紫外可见分光光度计参数分析方法
紫外可见分光光度计分析方法
紫外可见分光光度计是一种应用很广的分析仪器。
它的应用领域涉及制药、医疗卫生、化学化工、环保、地质、机械、冶金、石油、食品、生物、材料、计量科学、农业、林业、渔业等领域中的科研、教学等各个方面，用来进行定性分析、纯度检查、结构分析、络合物组成及稳定常数的测定、反应动力学研究等。
因为仪器涉及到光学、电学和结构等，所以它需要在一定的环境中应用。
(1)定量分析根据琅伯-比尔定律，样品的浓度和吸光度是成正比关系的，浓度越大，吸收值越高，所以分光光度计用的的还是定量分析，定量分析的种类有很多，这里介绍常用的几种定量分析方法：A、法：法是紫外可见分光光度计诸多分析方法中使用较多的一种方法。
这是一种以琅伯-比尔定律A=£bC为基础的分析方法，某一物质在一定波长下£值是一个常数，石英比色皿的光程是已知的，也是一个常数。
因此，可用紫外可见分光光度计在入max波长处，测定样品溶液的吸光度值A。
然后，根据琅伯比尔定律求出C=A/£b,则可求出该样品溶液的含量或浓度。
B、标准法：在选定的波长处，在相同的测试条件下，分别测试标准样品溶液C标和被测试样品溶液C样的吸光度A标和A样。
然后，按下式求得样品溶液的浓度或含量。
C样二A样/A标XC标C、标准曲线法紫外可见分光光度计常用的定量分析方法是标准曲线法。
即先用标准物质配制一定浓度的溶液，再将该溶液配制成一系列的标准溶液。
在一定波长下，测试每个标准溶液的吸光度，以吸光度值为纵坐标，标准溶液对应得浓度为横坐标，绘制标准曲线。
将样品溶液按标准曲线绘制程序测得吸光度值，在标准曲线上查出样品溶液对应的浓度或含量。
A、其它分析方法除上述几个分析方法外经常使用的分析方法外,还有比吸收系数法、二乘法、解联立方程法和示差分光光度法。
(2)定性分析如果未知物的紫外吸收光谱的吸收峰波长入max、吸收峰波长入Inin、摩尔吸光系数£max,以及吸收峰的数目、位置、拐点与标准光谱数据完全一致，就可以认为是同一种化合物。
紫外可见分光光度计检定误差分析及控制
紫外可见分光光度计检定误差分析及控制摘要：紫外可见分光光度计用于测定190nm-900nm波长范围内物质的吸光度，以及物质的鉴别、杂质检查和定量测定，广泛用于食品药品理化检验，仪器的性能严重影响检验结果。
紫外可见分光光度计是一种常见的实验分析仪器，由于其操作便利、结构简单，在实验检测分析中的运用较普遍。
为了保证实验数据的准确性，避免实验误差过大的问题，在应用过程中，针对其可能出现的部分误差，实验人员需采用适宜措施来开展误差缩减。
基于此，本文主要针对紫外可见分光光度计检定误差分析及相关控制措施展开研究。
关键词：紫外可见分光；光度计检定误差；控制引言紫外可见分光光度计是以被测物质在不同波长范围内，对光的吸收度反应作为物质分析依据的设备。
为满足物质测量的需求，其具有高灵敏度、操作简便等特点。
紫外可见分光光度计在使用中依据JJG178—2007《紫外、可见、近红外分光光度计》检定规程，其计量性能需要满足诸多要求，包括波长误差、波长重复性、噪声与漂移、透射比重复性、基线平直度、电源电压适应性、最小光谱带宽、透射比最大允许误差，另外还包括杂散光和吸收池配套性等10项。
1相关国家标准和检定规程目前，紫外可见分光光度计现行的国家标准为GB/T26798－2011《单光束紫外可见分光光度计》和GB/T26813－2011《双光束紫外可见分光光度计》，由国家质量监督检验检疫总局和国家标准化管理委员会联合发布，归口单位为全国工业过程测量和控制标准化技术委员会。
历经四次的修订和整合，由黑龙江省计量检定测试院等四家单位起草了国家计量检定规程JJG178－2007《紫外、可见、近红外分光光度计》，由国家质量监督检验检疫总局于2007年批准，并于2008年起施行，归口单位为全国物理化学计量技术委员会。
2紫外可见分光光度计检定误差分析2.1标准滤光片造成的误差标准滤光片的误差来源，主要是由于其定值误差及方向性所引发。
一般情况下，直接比较法是常见的检定方式，而这种方式对标准滤光片定值的准确性具有更高要求。
紫外可见分光光度计检定误差分析及控制
