如何区分凋亡细胞与坏死细胞
如何区分凋亡细胞与坏死细胞
如何区分凋亡细胞与坏死细胞凋亡(apoptosis)和坏死(necrosis)都是细胞死亡的两种主要形式。
凋亡是一种受控的细胞死亡过程,而坏死则是一种非受控的细胞死亡过程。
凋亡是细胞根据生物体的需要主动死亡,而坏死则是由于外部压力或损害等因素导致的细胞死亡。
这两种细胞死亡形式具有不同的特征和机制,我们可以通过以下几个方面来区分凋亡细胞和坏死细胞:1.形态学特征:凋亡细胞的形态学特征是细胞体积缩小,胞膜发生凹陷,并形成凋亡小体。
凋亡小体由于细胞核内的染色质凝聚而形成,核内染色质变得致密而有浓缩。
而坏死细胞的形态学特征是细胞体积肿胀,细胞内的各种细胞器失去完整性,胞膜断裂。
此外,坏死细胞还会伴随细胞溶解,释放细胞内容物。
2.细胞腔内过程:凋亡是一种主动的细胞死亡过程,凋亡细胞通常会产生信号分子,引导其他细胞吞噬和清除死细胞。
而坏死是一种被动的细胞死亡过程,由于细胞损伤导致细胞死亡,坏死细胞通常不会引发周围细胞的吞噬和清除反应。
3.细胞死亡信号:凋亡细胞死亡通常与一系列的信号通路有关,这些通路的激活可能受到细胞内外环境的调控,如DNA损伤、激素等。
而坏死细胞死亡通常是由于外部刺激引起的,如机械损伤、化学毒物、热伤害等。
4.细胞死亡机制:凋亡细胞死亡通常通过激活一系列的凋亡激活因子(apoptotic activator)和抑制剂(inhibitor)来实现。
而坏死细胞死亡过程往往与炎症反应相关,包括细胞溶解和细胞内容物的释放。
5.生理意义:凋亡是正常细胞死亡的重要方式,通过调控细胞数量,维持组织器官的结构和功能。
坏死则常常是细胞损伤和疾病的结果,如心肌梗死、脑中风等。
综上所述,凋亡细胞和坏死细胞在外观、形态学特征、细胞死亡机制、信号通路以及生理意义等方面具有明显的差异。
通过对这些方面的观察和分析,我们可以区分凋亡和坏死细胞。
细胞凋亡坏死的区别
细胞凋亡坏死的区别全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:细胞凋亡和坏死是两种不同的细胞死亡方式,它们在细胞内部发生的过程以及对机体的影响都有所不同。
了解这两种细胞死亡方式的区别对于研究疾病的发生和治疗具有重要意义。
细胞凋亡是一种程序性死亡方式,也被称为程序性细胞死亡。
在细胞凋亡中,细胞会按照一定的程序主动死亡,从而维持组织器官的正常发育和稳态。
细胞凋亡的过程通常包括细胞体积缩小、细胞核凝缩、细胞质内溶酶体的活化及DNA断裂等。
这些特点使得细胞在死亡的过程中能够及时清除自身,避免对周围细胞产生损害。
细胞凋亡在生理上扮演着重要的角色,它不仅可以通过清除受损细胞维持组织和器官的健康状态,还可以调控发育、免疫应答和器官形态等重要生物过程。
与细胞凋亡不同的是,坏死是一种被动的细胞死亡方式。
在细胞坏死中,细胞通常由于外界因素的刺激或内源性损伤导致的生理失调而发生病理性死亡。
细胞坏死的过程通常包括细胞体积膨胀、细胞膜破裂、细胞质溶胶以及细胞内容物泄漏等。
这些变化会导致细胞内部物质向外释放,引发周围组织和器官的炎症反应,从而对机体产生损害。
在病理状态下,细胞坏死常常和炎症、组织坏死及疾病的发生等联系在一起。
细胞凋亡与坏死的区别在于细胞死亡的方式和对机体的影响。
细胞凋亡是一种有序的细胞死亡方式,能够维持组织的稳态和健康。
而细胞坏死则是一种非程序性的细胞死亡方式,会引发炎症反应和对周围组织产生损害。
在研究和治疗疾病的过程中,需要充分理解细胞凋亡和坏死的不同特点,并根据其特点采取不同的治疗策略。
只有深入了解这两种细胞死亡方式的区别,才能更好地保护细胞和维护机体的健康。
第二篇示例:细胞是构成生物体的基本单位,而细胞的凋亡和坏死是两种不同的细胞死亡方式。
在生命活动的过程中,出现了细胞死亡是十分正常且必不可少的现象。
细胞的死亡方式对于生物体的健康和生存至关重要,因此了解细胞凋亡和坏死的区别是很重要的。
细胞凋亡和坏死是两种不同的细胞死亡方式。
细胞凋亡和细胞坏死的区别
细胞凋亡和细胞坏死的区别细胞凋亡和细胞坏死是两种不同的细胞死亡方式,虽然它们都是细胞在生命周期中发生的不可逆的终结过程,但两者在发生机制、特征和生物学意义上存在显著差异。
细胞凋亡细胞凋亡,又称程序性细胞死亡,是一种受控的细胞死亡方式。
在细胞凋亡的过程中,细胞通过内部程序自主进行死亡,不会引起周围细胞的损伤。
细胞凋亡通常涉及一系列复杂的细胞信号通路,如细胞因子、受体、蛋白酶等分子参与其中。
细胞凋亡的表现形式包括细胞体积缩小、核膜破裂、细胞核染色体凝集和DNA 断裂等特征。
