Agilent1100型高效液相色谱仪操作规程
Agilent1100高效液相色谱仪操作规程
Agilent1100高效液相色谱仪操作规程操作说明：1.开机前准备：1.1仪器设备：Agilent 1200LC ● G1322A (在线脱气机)。
● G1311A (四元泵)。
● G1329A（标准型自动进样器）。
● G1316A（柱温箱）。
● G1315A（DAD检测器）。
● 色谱柱 1.2溶剂准备：● 有机相必须是色谱级纯。
● 水相必须是二次蒸馏水或用二级蒸馏水配置的缓冲盐溶液、酸碱溶液。
● 流动相使用前必须过0.45μm的微孔滤膜。
有机相和水相微孔滤膜的选择参考下表。
产品类别代表产品品系产品特点纤维素酯类混合纤维素水相成孔性能好，亲水性好，材料成本低。
膜（CN-CA）可耐稀酸。
不适合于酮类、酯类、强酸、强碱类液体过滤。
尼龙6 通用具有亲水性，较耐碱不耐酸。
在酮、酚、聚酰胺类（PA-6）醚及高分子醇类不被腐蚀。
聚砜（PS）通用良好的化学和热稳定性，耐辐射，机械聚砜类强度高。
有机PDEF耐化学腐蚀，耐氧化，耐高温，疏聚偏氟乙烯/PDEF/PTFE 水性（酒精处理后变清水性），PTFE耐酸聚四氟乙烯膜碱性强。
具有良好的化学稳定性，耐酸碱和各种聚烯烃类聚丙烯膜有机有机溶剂。
价格便宜，但孔径分布宽。
（PP）耐高温，耐有机溶剂、耐生物降解等。
无机材料陶瓷、玻璃通用 BP、金属膜2.基本操作步骤: (一)、开机：1、打开计算机,进入中文Windows XP画面,并运行CAG Bootp Server程序（部分安装程序不需要运行Bootp）。
2、打开 1200 LC 各模块电源。
3、待各模块自检完成后，双击“仪器1 联机”图标，化学工作站自动与1200LC通讯，进入的工作站画面如下所示。
4、从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面, 点击“视图”菜单中的“仪器实际值”，“在线光谱”，“化学工作站状态”，“系统视图”,“样品视图”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。
5、把流动相放入溶剂瓶中。
农产品检测中心Agilent 1100液相色谱操作规程
农产品检测中心Agilent 1100液相色谱操作规程1、开机1.1 打开电脑电源，待电脑启动，自动弹出“CAG Bootp Server”。
1.2 打开液相色谱仪各模块电源开关，待仪器自检完毕，电脑“CAGBootp Server”会显示联机状态。
1.3 双击“Instrument(online)”打开工作站。
1.4 编辑或调用一个方法。
1.5 点击“on”仪器开始“Run”。
1.6 打开Purge 阀，排空管路中的气泡，再关闭Purge。
1.7 待基线走平，点击“sequence”，编辑序列，指定一个文件名（数据）以保存序列。
1.8 进样，数据采集自动开始。
2、数据分析2.1 数据采集完毕，进行数据分析，点击“View”下面的“Dataanalysis”进入数据分析界面。
2.2 “File”菜单下的“Load signal”选择一个数据文件。
2.3 点击“Intergration”菜单下的“Intergration Events”进行积分。
改变参数：Slop sensitivity、Area Reject或Height Reject等，点击“Intergration”菜单下的“Intergrate”进行重积分直至结果最佳。
2.4 打印报告：点击“Report”菜单下的“Print Report”打印报告。
3、关机3.1 数据分析完毕，点击“View”菜单下的“Method and run control”切换到运行控制界面。
3.2 关机前，先甲醇:水（5：95）冲洗系统20～30min，然后甲醇:水(1:1)冲洗10min，最后100%甲醇冲洗10min。
3.3 点击“Off”，关闭工作站及液相色谱电源。
4、注意事项4.1 一般用棕色瓶装水，且每日更换水，以免水长菌，堵塞管路。
4.2 做完实验后一定要冲洗系统管路。
4.3 色谱柱不用时，一定要用甲醇或色谱柱要求的溶剂浸润保存，以防色谱柱长菌堵塞。
Agilent_1100_HPLC_操作步骤
Agilent_1100_HPLC_操作步骤Agilent1100高压液相色谱仪基本操作步骤一)、开机：1、打开计算机,进入Windows NT （或Windows 2000）画面,并运行Bootp Server 程序。
2、打开 1100 LC 各模块电源。
3、待各模块自检完成后，双击Instrument 1 Online图标，化学工作站自动与1100LC 通讯，进入的工作站画面。
4、从“View”菜单中选择“Method and Run control”画面, 单击”View”菜单中的“Show Top Toolbar”，“Show status toolbar”，“Systemdiagram”,”Sampling diagram”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。
5、把流动相放入溶剂瓶中。
6、打开Purge阀。
7、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Setup pump选项，进入泵编辑画面。
8 、设Flow：5 ml/min，单击OK。
9、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Pump control选项，选中On，单击OK，则系统开始Purge，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续Purge，直到所有要用通道无气泡为止。
