制备液相色谱仪操作规程

制备液相色谱仪操作规程

1.样品准备：溶剂应使用“HPLC”级试剂、应对试样有适宜的溶解度。进样前，配制的

溶液须用0.45µm或更小孔径的过滤头过滤。

2.依次打开A泵、B泵电源、控制器电源、PDA检测器电源。

3.打开电脑电源，至WINDOWS界面出现。双击图标，打开软件进入操作界面。此时

会出现一个Shimadzu CLASS-VP 窗口，双击Instrument1图标，仪器会发出“嘟”的响声，以表示建立了与计算机的连接。随即出现主操作界面。

4.建立分析方法参数：点击图标，或用“Method/Instrument Setup”进入分析方法参数

设定画面（Instrument Setup），设置各项参数。

Pumps页面: 设定流动相的流速和组成百分比。A相的百分比由B相算出。

参数设置结束后，点击“Download”。

5.点击PDA检测器图标或（PDA setup），进入PDA检测器参数设定对话框，设

置检测波长等参数。

6.在主菜单上选择File > Method > Save as或Save保存方法文件。

7.点击Rinse autosampler图标，清洗自动进样器2～3次，然后点击Purge Autosampler图

标，进行约25分钟的清洗。

每天第一次进样之前或每次更换流动相，都应清洗autosampler并进行Auto purge。8．点击图标“Instrument On/Off”、“Turn pumps On/Off”和“Turn SPD-M10Avp Lamp On/Off”，启动仪器、泵和PDA检测器的灯源。

9．点击图标（Preview）预览基线。待基线平稳，点击图标（Autozero SPD－M10Avp）和（zeros detectors）调零。

10．进样：将样品放进样品架。

○1单个进样：点击Single Run键，此时出现一对话框，在Vial中输入样品所在位置编号，自动进样架上有。在Injection中输入所需的进样量，单位：µL。

○2连续进样：在主菜单上选择Sequence > Edit，在随即出现的对话框内输入各个样品的位置编号、重复次数、方法文件、保存路径等，编辑进样程序。然后点击Sequence Run 键，开始测试。

11．测试结束后，用流动相以5ml/min的流速冲洗30分钟，然后点击图标“Instrument On/Off”、“Turn pumps On/Off”和“Turn SPD-M10Avp Lamp On/Off”，关闭仪器、泵和PDA检测器的灯源。

12．退出软件，关闭电脑电源，然后依次关闭PDA检测器电源、控制器电源、A泵和B泵电源。