不规则抗体筛查和鉴定培训课件
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ABO血型鉴定不规则抗体筛选
为什么这次试验没有安排玻片法 的反定型？
因为存在于病人或献血者血清中的抗 Ａ及抗Ｂ，个体差异很大，如果效价较 弱，在玻片上不足以凝集大量抗原阳性 的红细胞，造成假阴牲的结果所以采用 玻片法作反定型的结果常不可靠。而用 试管离心法作反定型，则促进抗原抗体 反应，形成肉眼可见的凝块，使结果更 为可靠
谢谢
ＡＢＯ正反定型结果不一致的常 见原因有哪些？
（１）人为因素：①试剂不标准、失效或污染； ③操作中加错样本或试剂、离心速度不足或过 度、细胞与血清比例不当、结果判断错误等。 （２）客观因素：①因某些疾病导致抗原减弱 如：白血病，MDS（骨髓增生异常综合征）患 者血型抗原减弱导致误定血型。②受检者抗体 效价低（如婴幼儿、老年人、大量输液的患者， 血浆蛋白低下等）③某些药物干扰如输注右旋 糖酐后会干扰血型检定。
四 实验步骤.swf
1. 玻片法
（1） 取双凹玻片一块，用干净纱布轻拭使之洁净，在玻片两端 用记号笔标明A及B，并分别各滴入A及B标准血清一滴。 （2） 用滴管吸取红细胞悬液，分别各滴一滴于玻片两端的血清 上，注意勿使滴管与血清相接触。 （3） 竹签两头分别混合，搅匀。用两根 分别用来混合A型和B型标准
二 实验原理
血型就是红细胞膜上特异抗原的类型。在 ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两种 抗原，而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。血型 鉴定是将受试者的红细胞加入标准A型血清 （含有抗B抗体）与标准B型血清（含有抗A抗 体）中，观察有无凝集现象，从而测知受试者 红细胞膜上有无A或/和B抗原。在ABO血型系 统，根据红细胞膜上是否含A、B抗原而分为A、 B、AB、O四型。 见下表
A标准血清 B标准血清 2滴 受试者的红细胞悬液 1滴 1滴 混匀后1000rpm离心1min或3000rpm离心15秒。 。 取出观察结果。完全凝集的管底部有红细胞的凝块， 管底细胞边缘呈花边状，轻弹试管凝块不散；完全不 凝的试管，血细胞均匀的沉到管底，边缘整齐，用手 轻弹试管，红细胞像一缕烟似的立即上升，随即成为 均匀的悬液;轻微凝集的，必须将液体转到载玻片上镜 检后判定凝集程度。
不规则抗体筛选红细胞试剂简介ppt课件
血红蛋白试剂盒（硫酸铜比重法）
【主要组成成份】 试 剂2 14℃≤t＜18℃, 硫酸铜, 307.1mmol/L 18℃≤t＜22℃, 硫酸铜, 312.1mmol/L 22℃≤t＜26℃, 硫酸铜, 320.4mmol/L 26℃≤t≤30℃, 硫酸铜, 333.7mmol/L
血红蛋白试剂盒（硫酸铜比重法）
谢谢！
血红蛋白试剂盒（硫酸铜比重法）
• 【注意事项】 • 1.使用前应检查试剂瓶有无破损，瓶内试剂有无浑浊，如有上述 情况，则不能使用。 2.应选择基本符合采血现场温度的试剂盒。 • 3.从人体采出全血 (37℃左右)后，不宜将其立即滴入试剂中，应 将其平衡至室温后再滴入试剂中。 4.在观察标本下沉情况时，不能振摇塑料瓶，避免血液中的蛋白 微粒导致试剂混浊而影响筛检结果。 5.全血标本中不得含气泡，否则影响筛检结果。 6.试剂液面应保持清洁，如有血液凝块浮在液面，应用玻璃棒消 除，以免影响下一标本筛检。 7.1瓶试剂筛检全血血滴不能多于50滴，滴入全血标本后的试剂不 可储存后再使用。检测结束时，应将其视为污染物进行处理。
• 【储存条件及有效期】 • Hb试剂盒贮存于10℃－40℃的干燥环境 中，有效期为12个月，有效期为12个月。 • 【适用仪器】 • 本试剂为独立使用的筛查试剂，无需与 仪器配合使用。 • 【样本要求】 • 样本要求：应为人新鲜全血标本。
血红蛋白试剂盒（硫酸铜比重法）
• 【检验方法】 • 1.打开男用试剂1(绿色)瓶盖，将男性受检者新鲜全血标本一滴(约 50µ l)滴于瓶内， 1瓶试剂筛检血滴不能多于50滴。 • 2.打开女用试剂2(蓝色)瓶盖，将女性受检者新鲜全血标本一滴(约 50µ l)滴于瓶内， 1瓶试剂筛检血滴不能多于50滴。
• 3. 滴加标本时应距试剂液面1cm并将其垂直滴入,15秒内观察血滴 下沉情况。 • 【参考值（参考范围）】 • 成年男性全血比重≥1.052 (相当于血红蛋白含量≥120 g/L) • 成年女性全血比重≥1.050(相当于血红蛋白含量≥110 g/L)
