不规则抗体筛查与鉴定分析
不规则抗体筛查在临床输血患者中的检出结果及分析
不规则抗体筛查在临床输血患者中的检出结果及分析摘要目的探討并分析不规则抗体筛查在临床输血患者中的检出结果，为保证临床输血安全减少输血反应及临床疑难输血提供依据。
方法17521例住院患者，应用微柱凝胶抗球蛋白法筛查其血清中不规则抗体，对阳性患者进行抗体特异性检测并分析。
结果17521例受血者不规则抗体阳性率为0.35%（61/17521），检出血型同种不规则抗体61例。
男性阳性检出率为0.30%（21/6952），女性阳性检出率为0.38%（40/10569）。
结论输血前不规则抗体筛检能发现有临床意义的不规则抗体，特别是对血液病、肿瘤、多次输血及有多次妊娠史患者可提前预警，以保证患者输血安全。
关键词不规则抗体；筛查；微柱凝胶法；输血安全不规则抗体是指ABO 血型系统以外所有红细胞血型抗体，包括红细胞同种抗体和自身抗体，可导致血型鉴定及交叉配血困难，引起溶血性输血反应（HTR）及新生儿溶血病（HDN），自身抗体还可导致自身免疫溶血性疾病（AIHA）[1]。
输血前对受血者进行不规则抗体的筛查和鉴定，尤其对有输血史、妊娠史及短期内有多次输血患者筛检具有临床意义的抗体，选择相应抗原阴性、交叉配血相合的红细胞输注，对有效减少或避免溶血性输血反应的发生，保证临床输血安全具有重要意义。
现报告如下。
1 资料与方法1. 1 一般资料选取2013年1月～2015年9月住院申请输（备）血的17521例患者，其中男6952例，女10569例。
输血前1～3 d常规采集患者静脉血3 ml EDTA-K2 抗凝，充分离心分离血浆待查。
1. 2 试剂与仪器Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ0.8%标准抗体筛查细胞、谱细胞由上海市血液生物医药有限公司提供并在有效期使用，抗人球蛋白微柱凝胶卡（含抗-IgG + C3d）、微柱孵育器、离心机由长春博讯生物制品有限公司提供，并严格按说明书进行操作。
1. 3 检测方法[2] 不规则抗体筛查及特异性鉴定：使用抗人球蛋白微柱凝胶卡，离心患者血液标本分离血浆与红细胞，吸取分别被检者血浆50 μl和抗体筛查细胞50 μl加入抗球蛋白检测卡Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号中，置37℃孵育15 min， 1 000 r/min 离心10 min，肉眼观察结果。
输血中不规则抗体的筛查及临床意义
输血中不规则抗体的筛查及临床意义不规则抗体定义不规则抗体，是指血清中抗-A、抗-B以外的其他血型抗体。
在人群中检出频率为0.3-2％。
不规则抗体产生的原因不规则抗体主要是经大量输血或妊娠等免疫刺激产生，在盐水介质中不能凝集而只能致敏表达相应抗原的红细胞，必须通过特殊介质才能使致敏红细胞出现凝集反应。
不规则抗体检测的重要性由于其它血型系统的不规则抗体会导致输血反应:轻者引起寒战、发热，影响治疗效果；重者破坏输入的不配合的红细胞或缩短其寿命，产生溶血性输血反应，危机病人生命；此外，对孕妇而言，不规则抗体会引起新生儿溶血病，影响新生儿脏器的发育，并使其智力发育受到伤害，严重者则会危及新生儿的生命安全。
因此，不规则抗体筛选是很必要而且必须的。
不规则抗体检测方法采用抗人球蛋白(IgG+C3d)检测卡(徽柱凝胶法)检测人血清(浆)中的血型不规则抗体。
通过对患者进行输血前不规则抗体筛查，能够发现有临床意义的不规则抗体，避免输入不相合血液，以达到安全输血之目的。
不规则抗体检测的原理将血型血清免疫学的抗原抗体特异性凝集反应与微柱凝胶分子筛技术以及离心技术有机结合。
患者血清(浆)与筛选红细胞经过在微柱凝胶上层反应池中孵育，凝集或致敏的红细胞因体积大在离心力的作用下不能通过凝胶间隙而留在凝胶上层或分散在凝胶中，即为阳性反应。
未凝集的游离红细胞因体积小在离心力的作用下能通过凝胶间隙沉积在微柱凝胶管底部，形成“红细胞扣”即为阴性反应。
不规则抗体筛选适用以下情况1、ABO血型鉴定发现受检者血清中有不规则抗体时；2、供血者血清抗体筛检；3、输血前受者血清抗体检查；4、输血后溶血反应疑为由同种抗体引起时；5、孕妇血清的抗体检查；6、新生儿溶血病血液中抗体检查；7、直接抗人球蛋白试验阳性红细胞上抗体的检查。
不规则抗体筛选的临床意义1、献血者的血清或血浆进行抗体筛查，可以防止含有不规则抗体的血液输注给病人，避免由于献血者血液中的不规则抗体引起病人红细胞的破坏而引起的溶血性输血反应，同时可以减少血液浪费，可将有不规则抗体的血液制备成抗体血清，用于稀有血型的检测。
输血前不规则抗体筛查结果及其临床意义分析
表3控制菌验证结果组别金黄色葡萄球菌铜绿假单胞菌白色念珠菌试验组阳性阳性阳性阳性对照组阳性阳性阳性阴性对照组阴性阴性阴性划线平板甘露醇氯化钠琼脂漠化十六烷基三甲胺琼脂平板沙氏葡萄糖琼脂平板4讨论医用超声耦合剂中含有的卡波姆是一种高分子材料，是一类非常重要的流变调节剂,形成凝胶状,有增稠、悬浮等重要用途，具有良好的涂展性，还可以消炎杀菌％本实验中，利用氯化钙溶液屏蔽了卡伯姆的羧酸基，使相互排斥作用减弱,而二价离子有可能和羧酸根结合形成盐类物质从而影响了卡伯姆凝胶的粘度，使其容易通过滤膜，加上卵磷脂和吐温80的中和灭活作用，消除了抑菌物质的抑菌性，寻找出以卡伯姆作为基质,盐酸聚六亚甲基胍作为防腐剂的医用超声耦合剂的微生物检验方法。
