7200分光光度计的使用方法
掌握分光光度计的使用方法
掌握分光光度计的使用方法光度计光源出射光束经单色器内光栅色散成展开光谱,经波长选择后,得到所需波长的单色光,该单色光穿过被测样品,其能量被样品吸收一部分,剩余光能被检测器接收。
转换成电信号,经放大后,送至微机单元进行运算处理,由显示器给出测定结果,键盘用来设定测量模式、参数和命令的控制。
分光光度计基本操作方法1.连接仪器电源线,确保电压正确、并且电源有良好的接地性能。
2.接通电源,开机使仪器预热20分钟。
至仪器自动校正后,仪器自检完毕,即可进行测试。
3.用<方式>键设置测试方式,根据您的需要选择,透过率(T),吸光度(A)浓度(C)4.选择您要分析的波长,按键5(设定键)找出屏幕上显示“WL=×××.×nm”字样,按键2或键3输入您所要分析的波长,之后按键7(确认键)、显示器第一列右侧显示“×××.×nm BLANKING”仪器正在变换到您所设置的波长及自动调出0ABS/100%T请稍等。
待仪器显示出您需要的波长,并且已经把参比调成0.000A时,即可测试。
5.将您的参比样品溶液和被测样品溶液分别倒入比色皿中,打开样品室盖,将盛有溶液的比色皿分别插入比色皿槽中,盖上样品室盖。
一般情况下,参比样品放在第一个槽位中。
仪器所附的比色皿,其透过率是经过配对测试的,未经配对处理的比色皿将影响样品的测试精度。
比色皿透光部分表面不能有指印、溶液痕迹,被测溶液中不能有气泡、悬浮物,否则也将影响样品测试的精度。
6.将参比样品推(拉)入光路中,按<0ABS/100%T>键调“0ABS/100%T”。
此时显示器显示的“BLANKING”,直至显示“100.0”%T或“0.000A”为止。
7.当仪器显示器显示出“100.0%T”或“0.000A”后,将被测样品推(或拉)入光路,这时,您便可以从显示器上得到被测样品的测试参数。
分光光度计的使用方法
D、测定有色溶液吸光度时,一定要用有色溶液洗比色皿内壁几次,以免改变有色溶液的浓度。另外,在测定一系列溶液的吸光度时,通常都按由稀到浓的顺序测定,以减小测量误差。
F、在实际分析工作中,通常根据溶液浓度的不同,选用液槽厚度不同的比色皿,使溶液的吸光度控制在0.2-0.7。
分光光度计使用方法
1、操作方法
(1)预热仪器
为使测定稳定,将电源开关打开,使仪器预热20min,为了防止光电管疲劳,不要连续光照。预热仪器时和在不测定时应将比色皿暗箱盖打开,使光路切断。
(2)选定波长
根据实验要求,转动波长调节器,使指针指示所需要的单色光波长。
(3)固定灵敏度档
根据有色溶液对光的吸收情况,为使吸光度档,使其固定于某一档,在实验过程中不再变动。一般测量固定在“1”档。
(6)测定
轻轻拉动比色皿座架拉杆,使有色溶液进入光路,此时表头指针所示为该有色溶液的吸光度A。读数后,打开比色皿暗箱盖。
(7)关机
实验完毕,切断电源,将比色皿取出洗净,并将比色皿座架及暗箱用软纸擦净。
分光光度计使用方法
2、注意事项:
(1)为了防止光电管疲劳。不测定时必须将比色皿暗箱盖打开,使光路切断,以延长光电管使用寿命。
(4)调节“0”点
轻轻旋动调“0”电位器,使读数表头指针恰好位于透光度为“0”处(此时,比色皿暗箱盖是打开的,光路被切断,光电管不受光照)。
(5)调节T=100%
将盛蒸馏水(或空白溶液或纯溶剂)的比色皿放入比色皿座架中的第一格内,有色溶液放在其它格内,把比色皿暗箱盖子轻轻盖上,转动光量调节器,使透光度T=100%,即表头指针恰好指在T=100%处。
(2)比色皿的使用方法:
分光光度计使用方法新
分光光度计的使用方法发布时间:11-10-07 来源:陕西凯利化玻仪器有限公司点击量:11232 字段选择:大中小7200型分光光度计仪器结构7200型光栅分光光度计由光源,单色器,试样室,光电管,线性运算放大器,对数运算放大器及数字显示器等部件组成,基本结构如下所示.1.光源;2.单色器;3.试样室;4.光电管;5.线性运算放大器;6.对数运算放大器;7.数字显示器1.1.2 7200型分光光度计工作原理7 2 0 0型光栅分光光度计光学系统1.光源灯;2.滤光片;3.球面反射镜;4.入射狭缝;5.保护玻璃;6.平面反射镜;7.准直镜;8.光栅;9.保护玻璃;10.出射狭缝; 11.聚光镜;12.试样室; 13.光门;14.光电管;1.1.2 7200型分光光度计工作原理(文)由光源灯(1)发出连续辐射光线,经滤光片(2)和球面反射镜(3)至单色器的入射狭缝(4)聚焦成像,光束通过入射狭缝(4)经平面反射镜(6)到准直镜(7)产生平行光,射至光栅(8)上色散后又以准直镜(7)聚焦在出射狭缝(10)上形成一连续光谱,由出射狭缝选择射出一定波长的单色光,经聚光镜(11)聚光后,通过试样室(12)中的测试溶液部分吸收后,光经光门(13)再照射到光电管(14)上.调整仪器,使透光度为100%,再移动试样架拉手,使同一单色光通过测试溶液后照射到光电管上.如果被测样品有光吸收现象,光量减弱,由光电转换元件将变化的光信号转变为电信号,经线性运算放大器和对数运算放大器处理,将光能的变化程度通过数字显示器显示出来.可根据需要直接在数字显示器上读取透光度(T),吸光度(A)或浓度(C).1.1.3特点(1)具有低杂色光,高分辩率的单光束光路结构的单色器;(2)具有良好的稳定性,重现性和精确的测量读数;(3)明亮清晰的数字显示器可显示透射比,吸光度,浓度和所设置的波长,提高了仪器的读数准确性;(4)采用最新微机处理技术,仪器具有自动设置0%T和100%等控制功能;(5)仪器配有标准的RS-232双向通讯接口,不仅可向计算机发送测试参数,还可接收计算机发出的指令.(6)在已知标准溶液浓度前提下,测定未知样品浓度;(7)在已知标准溶液浓度斜率前提下,测定未知样品浓度.1.2 7200型分光光度计使用方法(基本操作1)1.2.1基本操作(1)通电---仪器自检----预热20min;(2)用键设置测试方式:透射比(T),吸光度(A),已知标样浓度方式(C)和已知标样浓度斜率(K)方式;(3)波长选择:用波长调节旋钮设置所需的单色光波长;(4)放样顺序:打开样品室盖,在1~4号放置比色皿槽中,依次放入%T校具(黑体),参比液,样品液1和样品液2.(5)校具(黑体)校"0.000":将%T校具(黑体)置入光路,在T方式下按"%T"键,此时仪器自动校正后显示"0.000"(6)参比液校"100"%T或"0.000"A:将参比液拉入光路中,按"0A/100%T"键调0A/100%T,此时仪器显示"BLA",表示仪器正在自动校正,校正完毕后显示"100"%T或"0.000"A后,表示校正完毕,可以进行样品测定.(7)样品测定:将两样品液分别拉入光路中,此时若在"T"方式下则可依次显示样品的透射比(透光度)若在"A"方式下,则显示测得的样品吸光度.1.2 7200型分光光度计使用方法(浓度测定)7200型分光光度仪不仅可以测定未知样品的透射比(T)和吸光度(A)这两项基本操作,还可进行未知样品浓度测定.(1)在已知标准溶液浓度前提下,测定未知样品浓度.(2)在已知标准溶液浓度斜率前提下,测定未知样品浓度.备注:以上两种浓度测定的方法请大家参照实验教学教材课后自学.1.3 7200型光栅分光光度计的使用注意事项(1)(1)预热是保证仪器准确稳定的重要步骤.(2)比色皿的清洁程度,直接影响实验结果.因此,特别要将比色皿清洗干净.先用自来水将用过的比色皿反复冲洗,然后用蒸馏水淋洗,倒立于滤纸片上,待干后再收回比色皿盒中.必要时,还要对比色皿进行更精细的处理,如用浓硝酸或铬酸洗液浸泡,冲洗.(3)比色皿与分光光度计应配套使用,否则会引起较大的实验误差. 比色皿不能单个调换1.3 7200型光栅分光光度计的使用注意事项(2)(4)比色皿内盛液应为其容量的2/3,过少会影响实验结果,过多易在测量过程中外溢,污染仪器. 