不规则抗体筛查方法
不规则抗体筛查方法
嘿，朋友们！今天咱就来讲讲不规则抗体筛查方法。
你说这不规则抗体筛查啊，就好比是我们身体里的一个小侦探，专门去寻找那些可能捣乱的“坏家伙”。
咱先来说说盐水法。
这就像是个直接干脆的小卫士，能快速地初步判断有没有问题。
就好像你去一个地方找东西，先大致看一眼有没有明显的目标。
虽然简单，但有时候也能发现一些大问题呢！
还有凝聚胺法，这可是个厉害的角色！它就像是个敏锐的神探，能把那些隐藏得比较深的不规则抗体给揪出来。
你想想看，就像是在一堆杂物里找出那个特别的小物件，需要更仔细、更用心地去分辨。
酶法呢，就有点特别啦！它就像一个有特殊技能的高手，对于一些特定情况特别在行。
好比你有个专门对付某种难题的法宝，一用就能解决。
抗球蛋白法更是不能小瞧。
它就如同一个超级严谨的检查员，不放过任何一个蛛丝马迹。
可以说，它是给不规则抗体筛查上了一道保险，确保万无一失。
咱为啥要这么重视不规则抗体筛查呢？你想想啊，如果不把这些可能捣乱的家伙找出来，那万一在关键时刻给咱来个“突然袭击”，那不就麻烦啦！这就好像家里有个小隐患，你不及时发现处理，哪天说不定就酿成大祸了呢！
所以啊，大家可别小看了这不规则抗体筛查。
它就像是我们健康的守护者，默默地为我们保驾护航呢！我们要积极配合医生，该做检查就做检查，这样才能让自己心里踏实呀！这难道不是很重要的事情吗？难道你不想给自己的身体多一份保障吗？别等到出了问题才后悔莫及呀！总之，不规则抗体筛查真的很关键，大家一定要重视起来哟！。
实验四不规则抗体筛选与鉴定、效价测定
2.鉴定 2.鉴定
标管： ⑴标管：11支1-10、自c 加样： ⑵加样：Ps2滴+谱细胞1滴 离心、观察结果： ⑶离心、观察结果： ①直接观察 ②4℃10min观察 ③恢复室温观察，有格局为IgM ④37℃观察有无凝集 ⑤凝聚胺法或抗人球法（上谱细胞），观 察格局可判断有无IgG抗体 测效价： ⑷测效价：若有抗体，测效价
操 作
1.筛选 1.筛选
(聚凝胺法 聚凝胺法) 聚凝胺法 (抗人球法 抗人球法) 抗人球法
⑴标管8支:S1、S2、S3、S1’、S2’、S3’、K、自c 标管8 ⑵加样：受检血清2滴+上述细胞1滴检测 加样 ⑶观察结果:阳性进行不规则抗体鉴定 观察结果: ⑷测抗体效价（室温、4℃10min、恢复室温 测抗体效价 10min、37℃3min ）
注意事项 1.更换滴管， 1.更换滴管，防止干扰 更换滴管 2.防止前带现象， 2.防止前带现象，看结果从高稀释度开始 防止前带现象 3.试剂细胞 3.试剂细胞 4.稀释液体积越小， 4.稀释液体积越小，产生误差越大 稀释液体积越小
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
思考题
1.为何不规则抗体筛选与鉴定要在盐水、 1.为何不规则抗体筛选与鉴定要在盐水、 为何不规则抗体筛选与鉴定要在盐水 聚凝胺、抗人球介质中进行。 聚凝胺、抗人球介质中进行。 2.抗体效价检测的临床应用 2.抗体效价检测的临床应用
目的 掌握抗体效价的测定方法 原理 Ab经过倍比稀释加入悬浮红细胞，以肉眼可 见“±”凝集的最高稀释倍数为抗体效价。 器材 试剂 小试管、记号笔、滴管、离心机 悬浮红细胞、血清、生理盐水
实验步骤 1.标记管号 标记管号：1、2、4、8、16、32…… 标记管号 2.从2号开始各管分别加生理盐水50ul 从 号开始各管分别加生理盐水50ul 3.加血清 加血清：1、2管各加血清 加血清 4.倍比稀释 倍比稀释：将2号管混匀，从中吸出50ul移入 倍比稀释 第3管，混匀；再从第3管吸出50ul移入第4 管，以此类推，至最后一管，吸出50ul弃去。 5.加悬红 加悬红：每管各加50ul ，混匀。 加悬红 6.3000r／min离心 离心15秒，直接观察结果 观察结果、 离心 观察结果 4℃10min、室温10min、37℃3min观察结果。
凝聚胺方法不规则抗体 PPT课件
疗效判定标准
1.取试管3支，各加被检血清（或血浆）100ul，分别加入 3-5%筛检红细胞各50ul。 2. 各加 LIM0.65ml，混匀后，再加入 Polybrene 溶液 100ul， 并混合均匀。
3.用输血科专用离心机3400rpm/min离心10秒，然后倒掉 上清液，不要沥干，让管底残留约0.1ml液体。
技术路线
（包括总体安排和进度步骤及其可行性论证）
不规则抗体筛选试验（凝聚胺法）是在凝聚胺试验法的
辅助作用下让受检者血清与特殊试剂红细胞 ---筛选红细 胞发生免疫反应，以发现在 37℃下有活性抗体的试验方 法。