参考文献［1］孟勇涛，饶丽平•卡波姆在凝胶制剂中的使用问题的探讨［J］・齐鲁药事,2010,29(12)：708-709.［2］熊佳佳，王柏•卡伯姆凝胶流变学特性及其影响因素研究［J］.海峡药学,2006,18(4)：34-37.［3］国家药典委员会•《中国药典》2015年版第四部通则［M］.北京：中国医药科技出版社,1105-1106.［4］曲萍，仇丽霞,赵思俊，等•卡波姆抑菌凝胶剂微生物限度检查方法的建立［J］.药物分析,2013,33(8)：1317-1312.［5］檀巧婷，严佳，周欣，等•快手洁手消毒凝胶的微生物限度检查方法学验证［J］・药学实践杂志,2014,32(5)：366-367,382.(收稿日期：2020-08-04)输血前不规则抗体筛查结果及其临床意义分析白明华输血是临床治疗多种疾病的常用方式,具有补充血容量、调节血液循环、增加携氧能力、改善凝血功能等多种作用,利于抗休克和防止出血性休克等疾病［1'2］o但血液制品内成分较为复杂，输血前筛查不规则抗体是保障输血安全性的重要措施。
目前，血型抗体可分为规则抗体和不规则抗体,其中ABO型血型内的抗体称为规则抗体,因检测技术的发展，该类抗体引起的溶血反应已大幅减少［3,4］%而不规则抗体主要指ABO型以外的抗体，在怀孕、器官移植或输血等因素影响下,体内血型意外抗体明显增多,给输血带来严重安全隐患,轻则输血失败，重则发生溶血反应威胁患者生命［5］o因此，临床更应重视输血前的精确检测,以筛查不规则抗体,准确了解患者不规则抗体类型，从而减少输血不良反应，保证输血安全。
实验四不规则抗体筛选与鉴定、效价测定
2.鉴定 2.鉴定
标管： ⑴标管：11支1-10、自c 加样： ⑵加样：Ps2滴+谱细胞1滴 离心、观察结果： ⑶离心、观察结果： ①直接观察 ②4℃10min观察 ③恢复室温观察，有格局为IgM ④37℃观察有无凝集 ⑤凝聚胺法或抗人球法（上谱细胞），观 察格局可判断有无IgG抗体 测效价： ⑷测效价：若有抗体，测效价
操 作
1.筛选 1.筛选
(聚凝胺法 聚凝胺法) 聚凝胺法 (抗人球法 抗人球法) 抗人球法
⑴标管8支:S1、S2、S3、S1’、S2’、S3’、K、自c 标管8 ⑵加样：受检血清2滴+上述细胞1滴检测 加样 ⑶观察结果:阳性进行不规则抗体鉴定 观察结果: ⑷测抗体效价（室温、4℃10min、恢复室温 测抗体效价 10min、37℃3min ）
注意事项 1.更换滴管， 1.更换滴管，防止干扰 更换滴管 2.防止前带现象， 2.防止前带现象，看结果从高稀释度开始 防止前带现象 3.试剂细胞 3.试剂细胞 4.稀释液体积越小， 4.稀释液体积越小，产生误差越大 稀释液体积越小
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
思考题
1.为何不规则抗体筛选与鉴定要在盐水、 1.为何不规则抗体筛选与鉴定要在盐水、 为何不规则抗体筛选与鉴定要在盐水 聚凝胺、抗人球介质中进行。 聚凝胺、抗人球介质中进行。 2.抗体效价检测的临床应用 2.抗体效价检测的临床应用
目的 掌握抗体效价的测定方法 原理 Ab经过倍比稀释加入悬浮红细胞，以肉眼可 见“±”凝集的最高稀释倍数为抗体效价。 器材 试剂 小试管、记号笔、滴管、离心机 悬浮红细胞、血清、生理盐水
实验步骤 1.标记管号 标记管号：1、2、4、8、16、32…… 标记管号 2.从2号开始各管分别加生理盐水50ul 从 号开始各管分别加生理盐水50ul 3.加血清 加血清：1、2管各加血清 加血清 4.倍比稀释 倍比稀释：将2号管混匀，从中吸出50ul移入 倍比稀释 第3管，混匀；再从第3管吸出50ul移入第4 管，以此类推，至最后一管，吸出50ul弃去。 5.加悬红 加悬红：每管各加50ul ，混匀。 加悬红 6.3000r／min离心 离心15秒，直接观察结果 观察结果、 离心 观察结果 4℃10min、室温10min、37℃3min观察结果。
不规则抗体筛选和鉴定标准操作规程
不规则抗体筛选和鉴定标准操作规程1.检验目的不规则抗体筛选和鉴定可在交叉配合之前进行或一起进行，这样有利于患者抗体的早期确认及鉴定，发现临床上有意义的抗体，避免一些可能的情况而造成病情的延误。
2.检验方法分盐水介质法、抗球蛋白法和微柱凝胶法。
3.检验原理让待检者的血清与已知血型的试剂红细胞即筛选红细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ套）起反应，以发现在37℃中有反应活性的抗体。
这种抗体可引起新生儿溶血病、溶血性输血反应、或使输入的红细胞存活期缩短等。
当不规则抗体筛选试验阳性后，再进行不规则抗体鉴定，即利用谱红细胞（11套鉴定细胞）与待检者的血清反应，根据反应结果判断机体所产生的同种抗体类别。
4.标本要求受检者不抗凝静脉血4.0ml，分离血清，48小时内使用5.试剂5.1.筛选红细胞：由2或3人份的O型红细胞组成为一套试剂，每套试剂筛选红细胞中至少有以下常见的抗原：D、C、E、c、e、M、N、S、s、P、Le a、Le b、K、k、Fy a、Fy b、Jk a、Jk b等。
每次用3套试剂（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）进行抗体筛选，见表1005-1。
5.2.鉴定谱细胞：除包括常见的抗原以外还有：C w、Kp a、Kp b、Js a、Js b、Lu a、Lu b、Xr/min a等。
每次用11套试剂进行抗体鉴定，见表1005-2。
5.3.抗球蛋白试剂：多特异性抗球蛋白血清（IgG、C3d）。
5.4.致敏红细胞（质控细胞）。
5.5.0.9%生理盐水。
5.6.Coombs微柱凝胶卡。
6.器材试管、吸管、37℃水浴箱、台式离心机、滤纸、微量加样器等。
7.操作程序7.1.盐水介质法7.1.1．取受检者血清2滴于标记有Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的3支小试管中。
7.1.2．对应加入Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ套2%～5%筛选红细胞生理盐水悬液1滴，37℃孵育30分钟。