10、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Pump Control 选项，选中Off，单击Ok关泵，关闭Purge valve。
11、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Setup pump选项，进入Pump编辑画面，设Flow：1.0 ml/min。
12、单击泵下面的瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积。
也可输入停泵的体积。
单击Ok。
（二）数据采集方法编辑：1、开始编辑完整方法：analysis ”外的三项，单击Ok，进入下一画面。
2、方法信息：●在“Method Comments”中加入方法的信息（如：方法的用途等）。
●单击Ok 进入下一画面。
Agilent 1100series安捷伦高效液相色谱仪操作规程
Agilent1100高效液相色谱仪操作规程1.仪器组成及开机1.1仪器组成：Agilent1100高效液相色谱系统主要由工作站、在线脱气机、柱温箱、输液泵、自动进样器、检测器等部件组成。
1.2开机：1.2.1接通电源，打开计算机及工作站其它各部件开关，约30秒钟后，各部件进入待机状态，指示灯为黄色或无色。
1.2.2打开HP ChemStations,进入Instrument 1 online状态，约30秒钟后，计算机进入工作站的操作页面。
该页面主要由以下几部分组成：最上方为命令栏，依次为File,Run Control,Instrument等；命令栏下方为快捷操作图标，由多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件、保存文件等；左边为样品信息栏；中部为工作站各部件的工作流程示意图，依次为进样器→输液泵→柱温箱→检测器→数据处理→报告；中下部为动态监测信号；右下部为色谱工作参数：进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
2.色谱条件的设定(色谱条件的设定可以通过下列几种方法实现2.1直接设定在操作页面的右下部一色谱工作参数中设定。
将鼠标移移至要设定的参数如进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等，单击一下，即可显示该参数的设置页面，键入设定值后，单击“OK”，即完成。
2.2 调用已设置好的文件在命令栏“Method”下，选择“Load Method”,或直接单击快捷键操作的“Load Method”图标，选定文件名，单击“OK”，此时，工作站即调用所选用文件中设定的参数。
如欲进行修改，则可同2.1项下，在色谱工作参数中作修改；亦可在命令栏“Method”下，选择“Edit Entire Method”，在每个页面中键入设定值，单击“OK”。
即完成。
2.3 编辑新文件先在命令栏“Method”下，选择“New Method”, 之后再在命令栏“Method”下，选择“Edit Entire Method”，在每个页面中键入设定值，完成后，Save Method”, 先在命令栏“Method”下选择“Save Method”，给新文件命名，单击“OK”。
Agilent 1100 HPLC高效液相操作简要 Operational Guide
Agilent 1100 HPLC高效液相色谱仪操作简要!准备"如果配有柱塞清洗装置，确认柱塞清洗（Sealwash）管路充满10％的异丙醇。
"避免使用腐蚀性的流动相与溶剂；过滤流动相；使用高纯水；使用的流动相要互溶。
"过滤流动相，如果没有脱气机还需要对流动相进行脱气。
"过滤样品溶液!开机"打开计算机，进入windows操作系统"运行Bootp（如果是Windows 2000, Bootp将自动运行），注意：在工作站工作过程中，不能关闭Bootp。
"打开1100系统各模块的电源"待Bootp识别硬件地址后（可以看着是仪器的自检，此过程约需20秒），运行Chemstation的instrument 1 online。
!分析"建立用于样品分析的Method，请参照现场培训手册。
1．从快捷工具栏中选中Method and Runcontrol或从菜单View中选中Method and Run Control。
2．从method菜单中选New Method。
3．从method菜单中选edit entire method。
4．按提示编辑适合分析你所分析样品的方法。
5．最后通过method菜单选择save method as保存方法。
"通过Method对样品进行分析，请参照培训手册#对于单个样品1．在Method and Runcontrol视图下，调用或建立一个适合所分析样品的方法。
2．在RunControl菜单下点Sample Info，在Sample Info表单里填上所分析样品的信息。
3．在快捷工具栏中选单个样品进样的图标。
4．按start开始一个分析。
5．停止分析，可以是根据方法的设定的时间自动停止分析，也可以通过点stop停止分析。
#对于多个样品建立序列1．在Method and Runcontrol视图下，从sequence菜单下点new sequence 建立一个新的序列。
Agilent1100液相基本操作步骤
Agilent1100液相基本操作步骤一、开机前准备工作:流动相使用前必须用0.45μm滤膜过滤除去杂质，超声排气泡。
流动相如若当天没有用完，第二天要将有机相重新超声，水相要重新过滤、超声。