抗体筛选试验（凝聚胺法）不一定能检验出所有有临床
意义的抗体，一些低频率抗原产生的抗体或者剂量效应 的抗体，可能被漏检，这时需选择抗原性更完全和特异 性更敏感的筛选细胞做试验，或用更高敏感度的技术作
一、献血者的血清或血浆进行抗体筛查，可以防止 含有不规则抗体的血液输注给病人，避免由于献血者血 液中的不规则抗体引起病人红细胞的破坏而引起的溶血
性输血反应，同时可以减少血液浪费，可将有不规则抗
体的血液制备成抗体血清，用于稀有血型的检测。 二、对需要输血治疗的患者，进行不规则抗体筛查， 有利于血液的选择，从而有充分的时间来选择不含有针 对某抗体的相应抗原的血液，从而防止因为输注含有某 抗体相应抗原的血液而引起溶血性输血反应，保证输血 安全。
适应症
适应症：禁忌症来自不良反应不规则抗体筛选试验（凝聚胺法）
第一类产前病人：测定非典型抗体以排除新生儿溶血病
发生的可能。
第二类输血前病人：确定供应相应抗原阴性血液，供血
者、受血者之间相容性评估。
第三类献血员：避免有阳性抗体阳性血，发现稀有血型
不规则抗体筛查与分析(1)
01抗筛的基本问 题
02抗体的筛查与 分析
03抗体的鉴定与 分析
01凡遇有下列情况必须按《全国临床检验操 作规程》有关规定作抗体筛选实验：交叉 配血不合时；对有输血史、妊娠史或短期 内需要接收多次输血者。
02不做抗筛直接盲配有风险，对于弱抗体， 若供血者为杂合子（剂量效应）则有可能 为阴性结果。所以筛选（鉴定）对抗体的 检测比交叉配血更敏感和可靠。
抗筛的目的是通过受检的血清和已知的带有
不同抗原的三人份O型筛选红细胞反应，来 测定血清中有无抗A和抗B以外的意外抗体 （也称不规则抗体）
对疑难交叉配血有重要的指导意义，降低盲 配风险
补体依赖性抗体 补体非依赖性抗
体
完全抗体 不完全抗体
天然抗体 免疫抗体
冷抗体 温抗体
自身抗体 同种抗体
临床有意义抗体：一般为免疫性抗体，在体 温条件（37度）具有反应性的同种抗体。
+ （抗-E/-cE约占1/3，此类患者筛选相合的血液 是很容易的）
+ Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ全部阳性，且强度一致；自c阳 性：结合病情，优先考虑自身抗体
+ Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ全部阳性，自c阴性：考虑同种 抗体，如病人血型为Rh阴性，优先考虑抗-D
+
+ 抗筛结果排除假阴性，一定是阴性结果吗？
+ 解答：“抗筛阴性”并不能代表“同种抗体阴性”。 + 筛选细胞和谱细胞有人种差异，如Mia，
+ 抗人球蛋白试剂：IgG抗体通过抗人IgG类免 疫球蛋白抗体（简称抗人球）“搭桥”，使已 致敏了不完全抗体的RBC发生凝集。
+ 抗筛要求用抗IgG+C3的多特异性抗人球蛋白 试剂，若用单抗IgG的单特异性抗人球蛋白 试剂，可能对某些抗体造成漏检。
02抗体的筛查与 分析
03抗体的鉴定与 分析
01凡遇有下列情况必须按《全国临床检验操 作规程》有关规定作抗体筛选实验：交叉 配血不合时；对有输血史、妊娠史或短期 内需要接收多次输血者。
02不做抗筛直接盲配有风险，对于弱抗体， 若供血者为杂合子（剂量效应）则有可能 为阴性结果。所以筛选（鉴定）对抗体的 检测比交叉配血更敏感和可靠。
抗筛的目的是通过受检的血清和已知的带有
不同抗原的三人份O型筛选红细胞反应，来 测定血清中有无抗A和抗B以外的意外抗体 （也称不规则抗体）
对疑难交叉配血有重要的指导意义，降低盲 配风险
补体依赖性抗体 补体非依赖性抗
体
完全抗体 不完全抗体
天然抗体 免疫抗体
冷抗体 温抗体
自身抗体 同种抗体
临床有意义抗体：一般为免疫性抗体，在体 温条件（37度）具有反应性的同种抗体。
+ （抗-E/-cE约占1/3，此类患者筛选相合的血液 是很容易的）
+ Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ全部阳性，且强度一致；自c阳 性：结合病情，优先考虑自身抗体
+ Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ全部阳性，自c阴性：考虑同种 抗体，如病人血型为Rh阴性，优先考虑抗-D
+
+ 抗筛结果排除假阴性，一定是阴性结果吗？
+ 解答：“抗筛阴性”并不能代表“同种抗体阴性”。 + 筛选细胞和谱细胞有人种差异，如Mia，
+ 抗人球蛋白试剂：IgG抗体通过抗人IgG类免 疫球蛋白抗体（简称抗人球）“搭桥”，使已 致敏了不完全抗体的RBC发生凝集。