比色皿中试样装入量应为2/3~3/4之间(5)拿放比色皿时,应持其"毛面",杜绝接触光路通过的"光面".如比色皿外表面有液体,应用绸布拭干,以保证光路通过时不受影响.(6)若待测液浓度过大,应选用短光径的比色皿,一般应使吸光度读数处于0.1~0.8范围内为宜.由于测定空白,标准和待测溶液时使用同样光径的比色皿,故不必考虑因光径变化而引起的影响.2. UV-754型紫外-可见分光光度计正确使用方法2.1紫外分光光度法概述2.2 UV-754型紫外-可见分光光度计结构和工作原理2.1.1仪器结构2.1.2工作原理2.3 UV-754型紫外-可见分光光度计使用方法2.4 UV-754型紫外-可见分光光度计使用注意事项2.1紫外分光光度计法概述(1)2.1.1定义用紫外光源通过分光光度技术对物质进行测定的方法叫作紫外分光光度法.所使用的仪器叫作紫外分光光度计.2.1.2原理因为许多化合物的分子结构中存在共轭双键,在200~400nm的紫外光区具有吸收光的特性,所以无需进行显色反应便能直接测定.2.1.3应用常用于对蛋白质和核酸进行定性,定量测定.蛋白质分子中所含酪氨酸,色氨酸和苯丙氨酸等芳香族氨基酸残基在波长280nm处具有最大吸收峰.故常用波长280nm处的吸光度测定蛋白质的浓度.2.1.4特点(1)组成核酸的碱基也含有共轭双键,其最大吸收峰的波长在260nm处.但在280nm处也有一定的光吸收,对蛋白质的测定有一定的干扰作用.若分别测定280nm和260nm处的吸光度,可通过经验公式消除核酸对蛋白质测定的影响.(2)可对微量蛋白质(1~10g/L)不需显色,进行直接定量测定.因此操作简便,而且可回收样品.此外,盐类在280nm处无光吸收,少量盐类也不会影响测定结果.(3)紫外分光光度法完全符合Lambert-Beer定律的基本原理.在其它条件保持一致的情况下,被测溶液的吸光度与被测溶液的浓度成正比.2.2 UV-754型分光光度计的结构和工作原理2.2.1仪器结构由光源(钨灯或氚灯),单色器,试样室,接受器(光电管),微电流放大器,A/C 转换器,打印机,键盘和显示器等部件组成.微处理机(CPU)通过输入,输出口(I/O)对微电流放大器,显示器和打印机等部件进行控制,实现仪器的整体功能.2.2.2工作原理UV-7 5 4型紫外-可见分光光度计光学系统1.氚灯;2.钨灯;3.滤光镜;4.聚光镜;5.入射狭缝;6.平面;7.准直镜;8.光栅;9.出射狭缝; 10.聚光镜; 11.试样室; 12.光门; 13.光电管2.2.2工作原理(文)由光源氚灯或钨灯(1或2)发出连续辐射光线经滤光镜(3)和聚光镜(4)至单色器入射狭缝(5)处聚焦成像,再经平面反射镜(6)反射至准直镜(7)产生平行光射至光栅(8)在光栅上色散后又经准直镜(7)聚焦在出射狭缝(9)上成一连续光谱,经出射狭缝射出的光在聚光镜(10)聚光后分别通过试样室(11)中的空白溶液(或对照溶液),标准溶液或样品溶液,被部分吸收后光经光门(12)再照射到光电管(13)上.被光电管接收的光信号再被转换成电信号,后者通过输入,输出口(I/O).进入微处理机进行调零,变换对数,浓度计算以及打印数据等处理,将检测结果通过显示器和打印系统显示出来.2.3 UV-754型分光光度计使用方法(外型)2.3.1UV-754型紫外可见分光光度计1.试样架拉手;2.键盘部分;3.数据打印;4.波长刻度盘;5.波长手轮;6.电源汗关;7.氚灯触发按钮;8.光源室.2.3 UV-754型分光光度计使用方法(键盘)UV-754型紫外-可见分光光度计键盘详细内容说明如下:2.3 UV-754型分光光度计使用方法(键盘内容1)①功能键: F1~F8,暂无功能,备扩展使用.②T键: 具有三种透光度状态调节功能.③A/C键:吸光度/浓度转换键,按此键可分别表示"吸光度0~3A","吸光度0~","吸光度0~0.1A"和"浓度"四种状态.④送入键:只在"A/C键"处于"浓度"状态时才起作用.⑤打印键:手动方式时有效,每按一次,便打印一次数据.⑥控制键:在分别使用"设定+","设定一","倍率","显示方式"和"打印方式"各键时,需与控制键分别联合使用才起作用.⑦设定+键:在"A/C键"处于"浓度"状态时才能设定"标准浓度值","斜率K值"或"斜率B值"等数据.其功能是将设定数值增加.2.3 UV-754型分光光度计使用方法(键盘内容2)⑧设定- 键:是使设定数值减小,操作与"设定+键"类同.⑨倍率键:用来设定标准溶液浓度的放大倍数.有"1","0.1"和"0.01"三档,与"控制键"同时按下,倍率便发生相应的变化.⑩显示方式键:可表示"积分","浓度"和"样品号"三种状态.(11)打印方式键:存在"自动"(每移动一次试样架,仪器自动打印一次数据),"方式1"(手动方式,每按一次此键,仪器打印一次数据)和"方式2"(每分钟定时打印一次数据)三种状态.每与"控制键"同时按一次此键便改变一个状态.(12)送纸键:每按一次此键,仪器移动一次打印纸.(13) TAC:数字显示器显示测定结果或输入的数据.2.3.2UV-754型紫外可见分光光度计使用方法(1)(1)测试准备①将盛有"空白"或"对照"溶液的比色皿处于试样室光路位置;②选择波长旋动波长手轮选定所需波长;③确定光源波长在200~290nm时,选择氚灯为光源;波长在290~360nm时,同时以氚灯和钨灯为光源;波长在360~850nm时,选择钨灯为光源;若使用氚灯,需按氚灯触发按钮启动;④仪器自检显示器显示"754"后,数字显示出现"100.0",表明仪器通过自检程序,此时仪器进入"0~100%","连续"和"自动"状态(打印系统处于自动打印状态)⑤仪器预热30min后方可进行测试.2.3.2UV-754型紫外可见分光光度计使用方法(2)(2)测试过程①数字显示透光度"100.0"(或吸光度"0.00")2~3s后,将盛有标准溶液的比色皿移至光路,打印系统便自动打印出所得数据;②将盛有样品溶液的比色皿移至光路,打印系统即自动打印出该样品的数据.待第一个样品数据打印完毕后,将第二个样品置于试样室光路………,若有多个样品,操作以此类推.(3)打印方式采用"自动"方式打印,依所选定表达方式可打印出以下数据:No(编号) %T(透光度)或ABS(吸光度)或CONC(浓度)2.4 UV—754型紫外—可见分光光度计注意事项(1)预热是保证实验结果准确可靠的必要步骤,不可忽略.(2)在波长320nm以下的实验范围一定要选用石英比色皿,绝不可以玻璃比色皿替代.(3)比色皿需保持清洁,拿放时要符合要求.(4)对不同型号和类型的仪器要严格按照使用说明操作.(5) UV-754型紫外-可见分光光度计还可开展"以校正线进行浓度演算"和"用已知斜率K值与B值进行浓度测定"等多种测试方法.(6)不同蛋白质所含酪氨酸,色氨酸和苯丙氨酸的数量有所差异,此法对不同蛋白质洋品的测定结果有所影响。
分光光度计的使用方法
分光光度计的使用方法主体内容:1.使用仪器前,使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理。
以及各个操作旋钮之功能。
在未接通电源前,应该对仪器的安全性进行检查,电源线接线应牢固。
通地要良好,各个调节旋钮的起始位置应该正确,然后再接通电源开关。
仪器在使用前先检查一下,放大器暗盒的硅胶干燥筒(在仪器的左侧),如受潮变色,应更换干燥的蓝色硅胶或者倒出原硅胶,烘干后再用。
2.将灵敏度旋钮调置“1”档(放大倍率最小)。
3.开启电源,指示灯亮,选择开关置于“T”,波长调至测试用波长。
仪器预热20分钟。
4.打开试样室盖(光门自动关闭),调节“0”旋钮,使数字显示为“00。
0”,盖上试样室盖,将比色皿架置与蒸馏水校正位置,使光电管受光,调节透过率“100%”旋钮,使数字显示为“100.0”.5.如果显示不到“100。