液相顶部托盘中放置的娃哈哈瓶中装有10%的异丙醇，依靠重力的作用冲洗前管路，实验前检查一下是否充满液体，循环流动。
A、D泵放水相，B、C泵放有机相，故将实验室液相流动相放置方法安排如下：A泵：各种水溶液（根据实验所需）C泵：有机相D泵：纯水相二、开机：1、打开计算机,进入Windows 2000画面。
2、从上而下依次打开1100 LC 各模块电源。
3、待各模块自检完成后，双击Instrument 1 Online图标，化学工作站自动与1100LC 通讯，进入的工作站画面。
4、点击“on”，系统开始初始化，初始化时各图标为黄色，初始化结束变为绿色。
右键点击流动相小瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积。
点击显示的图标，设置进样体积，检测波长等参数。
5、排气泡：扭松Purge阀，此时压力显示值瞬间降低，开始排气泡，待瓶中与管路中均无气泡，将流速慢慢调到0 ml/min（1，0.8，0.4，0.2，0），扭紧Purge阀。
6、设置流动相比例，将流速一点点升到1ml/min，待基线平稳后，进样。
三、关机：1、关机前清洗系统，如果流动相用的是有机相与纯水，需要调节不同比例进行冲洗，最后用有机相平衡；如果流动相用的是缓冲盐，冲洗时用大比例的水相先冲洗（但不能用纯水），待将缓冲盐冲洗干净后再调节流动相的比例冲洗，最后用纯有机溶剂冲洗系统。
2、冲洗完毕后，将流速一点点降到0。
3、退出化学工作站，及其它窗口。
4、自下而上关掉Agilent 1100各电源开关。
5、关闭计算机（用shut down关）。
仪器清洗要求：1、将预柱与柱子卸下，连接二通阀。
2、将3个泵的泵头均放在准备好的纯水中，首先用纯水冲洗系统。
如果系统经常使用缓冲盐，可以用60℃的水进行冲洗。
Agilent1100高效液相色谱仪使用与维护操作规程
Agilent1100 高效液相色谱仪使用与维护操作规程 已有 179 次阅读 2023-7-17 13:351 目的制定 Agilent1100 高效液相色谱仪使用与维护操作规程，确保操作人员能正确标准地操作，维护液相色谱仪。
2 适用范围适用于Agilent1100 高效液相色谱仪的使用，维护。
3 编写依据Agilent1100 高效液相色谱仪使用说明书 4 职责QC 相关检验人员对本仪器操作规程的实施负责。
5 内容5.1安全留意事项本仪器应良好接地，以防止触电及释放静电；本仪器常常处于高浓度的有机蒸汽环境中，故应通风良好，制止消灭电火花；配制流淌相或接触有机溶剂时应戴橡胶手套及其它防护用品。
5.2仪器组成本仪器由 LC-10ATVP 泵、7725 手动进样器、柱温箱、Agilent1100 紫外-可见光检测器、色谱工作站(N2023 或其它工作站)。
5.3 日常使用操作步骤 5.3.1 开机翻开计算机，进入 Windows 系统，CAG Bootp Server 程序将自动运行。
翻开 HPLC 1100 各模块电源，等仪器自检通过，并且与计算机通讯成功〔约 1～2min 〕后，进入 Online 工作站。
5.3.2 系统初始化〔主要目的：排解系统中的气泡〕 5.3.2.1 翻开Purge 阀 5.3.2.2加大泵流量并开启泵，快速冲洗试验通道，至无气泡从废液管排出。
降低流量及溶剂比例成试验初始条件，并单击OK 确认执行；5.3.2.3 关闭Purge 阀，完成系统初始化。
5.3.3 系统平衡〔主要目的：平衡、稳定色谱柱、柱温以及灯的能量〕调出本次试验所需方法，保持泵连续工作，以试验初始的流淌相冲洗、平衡柱子一段时间。
〔一般约 30min ，可自己依据本人的仪器配置状况计算，要求至少以色谱柱几何体积 5～10 倍体积的流淌相冲洗、平衡系统。
〕 5.3.4在适当时间，开启柱温箱和检测器，使得柱温稳定，检测器灯的能量稳定。
安捷伦1100操作规程
安捷伦1100高效液相色谱仪操作规程1、操作前的准备流动相的配制，流动相应用0.22μm或0.45μm的滤膜过滤，超声。
2、仪器的操作2.1接通电源，打开电脑，双击桌面上的“仪器1联机”，进入工作站；单击菜单栏中的“运行控制”选择“样品信息”输入“操作者姓名”或者单击菜单栏中的“序列”选择“序列参数”中输入“操作者姓名”；将A、B、C、D四个通道的溶剂量设置好。
2.2排气逆时针旋松排空阀，将流速设为5ml/min，四个通道逐个进行排液，排液至整个管路没有气泡为止。
2.3首选项的设置单击菜单栏中的“视图”选择“全部菜单”，再单击菜单栏中的“视图”选择“首选项”，在“路径”选项卡中分别设定“序列路径”、“数据路径”、“方法路径”，（具体操作时只要单击“添加”后选择相应的路径即可）单击“确定”。
2.4编辑仪器方法2.4.1单击“方法”选择“编辑完整方法”，根据需要钩选项目，“方法信息”，“仪器/采集”，“数据分析”，“运行时选项表”，单击“确定”。
2.4.2 出现“方法信息”窗口，如有需要输入方法信息（方法用途等），单击“确定”。
2.4.3出现“设置泵”窗口，根据方法需要设置“流速”、“停止时间”、“流动相比例”，将压力上限设为400bar，单击“确定”。
2.4.4出现“设置进样器”窗口，根据需要选择进样方法“标准进样”、“洗针进样”、“使用进样程序进样”（一般选择“标准进样”），输入相应的“进样量”，单击“确定”。
2.4.5出现“柱温箱温控方法”，输入“柱温”或“不控制”，单击“确定”。
2.4.6出现“VWD信号”窗口，输入所要的检测波长，单击“确定”。
2.4.7出现“信号细节”窗口，单击“确定”。
2.4.8出现“编辑积分事件”窗口，单击“确定”。
2.4.9出现“报告设定”窗口，选择所需的“报告格式”，“信号选项”中设定好图谱的量程，单击“确定”。
