气相色谱法测定蝉花中角鲨烯的含量

气相色谱法测定蝉花中角鲨烯的含量

凡军民;贾君;谢春芹;韩艳丽

【摘要】Objective] To establish a method of capillary gas chromatography to detect the content of squalene in Cordyceps cicadae.[Method] Squalene in Cordyceps cicadae Shing was detected by gas chromatography.And the squalene contents in different parts of C.cicadae were com-pared.The optimal condition for the detection of squalene in C.cicadae was obtained.[Result] C.cicadae (1 g) was extracted by ultrasonic ex-traction,the product was methyl esterified at 40 ℃for 5 min by 1 m L of 0.5 mol/L sodium hydroxide-methanol solution and then extracted by n-hexane.The squalene could be determined quantitatively by GC.When the squalene concentration was from 21.43 to 214.30 μg/mL,there was a good linear relation (r=0.999 2) and a perfect method precision (RSD =3.71%),and the recovery rate was 77.80%-97.32%,and the aver-age recovery rate was 88.10% (n=9).[Conclusion] This method was simple and rapid with low pollution and high sensitivity,and it is suitable for determination of squalene content in C.cicadae.%[目的]建立毛细管气相色谱（GC）测定蝉花中角鲨烯含量的方法。[方法]采用气相色谱法测定蝉花中角鲨烯，并对不同部位天然蝉花的角鲨烯含量进

行比较，确定蝉花中角鲨烯含量测定的最佳条件。[结果]1 g蝉花经超声波提取后，经1 mL 0．5 mol／L的氢氧化钠－甲醇溶液40℃皂化5 min，再经正已烷萃取

净化，采用GC法测定角鲨烯含量。该方法在角鲨烯质量浓度为21．43～214．30μg／mL （r＝0．9992）范围内线性关系良好，方法精密度良好（RSD

＝3．71％），加标回收率为77．80％～97．32％，平均加标回收率（n＝9）为

88．10％。[结论]气相色谱法简单快速，污染小，检测灵敏度高，可用于蝉花中

角鲨烯含量的测定。

【期刊名称】《安徽农业科学》

【年(卷),期】2016(044)028

【总页数】3页(P94-95,98)

【关键词】蝉花;角鲨烯;气相色谱法

【作者】凡军民;贾君;谢春芹;韩艳丽

【作者单位】江苏农林职业技术学院，江苏句容212400;江苏农林职业技术学院，江苏句容212400;江苏农林职业技术学院，江苏句容212400;江苏农林职业技术

学院，江苏句容212400

【正文语种】中文

【中图分类】TS201.2

蝉花(Cordyceps cicadae Shing)是一些蝉的土栖若虫受到蝉拟青霉(Paecilomyes cicadae Samson)真菌寄生的产物，与名贵中药材冬虫夏草的无性系同属，金蝉花可以作为冬虫夏草的代用品，起到滋补养生的作用[1]。研究表明，蝉花含有多种

活性成分，具有调节免疫功能和脂类代谢，改善机体的营养状况，抗疲劳、解热镇痛和滋补强壮等作用[2]。

角鲨烯又名鲨烯、鲨萜，是所有细胞中甾醇的前体，不饱和程度较高，是一种非常重要的功能油脂[2-3]。角鲨烯具有抗氧化、抗肿瘤、抗疲劳、抗心血管疾病、抗

感染、提高免疫调节等多种生理功能[4]，因此被广泛应用于保健食品、医药及化

妆品等行业。目前，角鲨烯含量的测定方法主要有气相色谱法(GC)[5-6] 、气相色

谱-质谱联用法(GC-MS)[7-8]、高效液相色谱法(HPLC)[9-10]以及超高效液相色谱法(UPLC)[11-12]。由于角鲨烯的极性较小，易溶解于非极性溶剂中，故检出限均高于气相色谱和气质联用色谱法而很少被应用于分析检测中。气相色谱法测定中大多数采用有机溶剂溶解直接进样，不仅污染了色谱柱，还缩短了色谱柱的使用寿命。由于角鲨烯是一种脂质不皂化物，因此可对样品进行皂化前处理，然后萃取净化皂化液，从而可脱除样品中较多的杂质峰。笔者建立了气相色谱法测定蝉花中角鲨烯的色谱条件，并对不同部位天然蝉花的角鲨烯含量进行了比较。

1.1 材料

1.1.1 原料与试剂。蝉花(Cordyceps cicadae Shing)产自江苏省句容市磨盘山；

角鲨烯对照品(含量99.5%)，中国药品生物制品检定所，批号140721-200601；正己烷为色谱纯，国药集团化学试剂有限公司。

1.1.2 仪器与设备。Agilent 7890A-FID气相色谱仪，MD 200氮气吹扫仪，梅特勒-托利多ME204E 电子天平，艾本森MixPuls涡旋混合仪，KH5200型超声波

清洗器，DJ-04B型粉碎机。

1.2 方法

1.2.1 对照品储备液的制备。精密称取角鲨烯对照品适量，置50 mL容量瓶中，加正己烷溶解稀释至刻度，摇匀，得质量浓度为214.30 mg/mL的对照储备液。

1.2.2 供试溶液的制备。精密称定烘干至恒重的样品粉末约1 g，置于50 mL离心管中，加正己烷20 mL，在40 kHz、200 W条件下超声提取30 min，冷却后过滤，将滤液用氮气吹干。在吹干的蝉花脂肪酸中加入0.5 mol/L氢氧化钠-甲醇溶

液 1.0 mL，摇匀，40 ℃水浴加热5 min，取出冷却，加入正己烷2.0 mL萃取，静置 10 min，取上清液，过0.22 μm滤膜，作为供试溶液，备用。

1.2.3 气相色谱条件。采用Agilent HP-5毛细管色谱柱(30.00 m × 0.32 mm × 0.25 μm，Agilent Technologies)，载气为氮气(纯度 99.999%)；空气流速400