7.1.3.以3000r/min离心10秒，观察凝集和溶血情况，并记录反应情况于表1005-1中。
如果抗体筛选试验阳性，继续做以下试验。
不规则抗体筛查与分析(1)
02抗体的筛查与 分析
03抗体的鉴定与 分析
01凡遇有下列情况必须按《全国临床检验操 作规程》有关规定作抗体筛选实验：交叉 配血不合时；对有输血史、妊娠史或短期 内需要接收多次输血者。
02不做抗筛直接盲配有风险，对于弱抗体， 若供血者为杂合子（剂量效应）则有可能 为阴性结果。所以筛选（鉴定）对抗体的 检测比交叉配血更敏感和可靠。
抗筛的目的是通过受检的血清和已知的带有
不同抗原的三人份O型筛选红细胞反应，来 测定血清中有无抗A和抗B以外的意外抗体 （也称不规则抗体）
对疑难交叉配血有重要的指导意义，降低盲 配风险
补体依赖性抗体 补体非依赖性抗
体
完全抗体 不完全抗体
天然抗体 免疫抗体
冷抗体 温抗体
自身抗体 同种抗体
临床有意义抗体：一般为免疫性抗体，在体 温条件（37度）具有反应性的同种抗体。
+ （抗-E/-cE约占1/3，此类患者筛选相合的血液 是很容易的）
+ Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ全部阳性，且强度一致；自c阳 性：结合病情，优先考虑自身抗体
+ Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ全部阳性，自c阴性：考虑同种 抗体，如病人血型为Rh阴性，优先考虑抗-D
+
+ 抗筛结果排除假阴性，一定是阴性结果吗？
+ 解答：“抗筛阴性”并不能代表“同种抗体阴性”。 + 筛选细胞和谱细胞有人种差异，如Mia，
+ 抗人球蛋白试剂：IgG抗体通过抗人IgG类免 疫球蛋白抗体（简称抗人球）“搭桥”，使已 致敏了不完全抗体的RBC发生凝集。
+ 抗筛要求用抗IgG+C3的多特异性抗人球蛋白 试剂，若用单抗IgG的单特异性抗人球蛋白 试剂，可能对某些抗体造成漏检。
不规则抗体筛查及鉴定培训7.27
情况一：抗筛阳性反应强度不一，自身对照阴性
表型与抗体互相验证
情况二：抗筛全部呈阳性反应，反应强度大致相同， 自身对照阳性
情况二：抗筛全部呈阳性反应，反应强度大致相同， 自身对照阳性
3 抗筛阳性输血原则
抗筛阳性患者输血
确认只有不规则抗体
自身（-）、抗体筛选（+）
配血时患者血清中的同种抗体与供 者红细胞上相应抗原起反应。
P 血型 系统抗体
最常见的表型 ：P1、P2 P1 红细胞上有两种不同的 抗原：P1 和 P；P2 红细胞 上只有 P 抗原，可以产生 抗-P1。
不规则抗体种类（其他）
Lewis血型系统抗体： 多为IgM类，属自然产生的抗体，37℃一般不发生反应
Lutheran 血型系统抗体： LU抗原剂量效应，导致混合凝集、临床意义一般不大
结果判读：根据谱细胞的反应格局一般可以鉴定常见的抗体,但有 一定的局限性，有可能漏检常见的组合抗体
排除法：纯合子表达抗原无反应则直接排 除对应的抗体（举例：与5号细胞dCCee、11 号细胞DCCEe、12号细胞DCcEE反应均为阴性， 表明不存在单特异性抗-C）
情况一：抗筛阳性反应强度不一，自身对照阴性
操作:抗体鉴定谱细胞分别与被检血清进行间接抗球 蛋白试验，同时做自身对照
自身细胞检查：确定患者血清内是否有自身抗体或自身抗体与同 种抗体并存，只有是阴性时，才能排除自身抗体或其他凝集素导 致的谱细胞凝集；
使用试剂谱细胞：谱细胞一般是由8～16单人份的已知血型表型的O 型红细胞配套组成，具有各种不同的抗原成分；
聚凝胺介质法
1.红细胞上已有不完全抗体致敏
2.加入聚凝胺，缩短红细胞之间的距离，不完全 抗体同时与两个红细胞结合使其特异性凝集
3774例输血患者不规则抗体筛查及鉴定结果分析
3774例输血患者不规则抗体筛查及鉴定结果分析目的了解本院输血患者的不规则抗体的发生率及分布，探讨不规则抗体检测在临床输血中的作用，提高输血的安全性及有效性。
方法选取我院2010年12月～2012年12月预备输血或手术备血患者标本进行抗体筛查，对于结果阳性者用谱细胞再进行抗体的鉴定试验，统计不规则抗体的发生率。
结果在3774例患者标本中不规则抗体阳性者为9例，发生率为0.24%，其中抗一Ec1例、抗一E 2例、抗一Ce各2例、抗一D 1例、抗一M及抗一Mur各1例，抗-Leb 1例。
其中血液肿瘤科患者发生率最高，占44.4%，其次为妇产科占33.4%。
结论输血前患者进行不规则抗体筛查及鉴定显得尤为重要，避免溶血性输血反应的发生，提高输血的安全性及有效性。
标签：抗体筛查和鉴定；微柱凝胶法；输血；安全血型抗体主要分为规则抗体和不规则抗体两类.一类是ABO血型系统的规则抗体.而另一类则是指抗A、抗B、抗AB以外的其它血型抗体，多为IgG抗体。
有临床意义的不规则抗体会造成急性或迟发性输血不良反应，破坏输入的不配合的红细胞或缩短其寿命，产生溶血性输血反应，轻则影响治疗效果，重则危机患者生命[1]。
目前随着血型鉴定试剂灵敏度的提高、输血技术的进步及同型血、成分血的运用，由ABO血型不合造成的溶血反应几乎不可能发生。
但是由于多次输血、多次妊娠或血液制品的免疫刺激等产生的不规则抗体引起的迟发性溶血反应也是不容忽视的。
因此，筛查及鉴定不规则抗体对临床安全输血中有重要的意义。
我院对3774 例临床申请输血患者进行不规则抗体筛查及鉴定，效果较好，现报告如下。
1资料与方法1.1一般资料我院2010年12月～2012年12月预备输血或手术备血患者3774 例，其中男2096例，女1678 例。
女性患者中，孕妇205 例，非孕妇1473 例。
年龄3～91 岁。
对患者标本均做不规则抗体筛查，对9例筛查阳性患者进行不规则抗体鉴定。
输血前患者不规则抗体筛查及鉴定结果分析对提前预警的作用