此外,细胞凋亡通常伴随着炎症反应程度较轻,不会引发局部组织的炎症反应。
细胞坏死细胞坏死是一种非受控的细胞死亡方式,通常由外部因素引起,如缺氧、毒物作用、物理损伤等。
与细胞凋亡不同,细胞坏死没有完整的信号通路参与,是一种被动的、紊乱的过程。
细胞坏死的表现形式包括细胞体积肿胀、细胞膜破裂、细胞质渗漏和细胞内容物外溢等特征。
细胞坏死还会引起严重的炎症反应,导致周围组织的炎症浸润和破坏。
区别与联系细胞凋亡和细胞坏死在发生机制、特征和生物学意义上有明显的区别。
细胞凋亡是一种主动的、受控的细胞死亡方式,通常发生在生理性或病理性条件下,对维持组织稳态和免疫调控具有重要意义。
而细胞坏死则是一种 passim 的细胞死亡方式,通常与急性炎症和组织损伤相关。
不过,细胞凋亡和细胞坏死之间并不存在绝对的界限,有时候两者也可能同时发生或相互转化。
在一些疾病状态下,细胞凋亡和细胞坏死的失衡可能导致病理性改变,如肿瘤发展、心肌梗死等。
总的来说,细胞凋亡和细胞坏死作为细胞生物学领域的两种基本现象,其区别与联系为我们深入理解细胞死亡的生理与病理过程提供了重要线索。
这也促使我们更深入地研究它们在疾病发生发展中的作用机制,并为相关疾病的治疗和预防提供理论基础。
坏死与凋亡的区别
骨质硬化坏死
肺干酪样坏
植物叶片局部坏死
什么是凋亡(Apoptosis) 什么是凋亡(Apoptosis)
细胞凋亡是一个主动的由基因决定的自动结束 生命的过程,所以也常常被称为细胞编程死亡 (programmed cell death, PCD)。凋亡细胞将被 吞噬细胞吞噬。 细胞凋亡例子: 蝌蚪尾的消失,骨髓和肠的细胞凋亡,脊椎动 物神经系统的发育。
纤维素样坏死
纤维素样坏死(fibrinoid necrosis)是发生 在间质、胶原纤维和小血管壁的一种坏死。 坏疽 组织坏死后因继发腐败菌的感染和其他因素 的影响而呈现黑色、暗绿色等特殊形态改变,称 为改变是细胞坏死的主要形态学标志, 表现为:①核浓缩;②核碎裂;;③核溶解 。 细胞浆的改变 嗜酸性染色增强。 间质的改变 在各种溶解酶的作用下,间质的基质崩解, 胶原纤维肿胀、崩解、断裂或液化。坏死的细胞 和崩解的间质融合成一片模糊的颗粒状、无结构 的红染物质。
坏死与凋亡的区别
学生:廖思红 单位:武汉植物园
什么是坏死
坏死是指在损伤因子的作用下,活体 内局部组织、细胞的死亡。它是一种非生 理性的细胞死亡 。常伴有细胞内容物释放 或组织死亡,所形成的细胞碎片可被巨噬 细胞和中性粒细胞清除。
坏死的类型
凝固性坏死 坏死组织因为失水变干、蛋白质凝固,而变 为灰白色或黄白色比较干燥结实的凝固体,故称 为凝固性坏死(coagulative necrosis)。凝固性 为凝固性坏死(coagulative necrosis)。凝固性 坏死常见于心、肾、脾等器官的缺血性坏死— 坏死常见于心、肾、脾等器官的缺血性坏死—梗 死。 液化性坏死 有些组织坏死后被酶分解成液体状态,并可 形成坏死囊腔称为液化性坏死(liquefactive 形成坏死囊腔称为液化性坏死(liquefactive necrosis)。 necrosis)。
如何区分凋亡细胞与坏死细胞
细胞凋亡(Apoptosis) 是生物界广泛存在的一种现象,与其它的生命现象一样具有同等重要的生理学或病理学意义。
尽管其最终结果也是导致细胞死亡,但其诱导因素、发生机制和过程及意义均明显不同于一般的病理性细胞死亡(即细胞坏死性死亡,简称细胞死亡) 。
细胞凋亡的形态特征与细胞坏死性死亡的形态特征不同。
细胞坏死性死亡是被动的病理性死亡,其形态特征首先是膜通透性增加,细胞外型发生不规则变化,内质网扩张,核染色质不规则移位,进而线粒体及核肿张,溶酶体破坏,细胞膜破裂,胞浆外溢,这种死亡过程常常引起炎症反应。
细胞凋亡则是在某些因素的诱导下,由细胞内在的有规律的机制引起的,是主动的生理性细胞自杀。
其特征是细胞首先变圆,随即与邻近细胞脱离,失去微绒毛,胞浆浓缩,内质网扩张呈泡状并与细胞膜融合,线粒体无明显变化,核染色质浓缩成块并凝聚在核膜周边,胞膜内陷将细胞自行分割为多个有外膜包裹、内涵物不外溢的凋亡小体,后被吞噬细胞或邻周细胞所识别、吞噬。
由于细胞凋亡过程不导致溶酶体破坏及胞膜破裂,没有细胞内容物外泄,故不引起炎症反应,在生理条件下,生物体内细胞存活与死亡是由自身发育阶段提供的遗传信息,或由邻近细胞和其微环境提供的信号决定的,其中包括细胞相互接触提供的信号以及周围环境中活性物质、激素等。