0”,则可适当增加微电流放大器的倍率档数,但尽可能置低倍率档使用,这样仪器将有更高的稳定性。
但改变倍率后必须按(4)重新校正“0”和“100%”。
6.预热后,按(4)连续几次调整“0”和“100%”,仪器即可进行测定工作.7.吸光度A的测量按(4)调整仪器的“00。
0"和“100%”,将选择开关置于“A”,调节吸光度调零旋钮,使得数字显示为“.000",然后将被测样品移入光路,显示值即为被测样品的吸光度值。
8.浓度C的测量:选择开关由“A"旋置“C”,将已标定浓度的样品放入光路,调节浓度旋钮,使得数字显示为标定值,将被测样品放入光路,即可读出被测样品的浓度值.9.如果大幅度改变测试波长时,在调整“0"和“100%"后稍等片刻,(因光能量变化急剧,光电管受光后响应缓慢,需一段光响应平衡时间),当稳定后,重新调整“0”和“100%”即可工作.10.每台仪器所配套的比色皿,不能与其它仪器上的比色皿单个调换。
11.本仪器数字表后盖,有信号输出0~1000MV,插座1脚为正,2脚为负接地线。
尤尼柯7200 型可见分光光度计使用操作规程
------致力成为医疗器械领域的引领者文件名称: DHG-系列电热鼓风干燥箱使用操作规程目的:建立DHG-系列电热鼓风干燥箱使用操作规程。
适用范围:适用于生产技术人员、质检人员。
职责:公司生产技术人员、质检人员对本规定的实施负责。
规程:1、使用方法1)连接仪器电源线,确保仪器供电电源有良好的接地性能。
2)接通电源,使仪器预热20 分钟。
(不包括仪器自检时间)3)用 <MODE> 键设置测试方式:透射比(T),吸光度(A),已知标准样品浓度值方式(C)和已知标准样品斜率(F)方式,4)用波长选择旋钮设置所需的分析波长。
5)将参比样品溶液和被测样品溶液分别倒入比色皿中,打开样品室盖,将盛有溶液的比色皿分别插入比色皿槽中,盖上样品室盖。
一般情况下,参比样品放在第一个槽位中。
仪器所附的比色皿,其透射比是经过配对测试的,未经配对处理的比色皿将影响样品的测试精度。
比色皿透光部分表面不能有指印、溶液痕迹,被测溶液中不能有气泡、悬浮物,否则也将影响样品测试的精度。
6)将 %T 校具(黑体)置入光路中,在T 方式下按“%T”键,此时显示器显示“000.0”7)将参比样品推(拉)入光路中,按“0A/100%T”键调0A/100%T,此时显示器显示的“BLA ”直至显示“100.0”%T 或“0.000”A为止。
8)当仪器显示器显示出“100.0”%T 或“0.000”A后,将被测样品推(拉)入光路,这时,便可从显示器上得到被测样品的透射比或吸光度值。
2、使用注意事项1)仪器应放置在室温为 5—35°C,相对湿度不大于85%的环境中工作。
2)放置仪器的工作台应平坦、牢固、结实,不应有振动或其他影响仪器正常工作的现象。
3)强烈电磁场、静电及其他电磁干扰,都可能影响仪器正常工作,放置仪器时应尽可能远离干扰源。
------致力成为医疗器械领域的引领者4)仪器放置应避开有化学腐蚀气体的地方,如硫化氢、二氧化硫、氨气等。
发酵液吸光度
发酵液吸光度(OD)检测操作规程
一、仪器:unic-7200分光光度计;50ml容量瓶;1cm玻璃
比色皿。
二、操作规程
1.吸取1ml发酵液放入50ml容量瓶中,加水定容到刻度,
摇匀,备用。
2.开机:插电源,打开开关,稳定20分钟,测量。
3.调波长:600nm
4.准备好2个洁净的1cm的玻璃比色皿,一个倒入蒸馏做空
白水另一个倒入待测样品,用擦镜纸擦拭干净。
5.黑体放1#档,空白放入2#档,样品放入3#档
6.调零:在1#档在T灯亮的情况下用黑体按0键调零。
7.调100%:在2#档在T灯亮的情况下用黑体按100%键调
100%。
8.测样:在3#档按M键调亮A灯的记录OD值。
发酵液谷氨酸(GA)和葡萄糖(RG)检测
操作规程
一、仪器、药品:
1)SBA-40C生物传感仪。
2)100-1000ul移液枪;
3)25ul微量注射器;
4)TGL-16G离心机;2ml离心管;
5)100mg/dl葡萄糖、谷氨酸标准液;
6)SBA生物传感仪专用缓冲剂。
二、操作规程
1.样品准备
1)样品与离心管对应编号,将样品2ml倒入对应的离心管中,8000转/分,离心5分钟。
2)用移液枪吸取990ul水放入2ml离心管中,用微量注射器吸取10ul离心液加入离心管中,摇匀。
2.开机:插电源,按开关键。
3.标定:用微量注射器吸取25ul标准液进行标定,至绿灯不在闪烁。
4.测样:用微量注射器吸取25ul标准液进行测量,记录读数。
分光光度计使用原理及操作方法
分光光度计使用原理及操作方法分光光度计的主要组成部分包括光源、样品室、光栅和光电检测器。
光源发出一束光线,经过光栅的光线会发生衍射,然后进入样品室,样品吸收一部分光线,剩余的经过光电检测器后被转化为电信号。
分光光度计会测量入射光和出射光之间的差异,据此计算溶液的吸光度。
操作分光光度计需要进行以下几个步骤:1.准备工作:打开分光光度计并等待预热,校准仪器,确保其准确度。
通常可以使用空白试剂即不含任何物质的溶液来进行校准。
2. 设置波长:根据实验需求设置所需的波长。
旋转光栅调节按钮或者键盘上的波长调节按钮,使仪器显示所需波长。
常见的波长范围是200-800 nm。
3.放置空白试剂:选择一种透明溶液作为空白试剂,将其转移到样品室中,确保样品室内无气泡和杂质。
关闭样品室。
4.零点调零:选择一个与空白试剂相近的波长,通过调节零点调零旋钮或键盘上的零点调零按钮,使光电检测器的读数为零。
5.测量样品:将需要测量的溶液转移到样品室中,确保样品室内无气泡和杂质。
关闭样品室。
根据实验需求选择适当的波长,并将分光光度计调至该波长。
6.讲样品的吸光度读数:记录分光光度计显示的吸光度读数。
如果需要对样品进行多次测量,可以重复步骤4和57.数据处理:根据实验需求,可以将吸光度读数与标准曲线进行比对,推断样品的浓度或其他信息。
在使用分光光度计时,还需要注意以下几个问题:1.波长选择:根据需要测量的物质的最大吸收波长,选择合适的波长。
在测量吸光度时,应选择吸收峰附近的波长,以提高测量的准确性。
2.样品制备:样品应尽量避免溶解剂或其他杂质的影响,应选择透明度高的溶液。
有时需要对样品进行稀释,使其浓度能够落在标准曲线范围之内。
3.校准和零点调零:在进行实验之前,应该进行仪器的校准和零点调零,以确保测量的准确性。
校准使用空白试剂进行,零点调零使用相近波长进行。
4.注意事项:在使用分光光度计时,样品室的门应完全关闭,以保证光路的稳定性。
简述分光光度计的操作步骤
简述分光光度计的操作步骤
分光光度计是一种用于测量溶液中物质浓度的仪器。
其操作步骤如下:
1、将待测样品注入比色皿中,然后将比色皿放入分光光度计的样品室中。
2、打开仪器电源,调节仪器的波长选择器,选择所需的检测波长。
3、通过调节参比池中的溶液,使其与待测样品在所选波长下的吸光度相等。
4、按下“读取”按钮,记录样品所对应的吸光度值。
5、重复以上步骤,测量待测样品的吸光度。
6、根据标准曲线,利用所测吸光度值计算出待测样品中物质的浓度。
7、清洗比色皿和分光光度计,关闭仪器电源。
以上是分光光度计的操作步骤。
在操作过程中,需注意样品和仪器的清洁,避免干扰物和波长选择器的调节范围,确保准确测量。
分光光度计操作规程
分光光度计操作规程一、前言分光光度计(又称分光光度测量仪、分光光度计仪或分光光度计)是一种能够测量样品溶液吸收光的仪器,广泛应用于生物、化工、医药等领域。
本文旨在介绍分光光度计的操作规程,是在使用该仪器时必须遵守的一系列安全操作和注意事项。
二、操作流程1. 打开仪器将电源插头插入电源插座,然后将电源开关打开。
等待片刻后,打开仪器主机的电源开关。
通电后,仪器将自动进入启动界面。
进入主界面后,选择需要的测量模式。
