J2 Scientific GPC凝胶渗透色谱操作指导
GPC-1:凝胶渗透色谱操作手册
样品溶液的过滤使用 0.45μm 过滤头。在装有过滤头的注射器内倒入样品溶液, 缓慢推动注射器,将样品溶液通过过滤头滤到干净的小试管中。然后用干净的溶剂 清洗过滤头数次。
(3)装完样品后,扳动进样阀扳手从 Load 位→Inject 位→Load 位→Inject 位,共三 下,动作要利落,否则会带来保留时间的误差。此时,窗口底栏显示 Single inject-running。
6. 到 设 定 的 运 行 时 间 后 , 仪 器 自 动 停 止 数 据 采 集 , 窗 口 底 栏 显 示 Single inject-complete。
凝胶渗透仪操作手册
6. 开计算机 打开计算机,双击Millennium32快捷键,出现Login Window; 点Login,输入Password:manager,OK; 从 Project 框中,选择自己课题组的 Project。
五. 测试样品
1. 在Millennium32主窗口,双击Run Samples,选择R-2410-T(THF系统)或L-2410(DMF 系统)或UV(紫外检测器),进入QuickSet窗口。
−−
∑∑ ∑∑ ∑ Mn =
wi = ni
niMi = ni
NiMiBiblioteka n---摩尔数 w---重量 N---摩尔分数 M---分子量
2. 重均分子量Mw 在一个高聚物体系中,各种大小分子的重量分数与其相应的分子量相乘,所得的各个 乘积的总和,定义为重均分子量。它是按重量统计平均的。
高效凝胶渗透色谱法
高效凝胶渗透色谱法
高效凝胶渗透色谱法(Gel Permeation Chromatography,GPC),又称凝胶过滤色谱,是一种分离大分子化合物的色谱技术。
该技术基于样品分子在凝胶纳米孔道中的渗透性差异,通过溶液中大分子与凝胶孔道的相互作用,实现溶液中分子的分离。
高效凝胶渗透色谱法主要包括以下步骤:
1. 样品制备:将待分离的大分子溶于适当的溶剂中,并使用过滤器或超滤器去除杂质。
2. 色谱柱选择:根据溶液中分子的分子量范围选择合适的高分子凝胶柱。
常用的凝胶材料包括聚合物和硅胶。
3. 柱温控制:根据样品性质,可选择恒温柱柱温控制,提高分离效果。
4. 流动相选择:根据样品的性质选择合适的流动相,常用的流动相包括有机溶剂和缓冲溶液。
5. 柱体填充:将凝胶填充到柱体中,保证凝胶均匀分布。
6. 样品进样:将样品溶液注入柱体,通过凝胶孔道渗透分离。
7. 分离分析:样品分子在凝胶孔道中的渗透速度不同,根据渗透速度的大小进行分离分析。
8. 检测器检测:通过检测器检测分离后的样品,常用的检测器包括紫外-可见光谱仪和光散射检测器。
高效凝胶渗透色谱法广泛应用于聚合物、蛋白质、天然高分子等大分子的分离和纯化。
与其他色谱技术相比,高效凝胶渗透色谱法具有分辨率高、选择性好、样品制备简单等优点,是一种重要的分离技术。
凝胶渗透色谱法测定聚氯乙烯的分子量分布
凝胶渗透色谱法测定聚氯乙烯的分子量分布凝胶渗透色谱法是一种常用的测定高分子化合物分子量分布的
方法。
该方法基于高分子在凝胶柱中的渗透速率不同而实现分离。
聚氯乙烯是一种常见的塑料材料,其分子量分布对其性能和应用具有重要影响。
本文将介绍如何利用凝胶渗透色谱法测定聚氯乙烯的分子量分布。
首先,准备样品。
将聚氯乙烯样品溶解于合适的溶剂中,并将其过滤以去除杂质和颗粒物。
将样品注入凝胶柱中,通常使用聚丙烯酰胺凝胶柱。
在注入样品前,必须对凝胶柱进行校准,以确保凝胶孔径的一致性。
接下来,将凝胶柱连接到色谱仪,并以适当的流速进行操作。
当样品进入凝胶柱时,分子量较大的聚合物分子会受到较大的阻力,因此在凝胶柱中的渗透速度较慢。
相反,分子量较小的聚合物分子会受到较小的阻力,因此在凝胶柱中的渗透速度较快。
这样,聚合物分子将被分离并按分子量分布逐渐排列。
最后,使用检测器检测样品,通常使用光散射检测器。
光散射检测器可以测量聚合物分子的光散射强度,并据此计算其分子量分布。
将测得的数据经过处理和分析,即可得到聚氯乙烯的分子量分布。
总之,凝胶渗透色谱法是一种常用的测定聚合物分子量分布的方法,对于测定聚氯乙烯的分子量分布也十分适用。
该方法操作简单、可靠,可以用于质量控制和研究聚合物性质的分析。
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凝胶渗透色谱柱安全操作及保养规程
凝胶渗透色谱柱安全操作及保养规程凝胶渗透色谱柱是生物分离和纯化中常用的工具。
为了确保设备的正常运转和用户的人身安全,本文将介绍凝胶渗透色谱柱的安全操作和保养规程。
一、准备工作在进行凝胶渗透色谱柱分离和纯化实验之前,需要做好以下工作:1.确认实验室内的安全防护措施是否齐全,并穿好防护衣物和手套等个人防护用品。
2.检查凝胶渗透色谱柱是否完好,特别是注意检查接口处是否有裂纹或断裂,如果有需要及时更换。
3.检查色谱柱的滤芯是否清洁,如有需要就更换滤芯。
4.将凝胶渗透色谱柱安装在色谱柱支架上,并连接好色谱柱两端的管道,确保管道连接处紧密无漏。
二、样品制备在进行凝胶渗透色谱柱分离和纯化实验前,需要对样品进行处理,一般包括以下步骤:1.样品离线浓缩:使用超滤器等离子体固定离子将样品离线浓缩。
2.样品调整:将调整剂或洗涤剂加入到样品中,以调整样品的pH值,离子强度等参数。
3.样品过滤:通过微孔过滤器将样品进行过滤,以去除悬浮粒子和杂质。
4.样品冷藏:将处理好的样品放入低温冰箱中冷藏,以方便后续实验操作。
三、凝胶渗透色谱柱的操作步骤1.开始操作前需要进行预流洗操作,在预流洗中需要使用上述处理好的样品进行洗涤,并进行管道空气排除操作,这样可以确保色谱柱和管道内都没有气泡和空隙。