2.4.10出现“仪器曲线”窗口，单击“确定”。
2.4.11出现“运行时选项表”，根据需要设定相关的参数，一般在设定方法时，只要单击“确定”即可。
Agilent1100高效液相色谱仪操作规程
Agilent1100高效液相色谱仪操作规程Agilent 1100高效液相色谱仪操作规程一、引言Agilent 1100高效液相色谱仪是一种常用的分析仪器，广泛应用于生物医药、环境监测、食品安全等领域。
本文将详细介绍Agilent 1100高效液相色谱仪的操作规程，以帮助用户正确、高效地使用该仪器。
二、仪器准备1. 检查仪器是否处于正常工作状态，包括电源是否连接、仪器是否通电等。
2. 检查仪器各部件的完整性，如进样器、泵、柱箱、检测器等。
3. 检查进样器的进样针是否干净，如有污染应及时清洗。
4. 检查溶剂瓶是否充足，必要时更换。
三、样品准备1. 根据实验要求准备样品，并确保样品的纯度和浓度符合要求。
2. 准备样品溶液，注意溶解度和稳定性。
3. 如需稀释样品，请使用纯净溶剂，并按照一定比例稀释样品。
四、仪器操作1. 打开Agilent 1100高效液相色谱仪的电源，确保仪器处于正常工作状态。
2. 打开色谱软件，并进行系统初始化。
3. 在色谱软件中设置实验方法，包括进样量、流速、梯度程序等。
4. 打开进样器盖，将样品注射器插入样品瓶中，吸取适量的样品溶液。
5. 关闭进样器盖，将样品注射器插入进样器，并按下进样按钮进行进样。
6. 打开泵的开关，调节流速至所需数值。
7. 检查柱箱的温度设置，根据实验要求进行调节。
8. 打开检测器，并设置检测器的参数，如波长、灵敏度等。
9. 开始实验运行，观察色谱图的变化并记录实验数据。
10. 实验结束后，关闭泵、检测器等设备。
11. 关闭色谱软件，并保存实验数据。
五、日常维护1. 每次使用后，及时清洗进样器和柱箱，避免样品残留。
2. 定期检查泵的密封件，如有磨损应及时更换。
3. 定期校准检测器，确保准确性和稳定性。
4. 定期更换柱子，避免柱子老化影响实验结果。
5. 清洗仪器外壳，保持仪器的整洁。
六、故障排除1. 若发现仪器无法正常启动，检查电源和连接线是否正常。
2. 若发现进样器无法正常工作，检查进样针是否堵塞或损坏。
Agilent_1100_液相色谱工作站基本操作说明
Agilent 1100型HPLC操作规程一、开机1、开机前准备：流动相使用前必须过0.45um的滤膜（有机相的流动相必须为色谱纯；水相必须用新鲜注射用水，不能使用超过3天的注射用水，以防止长菌或长藻类）；把流动相放入溶剂瓶中。
A瓶：为水相；B瓶：为有机相。
2、打开电脑，选Windows 2000，进入Windows 2000界面。
3、双击CAG Boodp server图标，放大CAG Boodp server小图标，出现窗口，5分钟内打开液相各部件电源开关，等待1100广播信息后，表示通讯成功连接，关闭CAG Boodp server窗口。
4、双击online图标，仪器自检，进入工作站。
该页面主要由以下几部分组成：——最上方为命令栏，依次为File，Run Control，Instrumen…等；——命令栏下方为快捷操作图标，如多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件保存文件……等；——中部为工作站各部件的工作流程示意图；依次为进样器-输液泵-柱温箱-检测器-数据处理-报告；——中下部为动态监测信号；——右下部为色谱工作参数：进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
4、从“View”菜单中选择“Method and Control”画面。
二、编辑参数及方法1、开始编辑完整方法：从“Method”菜单中选择“New method”，出现DEF-LC.M，从“Method”菜单中选择“Edit entire method”，选择方法信息、仪器参数及收集参数、数据分析参数和运行时间表等各项，单击“OK”，进入下一画面。
2、方法信息：在“Method Comments”中加入方法的信息，如方法的用途等。
单击OK，进入下一画面。
3、泵参数设定：进入“Setup pump”画面，在“Flow”处输入流量，如1ml/min；在“Solvent B”处输入有机相的比例如70.0，（A=100-B），也可在Insert 一行“Timetable”，编辑梯度；输入保留时间；在“Pressure Limits Max”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。
Agilent1100高效液相色谱质谱联用仪操作规程
Agilent 1100高效液相色谱/质谱联用仪操作规程一．开机前准备2．在容器中放入已过滤脱气好的流动相，把吸滤过滤头放入容器中。
二．开机1．打开微机，进入NT 2000，生成CAG Bootp Server界面。
2．打开空气泵开关，操作压力大于等于90PSI后，分别打开质谱、在线脱气机、泵、自动进样器、柱温箱、检测器的电源开关。
打开冲洗泵头的10％异丙醇溶液的开关（需用针筒抽），控制流量大小，以能流出的最小流量为准。
3．在CAG Bootp Server上显示联机成功后过5分钟，点击instrument online1，进入工作站。
三．编缉仪器方法1．在View 中选Diagnosis，进入Diagnosis 界面，选Maintenance，进入MSD pumpdown，将rough pump逆时针转2圈后，点Start，真空度达到后按Close，再回到Methord and Run 界面。