输血前患者不规则抗体筛查及鉴定结果分析对提前预警的作用作者：***来源：《医学食疗与健康》2021年第19期[中图分类号]R446.112[文献标识码]A [文章编号]2096-5249（2021）19-0256-02不规则抗体指的是不包括在A、B、O血型系统内的其它血型系统抗体，大都是由输血或是妊娠等免疫造成，并能够引起溶血性输血反应、新生儿溶血病、血型鉴定困难和交叉培训困难等严重后果。
目前在临床医疗技术水平日益提高的前提下，血型鉴定已经有了很高的灵敏性，这也在很大程度上降低了由于ABO血型鉴定误差而导致发生的速发型溶血反应，但是这也无法彻底阻挡因疾病、输血或是妊娠等原因导致的不规则抗体引发的輸血后迟发型溶血反应。
所以，在输血之前，对被输血者做不规则抗体筛查与鉴定，特别是通过筛查找到对有妊娠史、输血史和短期内多次输血者有临床意义的抗体，继而选择相应抗原阴性、较差配血相合红细胞进行输注，起到提前预警的作用，对于降低甚至是规避患者发生溶血性输血反应，保证患者临床安全是有重要意义的。
1资料来源和方法1.1基础资料以2018年8月至2020年8月在我院输血患者为试验观察对象，获得资料总计20000份，对其病历资料进行总结和分析，包括：患者性别、临床诊断、既往有无输血史和妊娠史等。
1.2方法1.2.1仪器与试剂抗体筛选细胞、抗体鉴定谱细胞;抗人球蛋白微柱凝胶卡;离心机与孵育器等。
1.2.2筛查方法使用抗人球蛋白微柱凝胶卡，严格按照说明书要求进行操作，步骤为：①取59uL筛选细胞悬液加入到微柱凝胶卡相应微管当中;②取患者血浆总计25uL加入其中;③在环境为37℃的条件下孵育15min;④使用离心机进行离心处理，进行结果的判定。
得到阳性筛查标本和谱细胞，再使用微柱凝胶法做抗体的特异性鉴定，结合与谱细胞的反应格局情况，做出抗体特异性的判断。
1.3数据统计试验结果数据用统计学软件SPSS25.0进行统计和分析，采用描述方法（百分比）呈现结果，采用卡方检验对结果进行分析，所得结果值为P，该值小于0.05表示两组数值比较有意义。
不规则抗体筛查及鉴定在临床中的意义
不规则抗体筛查及鉴定在临床中的意义摘要】目的：讨论研究对患者进行不规则抗体筛查及鉴定并及时发现具有临床意义的不规则抗体并选择相合的血液有助于确保患者输血安全。
方法：对我院2014年1月至2014年11月拟输血或手术备血的500名患者进行不规则抗体筛查。
将筛查结果呈阳性的标本进行抗体鉴定并分析抗体特异性。
结果：不规则抗体阳性患者共9例，占1.8%。
不规则抗体阳性患者进行抗体鉴定试验后：Rh 系统5例，占55.6；MNSs系统2 例，占22.2%；抗A-1 系统患者1例，占11.1%；P系统1例，占11.1%。
对其输注无相应抗原的红细胞未有一例发生溶血性输血反应。
结论：对预期输血及手术备血患者进行抗体筛查既能有效避免由于配血困难而导致抢救时间延误的发生，又能够避免溶血性输血反应的发生。
【关键词】不规则抗体；筛查及鉴定；意义与重要性【中图分类号】R2 【文献标号】A 【文章编号】2095-7165（2015）06-0041-01不规则抗体主要是指抗-A、抗-B 及抗A、B之外的血型抗体，主要以IgG抗体为主[1]。
这些红细胞血型的不规则抗体可能导致血型鉴定和交叉配血困难从而导致免疫性溶血输血反应和新生儿溶血病，自身抗体还可导致自身免疫溶血性疾病。
因此，对需要输血的患者提前进行常规抗体筛查并选择输入无相应抗原的完全配合型血液输注对确保临床输血安全具有重要意义。
我科室于2010年起已逐步开始开展不规则抗体筛查，现将2014年1月至11月间所做的不规则抗体筛查报告所得结果汇总如下。
1 资料与方法1.1 临床资料选择我院2014 年1 月至2014 年11 月住院拟输血及手术备血患者500例作为研究对象。
其中男255例，女245 例；年龄0-64岁，平均年龄（32.1±32.1）岁。
1.2 检测仪器及试剂使用长春博迅微柱凝胶免疫卡，37℃专用恒温孵育器及卡式离心机、长春博研公司TD-3A 型血型血清专用离心机等。
不规则抗体筛选与鉴定在临床安全输血中的应用实践分析
临床探索不规则抗体筛选与鉴定在临床安全输血中的应用实践分析曾玉龙 （巴中市中心医院输血科，四川巴中 636000）摘要：目的：探究不规则抗体筛选与鉴定在临床安全输血中的应用实践。
方法：选取2019年10月~2020年10月接受输血的150例患者为研究对象，并对其进行不规则抗体筛选与鉴定，分析筛选结果，以及输血安全的临床意义。
结果：对150例患者进行不规则抗体筛选与鉴定后，检出不规则抗体20例，阳性率13.30%。
对其抗体结果进行分析后，出现Rh系统抗体10例，其他系统出现5例患者,非特异性凝集出现4例，自身免疫性凝集出现6例。
结论：在对输血患者实施不规则抗体筛选与鉴定后，能够有效提升输血治疗的安全性，以及显著降低患者出现输血反应机率。
关键词：输血；不规则抗体筛选；鉴定；应用实践不规则抗体是指没有产生规则的抗体，在对无输血史以及妊娠史患者进行血液检验时，很少能够检出不规则抗体[1]。
对此，我国卫生部发文，当患者存在交叉配血不合、存在妊娠需输血，以及需要多次输血患者，应及时进行不规则抗体筛选。
早期鉴定能够有效检出存在影响的抗体，并减少由于不规则抗体而引发的输血反应率，同时也提高了输血治疗的安全性以及避免对患者病情的延误。
本研究选取接受输血的150例患者为研究对象，探究不规则抗体筛选与鉴定在临床安全输血中的应用实践。
现报道如下：1资料与方法1.1 一般资料选取2019年10月~2020年10月我院接受输血的150例患者为研究对象，进行不规则抗体筛选与鉴定。
男75例，女75例，年龄0岁~96岁，平均年龄（48.00±0.23）岁。
纳入标准：（1）对本研究内容均知情且自愿参与。
排除标准：输血配合度较差者。