2. 校准仪器将仪器不带样品的试管放入样品槽中,选择不同波长,通过调整仪器的操作,使显示屏上的数值在正常范围内,表明仪器已经校准成功。
3. 加载样品将待测样品加入试管中,然后将试管放入样品槽。
通过选择合适的波长和样品路径长度等参数进行测量,测量过程中需确保样品与仪器环境不发生变化。
4. 保存数据测量完毕后,将数据保存至计算机等设备中。
同时,对实验数据和相关信息进行记录,确保实验结果以及分析过程的准确性和可靠性。
5. 关闭仪器在测量完毕后,选择退出程序,点击仪器关闭按钮,将电源开关拨至关闭位置,拔掉电源插头。
三、注意事项1. 操作前准备在使用分光光度计前,应仔细阅读使用说明书,确保操作人员了解仪器的基本原理和使用方法,保证测量的准确性和可靠性。
在操作前要检查仪器设备是否完好无损,仔细查看样品是否合适,确保不会危及实验人员的安全。
2. 操作过程中操作人员在使用分光光度计的时候,应仔细注意各项操作流程中的注意事项,如:样品槽清洁、波长选择、洁净度、路径长度、光强等,避免操作失误或疏漏导致测量结果产生偏差,影响实验效果和实验结果的准确性和可靠性。
3. 操作后处理在实验操作完成后,应对仪器进行清洁,彻底清除样品和试剂污染,注意维护保养,确保设备长期运转稳定。
同时,应将实验数据及其相关信息进行归档和记录,以备后续查询和分析。
四、总结分光光度计是一种高精度测量仪器,操作简单方便、使用范围广泛、数据处理方便。
分光光度计的使用方法
分光光度计的使用方法主体内容:1.使用仪器前,使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理。
以及各个操作旋钮之功能。
在未接通电源前,应该对仪器的安全性进行检查,电源线接线应牢固。
通地要良好,各个调节旋钮的起始位置应该正确,然后再接通电源开关。
仪器在使用前先检查一下,放大器暗盒的硅胶干燥筒(在仪器的左侧),如受潮变色,应更换干燥的蓝色硅胶或者倒出原硅胶,烘干后再用。
2.将灵敏度旋钮调置“1”档(放大倍率最小)。
3.开启电源,指示灯亮,选择开关置于“T”,波长调至测试用波长。
仪器预热20分钟。
4.打开试样室盖(光门自动关闭),调节“0”旋钮,使数字显示为“00.0”,盖上试样室盖,将比色皿架置与蒸馏水校正位置,使光电管受光,调节透过率“100%”旋钮,使数字显示为“100.0”。
5.如果显示不到“100.0”,则可适当增加微电流放大器的倍率档数,但尽可能置低倍率档使用,这样仪器将有更高的稳定性。
但改变倍率后必须按(4)重新校正“0”和“100%”。
6.预热后,按(4)连续几次调整“0”和“100%”,仪器即可进行测定工作。
7.吸光度A的测量按(4)调整仪器的“00.0”和“100%”,将选择开关置于“A”,调节吸光度调零旋钮,使得数字显示为“.000”,然后将被测样品移入光路,显示值即为被测样品的吸光度值。
8.浓度C的测量:选择开关由“A”旋置“C”,将已标定浓度的样品放入光路,调节浓度旋钮,使得数字显示为标定值,将被测样品放入光路,即可读出被测样品的浓度值。
9.如果大幅度改变测试波长时,在调整“0”和“100%”后稍等片刻,(因光能量变化急剧,光电管受光后响应缓慢,需一段光响应平衡时间),当稳定后,重新调整“0”和“100%”即可工作。
10.每台仪器所配套的比色皿,不能与其它仪器上的比色皿单个调换。
11.本仪器数字表后盖,有信号输出0~1000MV,插座1脚为正,2脚为负接地线。
吸收池(即比色杯)使用注意事项:①要彻底清洗,尤其是盛过蛋白质等溶液,干后形成一层膜,不易洗去,通常杯子不用时可放在1%洗洁净液中浸泡,去污效果好,使用时用水冲洗干净,要求杯壁不挂水珠,还可以用绸布丝线或软塑料制作一个小刷子清洗杯子。
05)7200分光光度计说明书
随着现代科技的发展和进步,分光光度法的测试手段和方法都在不断改进,但最根本的依据依然是பைடு நூலகம்名的比尔—朗伯定律:
A=KLC
式中A为被测物质对单色光的吸光度值,K为被测物质的吸收系数,与入射光波长及被测物质的特性有关,L为被测物质的厚度,与比色皿的尺寸有关,C为被测物质的浓度。由上式可以得出:被测物质对单色光的吸光度与被测物质浓度成正比。
分光光度计要实现光学波谱自动扫描必须具备两个条件:一是独立的参比光束,二是有自动能量补偿系统。双光束型仪器正具备了这二个基本条件,将同一光源的光分别通过参比样品和待测样品,到达同一接收系统,经电路的比较处理,就能得到您所要光谱扫描,参比光又能反馈给自动能量补偿系统作能量调节。单光束仅有一束光,无法同时通过参比和待测样品,故在过去的仪器难以实现光谱扫描。在计算机时代,由计算机的主要功能之一--记忆功能的作用改变了这一状况,微机系统的记忆单元可以先把扫描得到的参比谱线持久的储存下来,然后对待测样品进行扫描,在每一个光谱点上取出对应的参比值进行运算,便得到了您所需要的光谱特性图。从实际意义上来说,这好比把双光束的二束光在时域上进行分割,分别扫描参比与待测样品,在进行对参比的光谱扫描时,微机时刻监视着参比的光谱能量的变化,通过DAC转换系统及时调整,建立能量补偿的参比曲线。采用单光束自动扫描方法的仪器具有较高的性能价格比。
——它并不需要您花费多少时间就能为您的样品提供一张准确地全谱范围内光学特性谱线图。
——它具有准确的波长自动校正功能,每次开机自动以钬玻璃特征峰为基准校正一次,无需您经常去担心仪器的波长是否准确。
——它采用全息凹面光栅作为色散元件。减化了结构,确保能从仪器的单色器中获得象质良好的光谱线。
——它具有一套完善的人机对话的操作方式。只要您稍花一些时间熟悉掌握显示器上显示的指示内容,就能使您的操作得心应手。
7200可见分光度计使用步骤
7200可见分光度计使用步骤
宝子,今天来给你唠唠7200可见分光度计咋用哈。
先说说开机前的准备。
咱得把光度计放在一个平稳的地方,就像给它找个安稳的小窝一样。
然后呢,要检查一下电源的连接,可别到时候用到一半没电了,那可就尴尬啦。
再看看比色皿,要保证比色皿是干净透明的,要是脏脏的,那测出来的数据肯定不准啦。
开机之后呀,得让它先预热一会儿,就像运动员上场前要热身一样。
这时候咱就可以稍微休息下,等它预热好了,它就像充满电的小机器人准备开始工作啦。
接着就是校准啦。
这可是很重要的一步哦。
一般会有专门的校准溶液,把装着校准溶液的比色皿放进光度计里,按照仪器的操作提示,让它找到标准值。
这个过程就像是给光度计定个小目标,告诉它啥是正确的数值。
然后就到了测量样品的时候啦。
把咱们要测的样品小心地放到比色皿里,再把比色皿放进光度计。
这个时候要放稳咯,就像把宝贝轻轻放在摇篮里一样。
然后在仪器上操作,让它开始测量样品的吸光度或者透光率之类的数据。
在测量的过程中呢,眼睛要盯着仪器的显示屏哦。
要是数据突然变得很奇怪,咱就得想想是不是哪里出问题了,比如说样品是不是放错了,或者仪器是不是被碰到了。
等测量完了,可别着急走哦。
要把测量的数据记录下来,这数据就像小宝贝一样珍贵呢。
记录的时候要仔细,可别写错啦。
最后就是关机啦。
要按照正确的关机步骤来,不能直接拔电源哦。
就像要温柔地跟光度计说拜拜,让它好好休息,下次还能好好工作呢。
宝子,这7200可见分光度计的使用步骤大概就是这样啦,多试几次就熟练咯。
分光光度计操作步骤
分光光度计是一种用于测量样品吸收光谱的仪器。
其操作步骤包括:
准备样品:将待测样品置于分光光度计中,确保样品与测量要求一致。
选择测量模式:根据需要选择相应的测量模式,如吸收光谱、连续光谱等。
设置参数:根据样品的特性和测量要求,设置相关参数,如波长、浓度等。
开始测量:启动测量程序,等待测量结果。
数据处理:对测量结果进行数据处理,如计算吸收值、绘制光谱图等。
保存数据:将测量结果保存,以备后续使用或分析。