+ 抗筛要求用抗IgG+C3的多特异性抗人球蛋白 试剂，若用单抗IgG的单特异性抗人球蛋白 试剂，可能对某些抗体造成漏检。
不规则抗体筛查及鉴定培训7.27
情况一：抗筛阳性反应强度不一，自身对照阴性
表型与抗体互相验证
情况二：抗筛全部呈阳性反应，反应强度大致相同， 自身对照阳性
情况二：抗筛全部呈阳性反应，反应强度大致相同， 自身对照阳性
3 抗筛阳性输血原则
抗筛阳性患者输血
确认只有不规则抗体
自身（-）、抗体筛选（+）
配血时患者血清中的同种抗体与供 者红细胞上相应抗原起反应。
P 血型 系统抗体
最常见的表型 ：P1、P2 P1 红细胞上有两种不同的 抗原：P1 和 P；P2 红细胞 上只有 P 抗原，可以产生 抗-P1。
不规则抗体种类（其他）
Lewis血型系统抗体： 多为IgM类，属自然产生的抗体，37℃一般不发生反应
Lutheran 血型系统抗体： LU抗原剂量效应，导致混合凝集、临床意义一般不大
结果判读：根据谱细胞的反应格局一般可以鉴定常见的抗体,但有 一定的局限性，有可能漏检常见的组合抗体
排除法：纯合子表达抗原无反应则直接排 除对应的抗体（举例：与5号细胞dCCee、11 号细胞DCCEe、12号细胞DCcEE反应均为阴性， 表明不存在单特异性抗-C）
情况一：抗筛阳性反应强度不一，自身对照阴性
操作:抗体鉴定谱细胞分别与被检血清进行间接抗球 蛋白试验，同时做自身对照
自身细胞检查：确定患者血清内是否有自身抗体或自身抗体与同 种抗体并存，只有是阴性时，才能排除自身抗体或其他凝集素导 致的谱细胞凝集；
使用试剂谱细胞：谱细胞一般是由8～16单人份的已知血型表型的O 型红细胞配套组成，具有各种不同的抗原成分；
聚凝胺介质法
1.红细胞上已有不完全抗体致敏
2.加入聚凝胺，缩短红细胞之间的距离，不完全 抗体同时与两个红细胞结合使其特异性凝集
不完全抗体ppt课件
溶血病。 血型鉴定
8
抗体筛选的目的
早期确认和鉴定患者的抗体，发现临床上有 意义的抗体，以减少不规则抗体进入受血者 的可能性，避免一些可能的情况而造成病情 的延误。
临床上有意义的抗体： 如果某种特异性抗体曾引起新生儿溶血病、 明显的溶血性输血反应或使输入的红细胞存 活时间太短，即认为该种抗体有临床意义。
5
由于其它血型系统的不规则抗体会导致输血 反应：轻者引起寒战、发热，影响治疗效果； 重者破坏输入的不配合的红细胞或缩短其寿 命，产生溶血性输血反应，危机病人生命； 此外，对孕妇而言，不规则抗体会引起新生 儿溶血病，影响新生儿脏器的发育，并使其 智力发育受到伤害，严重者则会危及新生儿 的生命安全。因此，抗筛选是很必要而且必 须的 .
性
11
抗体鉴定
▪ 用于抗体鉴定的配组红细胞由8～16已知血型
的O型红细胞配套组成。
▪ 每个红细胞具有各自不同的抗原成分。 ▪ 每套红细胞均附有相应的红细胞抗原谱。 ▪ 根据谱细胞的反应格局可以鉴定常见的抗体。
12
▪ 灵活应用各种方法，再结合吸收、放散等血
清学手段，对抗体的特异性作分析 自身溶血性贫血患者其红细胞和（或）血清
9
抗体筛查的方法
盐水介质法 非盐水介质法（抗球蛋白法、聚凝胺法、酶
法、低离子介质法、微注凝胶法等）
10
抗体筛选的原则
▪ 抗体筛选试验应尽可能使用包含所有主要血型抗原
的筛选红细胞
▪ 试验应包括完全抗体和不完全抗体的检测 ▪ 抗体筛选阳性标本继续用相同的试验方法做抗体鉴
定。
▪ 确定抗体特异性后，应该确定患者的相应抗原为阴
4
不规则抗体效价随时间的推移在体内可逐渐 降低以致于在输血前交叉配血试验中不能被 发现，但当病人再次输入同种血液时，机体 免疫系统产生回忆反应，大量的同种抗体在 短时间内即可产生而导致溶血性输血反应， 因此在输血前或输血后一旦发现受血者体内 有不规则抗体存在，一定要鉴别其特异性， 对以后输血意义重大。
8
抗体筛选的目的
早期确认和鉴定患者的抗体，发现临床上有 意义的抗体，以减少不规则抗体进入受血者 的可能性，避免一些可能的情况而造成病情 的延误。
临床上有意义的抗体： 如果某种特异性抗体曾引起新生儿溶血病、 明显的溶血性输血反应或使输入的红细胞存 活时间太短，即认为该种抗体有临床意义。
5
由于其它血型系统的不规则抗体会导致输血 反应：轻者引起寒战、发热，影响治疗效果； 重者破坏输入的不配合的红细胞或缩短其寿 命，产生溶血性输血反应，危机病人生命； 此外，对孕妇而言，不规则抗体会引起新生 儿溶血病，影响新生儿脏器的发育，并使其 智力发育受到伤害，严重者则会危及新生儿 的生命安全。因此，抗筛选是很必要而且必 须的 .