2.样品进样:将经处理好的样品注入色谱柱的进样口,并进行样品的压力调节操作,确保样品在色谱柱内的流动状态符合要求。
3.分离纯化:根据实验要求,进行分离纯化等操作。
4.实验结束后,要进行终流洗操作,将色谱柱内的样品和膜材洗净。
注意,在操作过程中要对色谱柱和管道进行清洗和消毒处理,以防止实验中残留物质的影响。
四、凝胶渗透色谱柱的保养规程1.对于已经使用过的凝胶渗透色谱柱,需要进行周全的清洁和消毒处理,以消除污垢和杂质,并防止细菌生长。
2.长期闲置的凝胶渗透色谱柱需要进行密封存放,以防止附着微生物和灰尘等影响。
3.对色谱柱的使用寿命要进行控制和管理,定期进行检查和更换,避免老化和磨损等问题带来的影响。
凝胶渗透色谱(GPC)
凝胶渗透色谱(GPC)1. 简介凝胶渗透色谱(Gel Permeation Chromatography,简称GPC)是一种常用的分离和分析高分子化合物的方法。
该技术基于样品中高分子与凝胶基质之间的相互作用特性进行分离,并通过检测其分子量进行定性和定量分析。
2. 原理GPC的原理基于高分子在溶剂中形成的动态螺旋结构。
在这个多孔的凝胶基质中,高分子可以通过不同的速度渗透进入孔隙中,较大分子量的高分子会更难进入孔隙,而较小分子量的高分子则相对容易进入。
因此,在GPC中,高分子化合物会根据其分子量的大小在凝胶柱中得到分离,从而实现对样品的分析。
3. 实验操作3.1 样品制备:将待分析的高分子化合物溶解在合适的溶剂中,得到样品溶液。
确保样品溶液中没有明显的悬浮物或杂质。
3.2 柱装填:将凝胶柱装入色谱柱座,并根据柱座的要求进行调整和固定。
3.3 校准:使用一系列已知分子量的标准品进行校准。
将标准品溶液以一定流速注入凝胶柱中,记录各标准品的保留时间。
3.4 样品进样:使用自动进样器或手动进样器将样品溶液以适当流速注入凝胶柱中。
3.5 分离:样品在凝胶柱中进行凝胶渗透分离,不同分子量的高分子以不同的速度通过凝胶基质,完成分离。
3.6 检测:通过不同的检测器检测凝胶柱中流出的样品,常用的检测器包括紫外-可见光谱检测器、折光率检测器等。
3.7 数据处理:根据标准品的保留时间和已知分子量,结合样品的保留时间,计算出样品的分子量。
4. 应用领域GPC广泛应用于高分子化合物的分析和研究领域。
主要应用包括但不限于以下几个方面:•分析聚合物的分子量分布:通过GPC可以获得聚合物样品的分子量分布情况,了解样品中分子量大小的范围和占比,有助于进一步研究和应用。
•聚合物纯度分析:GPC可以用于判断聚合物样品的纯度,通过检测样品中的低分子量杂质,评估样品的纯净度。
•聚合物杂质分析:GPC可以用于分析聚合物样品中的杂质物质,如副产物、残留单体等。
J2ScientificGPC凝胶渗透色谱操作指导
J2ScientificGPC凝胶渗透色谱操作指导J2 Scientific GPC凝胶渗透色谱操作指南应用部分在您阅读本指南之前,最好先熟悉仪器的操作,并已经掌握<软件中文操作手册>中的内容。
本指南旨在帮助新用户掌握仪器的维护,方法建立及简单的故障排除,北京绿绵巨贸科贸有限公司对此指南保留全部权力,任何未经允许的复制、转载及其他以赢利为目的的商业行为均构成对本公司的侵权。
凝胶渗透色谱原理简介Accuprep系统结构及工作框图注意事项如何建立适合我的应用的方法GPC柱的维护和重新装填如何备份数据常见故障分析凝胶渗透色谱原理简介凝胶渗透色谱,简称GPC,是一项比较传统的分离技术,GPC的柱子由化学惰性的中空小球组成,利用空间排阻的原理对样品进行分离,详见下图:小分子通过填料“球”中的孔大分子不能从孔中通过由于小分子化合物会从填料的孔中穿过,而大分子从填料周围的空间穿过,会造成小分子与大分子之间的行程差距,这样大分子与小分子会先后从柱中馏出,起到分离的作用。
由于这一分离技术不受样品极性的影响,所以对于色谱用户来说,是一种非常有效解决色谱柱不能分开的样品的手段,尤其是对于脂肪类,蛋白及色素类大分子干扰物,这些物质对于色谱柱,进样口来说非常危险,而在生物源样品当中的含量一般又比较高,那么在进行样品分析之前进行一步GPC净化就显得非常必要了。
Accuprep系统结构及工作框图TM是由美Accuprerp国J2 Scientific公司生产的凝胶渗透样品净化系统,早在上世纪80年代就引入中国,目前其产品型号主要有手动AccuPrepJr和自动AccuPrep两种,在2005年该公司又推出了新型TM 的AccuprerpMPS系统,体积进一步小型化,并能整合计算机及在线浓缩,SPE等多种技术,更加趋于成熟。
由于目前大家采购这一仪器主要是为了提高效率,本指南将重点放在对自动仪器的介绍方面。
TM自动系 TM手动系Accuprerp统 Accuprerp统AccuPrep MPS自动系统 AccuPrep MPS +AccuVap GPC在线浓缩系统一台完整的GPC系统包括几个部分:触摸屏,控制模块,输送泵,检测器,自动进样器和软件部分。
gpc凝胶色谱法
GPC凝胶色谱法(Gel Permeation Chromatography)是一种常用的高效分离和纯化大分子化合物的方法。
它利用多孔凝胶填充柱,通过溶剂的流动来实现样品分离。
本文将详细介绍GPC凝胶色谱法的原理、操作步骤和应用领域。
一、原理GPC凝胶色谱法基于溶液中溶剂分子能够穿过凝胶柱,而样品分子由于体积较大而无法穿过凝胶柱的特点。
在柱中填充的多孔凝胶具有不同的孔径大小,通过调整填充凝胶的孔径大小可以实现对不同分子大小的分离。
当样品溶液通过凝胶柱时,大分子会被凝胶阻挡,停留在柱上,而小分子则能够穿过凝胶柱,以较快的速度流出。
二、操作步骤1. 样品准备:将待测样品溶解在适当溶剂中,并去除悬浮物或杂质。
确保样品溶液的浓度适中,不要过于稀释或浓缩。
2. 准备柱:选择合适的凝胶柱,并根据样品大小选择合适的填充凝胶。
