不规则抗体筛查与鉴定 PPT
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不规则抗体筛选红细胞试剂简介.ppt
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血红蛋白试剂盒（硫酸铜比重法）
• 【检验结果的解释】 • 1. 若待检全血标本比重大于试剂比重，则15秒
内下沉于瓶底，表明血红蛋白初筛检测合格； 2. 若待检全血标本比重等于试剂比重，则在试 剂液面或中段悬浮15秒后下沉，表明血红蛋白 初筛检测合格； 3. 若待检全血样本比重小于试剂比重，则上浮 且15秒内不下沉，为血红蛋白初筛检测合格不 合格。
50µl)滴于瓶内， 1瓶试剂筛检血滴不能多于50滴。 • 2.打开女用试剂2(蓝色)瓶盖，将女性受检者新鲜全血标本一滴(约
50µl)滴于瓶内， 1瓶试剂筛检血滴不能多于50滴。
• 3. 滴加标本时应距试剂液面1cm并将其垂直滴入,15秒内观察血滴 下沉情况。
• 【参考值（参考范围）】 • 成年男性全血比重≥1.052 (相当于血红蛋白含量≥120 g/L) • 成年女性全血比重≥1.050(相当于血红蛋白含量≥110 g/L)
• 【储存条件及有效期】 • Hb试剂盒贮存于10℃－40℃的干燥环境
中，有效期为12个月，有效期为12个月。 • 【适用仪器】 • 本试剂为独立使用的筛查试剂，无需与
仪器配合使用。 • 【样本要求】 • 样本要求：应为人新鲜全血标本。
血红蛋白试剂盒（硫酸铜比重法）
• 【检验方法】 • 1.打开男用试剂1(绿色)瓶盖，将男性受检者新鲜全血标本一滴(约
• 【预期用途】 • 本试剂盒主要用于采供血机构对献血者全血中
血红蛋白（Hb）含量范围的筛检。 • 【检验原理】 • 血红蛋白能与硫酸铜形成蛋白质的铜盐，人体
新鲜全血标本滴入硫酸铜溶液后在其外表面形 成一层铜盐包膜，能在10－15秒内保持外形完 整而不改变比重。因此比较全血与一定浓度的 硫酸铜溶液的比重来判断全血的比重，进而筛 查出全血血红蛋白含量的范围。
不规则抗体筛查和鉴定培训课件
2.加入聚凝胺，缩短红细 胞之间的距离，不完全抗 体同时与两个红细胞结合 使其特异性凝集
聚凝胺
枸橼酸钠
3.加入枸橼酸钠中和聚凝胺
4.不完全抗体的结合， 特异性凝集不消失
不完全抗体
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抗人球蛋白介质法 处，请联系网站或本人删除。
1.红细胞彼此之间有一定的间 距 2.不完全抗体结合在红细胞表
产生：免疫刺激； 免疫抗体 分类：IgG类抗体为主； IgM类抗体少
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IgM抗体处，请联系网站或本人删除。
多以五聚体形式存在，分子最大
在盐水介质中能直接连接相应的红细胞， 使之发生肉眼可见的凝集反应，又称为完全 抗体
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思考题处，请联系网站或本人删除。
1.不规则抗体筛选为何先在盐水介质中进行？ 2.能否只选择聚凝胺介质法或抗人球蛋白介 质法一种方法进行不规则抗体的筛查？
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教学目标 处，请联系网站或本人删除。
1.掌握不规则抗体筛查方法 2.熟悉不规则抗体筛查的概念、方法学评价
及临床意义
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不规则抗体 处，请联系网站或本人删除。
聚凝胺
枸橼酸钠
3.加入枸橼酸钠中和聚凝胺
4.不完全抗体的结合， 特异性凝集不消失
不完全抗体
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抗人球蛋白介质法 处，请联系网站或本人删除。
1.红细胞彼此之间有一定的间 距 2.不完全抗体结合在红细胞表
产生：免疫刺激； 免疫抗体 分类：IgG类抗体为主； IgM类抗体少
