高效液相色谱串联质谱法学习交流ppt
合集下载
高相液相色谱质谱联用技术及实例.ppt
11
三、HPLC-MS联用的应用
◇在双酚A,壬基酚及表面活性剂分析中的应用 ◇在食品中兽药残留和毒素分析中的应用 ◇在食品及饮用水中农药残留检测中的应用 ◇天然产物分析或中草药的品质控制 ◇化妆品中违禁激素的测定 ◇保健食品中违禁药物的检测
12
13
7
化合物3: 色谱峰 3 在 26.8 min 时的 1 级质谱给出准分子离 子峰 m/z 433.2 ［M - H]-; 2 级质谱给出的主要碎片离子峰 m/z 301.0 可能是分子离子峰失去1 个阿拉伯糖基的槲皮素 苷元碎片的离子峰［( M - H) -132]－，符合广寄生苷的裂解 规律，并结合文献推断为槲皮素 －3 －O －阿拉糖苷，即 广寄生苷( 萹蓄苷)。
质谱负离子模式的总离子流图与 356 nm 波长下紫外色谱图基本吻合， 但总离子流图的基线噪声较大。
5
化合物1: 色谱峰 1 在 22.3 min 时的1 级质谱给出准分子离 子峰 m/z 463.2 ［M-H ]－; 2 级质谱给出的主要碎片离子峰 m/z 301.1， 可能是分子离子峰失去1 个半乳糖的槲皮素苷 元碎片的离子峰［( M-H) -162 ]－，且符合金丝桃苷的裂解 规律，并结合文献推断为槲皮素 -3 -O -半乳糖苷，即金丝 桃苷，且与对照品数据一致。
一、概述
色谱：化合物分离 质谱：纯物质结构分析
43
29 15
57
71 85 99 113 142
m/z
1ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
三、高效液相色谱-质谱联用 (HPLC-MS)
自1957年首次出现GC-MS联用以来， GC-MS 得到了迅速发展和广泛的应用，然而实际分析中 ，只有20%左右的样品可以通过GC-MS进行分析 ，绝大多数化合物由于具有极性大、低挥发度、 高分子量或不稳定性等特点，不能够采用这一方 法进行分析，但是可以通过HPLC-MS来完成。
三、HPLC-MS联用的应用
◇在双酚A,壬基酚及表面活性剂分析中的应用 ◇在食品中兽药残留和毒素分析中的应用 ◇在食品及饮用水中农药残留检测中的应用 ◇天然产物分析或中草药的品质控制 ◇化妆品中违禁激素的测定 ◇保健食品中违禁药物的检测
12
13
7
化合物3: 色谱峰 3 在 26.8 min 时的 1 级质谱给出准分子离 子峰 m/z 433.2 ［M - H]-; 2 级质谱给出的主要碎片离子峰 m/z 301.0 可能是分子离子峰失去1 个阿拉伯糖基的槲皮素 苷元碎片的离子峰［( M - H) -132]－，符合广寄生苷的裂解 规律，并结合文献推断为槲皮素 －3 －O －阿拉糖苷，即 广寄生苷( 萹蓄苷)。
质谱负离子模式的总离子流图与 356 nm 波长下紫外色谱图基本吻合， 但总离子流图的基线噪声较大。
5
化合物1: 色谱峰 1 在 22.3 min 时的1 级质谱给出准分子离 子峰 m/z 463.2 ［M-H ]－; 2 级质谱给出的主要碎片离子峰 m/z 301.1， 可能是分子离子峰失去1 个半乳糖的槲皮素苷 元碎片的离子峰［( M-H) -162 ]－，且符合金丝桃苷的裂解 规律，并结合文献推断为槲皮素 -3 -O -半乳糖苷，即金丝 桃苷，且与对照品数据一致。
一、概述
色谱：化合物分离 质谱：纯物质结构分析
43
29 15
57
71 85 99 113 142
m/z
1ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
三、高效液相色谱-质谱联用 (HPLC-MS)
自1957年首次出现GC-MS联用以来， GC-MS 得到了迅速发展和广泛的应用，然而实际分析中 ，只有20%左右的样品可以通过GC-MS进行分析 ，绝大多数化合物由于具有极性大、低挥发度、 高分子量或不稳定性等特点，不能够采用这一方 法进行分析，但是可以通过HPLC-MS来完成。
【完整】高效液相色谱仪课件资料PPT
1、 使用前仔细阅读色谱柱附带的说明书，注意适用范围，如pH值范围、流动相类型等； A、B、C、D四个储液器中其中一个为棕色瓶，用于存放水相流动相。 高效液相色谱仪的系统组成
由于HPL C具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用, 流出组分易收集等优点,因而被广泛应用到生物化学、食品分析、医 药研究、环境分析、无机分析等各种领域。
色谱图示例
硅胶层析后活性样品的液相分离图谱
操作过程中应注意的事项
• 流动相 1、 流动相应选用色谱纯试剂、高纯水或双蒸水，酸碱液 及缓冲液需经过滤后使用，过滤时注意区分水系膜和油系 膜的使用范围； 2、 水相流动相需经常更换（一般不超过2天），防止长 菌变质； 3、 使用双泵时，A、B、C、D四相中，若所用流动相中 有含盐流动相，则A、D（进液口位于混合器下方）放置 含盐流动相，B、C（进液口位于混合器上方）放置不含 盐流动相；A、B、C、D四个储液器中其中一个为棕色瓶， 用于存放水相流动相。