2．设置各仪器参数，等待整个系统平衡。
四．样品分析与采集1．当色谱柱、系统平衡，基线稳定后。
2．在View 中选MSD TUNE，根据实验需要做相应的Autotune或Checktune，当MSD TUNE通过后设置好样品信息，按Start，开始采集样品。
五．关机1．冲洗色谱柱，排出流路中可能有的缓冲液。
2．在View 中选Diagnosis，进入Diagnosis 界面，点Maintenance，进入MSD Vent，将rough pump 顺时针关闭，点击Start放真空，真空度放空后按Close，再回到Methord and Run control界面。
3. 退出工作站，关闭整个系统。
4. 在记录本上记录使用情况。
注意事项：1. 所有的溶剂均选用HPLC级试剂。
2. 禁止使用含不挥发性缓冲盐的流动相，流动相中如含有挥发性缓冲盐，必须用5%甲醇或5%乙腈过渡冲洗；水相流动相需经常更换，防止长菌变质。
3. 样品均用0.45um 的滤膜过滤后才可进样。
Agilent1100高效液相色谱仪操作规程
Agilent1100高效液相色谱仪操作规程操作说明：1.开机前准备：1.1仪器设备：Agilent 1200LC●G1322A(在线脱气机)。
●G1311A(四元泵)。
● G1329A（标准型自动进样器）。
● G1316A（柱温箱）。
● G1315A（DAD检测器）。
●色谱柱1.2溶剂准备：●有机相必须是色谱级纯。
●水相必须是二次蒸馏水或用二级蒸馏水配置的缓冲盐溶液、酸碱溶液。
●流动相使用前必须过0.45μm的微孔滤膜。
有机相和水相微孔滤膜的选择参考下表。
2.基本操作步骤:(一)、开机：1、打开计算机,进入中文Windows XP画面,并运行CAG Bootp Server 程序（部分安装程序不需要运行Bootp）。
2、打开 1200 LC 各模块电源。
3、待各模块自检完成后，双击“仪器1 联机”图标，化学工作站自动与1200LC通讯，进入的工作站画面如下所示。
4、从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面, 点击“视图”菜单中的“仪器实际值”，“在线光谱”，“化学工作站状态”，“系统视图”,“样品视图”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。
5、把流动相放入溶剂瓶中。
6、打开冲洗阀。
7、点击“泵”图标，点击“设置泵…”选项，进入泵编辑画面。
8 、设流速：5ml/min，点击“确定”。
9、点击“泵”图标，点击“控制…”选项，选中“启动”，点击“确定”，则系统开始冲洗，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止。
10、点击“泵”图标，点击“控制…”选项，选中“关闭”，点击“确定”关泵，关闭冲洗阀。
11、点击“泵”图标，点击“设置泵…选项”，设流速：例如1.0ml/min。
12、点击泵下面的瓶图标，如下图所示（以单元泵为例），输入溶剂的实际体积和瓶体积。
也可输入停泵的体积，点击“确定”。
13、点击“泵”图标，点击“泵辅助设定…”，设定“最流速梯度”，“最小冲程”，“压缩因子”，“主通道”。
Agilent1100series安捷伦高效液相色谱仪操作规程
Agilent1100 高效液相色谱仪操作规程1. 仪器组成及开机1.1仪器组成：Agilent1100 高效液相色谱系统主要由工作站、在线脱气机、柱温箱、输液泵、自动进样器、检测器等部件组成。
1.2开机：1.2.1接通电源，打开计算机及工作站其它各部件开关，约30秒钟后，各部件进入待机状态，指示灯为黄色或无色。
1.2.2打开HP ChemStations进入Instrument 1 online状态，约30秒钟后，计算机进入工作站的操作页面。
该页面主要由以下几部分组成：最上方为命令栏，依次为File,Run Con trol,I nstrume nt等；命令栏下方为快捷操作图标，由多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件、保存文件等；左边为样品信息栏；中部为工作站各部件的工作流程示意图，依次为进样器一输液泵一柱温箱一检测器一数据处理一报告；中下部为动态监测信号；右下部为色谱工作参数：进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
2. 色谱条件的设定（色谱条件的设定可以通过下列几种方法实现2.1直接设定在操作页面的右下部一色谱工作参数中设定。
将鼠标移移至要设定的参数如进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等，单击一下，即可显示该参数的设置页面，键入设定值后，单击“0K，即完成。
2.2调用已设置好的文件在命令栏“ Method下，选择“LoadMethod ”或直接单击快捷键操作的“LoadMethod ”图标，选定文件名，单击“0K,此时，工作站即调用所选用文件中设定的参数。
如欲进行修改，则可同2.1项下，在色谱工作参数中作修改；亦可在命令栏“Method T，选择“Edit Entire Method ”，在每个页面中键入设定值，单击“OK。
即完成。
2.3编辑新文件先在命令栏“ Method下，选择“ NewMethod”之后再在命令栏“ Method下，选择“Edit Entire Method，在每个页面中键入设定值，完成后，Save Method ”先在命令栏“Method下选择“Save Metho*给新文件命名，单击“OK。
高效液相色谱仪使用与操作规程
4.更换烧结不锈钢,加在线过滤器,过滤样