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多以五聚体形式存在，分子最大
在盐水介质中能直接连接相应的红细胞， 使之发生肉眼可见的凝集反应，又称为完全 抗体
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1.不规则抗体筛选为何先在盐水介质中进行？ 2.能否只选择聚凝胺介质法或抗人球蛋白介 质法一种方法进行不规则抗体的筛查？
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1.掌握不规则抗体筛查方法 2.熟悉不规则抗体筛查的概念、方法学评价
及临床意义
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不规则抗体筛选
取4支小试管，按表标记及加入相应试剂。
1#
2# 3# 自 身
受检者血清
2滴 2滴 2滴 2滴
筛选用红细胞悬液1# 1滴
筛选用红细胞悬液2#
1滴
筛选用红细胞悬液3#
1滴
受检者5%红细胞悬液
1滴
混匀后3400rpm离心15秒，立即观察结果 同前
注意事项
标本编号清楚！！ 试剂红细胞是保存在保存液中，一旦用生理盐
低离子聚凝胺法（LIP-IAT）：所需试验时间 少（3～5分钟）、方法灵敏度高，准确性高， 但无法排除无临床意义抗体的干扰。
间接抗人球方法：是很灵敏且有效的检测抗 体的方法，同时此方法可以有效的避免无临 床意义抗体的干扰。缺点：耗时间长，步骤多。
试剂
抗体筛选用红细胞悬液（1#、2#、3#） 试剂红细胞必须含有下列抗原：
3、有利于早期发现和确认具有临床意义的抗体，获得充足的时间来 选择相配合的血，避免由于寻找不到相合的血液而造成患者病情 的延误。
抗体筛选检查
一、什么叫“抗体筛选”检查 1、不规则抗体的含义：通常把抗A、抗B以
外的所有红细胞血型抗体称为不规则抗体。如 抗D、抗N、抗M、jk-抗体。
2、“抗体筛选”的含义：用具备有临床意 义的血型抗原的O型红细胞，检测病人血清 （含多种抗体）；如果出现聚集现象，则提示 病人有不规则抗体存在，可判为“抗体筛选” 阳性。
水或Liss液洗涤后则应该在24小时内使用，否 则会因污染、抗原丢失导致试验错误。 加血清和红细胞悬液的量必须准确不能多加， 少加,以免引起前带和后带效应 转速不能太快或太慢、时间不能过长或过短， 以免引起假阳性或假阴性。
Polybrene法
不规则抗体筛查与分析(1)
01抗筛的基本问 题
02抗体的筛查与 分析
03抗体的鉴定与 分析
01凡遇有下列情况必须按《全国临床检验操 作规程》有关规定作抗体筛选实验：交叉 配血不合时；对有输血史、妊娠史或短期 内需要接收多次输血者。
02不做抗筛直接盲配有风险，对于弱抗体， 若供血者为杂合子（剂量效应）则有可能 为阴性结果。所以筛选（鉴定）对抗体的 检测比交叉配血更敏感和可靠。
抗筛的目的是通过受检的血清和已知的带有
不同抗原的三人份O型筛选红细胞反应，来 测定血清中有无抗A和抗B以外的意外抗体 （也称不规则抗体）
对疑难交叉配血有重要的指导意义，降低盲 配风险
补体依赖性抗体 补体非依赖性抗
体
完全抗体 不完全抗体
天然抗体 免疫抗体
冷抗体 温抗体
自身抗体 同种抗体
临床有意义抗体：一般为免疫性抗体，在体 温条件（37度）具有反应性的同种抗体。
+ （抗-E/-cE约占1/3，此类患者筛选相合的血液 是很容易的）
+ Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ全部阳性，且强度一致；自c阳 性：结合病情，优先考虑自身抗体
+ Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ全部阳性，自c阴性：考虑同种 抗体，如病人血型为Rh阴性，优先考虑抗-D
+
+ 抗筛结果排除假阴性，一定是阴性结果吗？
+ 解答：“抗筛阴性”并不能代表“同种抗体阴性”。 + 筛选细胞和谱细胞有人种差异，如Mia，
+ 抗人球蛋白试剂：IgG抗体通过抗人IgG类免 疫球蛋白抗体（简称抗人球）“搭桥”，使已 致敏了不完全抗体的RBC发生凝集。
+ 抗筛要求用抗IgG+C3的多特异性抗人球蛋白 试剂，若用单抗IgG的单特异性抗人球蛋白 试剂，可能对某些抗体造成漏检。