高效液相色谱法只要求样品能制成溶液, 不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种类繁多,因而可以分离热不稳定和非 挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。
2、 水相流动相需经常更换（一般不超过2天），防止长菌变质； 2、 用流动相或比流动相弱（若为反相柱，则极性比流动相大； 高效——塔板数可达5000/米。 色谱柱：
高效液相色谱仪的应用
• 高效液相色谱法只要求样品能制成溶液, 不受样品挥发性 的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种类繁多,因而可 以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各 种分子量范围的物质。
• 由于HPL C具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可 反复利用, 流出组分易收集等优点,因而被广泛应用到生物 化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种 领域。高效液相色谱仪与结构仪器的联用是一个重要的发 展方向。 液相色谱- 质谱连用技术受到普遍重视, 如分析氨基甲酸 酯农药和多核芳烃等; 液相色谱- 红外光谱连用也发展很快, 如在环境污染分析测定水中的烃类, 海水中的不挥发烃类, 使环境污染分析得到新的发展。
由于HPL C具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用, 流出组分易收集等优点,因而被广泛应用到生物化学、食品分析、医 药研究、环境分析、无机分析等各种领域。
色谱图示例
硅胶层析后活性样品的液相分离图谱
操作过程中应注意的事项
• 流动相 1、 流动相应选用色谱纯试剂、高纯水或双蒸水，酸碱液 及缓冲液需经过滤后使用，过滤时注意区分水系膜和油系 膜的使用范围； 2、 水相流动相需经常更换（一般不超过2天），防止长 菌变质； 3、 使用双泵时，A、B、C、D四相中，若所用流动相中 有含盐流动相，则A、D（进液口位于混合器下方）放置 含盐流动相，B、C（进液口位于混合器上方）放置不含 盐流动相；A、B、C、D四个储液器中其中一个为棕色瓶， 用于存放水相流动相。
高效液相色谱法只要求样品能制成溶液, 不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种类繁多,因而可以分离热不稳定和非 挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。
2、 水相流动相需经常更换（一般不超过2天），防止长菌变质； 2、 用流动相或比流动相弱（若为反相柱，则极性比流动相大； 高效——塔板数可达5000/米。 色谱柱：
高效液相色谱仪的应用
• 高效液相色谱法只要求样品能制成溶液, 不受样品挥发性 的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种类繁多,因而可 以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各 种分子量范围的物质。
• 由于HPL C具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可 反复利用, 流出组分易收集等优点,因而被广泛应用到生物 化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种 领域。高效液相色谱仪与结构仪器的联用是一个重要的发 展方向。 液相色谱- 质谱连用技术受到普遍重视, 如分析氨基甲酸 酯农药和多核芳烃等; 液相色谱- 红外光谱连用也发展很快, 如在环境污染分析测定水中的烃类, 海水中的不挥发烃类, 使环境污染分析得到新的发展。
液相色谱-质谱(LC-MS)联用的原理及应用PPT课件
液相色谱—质谱联用的 原理及应用
.
简介
色谱质谱的在线联用将色谱的分离能力与质谱 的定性功能结合起来，实现对复杂混合物更准 确的定量和定性分析。而且也简化了样品的前 处理过程，使样品分析更简便。
色谱质谱联用包括气相色谱质谱联用(GC-MS) 和液相色谱质谱联用(LC-MS)，液质联用与气 质联用互为补充，分析不同性质的化合物。
峰: 质谱图中的离子信号通常称为离子峰或简称峰. 离子丰度: 检测器检测到的离子信号强度. 基峰: 在质谱图中，指定质荷比范围内强度最大的
离子峰称作基峰. 总离子流图；质量色谱图；准分子离子；碎片离子；
多电荷离子；同位素离子
总离子流图:
在选定的质量范围内，所有离子强度的 总和对时间或扫描次数所作的图,也称 TIC图.
在ESI中, 往往生成质量大于分子量的离子 如M+1,M+23,M+39,M+18......称准分子离 子,表示为:[M+H]+,[M+Na]+等
碎片离子：
准分子离子经过一级或多级裂解生成的产 物离子.