总之,分光光度计的操作步骤包括准备样品、选择测量模式、设置参数、开始测量、数据处理和保存数据等。
正确操作分光光度计可以提高测量精度和可靠性,为科学研究和
工业生产提供有力支持。
WFJ7200型可见分光光度计的使用操作规程
WFJ7200型可见分光光度计的使用操作规程使用操作规程-WFJ7200型可见分光光度计一、引言二、安全注意事项1.在操作仪器前,必须佩戴适当的防护眼镜和实验室衣物。
2.避免暴露于强光源和有毒有害物质的环境中。
3.操作前请确保电源开关在关闭状态。
三、仪器准备1.连接电源和仪器电源线。
2.打开电源开关,待仪器启动后,仪器将进入待机状态。
四、调节光程1.打开进样室盖板,将试样放置于进样室中。
2.关闭进样室盖板,选择所需的检测波长。
3.通过上、下调节旋钮,调节光程,使光强最大。
五、波长选择1.选择所需的检测波长。
2.通过波长选择旋钮调节至指定波长。
六、测量样品1.单击测量按钮,让仪器自动进行测量。
测量结果将在显示屏上显示。
2.若需要对一组样品进行测量,可点击“样品组”按钮,设置测量参数,并在每次测量后更换样品。
3.在测量每个样品之前,应确保进样室清洁,以避免残留样品对后续测量的干扰。
七、数据处理1.可将测量结果导出至计算机,以便进一步的数据分析和处理。
2.可利用仪器自带的数据分析软件,进行数据处理和绘图。
八、仪器维护1.定期清洁进样室和检测光路,以保证测量的准确性。
2.定期校准仪器,以确保测量结果的准确性。
九、操作禁忌1.禁止用力敲击仪器,以免损坏。
2.禁止将化学物品直接接触仪器表面,以免腐蚀和损坏仪器。
3.禁止拆卸仪器,以免影响仪器性能和设备安全。
十、总结本文对WFJ7200型可见分光光度计的使用操作规程进行了详细介绍,包括安全注意事项、仪器准备、调节光程、波长选择、测量样品、数据处理、仪器维护等方面。
在使用仪器时,务必遵守相关注意事项,并按照操作规程进行操作,以确保实验操作的安全性和数据的准确性。
7200分光光度计的使用方法
7200分光光度计的使用方法分光光度计的结构与使用方法2008-12-31 10:02:01 作者:来源:互联网浏览次数:122 文字大小:【大】【中】【小】1. 分光光度法定义与应用1.1 定义: 分光光度法是利用物质所特有的吸收光谱来鉴别物质或测定其含量的分析检测技术.1.2 特点: 灵敏,精确,快速和简便,在复杂组分系统中,不需要分离,即能检测出其中所含的极少量物质.1.3 应用: 生物<>化学研究中广泛使用的方法之一,广泛用于糖,蛋白质,核酸,酶等的快速定量检测.2. 分光光度计的基本结构和工作原理2.1 分光光度计的分类2.2 分光光度计工作原理2.3 分光光度计的基本结构2.4 分光光度法的测量误差2.5 显色反应及其影响因素2.1 分光光度计的分类分光光度计的分类红外分光光度计: 测定波长范围为大于760 nm的红外光区可见光分光光度计: 测定波长范围为400~760 nm的可见光区紫外分光光度计: 测定波长范围为200~400 nm的紫外光区2.2 分光光度计工作原理人眼可见的光只占电磁波谱的很小—部分(400~760nm)它是一种频率较大的电磁波.电磁波按频率大小,从频率最小的无线电波到频率最大的γ-射线排成一列,即组成电磁波的波谱,2.2.1 分光光度计的光谱范围包括波长范围为400~760 nm的可见光区和波长范围为200~400 nm 的紫外光区.不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源.钨灯的发射光谱:钨灯光源所发出的400~760nm波长的光谱,光通过三棱镜折射后,可得到由红,橙,黄,绿,蓝,靛,紫组成的连续色谱;该色谱可作为可见光分光光度计的光源. 氢灯的发射光谱:氢灯能发出185~400 nm 波长的光谱,可作为紫外光光度计的光源.2.2.2 物质的吸收光谱(1)如果在光源和棱镜之间放上某种物质的溶液,此时在屏上所显示的光谱已不再是光源的光谱,它出现了几条暗线,即光源发射光谱中某些波长的光因溶液吸收而消失,这种被溶液吸收后的光谱称为该溶液的吸收光谱.不同物质的吸收光谱是不同的.因此根据吸收光谱,可以鉴别溶液中所含的物质.2.2.2 物质的吸收光谱(2)当光线通过某种物质的溶液时,透过的光的强度减弱.因为有一部分光在溶液的表面反射或分散,一部分光被组成此溶液的物质所吸收,只有一部分光可透过溶液.入射光= 反射光+ 分散光+ 吸收光+ 透过光如果我们用蒸馏水(或组成此溶液的溶剂)作为"空白"去校正反射,分散等因素造成的入射光的损失,则:入射光= 吸收光十透过光2.2.3 物质吸光度(A)与透射比(T)的关系设I0 为经过空白校正后入射光的强度;I 为透过光的强度.根据实验得知I = I0 ?10-εc l式中,c 表示吸收物质的摩尔浓度;l 表示吸收物质的光径,用cm表示;ε表示吸收物质的摩尔消光系数,它表示物质对光的吸收特性,不同物质的ε数值不同. 所以I / I0 = 10-ε c l 令T(透射比) = I / I 0 T = 10-εcl 若以T对吸收物质的浓度作图,则得图1-5-2中的曲线.由上式可得1g(1 / T) = ε c llg(l / T)为物质的吸光度(A) A = 1g(1 / T)2.2.4 Lambert -Beer定律( E = ε c l)上式说明了物质的吸光度与吸收物质的浓度和液层的厚度成正比,这就是光吸收的基本定律--Lambert-Beer(朗伯-比耳)定律.2.3 分光光度计的基本结构无论哪一类分光光度计都包括:光源,单色器,吸收池,检测器和测量仪表.分光光度计各部件的次序如图所示:5个基本部件分光光度计的基本部件(1):光源: 分光光度计上常用的光源有两种:钨丝灯或氢灯,在可见光区,近紫外光区和近红外光区常用钨丝灯作为光源;在紫外光区多使用氢弧灯.单色器:把混合光波分解为单—波长光的装置.在分光光度计中多用作为色散元件.吸收池比色杯,比色皿,比色池)一般由玻璃,石英或熔凝石英制成,用来盛被测的溶液.在低于350 nm的紫外光区工作时,必须采用石英池或熔凝石英池.分光光度计的基本部件(2):吸收池(比色皿)必须与光束方向垂直.此外,每套比色皿的质料,厚度应完全相同,以免产生误差.比色皿上的指纹,油污或壁上的沉积物都会显著地影响其透光性,因此在使用前务必彻底清洗.常用光电池,光电管和光电倍增管三种.测量装置—般常用的紫外光和可见光分光光度计有3种测量装置,即电流表,记录器和数字示值读数单元.现代的仪器常附有自动记录器,可自动描出吸收曲线.检测器棱镜与光栅棱镜: 光波通过棱镜时,不同波长的光折射率不同;因而能将不同波长的光分开.玻璃对紫外线的吸收力强,故玻璃棱镜多用于可见光分光光度计.石英棱镜可在整个紫外光区传播光,故在紫外光分光光度计中广为应用.衍射光栅: 在石英或玻璃表面上刻划许多平行线(每英寸约刻15 000—30 000条).由于刻线处不透光,通过光的干涉和衍射使较长的光波偏折角度大,较短的光波偏折角度小,因而形成光谱.棱镜单色器装置示意图光源照到棱镜(或光栅)以前,先要经过一个入射狭缝,再通过平行光镜使成为平行光束投到棱镜上.透过棱镜的光再经另一聚光镜,在此聚光镜的焦面内可得一清楚的光谱图.如在焦线处放—出射狭缝,转动棱镜使光谱移动,就可以从出射狭缝射出所需要的单色光.整个装置称为"单色器"检测器---光电池光电池装在一个特制的匣子里面由3层物质组成的圆形或长方形薄片.第一层是一种导电性良好的金属,这是光电池的负极.中间极薄的一层是半导体硒,第3层是铁,这是光电池的正极.当光电池受光照射以后,半导体硒的表面逸出电子,这些电子只向负极方向移动,而不向正极移动,因此在上下两金属片间产生一个电位差,线路连通时即产生电流检测器---光电管光电管光电管是由封装在真空透明封套里的一个半圆柱型阴极和一个丝阳极组成.