02抗体的筛查与 分析
03抗体的鉴定与 分析
01凡遇有下列情况必须按《全国临床检验操 作规程》有关规定作抗体筛选实验：交叉 配血不合时；对有输血史、妊娠史或短期 内需要接收多次输血者。
02不做抗筛直接盲配有风险，对于弱抗体， 若供血者为杂合子（剂量效应）则有可能 为阴性结果。所以筛选（鉴定）对抗体的 检测比交叉配血更敏感和可靠。
抗筛的目的是通过受检的血清和已知的带有
不同抗原的三人份O型筛选红细胞反应，来 测定血清中有无抗A和抗B以外的意外抗体 （也称不规则抗体）
对疑难交叉配血有重要的指导意义，降低盲 配风险
补体依赖性抗体 补体非依赖性抗
体
完全抗体 不完全抗体
天然抗体 免疫抗体
冷抗体 温抗体
自身抗体 同种抗体
临床有意义抗体：一般为免疫性抗体，在体 温条件（37度）具有反应性的同种抗体。
+ （抗-E/-cE约占1/3，此类患者筛选相合的血液 是很容易的）
+ Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ全部阳性，且强度一致；自c阳 性：结合病情，优先考虑自身抗体
+ Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ全部阳性，自c阴性：考虑同种 抗体，如病人血型为Rh阴性，优先考虑抗-D
+
+ 抗筛结果排除假阴性，一定是阴性结果吗？
+ 解答：“抗筛阴性”并不能代表“同种抗体阴性”。 + 筛选细胞和谱细胞有人种差异，如Mia，
+ 抗人球蛋白试剂：IgG抗体通过抗人IgG类免 疫球蛋白抗体（简称抗人球）“搭桥”，使已 致敏了不完全抗体的RBC发生凝集。
+ 抗筛要求用抗IgG+C3的多特异性抗人球蛋白 试剂，若用单抗IgG的单特异性抗人球蛋白 试剂，可能对某些抗体造成漏检。
不规则抗体筛查及鉴定培训7.27
情况一：抗筛阳性反应强度不一，自身对照阴性
表型与抗体互相验证
情况二：抗筛全部呈阳性反应，反应强度大致相同， 自身对照阳性
情况二：抗筛全部呈阳性反应，反应强度大致相同， 自身对照阳性
3 抗筛阳性输血原则
抗筛阳性患者输血
确认只有不规则抗体
自身（-）、抗体筛选（+）
配血时患者血清中的同种抗体与供 者红细胞上相应抗原起反应。
P 血型 系统抗体
最常见的表型 ：P1、P2 P1 红细胞上有两种不同的 抗原：P1 和 P；P2 红细胞 上只有 P 抗原，可以产生 抗-P1。
不规则抗体种类（其他）
Lewis血型系统抗体： 多为IgM类，属自然产生的抗体，37℃一般不发生反应
Lutheran 血型系统抗体： LU抗原剂量效应，导致混合凝集、临床意义一般不大
结果判读：根据谱细胞的反应格局一般可以鉴定常见的抗体,但有 一定的局限性，有可能漏检常见的组合抗体
排除法：纯合子表达抗原无反应则直接排 除对应的抗体（举例：与5号细胞dCCee、11 号细胞DCCEe、12号细胞DCcEE反应均为阴性， 表明不存在单特异性抗-C）
情况一：抗筛阳性反应强度不一，自身对照阴性
操作:抗体鉴定谱细胞分别与被检血清进行间接抗球 蛋白试验，同时做自身对照
自身细胞检查：确定患者血清内是否有自身抗体或自身抗体与同 种抗体并存，只有是阴性时，才能排除自身抗体或其他凝集素导 致的谱细胞凝集；
使用试剂谱细胞：谱细胞一般是由8～16单人份的已知血型表型的O 型红细胞配套组成，具有各种不同的抗原成分；
聚凝胺介质法
1.红细胞上已有不完全抗体致敏
2.加入聚凝胺，缩短红细胞之间的距离，不完全 抗体同时与两个红细胞结合使其特异性凝集
最新不规则抗体及抗体效价PPT课件
分娩后10天复查 • 有不良产史，抗体效价（-） 28周复查1次/月
分娩后10天复查 • 抗体效价（+） 治疗中动态监测 1次/月
分娩后10天复查
Rh抗体效价临床意义
• 由于Rh血型抗体只能由人类红细胞产生，故测
定Rh抗体对诊断围产儿溶血症意义较大 • 一般抗体效价在1：32-1：64说明胎儿有溶血危 险
抗体特异性鉴定（了解）
• 使用谱细胞确定抗体的特异性，谱细胞一 般由8-16种含有不同抗原的O型红细胞配 套组成，根据谱细胞的反应格局一般可以 鉴定常见的抗体。
• 实验方法和抗体筛选实验相同
抗球蛋白试验