性
11
抗体鉴定
▪ 用于抗体鉴定的配组红细胞由8～16已知血型
的O型红细胞配套组成。
▪ 每个红细胞具有各自不同的抗原成分。 ▪ 每套红细胞均附有相应的红细胞抗原谱。 ▪ 根据谱细胞的反应格局可以鉴定常见的抗体。
12
▪ 灵活应用各种方法，再结合吸收、放散等血
清学手段，对抗体的特异性作分析 自身溶血性贫血患者其红细胞和（或）血清
9
抗体筛查的方法
盐水介质法 非盐水介质法（抗球蛋白法、聚凝胺法、酶
法、低离子介质法、微注凝胶法等）
10
抗体筛选的原则
▪ 抗体筛选试验应尽可能使用包含所有主要血型抗原
的筛选红细胞
▪ 试验应包括完全抗体和不完全抗体的检测 ▪ 抗体筛选阳性标本继续用相同的试验方法做抗体鉴
定。
▪ 确定抗体特异性后，应该确定患者的相应抗原为阴
4
不规则抗体效价随时间的推移在体内可逐渐 降低以致于在输血前交叉配血试验中不能被 发现，但当病人再次输入同种血液时，机体 免疫系统产生回忆反应，大量的同种抗体在 短时间内即可产生而导致溶血性输血反应， 因此在输血前或输血后一旦发现受血者体内 有不规则抗体存在，一定要鉴别其特异性， 对以后输血意义重大。
实验三 不规则抗体
【标本、试剂与器材】
• 1. 标本 被检者不抗凝全血； • 2. 试剂 符合国家标准的1-10号鉴定 谱细胞、凝胶微柱卡； • 3. 器材 台式离心机、37℃水浴箱、血 液细胞洗涤离心机。
谱细胞（Panel Cell）
• 由8～12个人份的已知血型 表现型的O型RBC配套组成 • 具有各种不同的抗原成分， 分布各具特点，与抗体反应 出现不同的格局 • 能检出常见抗体和稀有抗体 • 每种抗原在谱细胞上保持一 定为1 个以上
• 4. 凝胶微柱出现凝集，而盐水介质无凝集，则提示 不规则抗体为IgG性质。
【操作步骤】
• 1. 向凝胶卡内依次加0.8-1% 1～10 号鉴定谱细胞50ul, • 2. 每孔加被检者血清25ul, • 3. 37℃温15min, • 4. 专用离心机离心10min,观察结果．
【结果判断】
【方法评价与注意事项】
• 1. 被检者自身血清加自身红细胞管应无凝集；若出 现凝集则提示存在自身免疫性抗体； • 2. ±～4+凝集为阳性结果，表示待检血清中有不规 则抗体，结合谱红细胞反应格局，确定抗体特异性； • 3. 无凝集，表示被检者血清中无不规则抗体。
【操作步骤】
待捡血清 2～5% 1号筛选谱细胞 2～5% 2号筛选谱细胞 2～5% 3号筛选谱细胞
表 一 1 1滴 1滴 2 1滴 1滴 3 1滴
1滴
1. 盐水法 按表一加样后,1000×g离心15s，轻轻摇动试管，肉眼观 察有无凝集结果，记录结果.