碎片峰的数目及其丰度则与分子结构有关, 数目多表示该分子较容易断裂,丰度高的碎 片峰表示该离子较稳定,也表示分子比较容 易断裂生成该离子。
常用飞行时间作为质量分析器，所构成的仪器称为 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪（MALDITOF-MS）。API-MS的特点是可以和液相色谱、毛
细管电泳等分离手段联用，扩展了应用范围，包括
药物代谢、临床和法医学、环境分析、食品检验、 组合化学、有机化学的应用等；MALDI-TOF-MS的
特点是对盐和添加物的耐受能力高，且测样速度快， 操作简单。
随着生命科学的发展，欲分析的样品更加复杂， 分子量范围也更大，因此，电喷雾离子化质谱法 （ESI-MS）和基质辅助激光解吸离子化质谱法 （MALDI-MS）应运而生。
.
简介
色谱质谱的在线联用将色谱的分离能力与质谱 的定性功能结合起来，实现对复杂混合物更准 确的定量和定性分析。而且也简化了样品的前 处理过程，使样品分析更简便。
色谱质谱联用包括气相色谱质谱联用(GC-MS) 和液相色谱质谱联用(LC-MS)，液质联用与气 质联用互为补充，分析不同性质的化合物。
峰: 质谱图中的离子信号通常称为离子峰或简称峰. 离子丰度: 检测器检测到的离子信号强度. 基峰: 在质谱图中，指定质荷比范围内强度最大的
离子峰称作基峰. 总离子流图；质量色谱图；准分子离子；碎片离子；
多电荷离子；同位素离子
总离子流图:
在选定的质量范围内，所有离子强度的 总和对时间或扫描次数所作的图,也称 TIC图.
在ESI中, 往往生成质量大于分子量的离子 如M+1,M+23,M+39,M+18......称准分子离 子,表示为:[M+H]+,[M+Na]+等
碎片离子：
准分子离子经过一级或多级裂解生成的产 物离子.
碎片峰的数目及其丰度则与分子结构有关, 数目多表示该分子较容易断裂,丰度高的碎 片峰表示该离子较稳定,也表示分子比较容 易断裂生成该离子。
常用飞行时间作为质量分析器，所构成的仪器称为 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪（MALDITOF-MS）。API-MS的特点是可以和液相色谱、毛
细管电泳等分离手段联用，扩展了应用范围，包括
药物代谢、临床和法医学、环境分析、食品检验、 组合化学、有机化学的应用等；MALDI-TOF-MS的
特点是对盐和添加物的耐受能力高，且测样速度快， 操作简单。
随着生命科学的发展，欲分析的样品更加复杂， 分子量范围也更大，因此，电喷雾离子化质谱法 （ESI-MS）和基质辅助激光解吸离子化质谱法 （MALDI-MS）应运而生。
液相色谱-质谱联用PPT课件
No Image
34
No Image
35
No
36
开机步骤
1. 分别打开质谱、液相色谱和计算机电源 ，此时质谱主机内置的CPU会通过网线与计算 机主机建立通讯联系，这个时间大约需要1至2 分钟。
1.
双击桌面上的 MassLynx 4.0图标进入质谱软
No Image
件。
注：如果进入Masslynx软件时出现提示：“The embedded system is not responding, The
Tune）进入质谱调谐窗口
。No
Image
2. 选择菜单“Options – Pump”，这时机械泵将开始工作
，同时分子涡轮泵会开始抽真空。几分钟后，ZQ就会达到真
空要求，ZQ前面板右上角的状态灯“Vacuum”将变绿。
39
No Image
40
1. 2. 确认氮气气源输出已经打开，气体输出压力为90 psi。 设置源温度 （Source Temp）到目标温度。
点击真空状态图标 ，检查真空规的状态 ，以确
认真空达到要求。ImNaoge
No Image
41
质谱调谐窗口各项参数设定
电喷雾电离源（ESI）
在质谱调谐窗口选定要使用的离子模式。
点击进入下面Source界面，设定Source界面里的各项参数。
42
No Image
43
Capillary(KV) 加在ESI源内毛细管上的高压，正离子模式一般 是在2.5-3.75KV 之间优化，负离子模式一般是在 2.0-3.0KV之间优化。在负离子模式时，如果毛细
管电压设置过高容易引起放电现象。
Cone(V)
样品锥孔电压，一般在10-100V之间优化，通常来说， 分子量小的样品选择的锥孔电压要相对小，当提高 锥孔电压时，可能得到的碎片信息会多一些。
高效液相色谱法教学精【全】ppt课件
§1-3 色谱柱的分离效率
一、塔板理论 塔板理论认为: 一根柱子可以分为n
段，每段内组分在两相间迅速达到平衡， 把每一段称为一块理论塔板。