• 原理：抗体分子和补体成分都是球蛋白， 用这些球蛋白免疫动物使之产生抗体即抗 人球蛋白，抗球蛋白试剂可以和致敏在红 细胞上的人球蛋白（抗体分子和补体分子 ）反应，通过架桥作用使致敏红细胞出现 凝集。见图
每种方法都有自己的特点，适应于不同范围及情况
• 盐水法：可以用于检测干扰ABO定型的盐水反应活性
抗体，如：MN、P血型抗体。但此方法会检查出无临 床意义的抗体，如冷凝集素抗－I及抗－IH等，而且 会漏检IgG性质的抗体。 • 低离子聚凝胺法（LIP-IAT）：所需试验时间少（3～ 5分钟）、方法灵敏度高，准确性高，但无法排除无 临床意义抗体的干扰。 • 间接抗人球方法：是很灵敏且有效的检测抗体的方法 ，同时此方法可以有效的避免无临床意义抗体的干扰 。缺点：耗时间长，步骤多。
2、“抗体筛选”的含义： 用具备有临床意义的血型抗原的O型 红细胞，检测病人血清（含多种抗 体）；如果出现聚集现象，
则提示病人有不规则抗体存在，可 判为“抗体筛选”阳性。
抗体筛选技术要求
• 尽可能多的检测出有临床意义的抗体。 • 尽可能少的检测出无临床意义的抗体。 • 尽可能快的完成抗体检测
分娩后10天复查 • 抗体效价（+） 治疗中动态监测 1次/月
分娩后10天复查
Rh抗体效价临床意义
• 由于Rh血型抗体只能由人类红细胞产生，故测
定Rh抗体对诊断围产儿溶血症意义较大 • 一般抗体效价在1：32-1：64说明胎儿有溶血危 险
抗体特异性鉴定（了解）
• 使用谱细胞确定抗体的特异性，谱细胞一 般由8-16种含有不同抗原的O型红细胞配 套组成，根据谱细胞的反应格局一般可以 鉴定常见的抗体。
• 实验方法和抗体筛选实验相同
抗球蛋白试验
• 原理：抗体分子和补体成分都是球蛋白， 用这些球蛋白免疫动物使之产生抗体即抗 人球蛋白，抗球蛋白试剂可以和致敏在红 细胞上的人球蛋白（抗体分子和补体分子 ）反应，通过架桥作用使致敏红细胞出现 凝集。见图
每种方法都有自己的特点，适应于不同范围及情况
• 盐水法：可以用于检测干扰ABO定型的盐水反应活性
抗体，如：MN、P血型抗体。但此方法会检查出无临 床意义的抗体，如冷凝集素抗－I及抗－IH等，而且 会漏检IgG性质的抗体。 • 低离子聚凝胺法（LIP-IAT）：所需试验时间少（3～ 5分钟）、方法灵敏度高，准确性高，但无法排除无 临床意义抗体的干扰。 • 间接抗人球方法：是很灵敏且有效的检测抗体的方法 ，同时此方法可以有效的避免无临床意义抗体的干扰 。缺点：耗时间长，步骤多。
2、“抗体筛选”的含义： 用具备有临床意义的血型抗原的O型 红细胞，检测病人血清（含多种抗 体）；如果出现聚集现象，
则提示病人有不规则抗体存在，可 判为“抗体筛选”阳性。
抗体筛选技术要求
• 尽可能多的检测出有临床意义的抗体。 • 尽可能少的检测出无临床意义的抗体。 • 尽可能快的完成抗体检测
《不规则抗体筛选》课件
பைடு நூலகம்
需要不断改进和创新不规 则抗体筛选技术，以适应 不同的研究需求和应用场 景。
希望本课件能够为不规则 抗体筛选领域的研究者提 供参考和思路，推动该领 域的进一步发展。
参考文献
- 引用的文献列表
当前的研究现状
不规则抗体筛选技术在科学研究 和工业应用中取得了显著的进展 和创新。
未来的发展方向
加强对不规则抗体筛选技术的研 究，进一步完善技术方法，推动 其在更多领域的应用。
结论
1 不规则抗体筛选的重 2 筛选技术的进一步完 3 期望对不规则抗体筛
要性
善和创新的必要性
选研究的贡献
不规则抗体筛选在生物医 学领域和生物技术领域具 有重要的理论意义和实际 应用价值。
《不规则抗体筛选》PPT 课件
本课件介绍了不规则抗体筛选的重要性和筛选技术的发展。通过丰富的内容 和精美的布局，旨在提供易于理解和引人入胜的知识。
不规则抗体筛选介绍
不规则抗体是指形态、结构、性质上与普通抗体不完全一致的抗体，有着独特的特征和优势。了解不规则抗体 及筛选意义。
不规则抗体筛选的基本原理
不规则抗体筛选的基本原理是通过特定的方法，从混合溶液或反应体系中筛 选出目标抗体，以获得纯化和高亲和力的抗体。
直接筛选法
1 亲和层析法
利用不规则抗体与目标分子的特异性相互作用进行层析分离。
2 免疫法
通过不规则抗体与目标分子的特异性反应来检测和筛选抗体。
间接筛选法
吸附剂法
通过将目标抗原吸附在固相载体上，间接筛选出与抗原特异结合的不规则抗体。