紫外可见分光光度计检定误差分析及控制摘要：紫外可见分光光度计在使用过程中，由于多种原因会引起波长或杂散光检定误差，导致测量结果不准确，为了得到更为准确的实验结果，必须进一步控制紫外可见分光光度计检定误差。
本文结合作者工作经验，以紫外可见分光光度计检定原理作为切入点，对常见误差来源进行分析，并对如何有效控制此类误差进行了讨论关键字：紫外可见分光光度计；检定误差；控制紫外可见分光光度计是以被测物质在不同波长范围内，对光的吸收度反应作为物质分析依据的设备。
为满足物质测量的需求，其具有高灵敏度、操作简便等特点。
紫外可见分光光度计在使用中依据JG178-2007《紫外、可见、近红外分光光度计》检定规程，其计量性能需要满足诸多要求，包括波长误差、波长重复性、噪声与漂移、透射比重复性、基线平直度、电源电压适应性、最小光谱带宽、透射比最大允许误差，另外还包括杂散光和吸收池配套性等10项)，其中，波长最大允许误差、杂散光及透射比最大允许误差是紫外可见分光光度计评价的关键指标。
本文旨在对上述关键指标加以分析探讨。
1紫外可见分光光度计的检定1.1波长示值误差检定在波长示值误差检定中，依据规程要求通常需要对9种物质进行检定。
在日常的检定环节，一般应综合考虑携带、保存及使用的便捷性，通常选择氧化钬滤光片和错妆滤光片实施检定。
氧化钬滤光片在波长吸收峰值点上较为完整，而错钕滤光片当波长低于400nm时无吸收峰，且不会出现尖锐的吸收峰，因此在检定时需要综合两者的特点配合使用。
在具体的检定中，氧化钬滤光片适用于200～700nm波长，错钕滤光片普遍用于700～900nm波长四。
在检定实施之前，应针对波长点进行调节，将其设置为零度和满度，然后在样品光路中放置标准物质，并沿同一波长方向对标准物质实施透射比值逐步测量，以获得相应的峰值波长数据。
波长示值误差属于标准值与实测平均值间的差值，以各波段对应的波长示值误差的最大值为准。
1.2 透射比示值误差检定对照JJG178-2007《紫外、可见、近红外分光光度计》检定规程要求，在透射比示值误差检定中，其标准物质包括透射比标称值分别为10％、20％，30％的光谱中性滤光片，紫外光区透射比滤光片以及重铬酸钾标准溶液等，其中，按照各波长的特点及要求，可以在检定时进行划分，如：235nm、257nm、313nm、350nm。
实验一紫外-可见分光光度计的性能检验
11.关闭工作站，关闭输液泵电源，关闭检测器电源、 关闭仪器电源
练习液相色谱仪使用的色谱条件、样品溶液和 进样量
色谱条件 流动相为甲醇∶水（80∶20）； 固定相:C18反相键合色谱柱；
检测波长为254nm；
流速：1ml/min。 样品溶液 含苯、甲苯、萘浓度分别为
1μg/ml的甲醇溶液。
进样量 ：10μl。
四、思考题
流动相在洗脱前为何要进行脱气？
实验七、高效液相色谱定性及定量分 析—中药赤芍中芍药苷的定性鉴别和
含量测定
一、实验目的
1.掌握利用高效液相色谱法进行定性 及定量分析。
2.巩固高效液相色谱仪的使用方法。
二、实验原理
1.采用与已知化合物对照,对组分进行定 性分析。
A
0.4
0.2
0
500
800
λ(nm)
3、重复性的检查
以0.02mol/L的H2SO4为 空白
在257nm处 测定
同一K2Cr2O7溶液的T，连续测定7 求出极差 次
若极差 <0.5%
仪器的重复性符合 使用要求
4.吸收值准确度的检查
以0.02mol/L的H2SO4为 空白
(T＝100%）
λ＝235nm、 257n3m13nm、
实验二
吸收曲线的测绘及 吸收系数的测定
一、实验目的
1、掌握测绘吸收曲线的方法 2、学会测定吸收系数
二、实验原理
1、若溶剂固定不变，化合物吸收曲线所出现的λmax、 λmin或λ(S)为一定值，且数目也一定，为鉴别化合物提供 了有力的证据。
2、百分吸收系数是指当溶液浓度为1%，液层厚度为
1cm时的吸光度。
紫外可见分光光度计检定误差分析及控制
紫外可见分光光度计检定误差分析及控制摘要：紫外可见分光光度计在使用过程中，由于多种原因会引起波长或杂散光检定误差，导致测量结果不准确，为了得到更为准确的实验结果，必须进一步控制紫外可见分光光度计检定误差。
分光光度计广泛应用于食品、化工、环保等各个行业，量大面广，JJG178-2007紫外、可见、近红外分光光度计国家计量检定规程中，规定了检定的具体参数，其中透射比误差是最关键的参数，它的准确与否直接影响仪器的测量准确性。