设柱长为L，理论塔板高度为H，则
H=L/Ｎ
Ｎ为理论塔板数。
理论塔板数一N
①色谱峰对称 ： N 16(tR )2
说明：
tW
a. 在给定的操作条件下，N几乎相同
三、高效液相色谱法的特点
高压: 以液体作为流动相，液体流经色谱柱时，
受到阻力较大 必须对流动相施加高压。 一般可达到150～300kg／cm2， 甚至可达700kg／cm2以上。
高速:
分析时间较经典液相色谱少得多（交 换速度快），一个复杂样品的分析仅需几 分钟到几十分钟。
高效:
气相色谱的分离效能很高，高效液相 色谱的柱效则更高（化学键合相），一般 约可达 6000理论塔板／米
②一定色谱条件下，对k’有差异的组
分，则柱效愈高，分离效果愈好。
塔板理论的特点和不足：
(1)当L一定时，N 越大(H 越小)，被测组
分在柱内被分配的次数越多，柱效越 高，所得色谱峰越窄。 (2)柱效不能表示被分离组分的实际分离
效果：如两组分的分配系数K 相同，
无论该色谱柱的柱效多大，都无法 分离。
① 柱效较高，ΔK(分配系数)较大，完全分离。 ② ΔK 不是很大，柱效较高，峰较窄，基本分离。 ③ 柱效较低，ΔK 较大，但分离的不好。 ④ ΔK 小，柱效低，分离效果更差。
一．分离度的数学表达式：
Rs
2(tR 2 tR1 ) W2 W1
2(tR 2 tR1 )
1.699 [Y1/ 2(2) Y1/ 2(1) ]
于世林编著)
第一章 高效液相色谱法基本原理 §1－1 概述 一、色谱法
高效液相色谱培训PPT课件
H20 with 0.1% TFA
50% ACN with 0.1% TFA
210.00
220.00
230.00
240.00
250.00 nm
260.00
270.00
280.00
290.00
h
37
溶剂混合的基线噪音
色谱条件
色谱柱： C18, 5 µm, 3.9x150mm at 35º
C.
流动相： A: 0.1% TFA in Water. B: 0.1% TFA in Acetonitrile.
➢ 特点：分离效率高、分析速度快、应用范围广、操作自动 化。
h
3
流动相 脱气装置
四元 泵
一些商品化仪器
h
检测器 柱温箱 样品盘
控温箱
4
启动液相色谱仪器的流程
开启HPLC系统各个设备的电源
打开泵、自动进样器、检测器电
源， 待设备通过自检后，打开计算
机启动 色谱管理软件
准备流动相
过滤，脱气
色谱泵排气
脱气：除去流动相中溶解或因混合而产生的气泡 气泡对测定的影响： 1）泵中气泡使液流波动，改变保留时间和峰面积 2）柱中气泡使流动相绕流，峰变形 3）检测器中的气泡产生基线波动
h
14
h
15
h
16
流动相的保存
有机溶剂流动相：
室温下密封，避光保存
缓冲盐流动相：
当日现配现用： 低温下密封保存，一般不超过3天 防止微生物生长
h
39
基线噪音对积分的影响
Caffeine @ 271 nm
1.183
1.183
1.224
h
40
维护流程图
50% ACN with 0.1% TFA
210.00
220.00
230.00
240.00
250.00 nm
260.00
270.00
280.00
290.00
h
37
溶剂混合的基线噪音
色谱条件
色谱柱： C18, 5 µm, 3.9x150mm at 35º
C.
流动相： A: 0.1% TFA in Water. B: 0.1% TFA in Acetonitrile.
➢ 特点：分离效率高、分析速度快、应用范围广、操作自动 化。
h
3
流动相 脱气装置
四元 泵
一些商品化仪器
h
检测器 柱温箱 样品盘
控温箱
4
启动液相色谱仪器的流程
开启HPLC系统各个设备的电源
打开泵、自动进样器、检测器电
源， 待设备通过自检后，打开计算
机启动 色谱管理软件
准备流动相
过滤，脱气
色谱泵排气
脱气：除去流动相中溶解或因混合而产生的气泡 气泡对测定的影响： 1）泵中气泡使液流波动，改变保留时间和峰面积 2）柱中气泡使流动相绕流，峰变形 3）检测器中的气泡产生基线波动
h
14
h
15
h
16
流动相的保存
有机溶剂流动相：
室温下密封，避光保存
缓冲盐流动相：
当日现配现用： 低温下密封保存，一般不超过3天 防止微生物生长
h
39
基线噪音对积分的影响
Caffeine @ 271 nm
1.183
1.183
1.224
h
40
维护流程图
高效液相色谱串联质谱测定水中邻苯二甲酸酯PPT课件
• 2、仪器设备
Agilent 1200液相色谱仪，配二极管阵列检测器；API 3000串联三级四级杆质谱仪， 配有Turbo-Ionspray源、针泵以及Analyst 1.4数据处理系统，气源为高纯N2；氮吹仪等。
