骨髓检查

酸性磷酸酶染色
（acid phasphatase,ACP）
帮助诊断毛细胞白血病（HCL）
HCL抗酒石酸ACP阳性 淋巴瘤白血病及CLL的ACP阳性但可被酒石酸抑制
帮助鉴别T/B淋巴细胞：TL（+），BL（-） Gaucher Cell阳性而Niemanm-Pick Cell阴性。 单核、组织、网状、巨核细胞ACP染色均呈阴性反 应，但急性单核细胞白血病、恶性组织细胞病时异 常细胞阳性。
CD22+CD33+CD43+/83+D52+CD7+CD452+
正常B淋巴分化过程的抗原表达
antigens
I
II III
CD103+CD19+CD222+CD342+CD45+TdT+
CD102+CD19++CD20+CD222+CD45+ CD5+CD10+CD19++CD203+CD22+CD453+
中性粒细胞碱性磷酸酶染色
（Neutrophilalkaline Phosphatase，NAP） 碱性磷酸酶主要存在于成熟阶段的中性粒细胞（分 叶及杆状核）其他血细胞均呈阴性反应。 CML与类白血病反应的鉴别：CML时NAP活性明显 减低，类白血病反应NAP活性极度增高。 PNH与AA的鉴别:前者NAP活性减低，后者增高。 急性白血病AL类型的鉴别：急性淋巴细胞白血病时 NAP活性增高，急性粒细胞白血病时减低。 其他血液病：淋巴瘤、骨髓增值性疾病、慢性淋巴 细胞性白血病等NAP活性中度增高。 其他情况：肾上腺皮质激素功能亢进、妊娠及应用 肾上腺皮质激素、雌激素等， NAP积分可增高。
粒红比例减低：指粒/红比例小于2:1。
粒细胞减少，如粒缺； 红细胞系增多，如各种增生性贫血、真红或继发性红细胞增多 症等。
临床意义——各系变化意义
粒系
红系
减少
再障，粒细胞减少或缺乏症
巨核系
淋巴系 单核系 浆细胞
良性：类白血病 恶性：白血病
增加
临床意义——各系变化意义
粒系
红系
减少
再障，纯红再障
临床意义——粒/红比例意义
粒红比例正常：
正常骨髓象； 粒、红两系平等增多或减少，前者如红白血病，后者如AA； 粒、红两系细胞基本不变化的造血系统疾病，如MM、骨髓转 移癌、ITP等。
粒红比例增高：指粒/红比例大于5:1。
急性或慢性粒白血病； 急性化脓性感染、中性粒细胞性类白血病反应； 纯红再障。



一、骨髓细胞形态学检查
适应症及标本制备 骨髓涂片的显微镜检查 骨髓象分析 临床意义
骨髓检查适应症
确定诊断某些造血系统或非造血系统疾病
具有特征性细胞形态学改变。
辅助诊断某些造血系统疾病
多数是以骨髓造血功能改变为主，尚需结合其它临 床资料综合分析后才能作出诊断
作为鉴别诊断的应用
骨髓取材满意的指标：
抽吸骨髓时，病人有特殊的酸痛感。 骨髓涂片中应含有骨髓小粒或脂肪滴。 显微镜检查，可见骨髓的特有细胞，如巨核 细胞、浆细胞、组织细胞、组织嗜碱细胞、 成骨细胞、破骨细胞等。 髓细胞分类，中性杆状核粒细胞与分叶核粒 细胞之比大于血涂片。
成熟红细胞 / 有核细胞
Marked hypercellularity （1：1）
淋巴细胞 浆细胞
巨核系细胞
异常细胞
骨髓象分析
结合血象分析
诊断 疗效
疑难或不典型细胞 骨髓象报告 注意事项
骨髓象分析
结合血象分析
诊断 疗效
疑难或不典型细胞 •推测细胞归属 •血象变化显著（传单） 骨髓象报告 •骨髓变化显著（多发性骨髓 注意事项 瘤，脂质代谢异常）
诊断铁粒幼细胞性贫血：外铁增高，环形铁 粒幼细胞占幼红细胞15%以上
细胞外铁观察
++++ 血色病
++ +++ 感染 AA、铁粒幼贫血
+++ AA、铁粒幼贫血
+ NBM — IDA
阳性为蓝绿色沉淀
三、骨髓细胞免疫表型分析
正常骨髓细胞的免疫标志 免疫表型分析
正常骨髓细胞的免疫标记
T淋巴 B淋巴 粒系 单核 红系 巨核
血细胞发育过程中形态学演变的一般规律
原始