这些刺激信号的增加或减少调节着细胞产生和凋亡,维系着机体细胞的有序状态细胞凋亡的检测细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。
细胞凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法。
一、细胞凋亡的形态学检测根据凋亡细胞固有的形态特征,人细胞凋亡形态学检测方法。
细胞凋亡( apoptosis)的命名主要是根据某些单个细胞死亡时细胞碎裂如花瓣或树叶散落般的形态学特征。
目前对细胞凋亡的认识不断得到深化,检测凋亡细胞的方法也逐渐增多,但形态改变仍是确定细胞凋亡的最可靠的方法。
一步一步教你读流式图:凋亡和坏死的区别
一步一步教你读流式图:凋亡和坏死的区别2008-08-05 00:00 来源:丁香园点击次数: 841 关键词:流式图调亡坏死区别分享到:•收藏夹•腾讯微博•新浪微博•开心网下图为坏死图。
坏死的位于G0/G1峰前的峰形为从左至右的反抛物线形。
如下:而APOptosis则是一个较为对称的峰。
如下:.而有时凋亡和坏死同时存在。
如下图:蓝色的为apo峰(第一个三角),而白色的为坏死峰。
第二个三角为G0/G1峰。
第三个为异倍体G0/G1峰。
实际上,很多时候我们诱导的凋亡峰不像上图那样明显,如下:原因要从实验的原理开始,到细胞状态,实验步骤,试剂效能等,一一分析。
例如,某因素诱导的凋亡需要较长时间,而我们培养时间还没到,就有可能不出凋亡峰;或是在早期凋亡是用PI染色做SUB-G 1,凋亡率会不高,而用API法则更好地测出其凋亡率。
编辑: famsking 一步一步教你读流式图:凋亡诱导2008-08-05 00:00 来源:丁香园点击次数: 978 关键词:流式图教程调亡诱导分享到:•收藏夹•腾讯微博•新浪微博•开心网先发一张关于PI染色的uv诱导凋亡的图片,这是con:这是诱导凋亡的流式图,我们称之为sampl:那么怎么看这两张图呢?首先,我们要知道各个参数的意义。
这在流式原理中有介绍。
然后,我们要知道各个图之间的联系。
大家看一下下面的图。
R1主要代表粘连细胞R2主要代表G2/M期细胞R3主要代表G0/G1期细胞R4主要代表s期细胞R5主要代表凋亡细胞“主要”是因为大家可以看到设的gate后各个gate中的细胞有位置重叠。
FL2-W/FL2-A和FL2-A/COUNT之间的关系。
这两张图的最大区别在于G0/G1期前面的亚G1峰。
这个峰就是FL2-W/FL2-A图上的左下方的“小尾巴”,小尾巴越大,SUB-G1峰就越高。
也就是说凋亡的越多。
当然这需要跟整张图比较,就是选取mark 后测量其gate%。
编辑: famsking 一步一步教你读流式图:表型CD4CD82008-08-05 00:00 来源:丁香园点击次数: 927 关键词:表型CD4CD8流式图教程分享到:•收藏夹•腾讯微博•新浪微博•开心网大鼠外周血T细胞CD亚群CD4/CD8比值所做的流式分析图右上角的图片是CD4和CD8的双荧光检测。
细胞死亡的类型
细胞死亡的类型
细胞死亡是指细胞在某些状况下失去生命功能,不再执行正常生理功能而逐渐消失的过程。
细胞死亡可分为多种不同类型:
1. 坏死:是因为机体外部或内部原因导致的细胞死亡,如物理损伤、缺血、中毒等,坏死细胞通常会导致炎症反应。
2. 凋亡:是细胞自身程序性死亡的一种方式,凋亡细胞通常会被其他细胞吞噬,而不会导致炎症反应。
凋亡对维持正常组织的结构和功能非常重要。
3. 前凋亡:是凋亡前的一个状态,细胞在此状态下可以被保护和修复。
前凋亡是细胞死亡的防线,如果前凋亡失败,细胞就会进入凋亡状态。
4. 亡:是指细胞在凋亡过程中发生的自噬现象。
在细胞凋亡过程中,细胞会把自己的组织结构分解,并释放出杀死自己的物质,最终导致细胞死亡。
不同类型的细胞死亡对于机体的影响也不同,因此对于细胞死亡的研究非常重要,有助于更好地认识和治疗各种疾病。
- 1 -。
述坏死和凋亡的区别
述坏死和凋亡的区别
坏死和凋亡是两个常用于描述生物组织或细胞的词语,它们之间存在一些区别。
1. 坏死(Necrosis):坏死是指由于细胞受到严重损伤或死亡而引起的组织的不可逆转性损害。
坏死通常是病理过程中的一部分,由多种因素引起,如缺血、化学物质暴露、感染或损伤等。
在坏死过程中,受损细胞会发生明显的形态和结构上的变化,细胞膜破坏,细胞内部的物质会泄漏出来,引发炎症反应。
常见的坏死形式有坏死老化、干酪样坏死、脂肪坏死等。
2. 凋亡(Apoptosis):凋亡是一种机制性的、有规律的、受控的细胞死亡过程。