实 验 中 使 用 的 所 有 玻 璃 器 具 ， 由 于 实 验 室 内 空 气 中 PA E s 的 污 染 ， 使 用 时 必 须 洗 净 。 可将器具在洗液中浸泡数小时，自来水洗净，再分别用蒸馏水、丙酮淋洗后在烘箱中以 100 ℃烘烤2 h，以降低空白值。为降低PAEs的污染，实验过程中应避免使用塑料制品。
第3页/共19页
• 4、色谱及质谱条件
液相色谱条件:色谱柱为Waters 4.6 mm×150 mm×5 μm OSD2；流动相为甲醇-水， 含0.1%的甲酸；柱温为40 ℃；流速为200 μL/min；进样体积为5 μL。质谱条件:离子源 为ESI(+)，检测方式为多反应监测(multiple reactionmonitor，MRM)方式，利用保留时 间和碎片信号比值判断定性结果。质谱条件具体如下: IS电压: 4500 V；离子源温度: 450 :雾化气压力: 6.0 ps；i气帘气压力: 8.00 ps；i CAD=11.00 L/min；Gas1=6 L/min； Gas2=7 L/min；MRM参数见表1。
第4页/共19页
第5页/共19页
• 5、实验方法
5.1标准曲线的绘制
临用时将中间液用甲醇分别稀释成浓度为10. 0、20. 0、40. 0、80. 0、100 μg/L的 混合标准系列溶液，进样量5 μL测定，以各PAEs浓度为横坐标，相应离子对色谱峰面 积为纵坐标，绘制标准曲线。
第6页/共19页
第11页/共19页
Agilent 1200液相色谱仪，配二极管阵列检测器；API 3000串联三级四级杆质谱仪， 配有Turbo-Ionspray源、针泵以及Analyst 1.4数据处理系统，气源为高纯N2；氮吹仪等。
实 验 中 使 用 的 所 有 玻 璃 器 具 ， 由 于 实 验 室 内 空 气 中 PA E s 的 污 染 ， 使 用 时 必 须 洗 净 。 可将器具在洗液中浸泡数小时，自来水洗净，再分别用蒸馏水、丙酮淋洗后在烘箱中以 100 ℃烘烤2 h，以降低空白值。为降低PAEs的污染，实验过程中应避免使用塑料制品。
第3页/共19页
• 4、色谱及质谱条件
液相色谱条件:色谱柱为Waters 4.6 mm×150 mm×5 μm OSD2；流动相为甲醇-水， 含0.1%的甲酸；柱温为40 ℃；流速为200 μL/min；进样体积为5 μL。质谱条件:离子源 为ESI(+)，检测方式为多反应监测(multiple reactionmonitor，MRM)方式，利用保留时 间和碎片信号比值判断定性结果。质谱条件具体如下: IS电压: 4500 V；离子源温度: 450 :雾化气压力: 6.0 ps；i气帘气压力: 8.00 ps；i CAD=11.00 L/min；Gas1=6 L/min； Gas2=7 L/min；MRM参数见表1。
第4页/共19页
第5页/共19页
• 5、实验方法
5.1标准曲线的绘制
临用时将中间液用甲醇分别稀释成浓度为10. 0、20. 0、40. 0、80. 0、100 μg/L的 混合标准系列溶液，进样量5 μL测定，以各PAEs浓度为横坐标，相应离子对色谱峰面 积为纵坐标，绘制标准曲线。
第6页/共19页
第11页/共19页
液相色谱质谱联用 ppt课件
负离子检测 -[M-H]- 碱性条件 -[M+X]- X=溶剂或缓冲溶液中 的阴离子 -[M-H+S]- 溶剂加合离子
名义分子量和平均分子量
对于分子C6H3Cl3 平均分子量为 6(12.01115)+3(1.000797)+3(35.453) MW=181.428
6(12.000)+3(1.00078)+3(34.9989)=179.9990 精确质量/单同位素质量
小结：流动相的考虑
金属离子缓冲盐影响离子化 表面活性剂影响去溶剂化 离子对试剂可以离子化，而导致高背景噪音 强离子对试剂可与待测物反应，导致待测物不
能离子化 TEA 干扰正离子模式(m/z102) TFA 扰负离子模式(m/z113) 增塑剂（邻苯二甲酸酯）背景干扰，
(m/z149,315, 391)
1 电离模式的选择 2 查阅文献，参考样品前处理的技术路线和色谱分离条件 、质谱参数条件等。 3 MRM 参数优化 使用标准品优化 fragmentor 和 collision energy 4 离子源参数的优化（源温度、流速） 5 LC分离方法的优化，1-3 min为理想
MRM 参数优化
扫描（MS2 Scan）
液相色谱质谱联用
Agilent LC-MS/MS 6420
精品资料
• 你怎么称呼老师？
• 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点，你 是否会认为老师的教学方法需要改进？