品
5.进样器损坏
5.更换进样器转子
五、鬼峰
1.进样阀残余峰
2.样品中未知物 3.柱未平衡 1.每次用后用强溶剂清洗阀,改进阀和样品 的清洗 2.处理样品 3.重新平衡柱,用流动相作样品溶剂 (尤其 是离子对色谱)
4.三氟乙酸(TFA)氧化(肽谱) 4.每天新配,用抗氧化剂 5.通过变化平衡时间检查水质量，用HPLC 5.水污染(反相) 级的水
剂冲洗，可使用进样阀所附专用冲洗接头。 3 、关断电源，作好使用登记，内容包括日期、检品、色谱柱、流 动相、柱压，使用小时数，仪器完好状态等。
第四步、注意事项
一、流动相
1、流动相应选用色谱纯试剂、高纯水 或双蒸水，酸碱液及缓冲液需经过 滤后使用，过滤时注意区分水系膜 和油系膜的使用范围； 2、水相流动相需经常更换（一般不超 过2天），防止长菌变质；
7.等度洗脱时增加溶剂含量也可用梯度
7.保留时间过长 洗脱
8.将连接管径和连接管长度降至最小
8.柱外体积过大 9.进小浓度小体积样品 9.样品过载
第二步、开 机
接通电源，依次开启不间断电源、 真空脱气机、四元泵、检测器，待泵和
检测器自检结束后，打开电脑显示器、
主机，最后打开色谱工作站。
一）参数设定
1、 波长设定： 2 、流速设定：
3 、流动相比例设定：
4、 梯度设定：
二）更换流动相并排气泡
1： 将吸滤器放入装有准备好的流动相的储液
瓶中； 2 ：顺时针转动泵的排液阀180°，打开排液 阀； 3 ：运行泵，泵以3ml/min的流速冲洗5min （可设定）后泵流速设为0ml/min； 4 ：将排液阀逆时针旋转适度拧紧，关闭排液 阀。 5 ：如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至 气泡排尽。
Agilent1100高压液相色谱仪基本操作步骤及注意事项
Agilent1100高压液相色谱仪基本操作步骤及注意事项一)、开机：1、打开计算机,进入Windows NT （或Windows 2000）画面,并运行Bootp Server程序。
2、打开 1100 LC 各模块电源。
3、待各模块自检完成后，双击Instrument 1 Online图标，化学工作站自动与1100LC通讯，进入的工作站画面。
4、从“View”菜单中选择“Method and Run control”画面, 单击”View”菜单中的“Show Top Toolbar”，“Show status toolbar”，“System diagram”,”Sampling diagram”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。
5、把流动相放入溶剂瓶中。
6、打开Purge阀。
7、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Setup pump选项，进入泵编辑画面。
8 、设Flow：5ml/min，单击OK。
9、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Pump control选项，选中On，单击OK，则系统开始Purge，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续Purge，直到所有要用通道无气泡为止。
10、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Pump Control选项，选中Off，单击Ok关泵， 关闭Purge valve。
11、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Setup pump选项，进入Pump编辑画面，设Flow：1.0ml/min。
12、单击泵下面的瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积。
也可输入停泵的体积。
单击Ok。
（二）数据采集方法编辑：1、开始编辑完整方法：●从“Method”菜单中选择“Edit entire method” 项，如上图所示选中除“Data analysis ”外的三项，单击Ok，进入下一画面。
2、方法信息：●在“Method Comments”中加入方法的信息（如：方法的用途等）。
[知识]Aglent1100型液相色谱仪操作规程
![[知识]Aglent1100型液相色谱仪操作规程](https://img.taocdn.com/s3/m/514a14b6294ac850ad02de80d4d8d15abe2300f5.png)
Aglent1100型液相色谱仪操作规程Aglent1100型液相色谱仪操作规程1. 目的：建立安捷伦1100型高效液相色谱仪的标准操作规程，确保操作的准确与可靠。
2. 依据：安捷伦1100型高效液相色谱仪使用说明书。
3. 范围：适用于安捷伦1100型高效液相色谱仪的操作管理。
4. 责任：仪器使用者对本规程的实施负责，QC主任负责监督该操作规程的正确执行。
5. 正文：5.1.操作步骤5.1.1.打开计算机，进入windows英文操作系统，并运行Bootp Sever 程序。
5.1.2.开启液相色谱仪主机5.1.3.依次打开1100 LC自动进样器、泵及所需要使用的检测器等各模块的电源开关。
待各模块自检完毕后，双击Instrument Online 图标，色谱工作站自动与1100LC接通，并出现Configuration对话框，选中左测栏内需用的模块图标，单击add，便可进入右测的使用状态；选中右测栏内不需用模块的图标，单击remove，便可使之进入左测栏内的不使用状态。