阴极的凹画上有一层光电发射材料,此种物质经光照射可发射电子.当在两极间加有电位时,发射出来的电子就流向丝阳极而产生光电流.对于相同的辐射强度,它所产生的电流约为光电池所产生电流的1/4.由于光电管具有很高的电阻,所以产生的电流容易放大.检测器---光电倍增管光电倍增管它比普通的光电管优越,它可将第一次发射出的电子数目放大到数百万倍.当电子打在兼性阳极上时,能引起更多的电子自表面射出.这些射出的电子又被第二个兼性阳极所吸引,同样再产生更多的电子.此过程重复9次后,每个光子可形成106~107个电子.这些电子最后被收集在阳极上.所得到的倍增电流可进一步加以放大和测量.2.4 分光光度法的测量误差分光光度法的测量误差选择适宜波长的入射光控制吸光度A的遍数范围选择适当的参比溶液仪器测量误差测量条件选择2.4.1 仪器测量误差由朗伯-比尔定律可知,只有在一定的浓度范围内,即一定的吸光度范围同内,由分光光度计测量所引起的测定结果的相对误差才是较小的;当透光率接近0或 1.0时,其相对误差趋于无限大;一般在百分透光率在10~80%的范围内(即吸光度在1~0.1),浓度测量相对误差较小;对于精密度高的仪器.当吸度A=0.7-0.2时(百分透光率约为20-60%,测量误差约为1%.2.4.2 测量条件选择(1)选择适宜波长的入射光:由于有色物质对光有选择性吸收,为了使测定结果有较高的灵敏度,必须选择溶液最大吸收波长的入射光.(2)控制吸光度A的准确的读数范围:由朗伯-比耳定律可知,吸光度只有控制在0.2~0.7读数范围内时,测量的准确度较高.(3)选择参比溶液:参比溶液是用来调节仪器工作零点的.若样品溶液,试剂,显色剂无无色可用蒸馏水作参比溶液;反之应采用不加显色剂的样品液作参比溶液.2.5 显色反应及其影响因素显色反应及其影响因素显色反应一般要求影响显色反应因素选择性好灵敏度高生成的有色化合物性质稳定显色剂与有色物颜色反差大显色反应要易于控制显色剂用量反应液的酸碱度(pH)反应温度显色反应时间干扰离子的影响2.5.1 显色反应一般要求(1)选择性好:显色剂最好只与一种被测组分起显色反应;(2)灵敏度高:灵敏度高有笪微量组分的测定;(3)有色化合物性质稳定:确保前后测定准确.(4)显色剂与有色物颜色反差大:两者最大吸收波长之差应大于60nm;(5)显色反应要易于控制:结果的确保实验再现性.2.5.2 影响显色反应的主要因素(1)显色剂用量:通过实验来确定最适用量;(2)反应液的酸碱度(pH)溶液酸碱度直接影响金属离子与显色剂存在形式以及有色化合物组成的稳定性.(3)反应温度:不同的显色反应需要不同的反应温度,一般显色反应可在室温下完成.(4)显色反应时间:显色反应的速度有快有慢.(5)干扰离子的影响:应采用适当方法消除其影响.3. 7200型分光光度计的正确使用方法3.1 结构和工作原理3.1.1 仪器结构3.1.2 工作原理3.1.3 特点3.2 使用方法3.3 注意事项3.1.1 7200型分光光度计仪器结构7200型光栅分光光度计由光源,单色器,试样室,光电管,线性运算放大器,对数运算放大器及数字显示器等部件组成,基本结构如下图所示.1.光源;2.单色器;3.试样室;4.光电管;5.线性运算放大器;6.对数运算放大器;7.数字显示器3.1.2 7200型分光光度计工作原理(图)7 2 0 0型光栅分光光度计光学系统示意图1.光源灯;2.滤光片;3.球面反射镜;4.入射狭缝;5.保护玻璃;6.平面反射镜;7.准直镜;8.光栅;9.保护玻璃;10.出射狭缝; 11.聚光镜;12.试样室; 13.光门;14.光电管;3.1.2 7200型分光光度计工作原理(文)由光源灯(1)发出连续辐射光线,经滤光片(2)和球面反射镜(3)至单色器的入射狭缝(4)聚焦成像,光束通过入射狭缝(4)经平面反射镜(6)到准直镜(7)产生平行光,射至光栅(8)上色散后又以准直镜(7)聚焦在出射狭缝(10)上形成一连续光谱,由出射狭缝选择射出一定波长的单色光,经聚光镜(11)聚光后,通过试样室(12)中的测试溶液部分吸收后,光经光门(13)再照射到光电管(14)上.调整仪器,使透光度为100%,再移动试样架拉手,使同一单色光通过测试溶液后照射到光电管上.如果被测样品有光吸收现象,光量减弱,由光电转换元件将变化的光信号转变为电信号,经线性运算放大器和对数运算放大器处理,将光能的变化程度通过数字显示器显示出来.可根据需要直接在数字显示器上读取透光度(T),吸光度(A)或浓度(C).3.1.3 特点(1) 具有低杂色光,高分辩率的单光束光路结构的单色器;(2) 具有良好的稳定性,重现性和精确的测量读数;(3) 明亮清晰的数字显示器可显示透射比,吸光度,浓度和所设置的波长,提高了仪器的读数准确性;(4) 采用最新微机处理技术,仪器具有自动设置0%T和100%等控制功能;(5) 仪器配有标准的RS-232双向通讯接口,不仅可向计算机发送测试参数,还可接收计算机发出的指令.(6) 在已知标准溶液浓度前提下,测定未知样品浓度;(7)在已知标准溶液浓度斜率前提下,测定未知样品浓度.3.2 7200型分光光度计使用方法(基本操作1)3.2.1 基本操作(1)通电---仪器自检----预热20min;(2)用键设置测试方式:透射比(T),吸光度(A),已知标样浓度方式(C)和已知标样浓度斜率(K)方式;(3)波长选择:用波长调节旋钮设置所需的单色光波长;(4)放样顺序:打开样品室盖,在1~4号放置比色皿槽中,依次放入%T校具(黑体),参比液,样品液1和样品液2.(5)校具(黑体)校"0.000":将%T校具(黑体)置入光路,在T方式下按"%T"键,此时仪器自动校正后显示"0.000"(6)参比液校"100"%T或"0.000"A:将参比液拉入光路中,按"0A/100%T"键调0A/100%T,此时仪器显示"BLA",表示仪器正在自动校正,校正完毕后显示"100"%T或"0.000"A后,表示校正完毕,可以进行样品测定.(7)样品测定:将两样品液分别拉入光路中,此时若在"T"方式下则可依次显示样品的透射比(透光度)若在"A"方式下,则显示测得的样品吸光度.3.2 7200型分光光度计使用方法(浓度测定)7200型分光光度仪不仅可以测定未知样品的透射比(T)和吸光度(A)这两项基本操作,还可进行未知样品浓度测定.(1)在已知标准溶液浓度前提下,测定未知样品浓度.(2)在已知标准溶液浓度斜率前提下,测定未知样品浓度.备注:以上两种浓度测定的方法请大家参照实验教学教材课后自学.3.3 7200型光栅分光光度计的使用注意事项(1)(1) 预热是保证仪器准确稳定的重要步骤.(2) 比色皿的清洁程度,直接影响实验结果.因此,特别要将比色皿清洗干净.先用自来水将用过的比色皿反复冲洗,然后用蒸馏水淋洗,倒立于滤纸片上,待干后再收回比色皿盒中.必要时,还要对比色皿进行更精细的处理,如用浓硝酸或铬酸洗液浸泡,冲洗.(3) 比色皿与分光光度计应配套使用,否则会引起较大的实验误差. 比色皿不能单个调换。
7200型可见分光光度计操作规程
7200型可见分光光度计操作规程1:开机,预热15分钟。
2:按(MODE)键将测试方式设置至第一栏T(透过率)状态。
3:打开样品室盖,放入黑体,盖上样品室盖,按0%键,至显示000.0为止。
(注:仅每次开机时做一次)4:打开样品室盖,将参比液比色皿放入第一个比色槽中,其余待测液比色皿放入其它几个槽中,盖上样品室盖。
5:调整波长盘至所需要的波长。
6:按(MODE)键将测试方式设置至你所要测定的状态(第一栏为T(透过率)状态,第二栏为A(吸光度)状态)。
7:按(100%)键,至显示100.0(T状态)或0.000(A状态)为止。
8:将被测样品依次拉(或推)入光路,读数,记录。
9:如欲测其它波长,重复4-8项即可。
10:拿出比色皿,盖上样品室盖,关机,罩上防尘罩。