• 你所经历的课堂，是讲座式还是讨论式？ • 教师的教鞭
• “不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我 笨，没有学问无颜见爹娘 ……”
速和温度 选择母离子：准分子离子，[M+H]+、[M-
H]-优先，避免选择加和离子[M+Na]+,所 需能量较低，灵敏度好。 子离子的选择：高质量端的特征离子。
色谱质谱联用 高效液相色谱法83页PPT
色谱质谱联用 高效液相色谱 法
41、实际上，我们想要的不是针对犯 罪的法 律，而 是针对 疯狂的 法律。 ——马 克·吐温 42、法律的力量应当跟随着公民，就 像影子 跟随着 身体一 样。— —贝卡 利亚 43、法律和制度必须跟上人类思想进 步。— —杰弗 逊 44、人类受制于法律，律受制于情 理。— —托·富 勒
71、既然我已经踏上这条道路，那么，任何东西都不应妨碍我沿着这条路走下去。——康德 72、家庭成为快乐的种子在外也不致成为障碍物但在旅行之际却是夜间的伴侣。——西塞罗 73、坚持意志伟大的事业需要始终不渝的精神。——伏尔泰 74、路漫漫其修道远，吾将上下而求索。——屈原 75、内外相应，言行相称。——韩非
45、法律的制定是为了保证每一个人 自由发 挥自己 的才能 ，而不 是为了 束缚他 的才能 。—— 罗伯斯 庇尔
谢谢你的阅读
❖ 知识就是财富 ❖ 丰富你的人生
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
18932.22-2003 8、牛奶和奶粉中玉米赤霉醇、玉米赤霉酮、己烯雌酚、己烷雌酚、双烯雌酚残留量的测定 液相色谱-串
联质谱法 （质控-3个混标）------ GB/T 22992-2008 9、婴幼儿配方粉及婴幼儿补充谷粉通用技术条件（含第1号、第2号和第3号修改单，已作废） GB 10767-1997 （维生素D测定 D2、D3） 10、动物源性食品中11种激素残留检测 液相色谱-串联质谱法----------农业部1031号公告-1-2008 11、粮谷中486种农药及相关化学品残留量的测定 液相色谱-串联质谱法（凝胶色谱渗透仪净化）--GB/T 20770-2008 12、动物源性食品中14种喹诺酮药物残留检测方法 液相色谱-质谱/质谱法---------GB/T 21312-2007 13、食品安全地方标准 火锅食品中罂粟碱、吗啡、那可丁、可待因和蒂巴因的测定 液相色谱-串联质谱 法（地方标准） DB31/ 2010-2012
1、四级杆分析器由四根棒状电极组成。相对两根电 极间加有电压（Vdc+Vrf）,另外两根电极间加有 -（Vdc+Vrf）,其中Vdc为直流电压，Vrf为射频电压。 四个棒状电极形成一个四级电场，下图为分析器示 意图。
（Vdc+Vrf）
-（Vdc+Vrf）
2、离子从离子源 经过离子光学系统聚焦 后进入四极电场，在四 极电场的作用下做简谐 振荡，如果质量为m， 电荷为e的离子从z方向 进入四极场。
第四部分：仪器操作
此次培训学习中我主要学习操作的仪器是 液相色谱-串联质谱，下面对其进行简单的介 绍
质谱仪器
质谱组质量分析器
检测接收器
真空系统
液相色谱串联质谱原理简介
三重四极杆基本功能 ● Q1 可以筛选母离子Mz1 ● Q2 通过碰撞碎裂打碎离子，形成碎片离子峰 ● Q3 筛选子离子，定量子离子碎片强度Mz2
Q1和Q3均为选择性离子监测模式
串联质谱QQQ几种操作方式：
1.子离子扫描 2.母离子扫描 3.中性丢失扫描 4.多重反应监测
SUCCESS
THANK YOU
2020/1/10
1.子离子扫描
Q1选择某一特定质量的母离子，Q2碰撞池碰撞 产生碎片离子。Q3只分析一个碎片离子。此过程产 生一个简单的单个离子碎片谱图
Q1
Q2碰撞池
在仪器实验室的两个月时间里主要学习了高效 液相色谱-串联质谱法和高效液相色谱法，简单的学 习了原子吸收和原子荧光法的基本原理和检测内容。
在学习液-质联用仪的过程中主要学习了样品前 处理、标准样液的配制（扩项）、流动相的配制和 仪器原理-仪器操作的学习。总计5大类，12个检测 项目，13个常用标准
1、实验检测项目有
Q3
Q1只允许目标离 子210通过
Q3只检测来自母离子 210的碎片158，进行 定性定量分析
2.中性丢失扫描
在QQQ中进行中性丢失扫描，Q1和Q3分析器的结合使灵敏
度 和选择性得到最大化。Q1/Q3中性丢失扫描可监测母离子
特定的中性丢失，例如缩氨酸磷酸盐中一个磷酸根的丢失。
在这个例子中，Q1和Q3的扫描得到母离子的谱图，这张谱图