而透射比滤光片标准物质是目前检定校准各类型分光光度计的主要标准器之一，在一次计量比武中，出现了测量值的异常偏离，经过短时间内两名人员多次重复测量，得到的数据与第一次测量时基本一致。
关键词：紫外可见分光光度计；检定误差；控制引言紫外可见分光光度计是基于紫外可见分光光度法原理，利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射吸收来进行分析的一种分析仪器。
分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后，发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。
1紫外可见分光光度计检定误差分析1.1波长显示数值误差实际测量波长点调节至0度时，需要将检测物质放置在吸收池中，随后沿着相同波长方向逐个位置点测试物质的透射比例值，最终计算出相应的峰值波长数据。
而波长在实际测量过程中所得的平均数值和标准数值之差被称为波长显示数值差。
1.2透视比例误差技术人员需要在235nm、257nm、313nm波长下，分别矫正仪器设备的0度范围以及满度范围，进一步测量出各标准物质的基础透射比。
紫外可见分光光度计工作时，数据测量的平均数值以及标准值之差一般为透射比例数值误差，为此各个波长透射比所展现的数值误差最大范围则为各个波长段透射比例数值误差。
2紫外可见分光光度计检定误差控制2.1强化检测人员技能提升为进一步提高检测人员的检测技能，确保检测数据的稳定和安全，应不断强化检测人员对检定规程的理论学习，认真学习JJG178—2007《紫外、可见、近红外分光光度计》，并且将理论与实际操作相互结合，积极总结工作中的工作经验和教训，不断提升自身检测水平和处理问题能力，有效防止检测误差性的产生。
紫外可见分光光度计 普析
紫外可见分光光度计普析紫外可见分光光度计（UV-Vis spectrophotometer）是一种常用的分析仪器，广泛应用于化学、生物、环境等领域的研究和实验中。
本文将从紫外可见分光光度计的原理、应用以及操作步骤等方面进行介绍。
一、紫外可见分光光度计的原理紫外可见分光光度计是利用物质对紫外可见光的吸收特性进行定量分析的仪器。
根据光的波长范围，可分为紫外光区和可见光区两部分。
紫外光区的波长范围为200-400 nm，可见光区的波长范围为400-800 nm。
紫外可见分光光度计的工作原理是通过光源产生的光经过样品后，被光电二极管或光电倍增管接收，形成光谱图，再通过计算机进行数据处理和分析。
在分析过程中，样品溶液的吸收特性会使光强发生变化，根据吸光度与物质浓度之间的线性关系，可以通过测量吸光度来确定物质的浓度。
二、紫外可见分光光度计的应用紫外可见分光光度计在科研和实验中有着广泛的应用。
以下是其中几个常见的应用领域：1. 生物化学分析：紫外可见分光光度计可用于蛋白质、核酸、酶等生物大分子的浓度测定和纯度分析，如蛋白质含量的测定、核酸的纯度检测等。
2. 药物分析：紫外可见分光光度计可用于药物的含量测定、质量控制和稳定性研究，如药物溶液的吸光度测定、药物的光解动力学研究等。
3. 环境监测：紫外可见分光光度计可用于水质、大气和土壤等环境样品的污染物分析和监测，如水中重金属离子的测定、大气中挥发性有机物的测定等。
4. 食品安全检测：紫外可见分光光度计可用于食品中添加剂、农药残留、重金属等有害物质的检测，如食品中硝酸盐含量的测定、食品中防腐剂的测定等。
三、紫外可见分光光度计的操作步骤使用紫外可见分光光度计进行实验时，需要按照以下步骤进行操作：1. 打开仪器电源，并预热一段时间，使光源和光电二极管稳定工作。
2. 根据实验需要选择合适的光源和检测器，设置光的波长范围。
3. 取一定量的样品溶液，注入样品池中，并调节样品池的位置，使光线通过样品溶液。
紫外可见分光光度计测量结果的不确定度评定
紫外可见分光光度计测量结果的不确定度评定紫外可见分光光度计是一种用于测量样品吸收或反射光的仪器，在化学、生物学、环境科学等领域被广泛应用。
在进行测量时，我们需要评定测量结果的不确定度，以确保结果的准确性和可靠性。
本文将主要讨论紫外可见分光光度计测量结果的不确定度评定方法。