1.2 研究方法准备瑞士DiaMed检测系统、37℃水浴箱、普通离心机、久保田洗涤离心机、微柱凝胶抗人球蛋白卡式法技术、全自动血型分析仪（瑞士哈美顿博纳图斯股份公司生产）、抗人球蛋白检测卡（长春博迅生物技术有限责任公司生产）、的抗体筛选红血细胞试剂盒（上海血液生物医药有限责任公司生产）以及谱细胞（上海血液生物医药有限责任公司生产）对患者进行不规则抗体筛选，以上准备的试剂盒以及试验仪器，均符合国家相关规定，使用状态均正常。
2024年浅谈不规则抗体的筛查
2024年浅谈不规则抗体的筛查1. 不规则抗体定义不规则抗体（Irregular Antibodies）是指在ABO血型系统之外的抗体，也称为意外抗体或非ABO抗体。
这些抗体通常是由输血、妊娠、疾病或免疫接种等过程中产生的免疫反应所致。
不规则抗体可以是IgG或IgM类型，它们能够与红细胞表面抗原发生反应，导致红细胞凝集或溶血等不良反应。
2. 筛查意义进行不规则抗体筛查具有重要意义。
首先，不规则抗体是输血反应的主要原因之一，包括输血后溶血性反应、发热反应和过敏反应等。
通过筛查不规则抗体，可以及时发现并避免这些输血反应的发生，保障输血的安全性和有效性。
其次，不规则抗体筛查对于孕妇和新生儿也具有重要意义。
孕妇在妊娠过程中会产生不规则抗体，这些抗体可能通过胎盘进入胎儿体内，导致新生儿溶血病。
通过筛查不规则抗体，可以及时发现并采取相应的干预措施，避免新生儿溶血病的发生。
此外，不规则抗体筛查还可以为临床诊断和治疗提供重要依据，帮助医生了解患者的免疫状态和疾病情况。
3. 筛查方法不规则抗体筛查主要采用血清学方法，包括盐水法、凝聚胺法、抗球蛋白法等。
这些方法通过检测血清中的抗体与红细胞表面的抗原反应，来判断是否存在不规则抗体。
其中，抗球蛋白法是目前最常用的不规则抗体筛查方法，具有较高的灵敏度和特异性。
除了血清学方法外，还有一些新型技术如流式细胞术、基因测序等也逐渐应用于不规则抗体筛查中。
4. 筛查时机不规则抗体筛查的时机通常取决于具体的临床情况。
对于输血患者，应在输血前进行不规则抗体筛查，以确保输血的安全性和有效性。
对于孕妇，应在妊娠早期和晚期分别进行不规则抗体筛查，以监测不规则抗体的产生和变化情况。
对于需要接受器官移植、免疫治疗等特殊情况的患者，也应在相应的时机进行不规则抗体筛查。
5. 结果解读不规则抗体筛查的结果通常分为阳性和阴性。
阳性结果表示患者血清中存在不规则抗体，可能存在输血反应或新生儿溶血病的风险。
血型鉴定、不规则抗体筛查及交叉配血步骤
血型鉴定、不规则抗体筛查及交叉配血步骤一.血型鉴定1.排管并标记患者红细胞悬液管、患者血浆管、患者ABO正定型试管、患者ABO反定型试管、患者RhD定型试管。
2.标本准备分离患者的血浆，取一滴压积红细胞，三次洗涤，制备患者2%-5%红细胞悬液。
3.加样ABO正定型：1滴（50ul）抗A、抗B试剂加1滴（50ul）患者红细胞悬液。
ABO反定型：1滴（50ul）患者血清加1滴（50ul）反定型试剂红细胞。
RhD定型：1滴（50ul）抗D血清加1滴（50ul）患者红细胞悬液。
4. 结果判断离心（2档）：轻摇试管，肉眼观察有无凝集，记录ABO、RhD血型结果。
二.不规则抗体筛查（生理盐水法+凝聚胺法）1.排管标记01、02、03及自身对照管2.加样各试管分别加入相应的患者血清2滴（100ul）及筛选细胞1滴（50ul）。
3.结果观察离心（2档），观察结果先看上清液有无溶血，轻轻混匀，肉眼观察有无凝集，结果判断并记录。
各试管分别加入低离子介质0.65ml，轻轻混匀（参照试剂说明书）各试管再分别加凝聚胺溶液2滴（100ul）混匀，离心先观察上清液有无溶血弃去上清液，留约0.1ml，轻轻混匀肉眼观察有无凝集（凝者继续试验，否则查找原因并重复试验）各试管分别加入重悬液2滴（100ul），轻轻混匀肉眼观察凝集是否在1min内消失显微镜检查三.交叉配血试验（生理盐水法+凝聚胺法）1.标本准备分离供血者血浆与红细胞三次洗涤，制备供血者2%-5%红细胞悬液2.排管标记排管，主侧、次侧及自身对照管3.加样各试管分别加入相应的备检血清2滴（100ul）及2%-5%备检红细胞悬液1滴（50ul）4. 结果观察离心（2档），观察结果先看上清液有无溶血轻轻混匀，肉眼观察有无凝集结果判断并记录各试管分别加入低离子介质0.65ml，轻轻混匀（参照试剂说明书）各试管再分别加凝聚胺溶液2滴（100ul）混匀，离心先观察上清液有无溶血弃去上清液，留0.1ml，轻轻混匀.肉眼观察有无凝集（凝者继续试验，否则查找原因并重复试验）各试管分别加入重悬液2滴（100ul），轻轻混匀肉眼观察凝集是否在1min内消失肉眼观察阴性者，显微镜检查记录交叉配血结果A、B、O试验红细胞悬液的制备1. 分别采取已知A、B、O三种血型的红细胞，经盐水洗涤3次，以压紧红细胞配成不同浓度的红细胞悬液（见表格）红细胞悬液的配置悬液浓度（%）压实红细胞（滴）盐水（滴）2 1 2.0ml（40）5 1 0.8ml（16）10 1 0.4ml（8）20 1 0.2ml（4）2. 为了防止红细胞悬液敏感性不一致，可随机采取3个以上健康成人血液，按A、B、O型分别混合后，按上法制备。
不规则抗体筛查及阳性抗体分布情况调查分析
不规则抗体筛查及阳性抗体分布情况调查分析目的：了解文山市醫院住院患者中不规则抗体检出率及阳性抗体分布情况，探讨与临床安全输血的关系。
方法：采用盐水法、凝聚胺法和微柱凝胶抗球蛋白法对住院患者血样进行不规则抗体筛选。
结果：使用盐水法和凝聚胺方法检测13148例普通住院患者血型不规则抗体，阳性4例，阳性率0.03%（4/13 148）。
使用微柱凝胶抗球蛋白法检测6233例拟输血或手术备血患者血型不规则抗体，阳性20例，阳性率0.32%（20/6233）。
