英文摘要论文翻译——革兰氏染色原理
简述革兰氏染色机理
简述革兰氏染色机理
革兰氏染色是一种常用的细菌染色方法,通过这种方法可以将细菌分为两大类:革兰氏阳性(G+)和革兰氏阴性(G-)。
以下是革兰氏染色的机理:
1、脱色:革兰氏染色过程中的关键步骤之一是脱色。
在经过结晶紫初染和碘液媒染后,G+菌和G-菌都呈现深紫色。
此时,通过在酒精或其他脱色剂中短暂停留,可以将G-菌的细胞壁中的脂质成分溶解,使得脱色剂更容易进入细胞内部,将其染成无色或浅色。
而G+菌由于其细胞壁结构较为坚韧,不易被脱色剂渗透,因此保持深色。
2、复染:在脱色后,通过施加沙黄或其他染料进行复染,使所有细菌都被染上颜色。
由于G-菌已被脱色至无色或浅色,因此沙黄会使其呈现红色。
而G+菌由于未被脱色或仅被部分脱色,呈现深紫色或蓝黑色。
3、结果观察:通过显微镜观察染色后的细菌,可以看到G+菌呈蓝紫色,而G-菌呈红色。
这一差异是由于革兰氏染色过程中对细胞壁脂质成分的处理和脱色剂的渗透能力不同所致。
革兰氏染色的机理主要基于细菌细胞壁的差异,特别是脂质含量的差异。
G+菌的细胞壁富含肽聚糖,不易被脱色剂渗透,而G-菌的细胞壁中含有较多的脂质,使得脱色剂能够更好地进入细胞内部。
此外,革兰氏染色还涉及到结晶紫和碘液等染料的结合和吸附性质的不同,进一步增强了G+菌和G-菌在染色过程中的颜色差异。
总之,革兰氏染色的机理主要基于细菌细胞壁的结构和化学成分差异,通过脱色和复染等步骤,将细菌分为G+和G-两大类,为后续的细菌鉴定和分类提供重要依据。
革兰氏染色的原理
革兰氏染色的原理
革兰氏染色是一种常用的细菌染色技术,它是由丹麦微生物学家克里斯汀·革兰(Hans Christian Gram)于1884年发明的。
革兰氏染色的原理是利用细菌细胞壁的特性来区分细菌。
细菌细胞壁的主要成分是胞壁多糖层,根据胞壁多糖层的不同结构,细菌分为革兰阳性菌和革兰阴性菌。
革兰阳性菌的细菌细胞壁由较厚的胞壁多糖层和较薄的细胞膜组成,胞壁多糖层含有大量的 peptidoglycan(肽多糖),可以保留紫色的结晶紫染色剂。
在染色过程中,首先用结晶紫染色液将细菌细胞染紫。
然后用碘液作为固定剂,固定结晶紫染料和细菌细胞中的 peptidoglycan 形成复合物。
接着用乙醇或酒
精洗涤细胞,这一步称为去蓝。
由于革兰阳性菌的细胞壁的胞壁多糖层较厚,染色剂较难被去除,因此革兰阳性菌在去蓝后仍保持紫色。
最后用粉碱溶液上色,将革兰阳性菌染成蓝色。
革兰阴性菌的细菌细胞壁较薄,胞壁多糖层较少,不能固定结晶紫染料和 peptidoglycan 的复合物。
因此,染色剂容易被去除。
在去蓝步骤中,革兰阴性菌的染色剂会被洗掉,细菌细胞则处于无色状态。
最后用粉碱溶液上色,将革兰阴性菌染成红色。
通过革兰氏染色,可以在显微镜下直观地区分出细菌的革兰性质,帮助微生物学家进行细菌分类和鉴定。
革兰氏染色的原理流程及颜色反应
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革兰氏染色法的原理
革兰氏染色法的原理革兰氏染色法是一种最常用的细菌染色方法之一,它是由丹麦细菌学家克里斯汀·格拉姆(Christian Gram)于1884年发明的。
这种染色方法可以将细菌分为两类,革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
革兰氏染色法的原理是利用细菌细胞壁的化学成分差异,通过染色剂的作用,使得革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在显微镜下呈现不同的颜色。
在进行革兰氏染色法时,首先需要将待检测的细菌样本涂抹在玻片上,然后经过热固定,使细菌固定在玻片上。
接着,将碘液滴在细菌上,碘液可以使细菌细胞壁中的革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都呈现出蓝紫色。
然后用酒精洗涤,革兰氏阳性菌由于细胞壁的特殊结构,可以保持蓝紫色,而革兰氏阴性菌则会被酒精冲淡。
最后再用碘液染色,使革兰氏阴性菌也呈现出蓝紫色,而革兰氏阳性菌则不受影响。
革兰氏染色法的原理主要是利用了细菌细胞壁的化学成分差异。
革兰氏阳性菌的细胞壁主要由大量的肽聚糖和穿链肽构成,而革兰氏阴性菌的细胞壁则含有较多的脂多糖。
由于革兰氏阳性菌的细胞壁结构较为复杂,具有较强的染色剂保持能力,因此在进行革兰氏染色时能够保持紫色,而革兰氏阴性菌的细胞壁结构相对简单,染色剂容易被洗去,因此在后续的酒精洗涤中会失去染色。
革兰氏染色法的原理虽然简单,但却具有重要的临床意义。
通过革兰氏染色法,医生可以快速准确地鉴别出细菌的类型,有助于选择合适的抗生素进行治疗。
此外,革兰氏染色法也是微生物学实验室中常用的一种方法,可以帮助科研人员进行对细菌的鉴别和分类。
总之,革兰氏染色法的原理是基于细菌细胞壁的化学成分差异,通过染色剂的作用,将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
这种染色方法不仅在临床诊断中有重要意义,也在微生物学研究中发挥着重要作用。
通过了解革兰氏染色法的原理,我们可以更好地理解其在医学和科研领域的应用,为细菌研究和临床诊断提供更多的帮助。
简述革兰氏染色的原理
简述革兰氏染色的原理革兰氏染色是一种常用的细菌染色方法,它是由丹麦微生物学家克里斯汀·格拉姆于1884年发明的,用于区分细菌的结构特征。
革兰氏染色的原理是利用革兰氏染色试剂对细菌进行染色,通过细菌细胞壁的不同结构,将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两种类型。
首先,让我们来了解一下革兰氏染色的步骤。
革兰氏染色的步骤通常包括以下几个步骤,准备细菌涂片、涂染、固定、染色、洗净和干燥。
在进行染色的过程中,革兰氏阳性菌会呈紫色或紫红色,而革兰氏阴性菌则呈蓝色或粉红色。
接下来,让我们来详细了解一下革兰氏染色的原理。
革兰氏染色的原理主要是利用细菌细胞壁的不同结构特点。
革兰氏阳性菌的细胞壁主要由厚层的壁多糖和穿过细胞壁的大量的穿透蛋白组成,这些穿透蛋白可以使革兰氏染色试剂在细菌细胞壁上形成紫色沉淀。
而革兰氏阴性菌的细胞壁则由较薄的壁多糖和较少的穿透蛋白组成,这使得革兰氏染色试剂在细菌细胞壁上形成蓝色或粉红色的沉淀。
革兰氏染色的原理可以通过以下几个方面来总结,首先,革兰氏染色试剂中的紫色染料结合到了革兰氏阳性菌的细胞壁上,形成紫色的沉淀;其次,革兰氏染色试剂中的蓝色或粉红色染料结合到了革兰氏阴性菌的细胞壁上,形成蓝色或粉红色的沉淀。
这样,通过观察细菌在显微镜下的染色情况,我们可以区分出革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
总的来说,革兰氏染色的原理是利用革兰氏染色试剂与细菌细胞壁的特定结构相互作用,从而实现对细菌的染色和区分。
通过这种方法,我们可以快速准确地区分出不同类型的细菌,对于临床诊断和细菌学研究具有重要的意义。