它是细胞生命周期中的一部分,并在正常生理过程中发挥重要作用,如胚胎发育、免疫系统调节、组织维持和调整等。
凋亡通常对个体或组织是有利的,它确保了细胞数量的平衡。
在凋亡过程中,细胞会发生收缩和凝结,核DNA出现断裂,胞质内部形成凋亡小体,并最终被吞噬和清除。
凋亡可以被认为是一种正常细胞死亡的方式。
因此,坏死和凋亡之间的关键区别在于,坏死是受到严重的损伤或病理因素引起的不可逆转的细胞死亡,而凋亡是一种受控的、有规
律的、随着正常生理过程发生的细胞死亡方式。
如何区分凋亡细胞与坏死细胞,细胞坏死与细胞凋亡在形态学上如何鉴别
如何区分凋亡细胞与坏死细胞,细胞坏死与细胞凋亡在形态学上如何鉴别采用一些凋亡细来胞检测方自法,因为要区bai分,所以只能从形态学方du面入手.如细胞核染色zhi,用dapi,观察细胞核形dao态:凋亡细胞核固缩,晚期有凋亡小体凋亡早期可以用双重染色:膜不通透的染料和通透性染料.希望我的回答能帮到你,望采纳!如何区分凋亡细胞与坏死细胞采用一些凋亡细胞检测 ... ,因为要区分,所以只能从形态学方面入手.如细胞版核染色权,用dapi,观察细胞核形态:凋亡细胞核固缩,晚期有凋亡小体凋亡早期可以用双重染色:膜不通透的染料和通透性染料.希望我的回答能帮到你,望采纳!细胞凋抄亡是由基因所决袭定的细胞自动结束生命的过程,由于细胞凋亡受到严格的由遗传机制决定的程式性调控,所以也常常被称为细胞程式设计性死亡。
而细胞坏死则是在种种不利因素的影响下,由于细胞正常代谢活动受损或中断引起的细胞损伤和死亡。
对于生物体来说,细胞调亡是有积极意义的,对于多细胞生物体完成正常发育,维持内部环境的稳定,以及抵御外界各种因素的干扰都起著非常关键的作用。
如,被病原体感染的细胞的清除,就是通过细胞凋亡来完成的。
而细胞坏死对对机则是不利的。
如何区分凋亡细胞与坏死细胞细胞凋亡是由基因所决定的细胞自动结束生命的过程,由于细胞凋亡受到严格的由遗传机制决定的程式性调控,所以也常常被称为细胞程式设计性死亡。
而细胞坏死则是在种种不利因素的影响下,由于细胞正常代谢活动受损或中断引起的细胞损伤和死亡。
对于生物体来说,细胞调亡是有积极意义的,对于多细胞生物体完成正常发育,维持内部环境的稳定,以及抵御外界各种因素的干扰都起著非常关键的作用。
如,被病原体感染的细胞的清除,就是通过细胞凋亡来完成的。
而细胞坏死对对机则是不利的。
采用一些凋亡细胞检测 ... ,因为要区分,所以只能从形态学方面入手.如细胞核染色,用dapi,观察细胞核形态:凋亡细胞核固缩,晚期有凋亡小体凋亡早期可以用双重染色:膜不通透的染料和通透性染料.细胞坏死与细胞凋亡在形态学上如何鉴别?坏死形态学特征-膜完整性丧失,胞浆和线粒体膨胀,全细胞裂解凋亡形态学特征-胞膜出芽,但保持完整,染色体聚集在核膜周边,胞浆收缩、细胞核凝集,最后细胞**为凋亡小体,bcl-2家族蛋白导致线粒体膜通透性增加坏死是细胞受到强烈理化或生物因素作用引起细胞无序变化的死亡过程。
细胞凋亡和细胞坏死
五、流式细胞分析
(Flow Cytometry,FCM)
利用流式细胞仪对处在快速、直线、 流动状态中的单细胞或生物颗粒进行多参数、 快速定量分析,同时对特定群体加以分选的 现代细胞分析技术。
FCM分析细胞凋亡的方 法
• 一. 细胞形态分析 • 二. 细胞膜结构与功能改变分析 • 三. 细胞DNA含量分析 • 四. TUNEL法
ROS
mtDNA
cell
㈢ 细胞凋亡相关基因
• 抑制凋亡基因:bcl-2 • 促进凋亡基因: fas,P53 • 双向调控基因: c-myc,bclx
Bcl-2抗凋亡机制
①直接的抗氧化 ②抑制线粒体释放促凋亡的蛋白质 ③抑制促凋亡的Bax,Bak细胞毒作用 ④抑制Caspases激活 ⑤维持细胞钙稳态
1.DNA的片段化“梯”状 条 带为细胞凋亡主要特 征
2.内源性核酸内切酶激活及其作用
• 由一系列胞内信号转导环节激活, 执行染色质DNA切割
3. Caspase 9 激活,需要通过CARD (caspase-recruitment domain)、Apaf-1、 细胞色素c、ATP等多个因子的参与
受 体
死 亡 信 号
Dnase 激活 Capases 激活
巨噬细胞 吞噬细胞 凋亡细胞
诱导期
执行期
消亡期
凋亡时细胞的主要变 化
一、细胞凋亡的形态学改变
1.细胞膜的变化:微绒毛、细胞突起和细胞表面皱褶消失;
胞膜空泡化,内质网不断扩张并与胞膜融合形成芽状突起 (出芽);
2.细胞质变化:胞质浓缩、细胞器变化(线粒体变大脊增多
• • •
四.