非吸附剂法
利用可溶性载体或晶体结合剂介导的间接筛选方法，实现不规则抗体的高效筛选。
应用举例
1
需要不断改进和创新不规 则抗体筛选技术，以适应 不同的研究需求和应用场 景。
希望本课件能够为不规则 抗体筛选领域的研究者提 供参考和思路，推动该领 域的进一步发展。
参考文献
- 引用的文献列表
当前的研究现状
不规则抗体筛选技术在科学研究 和工业应用中取得了显著的进展 和创新。
未来的发展方向
加强对不规则抗体筛选技术的研 究，进一步完善技术方法，推动 其在更多领域的应用。
结论
1 不规则抗体筛选的重 2 筛选技术的进一步完 3 期望对不规则抗体筛
要性
善和创新的必要性
选研究的贡献
不规则抗体筛选在生物医 学领域和生物技术领域具 有重要的理论意义和实际 应用价值。
《不规则抗体筛选》PPT 课件
本课件介绍了不规则抗体筛选的重要性和筛选技术的发展。通过丰富的内容 和精美的布局，旨在提供易于理解和引人入胜的知识。
不规则抗体筛选介绍
不规则抗体是指形态、结构、性质上与普通抗体不完全一致的抗体，有着独特的特征和优势。了解不规则抗体 及筛选意义。
不规则抗体筛选的基本原理
不规则抗体筛选的基本原理是通过特定的方法，从混合溶液或反应体系中筛 选出目标抗体，以获得纯化和高亲和力的抗体。
直接筛选法
1 亲和层析法
利用不规则抗体与目标分子的特异性相互作用进行层析分离。
2 免疫法
通过不规则抗体与目标分子的特异性反应来检测和筛选抗体。
间接筛选法
吸附剂法
通过将目标抗原吸附在固相载体上，间接筛选出与抗原特异结合的不规则抗体。
非吸附剂法
利用可溶性载体或晶体结合剂介导的间接筛选方法，实现不规则抗体的高效筛选。
应用举例
1
不规则抗体及抗体效价 PPT
微柱凝集
• 灵敏度高 • 操作简便，时间较少 • 准确性较高 • 成本较高
上海市血液中心 朱自严
• 抗体筛选是无法检测出血清中的所有抗体 ，比如抗体是针对低频抗原的，而筛选细 胞中并不含低频抗原
• 如果抗体在37℃或抗球蛋白介质中不反应 ，单用间接抗球蛋白方法的抗体筛选也会 漏检这些抗体。
上海市血液中心 朱自严
0型产妇是发生溶血症的独立危险因子！！
其他血型的孕妇需要检测抗体效价吗？
ABO血型不合系统
➢A型人的抗B 和B 型人的抗A主要由IgM分 子组成,只有少量IgG分子,故A型或B型母亲 所生婴儿很少因母子血型不合引起新生儿 溶血病。
ABO抗体效价临床意义
• 由于ABO血型有天然抗体，故母亲血中的抗体效价 需很高才对新生儿溶血症的诊断有意义
为什么要开展输血前的“抗体筛选”检查
3、有利于早期发现和确认具有临床意义的抗体， 获得充足的时间来选择相配合的血，避免由于 寻找不到相合的血液而造成患者病情的延误。
抗体筛选检查
一、什么叫“抗体筛选”检查 1、不规则抗体的含义：通常把抗A、抗B以外的所有红
细胞血型抗体称为不规则抗体。如抗D、抗N、抗M、jk-抗 体。
• 一般抗体效价在1：128-1：256要警惕胎儿可能有 溶血，抗体效价≥1：512说明胎儿有溶血危险
• 有学者报告观察几例抗体效价≥1：512的孕妇产后 无新生儿溶血发生。所以母体血中有ABO抗体临床 意义较小，但结合其它检验结果综合分析，仍有一 定的临床意义。
ห้องสมุดไป่ตู้
Rh抗体效价测定
• 妊娠20周测抗体效价 • 无不良产史，抗体效价（-）32-34周复查
为什么要开展输血前的“抗体筛选”检查
不规则抗体筛选PPT课件
2、临床有的病人出现慢性（迟缓性）溶血反应，易忽视或引不起临 床医师重视。 （理论上讲，成年人每输1U的浓缩红细胞，在不丢失、 不被破坏（溶血）的前提下，应能提升Hb5-10g/L (0.5-1g/dl), 保持15-30天。如果输3-4U RBC，病人Hb上升不到10g/L，或几天 后（1周内）Hb仍旧下降到原来水平，甚至更低。这种情况，就要 考虑是否有慢性溶血反应存在。） 3、有利于早期发现和确认具有临床意义的抗体，获得充足的时间来 选择相配合的血，避免由于寻找不到相合的血液而造成患者病情 的延误。
YOU
SUCCESS
2019/4/8
Polybrene法