一、实验原理在紫外可见分光光度计测量中，我们会放置一个参比溶液和待测样品，分别测量它们的光吸收率。
我们主要关心的是光吸收率的差值，即待测样品的光吸收率减去参比溶液的光吸收率。
这样，可以排除光源强度变化、仪器灵敏度变化等因素对测量结果的影响，以提高测量的准确性。
二、不确定度评定方法在进行光度计测量时，我们需要考虑多个因素对测量结果的影响，并评定不确定度。
以下是一些常用的不确定度评定方法：1. 仪器本身的不确定度：光度计仪器的性能参数、校准情况、使用年限等都会对测量结果产生影响。
首先需要查阅仪器的性能参数和校准记录，评定仪器本身的不确定度。
2. 光源和检测器的不确定度：光源的稳定性和检测器的灵敏度都会对测量结果产生影响，需要考虑它们的不确定度。
3. 样品制备和测量过程中的不确定度：样品制备的不均匀性、溶解度、浓度测量的不确定度等都会对测量结果产生影响。
在测量过程中，操作人员的经验水平和操作规范也会对结果产生影响，需要进行合理评定。
4. 数据处理和分析的不确定度：在进行数据处理和分析时，需要考虑各种误差的影响，包括标准曲线的拟合误差、测量数据的重复性误差等。
基于以上因素，我们可以利用传统的高斯不确定度分析方法或蒙特卡洛模拟方法对测量结果的不确定度进行评定。
具体步骤如下：1. 收集相关数据和信息：收集仪器性能参数、校准记录、样品制备过程记录、测量数据等相关信息。
2. 评估不确定度来源：对各个不确定度来源进行分析和评估，确定其对测量结果的影响程度。
3. 计算不确定度：根据不同不确定度来源的性质和分布，选择合适的不确定度分析方法，计算各个不确定度来源的贡献，进而得到最终的测量结果的不确定度。
紫外-可见分光光度法测定
紫外-可见分光光度法测定1. 引言1.1 引言紫外-可见分光光度法是一种常用的分析化学方法，通常用于测定物质的浓度或测定物质的吸光度。
该方法利用紫外-可见光谱仪测量样品对紫外和可见光的吸收情况，从而推断样品中所含物质的浓度或结构。
在化学分析实验中，紫外-可见分光光度法具有灵敏度高、准确性高和简便易行的优点，因此被广泛应用于药物分析、环境监测、食品检测等领域。
本实验旨在通过该方法测定样品中目标物质的浓度，并探讨影响测定结果的因素。
通过对仪器原理、操作步骤、实验结果、数据分析和影响因素的详细讨论，我们将深入了解紫外-可见分光光度法的原理和应用，并为今后在相关领域的研究提供参考和借鉴。
希望本实验能够为我们提供更多关于分光光度法的实际操作经验，提升我们的实验技能和分析能力。
1.2 背景介绍紫外-可见分光光度法是一种广泛应用于化学分析领域的分析方法，通过测定物质在紫外-可见光区域的吸收特性，从而确定物质的浓度或者进行定性分析。
紫外-可见分光光度法具有操作简单、灵敏度高、选择性强的特点，被广泛应用于环境监测、食品安全检测、药品质量控制等领域。
随着科学技术的不断发展，紫外-可见分光光度法在实验室分析中扮演着越来越重要的角色。
通过测定物质在特定波长范围内的光吸收情况，我们可以获得关于物质性质的重要信息，如浓度、溶解度、稳定性等。
掌握紫外-可见分光光度法的原理和操作方法，对于提高实验准确性和效率具有重要意义。
在本文中，我们将介绍紫外-可见分光光度法的仪器原理、操作步骤、实验结果、数据分析和影响因素，希望能够为读者提供一份系统全面的紫外-可见分光光度法测定指南。
通过总结和展望，我们也希望能够进一步探讨该方法在化学分析领域的应用前景。
1.3 研究目的紫外-可见分光光度法是一种常用的分析化学技术，可以用于测定物质的吸光度，从而推断物质的浓度。
本实验的研究目的主要分为以下几点：1. 研究紫外-可见分光光度法在测定物质浓度方面的应用。
紫外可见分光光度计技术与检定
紫外可见分光光度计技术与检定随着分析化学的不断发展，分光光度法已成为一种常用的分析方法。
其中，紫外可见分光光度计是一种基于分子电子能级的吸收原理进行定量分析的仪器，广泛应用于医药、环保、生化分析等领域。
本文将重点介绍紫外可见分光光度计的技术原理、检定方法以及常见问题及解决方法。
紫外可见分光光度计是利用样品中的颜色和吸收性质定量分析的仪器。
在分光光度计中，样品被分别照射在可见光和紫外线的光源下，分别探测它在这两个范围内的光的强度。