凋亡相关蛋白分析
• 1. Bcl-2家族 • 促进凋亡:Bax, Bal, Bcl-Xs, Bad, Bid, Bik, Bim, Hrk, Bok等 • 抑制凋亡:Bcl-2, Bcl-Xl, Bcl-w, Mcl1, A1/Bfl-1等 • 均含有BH(Bcl-2 homology)结构域,通过 此结构域以二聚体形式调控凋亡。 • 2. 其他相关蛋白 • p53, Myc, Fas等
简述细胞凋亡与坏死在形态学上的主要区别。
简述细胞凋亡与坏死在形态学上的主要区别。
细胞凋亡(Apoptosis)和坏死(Necrosis)是细胞死亡的两种
主要形式,它们在形态学上有以下主要区别:
1. 形态特点:细胞凋亡通常呈现为细胞体积减小、细胞核凝缩、细胞核碎裂或形成尸体团块等特点,同时细胞膜完整,维持相对完整的细胞形态;而坏死在形态学上则表现为细胞体积膨胀,细胞膜破裂,细胞内容物溢出。
2. 细胞内变化:细胞凋亡过程中,细胞内的DNA发生断裂和
切割,形成DNA片段,同时细胞内的嗜碱性内核蛋白酶(caspase)活化,引发跨膜电势的消失,以及线粒体功能和
膜通透性的改变;而坏死时,细胞核DNA的断裂没有规律性,线粒体功能损害较大,导致能量和ATP的丧失。
3. 炎症反应:细胞凋亡通常不会引发炎症反应,仅包裹在吞噬细胞内;而坏死会导致细胞内容物的溢出,引起炎症反应,可能会引发局部或全身的炎症反应。
4. 生理功能:细胞凋亡是一种可调控的程序性细胞死亡形式,常常在发育、维持正常组织和细胞内恶性肿瘤生成过程中发挥重要作用;而坏死则通常发生在外界严重刺激或损伤导致的急性细胞死亡情况下,是一种非调控性的细胞死亡。
总体而言,细胞凋亡和坏死在形态学上表现出明显的差异,前者通常表现为细胞核和细胞体的凋亡和碎裂,维持相对完整的细胞形态,而后者则表现为细胞体肿胀、细胞膜破裂,细胞内
容物泄漏。
此外,细胞凋亡和坏死在生理功能上也有明显的差别,前者是一种调控性的细胞死亡方式,而后者则是一种非调控性的细胞死亡方式。
细胞凋亡坏死的区别
细胞凋亡坏死的区别
细胞凋亡和坏死是两种不同的细胞死亡方式,它们在多个方面存在明显的区别。
1. 死亡原因:细胞凋亡是细胞的程序性死亡,通常受基因调控,是生物体发育过程中的自然现象。
而细胞坏死则是因为细胞受到强烈理化或生物因素的刺激,如极端的物理条件、严重的病理状态或毒性物质的影响,导致细胞无序变化的死亡过程。
2. 形态学变化:细胞凋亡时,细胞膜保持完整,细胞逐渐缩小并固缩成核状,形成凋亡小体,最终被邻近的细胞或体内吞噬细胞所吞噬。
而细胞坏死时,细胞膜会破损,细胞肿胀,内质网崩解,细胞内容物外溢,导致周围组织的炎症反应。
3. 生物化学变化:细胞凋亡时,可以有蛋白质合成,而细胞坏死则无蛋白质合成。
4. 发生的条件:细胞凋亡通常发生在单个细胞或小范围的细胞中,且不受环境条件的影响。
而细胞坏死则常常发生在成群的细胞或大片组织中,且常由严重的病理状态或毒性物质引起。
5. 对机体的影响:细胞凋亡是机体的一种自我保护机制,有助于清除不需要的或异常的细胞,对机体有利。
而细胞坏死则可能导致周围组织的炎症反应,对机体造成损害。
总的来说,细胞凋亡和坏死在死亡原因、形态学变化、生物化学变化、发生条件以及对机体的影响等方面都存在明显的区别。
这些区别使得我们能够对细胞的死亡方式进行准确的判断,从而更好地理解生命的奥秘。
细胞凋亡 细胞坏死 细胞焦亡的关联
细胞凋亡细胞坏死细胞焦亡的关联细胞凋亡、细胞坏死和细胞焦亡是细胞死亡的三种主要形式。
虽然它们在表现形式和机制上存在差异,但它们之间也有一些关联。
细胞凋亡是一种被程序性激活的死亡形式,它通常由内部或外部的信号引起。
凋亡过程中,细胞内部的蛋白酶被激活,导致细胞核DNA和细胞质膜的破裂,最终导致细胞死亡。
与细胞坏死不同的是,细胞凋亡是一种有序的过程,不会引起炎症反应。
细胞坏死是一种非程序性的死亡形式,通常是由于细胞内外部的创伤或病理因素导致细胞死亡。
在坏死过程中,细胞膜被破坏,导致细胞内容物泄漏到周围环境中,引发炎症反应。
细胞焦亡是一种介于凋亡和坏死之间的死亡形式。
在焦亡过程中,细胞核DNA被降解,但细胞膜仍然完好,从而避免了细胞内容物泄漏和炎症反应的发生。
尽管细胞凋亡、细胞坏死和细胞焦亡是不同的死亡形式,但它们之间也存在着一些关联。
例如,某些病理因素可以同时引起细胞凋亡和细胞坏死,而焦亡通常被认为是凋亡和坏死的中间状态。
此外,细胞死亡的形式可能会相互转化,例如某些凋亡调节蛋白也可以在坏死或焦亡过程中发挥作用。
总之,细胞凋亡、细胞坏死和细胞焦亡是三种不同的细胞死亡形式,但它们之间也存在着一些关联和交叉影响。
深入研究这些关联可能有助于更好地理解和治疗相关疾病。
区别坏死细胞与凋亡细胞的方法
PI单染色法基本原理其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。
这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等,其中细胞核的改变最具特征性,主要包括以下几个方面:1. 细胞核的改变:由于凋亡细胞核的改变,造成各种染色体荧光染料对凋亡细胞DNA可染性发生改变。
研究表明,用各种染色体荧光染料对经固定的凋亡细胞进行染色,其DNA可染性降低。
许多学者把这种DNA可染性的降低认为是凋亡细胞的标志之一。
2. 光散射特性:凋亡细胞形态上的改变影响它们的光散射特性。
在流式细胞仪上,前散射光与细胞的大小有关,而侧散射光反映的是光在细胞内的折射作用,与细胞内的颗粒多少有关。