是母离子为了磷酸化，丢失了碎片98而得到的
Q1
碰撞池
Q3
扫描
中性丢失扫描
3.多重反应检测
Q1选择某一质量的母离子，碰撞单元产生碎片离子。Q3 用于搜寻多个选择反应监测，这就是多重反应监测（MRM）。
Q1 选择m/z
碰撞池
Q3
子离子扫描
只允许目 标里子210 和350通过
Q3仅监测来自离子 210的特征碎片191和 来自离子350的特征 碎片226，进行定性 定量分析
1.豆芽中的赤霉素，六-苄基腺嘌呤（液相）；2.豆 芽中的四氯苯氧乙酸钠（液相）；3.动物源性食品 中的激素、瘦肉精（沙丁胺醇、莱克多巴胺、盐酸 克伦特罗）-（液质）； 4.乳制品的维生素B6（液 相）、维生素D（液相）、三聚氰胺（液质） 5.蜂 蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖，粮谷中农药和 保健食品中脱氢表雄甾(zai)酮(DHEA)
其中最多的是：1.豆芽中的赤霉素，六-苄基腺 嘌呤；2.肉食品中的瘦肉精；3.乳品中的三聚氰胺
2、主要检验的方法为高效液相色谱法和液相串联质 谱法
仪器实验室具体实验内容有：
1、出口水果中赤霉素残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 ----------SN/T 0350-2012 2、无公害豆芽 第3部分：6-苄基腺嘌呤残留量和4-氯苯氧乙酸钠残留量的测定 --------DB33/T 625.32007 3、动物源性食品中多种β-受体激动剂残留量的测定 液相色谱串联质谱法（瘦肉精）--------GB/T 22286-2008 4、原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法 -------GB/T 22388-2008（婴幼儿乳粉） 5、婴幼儿食品和乳品中维生素B6的测定--------GB 5413.13-2010 6、保健食品中脱氢表雄甾(zai)酮(DHEA)测定-------GB/T 5009.193-2003 7、蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖含量的测定方法 液相色谱示差折光检测法------GB/T
高效液相色谱-串联质谱法 学习交流
学习提纲
第一部分：仪器实验室（3.18-5.15）★ ★ ★ 第二部分：微生物实验室（5.18-5.29） 第三部分：理化实验室（6.1-6.12） 第四部分：仪器操作★ ★ ★ 第五部分：资料收集★ ★ 第六部分：学习总结、心得体会
第一部分：仪器实验室（3.18-5.15）
★ ★ ★在本次仪器实验室学习的过程中，参 与了质检院的何冲老师的一个CNAS认证，加有三个 混标盲样（牛奶和奶粉中玉米赤霉醇、玉米赤霉酮、 己烯雌酚残留量的测定 GB/T 22992-2008 ）的质控 实验。实验过程中从实验原理、样品量取、样品前 处理、净化的每一个过程中都做到认真、细心的学 习和参与，保证实验中氮吹、固相萃取柱的活化、 淋洗、洗脱以及流动相的配制等每个环节都顺利进 行，圆满的完成了质控、比对实验，提高了我对标 准的认识，注重实验过程中细节操作的重要性。
联质谱法 （质控-3个混标）------ GB/T 22992-2008 9、婴幼儿配方粉及婴幼儿补充谷粉通用技术条件（含第1号、第2号和第3号修改单，已作废） GB 10767-1997 （维生素D测定 D2、D3） 10、动物源性食品中11种激素残留检测 液相色谱-串联质谱法----------农业部1031号公告-1-2008 11、粮谷中486种农药及相关化学品残留量的测定 液相色谱-串联质谱法（凝胶色谱渗透仪净化）--GB/T 20770-2008 12、动物源性食品中14种喹诺酮药物残留检测方法 液相色谱-质谱/质谱法---------GB/T 21312-2007 13、食品安全地方标准 火锅食品中罂粟碱、吗啡、那可丁、可待因和蒂巴因的测定 液相色谱-串联质谱 法（地方标准） DB31/ 2010-2012
1、四级杆分析器由四根棒状电极组成。相对两根电 极间加有电压（Vdc+Vrf）,另外两根电极间加有 -（Vdc+Vrf）,其中Vdc为直流电压，Vrf为射频电压。 四个棒状电极形成一个四级电场，下图为分析器示 意图。
（Vdc+Vrf）
-（Vdc+Vrf）
2、离子从离子源 经过离子光学系统聚焦 后进入四极电场，在四 极电场的作用下做简谐 振荡，如果质量为m， 电荷为e的离子从z方向 进入四极场。
第四部分：仪器操作
此次培训学习中我主要学习操作的仪器是 液相色谱-串联质谱，下面对其进行简单的介 绍
质谱仪器