注意事项:(1)仪器应放置在防震,防水,防潮,防化学腐蚀,防电磁干扰,稳压的地方。
(2)样品液以充满比色皿的三分之二体积为宜,每次使用后应拿出比色皿,并清洗干净。
(3)每次使用后应检查样品室是否积存有溢出溶液,经常擦拭样品室。
(4)仪器使用完毕应盖好防尘罩,可在样品室内放置硅胶袋防潮,但开机时要取出。
(5)如仪器长期不使用,应保证每周开机一次(两小时左右)。
7200型分光光度计(一)仪器外部部件功能7200型分光光度计(图1)是一款数字式带计算机接口的可见光分光光度计,其波长范围比721分光光度计宽,精度高于721分光光度计。
1.液晶显示器用于显示测量信息,参数及数据。
2.样品室用于放置被测样品。
3.显示器LED显示透射比,吸光度和浓度参数。
显示器右边四个LED圆点分别指示当前的测试方式。
4.键盘共有4个触摸式按键,用于控制和操作仪器。
其基本功能如下:(1)测试方式选择键(MODE)可选择您想要的测试方式。
(2)0ABS/100.0%T设置键可自动调整0吸光度和100%透射比。
(3)%T设置键将%T校具(黑体)置入光路后,按此键可自动调整%T。
VIS 7200A可见分光光度计操作说明书
4.温度与湿度 仪器最好工作在 5℃~35℃的温度环境下。如果环境温度过低,则仪器所需的稳定时间较长, 而且样品的饱和度低。相反,如果环境温度过高,用户就必须注意仪器的通风条件,而且要防 止样品挥发。如果环境温度高于 30℃,则需安装空调设备。 仪器内部的光学器件对环境湿度的敏感性较高。在潮湿地区,用户必须考虑去湿措施,以确保 光学元器件的寿命。例如用户可以在实验室内使用抽湿机。
TO START SCAN PRINT NOT LINK
WAITING
打印机未连接好 等待
三.开机 注意:在开机时,或换样品时请尽量减少比色盒盖开启的时间。 1.开打印机 可以先开启打印机,注意此时打印线已经连好,此时打印机上仅“POWER”指示灯亮。如果打 印机上“PAPER OUT”灯闪烁,则说明打印纸未装好。具体操作方法参考打印机说明书。 2.打开主机电源 打开 VIS-7200 主机电源,仪器显示板 LCD 上发生闪烁,这是正常现象,一段时间后,将显示:
5.打印机配置 VIS-7200 可配置与 PC 计算机兼容的打印机,但打印机的控制语言必需同 LQ-80 或 HP 的 PCL 控制语言兼容。具体选择方法如下: A.在工作方式选择模式下按数字“6”健。 B.输入数字”503”,再按 ENTER”键。 C.再输入数字”1”或数字”-1”,然后再按两次”ENTER”键,分别选择了 LQ-80 的控制方式或 PCL(HP) 控制方式. D.PCL 方式可配 HP 420C 或 640C 喷墨打印机. LQ-80 方式可配 EPSON LQ-80 打印机。
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分光光度计的结构与使用方法2008-12-31 10:02:01 作者:来源:互联网浏览次数:122 文字大小:【大】【中】【小】1. 分光光度法定义与应用1.1 定义: 分光光度法是利用物质所特有的吸收光谱来鉴别物质或测定其含量的分析检测技术.1.2 特点: 灵敏,精确,快速和简便,在复杂组分系统中,不需要分离,即能检测出其中所含的极少量物质.1.3 应用: 生物<>化学研究中广泛使用的方法之一,广泛用于糖,蛋白质,核酸,酶等的快速定量检测.2. 分光光度计的基本结构和工作原理2.1 分光光度计的分类2.2 分光光度计工作原理2.3 分光光度计的基本结构2.4 分光光度法的测量误差2.5 显色反应及其影响因素2.1 分光光度计的分类分光光度计的分类红外分光光度计: 测定波长范围为大于760 nm的红外光区可见光分光光度计: 测定波长范围为400~760 nm的可见光区紫外分光光度计: 测定波长范围为200~400 nm的紫外光区2.2 分光光度计工作原理人眼可见的光只占电磁波谱的很小—部分(400~760nm)它是一种频率较大的电磁波.电磁波按频率大小,从频率最小的无线电波到频率最大的γ-射线排成一列,即组成电磁波的波谱,2.2.1 分光光度计的光谱范围包括波长范围为400~760 nm的可见光区和波长范围为200~400 nm的紫外光区.不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源.钨灯的发射光谱:钨灯光源所发出的400~760nm波长的光谱,光通过三棱镜折射后,可得到由红,橙,黄,绿,蓝,靛,紫组成的连续色谱;该色谱可作为可见光分光光度计的光源.氢灯的发射光谱:氢灯能发出185~400 nm波长的光谱,可作为紫外光光度计的光源.2.2.2 物质的吸收光谱(1)如果在光源和棱镜之间放上某种物质的溶液,此时在屏上所显示的光谱已不再是光源的光谱,它出现了几条暗线,即光源发射光谱中某些波长的光因溶液吸收而消失,这种被溶液吸收后的光谱称为该溶液的吸收光谱.不同物质的吸收光谱是不同的.因此根据吸收光谱,可以鉴别溶液中所含的物质.2.2.2 物质的吸收光谱(2)当光线通过某种物质的溶液时,透过的光的强度减弱.因为有一部分光在溶液的表面反射或分散,一部分光被组成此溶液的物质所吸收,只有一部分光可透过溶液.入射光 = 反射光 + 分散光 + 吸收光 + 透过光如果我们用蒸馏水(或组成此溶液的溶剂)作为"空白"去校正反射,分散等因素造成的入射光的损失,则:入射光 = 吸收光十透过光2.2.3 物质吸光度(A)与透射比(T)的关系设 I0 为经过空白校正后入射光的强度;I 为透过光的强度.根据实验得知 I = I0 ?10-εc l式中,c 表示吸收物质的摩尔浓度;l 表示吸收物质的光径,用cm表示;ε表示吸收物质的摩尔消光系数,它表示物质对光的吸收特性,不同物质的ε数值不同. 所以 I / I0 = 10-εc l令 T(透射比) = I / I 0 T = 10-εcl若以T对吸收物质的浓度作图,则得图1-5-2中的曲线.由上式可得 1g(1 / T) = εc llg(l / T)为物质的吸光度(A) A = 1g(1 / T)2.2.4 Lambert -Beer定律( E = εc l)上式说明了物质的吸光度与吸收物质的浓度和液层的厚度成正比,这就是光吸收的基本定律--Lambert-Beer(朗伯-比耳)定律.2.3 分光光度计的基本结构无论哪一类分光光度计都包括 :光源,单色器,吸收池,检测器和测量仪表.分光光度计各部件的次序如图所示:5个基本部件分光光度计的基本部件(1):光源: 分光光度计上常用的光源有两种:钨丝灯或氢灯,在可见光区,近紫外光区和近红外光区常用钨丝灯作为光源;在紫外光区多使用氢弧灯.单色器:把混合光波分解为单—波长光的装置.在分光光度计中多用作为色散元件.吸收池比色杯,比色皿,比色池)一般由玻璃,石英或熔凝石英制成,用来盛被测的溶液.在低于3 50 nm的紫外光区工作时,必须采用石英池或熔凝石英池.分光光度计的基本部件(2):吸收池(比色皿)必须与光束方向垂直.此外,每套比色皿的质料,厚度应完全相同,以免产生误差.比色皿上的指纹,油污或壁上的沉积物都会显著地影响其透光性,因此在使用前务必彻底清洗.常用光电池,光电管和光电倍增管三种.测量装置—般常用的紫外光和可见光分光光度计有3种测量装置,即电流表,记录器和数字示值读数单元.现代的仪器常附有自动记录器,可自动描出吸收曲线.检测器棱镜与光栅棱镜: 光波通过棱镜时,不同波长的光折射率不同;因而能将不同波长的光分开.玻璃对紫外线的吸收力强,故玻璃棱镜多用于可见光分光光度计.石英棱镜可在整个紫外光区传播光,故在紫外光分光光度计中广为应用.衍射光栅: 在石英或玻璃表面上刻划许多平行线(每英寸约刻15 000—30 000条).由于刻线处不透光,通过光的干涉和衍射使较长的光波偏折角度大,较短的光波偏折角度小,因而形成光谱.