生长。

7. 附表及附录
附录1：纯化水微生物限度检测报告
8. 制定依据
参照《中华人民共和国药典》2010版第二部微生物限度检查及（附录XI J）微生物限度标准，和GB/T14233.2医用输液、输血、注射器具检验方法第二部分生物学试验方法。

附录一
纯化水微生物限度检测报告。