24例不规则抗体阳性患者中，女性较多，占66.67%（16/24），男性仅占33.33%（8/24）；血型系统以RH系统最多，占70.83%（17/24）；抗体以抗-E多见，占41.67%（10/24）；民族以汉族居多，占58.33%（14/24），壮族次之，占20.83%（5/24）；24例中20例有输血史或妊娠史或两者兼有，占83.33%（20/24），4例患者无输血史或妊娠史，占16.67%（4/24）。
结论：医疗单位做好不规则抗体筛查与特异性鉴定，了解阳性抗体的分布情况，对拟输血者很有帮助，特别是对多次输血或妊娠的患者可以提前预警，有利于寻找到合适的血液，对保障安全有效的输血至关为重要。
[Abstract] Objective：To understand the irregular antibody detection rate and the distribution of positive antibody of patients in Wenshan City Hospital，to explore the relationship and clinical safety of blood transfusion.Method：By the methods of brine，condensed amine and micro column gel antiglobulin method were uesd for screening hospitalized patients blood samples on irregular antibody screening.Result：The methods of brine and condensed amine was used to detect 13148 cases of hospitalized patients with normal blood type irregular antibodies，4 cases were positive，positive rate was 0.03% （4/13 148）.Micro column gel antiglobulin method was used to detect 6233 cases to blood transfusion or surgery for patients with irregular antibody，blood type of 20 patients with positive rate of 0.32% （20/6233）.In 24 patients with irregular antibody positive，more women，66.67% （16/24），men accounted for 33.33%（8/24）.Most system with RH blood type，accounting for 70.83% （17/24）.The antibody was anti-E，accounting for 41.67%（10/24）.Ethnic majority with the han nationality，accounted for 58.33% （14/24），and then was zhuang nationality，accounted for 20.83% （5/24）.24 cases in the history of 20 patients with a history of blood transfusion or pregnancy，or both，accounted for 83.33% （20/24），4 cases of patients with no history of blood transfusion or pregnancy，16.67% （4/24）.Conclusion：Completing the irregular antibody screening and specificity identification，understanding the distribution of positive antibody，is very helpful to a transfusion，especially in patients with multiple blood transfusion or pregnancy can early warning，to find the suitable blood，is very important for ensuring safe and effective transfusion.[Key words] Blood type of red blood cells；Irregular antibody；Antibody screening；Safety of blood transfusion血型不规则抗体是指ABO血型以外的其他血型系统抗体，如RH、MNS、Leis等血型系统的抗体。
输血前不规则抗体筛查结果分析及其临床意义探析
输血前不规则抗体筛查结果分析及其临床意义探析目的分析输血前不规则抗体筛查结果，并探析其临床意义。
方法本院自2014年起在输血前进行不规则抗体筛查，将2014年1月～12月412例进行输血前不规则抗体筛查者作为实验组。
以此前2013年1月～12月396例未进行输血前不规则抗体筛查者作为对照组。
结果数据经过统计学分析发现，412例患者共检出不规则抗体6例，检出率为1.46%。
实验组输血不良反应发生率明显低于对照组，组间有显著的统计学差异（P＜0.05）。
结论输血前不规则抗体筛查可及时发现患者体内的不规则抗体，有利于保证输血安全性，应将其作为输血前的常规检查项目。
标签：输血；不规则抗体筛查；临床意义不规则抗体是除人体血清中抗A、抗B以外的血型抗体，以IgG抗体、IgM 抗体比较常见。