在细胞凋亡时,细胞固缩,体积变小,故前散射光降低,这一特性往往被认为是凋亡细胞的特点之一。
此外细胞凋亡时由于染色体降解,核破裂形成,细胞内颗粒往往增多,故凋亡细胞侧散射光常增加。
细胞坏死时,由于细胞肿胀,其前散射光增大;侧散射光在细胞坏死时也增大,因此可根据前散射光和侧散射光区别凋亡细胞和坏死细胞。
但需要注意的是,根据前散射光和侧散射光判断凋亡细胞的可靠性受被检测细胞形态上的均一性和核胞浆比率影响很大。
因此在某些淋巴细胞凋亡中,用光散射特性检测凋亡的可靠性较好,而在肿瘤细胞凋亡中,其可靠性就较差。
根据光散射特性检测凋亡细胞最主要的优点是可以将光散射特性与细胞的表面免疫荧光分析结合起来,用以区别经这些特殊处理发生选择性凋亡的淋巴细胞亚型。
也可用于活细胞的分类。
试剂与仪器PBS溶液(配制方法见附录);λPI染液:将PI溶于PBS(pH7.4)中,终浓度为100ug/ml。
用棕色瓶4℃避光保存。
λ70%乙醇λ400目筛网λ流式细胞仪λ实验步骤1. 收集细胞{数目约(1~ 5)×106个/mL},500 ~ 1000 r/min离心5min,弃去培养液。
2. 3ml PBS洗涤1次。
3. 离心去PBS,加入冰预冷的70%的乙醇固定,4℃,1—2小时。
凋亡和坏死的名词解释
凋亡和坏死的名词解释《凋亡和坏死的名词解释》凋亡,这听起来像是一个有点神秘的词呢。
想象一下啊,细胞就像一个个小小的生命个体,凋亡呢,就好比是细胞的一种“自我了断”,但这种“了断”是非常有序的。
就像是秋天树叶的凋零,一片树叶从树上掉落,它不是突然破碎或者毫无征兆地烂掉,而是到了一定的时候,它就会按照某种内在的规律,慢慢从树枝上脱落。
细胞凋亡也是这样,它是细胞自身基因调控下的一种程序性死亡。
就像一个训练有素的士兵,接收到了某种特定的命令,然后就开始有条不紊地执行死亡程序。
它的细胞膜会发生一些变化,比如说会形成一些小泡,就像树叶在凋零前可能会卷起来一点一样。
然后细胞里面的一些成分会被切割成一小段一小段的,就像把一个大物件拆解成一个个小零件。
这些小零件还会被细胞周围的其他细胞或者是专门处理垃圾的细胞给收拾掉,不会对周围环境造成混乱和破坏。
再来说坏死。
坏死可就不像凋亡那么“文明”了。
如果说凋亡是细胞的优雅谢幕,坏死就像是一场突如其来的灾难。
比如说,你把一个苹果放在那,突然被重物狠狠地砸了一下,这个苹果被砸到的部分就会迅速变黑、变软,开始腐烂。
细胞坏死也是类似的情况。
细胞坏死往往是因为一些外界的不良因素,像突然的高温、强酸强碱的侵蚀或者是严重的缺氧。
这时候细胞就像一个无辜的小生命遭受了不可抗力的打击。
细胞的细胞膜会破裂,里面的东西就会像开了闸的洪水一样,全都涌出来。
这里面有很多对周围细胞有害的物质,就像苹果腐烂流出的汁水会让旁边的好苹果也跟着受到影响一样。
这些涌出来的物质会引发炎症反应,周围的细胞就像是被卷入了一场战争,无辜受到牵连,整个环境就变得乱糟糟的。
从外观上看,凋亡的细胞往往是比较规整的,像是一个有序的过程留下的痕迹。
而坏死的细胞则是乱糟糟的,就像被破坏后的废墟。
从对身体或者整个组织的影响来看,凋亡在很多时候是正常生理过程的一部分,像我们身体里一些细胞的更新换代,老的细胞凋亡了,新的细胞才能更好地发挥作用。
细胞坏死和凋亡
细胞坏死与凋亡死亡是生命的普遍现象,但细胞死亡并非与机体死亡同步。
正常的组织中,经常发生“正常”的细胞死亡,它是维持组织机能和形态所必需的。
细胞死亡的方式通常有3种:即①细胞坏死(necrosis)。
②细胞凋亡(apoptosis)。
③细胞程序性死亡(programmed cell death,PCD)。
一、细胞坏死是细胞受到化学因素(如强酸、强碱、有毒物质)、物理因素(如热、辐射)和生物因素(如病原体)等环境因素的伤害,引起细胞死亡的现象。
坏死细胞的形态改变主要是由下列2种病理过程引起的,即酶性消化和蛋白变性。
参与此过程的酶,如来源于死亡细胞本身的溶酶体,则称为细胞自溶(autolysis);若来源于浸润坏死组织内白细胞溶酶体,则为异溶(heterolysis)。
细胞坏死初期,胞质内线粒体和内质网肿胀、崩解,结构脂滴游离、空泡化,蛋白质颗粒增多,核发生固缩或断裂。
随着胞质内蛋白变性、凝固或碎裂,以及嗜碱性核蛋白的降解,细胞质呈现强嗜酸性,故坏死组织或细胞在苏木精/伊红染色切片中,胞质呈均一的深伊红色,原有的微细结构消失。
在含水量高的细胞,可因胞质内水泡不断增大,并发生溶解,导致细胞结构完全消失,最后细胞膜和细胞器破裂,DNA降解,细胞内容物流出,引起周围组织炎症反应。
二、细胞凋亡细胞凋亡(cell apoptosis)是借用古希腊语,表时细胞象秋天的树叶一样凋落的死亡方式。
1972年Kerr最先提出这一概念,他发现结扎大鼠肝的左、中叶门静脉后,其周围细胞发生缺血性坏死,但由肝动脉供应区的实质细胞仍存活,只是范围逐渐缩小,其间一些细胞不断转变成细胞质小块,不伴有炎症,后在正常鼠肝中也偶然见到这一现象。
凋亡细胞的主要特征是:①染色质聚集、分块、位于核膜上,胞质凝缩,最后核断裂,细胞通过出芽的方式形成许多凋亡小体(图15-4);②凋亡小体内有结构完整的细胞器,还有凝缩的染色体,可被邻近细胞吞噬消化,因始终有膜封闭,没有内溶物释放,故不会引起炎症;③凋亡细胞中仍需要合成一些蛋白质,但是在坏死细胞中ATP和蛋白质合成受阻或终止;④核酸内切酶活化,导致染色质DNA在核小体连接部位断裂,形成约200bp整数倍的核酸片段,凝胶电泳图谱呈梯状;⑤凋亡通常是生理性变化,而细胞坏死是病理性变化。