在实际操作中,革兰氏染色的原理为我们提供了一种简单而有效的方法来区分细菌类型,为医学诊断和细菌学研究提供了重要的帮助。
同时,革兰氏染色的原理也为我们深入了解细菌的结构特征提供了重要的实验手段。
综上所述,革兰氏染色的原理是利用革兰氏染色试剂与细菌细胞壁的特定结构相互作用,通过染色的方式区分出革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
细菌革兰氏染色原理
细菌革兰氏染色原理细菌革兰氏染色是一种常用的细菌分类染色方法,它是由丹麦细菌学家克里斯蒂安·格拉姆(Christian Gram)于1884年首次提出的。
革兰氏染色的原理是利用细菌细胞壁的化学成分差异,将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两大类。
革兰氏染色是细菌学中的基础实验技术,对于细菌的鉴定和分类具有重要意义。
革兰氏染色的原理基于细菌细胞壁的特点。
细菌细胞壁是细菌的外部结构,它包裹在细菌细胞膜的外侧,起着支撑和保护细菌的作用。
细菌细胞壁的主要成分是肽聚糖和肽聚肌醇,革兰氏阳性菌的细胞壁含有较多的肽聚糖和肽聚肌醇,而革兰氏阴性菌的细胞壁则含有较少的肽聚糖和肽聚肌醇,但含有脂多糖层。
这种化学成分的差异使得革兰氏染色可以区分不同类型的细菌。
革兰氏染色的操作步骤相对简单,主要包括以下几个步骤,首先,将待染色的细菌涂抹在玻片上并固定;然后,用紫色的革兰氏染色液涂抹在细菌上,使其染色;接着,用碘液固定染色;最后,用酒精脱色,再用脱色后的细菌用洋红染色。
经过这些步骤,革兰氏阳性菌会呈现紫色,而革兰氏阴性菌则会呈现红色。
革兰氏染色的原理和操作方法虽然简单,但却具有重要的应用价值。
通过革兰氏染色,我们可以快速、准确地区分细菌的类型,为细菌的鉴定和分类提供了重要的依据。
在临床诊断中,革兰氏染色常常被用于鉴定引起感染的细菌,为临床治疗提供重要参考。
此外,在食品卫生、环境监测等领域,革兰氏染色也被广泛应用。
总的来说,革兰氏染色是一种简单而有效的细菌分类染色方法,它的原理基于细菌细胞壁的化学成分差异,通过染色的方式将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
革兰氏染色在细菌学研究和临床诊断中具有重要的应用价值,对于细菌的鉴定和分类起着至关重要的作用。
通过深入了解革兰氏染色的原理和操作方法,我们可以更好地理解细菌的特性,为相关领域的研究和实践提供有力支持。
革兰氏染色原理简述
革兰氏染色原理简述
革兰氏染色是一种广泛应用于微生物学领域的染色方法,它能够将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
这种染色方法是由丹麦微生物学家Christian Gram于1884年发明的。
革兰氏染色的原理是利用不同细胞壁结构的微生物有不同的结
构和染色性质,通过染色反应将其分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。
革兰氏阳性菌细胞壁由厚厚的肽聚糖和磷脂酰肌醇构成,其细胞壁结构较为单一,细胞壁的颜色染成紫色。
而革兰氏阴性菌细胞壁由薄的肽聚糖层和外层的脂多糖构成,细胞壁结构较为复杂,细胞壁的颜色染成红色。
革兰氏染色的步骤包括涂片、热固定、染色、洗涤和干燥等。
首先将待检测的微生物取一滴液体放在玻璃片上,用火烧或紫外线消毒。
然后用酒精将其热固定。
之后将其浸入革兰氏染色液中染色,常用的染色液包括紫色染色液和红色染色液。
紫色染色液中主要成分是结晶紫和碘酸钾,红色染色液中主要成分是碱性洋红。
染色完毕后,用水或乙醇洗涤,可根据需要加上对比染色液。
最后将玻璃片在温暖的气流中晾干,即可进行观察。
革兰氏染色方法广泛应用于微生物学领域,可以帮助鉴定细菌的类别和数量。
在细菌学、病原学和临床医学等领域都有着重要的应用。
革兰氏染色可以帮助医生诊断疾病、选择合适的治疗方法,对于对抗疾病和控制细菌感染具有重要意义。
总之,革兰氏染色是一种简单而有效的微生物学实验方法,通过
染色反应将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类,成为微生物学研究和临床应用的重要手段。
革兰氏染色的原理
革兰氏染色的原理革兰氏染色是一种用来区分细菌的染色方法,它是由丹麦细菌学家克里斯汀·格拉姆(Christian Gram)于1884年发明的。
革兰氏染色的原理是利用细菌细胞壁的化学成分差异,将细菌分成两大类,革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌。
这一染色方法对于细菌的鉴定和分类具有重要意义,也是临床微生物学中常用的一种技术手段。
革兰氏染色的原理主要基于细菌细胞壁的差异。
革兰氏阳性细菌的细胞壁由厚厚的壁层和一层特殊的多糖多肽复合物组成,这种结构使得革兰氏阳性细菌在革兰氏染色中能够保持紫色染色。
而革兰氏阴性细菌的细胞壁则由较薄的壁层和一层脂多糖组成,这种结构使得革兰氏阴性细菌在革兰氏染色中无法保持紫色染色,而会被洗去紫色染料后被红色染料染色。
革兰氏染色的步骤包括,先用紫色染料染色,再用碘液固定,再用酒精洗去多余的染料,最后再用红色染料染色。
在这个过程中,革兰氏阳性细菌会保持紫色染色,而革兰氏阴性细菌则会被洗去紫色染料后被红色染料染色。
革兰氏染色的原理虽然简单,但却对于细菌的鉴定和分类有着重要的意义。
通过观察细菌在革兰氏染色中的染色情况,可以快速准确地区分出革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌,为临床诊断和治疗提供重要参考。
同时,革兰氏染色也为微生物学研究提供了重要的技术手段,帮助科学家们更好地了解和研究细菌的特性和分类。
总之,革兰氏染色的原理是基于细菌细胞壁的化学成分差异,通过染色方法将细菌分成革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌两大类。
这一方法在临床诊断和微生物学研究中具有重要意义,为细菌的鉴定和分类提供了重要的技术手段。
革兰氏染色的原理虽然简单,但却对于医学和科学研究有着深远的影响,是微生物学领域中不可或缺的重要技术之一。
革兰氏染色——摘要翻译
革兰氏染色实验目的1.学习并掌握革兰氏染色2.理解革兰氏染色原理3.巩固显微和无菌操作技术实验步骤1. 制片将生长旺盛时期的细胞用常规方法涂片(不应太厚),干燥、固定。
2. 初染滴加草酸铵结晶紫覆盖细菌的涂层,1-2分钟,倾斜玻片,用水冲洗至无色3. 媒染先用卢卡氏碘液冲掉残余水分,然后用碘覆盖1分钟,倾斜玻片,用水冲洗至无色4. 脱色用吸水纸吸去残余水分,在白色背景下使用95%乙醇脱色(通常20-30秒),当流出水无色时立刻用水冲洗乙醇。
5. 复染用吸水纸吸净水分,番红染液染色2min,用水冲洗至无色。
6. 镜检油镜观察7. 混合涂片染色在同一区域内将大肠杆菌和金黄色葡萄球菌混合涂片,其他步骤同上。
实验结果大肠杆菌呈杆状,,说明大肠杆菌是革兰氏阴性(G-)细菌。