5.1.4.把所需要的流动相经过过滤后放入溶剂瓶中。
5.1.5.单击pump图标，出现参数设定菜单，选中Setup pump，设置流速Flow为5.0ml/min、Stop Time、以及流动相的比例，逆时针打开Purge阀。
单击Pump Control选项，选中on，单击OK，开始脱气至通道无气泡为止。
5.1.6.开启泵的在线洗脱，用10%异丙醇溶液清洗，必要时从清洗液的流出管口用注射器抽一下，使得其流速为3～5滴/分钟。
5.1.7.单击Pump Control选中off，关泵，顺时针旋转关闭Purge阀。
5.1.8.单击Pump图标，单击Setup Pump选项，进入pump编辑画面，设流速、Stop Time（要超过组分的保留时间）、以及流动相在各个通道的比例、最高柱压和最低柱压等，单击“OK”。
5.1.9.单击泵下面的图标，输入各个溶剂瓶内的实际体积（SolventBottles Filling），以及Prevent Analysis if Level Falls Below Liter，单击“OK”。
高效液相色谱仪(Agile 1100型)操作规程
高效液相色谱仪（Agile 1100型）操作规程一、开机1、开机前准备：流动相使用前必须过0.45um的滤膜（有机相的流动相必须为色谱纯；水相必须用新鲜注射用水，不能使用超过3天的注射用水，以防止长菌或长藻类）；把流动相放入溶剂瓶中。
A瓶：为水相B瓶：为有机相。
2、打开电脑，选Win 2000，进入Win 2000界面。
3、双击CAG Boodp server图标，放大CAG Boodp server小图标，出现窗口，5min内打开液相各部件电源开关，等待1100广播信息后，表示通讯成功连接，关闭CAG Boodp serve窗口。
4、双击online图标，仪器自检，进入工作站。
该页面主要由以下几部分组成：——最上方为命令栏，依次为File，Run Control，Instrumen…等；——命令栏下方为快捷操作图标，如多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件保存文件……等；——中部为工作站各部件的工作流程示意图；依次为进样器-输液泵-柱温箱-检测器-数据处理-报告；——中下部为动态监测信号；——右下部为色谱工作参数：进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
4、从“View”菜单中选择“Method and control”画面。
二、编辑参数及方法1、开始编辑完整方法：从“Method”菜单中选择“New method”，出现DEF-LC.M，从“Method”菜单中选择“Edit entire method”，选择方法信息、仪器参数及收集参数、数据分析参数和运行时间表等各项，单击OK，进入下一画面。
2、方法信息：在“Method Comments”中加入方法的信息，如方法的用途等。
单击OK，进入下一画面。
3、泵参数设定：进入“Setup pump”画面，在“Flow”处输入流量，如1ml/min；在“Solvent B”处输入有机相的比例如70.0，（A=100-B），也可在Insert 一行“Timetable”，编辑梯度；输入保留时间；在“Pressure Limits Max”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。
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在Method Comments 中加入方法的信息如方 法的用途等
泵参数设定
在Flow 处输入流量, 在Solvent A、B、C、D 处输入比例，也可Insert一 行”Timetable” ,编辑梯度，在Pressure Limits Max 处输入柱子的最大耐高 压。单击Ok进入下一画面
Agilent1100型高效液相色谱仪操作规程
Agilent 1100型高效液相色谱仪操作规程
溶剂架 在线脱气
Purge阀
溶剂瓶 泵
自动进样器
柱温箱 检测器
仪器各组件
泵 ：四元泵、二元泵 在线脱气器 进样器：自动进样器及手动进样器 柱温箱 检测器： DAD检测器、UV检测器
Agilent1100在线脱气机
泵的溶剂选择原则
பைடு நூலகம்
使用自动进样器注意事项
• 使用自动洗针功能
• 去掉洗涤瓶盖
为了获得最佳的分析结果，装有溶剂的洗涤瓶 是不加盖的，而且洗涤瓶中的 溶剂对样品组分 有较好的溶解作用。如果洗涤瓶有盖将会有少 量样品留在密 封垫上，这样会把残留的样品带 到下一个样品中。
千里之行 始于足下 感谢聆听
注意事项
溶剂瓶中的沙芯过滤头容易破碎，在更换流动 相时注意保护，当发现过滤头变脏或长菌时， 不可用超声洗涤，可用35%稀硝酸溶液浸泡后 再洗涤。
检测器的灯有使用寿命限制，一般在正式进样 分析前30min 左右开启D灯或W灯，分析结束， 立即关灯。
使用双泵时，A、B、C、D四相中，若所用流 动相中有含盐流动相，则A、D（进液口位于 混合器下方）放置含盐流动相，B、C（进液口 位于混合器上方）放置不含盐流动相。
数据分析方法编辑
从File 菜单选择Load signal 选中您的 数据文件名
单击Ok
积分
从Integration 中选择“Auto integrate”, 如积分结果不理想,再从菜单中选择 Integration Events 选项选择合适的Slope sensitivity Peak width Area reject Height reject