2. 凝聚胺 按表一加样后,依次加入低离子介质溶液、凝聚胺溶液, 1000×g离心15s，弃上清夜,摇动试管,看是否形成凝集(如没有凝集 形成需重做),加悬浮液,观察凝集是否散开,记录结果
• 3. 无凝集，表示被检者血清中不存在不规则抗体。
最新不规则抗体及抗体效价PPT课件
分娩后10天复查 • 有不良产史，抗体效价（-） 28周复查1次/月
分娩后10天复查 • 抗体效价（+） 治疗中动态监测 1次/月
分娩后10天复查
Rh抗体效价临床意义
• 由于Rh血型抗体只能由人类红细胞产生，故测
定Rh抗体对诊断围产儿溶血症意义较大 • 一般抗体效价在1：32-1：64说明胎儿有溶血危 险
抗体特异性鉴定（了解）
• 使用谱细胞确定抗体的特异性，谱细胞一 般由8-16种含有不同抗原的O型红细胞配 套组成，根据谱细胞的反应格局一般可以 鉴定常见的抗体。
• 实验方法和抗体筛选实验相同
抗球蛋白试验
• 原理：抗体分子和补体成分都是球蛋白， 用这些球蛋白免疫动物使之产生抗体即抗 人球蛋白，抗球蛋白试剂可以和致敏在红 细胞上的人球蛋白（抗体分子和补体分子 ）反应，通过架桥作用使致敏红细胞出现 凝集。见图
每种方法都有自己的特点，适应于不同范围及情况
• 盐水法：可以用于检测干扰ABO定型的盐水反应活性
抗体，如：MN、P血型抗体。但此方法会检查出无临 床意义的抗体，如冷凝集素抗－I及抗－IH等，而且 会漏检IgG性质的抗体。 • 低离子聚凝胺法（LIP-IAT）：所需试验时间少（3～ 5分钟）、方法灵敏度高，准确性高，但无法排除无 临床意义抗体的干扰。 • 间接抗人球方法：是很灵敏且有效的检测抗体的方法 ，同时此方法可以有效的避免无临床意义抗体的干扰 。缺点：耗时间长，步骤多。
2、“抗体筛选”的含义： 用具备有临床意义的血型抗原的O型 红细胞，检测病人血清（含多种抗 体）；如果出现聚集现象，
则提示病人有不规则抗体存在，可 判为“抗体筛选”阳性。
抗体筛选技术要求
• 尽可能多的检测出有临床意义的抗体。 • 尽可能少的检测出无临床意义的抗体。 • 尽可能快的完成抗体检测
分娩后10天复查 • 抗体效价（+） 治疗中动态监测 1次/月
分娩后10天复查
Rh抗体效价临床意义
• 由于Rh血型抗体只能由人类红细胞产生，故测
定Rh抗体对诊断围产儿溶血症意义较大 • 一般抗体效价在1：32-1：64说明胎儿有溶血危 险
抗体特异性鉴定（了解）
• 使用谱细胞确定抗体的特异性，谱细胞一 般由8-16种含有不同抗原的O型红细胞配 套组成，根据谱细胞的反应格局一般可以 鉴定常见的抗体。
• 实验方法和抗体筛选实验相同
抗球蛋白试验
• 原理：抗体分子和补体成分都是球蛋白， 用这些球蛋白免疫动物使之产生抗体即抗 人球蛋白，抗球蛋白试剂可以和致敏在红 细胞上的人球蛋白（抗体分子和补体分子 ）反应，通过架桥作用使致敏红细胞出现 凝集。见图
每种方法都有自己的特点，适应于不同范围及情况
• 盐水法：可以用于检测干扰ABO定型的盐水反应活性
抗体，如：MN、P血型抗体。但此方法会检查出无临 床意义的抗体，如冷凝集素抗－I及抗－IH等，而且 会漏检IgG性质的抗体。 • 低离子聚凝胺法（LIP-IAT）：所需试验时间少（3～ 5分钟）、方法灵敏度高，准确性高，但无法排除无 临床意义抗体的干扰。 • 间接抗人球方法：是很灵敏且有效的检测抗体的方法 ，同时此方法可以有效的避免无临床意义抗体的干扰 。缺点：耗时间长，步骤多。
2、“抗体筛选”的含义： 用具备有临床意义的血型抗原的O型 红细胞，检测病人血清（含多种抗 体）；如果出现聚集现象，
则提示病人有不规则抗体存在，可 判为“抗体筛选”阳性。
抗体筛选技术要求
• 尽可能多的检测出有临床意义的抗体。 • 尽可能少的检测出无临床意义的抗体。 • 尽可能快的完成抗体检测
《不规则抗体筛选》课件
பைடு நூலகம்
需要不断改进和创新不规 则抗体筛选技术，以适应 不同的研究需求和应用场 景。
希望本课件能够为不规则 抗体筛选领域的研究者提 供参考和思路，推动该领 域的进一步发展。
参考文献
- 引用的文献列表
当前的研究现状
不规则抗体筛选技术在科学研究 和工业应用中取得了显著的进展 和创新。
未来的发展方向
加强对不规则抗体筛选技术的研 究，进一步完善技术方法，推动 其在更多领域的应用。
结论
1 不规则抗体筛选的重 2 筛选技术的进一步完 3 期望对不规则抗体筛
要性
善和创新的必要性
选研究的贡献
不规则抗体筛选在生物医 学领域和生物技术领域具 有重要的理论意义和实际 应用价值。
《不规则抗体筛选》PPT 课件
本课件介绍了不规则抗体筛选的重要性和筛选技术的发展。通过丰富的内容 和精美的布局，旨在提供易于理解和引人入胜的知识。
不规则抗体筛选介绍
不规则抗体是指形态、结构、性质上与普通抗体不完全一致的抗体，有着独特的特征和优势。了解不规则抗体 及筛选意义。
不规则抗体筛选的基本原理
不规则抗体筛选的基本原理是通过特定的方法，从混合溶液或反应体系中筛 选出目标抗体，以获得纯化和高亲和力的抗体。
直接筛选法
1 亲和层析法
利用不规则抗体与目标分子的特异性相互作用进行层析分离。
2 免疫法
通过不规则抗体与目标分子的特异性反应来检测和筛选抗体。
间接筛选法
吸附剂法
通过将目标抗原吸附在固相载体上，间接筛选出与抗原特异结合的不规则抗体。
非吸附剂法
利用可溶性载体或晶体结合剂介导的间接筛选方法，实现不规则抗体的高效筛选。
应用举例
1
需要不断改进和创新不规 则抗体筛选技术，以适应 不同的研究需求和应用场 景。
希望本课件能够为不规则 抗体筛选领域的研究者提 供参考和思路，推动该领 域的进一步发展。
参考文献
- 引用的文献列表
当前的研究现状
不规则抗体筛选技术在科学研究 和工业应用中取得了显著的进展 和创新。
未来的发展方向
加强对不规则抗体筛选技术的研 究，进一步完善技术方法，推动 其在更多领域的应用。
结论
1 不规则抗体筛选的重 2 筛选技术的进一步完 3 期望对不规则抗体筛
要性
善和创新的必要性