金黄色葡萄球菌呈球形,革兰氏染色后的颜色为蓝色,说明金黄色葡萄球菌是革兰氏阳性(G+)细菌。
Gram stainExperimental purposes1. Learn and master the Gram stain.2. Understand the principles of Gram stain.3. Consolidate microscopy operation techniques and aseptic technique.Steps1. producerTake an active growth phase bacteria by conventional methods of smear( should not be too thick), dried and fixed.2. primary stainPlus ammonium oxalate crystal violet dye covering bacteria coated , dyeing 1-2min, tilting to the dye, washed out of the water to colorless.3. mordantingFirst used Lugol iodine washed out residual traces of water, then iodine covered 1min, tilting to the iodine, washed out of the water to colorless.4. destainingResidual water on the slide with absorbent paper absorbed, on a white background use dropper flow plus 95% ethanol bleaching(Usually 20 ~ 30s), when the outflow of water was colorless as soon as wash with water liquid ethanol.5. counterstainResidual water on the slide with absorbent paper absorbed, stained with safranin counterstain 2min, washed, absorb residual water to dry.6. microscopic examinationObserve oil microscope.7. mixed smear dyeingIn same area on slide Escherichia coli and Staphylococcus aureus are mixed smear, other steps like as above.Experimental resultsE. coli is rod-shaped, after the gram stain colour to red, description the E.coli is gram-negative (G-) bacteria. Staphylococcus aureus is a spherical shape,after the gram stain colour to Blue, description the Staphylococcus aureus is gram-positive (G +) bacteria.。
革兰氏染色法的原理
革兰氏染色法的原理革兰氏染色法是一种微生物学常用的染色方法,主要用于检测细菌的结构和特性。
它是由丹麦细菌学家克里斯蒂安·格拉姆(Christian Gram)于1884年发明的。
革兰氏染色法可以把细菌分成两种类型:革兰氏阳性和革兰氏阴性。
其中,革兰氏阳性细菌染色后呈紫色或深蓝色,而革兰氏阴性细菌染色后则呈红色或粉色。
这两种细菌的差异在于其细胞结构和化学成分的不同。
革兰氏染色法是通过染色剂与细菌细胞壁之间的相互作用来实现的。
整个染色过程可以分为四个步骤:脱脂、染色、酒精洗和次染色。
下面我们分别来看一下每个步骤的具体原理。
步骤一:脱脂在这个步骤中,一些挥发性脱脂剂例如乙醚、丙酮等被用来去除细菌表面的脂肪酸和脂类物质。
这使得染色剂能够更容易地渗透进入细胞壁和胞质,从而更好地染色。
同时,这个步骤也可以使得革兰氏阴性菌表面的脂膜被去掉,暴露出细胞壁,便于下一步染色。
步骤二:染色此步骤是革兰氏染色的关键步骤。
常用的染色剂是结晶紫,它是一种碱性染料,会与革兰氏阳性菌细胞壁上的多聚糖染色。
染色剂被涂到细菌表面上,紫色染料会渗透进入细胞壁和细胞质,使得细胞全部变为紫色。
这个步骤中染色剂可以明显区分革兰氏阴性和阳性菌,因为革兰氏阴性菌在这里不会被染成紫色。
步骤三:酒精洗这个步骤叫做脱色,因为它涉及到去除紫色染料。
酒精被用来冲洗已经染过色的细菌,去除革兰氏阴性菌细胞壁上的颗粒状物质(如唾液酸),以及脱掉染色剂丝状外露的部分,从而使得染色剂从细胞壁中漏出来。
此时,革兰氏阳性菌细胞的细胞壁关键成分――胞外十字连的多聚糖,比革兰氏阴性菌细胞壁的成分――薄层的类脂和多糖要厚,它们锁住染色剂,使颜色不易溶解,成为定色基团,从而不受脱色的影响并保持紫色。
步骤四:次染色次染色是将革兰氏阴性菌染色为红色或粉色的步骤。
主要采用舒尔茨墨汁或法斯丹染料。
这些染色剂是酸性染料,只会沉淀附着在革兰氏阴性菌的细胞壁上。
当染色剂沉积时,革兰氏阳性菌仍然保持紫色,而革兰氏阴性菌则变成了红色。
革兰氏染色法的原理和步骤
革兰氏染色法的原理和步骤革兰氏染色法是一种常用的细菌染色方法,它可以将细菌区分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
这种染色方法是由丹麦微生物学家Christian Gram于1884年首次提出的。
革兰氏染色法的原理是利用细菌细胞壁的特性来区分不同类型的细菌。
细菌细胞壁的主要成分是多聚糖和肽聚糖,革兰氏氏染色法通过不同的处理步骤,使得细菌细胞壁的特性在染色过程中显现出来。
革兰氏染色法的步骤如下:1. 准备细菌涂片:首先,从培养基中取一小块细菌培养物,涂抹在玻璃片上,形成细菌涂片。
2. 固定:将细菌涂片在空气中晾干,然后用火焰快速烘烤,使细菌固定在玻璃片上。
3. 染色:将固定的细菌涂片放入革兰染色液中浸泡几分钟。
革兰染色液主要由紫晶染料和碘酒组成。
紫晶染料可以渗透进入细菌细胞壁,而碘酒可以固定染色物质。
浸泡时间过长会导致革兰氏阳性菌染色过度。
4. 洗涤:用蒸馏水冲洗细菌涂片,以去除多余的染色剂。
5. 差染:将细菌涂片放入酒精-醋酸溶液中浸泡几秒钟,然后用蒸馏水冲洗。
这一步是为了除去革兰氏阴性菌表面的染色剂。
6. 洗涤:再次用蒸馏水冲洗细菌涂片。
7. 对比染色:将细菌涂片放入苏木精染色液中浸泡几分钟。
苏木精染色液会将革兰氏阴性菌染成红色。
8. 洗涤:用蒸馏水冲洗细菌涂片。
9. 干燥:将细菌涂片放入通风处晾干。