将凝胶柱放入色谱系统中,并用适当的溶剂预洗柱体,以去除空隙中的杂质。
3. 样品进样:使用自动进样器或手动进样器将样品溶液注入色谱系统中,确保样品进入凝胶柱。
4. 溶剂流动:打开溶剂泵,使溶剂以一定的流速通过凝胶柱,保持稳定的流速和压力。
5. 检测器测量:在溶剂流动的同时,使用合适的检测器(如紫外检测器)对流出的溶液进行连续监测。
记录下各组分的峰面积或峰高度,以及相对保留时间。
6. 数据处理:根据样品的分子量和峰面积或峰高度,绘制标准曲线,从而得到待测样品的分子量分布。
三、应用领域1. 聚合物研究:GPC凝胶色谱法是聚合物分子量分布分析的重要手段。
通过测定不同聚合物样品的分子量分布,可以评估聚合反应的效果、控制聚合物的质量以及研究聚合物的性质和结构。
2. 生物医药领域:GPC凝胶色谱法在生物医药领域中被广泛应用于蛋白质、多肽和核酸等生物大分子的分离和纯化。
它可以帮助研究人员获取纯度高、分子量分布窄的样品,为后续的生物学研究和制剂开发提供可靠的基础数据。
3. 环境监测:GPC凝胶色谱法也常用于环境监测中,例如对水体中有机物的分析和大气颗粒物的检测。
凝胶渗透色谱仪安全操作及保养规程
凝胶渗透色谱仪安全操作及保养规程凝胶渗透色谱仪是一种用于生物大分子的分析、纯化和鉴定的仪器,其操作需要专业的训练和严格的安全措施。
本文将介绍凝胶渗透色谱仪的安全操作和保养规程,以保证仪器的正常运行和使用者的安全。
安全操作规程1. 仪器放置•将仪器放置在平稳、稳定、通风的地方,不要放在受潮或温度变化过大的地方。
•仪器连接电源和外部设备时,务必先关闭所有电源。
插头请间隔15秒以上才插上或拔下。
•避免仪器接触到强磁场或电磁场。
2. 样品操作•在实验前确认好样品的溶解度,以避免对仪器产生损害。
•操作前务必先阅读说明书,并检查所有螺丝是否已经拧紧。
•打开电源前,先检查好所有的液体管道和流量计是否正常。
•样品操作需要手套和护目镜。
•在样品溶液中加入试剂或溶解物质时,注意不要让其沾到仪器外表部分。
3. 仪器开机和关闭•在开机前需要检查好所有的管道是否插牢。
•开机前,需等待电脑彻底启动。
•关闭仪器前,需要关闭所有输入和输出的阀门,并关掉所有流量计和泵,关闭电源。
4. 紫外吸收检测器的使用•在使用紫外吸收检测器时,注意不要拆除或干扰探头。
•在更换探头时,不能在不断电状态下操作。
•紫外吸收检测器需要定期校准和保养。
5. 保养和维修•在仪器长时间未使用时,堵住所有连接管道以防止灰尘和脏物进入。
•定期清洗所有的通道和阀门。
•定期维护仪器并更换易损件。
•进行维护和保养时,需要切断电源并等待15分钟左右。
保养规程1. 仪器清洁•定期清洗仪器表面,避免脏物和灰尘进入机内妨碍使用,同时也可以延长仪器使用寿命。
•清洁时,应使用软布和清洁剂,不要使用含有酸、碱、切割剂或抛光剂的清洁剂或物质。
2. 管路清洁•定期清洁管路,避免有污垢和杂乱物质导致管道堵塞和流速减慢。
•管路清洁时,应使用特殊的清洗剂和保洁剂,而不能使用普通的清洁剂物质,更不能使用硫酸、盐酸、硫酸亚铁、亚硝酸钠等强酸碱性物质进行清洗。
3. 更换易损件•仪器需要定期更换易损件,以保证仪器的正常使用和准确性。
凝胶渗透色谱仪(GPC)基础知识及操作培训
体积排除流程示意图
进样口 混合器
色 谱 柱
检测器
溶剂
废液
GPC的基本结构
• 输液系统(包括溶液储存器、输液泵、进样器等); • 色谱柱系统(包括柱温控制箱); • 检测器(RI、UV、LS、VS等); • 数据收集及数据处理系统包括模数转换器、计算机、打印
机/绘图仪等)。
数均分子量
Ni个
分子个数(N)
N2个
N1个
Nj个
M1 M2
Mi
Mj
分子量(M)
Mn =
M1N1+M2N2+...+MiNi+…MjNj N1+N2+…+Ni…+Nj
重均分子量
20
Wig
重量(N)
W2g
W1g
Wjg
M1 M2
Mi
Mj
分子量(M)
M1W1+M2W2+...+MiWi+…MjWj Mw =
色谱分类方法-按两相状态分
色谱术语
➢ 基线:色谱柱后仅有纯流动相进入检测器时流出曲线 ➢ 峰高:色谱峰顶点与基线的距离 ➢ 保留值
凝胶色谱法
• 凝胶色谱法又称分子尺寸排阻色谱法,主要用于高聚物的相对分子质量及 其分布的测试,是液相色谱的一种分离模式。 SEC:Size Exclusion Chromatography,尺寸排阻色谱 GPC:Gel Permeation Chromatography,凝胶渗透色谱 GFC:Gel Filtration Chromatography,凝胶过滤色谱 从分离原理看,使用分子尺寸排阻色谱(SEC)较为确切。
酰胺凝胶 • 木质素凝胶等
J2 Scientific GPC凝胶渗透色谱操作规程
J2 Scientific GPC凝胶渗透色谱操作规程1 打开稳压电源和电脑,打开GPC和自动进样器。
2 运行AccuPrep软件,点击Use Autoinject,进入工作界面。
3 仪器自检,预热30min,并检查流动相的量是否满足需要。
4 在流动相(6ml)中加入目标物的标准物质,编辑序列,选择DEFAULT方法(运行30min,4.7ml/min,no collection),运行AccuChrome确定目标物收集时间。
5 依据目标物收集时间,编辑方法,编辑序列,选择相应方法,运行序列。
6 序列运行完毕后依次关闭工作软件、自动进样器、GPC、电脑、稳压电源。
注意事项:1 品在进样前必须经0.45u的微孔滤膜过滤,去除颗粒物。
2 水量大的样品在进样前须脱水。
3 动相使用前要脱气,并将系统中气泡赶尽后进样。
4 在上GPC前须进行溶剂转换,将样品转换成GPC所用的流动相,一般来说除石油醚外,必须进行这样的转换。
如果采用乙酸乙酯等与水互溶的溶剂进行萃取,最好过无水硫酸钠脱水。
如果溶剂无法进行转换,那么不同的溶剂总量不得大于进样量的10%。