简单来说，就是采用一束宽谱的白光或滤过可见光或紫外线，使样品吸收特定波长的光线而得到吸收光的强度值。
下面是紫外可见分光光度计的各部分功能描述：1. 光源紫外可见分光光度计的光源有两种，一种是氢氖灯，适用于360-780nm的波长范围，另一种是钨灯，适用于200-800nm的波长范围。
2. 分光器分光器用于将光线分为两束——参比光和样品光，以确保样品和参比光在相同的条件下测量。
两束光线从分光器出来后，经过不同的道（即光谱），分别接触到检测器。
光谱可以是单色光通道或带通滤光片通道。
3. 检测器检测器用于将光信号转化为电信号，电信号被计算机进行数字化处理并输出到显示器上，形成光谱图。
光谱图可用于定量分析光谱中的化合物。
4. 数据分析软件数据分析软件将检测器输出的光信号转化为数字信号，然后可以通过公式计算样品浓度。
同时可以用于更高级的数据分析，如光谱分解和样品分类。
紫外可见分光光度计的准确性和可靠性对于分析化学实验室的研究和诊断非常关键。
根据ISO 17025：2005标准，检验员必须定期检测光度计的性能以确保其准确可靠。
下面是检定紫外可见分光光度计的步骤：1. 清洁光学系统光学系统包括光谱仪，样品池和检测器。
必须确保光学系统干净且无灰尘。
使用干净的棉棒和无水酒精（IPA）清洁样品池和检测器窗口。
2. 灵敏度检定在可见光波段，研制标准液，并测量一组不同的光强度值。
以强度和浓度的负对数作为横纵坐标根据Lamber-Beer定律绘制标准曲线。
紫外可见分光光度计校准方法说明书
紫外可见分光光度计校准方法说明书一、引言紫外可见分光光度计是现代实验室中常用的分析仪器，被广泛应用于化学、生物、环境等领域的分析与研究工作中。
为了确保光度计所得到的数据的准确性和可靠性，必须进行定期的校准。
本说明书旨在介绍紫外可见分光光度计的校准方法，以确保正确的测量结果。
二、校准前准备工作在进行校准之前，确保以下准备工作已经完成：1. 校准仪器：准备一台标准紫外可见分光光度计，确保其参数已进行校准；2. 试剂准备：准备一系列浓度已知的标准溶液，用于校准的标准曲线绘制；3. 试剂质量：所有试剂需要经过严格的质量控制，确保其浓度准确无误；4. 清洁工作：确保测量室干净整洁，仪器和配件都经过彻底清洁。
三、校准步骤下面将介绍紫外可见分光光度计的校准步骤，包括波长校准和测量系统校准。
1. 波长校准1.1 确保光度计电源已接通，待仪器预热后，打开软件并进入波长校准界面；1.2 光度计应配备一组标准色玻璃滤光片或者氘灯，用于波长校准；1.3 选择一个已知波长的标准色玻璃滤光片或氘灯，输入其波长数值并按下“校准”按钮；1.4 校准结果将显示在屏幕上，如果偏差过大，则需要调整光度计的波长设置。
2. 测量系统校准2.1 使用已标定浓度的标准溶液，进行测量系统的校准；2.2 准备一系列浓度已知的标准溶液，包括低浓度和高浓度；2.3 将标准溶液依次加入量筒中，使用吸光度模式进行测量，并记录各个浓度下的吸光度数值；2.4 绘制得到的吸光度-浓度曲线，可使用线性回归或非线性拟合方法；2.5 检查曲线斜率和截距，确保其符合预期的范围要求；2.6 如果校准曲线的相关系数小于0.99，则需要重新进行校准。
四、校准结果确认校准完成后，需要验证校准结果的准确性。
以下是几种常用的验证方法：1. 校准溶液检测：使用已知浓度的标准溶液进行光度计的测量，并比较测量结果与溶液浓度的差异；2. 重复性测试：在相同条件下，重复测量多个样品，并比较数据的一致性；3. 参比方法对比：将测量数据与其他已知准确的参比方法进行对比，以验证测量结果的准确性。
紫外可见分光光度计波长校准方法
紫外可见分光光度计波长校准方法
紫外可见分光光度计是常用的分析仪器，在进行分布光谱分析等检测方面有着广泛的
应用，它的准确性对检测结果会产生重要影响。
正确的校正对灵敏度分析的准确性起着至
关重要的作用。
因此，校准是紫外-可见分光光度计的必要程序，以合格确保分光光度计
读数的正确性。
紫外可见分光光度计波长校准的主要步骤是：校准溶液的配置、滤光片的选择、光路
的调整、滤光片的校准和波长的校准等。
1、校准溶液的配置：首先，根据实验要求，选择恰当的校准溶液，如金属离子、二
价离子、有机溶剂等，确定校准溶液的浓度，按规定的容量将溶液放入校准槽中。