通过上述步骤,革兰氏染色法可以将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
革兰氏阳性菌在染色后呈紫色,而革兰氏阴性菌在染色后呈红色。
革兰氏染色法的原理基于细菌细胞壁的差异。
细菌细胞壁是由多聚糖和肽聚糖组成的。
革兰氏阳性菌的细胞壁较厚,含有大量的多聚糖和肽聚糖,而革兰氏阴性菌的细胞壁较薄,含有较少的多聚糖和肽聚糖。
在染色过程中,革兰染色液中的紫晶染料可以渗透进入细菌细胞壁,并与细菌细胞内的多聚糖和肽聚糖结合,使革兰氏阳性菌呈紫色。
而革兰氏阴性菌的细胞壁较薄,紫晶染料不能渗透进去,因此在差染过程中被苏木精染色液染成红色。
说明革兰氏染色的原理
说明革兰氏染色的原理革兰氏染色是一种细菌染色技术,由丹麦细菌学家克里斯汀·格拉姆(Christian Gram)于1884年首次提出并应用于细菌鉴定中。
革兰氏染色技术是一种简单而有效的细菌染色方法,通过染色的特性能够将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌,对于细菌的鉴定和分类有着重要的意义。
革兰氏染色的原理基于细菌细胞壁的不同结构。
细菌的细胞壁主要由多聚糖和肽聚糖构成,其中革兰氏阳性菌的细胞壁含有大量的肽聚糖,而革兰氏阴性菌的细胞壁则富含脂质和蛋白质。
这种差异性决定了它们对革兰氏染色的反应。
在革兰氏染色中,首先用革兰碘复合物将细菌染色,然后用酒精漂白去除多余的染色剂,最后再用碘过的碘酊染色。
革兰氏阳性菌由于细胞壁结构的特殊性,在漂白后无法去除碉过的碘,因此呈紫色;而革兰氏阴性菌在漂白后能够去除碘过的碘,再用洗剂后,直接用红色染剂染色,所以呈粉红色。
通过这种染色方法,革兰氏染色可以将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两类,这为临床医学和微生物学提供了非常重要的参考价值。
革兰氏阳性菌有很多致病菌,比如葡萄球菌、脑膜炎球菌等,这些细菌在染色后呈紫色;而革兰氏阴性菌则包括大肠杆菌等,这些细菌在染色后呈粉红色。
通过革兰氏染色,医生可以快速判断患者细菌感染的类型,从而选择合适的抗生素进行治疗,这为细菌感染的治疗提供了重要的依据。
除了用于临床医学上的细菌鉴定外,革兰氏染色还被广泛应用于微生物学领域。
在微生物学研究中,革兰氏染色可以帮助科研人员对细菌进行分类和鉴定,从而深入了解细菌的生物特性和生态特性,这为人们更好地利用细菌资源和控制细菌疾病提供了重要的科学依据。
革兰氏染色的原理简单而直观,操作也相对简便,因此在实验室中得到了广泛的应用。
其过程包括固定、染色、漂洗和显微镜观察,只需基本的显微镜和染色试剂即可完成。
由于革兰氏染色的原理和操作简单,因此被列为医学、微生物学等专业的实验课程中,是学生学习微生物学的基础实验之一。
革兰氏染色基本原理
革兰氏染色基本原理革兰氏染色是一种常用的细菌染色方法,主要用于细菌的形态鉴定与分类。
它是由丹麦微生物学家革兰(Hans Christian Gram)于1884年提出的,经过多年的发展和改进,已成为一种世界通用的细菌染色方法。
革兰氏染色的基本原理是利用细菌细胞壁的化学组成差异实现细菌的区分。
细菌的细胞壁主要由多糖组成,如革兰氏阳性菌的细胞壁主要由厚壁的胞内层(胞内膜)、胞间层(细胞壁)和胞外层(胞外膜)三部分组成;而革兰氏阴性菌的细胞壁主要由较薄的胞内层和胞外膜组成。
革兰氏染色的步骤如下:1. 取一枚无菌的玻璃片,用火烙消毒炉炙热,使其无菌。
2. 用无菌的培养物或密液背景,取一小滴液菌液,涂在玻璃片上。
3. 涂片干燥后,在培养物上滴一滴革兰染紫。
革兰染紫是一种紫色碱性染料,可以渗透细菌细胞壁上的孔道,使内部染上紫色。
4. 静置片上约1分钟,然后用无菌蒸馏水冲洗几次,直到洗涤液基本没有紫色溢出,但是还保持涂片干燥。
5. 滴加五碘化钾溶液(碘液)静置片上约1分钟。
碘液会与紫色染料在细菌细胞上形成复合物,使其难溶于酒精。
6. 用无菌蒸馏水冲洗几次,然后取少许酒精滴在涂片上,静置片上约20秒钟,酒精的作用是去色。
7. 再次用无菌蒸馏水冲洗几次,然后滴加葡萄糖里面棕色电子偏转阳离子染液(革兰氏红色)、溴水溶液等,静置片上约1分钟。
8. 用无菌蒸馏水冲洗涂片,使其洗净。
9. 涂片上的水分脱干后放入显微镜下观察,使用油镜片进行放大观察。
利用革兰氏染色,可以将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两类。
革兰氏阳性菌在染色后呈现紫色或紫蓝色,细胞形态丰富多样,由于细胞壁厚,所以在显微镜下呈圆形鲜明的菌体形态。
而革兰氏阴性菌在染色后呈现粉红色或褐色,细胞形态相对较简单,由于细胞壁较薄,菌体形态较小且呈现胶状。
革兰氏染色的原理主要是由革兰染紫和碘液的作用,革兰阳性菌的细胞壁中含有较多的乳酸和柠檬酸,革兰染紫与乳酸和柠檬酸形成复合物后,与细胞壁形成的结合力较大,所以难以被去色。
英文摘要论文翻译——革兰氏染色原理[推荐五篇]
英文摘要论文翻译——革兰氏染色原理[推荐五篇]第一篇:英文摘要论文翻译——革兰氏染色原理Disscusion about Gram stain principleThis paper discusses the Gram stain principle in terms of the specific molecular structure and the different ionization state in different PH solutions of the triphenylmethane dye, which will ionize an ion with a positive electric when in the solution with PH higher than 3.2;the substance composition variance of the bacteria cell walls, the distinction of the molecular composition and the structure of peptidoglycan which is the specific composition of bacteria cell walls, the distinction of acid dissociation and iso-electric point of different bacteria;and the interaction between the stain and bacteria led by the above.This examination will perfect the principle and render it more guiding significance in the corresponding operations.Keywords Gram stain;crystal violet;peptidoglycan;alcohol;cell wall;lip polysaccharide;革兰氏染色原理从染色剂三苯甲烷特有的分子结构、三苯甲烷染色剂在不同pH溶液中有不同的电离状态,当pH>3.2溶液时它将电离为带一个正电荷的离子的特质;以及不同细菌细胞壁的物质组成差异,构成细胞壁特征性物质——肽聚糖分子组成和空间结构存在的差异,不同细菌酸式解离以及等电点的差异;由此引发染色剂与细菌之间相互作用的角度论述了革兰氏染色的原理。