体积 外形 核浆比 核形 大 圆(椭圆） 核大质少 圆(椭圆） 凹陷
幼稚
成熟
小
大多圆、椭圆、卵圆 形，巨核不规则
核小质多 分叶
核仁 核染色质
胞浆
多、清晰 细致
深蓝、少
少（不清） 疏松
灰蓝
消失 粗糙(块状)
粉色、多
各系细胞形态学特点
红系细胞 单核系细胞
粒系细胞
粒系
红系
巨核系
淋巴系 单核系 浆细胞
良性：结核，疟疾，粒缺 恶性：白血病，MDS
增加
临床意义——各系变化意义
粒系
红系
巨核系
淋巴系 单核系 浆细胞
恶性：MM
增加
良性：AA，粒缺，慢性感染 结缔组织病，寄生虫，
二、常用细胞化学染色
过氧化物酶（peroxidase，POX ) 中性粒细胞碱性磷酸酶(Neutrophli alkaline phosphatase，NAP) 非特异性酯酶染色（NSE）+NaF抑制试验及特异 性酯酶染色（specific esterase，SE） 糖原染色(periodic acid –Schiff’s reaction，AS) 铁染色 酸性磷酸酶染色（acid phosphatase，ACP）
骨髓片POX染色
AML-M4：部分呈阳性反应， APL：呈强阳性反应 部分成弱阳性反应
AML-M5：呈弱阳性 ALL：呈阴性，<3%
酯酶染色
萘酚AS-D氯乙酸酯酶 乙酸萘酚酯酶 丁酸奶酸酯酶 SE特异性酯酶（粒系） NSE非特异性酯酶 单核细胞酯酶
NSE+NaF抑制试验
【正常参考值】 NSE主要存在于单核细胞中，从原单核细胞到 成熟单核细胞逐渐增强，粒细胞一般呈阴性或弱阳 性。 【临床意义】 • 急性单核细胞性白血病为强阳性，且可被氟化钠所 抑制。 • 急性粒细胞性白血病与均为阴性或弱阳性,但阳性 反应不被氟化钠所抑制。 • 急性淋巴细胞性白血病为阴性反应。
骨髓细胞学检查
中南大学湘雅医院血液科 付斌
内容概述
骨髓细胞形态学检查 适应症及标本制备 骨髓涂片的显微镜检查 骨髓象分析 临床意义 常用血细胞化学染色 过氧化物酶染色 酯酶染色 中性粒细胞碱性磷酸酶染色 酸性磷酸酶染色 糖原染色 铁染色 骨髓细胞免疫表型分析 正常骨髓细胞的免疫标志 免疫表型分析 骨髓病理学检查 意义 正常骨髓组织的形态学 常见血液病的骨髓病理学诊断 常见血液病的细胞学诊断 贫血 急性白血病 慢性白血病 骨髓增生异常综合症 多发性骨髓瘤 特发性血小板减少性紫癜
骨髓象分析
结合血象分析
诊断 疗效
疑难或不典型细胞 骨髓象报告 注意事项
•多种手段综合分析 •下阶段划分优先 •重取标本
骨髓象分析
结合血象分析
诊断 疗效
疑难或不典型细胞 骨髓象报告 注意事项
•肯定性诊断 •支持临床诊断 •排除性诊断 •描述性报告
骨髓象分析
显微镜检的内容
低倍镜检查： 观察取材和涂片制作是否满意。 判断骨髓增生程度。 观察巨核细胞。7~35个/1.5*3cm2 异常细胞：组织细胞，R-S细胞，转移癌，戈谢细胞，尼曼皮克细胞 选择油镜观察区域 油镜检查： 取材 细胞形态 分类计数 粒红比 异常细胞和寄生虫
铁染色
【结果】 细胞外铁：按阳性强度（蓝色物质、蓝色颗 粒、蓝色小珠）分为5级。 细胞内铁：以铁粒幼细胞所占的百分率表示。 正常参考：
细胞外铁：1 ～ 2+，大多为2+ 细胞内铁：20～90%，平均值为65%，细胞 浆内常见1~5个铁染色颗粒。
环状铁粒幼细胞
10个以上的粗大铁粒，环绕细胞核排列超过核周 径的2/3以上。
巨核系
淋巴系 单核系 浆细胞
良性：增生性贫血 恶性：白血病
增加
临床意义——各系变化意义
粒系
红系
减少
再障，白血病，骨纤，药物
巨核系
淋巴系 单核系 浆细胞
恶性：白血病，MPD
增加
ITP
临床意义——各系变化意义
粒系
红系
巨核系
淋巴系 单核系 浆细胞
恶性：白血病，淋巴瘤
增加
良性：病毒、细菌感染
临床意义——各系变化意义