打开色谱仪各组件电源，待Bootp Server 里显示已联上各组件的信息及各模块自检 完成后，双击Instrument 1 Online ，图 标打开工作站。化学工作站自动与1100通 讯。进入的工作站画面如下所示
排气
将流动相放入溶剂瓶中，打开Purge 阀，依次单击 【 Pump】→【Set up Pump】， 设 Flow 为 2 ml/min， 单 击 OK ， 再 依 次 单 击 【 Pump】→ 【control】，选中on，单击OK，则系统开始Purge 至管路无气泡为止，切换管路反复操作至所需管路均 无气泡。
许多情况下用100nm作为缺省值 Peak width Response time 其值尽可能接
近要测的窄峰峰宽 选中所用的灯点击Ok进入下一画面
方法保存
单击Method 菜单选中Save method as 输入一方法名，如test
单击Ok
编辑分析方法
选择已有方法：点击【Method】，点 击【Load method】选项，选取已存的 各种操作方法。
在【control】选项中选off，关闭泵，关闭Purge 阀。 单击泵下面瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积。 如图所示。
打开10％异丙醇溶液控制阀，用针筒抽吸至管路中有 液体流出。调节控制阀松紧，控制流量至流出量约为 每分钟5～15滴。
编辑分析方法
新方法建立：点击【Method】，点击 【 Edit entire method】 或 【 New method】选项，进行方法编缉。
Agilent 1100泵头结构
Agilent 1100自动进样器结构
Agilent 1100自动进样器工作原 理
Agilent 1100柱温箱结构
柱温箱流路连接
开机
打 开 计 算 机 , 进 入 Windows NT 或 Windows 2000 画 面 , 并 运 行 Bootp Server程序（点击左下方【Bootp Server】 图标）
样品分析与采集数据
将样品放于样品盘中相应位置，所有的样品均 需澄清。
待 仪 器 显 示 Ready， 基 线 平 稳 ， 从 【 Run control】菜单中选择【Run Method】，开 始进样分析。
数据处理：单击【View】菜单，单击【Data analysis】 选 项 ， 进 行 数 据 分 析 。 单 击 【 View】 菜 单 ， 单 击 【 Method and Run control】选项，回到样品分析界面。
泵的维护
流动相使用前必须脱气过滤 使用缓冲盐时要加在线Seal-wash选项 关机前反相色谱柱用5%的甲醇水冲洗系统30
分钟，然后用有机溶剂冲洗系统20分钟，然后 关泵。正相色谱柱用适当的溶剂冲洗。 及时更换Purge Valve内的过滤芯，当打开 Purge Valve时压力高于10bar 表明过滤芯已 堵
自动进样器参数设定
选择合适的进样方式 进样体积 洗瓶位置 进样方式：“Standard Injection”只能输入
进样体积“Injection with Needle Wash” 可以输入进样体积和洗瓶位置此方式针从样品 瓶抽完样品后会在洗瓶中洗针 Use injector program ---可以点击Edit 键 进行进样程序编辑 点击Ok进入下一画面
柱温箱参数设定
在”Temperature”下面的方框内 输入所需温度,并选中它,点 击”more>>”键,选中“Same as left”使柱温箱的温度左右一致
点击ok进入下一画面
检测器参数设定－UV
在”Wavelength”下方的空白处输入 所需的检测波长,如254nm, 在 “Peakwidth (Response time)”下方 点击下拉式三角框,选择合适的响应时间, 如>0.1min(2s)
从Integration 菜单中选择Integrate 选项则 数据被积分
如积分结果不理想则修改相应的积分参数直到 满意为止
单击左边图标将积分参数存入方法
单击左边图标将积分参数存入方法
关机
冲洗系统：反相柱用5％的甲醇水冲洗系 统30分钟，再用纯甲醇冲洗系统20分钟， 然后关泵，正相柱先用合适溶剂冲洗， 后用柱保存液冲洗。
Agilent1100在线脱气机工作原 理
何时需要使用Agilent在线脱气机
如果在低UV波长段，用最高灵敏度进行检测 如果要求使用最佳进样精度 如果要求保留时间重现性很高 （在0.5ml/min流速以下） 如果样品和检测对流动相中溶解氧敏感
Agilent 1100泵
Agilent 1100四元泵工作原理
使用梯度比例时的注意事项
当盐溶液与有机溶剂溶液混合时盐溶液能与有 机溶剂溶液完全混溶而不会出现沉淀。
由于在比例阀的混合点重力作用使盐颗粒沉淀 下来通常阀A接水相/盐溶液D接有机溶剂此法 连接可有效使盐回落到盐溶液中并被溶解若颠 倒过来盐可能落在有机溶剂中出现问题
当使用缓冲盐溶液和有机溶剂时推荐将缓冲盐 通道接在A通道上有机溶剂通道直接接在A通 道的上方D通道上定期用水冲洗所有的通道以 除去阀口上可能出现的盐沉淀
退出工作站，关闭计算机。 关闭10％异丙醇溶液控制阀。 关闭仪器各组件 关掉Agilent 1100电源开关
注意事项
仪器运行时，泵头必须用10%异丙醇水溶液虹 吸冲洗，不能干涸。
注意各流动相所剩溶液的容积设定，若设定的 容积低于最低限会自动停泵。
对于手动进样器当使用缓冲溶液时要用水冲洗 进样口同时搬动进样阀数次每次数毫升
在Timetable 中可以Insert 一行输入随 时间切换的波长
点击ok进入下一画面
检测器参数设定－DAD
样品波长--一般选择最大吸收处的波长 样品带宽BW—一般选择最大吸收值一半处的
整个宽度 参比波长—一般选择在靠近样品信号的无吸收
或低吸收区域 参比带宽BW—至少要与样品信号的带宽相等