革兰氏染色法原理和操作流程
革兰氏染色法原理和操作流程The Gram stain, also known as the Gram's method, is a differential staining technique used to classify bacteria into two groups: Gram-positive and Gram-negative. 革兰氏染色法,也称为革兰氏方法,是一种差异染色技术,用于将细菌分类为两组:革兰氏阳性和革兰氏阴性。
The principle of the Gram stain is based on differences in the cell wall structure of bacteria. 革兰氏染色的原理是基于细菌细胞壁结构的差异。
Gram-positive bacteria have a thick layer of peptidoglycan in their cell walls, which retains the purple crystal violet dye during the staining process. 革兰氏阳性细菌在其细胞壁中有一层厚厚的肽聚糖,使得在染色过程中保留了紫色的结晶紫染料。
On the other hand, Gram-negative bacteria have a thinner layer of peptidoglycan and an outer membrane that can be disrupted by alcohol, allowing the purple dye to be washed out and the counterstain (usually safranin) to be absorbed, giving them a pink color. 另一方面,革兰氏阴性细菌具有较薄的肽聚糖层和外膜,可以被酒精破坏,允许紫色染料被洗去,而对比染色(通常是伽蓝红)被吸收,使它们呈现粉红色。
革兰氏染色原理
革兰氏染色原理革兰氏染色是一种常用的细菌染色方法,它是以丹尼尔·鲍林·革兰(Christian Gram)的名字命名的。
革兰氏染色可以将细菌分成革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两大类,这对于细菌的鉴定和分类具有非常重要的意义。
那么,革兰氏染色的原理是什么呢?首先,我们需要准备一些基本的染色试剂,包括革兰染色液、碘液、酒精和洗涤液。
接下来,我们将细菌样本涂抹在载玻片上,然后用革兰染色液涂抹在细菌上,经过一定时间的染色后,用碘液固定染色,然后用酒精洗涤,最后用洗涤液冲洗干净,就可以观察到细菌的染色效果了。
革兰氏染色的原理主要是依靠细菌细胞壁的结构特点来区分。
革兰氏阳性菌的细胞壁主要由大量的肽聚糖和穿过肽聚糖的多肽交联链组成,这使得革兰氏阳性菌在染色过程中能够保留革兰染色液和碘液的染色物质,呈现出蓝紫色的染色效果。
而革兰氏阴性菌的细胞壁则含有较少的肽聚糖和多肽交联链,因此在酒精洗涤的过程中,革兰氏阴性菌会失去革兰染色液和碘液的染色物质,最终呈现出红粉色的染色效果。
通过观察细菌在革兰氏染色中的染色效果,我们可以快速准确地区分出革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
这对于临床医学、食品工业、环境监测等领域都具有非常重要的意义。
同时,革兰氏染色也为我们提供了一种简单而有效的细菌分类方法,为细菌学研究和实际应用提供了便利。
总之,革兰氏染色原理是基于细菌细胞壁结构的差异来区分细菌的染色方法,通过观察细菌在染色过程中的染色效果,可以快速准确地区分出革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌,为细菌鉴定和分类提供了重要的依据。
革兰氏染色在临床医学、科研领域以及工业应用中具有广泛的应用前景,是一种简单而有效的细菌染色方法。
革兰氏染色的原理
革兰氏染色的原理革兰氏染色是一种最常用的细菌染色方法之一,它是以丹尼尔·埃德温·革兰(1881-1938)的名字命名的。
革兰氏染色是通过对细菌进行染色来区分细菌的一种方法,它可以将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两类。
革兰氏染色的原理是利用细菌细胞壁的特性来区分不同类型的细菌。
首先,我们来看一下革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的区别。
革兰氏阳性菌的细胞壁主要由肽聚糖和茎二糖构成,这种细胞壁结构比较简单,可以很容易地吸收革兰氏染色的染料,因此在染色后会呈现紫色或蓝色。
而革兰氏阴性菌的细胞壁则含有较多的脂多糖和蛋白质,这种结构比较复杂,不容易吸收革兰氏染色的染料,因此在染色后会呈现红色或粉红色。
革兰氏染色的步骤一般包括以下几个步骤,首先是将细菌标本涂在玻片上,然后用热力固定法将细菌固定在玻片上。
接着,用革兰氏染色液将细菌染色,然后用碘液固定染色。
最后,用酒精洗去多余的染色液,最后用水洗净,晾干即可观察。
革兰氏染色的原理是通过细菌细胞壁的特性来区分不同类型的细菌。
革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在染色后呈现不同的颜色,这是由于它们细胞壁的化学成分不同所致。
革兰氏染色是一种简单而有效的细菌鉴定方法,它可以帮助我们快速区分不同类型的细菌,对于临床诊断和细菌学研究具有重要意义。
总的来说,革兰氏染色是一种简单而有效的细菌染色方法,它通过对细菌细胞壁的特性进行染色来区分不同类型的细菌。
革兰氏染色的原理是利用细菌细胞壁的化学成分的差异来实现细菌的区分。
革兰氏染色在临床诊断和细菌学研究中具有重要的应用价值。
希望通过本文的介绍,能够让大家对革兰氏染色有一个更加深入的了解。
革兰氏染色的原理
革兰氏染色的原理革兰氏染色是一种最常用的细菌染色方法,它是由丹麦细菌学家革兰于1884年首次提出的。
革兰氏染色可以将细菌分为革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌两类,这对于细菌的鉴定和分类具有非常重要的意义。
那么,革兰氏染色的原理是什么呢?首先,我们需要了解一下革兰氏染色的步骤。
革兰氏染色的步骤通常包括将细菌涂片在火焰中固定、用革兰碘液浸泡、用乙醇漂洗、再用碘液浸泡、最后用洗净的水冲洗干净,然后在显微镜下观察。
这些步骤看起来很简单,但是其中蕴含着丰富的科学原理。