原因未明的发热、淋巴结、脾或肝肿大、骨痛或关 节痛时，骨髓检查有助于鉴别是否由造血系统疾病 所引起。此外，某些疾病可以有血液学改变但非造 血系统疾病，故骨髓检查可作鉴别诊断。
禁忌症是有严重出血倾向者如血友病等
标本制备
部位：髂后上棘，髂前上棘，胸骨，胫骨粗隆 采集：迅速，少量，抗凝？ 涂片：手法，肉眼观 染色：wright，Giemsa
结合血象分析
诊断 疗效
疑难或不典型细胞 骨髓象报告 注意事项
•取材，涂片， 染色良好是准 确报告的基础
临பைடு நூலகம்意义——正常骨髓象：
粒细胞系: 50～60% 原粒<2% 早幼粒 <5%； 红细胞系: 20%左右 淋巴细胞系: 20%； 单核细胞: <4%； 浆细胞: <1%。 巨核细胞系统：1～133/片，平均36/片
酸性磷酸酶染色
FAB：ALL
ACP染色呈阳性反应（桔红色粗大颗粒）提示为T淋巴细胞白血病
糖原染色
（Periodic acid-Schiff’s action,PAS） 【正常参考值】 有核红细胞呈阴性反应； 淋巴细胞多呈阴性，少数弱阳性； 粒系中，原粒细胞糖原染色（－），早幼粒 以下阶段为（+），逐渐增强； 单核细胞呈弱阳性反应 巨核细胞和血小板呈阳性反应
糖原染色
MA 幼红细胞呈阴性反 应
AML-M6 幼红细胞呈阳性反 应
糖原染色
（Periodic acid-Schiff’s action,PAS） 鉴别某些细胞类型：
不典型的巨核细胞与李-斯（Reed-sternberg） 细胞的鉴别：前者呈阳性反应，后者一般为阴 性或弱阳性反应。 Gaucher Cell阳性而Niemanm-Pick Cell一般 为阴性或弱阳性反应。 腺癌细胞呈强阳性反应，骨髓转移时有助于与 白血病细胞的鉴别。
铁染色临床意义
缺铁与非缺铁性贫血
缺铁性贫血：细胞外铁明显降低或消失，细胞 内铁阳性率减低，常<15%，细胞浆内铁粒变 小、变淡。 非缺铁性贫血：恶性贫血、再生障碍性贫血、 溶血性贫血时，细胞外铁多为++到+++，细 胞内铁阳性率增加。感染性贫血时外铁正常或 增高，铁粒幼细胞减少，提示铁利用障碍。
糖原染色
（Periodic acid-Schiff’s action,PAS） 鉴别红白血病与其他幼红细胞增多的疾病：
红白血病时幼红细胞的PAS染色呈强阳性反应， 积分值增高。 巨幼贫、溶贫时幼红细胞多阴性
鉴别良性与恶性淋巴细胞增生性疾病：
恶性淋巴细胞增生性疾病（ALL，CLL ，淋巴 瘤白血病），其淋巴细胞的PSA染色积分值增 高； 病毒感染等淋巴细胞良性增生时，淋巴细胞积 分值正常。
过氧化物酶染色
【原理】 分解H2O2 氧化底物（如联苯胺） 【结果】强阳性：胞质中蓝黑色颗粒粗大而密集 弱阳性：胞质中蓝黑色颗粒细小而稀疏 阴 性: 胞质中无蓝黑色颗粒者 【正常参考值】 POX主要存在于粒细胞系统，原粒细 胞为阴性,随细胞的成熟反应越强，但嗜碱性粒细 胞为阴性。原单核细胞一般阴性，幼稚和成熟单核 细胞弱阳性。淋巴、巨核、幼红细胞阴性。 【临床意义】 阳性反应：急性粒细胞性白血病。 阴性反应：急性淋巴细胞性白血病。
正常T淋巴分化过程的抗原表达
antigens
I
II III
CD1a1+CD22+CD52+CD73+CD103+CD342+CD45+
CD1a2+CD22+CD4/83+D52+CD7+CD102+CD452+ CD1a2+CD22+CD3+CD4/83+D52+CD7+CD102+CD452+
IV
Hypocellularity （50：1）, reductive activity Normocellularity （20：1,activity)
Hypercellularity(10：1) obvious activity
Marked hypocellularity （300：1）
100 倍
细胞形态观察