不规则抗体可造成疑难配血、血型鉴定困难、输血不良反应等问题，轻者引起患者输血后发生寒战、发热，重者可发生溶血反应而危及患者的生命，严重影响了临床用血的安全性[1]。
1资料与方法1.1一般资料将2013年1月～12月396例未进行输血前不规则抗体筛查者作为对照组。
包括男性232例，女性164例；年龄22岁～75岁，平均年龄（52.64±11.53）岁；体重48kg～82kg，平均体重（64.15±11.28）kg。
将2014年1月～12月412例进行输血前不规则抗体筛查者作为实验组，包括男性245例，女性167例；年龄20岁～78岁，平均年龄（64.32±11.43）岁；体重47kg～83kg，平均体重（64.37±11.62）kg。
对两组患者的一般资料进行统计学对比分析，发现两组的可比性较好，在年龄、体重、性别等方面无显著的统计学差异（P>0.05）。
1.2检测方法1.2.1检测仪器和试剂LXJ-I血型血清学多用离心机，长春博研仪器有限责任公司。
FYQ型免疫微柱孵育器，长春博研仪器有限责任公司。
不规则抗体筛查
不规则抗体检查之相礼和热创作不规则抗体检查也称红细胞抗体检查.不规则抗体是指抗Ａ、抗Ｂ以外的血型抗体.ＡＢＯ系中的亚型,变异型抗Ａ1或某种抗Ｂ等抗体,也称为不规则抗体.其多为ＩｇＧ抗体.次要是经输血或妊娠等免疫刺激发生,在盐水介质中不克不及凝集而只能致敏相应抗原的红细胞,必须经过特殊介质才能使致敏红细胞出现凝集反应.临床上通常所称的“同型血”实践上是指ＡＢＯ血型零碎和Ｒｈ血型零碎相反,别的红细胞血型零碎未必相反.假如交叉配血不细致,或者只用盐水介质配血,则有可能检查不出ＡＢＯ血型零碎之外的不规则抗体,而此抗体与相应抗原发生免疫反应,可导致溶血性输血反应的发生.红细胞血型抗体检查适用于下列状况：1、ABO血型鉴定发现受检者血清中故不测抗体时；2、供血者血清抗体筛检；3、输血前受者血清抗体检查；4、输血后溶血反应疑为由同种抗体惹起时；5、孕妇血清的抗体检查；6、重生儿溶液血病婴儿血液中抗体检查；7、直接抗球蛋白实验阳性红细胞上抗体的检查.1. 原理利用挑选细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）上存在的多种红细胞抗原与被检血清在凝聚胺介质中反应，假如出现凝集暗示血清中存在不规则抗体.2. 试剂2.1 5%挑选细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）2.2 凝聚胺试剂2.3 直接抗人球试剂外周血或静脉血3. 操纵步调3.1 取试管三支，标明Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ并往各管加病人血清（血浆）2滴，加5%挑选细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）各1滴.3.2 各加，混合均匀后，再各加Polybrene 溶液2滴，并混合均匀.3.3 用BASO公用离心机1000G离心力，离心10秒，然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约液体.3.4 悄悄摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重作.3.5 末了加入Resuspending 2滴，悄悄转动试管混合并同时观察结果.假如凝集散开，暗示是由Polybrene惹起的非特异性聚集，抗体筛检结果为阴性；如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，抗体筛检结果为阳性，应进一步作抗体鉴定.4. 挑选Ⅰ号细胞，挑选Ⅱ号细胞，挑选Ⅲ号细胞.对应的细胞反应格局表一张.红细胞血型抗体挑选细胞反应格局表4. 临床意义虽然不规则抗体挑选阳性率仅为0.37%,但是该项阳性的患者一旦输出具有相应抗原的红细胞,抗原、抗体发生免疫性结合,在补体的介入下,使输出的红细胞发生溶解,即发生溶血性输血反应.患者出现发热、血虚、黄疸和血红蛋白尿,严重时甚至危及其生命.因而,在输血中要经常警惕这种输血反应发生的可能性.当不规则抗体挑选阳性时,必须进一步作抗体鉴定,确定其特异性后,再输出无相应抗原的红细胞,才能达到安全输血之目的.重生儿溶血病(ＨＤＮ)也是由于母亲体内存在着与其胎儿红细胞不配合的ＩｇＧ性子的不规则抗体,惹起的同种自动免疫性疾病.凡是以ＩｇＧ性子出现的不规则抗体,理论上都可以惹起ＨＤＮ,由于ＩｇＧ性子抗体能经过胎盘进入胎儿血循环,毁坏胎儿红细胞,引发胎儿水肿、黄疸、血虚和肝脾肿大,甚至并发核黄疸.因而对有输血史或妊娠史的孕妇也应作不规则抗体挑选,若检测出不规则抗体,应作出相应的预防和医治.Ｒｈ血型中Ｄ抗原的抗原性强于Ｅ抗原的抗原性,因而发生抗Ｄ抗体的几率大于抗-Ｅ抗体.抗Ａ1抗体为Ａ亚型中不规则抗体,它的存在提示我们在留意ＡＢＯ血型以外的不规则抗体的同时,也应高度器重ＡＢＯ亚型中的不规则抗体,由于它也是惹起溶血性输血反应的一个要素.抗Ｍ抗体为冷凝集素,很少在37℃有活性,一样平常在体内不克不及惹起溶血反应,但患者处于低温麻醉形态动手术时应留意,由于此类抗体可激活补体.当机体的体温在冷抗体最适反应温度范围内(4～20℃)时,可发生溶血反应.℃℃,偶可在37℃查出.抗Ｐ1抗体很少在体内形成溶血,几乎总是ＩｇＭ型抗体,以是不克不及经过胎盘,不会形成ＨＤＮ.冷凝集素在配血时可忽略.本身抗体在本身溶血性血虚时出现较多,不停以来是输血的一大难题,我们仍遵照一样平常输血准绳.综上所述,不规则抗体是惹起溶血性输血反应和重生儿溶血病的次要要素之一, 对输血发生溶血性反应所惹起肾衰、殒命病例的诊断有临床意义.因而为了包管输血安全,进步输血疗效,减少或杜尽溶血性输血反应的发生,不规则抗体检查必须作为输血前检查的紧张项目之一.。