革兰氏染色的原理主要涉及到细菌细胞壁的化学成分和染色剂的作用。
革兰氏阳性细菌的细胞壁主要由大量的肽聚糖和一些蛋白质组成,而革兰氏阴性细菌的细胞壁则含有较多的脂多糖。
在革兰氏染色中,首先使用革兰碘液浸泡,革兰碘液含有碘和碘化钾,它可以使细菌细胞壁中的染色质与碘结合形成复合物,从而增加细菌细胞壁的染色性。
接着用乙醇漂洗,乙醇可以溶解革兰氏阴性细菌细胞壁中的脂多糖,使其变薄,而革兰氏阳性细菌的细胞壁则不受影响。
因此,在染色后,革兰氏阳性细菌呈紫色,而革兰氏阴性细菌呈粉红色。
通过革兰氏染色,我们可以快速而准确地区分不同类型的细菌。
这对于临床诊断、细菌学研究以及食品工业等领域具有非常重要的意义。
革兰氏染色的原理虽然看似简单,但是其中蕴含着丰富的科学知识,只有深入理解了其原理,我们才能正确地进行细菌的染色和鉴定工作。
总的来说,革兰氏染色的原理是基于细菌细胞壁的化学成分和染色剂的作用,通过特定的步骤将细菌染色,从而区分革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌。
这一方法在微生物学领域具有广泛的应用,对于细菌的鉴定和分类具有非常重要的意义。
希望通过本文的介绍,读者能对革兰氏染色的原理有一个更加清晰的认识。
革兰氏染色的机理和步骤
1.革兰氏染色的机理和步骤【2 】机理:G+.G-重要由其CW化学成分的差异而引起对乙醇的通透性,抗脱色才能的差异.重要有肽聚糖的厚度和构造所决议.G+的CW:肽聚糖层厚,脂质含量低.乙醇脱色时CW脱水,孔径削减,透性降低,不易脱色,呈初染得蓝紫色.G-的CW:肽聚糖层薄,脂质含量高.乙醇脱色时,类脂被乙醇消融,透性升高,细胞被复染显红色.步骤:①涂片:在清洁的载玻片上滴一滴水,用接种环挑取菌体平均涂布于水中.②固定:将玻片接近酒精灯火焰,蒸干水分,但不要烤焦.③初染:用碱性颜料结晶紫对菌液涂片进行初染.④媒染:以碘液媒染1min,水洗,吸干水分.(细胞内形成结晶紫与碘的复合物,加强互相感化)⑤脱色(症结步骤):以95%的乙醇脱色30s,应恰当振荡平均,是乙醇脱色完全.⑥水洗,吸干.⑦复染:??(第2张)复染30s,水洗吸干.⑧湿润镜检.2、用渗入渗出皮层膨胀学说讲解芽孢耐热机制.芽孢的耐热性在于芽孢衣对多价阳离子和水分的透性很差,以及皮层的离子强度很高,这就使皮层产生了极高的渗入渗出压去牟取芽孢焦点中水分,其成果造成皮层的充分膨胀和焦点的高度掉水,恰是这种掉水的焦点才付与芽孢极强的耐热性.3、引起微生物造就进程中PH变化的几种可能反响,并解释若何可以或许保持微培PH稳固.答:造就进程中,因为养分物资被分化应用,代谢产物的形成与积聚,会导致PH变化.(第2张中的图)还与造就基的C/N比有关,C/N高,经造就基后PH明显降低,C/N低,经造就基后PH明显上升.PH调节:①参加缓冲剂--------常用:一氢二氢磷酸盐,K2HPO4呈碱性,KH2PO4 酸性,只在必定的PH规模内调节(6.4--7.2)②大量产酸的菌株,加CaCO3调节,CaCO3难溶于水,不会使造就液的P H过度增长,但可不断中和微生物产的酸.③造就液中消失自然的缓冲体系,如AA,肽,Pr均属两性电解质,也起缓冲的感化.④过酸:治标------加NaOH.Na2CO3中和,治本-----加适量氮源:NaNO3.Pr.NH3·H2O;增长通风量.⑤过碱:治标-----H2SO4.HCl中和,治本----加适量碳源:G类,脂类;减小通风量.3、抗生素法和菌丝过滤法为何能浓缩养分缺点型突变株?抗生素法(青霉素法):实用于细菌.道理:青霉素克制肽聚糖链间的交联,组织了合成完全的CW,野生型B处于正常发展滋生,所以对青霉素迟钝,可被克制或杀逝世;营缺B在根本造就基上休眠状况存活下来,从而达到浓缩营缺型目标.制霉菌素法实用于真菌,其可与cm上?(第1张)醇感化,引起cm毁伤,因为它只能杀逝世发展滋生着的真菌,所以......菌丝过滤法:根本培上,野生型霉菌,?菌的孢子能萌发并长成菌丝,而缺型孢子一般不萌发,或不能长成菌丝,是以造就一段时光后,用灭菌脱脂棉或滤纸滤去菌丝,收集滤液,反复数遍后可除去大部分野生型,从而……4.临盆蛋白酶的枯草芽孢杆菌产生遗传变异,使得产量性状降低,你若何解决?写出具体实验计划.答:将必定量的枯草芽孢杆菌造就液,做必定浓度的稀释,涂布在含有酪素蛋白质的根本造就基上,37°C造就一段时光后,掏出造就基,不雅察单菌落形成的透明圈大小,取透明圈直径与菌落直径之比较大的菌落,挑取造就做进一步的判定,即可得到高产蛋白酶的枯草芽孢杆菌.5.以磺胺为例,解释化学治疗机的感化机制.答:机理:磺胺是叶酸构成部分对氨基苯甲酸的构造类似物,(磺胺类药物代替对氨基苯甲酸,干扰叶酸的合成,克制了转甲基反响,导致代谢杂乱,从而克制B发展),磺胺的抑菌感化是因为很多细菌须要本身合成叶酸而发展,磺胺对人体细胞无毒性,因为人体缺少从对氨基苯甲酸合成叶酸的相干酶-----二氢叶酸合成酶,不能用外界供给的对氨基苯甲酸自行合成叶酸,而必须直接应用叶酸为发展因子进行发展.(磺胺类----与正常代谢产物竞争酶的活性中间,干扰了酶的功效,从而干扰代谢的正常进行).6、画动身展曲线.(第1张)1、微生物的共性?哪个最根本?答:①体积小,面积大(最根本)②接收多,转化快③发展旺,滋生快思顺应性强,易变异⑤散布广,种类多.2、比较G+,G-B在CW构造,构成,对溶菌酶,青霉素的迟钝性4方面的异同点.3、表型延迟现象?若何战胜?答:表型延迟:表型的转变落伍于?(第四张)转变的现象,分为①分别性延迟;突变的?经DNA复制和细胞决裂后变成纯合状况,表型才能表现出来.②心理性延迟;杂合状况→纯合状况,仍不能表现出来,(如营缺型)经由过程中央造就(CM,造就留宿),可使突变?稳固下来,战胜表型延迟.4、造就B常用的斜面造就基是什么?简述配制程序.答:牛肉膏蛋白胨造就基①称量;按配方依次精确称量②熔化:取少量水于烧杯中,加1%的蛋白胨,加热消融,加0.5%的牛肉膏,加热消融,加0.5%的NaCl,热熔,加水补充到所需体积.③调PH至7.6阁下.④加琼脂固体2%,热熔.⑤分装入试管,加塞,包扎,高压灭菌⑥弃捐斜面(斜面长度不超过试管一半)⑦无菌检讨:将灭菌的造就基放入37°C的温室中造就24-28h,以检讨灭菌是否彻底.5、啤酒酵母在分批发酵中的发展曲线分哪几个时代?在菌种扩培时,哪个时代做种子?为什么?答:延滞期,对数发展期,稳按期,阑珊期.对数期做种子.利于缩短延滞期.6、菌种阑珊的根本原因?防治措施?答:?的自觉突变.措施:①削减传代次数②创造优越的造就前提③采用不易阑珊的菌种传代④采取优越的菌种保藏措施4、菌种阑珊的根本原因,防止措施.若何区分阑珊和饰变?答:根本原因:?的自觉突变.(②传代次数的影响,是负突变株比例占优势,③造就前提)防止措施见上题.区分:阑珊:指跟着菌体的不断发展,负突变菌株的数目占全部菌体数目的比例增大,最终导致菌株的临盆机能大幅降低的现象.①原有形态性状不典范,②发展速度降低③代谢产物临盆力降低④对宿主侵袭力降低⑤抵抗力降低饰变:遗传物资构造不产生变化,而只在转录与转译程度上的表型变化,可以统一前提持续造就,不雅察子代的情形.