2、滤光片的选择：接下来，根据紫外可见分光光度计的波长特性，选择合适的过滤片，安装在光路镜头上。
3、光路的调整：然后，紫外可见分光光度计的工作状态和校准曲线应满足实验要求，如输出电压、光照度等，要确保谐振腔的运行平稳，并为校准曲线所需的各种噪声参数提
供良好的设置条件。
4、滤光片的校准：接下来是滤光片的校准，先将分光光度计仪器放置校准光源，调
整好准确性曲线，控制好滤光片的偏移，并使用校准光源重复多次测量，一旦滤光片偏移
量太大，就要重新调整滤光片，确保校准曲线准确。
5、波长的校准：最后，使用专用的全息校准曲线，根据测量结果确定曲线的准确度，再调整分光光度计的波长，以确保测量的准确性。
总之，紫外可见分光光度计的波长校准是重要的保证检测结果准确的必要过程，必须
严格按照上述步骤进行校准，以免影响检测结果的准确性。
紫外可见光分光光度计的性能检查
紫外可见光分光光度计的性能检查
1、比色皿透光率的检查：以空气的透光率为100%，测量比色皿的透光率，应不低于84.0%,
同时在450.0nm和650nm处分别测空比色皿的透光率，透光率差应不小于5.0%。
（注意2个比色皿都要检查）
2、比色皿的配对性：将0.008mol/L的重铬酸钾溶液注入厚度相同的比色皿中。
以其中一个
比色皿溶液作为空白溶液，在440nm波长处测定另外一个比色皿的透光率，相差应小于
0.5%。
3、重复性：以蒸馏水的透光率为100%，用同一重铬酸钾溶液连续测定7次，求出极差（最大值与最小值之差），如小于0.5%，则符合要求。
4、吸光度的准确性：取60mg/L的重铬酸钾溶液，在350nm处测定其吸光度，计算其吸光系数E1%1cn与规定的吸光系数（106.6）比较，相对偏听偏信差应在±1.5%
实验数据与结果分析
4 A= E1cn= （E测-E规）/ E规×100%=。
TU-1901紫外可见分光光度计
2
2、紫外可见分光光度法分类
目视比色法
光电比色法
紫外分光光度法
分光光度法
紫外可见分光光度法
可见分光光度法
比色分析法：利用比较待测溶液本身的颜色或加入试剂后呈现的颜色深浅来 测定溶液中待测物质的浓度的方法
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（四）检测器
检测器是利用光电效应将透过吸收池的光信
号变成可测的电信号。
常用的检测器有光电池、光电管及光电倍增
管。
TU-1810 所用
光电池
光电管
光电倍增管
18
三、分光光度计的检验和维护
（一）分光光度计的检验 为保证测试结果的准确可靠，新制造、
使用中和修理后的分光光度计都应定期进 行检定。紫外-可见分光光度计的检定周期 为1年，在此期间内，仪器经修理或对测量 结果有怀疑时，应及时进行检定。
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（9）定期进行性能指标检测，发现问题即 与厂家或销售部门联系解决。
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(四)TU-1901紫外可见分光光度计的 故障诊断与维修
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现象
原因 A.电源线接触不良
接通电源仪器不动作
B.保险管熔断 C.电路故障
A.打印机故障
不能打印谱图
B.仪器CPU板故障 C.仪器打印机连线松动
ROM (只读内存)检查 波长原点
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TU-1901分光光度计对光源的使用要求：
1、分光光度计安装调试正常后，如无特殊情 况不能随意搬动仪器机体，避免带来的震动引起 光源灯及聚光镜等螺丝松动，导致光斑偏离。
紫外可见分光光度计量值比对结果及分析
紫外可见分光光度计量值比对结果及分析陈田新 王为梁 高 猛 陈 辉 / 西安计量技术研究院摘 要 为了评估紫外可见分光光度计的检测能力，进行了陕西省计量技术机构紫外可见分光光度计的量值比对。
介绍了比对依据、组织实施、比对方案和比对过程，阐述了参考值和参考值测量不确定度的选择，测量数据处理方法以及比对结果的判定原则。