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细胞凋亡(Apoptosis) 是生物界广泛存在的一种现象,与其它的生命现象一样具有同等重要的生理学或病理学意义。
尽管其最终结果也是导致细胞死亡,但其诱导因素、发生机制和过程及意义均明显不同于一般的病理性细胞死亡(即细胞坏死性死亡,简称细胞死亡)。
细胞凋亡的形态特征与细胞坏死性死亡的形态特征不同。
细胞坏死性死亡是被动的病理性死亡,其形态特征首先是膜通透性增加,细胞外型发生不规则变化,内质网扩张,核染色质不规则移位,进而线粒体及核肿张,溶酶体破坏,细胞膜破裂,胞浆外溢,这种死亡过程常常引起炎症反应。
细胞凋亡则是在某些因素的诱导下,由细胞内在的有规律的机制引起的 ,是主动的生理性细胞自杀。
其特征是细胞首先变圆,随即与邻近细胞脱离,失去微绒毛,胞浆浓缩,内质网扩张呈泡状并与细胞膜融合,线粒体无明显变化 ,核染色质浓缩成块并凝聚在核膜周边,胞膜内陷将细胞自行分割为多个有外膜包裹、内涵物不外溢的凋亡小体,后被吞噬细胞或邻周细胞所识别、吞噬。
由于细胞凋亡过程不导致溶酶体破坏及胞膜破裂,没有细胞内容物外泄,故不引起炎症反应,在生理条件下,生物体内细胞存活与死亡是由自身发育阶段提供的遗传信息,或由邻近细胞和其微环境提供的信号决定的,其中包括细胞相互接触提供的信号以及周围环境中活性物质、激素等。
这些刺激信号的增加或减少调节着细胞产生和凋亡,维系着机体细胞的有序状态细胞凋亡的检测细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。
细胞凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法。
一、细胞凋亡的形态学检测根据凋亡细胞固有的形态特征,人细胞凋亡形态学检测方法。
细胞凋亡(apoptosis)的命名主要是根据某些单个细胞死亡时细胞碎裂如花瓣或树叶散落般的形态学特征。
目前对细胞凋亡的认识不断得到深化,检测凋亡细胞的方法也逐渐增多,但形态改变仍是确定细胞凋亡的最可靠的方法。
光学显微镜观察凋亡细胞的主要特征为核染色质致密深染,形成致密质块,有时可碎裂。
在HE染色的组织切片中细胞积缩小.胞质致密、嗜酸性染色增强,并可形成凋亡小体。
在组织中凋亡细胞以分散单个形式存在,凋亡细胞与周围细胞分离,不引起炎症反应。
检测方法:细胞涂片或组织石蜡切片作HE染色或Giemsa染色,在高倍物镜下观察凋亡细胞的形态改变,结合显微镜测量工具可作凋亡计数。
本方法简便易行,但在细胞密集的组织中对于改变不典型的细胞判断较困难,常缺乏较为特征的指标,具有较强的主观性,重复性差。
本方法.可用于凋亡现象的初步观察,作为分析指标之一。
视频时差显微技术(videotime-lapsemicroscopy)本方法用于细胞培养,通过相差显微镜可动态观察细胞凋亡的变化过程,尤其是观察细胞表和外形的变化。
凋胞与基质分离,胞体变圆、收缩、出泡,有的细胞拉长,出现钉状突起,持续数小时后细胞膜破裂,细胞溶解,通过连续观察,本方法可检测培养基中凋亡细胞,但不能用于病理组织。
检测方法:收集2x105细胞/ml培养,置于多空培养板,加入凋亡诱导剂,在带有自动摄像装置的相差显微镜下观察凋亡细胞的动态改变,每隔30秒作序列摄影,连续24小时。
如同时进行荧光染色,可参荧光显微镜下观察和摄影。
电子显微镜观察凋亡细胞的典型形态改变如胞质的固缩,染色质浓缩成半月板或帽状附于核膜,核的碎裂和凋亡小体形成等,在透射电镜下得到最佳体现。
为凋亡细胞判定提供了最可靠的依据。
本方法的缺点是样品制作过程较复杂,且仪器、设备的费用昂贵,较难广泛大量开展。
由于样品范围局限,在凋亡数较少时需进行大量的观察才能观察到典型的凋亡改变。
检查方法:透射电镜标本经戊二醛和饿酸双重固定,丙酮脱水,环氧树脂包埋,超薄切片,醋酸枸橼酸电子重染色,透射电镜观察。
扫描电镜标本经戊二醛和饿酸双重固定,乙醇逐级脱水,CO2临界点干燥,真空喷金,扫描电镜观察。
一、检测细胞膜成分变化的AnnexinV 联合PI法磷脂酰丝氨酸外翻分析( AnnexinV 法)原理:磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS )正常位于细胞膜的内侧,但在细胞凋亡的早期,PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中(图3)。
Annexin-V是一种分子量为35~36KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力特异性结合。
将Annexin-V进行荧光素(FITC、PE)或biotin标记,以标记了的Annexin-V作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。
碘化丙啶(propidineiodide,PI) 是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI能够透过细胞膜而使细胞核红染。
因此将Annexin-V 与PI匹配使用,就可以将凋亡早晚期的细胞以及死细胞区分开来。
方法1悬浮细胞的染色:将正常培养和诱导凋亡的悬浮细胞(0.5~1×106)用PBS洗2次,加入100ulBindingBuffer和FITC标记的Annexin-V(20ug/ml)10ul,室温避光30min,再加入PI(50ug/ml)5ul,避光反应5min后,加入400ulBindingBuffer,立即用FACScan进行流式细胞术定量检测(一般不超过1h),同时以不加AnnexinV-FITC及PI的一管作为阴性对照。