棱镜单色器装置示意图光源照到棱镜(或光栅)以前,先要经过一个入射狭缝,再通过平行光镜使成为平行光束投到棱镜上.透过棱镜的光再经另一聚光镜,在此聚光镜的焦面内可得一清楚的光谱图.如在焦线处放—出射狭缝,转动棱镜使光谱移动,就可以从出射狭缝射出所需要的单色光.整个装置称为"单色器"检测器---光电池光电池装在一个特制的匣子里面由3层物质组成的圆形或长方形薄片.第一层是一种导电性良好的金属,这是光电池的负极.中间极薄的一层是半导体硒,第3层是铁,这是光电池的正极.当光电池受光照射以后,半导体硒的表面逸出电子,这些电子只向负极方向移动,而不向正极移动,因此在上下两金属片间产生一个电位差,线路连通时即产生电流检测器---光电管光电管光电管是由封装在真空透明封套里的一个半圆柱型阴极和一个丝阳极组成.阴极的凹画上有一层光电发射材料,此种物质经光照射可发射电子.当在两极间加有电位时,发射出来的电子就流向丝阳极而产生光电流.对于相同的辐射强度,它所产生的电流约为光电池所产生电流的1/4.由于光电管具有很高的电阻,所以产生的电流容易放大 .检测器---光电倍增管光电倍增管它比普通的光电管优越,它可将第一次发射出的电子数目放大到数百万倍 .当电子打在兼性阳极上时,能引起更多的电子自表面射出.这些射出的电子又被第二个兼性阳极所吸引,同样再产生更多的电子.此过程重复9次后,每个光子可形成106~107个电子.这些电子最后被收集在阳极上.所得到的倍增电流可进一步加以放大和测量.2.4 分光光度法的测量误差分光光度法的测量误差选择适宜波长的入射光控制吸光度A的遍数范围选择适当的参比溶液仪器测量误差测量条件选择2.4.1 仪器测量误差由朗伯-比尔定律可知,只有在一定的浓度范围内,即一定的吸光度范围同内,由分光光度计测量所引起的测定结果的相对误差才是较小的;当透光率接近0或 1.0时,其相对误差趋于无限大;一般在百分透光率在10~80%的范围内(即吸光度在1~0.1),浓度测量相对误差较小;对于精密度高的仪器.当吸度 A=0.7-0.2时(百分透光率约为20-60%,测量误差约为1%.2.4.2 测量条件选择(1)选择适宜波长的入射光:由于有色物质对光有选择性吸收,为了使测定结果有较高的灵敏度,必须选择溶液最大吸收波长的入射光.(2)控制吸光度A的准确的读数范围:由朗伯-比耳定律可知,吸光度只有控制在0.2~0.7读数范围内时,测量的准确度较高.(3)选择参比溶液:参比溶液是用来调节仪器工作零点的.若样品溶液,试剂,显色剂无无色可用蒸馏水作参比溶液;反之应采用不加显色剂的样品液作参比溶液.2.5 显色反应及其影响因素显色反应及其影响因素显色反应一般要求影响显色反应因素选择性好灵敏度高生成的有色化合物性质稳定显色剂与有色物颜色反差大显色反应要易于控制显色剂用量反应液的酸碱度(pH)反应温度显色反应时间干扰离子的影响2.5.1 显色反应一般要求(1)选择性好:显色剂最好只与一种被测组分起显色反应;(2)灵敏度高:灵敏度高有笪微量组分的测定;(3)有色化合物性质稳定:确保前后测定准确.(4)显色剂与有色物颜色反差大:两者最大吸收波长之差应大于60nm;(5)显色反应要易于控制:结果的确保实验再现性.2.5.2 影响显色反应的主要因素(1)显色剂用量:通过实验来确定最适用量;(2)反应液的酸碱度(pH)溶液酸碱度直接影响金属离子与显色剂存在形式以及有色化合物组成的稳定性.(3)反应温度:不同的显色反应需要不同的反应温度,一般显色反应可在室温下完成.(4)显色反应时间:显色反应的速度有快有慢.(5)干扰离子的影响:应采用适当方法消除其影响.3. 7200型分光光度计的正确使用方法3.1 结构和工作原理3.1.1 仪器结构3.1.2 工作原理3.1.3 特点3.2 使用方法3.3 注意事项3.1.1 7200型分光光度计仪器结构7200型光栅分光光度计由光源,单色器,试样室,光电管,线性运算放大器,对数运算放大器及数字显示器等部件组成,基本结构如下图所示.1.光源;2.单色器;3.试样室;4.光电管;5.线性运算放大器;6.对数运算放大器;7.数字显示器3.1.2 7200型分光光度计工作原理(图)7 2 0 0型光栅分光光度计光学系统示意图1.光源灯;2.滤光片;3.球面反射镜;4.入射狭缝;5.保护玻璃;6.平面反射镜;7.准直镜;8.光栅;9.保护玻璃;10.出射狭缝; 11.聚光镜;12.试样室; 13.光门;14.光电管;3.1.2 7200型分光光度计工作原理(文)由光源灯(1)发出连续辐射光线,经滤光片(2)和球面反射镜(3)至单色器的入射狭缝(4)聚焦成像,光束通过入射狭缝(4)经平面反射镜(6)到准直镜(7)产生平行光,射至光栅(8)上色散后又以准直镜(7)聚焦在出射狭缝(10)上形成一连续光谱,由出射狭缝选择射出一定波长的单色光,经聚光镜 (11)聚光后,通过试样室(12)中的测试溶液部分吸收后,光经光门(13)再照射到光电管(14)上.调整仪器,使透光度为100%,再移动试样架拉手,使同一单色光通过测试溶液后照射到光电管上.如果被测样品有光吸收现象,光量减弱,由光电转换元件将变化的光信号转变为电信号,经线性运算放大器和对数运算放大器处理,将光能的变化程度通过数字显示器显示出来.可根据需要直接在数字显示器上读取透光度(T),吸光度(A)或浓度(C).3.1.3 特点(1) 具有低杂色光,高分辩率的单光束光路结构的单色器;(2) 具有良好的稳定性,重现性和精确的测量读数;(3) 明亮清晰的数字显示器可显示透射比,吸光度,浓度和所设置的波长,提高了仪器的读数准确性;(4) 采用最新微机处理技术,仪器具有自动设置0%T和100%等控制功能;(5) 仪器配有标准的RS-232双向通讯接口,不仅可向计算机发送测试参数,还可接收计算机发出的指令.(6) 在已知标准溶液浓度前提下,测定未知样品浓度;(7)在已知标准溶液浓度斜率前提下,测定未知样品浓度.3.2 7200型分光光度计使用方法(基本操作 1)3.2.1 基本操作(1)通电---仪器自检----预热20min;(2)用键设置测试方式:透射比(T),吸光度(A),已知标样浓度方式(C)和已知标样浓度斜率(K)方式;(3)波长选择:用波长调节旋钮设置所需的单色光波长;(4)放样顺序:打开样品室盖,在1~4号放置比色皿槽中,依次放入%T校具(黑体),参比液,样品液1和样品液2.(5)校具(黑体)校"0.000":将%T校具(黑体)置入光路,在T方式下按"%T"键,此时仪器自动校正后显示"0.000"(6)参比液校"100"%T或"0.000"A:将参比液拉入光路中,按"0A/100%T"键调0A/100%T,此时仪器显示"BLA",表示仪器正在自动校正,校正完毕后显示"100"%T或"0.000"A后,表示校正完毕,可以进行样品测定.(7)样品测定:将两样品液分别拉入光路中,此时若在"T"方式下则可依次显示样品的透射比(透光度)若在"A"方式下,则显示测得的样品吸光度.3.2 7200型分光光度计使用方法(浓度测定)7200型分光光度仪不仅可以测定未知样品的透射比(T)和吸光度(A)这两项基本操作,还可进行未知样品浓度测定.(1)在已知标准溶液浓度前提下,测定未知样品浓度.(2)在已知标准溶液浓度斜率前提下,测定未知样品浓度.备注:以上两种浓度测定的方法请大家参照实验教学教材课后自学.3.3 7200型光栅分光光度计的使用注意事项(1)(1) 预热是保证仪器准确稳定的重要步骤.(2) 比色皿的清洁程度,直接影响实验结果.因此,特别要将比色皿清洗干净.先用自来水将用过的比色皿反复冲洗,然后用蒸馏水淋洗,倒立于滤纸片上,待干后再收回比色皿盒中.必要时,还要对比色皿进行更精细的处理,如用浓硝酸或铬酸洗液浸泡,冲洗.(3) 比色皿与分光光度计应配套使用,否则会引起较大的实验误差. 比色皿不能单个调换。