影响淀粉酶酶活性的因素复习课程

影响淀粉酶酶活性的因素
一、目的
了解淀粉在水解过程中遇碘后溶液颜色的变化。

观察温度、pH、激活剂与抑制剂对淀粉酶活性的影响。

二、原理
人唾液中淀粉酶为α—淀粉，在唾液腺细胞中合成。

在唾液淀粉酶的作用下，淀粉水解，经过一系列被称为糊精的中间产物，最后生成麦芽糖和葡萄糖。

淀粉→紫色糊精→红色糊精→麦芽糖、葡萄糖
淀粉、紫色糊精、红色糊精遇碘后分别呈蓝色、紫色与红色，麦芽糖、葡萄糖遇碘不变色。

唾液淀粉酶的最适温度为37－40℃，最适pH为6.8。

偏离此最适环境时，酶的活性减弱。

低浓度的氯离子能增加淀粉酶的活性，是它的激活剂。

铜离子等金属离子能降低该酶的活性，是它的抑制剂。

三、试剂和仪器
1．碘液：称取2g碘化钾溶于5ml蒸馏水中，再加1g碘。

待碘完全溶解后，加蒸馏水295ml，混合均匀后贮存于棕色瓶内。

2．1％淀粉溶液：称取1克可溶性淀粉放入小烧杯中，加少量蒸馏水做成悬浮液。

然后在搅拌下注入沸腾的蒸馏水中，继续煮沸1分钟，冷后再加蒸馏水定容至100ml。

3．0.4％的盐酸溶液
4．0.1％的乳酸溶液。

5．1％的碳酸钠溶液。

6．％的氯化钠溶液。

7．％的硫酸铜溶液。

8．仪器：试管试管架吸管玻璃棒白磁板烧杯漏斗恒温水浴量筒冰浴四、操作步骤
1．淀粉酶液的制备：实验者先用蒸馏水嗽口，然后含一口蒸馏水于口中，轻嗽一、二分钟，吐入小烧杯中，用脱脂棉过滤，除去稀释液中可能含有的食物残渣。

最后将数人的稀释液混合在一起，再进行过滤，以避免个体差异。

2．pH对酶活性的影响
取4支试管，分别加入0.4%盐酸（pH＝1），0.1％乳酸（pH＝5），蒸馏水（pH＝7），与1％碳酸钠（pH＝9）各2毫升，再向以上四支试管中各加入2毫升淀粉溶液及淀粉酶液。

混合摇匀后置于37℃水浴中保温。

2分钟后，从蒸馏水试管中取出一滴溶液，置于白磁板上，用碘液检查淀粉的水解程度，待蒸馏水试管内的溶液遇碘不再变色后，取出所有的试管，各加碘液2滴，观察溶液颜色的变化。

根据观察结果说明pH对酶活性的影响。

3．温度对酶活性的影响
取3支试管各加入3毫升2％淀粉溶液，另取三支试管，各加入1毫升淀粉酶液。

将6支试管分为三组，每组中盛放淀粉溶液与淀粉酶液的试管各1支。

三组试管分别置于0℃、37℃、70℃的水浴中，5分钟后将各组中的淀粉溶液到入淀粉酶液中，继续保温。

2分钟后从37℃试管中取出一滴溶液，置于白磁板上，用碘液检查淀粉的水解程度，待37℃试管内的溶液遇碘不再变色后，取出所有的试管，各加碘液2滴，观察溶液颜色的变化。

根据观察结果说明温度对酶活性的影响。

4．激活剂与抑制剂对酶活性的影响
取3支试管按下表的规定加入各种试剂。

混匀后置于37℃的水浴中保温，1分钟后从1号试管中取出一滴溶液，置于白磁板上，用碘液检查淀粉的水解程度，待一号试管内的溶液遇碘不再变色后，取出所有的试管，各加碘液2滴，观察溶液颜色的变化。

根据观察结果说明激活剂与抑制剂对酶活性的影响。

五、实验结果： pH 值对酶的活力的影响
项目
颜色 水（pH=7）
32a CO N （pH=9）
HCl （pH=1） 乳酸（pH=5）
淡黄色 深紫色
蓝色 浅蓝色
结果分析：由于淀粉水解，经过一系列被称为糊精的中间产物，最后生成麦芽糖和葡萄糖。

淀粉→紫色糊精→红色糊精→麦芽糖、葡萄糖，并且淀粉、紫色糊精、红色糊精遇碘后分别呈蓝色、紫色与红色，麦芽糖、葡萄糖遇碘不变色。

于是从上图的结果可以看出pH 为7这个pH 段的时候，淀粉酶的活力最强。

可见，淀粉酶有一个最适的酸碱度。

这是因为在过酸和过碱的环境下，溶液中的氢离子或者氢氧根例子会进攻酶蛋白分子，使其维持高级结构的化学键（例如氢键，范德华力）破坏，高级结构无法维持稳定，于是解构，最终是蛋白质分子失去活性，活力减弱。

激活剂对酶的影响
激活剂
颜色 Cl N a
4CuSO
水
淡色明蓝 深紫色 不变
结果分析：从上面结果可以看出，在有钠离子存在的情况下淀粉有一点的水解，在有铜离子存在的情况下完全没有水解，在纯水的环境中，酶将淀粉完全水解。

同时，结合资料，水为对照组可以了解到钠离子对酶有一点的抑制作用，铜离子就将酶完全一致了，可见此淀粉酶为金属依赖性的酶，不同的离子对酶的活性中心有抑制的作用，改变其构象影响了活性。

温度对酶的影响
温度 颜色 0摄氏度 37摄氏度 70摄氏度
深紫色 黄色 深紫
结果分析：从上表可以看出，在37摄氏度的时候，酶水解淀粉的能力最强。

由于温度体系中随着温度的升高，酶蛋白分子中维持构象的键由于分子间的碰撞和分子内离子的热运动由于能量的升高而挣脱互相的吸引而造成分子的解体蛋白变性。

总结：从以上实验可以得出影响酶的水解的活性的因素有激活剂，温度，酸碱度。

同时所得的启示就是在应用淀粉酶要注意在最适温度最适酸碱度还有排除抑制剂的干扰来提高活力。