饰变特色:临时性,不可遗传性,表现为全体个别的行动.变异:遗传性,群体中少少数个别的行动.5、gone?突变的特色?答:①自觉性②非对应性③罕见性(突变率10-6~10-9)④自力性⑤可诱发性(升高10~10^5倍)⑥稳固性⑦可逆性(原养型<=>突变型)6、v(第三张)的特色.答:①形体渺小,能通细致胞滤器(0.22um),电子显微镜下才能看见②不具有细胞机构,重要成分NA,Pr③V只含有一种核酸,DNA或RNA ④无核糖体,即无产能酶系,也无Pr,NA合成酶系,专性活细胞内寄生⑤无个别发展,也不进行二决裂,以NA,Pr等“元件”装配,实现大量滋生.⑥离体下以无性命的生物大分子状况消失⑦对大多半抗生素不迟钝,对干扰素迟钝.7、?月元病毒的致病机理.答:月元病毒是一种Pr侵染颗粒,仅有Pr构成,称作PrP.细胞型PrP----PrP^c对蛋白酶迟钝,无凝集才能,而致病型PrP---PrP^sc对蛋白酶有必定抗性,可凝集成纤维状组织,PrP^sc进入细胞后,与PrP^c联合,形成PrP^sc---PrP^c复合体,PrP^c构型产生转变,转化成PrP^sc,PrP^sc数目呈指数增长,其埋伏期长,对中枢神经伤害轻微.估菌计数法及其特色(笔记P31)乳糖操纵子(P30)1.2、伴孢晶体?它在何种B中产生?答:伴孢晶体:苏云金芽孢杆菌等少数芽孢杆菌在其形成芽孢的同时,会在芽孢旁形成一颗菱形或双锥形的碱溶性蛋白晶体(δ肉毒素)称为伴孢晶体.对约200种虫豸无为鳞翅目幼虫有毒杀感化,可制成B杀虫剂.3、霉菌菌落的特点?答:①质地松散,呈絮状,网状,绒毛状,地毯状.②形态大,分为局限性发展(青.曲)和舒展性发展(根毛)③菌落湿润(孢子)④色彩丰硕,正反色彩常不一致,中间与边缘常不一致.⑤各类霉菌,在必定造就基上,形成的菌落大小,外形,色彩相对稳固,为分类根据之一.4、应用磷酸盐或碳酸钙若何保持PH稳固性?答:①磷酸氢二钾略呈碱性,磷酸氢二钾略呈酸性,两物资以等摩尔浓度溶液PH为6.8,其缓冲才能一般在6.4~7.2规模内有用.磷酸氢二钾+H阳离子---->磷酸氢二钾+K阳离子磷酸二氢钾+K阳离子+OH- →磷酸氢二钾+H2O②大量产酸的菌株,参加碳酸钙调节,碳酸钙难溶于水,不会使造就基P H过度升高,但可不断中和微生物产的酸,同时放出二氧化碳,而降造就基PH掌握在必定规模.5、单倍体酵母细胞经??(第5张)诱变后,得到一系列的突变株,欲从平分别筛选出一株(Leu-),请设计合理的实验程序.答:镌汰型野生型→(制霉菌素法)→检出→判定(滤纸片法)将单倍体酵母细胞突变株,制成菌悬液,平均涂布于完全造就基上,长成单个菌落之后,以逐个检出的方法接种于完全造就基上,并影印到根本造就基上,在合适前提下造就一段时光,在完全造就基上发展,而在根本造就基上不发展的,即为养分缺点型菌株.将此菌株检出离心,水洗之后制成恰当浓度的菌悬液,与根本造就基平均混杂后,倾泻于平板中,湿润凝固之后,在板上划分几个区,在区中参加蘸有色AA的滤纸片,经造就后,在纸片四周有污浊的发展圈的,解释为色AA养分缺点株. 6、MR,V.P.实验的道理.答:MR:用来检测由G产生的有机酸,如甲酸,乙酸,乳酸等,细菌代谢糖产酸,PH降低,甲基红指导剂由橙色(PH=6.3)变成红色(PH=4.2)大肠杆菌---阳性:应用乳糖产生乳酸,造就后PH<4.5大肠杆菌---阴性:夙兴产有机酸,后转化有机酸→乙醇,丙酮酸.②V.P.用来测定细菌应用G产生非酸性或中性末尾产物的才能,如丙酮酸.丙酮酸经缩合→乙酰甲基甲醇(经碱性.氧化)→二乙酰.二乙酰与蛋白胨中精AA中胍基感化,生成红色化合物,产气肠杆菌---阳性,大肠杆菌---阴性.7、什么叫发展曲线?单细胞微生物的典范发展曲线分几期?划分根据?答:发展曲线:将少量纯种单细胞微生物接种到定量的液体造就基中,准时取样测定细胞数目,以造就时光为横坐标,以菌数的对数为纵坐标作图,得到一条反响在全部造就时代菌数变化纪律的曲线.分为延滞期,对数期,稳按期,衰亡期.根据发展速度常数划分,即单位时光内决裂次数的不同.8、为什么诱变时,要制成充分疏散的单细胞或单孢子悬液?对放线菌进行诱变育种时,宜处理其孢子照样菌丝细胞?为什么?答:使每个细胞平均接触诱变剂,削减表型延迟现象,并避免长出不纯菌落.多应用单核无性孢子,因为孢子心理上处于休眠状况,单核区基中了大部分的DNA,削减分别表型延迟,进步突变后果.造就基原则:①目标明白②合适的养分物资③浓度及配比适合④掌握PH前提⑤掌握氧化还原电位⑥原料起源经济勤俭⑦灭菌处理1、青霉素的感化机制?答:道理:β-内酰胺环的构造与肽聚糖单体五肽尾末尾的D-Ala-D-Ala二肽构造邻近,因而可竞争性的克制转肽酶的活性,克制单体间交联,形成缺损的CW.青霉素对发展兴旺的G+有明显的克制造用,对休眠期的无克制,对G+的感化比G-强得多.2、筛选抗代谢构造类似物突变株的意义是什么?答:在含有较高浓度终代谢构造类似物的造就基中,野生型细胞不能发展,而遗传性的解除了反馈克制或反馈阻遇的抗代谢构造类似物突变株则能发展,突变株在终产物累积的情形下仍然可以不断合成这一产物,所以采取必定的办法,筛选到抗代谢构造类似物突变株,即可获得终产物的高产菌株.3、酿酒酵母生涯史.(同P15)4、烈性噬菌体?生涯史包括几个进程?答:沾染宿主细胞后能在细胞内正常复制并引起宿主细胞敏捷裂解的噬菌体.吸附→侵入→增殖(NA复制,Pr的生物合成)→装配(成熟)→裂解(释放)5、缩短延滞期的措施答:①应用遗传学办法转变种的遗传特点,使延滞期缩短,②应用对数发展期的细胞做种子,③尽量使接种前后应用的造就基构成不要相差太大④恰当扩展接种量6、盘算代时(G),滋生代数(n),发展速度常数(R)答:见第七张7、诱变育种?举例①非电离辐射诱变剂②电离辐射诱变剂③烷化剂④插入诱变剂⑤间接引起碱基置换的诱变剂答:诱变育种:指应用物理或化学诱变剂处理微生物群体细胞,促进其突变率明显进步,然后从中拔取少数相符育种目标的突变株的办法.①紫外线②x射线,γ射线③EMS,NTG④吖啶类颜料,ICR类⑤碱基类似物(5-BU等)(直接引起:①亚硝酸G:C<--->A:T,②羟胺:只引起G:C<--->A:T③烷化剂G:C<--->A:T)8、什么是辨别造就基?应用EMB造就正常大肠杆菌和沙门氏菌时,菌落现象?为什么?答;辨别造就基:用于辨别不同类型微生物的造就基,在造就分散参加能与目标菌的无色代谢产物产生色彩反响的指导剂,从而用肉眼就能将该种微生物的菌落与外形类似的其他微生物菌落相区分的造就基. 伊红和美蓝在低酸度时联合形成沉淀,起产酸指导剂感化,大肠杆菌强烈分化乳糖而产生大量混杂酸,菌落被染成深紫色,还可看到绿色金属闪光.沙门氏菌不能应用乳糖,菌落无色通明.1、微生物的产能方法有?与食物发酵工业亲密相干的微生物的代谢方法有哪几种?答:微生物产能方法分为:发酵,有氧呼吸,无氧呼吸.与食物发酵工业亲密相干的发酵,本质是底物程度磷酸化,,底物氧化不彻底,产能程度低,为厌氧前提,兼性厌氧菌在有氧的前提下,从发酵→呼吸感化,对发酵感化克制(巴氏效应)2、高压蒸汽灭菌法的操作步骤和留意事项?