质谱组质量分析器
检测接收器
真空系统
液相色谱串联质谱原理简介
三重四极杆基本功能 ● Q1 可以筛选母离子Mz1 ● Q2 通过碰撞碎裂打碎离子，形成碎片离子峰 ● Q3 筛选子离子，定量子离子碎片强度Mz2
Q1和Q3均为选择性离子监测模式
串联质谱QQQ几种操作方式：
1.子离子扫描 2.母离子扫描 3.中性丢失扫描 4.多重反应监测
SUCCESS
THANK YOU
2020/1/10
1.子离子扫描
Q1选择某一特定质量的母离子，Q2碰撞池碰撞 产生碎片离子。Q3只分析一个碎片离子。此过程产 生一个简单的单个离子碎片谱图
Q1
Q2碰撞池
在仪器实验室的两个月时间里主要学习了高效 液相色谱-串联质谱法和高效液相色谱法，简单的学 习了原子吸收和原子荧光法的基本原理和检测内容。
在学习液-质联用仪的过程中主要学习了样品前 处理、标准样液的配制（扩项）、流动相的配制和 仪器原理-仪器操作的学习。总计5大类，12个检测 项目，13个常用标准
1、实验检测项目有
Q3
Q1只允许目标离 子210通过
Q3只检测来自母离子 210的碎片158，进行 定性定量分析
2.中性丢失扫描
在QQQ中进行中性丢失扫描，Q1和Q3分析器的结合使灵敏
度 和选择性得到最大化。Q1/Q3中性丢失扫描可监测母离子
特定的中性丢失，例如缩氨酸磷酸盐中一个磷酸根的丢失。
在这个例子中，Q1和Q3的扫描得到母离子的谱图，这张谱图
是母离子为了磷酸化，丢失了碎片98而得到的
Q1
碰撞池
Q3
扫描
中性丢失扫描
3.多重反应检测
Q1选择某一质量的母离子，碰撞单元产生碎片离子。Q3 用于搜寻多个选择反应监测，这就是多重反应监测（MRM）。
Q1 选择m/z
碰撞池
Q3
子离子扫描
只允许目 标里子210 和350通过
Q3仅监测来自离子 210的特征碎片191和 来自离子350的特征 碎片226，进行定性 定量分析
1.豆芽中的赤霉素，六-苄基腺嘌呤（液相）；2.豆 芽中的四氯苯氧乙酸钠（液相）；3.动物源性食品 中的激素、瘦肉精（沙丁胺醇、莱克多巴胺、盐酸 克伦特罗）-（液质）； 4.乳制品的维生素B6（液 相）、维生素D（液相）、三聚氰胺（液质） 5.蜂 蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖，粮谷中农药和 保健食品中脱氢表雄甾(zai)酮(DHEA)
其中最多的是：1.豆芽中的赤霉素，六-苄基腺 嘌呤；2.肉食品中的瘦肉精；3.乳品中的三聚氰胺
2、主要检验的方法为高效液相色谱法和液相串联质 谱法
仪器实验室具体实验内容有：
1、出口水果中赤霉素残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 ----------SN/T 0350-2012 2、无公害豆芽 第3部分：6-苄基腺嘌呤残留量和4-氯苯氧乙酸钠残留量的测定 --------DB33/T 625.32007 3、动物源性食品中多种β-受体激动剂残留量的测定 液相色谱串联质谱法（瘦肉精）--------GB/T 22286-2008 4、原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法 -------GB/T 22388-2008（婴幼儿乳粉） 5、婴幼儿食品和乳品中维生素B6的测定--------GB 5413.13-2010 6、保健食品中脱氢表雄甾(zai)酮(DHEA)测定-------GB/T 5009.193-2003 7、蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖含量的测定方法 液相色谱示差折光检测法------GB/T
高效液相色谱-串联质谱法 学习交流
学习提纲
第一部分：仪器实验室（3.18-5.15）★ ★ ★ 第二部分：微生物实验室（5.18-5.29） 第三部分：理化实验室（6.1-6.12） 第四部分：仪器操作★ ★ ★ 第五部分：资料收集★ ★ 第六部分：学习总结、心得体会
第一部分：仪器实验室（3.18-5.15）
★ ★ ★在本次仪器实验室学习的过程中，参 与了质检院的何冲老师的一个CNAS认证，加有三个 混标盲样（牛奶和奶粉中玉米赤霉醇、玉米赤霉酮、 己烯雌酚残留量的测定 GB/T 22992-2008 ）的质控 实验。实验过程中从实验原理、样品量取、样品前 处理、净化的每一个过程中都做到认真、细心的学 习和参与，保证实验中氮吹、固相萃取柱的活化、 淋洗、洗脱以及流动相的配制等每个环节都顺利进 行，圆满的完成了质控、比对实验，提高了我对标 准的认识，注重实验过程中细节操作的重要性。