原理：聚凝胺是一种多价阳离子聚合物，在溶 液中有多个阳离子集团，能中和红细胞表面的 负电荷，并借助正负电荷的作用，引起红细胞 的非特异性凝聚，这种凝聚是可逆的。当红细 胞与血清在低离子介质中孵育，IgG抗体与红 细胞上相应抗原结合后，在聚凝胺的作用下发 生凝集，凝聚和凝集外表上不能区分，加入枸 橼酸钠重悬液后，枸橼酸根的负电荷中和了聚 凝胺上的正电荷，使红细胞凝聚现象消失，而 真正的凝集不消失。(见图).+源自自身在注意事项
必须进行间接抗人球蛋白试验。 必须同时作自身抗体的检查，即患者血清与自身红细胞的反 应，以识别同种抗体、自身抗体或两者是否都存在。 观察水浴箱的温度、血清对细胞的比例准确、反应时间、转 速、。 观察结果时轻摇试管，以免将弱凝集摇散造成假阴性，引起 事故。 若抗体筛选时，无论哪一种方法出现阳性反应时，都必须进 一步进行抗体特异性的鉴定.(以判断抗体的临床意义并给予 配合型血液输注，以预防溶血性输血反应的发生及预测新生 儿溶血病等疾病) 建议：作抗体筛选试验的时候最好先做抗人球法
不规则抗体筛选
使用谱细胞确定抗体的特异性，谱细胞 一般由8-16种含有不同抗原的O型红细胞 配套组成，根据谱细胞的反应格局一般 可以鉴定常见的抗体。
实验方法和抗体筛选实验相同
携手共进，齐创精品工程
Thank You
世界触手可及
抗球蛋白试验
抗球蛋 白
实验步骤
1# 2#
3#
受检者血清
2滴 2滴 2滴
筛选用红细胞悬液1# 1滴
筛选用红细胞悬液2#
1滴
筛选用红细胞悬液3#
1滴
自身 2滴
受检者5%红细胞悬液
1滴
混匀后置37℃水浴30分钟后，用生理盐水洗
涤3次（怎么洗）最后1次用吸水纸吸尽盐水， 然后加1滴抗球蛋白血清，混匀后以3400rpm 离心15秒钟，轻摇，观察结果。
不规则抗体筛选
《临床输血技术规范》
明确规定部分病人应做“抗体筛选” 检测，第四章第17条：“凡遇以下情况 必须按《全国临床检验操作规程》有关 规定做抗体筛选试验：1、交叉配血不 合的； 2、对有输血史、妊娠史或短期 内需接受多次输血者。
为什么要开展输血前的“抗体筛 选”检查
1、目前已知红细胞有26个抗原系统（确认21 个，如ABO、Rh、MN、LW、MNS、JK等），500 多种抗原（确认200多种）。红细胞抗原的多 样性决定了抗体的多样性，检测抗A、抗B、抗 D（ABO血型、Rh血型）可确保绝大多数病人的 输血安全，但仍不能避免因血型不合（ABO、 Rh血型以外）而引发的溶血。
抗体筛选技术要求
尽可能多的检测出有临床意义的抗体。 尽可能少的检测出无临床意义的抗体。 尽可能快的完成抗体检测
方法选择：每种方法都有自己的 特点，适应于不同范围及情况
盐水法：可以用于检测干扰ABO定型的盐水反 应活性抗体，如：MN、P血型抗体。但此方法 会检查出无临床意义的抗体，如冷凝集素抗 －I及抗－IH等，而且会漏检IgG性质的抗体。
实验方法和抗体筛选实验相同
携手共进，齐创精品工程
Thank You
世界触手可及
抗球蛋白试验
抗球蛋 白
实验步骤
1# 2#
3#
受检者血清
2滴 2滴 2滴
筛选用红细胞悬液1# 1滴
筛选用红细胞悬液2#
1滴
筛选用红细胞悬液3#
1滴
自身 2滴
受检者5%红细胞悬液
1滴
混匀后置37℃水浴30分钟后，用生理盐水洗
涤3次（怎么洗）最后1次用吸水纸吸尽盐水， 然后加1滴抗球蛋白血清，混匀后以3400rpm 离心15秒钟，轻摇，观察结果。
不规则抗体筛选
《临床输血技术规范》
明确规定部分病人应做“抗体筛选” 检测，第四章第17条：“凡遇以下情况 必须按《全国临床检验操作规程》有关 规定做抗体筛选试验：1、交叉配血不 合的； 2、对有输血史、妊娠史或短期 内需接受多次输血者。
为什么要开展输血前的“抗体筛 选”检查
1、目前已知红细胞有26个抗原系统（确认21 个，如ABO、Rh、MN、LW、MNS、JK等），500 多种抗原（确认200多种）。红细胞抗原的多 样性决定了抗体的多样性，检测抗A、抗B、抗 D（ABO血型、Rh血型）可确保绝大多数病人的 输血安全，但仍不能避免因血型不合（ABO、 Rh血型以外）而引发的溶血。
抗体筛选技术要求
尽可能多的检测出有临床意义的抗体。 尽可能少的检测出无临床意义的抗体。 尽可能快的完成抗体检测
方法选择：每种方法都有自己的 特点，适应于不同范围及情况