5 器配置的GPC柱使用乙酸乙酯:环己烷(1:1)流动相,请不要随意变更流动相的比例及组成。
6 统主要采用尼龙接头,在连接时适当拧紧即可,过度用力会造成螺纹损坏。
7 TFE的连接管比较脆,不可折成死弯,并在移动仪器时小心。
8 禁使用酸、碱性流动相,严禁使用水做为流动相,严禁使用缓冲盐。
严禁无流动相运行,致使柱抽干。
9 动相最好每次配制的量够用,如果放置时间过长,最好重新配制。
对于乙酸乙酯来说长时间放置会吸收水分,二氯甲烷吸水后会产生盐酸,这些都非常不利于GPC分析。
对于快速柱来说,脂肪耐受力为0.5克;传统柱为1克,进样前请以此为根据来计算取样量。
凝胶色谱GPC实验步骤
一、实验目的:1. 掌握PL—120型号凝胶渗透色谱(gel permeation chromatography,GPC)的工作原理。
2. 掌握凝胶渗透色谱仪的基本操作及数据处理方法。
3. 利用凝胶渗透色谱仪测定聚合物的分子量及其分布。
二、基本原理:分子量的多分散性是高聚物的基本特征之一。
聚合物的性能与其分子量和分子量分布密切相关。
凝胶渗透色谱(gel permeation chromatography,GPC)是液相色谱的一个分支,已成为测定聚合物分子量分布和结构的最有效手段。
其还可测定聚合物的支化度,共聚物及共混物的组成。
采用制备型的色谱仪,可将聚合物按分子量的大小分级,制备窄分布试样,供进一步分析和测定其结构。
该方法的优点是:快捷、简便、重视性好、进样量少、自动化程度高。
凝胶色谱的分离机理众说不一,有体积排除、限制扩散、与流动分离等各种解释。
实验证明,体积排除的分离机理起主要作用。
因此,这一技术又被赋予另一个名称:体积排除色谱(size exclusion chromatography,SEC)、图1. GPC分离过程示意图圆球表示颗粒;黑点表示溶质分子在凝胶色谱中会有三种情况,一是分子很小,能进入分子筛全部的内孔隙;二是分子很大,完全不能进入凝胶的任何内孔隙;三是分子大小适中,能进入凝胶的内孔隙中孔径大小相应的部分。
大、中、小三类分子彼此间较易分开,但每种凝胶分离范围之外的分子,在不改变凝胶种类的情况下是很难分离的。
对于分子大小不同,但同属于凝胶分离范围内各种分子,在凝胶床中的分布情况是不同的:分子较大的只能进入孔径较大的那一部分凝胶孔隙内,而分子较小的可进入较多的凝胶颗粒内,这样分子较大的在凝胶床内移动距离较短,分子较小的移动距离较长。
于是分子较大的先通过凝胶床而分子较小的后通过凝胶床,这样就利用分子筛可将分子量不同的物质分离。
另外,凝胶本身具有三维网状结构,大的分子在通过这种网状结构上的孔隙时阻力较大,小分子通过时阻力较小。
GPC 凝胶渗透色谱
GPC(Gel Permeation Chromatography ) ,凝胶渗透色谱,又称为尺寸排阻色谱(Size Exclusion Chromatography,简称SEC),它是基于体积排阻的分离机理,通过具有分子筛性质的固定相,用来分离相对分子质量较小的物质,并且还可以分析分子体积不同、具有相同化学性质的高分子同系物。
凝胶渗透色谱(Gel Permeation Chromatography、GPC)1964年,由J.C.Moore首先研究成功。
不仅可用于小分子物质的分离和鉴定,而且可以用来分析化学性质相同分子体积不同的高分子同系物。
(聚合物在分离柱上按分子流体力学体积大小被分离开)1.基本原理1.1分离原理让被测量的高聚物溶液通过一根内装不同孔径的色谱柱,柱中可供分子通行的路径有粒子间的间隙(较大)和粒子内的通孔(较小)。
当聚合物溶液流经色谱柱时,较大的分子被排除在粒子的小孔之外,只能从粒子间的间隙通过,速率较快;而较小的分子可以进入粒子中的小孔,通过的速率要慢得多。
经过一定长度的色谱柱,分子根据相对分子质量被分开,相对分子质量大的在前面(即淋洗时间短),相对分子质量小的在后面(即淋洗时间长)。
自试样进柱到被淋洗出来,所接受到的淋出液总体积称为该试样的淋出体积。
当仪器和实验条件确定后,溶质的淋出体积与其分子量有关,分子量愈大,其淋出体积愈小。
(1)体积排除(2)限性扩散(3)流动分离1.2校正原理用已知相对分子质量的单分散标准聚合物预先做一条淋洗体积或淋洗时间和相对分子质量对应关系曲线,该线称为“校正曲线”。
聚合物中几乎找不到单分散的标准样,一般用窄分布的试样代替。
在相同的测试条件下,做一系列的GPC标准谱图,对应不同相对分子质量样品的保留时间,以lgM对t作图,所得曲线即为“校正曲线”。
通过校正曲线,就能从GPC谱图上计算各种所需相对分子质量与相对分子质量分布的信息。
聚合物中能够制得标准样的聚合物种类并不多,没有标准样的聚合物就不可能有校正曲线,使用GPC方法也不可能得到聚合物的相对分子质量和相对分子质量分布。
凝胶渗透色谱填料安全操作及保养规程
凝胶渗透色谱填料安全操作及保养规程凝胶渗透色谱填料是在分析样品中用于分离和纯化生物分子的一种常见方法。
凝胶渗透色谱填料由于其高分辨率、高选择性和可扩展性而被广泛应用于生物分析实验中。
为了确保实验的准确性和安全性,下面是凝胶渗透色谱填料的安全操作和保养规程。
一、实验操作环境的准备1.实验室应该保持清洁和整洁,尽量避免灰尘和其他杂质的进入。
2.实验过程中应戴上适当的个人防护用具,如实验手套、实验衣和安全眼镜,以保护个人安全。
二、填料的使用1.在使用凝胶渗透色谱填料之前,必须先进行激活和平衡处理。
根据填料的要求制备适当的激活缓冲液,并将其通过填料柱进行循环。
2.在进行样品分析之前,应该先清洗填料柱,以确保填料表面的干净和无残留。
3.对于每一次样品分析之前,都需要进行填料柱的平衡处理。
平衡步骤通常包括使用缓冲液进行预平衡和平衡操作,以确保填料的稳定性和一致性。
三、填料柱的操作1.在操作填料柱时要注意轻放,避免摔落和碰撞,以防损坏填料。