同时报告了比对结果，对比对过程中出现的问题进行了分析，并提出建议。
关键词 紫外可见分光光度计；量值比对0 引言紫外可见分光光度计是环境监测、工业生产、食品加工、临床医学等领域最常用的分析仪器之一，其既可用于定性分析亦可用于定量测量，且具有灵敏度高、分析速度快、物质信息准确及选择性好的特点，使得该仪器在化学分析实验室中得到广泛应用。
依据《中华人民共和国计量法》，该仪器被列入强制检定工作计量器具目录。
为保证陕西省紫外可见分光光度计的量值准确、一致、可靠，验证省内各法定及授权计量技术机构的检定能力，提高人员技术水平，陕西省质量技术监督局下达了2016年度陕西省紫外可见分光光度计量值比对任务。
1 技术背景1.1 比对依据1）JJG 178-2007《紫外、可见、近红外分光光度计》；2）JJF 1117-2010《计量比对》；3）JJF 1117.1-2012《化学量测量比对》；4）JJF 1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》；5）JJF 1033-2008《计量标准考核规范》；6）GB/T 27043-2012《合格评定能力验证的通用要求》。
1.2 比对组织实施西安计量技术研究院作为主导实验室，承担此次比对的具体组织实施工作，负责制定比对方案，编写比对实施细则，比对用样品选型，汇总参比实验室的实验数据及相关资料，分析比对结果并编写比对总结报告。
陕西省共13家相关技术机构参加本次比对，参比实验室对应代码分别为：A、B、E、F、G、H、J、L、S、T、W、X、Y。
按照比对实施细则的要求，本次比对采用固定场所现场实验的方式进行，即每家参比实验室参比人员携带本实验室的检定装置，按约定时间至主导实验室进行比对实验。
紫外可见分光光度计测量结果的不确定度评定
紫外可见分光光度计测量结果的不确定度评定紫外可见分光光度计是一种广泛应用于化学、生物、环境等领域的实验仪器，用于测量溶液或气态样品的吸光度。
在实验中，我们不仅要关注测量结果的准确性，还需要评定测量结果的不确定度，以确保实验数据的可靠性。
本文将就紫外可见分光光度计测量结果的不确定度评定进行详细介绍。
一、紫外可见分光光度计测量原理紫外可见分光光度计是利用样品对紫外或可见光的吸收来测定样品组分浓度的仪器。
其工作原理是，通过将样品置于光束路径中，测得透射光强度和入射光强度的比值，即可计算出样品的吸光度。
吸光度与样品的浓度成正比，因此可以借此测定样品的浓度。
在实验中，通常会通过标准曲线的方法，将吸光度与浓度建立数学关系，从而计算出样品的浓度。
二、不确定度的来源在紫外可见分光光度计测量过程中，不确定度主要来自以下几个方面：1. 测量仪器的误差：包括光源、检测器、滤光片等光学元件的精细度和稳定性，以及仪器的刻度误差等；2. 样品制备的误差：包括溶液稀释的误差、反应配比的误差等；3. 环境因素的影响：包括温度、湿度等环境条件对光学元件和样品的影响；4. 实验操作误差：包括溶液操作、光学路径对齐等的误差。
三、不确定度评定的方法1. 确定测量结果的类型：首先需要确定测量结果的类型，是单次测量还是多次测量的平均值。
如果是单次测量，需要评定其随机误差；如果是多次测量的平均值，需要评定其系统误差和随机误差。
2. 确定不确定度的来源：根据测量结果的类型，确定不确定度的来源，包括仪器误差、样品制备误差、环境因素的影响以及实验操作误差等。
3. 评定随机误差：通过进行多次测量，利用统计方法计算出测量数据的标准偏差，作为随机误差的评定值。
随机误差的评定可以采用标准偏差的方法或者重复测量的方法。
4. 评定系统误差：系统误差主要来自于仪器误差和样品制备误差，可以通过校准仪器、制备标准曲线等方法来评定。
校准仪器可以通过使用标准溶液进行检定，制备标准曲线可以通过多次测量标准溶液得到。
紫外可见分光光度计操作规程 (2)
紫外可见分光光度计操作规程1 编制目的为了规范UV-1800PC型紫外可见分光光度计的操作规程，正确使用仪器，保证检测工作顺利进行，确保操作人员人身安全和设备安全，特编制本操作规程。
2 适用范围本操作规程适用于本公司UV-1800PC型紫外可见分光光度计。
3 引用文件《UV-1800PC紫外可见分光光度计说明书》使用说明书。