盐水法：可以用于检测干扰ABO定型的盐水反 应活性抗体，如：MN、P血型抗体。但此方法 会检查出无临床意义的抗体，如冷凝集素抗 －I及抗－IH等，而且会漏检IgG性质的抗体。
ABO血型鉴定不规则抗体筛选
为什么这次试验没有安排玻片法 的反定型？
因为存在于病人或献血者血清中的抗 Ａ及抗Ｂ，个体差异很大，如果效价较 弱，在玻片上不足以凝集大量抗原阳性 的红细胞，造成假阴牲的结果所以采用 玻片法作反定型的结果常不可靠。而用 试管离心法作反定型，则促进抗原抗体 反应，形成肉眼可见的凝块，使结果更 为可靠
谢谢
ＡＢＯ正反定型结果不一致的常 见原因有哪些？
（１）人为因素：①试剂不标准、失效或污染； ③操作中加错样本或试剂、离心速度不足或过 度、细胞与血清比例不当、结果判断错误等。 （２）客观因素：①因某些疾病导致抗原减弱 如：白血病，MDS（骨髓增生异常综合征）患 者血型抗原减弱导致误定血型。②受检者抗体 效价低（如婴幼儿、老年人、大量输液的患者， 血浆蛋白低下等）③某些药物干扰如输注右旋 糖酐后会干扰血型检定。
四 实验步骤.swf
1. 玻片法
（1） 取双凹玻片一块，用干净纱布轻拭使之洁净，在玻片两端 用记号笔标明A及B，并分别各滴入A及B标准血清一滴。 （2） 用滴管吸取红细胞悬液，分别各滴一滴于玻片两端的血清 上，注意勿使滴管与血清相接触。 （3） 竹签两头分别混合，搅匀。用两根 分别用来混合A型和B型标准
二 实验原理
血型就是红细胞膜上特异抗原的类型。在 ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两种 抗原，而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。血型 鉴定是将受试者的红细胞加入标准A型血清 （含有抗B抗体）与标准B型血清（含有抗A抗 体）中，观察有无凝集现象，从而测知受试者 红细胞膜上有无A或/和B抗原。在ABO血型系 统，根据红细胞膜上是否含A、B抗原而分为A、 B、AB、O四型。 见下表
A标准血清 B标准血清 2滴 受试者的红细胞悬液 1滴 1滴 混匀后1000rpm离心1min或3000rpm离心15秒。 。 取出观察结果。完全凝集的管底部有红细胞的凝块， 管底细胞边缘呈花边状，轻弹试管凝块不散；完全不 凝的试管，血细胞均匀的沉到管底，边缘整齐，用手 轻弹试管，红细胞像一缕烟似的立即上升，随即成为 均匀的悬液;轻微凝集的，必须将液体转到载玻片上镜 检后判定凝集程度。
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抗人球蛋白介质法：检测IgG型血型抗体最为经典方法， 步骤繁琐，耗时较多
临床意义
献血者：防止含有不规则抗体的血液输注给病 人，避免溶血性输血反应
受血者：有助于血液选择，充分的时间选择相合 的血液
孕妇：早发现，孕期进行新生儿溶血病的预防和 治疗，减少不规则抗体对胎儿或新生儿带来的伤 害
小结
1.不规则抗体两类：IgG型、 IgM型
不规则抗体筛查
受伤严重，需要 立即输血！！！
教学目标
1.掌握不规则抗体筛查方法 2.熟悉不规则抗体筛查的概念、方法学评价
及临床意义
不规则抗体
概念：不符合ABO血型系Landsteiner 法 则的血型抗体，即抗-A、抗-B 以外的血 型抗体
Landsteiner法则
ห้องสมุดไป่ตู้ 不规则抗体
概念：不符合ABO 血型系Landsteiner法则的血 型抗体，也就是抗-A、抗-B 以外的血型抗体
聚凝胺法 抗人球蛋白法
不规则抗体筛查方法
盐水介质法 聚凝胺介质法（最常用） 抗人球蛋白介质法（经典）
不规则抗图 体6-2 检：红细测胞表原面电理荷及其相互之间的距离
自由移动的 正电荷 内层正电荷 随红细胞移动 表面负电荷 红细胞
红细胞间由静电维 持最小距离约 24nm
不规则抗体检测原理
产生：免疫刺激； 免疫抗体 分类：IgG类抗体为主； IgM类抗体少
IgM抗体
多以五聚体形式存在，分子最大
在盐水介质中能直接连接相应的红细胞， 使之发生肉眼可见的凝集反应，又称为完全 抗体
IgG 抗体
单体形式存在，分子量较小 盐水介质中只能致敏相应抗原的红细胞，而不能
使之凝集，又称为不完全抗体 必须通过特定的方法使致敏红细胞发生凝集
面,但是不能和两个红细胞同 时结合（致敏） 3.加入抗人球蛋白