2.使用填料柱的时候,要根据填料的要求,选择适当的样品溶液和洗涤缓冲液,在操作过程中要严格控制流速和压力。
3.当填料柱使用一段时间后,需要定期进行压力测试和流量调节,以确保柱子的性能和稳定性。
四、填料柱的保养和维护1.在样品分析结束后,应及时用适当的洗涤缓冲液进行柱子的清洗,以防止填料的附着和交叉污染。
2.柱子不使用时应妥善保管,在避光和干燥的条件下存放,避免直接阳光照射和水分进入。
3.定期对填料柱进行检查和清洗,如果观察到填料柱上有任何异常或损坏,应及时更换或修复。
五、废弃物处理1.废弃物应按照规定的方法进行处理,不可随意丢弃。
2.废弃液体应分类处理,以便于回收和环境保护。
六、安全事故处置1.如果在实验过程中发生任何安全事故,应立即停止操作,保持冷静,并及时向实验室管理人员报告。
2.在处理化学品或有毒溶液时,应遵循相关安全准则和操作规程。
总结:凝胶渗透色谱填料的安全操作和保养规程是确保实验准确性和个人安全的重要措施。
凝胶净化系统(GPC)操作规程
凝胶净化系统(GPC)操作规程1.准备1.1.流动相:乙酸乙酯:环己烷(1:1),超声脱气。
1.2.样品:样品需要用流动相置换溶剂,并过滤膜(0.45 µm),方可上机。
2.凝胶净化系统(GPC)操作流程2.1.开机:将仪器及电脑各部分电源打开。
电脑登录密码为“labtech”。
原则上先开启GPC电源,待检测器自检通过(约2分钟)后,再打开仪器工作站()“GStation Workstation”。
工作站显示连击通讯成功。
2.2.清洗与平衡:点击工作站主界面左边的【手动控制】,选择【GPC信息】窗口,点击【馏分】。
注射泵<体积>输入“8”mL,点击【清洗】。
注射泵清洗完成后,在输液泵<流量>输入“5”mL/min,点击【运行】(注:色谱柱平衡时间一般为30分钟即可,若长期未使用需要适当延长平衡时间)。
同时点击【填充进样口】。
进样口填充完毕,点击【关闭】返回主界面。
2.3.方法查看:在工作站主界面左上角的<功能导航>选择【方法管理】,点击【go】。
在方法列表中点击方法文件名,点击【打开】,即可查看方法参数。
2.4.批表编辑:点击【新建】新建批表,在“方法”栏下拉菜单选择运行方法。
点击【添加】可添加样品,更改样品名称编号。
(进样管、收集起始管和收集结束管系统会根据运行的方法自动填入。
)点击【保存】保存当前批表。
点击【载入】,液体工作站会显示样品管与收集管位置,检查摆放的样品管与收集管位置是否与界面显示的位置一致(注意检查样品管支架位置是否正确、平稳)。
2.5.运行:平衡好色谱柱后,点击【批运行】2.6.关机操作:使用结束后,点击【手动操作】,选择“GPC”信息,点击“输液泵”中的【停止】按钮,将输液泵关闭后,再关闭工作站,然后分别将仪器及电脑的电源关闭。
3.新方法的建立:(1)点击工作站主界面左上角的<功能导航>选择【方法管理】,点击【go】。
凝胶渗透色谱gpc分子量测试
凝胶渗透色谱gpc分子量测试
凝胶渗透色谱(GPC)是一种用于测量分子量和分子尺寸的常用技术。
它基于分子在凝胶中的扩散行为,通过比较不同分子在凝胶中的迁移速率来确定其分子量。
以下是GPC分子量测试的基本步骤:
1. 样品准备:首先,你需要将待测样品溶解在适当的溶剂中。
对于聚合物,常用的溶剂是四氢呋喃(THF)、氯仿或二甲基甲酰胺(DMF)。
确保样品完全溶解并过滤以去除任何杂质。
2. 校准曲线:使用已知分子量的聚合物标准品进行校准。
这些标准品通常具有窄分子量分布,例如聚苯乙烯(PS)或聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。
将标准品溶解在相同的溶剂中,并在GPC仪器上进行分析。
根据标准品的保留时间和分子量之间的关系,建立校准曲线。
3. 样品加载:将待测样品加载到GPC柱上。
这可以通过注射器或自动进样器完成。
确保样品在加载过程中不会发生气泡形成或其他污染。
4. 分离和检测:将样品溶液通过GPC柱,柱子中的凝胶会选择性地吸附和分离不同大小的分子。
流动相(通常是溶剂)以恒定的流速通过柱子,使分子逐渐分离。
分离后的分子通过检测器进行检测,常用的检测器是折射率检测器、紫外可见光检测器或示差折光检测器。
5. 数据分析:根据校准曲线和样品的保留时间,可以计算出样品的分子量。
GPC软件通常会提供分析结果,包括分子量分布图、平均分子量等。
需要注意的是,GPC测试的结果受到许多因素的影响,如样品浓度、溶剂选择、柱类型和温度等。
因此,在进行GPC测试时,需要仔细控制实验条件,并遵循标准操作程序。
GPC凝胶色谱操作规程
GPC凝胶色谱操作规程GPC凝胶色谱(Gel Permeation Chromatography)是一种用于分离和测定高分子聚合物分子量分布的方法。
下面是一份简要的GPC凝胶色谱操作规程,包括样品准备、仪器操作、数据处理等步骤。
一、样品准备1. 将待测样品溶解在适量的溶剂中,使其浓度达到适合测定的范围。
2. 溶液中的固体颗粒应尽量去除,可通过过滤或离心操作来完成。
二、仪器操作1. 打开仪器电源,启动GPC系统。
2. 检查仪器各个部分的连接是否紧密,确保没有泄漏。
3. 检查流动相的质量和纯度,必要时进行更换。
4. 使用适当的毛细管或注射器将样品注入到色谱柱中。
5. 设置流动相的流速和温度,一般情况下,流速根据实验需要选择,温度一般设置在室温下进行。
6. 开始运行GPC实验,记录运行开始的时间。
三、GPC实验运行1. 设定好GPC柱的温度、流速和检测器的灵敏度等参数。
2. 打开检测器的电源,选择合适的检测波长或检测器类型。
3. 开始样品分离,记录分离过程中的响应信号,并保存数据。
四、数据处理1. 使用专用的GPC数据处理软件对得到的数据进行处理。