答:步骤:①掏出内层锅,外层锅加水至与三角搁架相平②放回内层锅,放入带灭菌物品,加盖并将盖上排气软管插入内层锅③打开加热开关,并同时打开排气阀3-5Min④关上排气阀,温度升至121℃计时,掌握热源119-123℃15-20min⑤关上开关,断电后压力降0开盖取物⑥无菌检讨留意;①切勿忘却加水,水量不可过少②三角瓶,试管口不要与桶壁接触③切勿忘却打开排气阀排锅内空气④压力降为0才能打开排气阀,开盖3、造就基应包括哪几种养分物资?若何掌握PH?答;碳源,氮源,能源,发展因子,无机盐,水治标过酸----NaOH.NH3·H2O,过碱----H2SO4.HCl治本酸---加氮源,增大通风量 ,碱----加碱?(第8张)源,减小通风量加缓冲剂:加碳酸钙4、若何延伸对数发展期?答;补充养分物资,调剂PH,取走代谢产物,改良物化前提,调剂养分配比,C/N比4/1时,菌体大量滋生.5、简述烈性噬菌体一步发展曲线制造进程,并绘制曲线图.答:适量噬菌体接种于造就好的高浓度迟钝细胞中,②经数min吸附后,将造就物高倍稀释,或参加抗V抗血清,中和给准时光内未吸附的噬菌体,从而使因吸附噬菌体树立同步沾染③适温下持续造就,准时取样,测样品中V的效价.沾染T横坐标,V效价纵坐标,绘制订量描写烈性噬菌体发展纪律的实验曲线.(曲线见第9张)6、应用物理化学诱变剂对微生物进行诱变的目标有哪些?中央造就的目标?用简图表示应用EMS对微生物进行诱变育种的进程?答:诱变育种目标:①获得高产菌株②抗性突变种③养分缺点型突变株(检致癌物,高产次代产物)中央造就为了战胜表型延迟现象.EMS(甲基磺酸乙酯)----烷化剂----直接引起碱基置换(烷化后的碱基引起碱基配对错误,也能使嘌呤整体直接从DNA链上脱下来,产生一个缺口,在与缺口相对应的位点上,就能配上任何碱基,从而引起转换或颠换)选择动身菌株→前造就,制造菌悬液→EMS适合剂量诱变处理→中央造就→初筛造就基涂布→划线分别→菌种判定7、简图表示两亲株细胞(A+B-.A-B+)进行原生质体融会的操作示意图,并对重要步骤作扼要解释. 答:见第9张常用造就基:细菌---牛肉膏蛋白胨造就基(PH7-7.5)放线菌---高氏1号造就基(PH7-7.5)酵母菌---麦芽汁造就基(PH4.5-5,5)霉菌---查氏合成造就基(PH4.5-5,5)1、放线菌的造就:28℃,3-5d,PH=7~7.5 染色:碳酸复红染1min不雅察:(链霉菌)菌落湿润慎密,正反色彩不一致,边缘有辐射状皱褶,小不舒展,不易挑起.2、酵母菌造就:25~28℃,24h,PH=4.5~5.5,染色:美蓝--活体染色不雅察:(酿酒酵母)菌落较B的大且厚,多为乳白色,表面潮湿,粘稠,边缘整洁,易被挑起.3、霉菌造就:28℃,5~7天,PH=4.5~5.5,染色:乳酸碳酸棉签染液.不雅察:见第10张4、酵母菌①大小测定:测微尺,酵母造就物制成水漫片,高倍镜测出宽长与目镜测微尺的格数,再乘以目镜微尺每格代表长度.②计数:血球计数板:逝世菌+活菌总数,1ml总菌数=5中方格总数/5 *中方格数*10^4*稀释倍数平板菌落计数法:只活菌5、革兰氏染色:机理+步骤(04真题①)6、MR,V.P.实验(02真题⑥)吲哚实验---磨练水解色AA,水解色AA(经水解)→丙酮酸+吲哚大肠杆菌---阳性,产气肠杆菌---阴性柠檬酸盐实验----检测柠檬酸盐是否被应用大肠杆菌---阴性(绿色),产气肠杆菌---阳性(蓝色)硫化氢实验---是否分化含硫有机物大肠杆菌----阴性,产气肠杆菌----阳性(黑色沉淀)1、大肠杆菌 Escherichia coli 食物卫生重要指导菌,合成V B,大肠菌素2、枯草芽孢杆菌 Bacillus subtilis 淀粉酶,蛋白酶3、苏云金芽孢杆菌 Bacillus thuringiensis δ-肉毒素,生物农药4、酿酒酵母(真)Sacharomyces cerevisiae 酒类酿造5、灰色链霉菌(放)Streptomyces griseus 链霉素6、产黄青霉 Penicillum chrysogenum 青霉素7、米曲霉 Aspergillus oryzae 酱,酱油8、黑曲霉 A.niger 淀粉酶,柠檬酸9、黄曲霉 A.flavus 蛋白酶10、米根霉 Rhizopus oryzae 制曲酿酒,乳酸11、总状毛霉 Mucor racemosus 腐乳,豆豉(强蛋白质分化才能)属名:首字母大写,斜体种名:小写。
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Disscusion about Gram stain principle
This paper discusses the Gram stain principle in terms of the specific molecular structure and the different ionization state in different PH solutions of the triphenylmethane dye, which will ionize an ion with a positive electric when in the solution with PH higher than 3.2; the substance composition variance of the bacteria cell walls, the distinction of the molecular composition and the structure of peptidoglycan which is the specific composition of bacteria cell walls, the distinction of acid dissociation and iso-electric point of different bacteria; and the interaction between the stain and bacteria led by the above. This examination will perfect the principle and render it more guiding significance in the corresponding operations. Keywords
Gram stain; crystal violet; peptidoglycan; alcohol; cell wall; lip polysaccharide;
革兰氏染色原理
从染色剂三苯甲烷特有的分子结构、三苯甲烷染色剂在不同pH溶液中有不同的电离状态,当pH>3.2溶液时它将电离为带一个正电荷的离子的特质;以及不同细菌细胞壁的物质组成差异,构成细胞壁特征性物质——肽聚糖分子组成和空间结
构存在的差异,不同细菌酸式解离以及等电点的差异;由此引发染色剂与细菌之间相互作用的角度论述了革兰氏染色的原理。
使该理论更加完善,对相应操作和结果分析更具指导意义。
关键词
革兰氏染色; 结晶紫; 肽聚糖; 乙醇; 外膜; 脂多糖;。