选研究的贡献
不规则抗体筛选在生物医 学领域和生物技术领域具 有重要的理论意义和实际 应用价值。
《不规则抗体筛选》PPT 课件
本课件介绍了不规则抗体筛选的重要性和筛选技术的发展。通过丰富的内容 和精美的布局，旨在提供易于理解和引人入胜的知识。
不规则抗体筛选介绍
不规则抗体是指形态、结构、性质上与普通抗体不完全一致的抗体，有着独特的特征和优势。了解不规则抗体 及筛选意义。
不规则抗体筛选的基本原理
不规则抗体筛选的基本原理是通过特定的方法，从混合溶液或反应体系中筛 选出目标抗体，以获得纯化和高亲和力的抗体。
直接筛选法
1 亲和层析法
利用不规则抗体与目标分子的特异性相互作用进行层析分离。
2 免疫法
通过不规则抗体与目标分子的特异性反应来检测和筛选抗体。
间接筛选法
吸附剂法
通过将目标抗原吸附在固相载体上，间接筛选出与抗原特异结合的不规则抗体。
非吸附剂法
利用可溶性载体或晶体结合剂介导的间接筛选方法，实现不规则抗体的高效筛选。
应用举例
1
不规则抗体及抗体效价 PPT
微柱凝集
• 灵敏度高 • 操作简便，时间较少 • 准确性较高 • 成本较高
上海市血液中心 朱自严
• 抗体筛选是无法检测出血清中的所有抗体 ，比如抗体是针对低频抗原的，而筛选细 胞中并不含低频抗原
• 如果抗体在37℃或抗球蛋白介质中不反应 ，单用间接抗球蛋白方法的抗体筛选也会 漏检这些抗体。
上海市血液中心 朱自严
0型产妇是发生溶血症的独立危险因子！！
其他血型的孕妇需要检测抗体效价吗？
ABO血型不合系统
➢A型人的抗B 和B 型人的抗A主要由IgM分 子组成,只有少量IgG分子,故A型或B型母亲 所生婴儿很少因母子血型不合引起新生儿 溶血病。
ABO抗体效价临床意义
• 由于ABO血型有天然抗体，故母亲血中的抗体效价 需很高才对新生儿溶血症的诊断有意义
为什么要开展输血前的“抗体筛选”检查
3、有利于早期发现和确认具有临床意义的抗体， 获得充足的时间来选择相配合的血，避免由于 寻找不到相合的血液而造成患者病情的延误。
抗体筛选检查
一、什么叫“抗体筛选”检查 1、不规则抗体的含义：通常把抗A、抗B以外的所有红
细胞血型抗体称为不规则抗体。如抗D、抗N、抗M、jk-抗 体。
• 一般抗体效价在1：128-1：256要警惕胎儿可能有 溶血，抗体效价≥1：512说明胎儿有溶血危险
• 有学者报告观察几例抗体效价≥1：512的孕妇产后 无新生儿溶血发生。所以母体血中有ABO抗体临床 意义较小，但结合其它检验结果综合分析，仍有一 定的临床意义。
ห้องสมุดไป่ตู้
Rh抗体效价测定
• 妊娠20周测抗体效价 • 无不良产史，抗体效价（-）32-34周复查
为什么要开展输血前的“抗体筛选”检查
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2.加入聚凝胺，缩短红细 胞之间的距离，不完全抗 体同时与两个红细胞结合 使其特异性凝集
聚凝胺
枸橼酸钠
3.加入枸橼酸钠中和聚凝胺
4.不完全抗体的结合， 特异性凝集不消失
不完全抗体
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抗人球蛋白介质法 处，请联系网站或本人删除。
1.红细胞彼此之间有一定的间 距 2.不完全抗体结合在红细胞表
产生：免疫刺激； 免疫抗体 分类：IgG类抗体为主； IgM类抗体少
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IgM抗体处，请联系网站或本人删除。
多以五聚体形式存在，分子最大
在盐水介质中能直接连接相应的红细胞， 使之发生肉眼可见的凝集反应，又称为完全 抗体
IgG 抗体 本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之 处，请联系网站或本人删除。
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思考题处，请联系网站或本人删除。
1.不规则抗体筛选为何先在盐水介质中进行？ 2.能否只选择聚凝胺介质法或抗人球蛋白介 质法一种方法进行不规则抗体的筛查？
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教学目标 处，请联系网站或本人删除。
1.掌握不规则抗体筛查方法 2.熟悉不规则抗体筛查的概念、方法学评价
及临床意义
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不规则抗体 处，请联系网站或本人删除。
概念：不符合ABO血型系Landsteiner 法 则的血型抗体，即抗-A、抗-B 以外的血 型抗体
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受伤严重，需要 立即输血！！！
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面,但是不能和两个红细胞同 时结合（致敏） 3.加入抗人球蛋白
4.抗人球蛋白同时和两个 不完全抗体的Fc段结合， 从而把红细胞连接在一起
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方法学评价 处，请联系网站或本人删除。
盐水介质法：最基本，检测IgM型血型抗体
聚凝胺介质法：速度快，实验时间5分钟左右 ； 不适合于Kell系统抗体的检测，但汉 族人群至今无Kell系统抗体检出报道
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概念：不符合ABO 血型系Landsteiner法则的血 型抗体，也就是抗-A、抗-B 以外的血型抗体
抗人球蛋白介质法：检测IgG型血型抗体最为经典方法， 步骤繁琐，耗时较多
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临床意义 处，请联系网站或本人删除。