2. 根据响应信号与时间的关系曲线,计算出不同分子量的聚合物峰面积。
3. 将样品的峰面积与标准聚合物的峰面积进行比较,计算出待测样品的分子量分布。
4. 根据实验需要,可以生成相关的分子量分布曲线或分子量平均值等结果。
五、注意事项1. 在操作过程中,应注意保持实验环境的洁净,并避免灰尘和异物的污染。
2. 使用前应检查样品是否有异常,如有溶解不完全、有颗粒物等,应予以处理或更换。
3. 注意操作时的安全性,避免与有毒或腐蚀性物质接触。
4. 操作结束后,及时将仪器清洗干净,并进行必要的维护。
以上是一份简要的GPC凝胶色谱操作规程,但实际操作中可能因仪器和实验需求的不同会有一些细微的差距,因此在操作时应根据具体情况进行调整。
另外,此规程也建议参考实验室的操作指南和相关文献,以确保操作的准确性和可重复性。
J2ScientificGPC凝胶渗透色谱操作指导
J2 Scient ific GPC凝胶渗透色谱操作指南应用部分在您阅读本指南之前,最好先熟悉仪器的操作,并已经掌握<软件中文操作手册>中的内容。
本指南旨在帮助新用户掌握仪器的维护,方法建立及简单的故障排除,北京绿绵巨贸科贸有限公司对此指南保留全部权力,任何未经允许的复制、转载及其他以赢利为目的的商业行为均构成对本公司的侵权。
凝胶渗透色谱原理简介Accuprep系统结构及工作框图注意事项如何建立适合我的应用的方法GPC柱的维护和重新装填如何备份数据常见故障分析凝胶渗透色谱原理简介凝胶渗透色谱,简称GPC,是一项比较传统的分离技术,GPC的柱子由化学惰性的中空小球组成,利用空间排阻的原理对样品进行分离,详见下图:小分子通过填料“球”中的孔大分子不能从孔中通过由于小分子化合物会从填料的孔中穿过,而大分子从填料周围的空间穿过,会造成小分子与大分子之间的行程差距,这样大分子与小分子会先后从柱中馏出,起到分离的作用。
由于这一分离技术不受样品极性的影响,所以对于色谱用户来说,是一种非常有效解决色谱柱不能分开的样品的手段,尤其是对于脂肪类,蛋白及色素类大分子干扰物,这些物质对于色谱柱,进样口来说非常危险,而在生物源样品当中的含量一般又比较高,那么在进行样品分析之前进行一步GPC净化就显得非常必要了。
Accup rep 系统结构及工作框图Accup rerp TM是由美国J2 Scien tific 公司生产的凝胶渗透样品净化系统,早在上世纪80年代就引入中国,目前其产品型号主要有手动Acc uPrep Jr 和自动AccuP rep 两种,在2005年该公司又推出了新型的Accu prerp TMMPS 系统,体积进一步小型化,并能整合计算机及在线浓缩,SPE 等多种技术,更加趋于成熟。
系列凝胶渗透色谱仪安全操作及保养规程
系列凝胶渗透色谱仪安全操作及保养规程引言凝胶渗透色谱仪是一种常用的实验仪器,广泛应用于生物分子的分离和分析。
为了确保仪器的正常运行和使用人员的安全,建立一套科学的操作和保养规程是非常重要的。
本文档将介绍系列凝胶渗透色谱仪的安全操作及保养规程。
安全操作规程1. 穿戴个人防护装备在操作凝胶渗透色谱仪之前,用户必须穿戴个人防护装备,包括实验室白大褂、手套和安全眼镜。
这些个人防护装备能够降低实验过程中的意外风险和化学品的伤害。
2. 仪器放置凝胶渗透色谱仪应该放置在平稳的工作台上,并确保周围环境清洁、干燥。
仪器上的开关、插座和连接线应牢固可靠,不得有松动或外露的电线。
3. 操作前的准备工作在操作凝胶渗透色谱仪之前,用户需要进行以下准备工作:•检查仪器是否处于正常工作状态。
•确保色谱仪的供电和连接线都正常。
•准备好实验所需的试剂和样品。
4. 样品处理在使用凝胶渗透色谱仪之前,样品需要进行相应的处理,以确保准确的实验结果。
处理样品的步骤包括:•样品的准备:根据实验需要,将样品制备成适当的浓度和体积。
•样品的过滤:使用合适的过滤器对样品进行过滤,以去除杂质和颗粒。
5. 仪器操作步骤在凝胶渗透色谱仪的操作过程中,用户需要按照以下步骤进行操作:1.打开仪器电源。
2.开启色谱仪软件,并进行仪器初始化。
3.根据实验要求,设置合适的运行条件,包括流速、温度和波长等。
4.样品注入:将样品注入色谱柱,并启动运行。
5.监控运行过程:通过色谱软件实时监控运行过程,记录相关数据。
6.运行结束后,关闭色谱软件,关闭仪器电源。
6. 安全关机在使用凝胶渗透色谱仪之后,用户需要进行安全关机操作,具体步骤如下:1.关闭色谱软件。
2.断开仪器电源并拔掉电源线。
3.清理工作台和仪器表面的污垢。
4.检查仪器是否关闭完全。
保养规程1. 清洁定期清洁凝胶渗透色谱仪是保持其正常运行的重要措施。
用户应定期清洁仪器表面、色谱柱和附件。
注意事项如下:•使用柔软的干净布或纸巾擦拭仪器表面,避免使用含酸性、碱性或腐蚀性的清洁剂。
二氯甲烷中凝胶渗透色谱校准溶液
二氯甲烷中凝胶渗透色谱校准溶液二氯甲烷(俗称甲基氯)是一种常用的有机溶剂,具有粘度低、挥发性强、沸点适中等特点,因此在化学分析技术中有着广泛的应用。
其中,凝胶渗透色谱(Gel Permeation Chromatography,GPC)是一种常用的分析技术,主要用于高分子化合物的分子量及分子量分布的测定。
本文将介绍凝胶渗透色谱校准溶液在二氯甲烷中的使用方法、注意事项以及常见问题解答。
一、凝胶渗透色谱校准溶液的制备方法凝胶渗透色谱校准溶液是一种高分子聚合物制备的溶液,用于凝胶渗透色谱分析中的分子量校准。
制备凝胶渗透色谱校准溶液需注意以下几个方面:1.选择合适的高分子聚合物:根据待测样品的分子量范围选择相应的高分子聚合物。
常见的高分子聚合物有聚苯乙烯(PS)、聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)等。
2.溶解高分子聚合物:将高分子聚合物按照一定比例加入二氯甲烷中,并使用搅拌器进行充分搅拌,直至高分子聚合物完全溶解。