2贴壁培养的细胞染色:先用0.25%的胰酶消化,洗涤、染色和分析同悬浮细胞。
3爬片细胞染色:同上,最后用荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜进行观察。
应用价值:细胞发生凋亡时,膜上的PS外露早于DNA断裂发生,因此AnnexinV联合PI染色法检测早期细胞凋亡较TUNEL法更为灵敏。
又AnnexinV联合PI染色不需固定细胞,可避免PI染色因固定造成的细胞碎片过多及TUNEL法因固定出现的DNA 片段丢失。
因此, Annexin V联合PI法更加省时,结果更为可靠,是目前最为理想的检测细胞凋亡的方法。
结果:细胞内氧化还原状态改变的检测:细胞色素 C的定位检测细胞色素C作为一种信号物质,在细胞凋亡中发挥着重要的作用。
正常情况下,它存在于线粒体内膜和外膜之间的腔中,凋亡信号刺激使其从线粒体释放至细胞液,结合Apaf-1(apoptotic proteaseactivatingfa ctor-1 )后启动caspase级联反应:细胞色素C/Apaf-1复合物激活caspase-9,后者再激活caspase-3和其它下游caspase。
细胞色素C氧化酶亚单位Ⅳ(cytochromecoxidasesubunit Ⅳ:COX4)是定位在线粒体内膜上的膜蛋白,凋亡发生时,它保留在线粒体内,因而它是线粒体富集部分的一个非常有用的标志。
方法:ApoAlertTMCellFractionationKit 不用超离心,可从凋亡和非凋亡细胞中快速有效分离出高度富集的线粒体部分,再进一步通过Western杂交用细胞色素C抗体和COX4抗体标示细胞色素C和COX4的存在位置,从而判断凋亡的发生。
三、线粒体膜势能的检测原理:线粒体在细胞凋亡的过程中起着枢纽作用,多种细胞凋亡刺激因子均可诱导不同的细胞发生凋亡,而线粒体跨膜电位DYmt的下降,被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件,它发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体 DYmt崩溃,则细胞凋亡不可逆转。
线粒体跨膜电位的存在,使一些亲脂性阳离子荧光染料如Rhodamine 123 、 3 ,3-Dihexyloxacarbocyanine iodide[DiOC6 ( 3 )] 、Tetrechloro-tetraethylbenzimidazol carbocyanineiodide[JC-1]、Tetramethylrhodaminemethylester(TMRM)等可结合到线粒体基质,其荧光的增强或减弱说明线粒体内膜电负性的增高或降低。
方法:将正常培养的细胞和诱导凋亡的细胞加入使用终浓度为Rhodamine123 (1mM)或终浓度为DiOC6(25nM),JC-1(1mM),TMRM(100nM),37°C平衡30min,流式细胞计检测细胞的荧光强度。
结果判定:经LPS刺激后的细胞,绿色荧光强度增加,意味着膜电位下降,细胞发生凋亡。
意义:该法通过对细胞生理指标的监测检测来反映细胞凋亡,结果直观、灵敏四、DNA片断化检测、DNA凝胶电泳(一)、检测原理细胞凋亡过程中 ,可发生特异性级联生化反应,其中最具特色的是内源性核酸内切酶的激活此酶可作用于连接DNA的核小体间区域,DNA链被切割成180~200bp 或其整倍数的片断抽提DNA, 经琼脂糖电泳可见梯状电泳图谱。
而坏死细胞的 DNA断裂点为无特征的杂乱片断,利用此特征可以确定群体细胞的死亡,并可与坏死细胞区别。
方法:1,DEX诱导小鼠胸腺细胞凋亡细胞2,获取凋亡细胞3,抽提DNA4,琼脂糖凝胶电泳5,紫外灯下观察结果. .(二)结果判断正常活细胞 DNA 电泳出现阶梯状(LADDER) 条带;坏死细胞DNA 电泳类似血抹片时的连续性条带。
用途:此方法灵敏性不高,大量凋亡细胞同时存在时才出现典型的结果,且只能被用于细胞群体,不能用于组织的原位检测。
凋亡细胞DNA含量的流式细胞计分析原理:由于凋亡细胞核的改变,造成各种染色体荧光染料对凋亡细胞DNA可染性发生改变。
研究表明,用各种染色体荧光染料对经固定的凋亡细胞进行染色,其DNA可染性降低。
许多学者把这种DNA可染性的降低认为是凋亡细胞的标志之一。
方法:收集细胞?70%冷乙醇(inPBS)4°C固定过夜?PBS洗涤,1000rpm′10min?RNaseA(0.5mg/ml)37°C消化30min?PI(50mg/ml)染色,室温避光15min?FACScan分析DNA亚二倍体的形成及细胞周期的变化。
优点:敏感度高,适合于检测少量样本,小部分凋亡细胞。
如临床活组织检测。
三、酶联免疫吸附法( ELISA)核小体测定原理:凋亡细胞的DNA断裂使细胞质内出现核小体。
核小体由组蛋白及其伴随的DNA片断组成,可由 ELISA 法检测。
检测步骤 1、将凋亡细胞裂解后高速离心,其上清液中含有核小体;2、在微定量板上吸附组蛋白体;3、加上清夜使抗组蛋白抗体与核小体上的组蛋白结合;4、加辣过氧化物酶标记的抗DNA抗体使之与核小体上的DNA结合‘4、加酶的底物,测光吸收制。
用途该法敏感性高,可检测5*100/ml 个凋亡细胞。
可用于人、大鼠、小鼠的凋亡检测。
该法不需要特殊仪器,适合基层工作,但是不能精确测定凋亡细胞发生的绝多对量。