献血者：防止含有不规则抗体的血液输注给病 人，避免溶血性输血反应
受血者：有助于血液选择，充分的时间选择相合 的血液
孕妇：早发现，孕期进行新生儿溶血病的预防和 治疗，减少不规则抗体对胎儿或新生儿带来的伤 害
1.临床输血与检验 人民卫生出版社 2.人类血型 科学出版社 3.免疫血液学 上海科学技术出版社 4.中国输血协会
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不规则抗体处检，请测联系原网站理或本人删除。 图 6-2 ：红细胞表面电荷及其相互之间的距离
自由移动的 正电荷 内层正电荷 随红细胞移动 表面负电荷 红细胞
红细胞间由静电维 持最小距离约 24nm
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1.不规则抗体两类：IgG型、 IgM型
2.不规则抗体筛查方法：先盐水介质法，后聚凝胺 介质法或抗人球蛋白法 3.盐水介质法只能检测IgM型不规则抗体； IgG型抗 体需要选择聚凝胺介质法或抗人球蛋白法
单体形式存在，分子量较小 盐水介质中只能致敏相应抗原的红细胞，而不能
使之凝集，又称为不完全抗体 必须通过特定的方法使致敏红细胞发生凝集
✓聚凝胺法 ✓抗人球蛋白法
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不规则抗体处筛，请查联系方网站或法本人删除。
盐水介质法 聚凝胺介质法（最常用） 抗人球蛋白介质法（经典）
不规则抗体处检，请测联系原网站理或本人删除。
35.7nm
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14nm
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聚凝胺介质法 处，请联系网站或本人删除。
1.红细胞上已有不完全 抗体致敏
聚凝胺
枸橼酸钠
3.加入枸橼酸钠中和聚凝胺
4.不完全抗体的结合， 特异性凝集不消失
不完全抗体
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抗人球蛋白介质法 处，请联系网站或本人删除。
1.红细胞彼此之间有一定的间 距 2.不完全抗体结合在红细胞表
产生：免疫刺激； 免疫抗体 分类：IgG类抗体为主； IgM类抗体少
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多以五聚体形式存在，分子最大
在盐水介质中能直接连接相应的红细胞， 使之发生肉眼可见的凝集反应，又称为完全 抗体
IgG 抗体 本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之 处，请联系网站或本人删除。
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1.不规则抗体筛选为何先在盐水介质中进行？ 2.能否只选择聚凝胺介质法或抗人球蛋白介 质法一种方法进行不规则抗体的筛查？
参考资料 本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之 处，请联系网站或本人删除。
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1.掌握不规则抗体筛查方法 2.熟悉不规则抗体筛查的概念、方法学评价
及临床意义
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概念：不符合ABO血型系Landsteiner 法 则的血型抗体，即抗-A、抗-B 以外的血 型抗体
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受伤严重，需要 立即输血！！！
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面,但是不能和两个红细胞同 时结合（致敏） 3.加入抗人球蛋白
4.抗人球蛋白同时和两个 不完全抗体的Fc段结合， 从而把红细胞连接在一起
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盐水介质法：最基本，检测IgM型血型抗体
聚凝胺介质法：速度快，实验时间5分钟左右 ； 不适合于Kell系统抗体的检测，但汉 族人群至今无Kell系统抗体检出报道
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概念：不符合ABO 血型系Landsteiner法则的血 型抗体，也就是抗-A、抗-B 以外的血型抗体
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献血者：防止含有不规则抗体的血液输注给病 人，避免溶血性输血反应
受血者：有助于血液选择，充分的时间选择相合 的血液
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自由移动的 正电荷 内层正电荷 随红细胞移动 表面负电荷 红细胞
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2.不规则抗体筛查方法：先盐水介质法，后聚凝胺 介质法或抗人球蛋白法 3.盐水介质法只能检测IgM型不规则抗体； IgG型抗 体需要选择聚凝胺介质法或抗人球蛋白法
单体形式存在，分子量较小 盐水介质中只能致敏相应抗原的红细胞，而不能
使之凝集，又称为不完全抗体 必须通过特定的方法使致敏红细胞发生凝集
✓聚凝胺法 ✓抗人球蛋白法
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1.红细胞上已有不完全 抗体致敏