3.过滤溶液:为确保溶液中无悬浮物质,可采用滤器对溶液进行过滤处理。
4.储存溶液:将制备好的凝胶渗透色谱校准溶液保存在干燥、避光的环境中,避免溶液蒸发和受到光照。
二、凝胶渗透色谱校准溶液的使用方法凝胶渗透色谱校准溶液的使用方法如下:1.装载样品:将待测样品溶解在二氯甲烷中,可选择使用样品溶解剂将待测样品充分溶解。
2.样品进样:使用凝胶渗透色谱仪的进样器,将样品注入到色谱柱中。
3.选择流动相:根据实验的需要选择合适的流动相,在凝胶渗透色谱仪中设置相应的流速和温度。
一般来说,二氯甲烷作为溶剂是较为常用的流动相。
4.开始分析:启动凝胶渗透色谱仪,开始分析样品。
5.数据分析:通过检测得到的色谱图,根据凝胶渗透色谱校准溶液的峰高和峰面积,与待测样品的峰高和峰面积进行比较,从而得到待测样品的分子量和分子量分布信息。
三、凝胶渗透色谱校准溶液的注意事项在使用凝胶渗透色谱校准溶液时需注意以下几个方面:1.保持系统稳定:在进行凝胶渗透色谱分析时,应保持仪器和流动相的稳定性,以确保实验结果的准确性和可靠性。
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J2 Scientific GPC凝胶渗透色谱操作指南应用部分在您阅读本指南之前,最好先熟悉仪器的操作,并已经掌握<软件中文操作手册>中的内容。
本指南旨在帮助新用户掌握仪器的维护,方法建立及简单的故障排除,北京绿绵巨贸科贸有限公司对此指南保留全部权力,任何未经允许的复制、转载及其他以赢利为目的的商业行为均构成对本公司的侵权。
凝胶渗透色谱原理简介Accuprep系统结构及工作框图注意事项如何建立适合我的应用的方法GPC柱的维护和重新装填如何备份数据常见故障分析凝胶渗透色谱原理简介凝胶渗透色谱,简称GPC,是一项比较传统的分离技术,GPC的柱子由化学惰性的中空小球组成,利用空间排阻的原理对样品进行分离,详见下图:小分子通过填料“球”中的孔大分子不能从孔中通过由于小分子化合物会从填料的孔中穿过,而大分子从填料周围的空间穿过,会造成小分子与大分子之间的行程差距,这样大分子与小分子会先后从柱中馏出,起到分离的作用。
由于这一分离技术不受样品极性的影响,所以对于色谱用户来说,是一种非常有效解决色谱柱不能分开的样品的手段,尤其是对于脂肪类,蛋白及色素类大分子干扰物,这些物质对于色谱柱,进样口来说非常危险,而在生物源样品当中的含量一般又比较高,那么在进行样品分析之前进行一步GPC净化就显得非常必要了。
Accuprep 系统结构及工作框图Accuprerp TM 是由美国J2 Scientific 公司生产的凝胶渗透样品净化系统,早在上世纪80年代就引入中国,目前其产品型号主要有手动AccuPrepJr 和自动AccuPrep 两种,在2005年该公司又推出了新型的Accuprerp TM MPS 系统,体积进一步小型化,并能整合计算机及在线浓缩,SPE 等多种技术,更加趋于成熟。
由于目前大家采购这一仪器主要是为了提高效率,本指南将重点放在对自动仪器的介绍方面。
一台完整的GPC 系统包括几个部分:触摸屏,控制模块,输送泵,检测器,自动进样器和软件部分。
让我们先来认识一下仪器各部分:AccuPrep MPS 自动系统Accuprerp TM 自动系统Accuprerp TM 手动系统AccuPrep MPS +AccuVap GPC 在线浓缩系统工作框图:详见附录1。
收集架样品架柱子支架触摸屏输送泵检测器V1/V2阀柱切换阀进样环与进样阀注射泵 自动进样器注意事项:1.样品在进样前必须经0.45u的微孔膜过滤。
2.含水量大的样品在进样前须脱水。
3.对于快速柱来说,脂肪耐受力为0.5克;传统柱为1克,那么在进样前请以此为根据来计算取样量。
例如某种样品的脂肪含量为20%,那么称样量请不要大于2.5克。
4.在完成前面的样品处理后,如液液萃取,要将样品体系转换成GPC所用的流动相,一般来说除石油醚外,其它基质如丙酮,必须进行这样的转换。
而如果采用乙酸乙酯这类与水互溶的溶剂进行萃取,最好过无水硫酸钠脱水。
如果样品溶剂无法进行转换,那么不同的溶剂总量不得大于进样量的10%。
5.GPC柱要求流动相与柱子规格一致,请不要随意变更流动相的比例及组成。
6.系统主要采用尼龙接头,在连接时适当拧紧即可,过度用力会造成螺纹损坏。
7.PTFE的连接管比较脆,不可折成死弯,并在移动仪器时小心。
8.严禁使用酸,碱性流动相,严禁使用水做为流动相,严禁使用缓冲盐。
9.流动相最好每次配制的量够用,如果放臵时间过长,最好重新配制。
对于乙酸乙酯来说长时间放臵会吸收水分,二氯甲烷见光分解后会产生盐酸,这些都非常不利于GPC分析。
10.如果有其它不明事项,请咨询我公司工程师,请勿自行尝试。
如何建立适用于自己的分析方法针对一般的农药/兽药残留分析来说,样品基质中的大分子干扰物主要为色素,脂肪及蛋白,多糖等生物源的干扰物。
这类物质对于后面的色谱分析来说,是非常令人讨厌的,不但会带来噪音高,杂峰多,而且会污染色谱的进样口,离子源,并对色谱柱的寿命也会有很大影响。
虽然还有其它方法进行净化,例如氧化铝柱,酸性硅胶柱等,但这类方法多数会对待测样品有不同程度对的吸咐,会引起回收率的问题。
根据凝胶渗透色谱的原理,大分子干扰物会率先从柱子中流出,随后是小分子的目标化合物,那么对于一个GPC的方法来说,关键在于找出什么时间收集,什么时间停止收集。
为了说明如何找到准确的收集时间,我们以50%乙酸乙酯/50%环已烷的GCP色谱柱对溴氢菊酯净化为例:1.移取2ml,100ppm的溴氢菊酯标准品(请用1:1乙酸乙酯:环已烷配制)到样品瓶,并加入1ml色拉油最后定容至10ml,做为我们的待分析样品。
2.在软件中,编辑方法default.met,对于快速柱来说,第一个馏分设定30分钟不选择收集流速设定为4.7ml/min,2到5馏分都不进行设定选择记录检测器数据选择合适的柱子保存方法即可。