不规则抗体筛查
不规则抗体检查不规则抗体检查也称红细胞抗体检查。
不规则抗体是指抗Ａ、抗Ｂ以外的血型抗体。
ＡＢＯ系中的亚型,变异型抗Ａ1或某种抗Ｂ等抗体,也称为不规则抗体。
其多为ＩｇＧ抗体。
主要是经输血或妊娠等免疫刺激产生,在盐水介质中不能凝集而只能致敏相应抗原的红细胞,必须通过特殊介质才能使致敏红细胞出现凝集反应。
临床上通常所称的“同型血”实际上是指ＡＢＯ血型系统和Ｒｈ血型系统相同,其它红细胞血型系统未必相同。
如果交叉配血不仔细,或者只用盐水介质配血,则有可能检查不出ＡＢＯ血型系统之外的不规则抗体,而此抗体与相应抗原发生免疫反应,可导致溶血性输血反应的发生。
红细胞血型抗体检查适用于下列情况：1、ABO血型鉴定发现受检者血清中有意外抗体时；2、供血者血清抗体筛检；3、输血前受者血清抗体检查；4、输血后溶血反应疑为由同种抗体引起时；5、孕妇血清的抗体检查；6、新生儿溶液血病婴儿血液中抗体检查；7、直接抗球蛋白试验阳性红细胞上抗体的检查。
1. 原理利用筛选细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）上存在的多种红细胞抗原与被检血清在凝聚胺介质中反应，如果出现凝集表示血清中存在不规则抗体。
2. 试剂2.1 5%筛选细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）2.2 凝聚胺试剂2.3 直接抗人球试剂外周血或静脉血3. 操作步骤3.1 取试管三支，标明Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ并往各管加病人血清（血浆）2滴，加5%筛选细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）各1滴。
3.2 各加LIM0.7ml，混合均匀后，再各加Polybrene 溶液2滴，并混合均匀。
3.3 用BASO专用离心机1000G离心力，离心10秒，然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约0.1ml液体。
3.4 轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重作。
3.5 最后加入Resuspending 2滴，轻轻转动试管混合并同时观察结果。
如果凝集散开，表示是由Polybrene引起的非特异性聚集，抗体筛检结果为阴性；如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，抗体筛检结果为阳性，应进一步作抗体鉴定。
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产生：免疫刺激； 免疫抗体 分类：IgG类抗体为主 IgM类抗体少
IgM抗体
多以五聚体形式存在，分子最大 在盐水介质中能直接连接相应的红细胞， 使之发生肉眼可见的凝集反应，又称为完全 抗体
IgG 抗体
单体形式存在，分子量较小 盐水介质中只能致敏相应抗原的红细胞，而不能 使之凝集，又称为不完全抗体 必须通过特定的方法使致敏红细胞发生凝集 聚凝胺法
步骤繁琐，耗时较多
临床意义
献血者：防止含有不规则抗体的血液输注给病 人，避免溶血性输血反应
受血者：有助于血液选择，充分的时间选择相合 的血液
孕妇：早发现，孕期进行新生儿溶血病的预防和 治疗，减少不规则抗体对胎儿或新生儿带来的伤 害
小结
1.不规则抗体两类：IgG型、 IgM型
2.不规则抗体筛查方法：先盐水介质法，后聚凝胺 介质法或抗人球蛋白法 3.盐水介质法只能检测IgM型不规则抗体； IgG型抗 体需要选择聚凝胺介质法或抗人球蛋白法
思考题
1.不规则抗体筛选为何先在盐水介质中进行？
2.能否只选择聚凝胺介质法或抗人球蛋白介 质法一种方法进行不规则抗体的筛查？
参考资料
1.临床输血与检验
2.人类血型
人民卫生出版社
科学出版社
3.免疫血液学
4.中国输血协会
上海科学技术出版社
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3.加入抗人球蛋白
4.抗人球蛋白同时和两个 不完全抗体的Fc段结合， 从而把红细胞连接在一起
方法学评价
盐水介质法：最基本，检测IgM型血型抗体
聚凝胺介质法：速度快，实验时间5分钟左右 ； 不适合于Kell系统抗体的检测，但汉
族人群至今无Kell系统抗体检出报道 抗人球蛋白介质法：检测IgG型血型抗体最为经典方法，
抗人球蛋白法
不规则抗体筛查方法
盐水介质法 聚凝胺介质法（最常用）
抗人球蛋白介质法（经典）
不规则抗体检测原理 图 62 ：红细胞表面电荷及其相互之间的距离
自由移动的 正电荷 内层正电荷 随红细胞移动 表面负电荷 红细胞
红细胞间由静电维 持最小距离约 24nm
不规则抗体检测原理
35.7nm
受伤严重，需要 立即输血！！！
教学目标
1.掌握不规则抗体筛查方法 2.熟悉不规则抗体筛查的概念、方法学评价 及临床意义
不规则抗体
概念：不符合ABO血型系Landsteiner 法 则的血型抗体，即抗-A、抗-B 以外的血 型抗体
Landsteiner法则
不规则抗体
概念：不符合ABO 血型系Landsteiner法则的血 型抗体，也就是抗-A、抗-B 以外的血型抗体
不规则抗体检测原理
14nm
聚凝胺介质法
1.红细胞上已有不完全 抗体致敏
2.加入聚凝胺，缩短红细 胞之间的距离，不完全抗 体同时与两个红细胞结合 使其特异性凝集
3.加入枸橼酸钠中和聚凝胺
4.不完全抗体的结合， 特异性凝集不消失
聚凝胺 枸橼酸钠 不完全抗体
抗人球蛋白介质法
1.红细胞彼此之间有一定的间 距 2.不完全抗体结合在红细胞表 面,但是不能和两个红细胞同 时结合（致敏）