4.抗人球蛋白同时和两个 不完全抗体的Fc段结合， 从而把红细胞连接在一起
方法学评价
盐水介质法：最基本，检测IgM型血型抗体
聚凝胺介质法：速度快，实验时间5分钟左右 ； 不适合于Kell系统抗体的检测，但汉 族人群至今无Kell系统抗体检出报道
2.不规则抗体筛查方法：先盐水介质法，后聚凝胺 介质法或抗人球蛋白法 3.盐水介质法只能检测IgM型不规则抗体； IgG型抗 体需要选择聚凝胺介质法或抗人球蛋白法
思考题
1.不规则抗体筛选为何先在盐水介质中进行？ 2.能否只选择聚凝胺介质法或抗人球蛋白介 质法一种方法进行不规则抗体的筛查？
参考资料
1.临床输血与检验 人民卫生出版社 2.人类血型 科学出版社 3.免疫血液学 上海科学技术出版社 4.中国输血协会
/
21
Thank you
35.7nm
不规则抗体检测原理
14nm
聚凝胺介质法
1.红细胞上已有不完全 抗体致敏
2.加入聚凝胺，缩短红细 胞之间的距离，不完全抗 体同时与两个红细胞结合 使其特异性凝集
聚凝胺
枸橼酸钠
3.加入枸橼酸钠中和聚凝胺
4.不完全抗体的结合， 特异性凝集不消失
不完全抗体
抗人球蛋白介质法
1.红细胞彼此之间有一定的间 距 2.不完全抗体结合在红细胞表
临床意义
献血者：防止含有不规则抗体的血液输注给病 人，避免溶血性输血反应
受血者：有助于血液选择，充分的时间选择相合 的血液
孕妇：早发现，孕期进行新生儿溶血病的预防和 治疗，减少不规则抗体对胎儿或新生儿带来的伤 害
小结
1.不规则抗体两类：IgG型、 IgM型
不规则抗体筛查
受伤严重，需要 立即输血！！！
教学目标
1.掌握不规则抗体筛查方法 2.熟悉不规则抗体筛查的概念、方法学评价
及临床意义
不规则抗体
概念：不符合ABO血型系Landsteiner 法 则的血型抗体，即抗-A、抗-B 以外的血 型抗体
Landsteiner法则
ห้องสมุดไป่ตู้ 不规则抗体
概念：不符合ABO 血型系Landsteiner法则的血 型抗体，也就是抗-A、抗-B 以外的血型抗体
聚凝胺法 抗人球蛋白法
不规则抗体筛查方法
盐水介质法 聚凝胺介质法（最常用） 抗人球蛋白介质法（经典）
不规则抗图 体6-2 检：红细测胞表原面电理荷及其相互之间的距离
自由移动的 正电荷 内层正电荷 随红细胞移动 表面负电荷 红细胞
红细胞间由静电维 持最小距离约 24nm
不规则抗体检测原理
产生：免疫刺激； 免疫抗体 分类：IgG类抗体为主； IgM类抗体少
IgM抗体
多以五聚体形式存在，分子最大
在盐水介质中能直接连接相应的红细胞， 使之发生肉眼可见的凝集反应，又称为完全 抗体
IgG 抗体
单体形式存在，分子量较小 盐水介质中只能致敏相应抗原的红细胞，而不能
使之凝集，又称为不完全抗体 必须通过特定的方法使致敏红细胞发生凝集
面,但是不能和两个红细胞同 时结合（致敏） 3.加入抗人球蛋白
4.抗人球蛋白同时和两个 不完全抗体的Fc段结合， 从而把红细胞连接在一起
方法学评价
盐水介质法：最基本，检测IgM型血型抗体
聚凝胺介质法：速度快，实验时间5分钟左右 ； 不适合于Kell系统抗体的检测，但汉 族人群至今无Kell系统抗体检出报道
2.不规则抗体筛查方法：先盐水介质法，后聚凝胺 介质法或抗人球蛋白法 3.盐水介质法只能检测IgM型不规则抗体； IgG型抗 体需要选择聚凝胺介质法或抗人球蛋白法
思考题
1.不规则抗体筛选为何先在盐水介质中进行？ 2.能否只选择聚凝胺介质法或抗人球蛋白介 质法一种方法进行不规则抗体的筛查？
参考资料
1.临床输血与检验 人民卫生出版社 2.人类血型 科学出版社 3.免疫血液学 上海科学技术出版社 4.中国输血协会
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Thank you
35.7nm
不规则抗体检测原理
14nm
聚凝胺介质法
1.红细胞上已有不完全 抗体致敏
2.加入聚凝胺，缩短红细 胞之间的距离，不完全抗 体同时与两个红细胞结合 使其特异性凝集
聚凝胺
枸橼酸钠
3.加入枸橼酸钠中和聚凝胺
4.不完全抗体的结合， 特异性凝集不消失
不完全抗体
抗人球蛋白介质法
1.红细胞彼此之间有一定的间 距 2.不完全抗体结合在红细胞表