3.编辑样品序列,待序列运行完毕后进入accuchrome,导入数据,根据标样的峰来设定收集时间,为了保证回收率,一般来说会让收集时间段略宽于峰宽。
4.随后我们再回到Accuprep软件,新建一个方法,注意这里的时间不是保留时间,而是一个时间段,比如我们刚才运行的谱图中溴氢菊酯的出峰时间为10分钟到12.5分钟,则在这里我们设定馏份1的时间为10分钟并不收集,馏份2的收集时间为2.5分钟并收集,并修改为不记录检测器数据,最后保存方法,那么这个方法建立就完成了。
5.但是通常来说,我们的分析不会这样简单,我们通常在一个分析中要应付多达20,乃至40到50种农药,那么我们如何建立一个方法来进行这样的净化呢?其实还是很简单,我们只要找到在这个样品列表中分子量最大和最小的化合物作为开始和结束收集的标志,在谱图上找到开始出峰和结束的时间就可以了。
6.还有一类农药,在紫外检测器上并没有明显的吸收,我们如何来确定处理方法呢?一个是找一个分子量和结构相似,紫外有吸收的化合物来代替,由于GPC原理与样品的极性等化学活性无关,只与分子量大小有关,那么一般来说这样的方法完全可以找到准确的收集时间。
那么还有一种方法就是进行分段收集。
首先根据分子量信息可以大概知道待测样品会在什么时间馏出,然后将这一段时间分成几段,随后将分段收集后的样品上色谱分析,来判断其所在的位臵。
7.虽然我们很注意对柱子的清洗,但是还是难以保证会有些强极性的物质会留在柱子的填料中造成柱压升高,着色等现象,那么为了排除这些因素对保留时间的影响,对于我们已经确定好的方法,有必要在半年或一年后,进行方法的校准。
GPC柱的维护与重新装填一根GPC柱如果维护好的话,那么样品重现性会更好,柱效会比较高,寿命也会更长。
通常GPC柱处在流动相保护当中,但如果长时间停机,虽然我们有柱切换阀对柱子进行保护,一般来说柱子不会出现问题,但还是有报告柱子当中的流动相会跑掉造成柱子变干,那么此时如果开机后立刻用大流速平衡柱子,会造成柱内压力不匀,造成柱子损坏。
那么此时需要先用2ml/min的小流速平衡10分钟,再使用常规流速,并注意观察柱压的变化,直到柱压稳定并在正常的8-12psi之间即可进行分析。
一根柱在最初的使用当中,柱压一般在5-8psi,而12psi以下的柱压都可以视做正常,但要注意方法的校准。
当柱压第一次超过12psi时,将柱子以0.5ml/min 的流速反洗1小时可以起到一定的清洗作用,在反向清洗时,请将出口直接接到废液而不要再进入系统管线。
如果反洗后压力仍然过高,则应将柱子重新装填。
一般来说柱子重新装填建议采用全新的填料,当然也可以尝试将旧填料反复清洗后再装入,但寿命一般不会太久。
柱子的重新装填:请确认以下零件齐备:1 Frit, SS, 20µm, Glass Column FR506A2 O-Ring, Silicone Encapsulated CO408A3 Bed Support Holder, Glass Column CO635A4 Seal Teflon CO422A5 Plunger, Long, Glass Column CO300A6 Collar, Glass Column, Delrin CO3057 Cone, Compression CO432A如果发现零件不全请立即与我公司联系订购事宜。
装填步骤:1、在确定以上零件齐备的状态下,请准备以下必须的工具:铁架台,长颈漏斗,250ML烧杯两只,玻璃棒一只,吸管一只,适量的流动相,以及浸泡过夜的填料。
2、将柱两端的四只螺母取下,就可以将两端的封套取下,将柱子的出入口的管线放臵在烧杯中,用手握紧柱塞中部反时针将其旋松一圈至两圈即可,这时柱塞就可以从玻璃柱拨出。
将两个柱塞全部取出后,向玻璃管中加适当流动相并用玻璃棒搅动原有的填料,将其取出。
3、反复清洗玻璃管,直到玻璃管壁上不再粘有填料,将一个柱塞装好,把玻璃管垂直夹在铁架台上,装好柱塞的一端向下,在上端旋转漏斗。
4、将准备好的填料经漏斗倒入玻璃管中,并用流动相冲洗烧杯和玻璃棒,及玻璃管内壁,待玻璃管内壁没有填料后,等待流动相距离柱床一厘米左右,将另一根柱塞装入,推至柱床处旋紧。
在取出和装入柱塞时,请沿柱子轴向均匀用力,不要向其它方向摇晃以免损坏玻璃柱管。
如发现CO422A已经损坏,请予以更换。
5、重力装填的柱子在压力系统中需要重新调整。
将柱子接入系统,2ML/min的流速下检查是否有泄漏,如发现有泄漏请重复2-4步骤。
随后将流速逐渐加大至分析流速,待柱压稳定后检查柱床是否被压缩。
在被压缩的位臵做好标记,停泵,将柱子的一端与大气联通,旋松柱塞,调整柱床长度至刚才的标记即可。
6、运行标准品与原来的谱图进行比对,如发现保留时间有所漂移,则需要重新调整方法。
[溶剂的选择]所选用的溶剂应该对目标物有良好的溶解度,并对凝胶有一定的膨胀力,不能使每克凝胶的膨胀体积超过2.5ML的溶剂不能用于GPC,下表为用于Bio-Beads此部分内容引自中国疾病预防控制中心吴永宁老师的《色谱在食品安全分析中的应用》如何备份数据随着时间的推移,数据越来越多,尤其是在accuchorme软件里,导入的数据列表变得越来越长,找起数据来会非常困难。
当然您可以用工厂提供的软件J2GPCBACKUPTOOL来进行数据备份并将其从列表中先移除。
当数据很多时,可以用以下的办法来进行批量移除:1.关闭Accuchrome软件,并重启电脑。
2.在C:\program files\microsoft SQL Sever\MSSQL目录里,会发现一个目录“J2DATA”,将其重命名,如J2DA TA2004。
3.插入GPC软件光盘,重新安装“Setup data tables”和“Install DB Updates 1.01”。