4 操作步骤4.1 技术要求4.1.1型号：UV-1800PC型紫外可见分光光度计4.1.2主要技术参数（1）波长范围：190-1100nm（2）光谱带宽：2nm（3）波长准确度：±0.5nm（4）波长重复性：≤0.2nm（5）光度显示范围：0～200%T，-0.3～3A（6）稳定性：±0.001A/h(500nm处)4.2 操作要求4.2.1环境要求：应避开高温高湿环境，避免受到外界磁场干扰。
4.2.2职责要求（1）检验人员按本规程操作使用仪器，并对仪器进行日常卫生清洁。
（2）设备维护人员负责按照本规程进行仪器的例行维护保养工作。
（3）设备管理员负责仪器的综合管理。
4.3 工作原理分光光度法分析的原理是利用物质对不同波长光的选择吸收现象来进行物质的定性和定量分析，通过对吸收光谱的分析，判断物质的结构及化学组成。
本仪器是根据相对测量原理工作的，即选定某一溶剂(蒸馏水、空气或试样)作为参比溶液，并设定它的透射比(即透过率T)为100%，而被测试样的透射比是相对于该参比溶液而得到的，透射比(透过率T)的变化和被测物质的浓度有一定函数关系，在一定的范围内，它符合朗伯比尔定律。
4.4 操作方法4.4.1实验准备4.4.1.1开机自检：确认仪器光路中无阻挡物，关上样品室盖，打开仪器电源开始自检。
4.4.1.2预热：仪器自检完成后进入预热状态，若要精确测量，预热时间需在30min 以上。
4.4.1.3确认比色皿：在将样品移入比色皿前确认比色皿是干净、无残留物的，若测试样品波长小于400nm,请使用石英比色皿。
紫外可见分光光度计原理及操作
紫外可见分光光度法的原理及应用原理：紫外可见分光光度法基于物质对紫外-可见光的吸收特性进行测定。
当光线通过样品时，样品中的分子会吸收特定波长的光，从而产生吸收峰。
通过测量样品吸收的光强，可以得到样品在不同波长下的吸光度。
常用的光谱仪器是分光光度计，它能够实现对不同波长光的选择和测量。
应用：1.定量分析：紫外可见分光光度法可以用于定量分析各种物质。
根据比尔定律，吸光度与物质浓度之间存在一定的线性关系，因此可以根据吸光度测量值推算出物质的浓度。
这在医药、环境监测、食品安全等领域中具有重要意义。
2.药物分析：紫外可见分光光度法广泛应用于药物分析中。
例如，可以利用紫外光谱测定药物的浓度、纯度和含量，评价药物的质量。
同时，通过分析药物在不同波长下的吸收特性，可以了解药物的结构和反应机理，为新药的研发提供重要的信息。
3.生化分析：生物体内的很多生物分子都具有紫外可见吸收特性，这使得紫外可见分光光度法成为生化分析中常用的工具。
例如，可以通过测定蛋白质和核酸在特定波长下的吸光度来研究其构象和浓度。
此外，也可以用于测定血液中的代谢产物、激素和维生素等的浓度。
4.环境监测：在环境监测中，紫外可见分光光度法可用于分析水质、空气中的有害物质和污染物。
例如，可以利用其测定水中化学需氧量（COD）、氨氮（NH3-N）和磷酸盐等的浓度。
这对于环境保护和水质安全具有重要意义。
5.食品检测：紫外可见分光光度法在食品行业中也具有广泛应用。
可以通过测定食品中的营养成分和添加剂的含量来评价食品质量和安全性。
例如，可以测定维生素、氨基酸、酚类和色素等在食品中的含量。
总之，紫外可见分光光度法具有简单、快速、高灵敏度和高选择性等优点，且适用范围广泛。
它在化学、制药、环保、医疗和食品等领域中都有不可替代的地位，对于研究物质性质和反应机理，以及保障人类健康和环境安全都起着重要作用。
实验指导书(紫外可见分光光度计)
“功能材料”课教学实验指导书材料光学性能分析一、实验目的本实验目的是在本科生的专业核心课《功能材料》中, 开设使学生掌握材料光学特性, 特别是在紫外光区和可见光区的光学特性的检测方法, 同时具有分析和运用材料紫外光区和可见光区光谱特性的能力。
二、实验设备及实验原理1、实验设备SPECORD200紫外可见分光光度计（含积分球附件、计算机和打印机）（照片、扫描）2、实验原理当光作用在物质上时, 一部分被表面反射, 一部份被物质吸收。
改变入射光的波长时, 不同物质对每种波长的光都有对对应的吸收程度（A）或透过程度（T）, 可以作出这种物质在实验波长范围内的吸收光谱曲线或透过光谱曲线。
用紫外-可见分光光度计可以作出材料在紫外光区和可见光区的对紫外光和可见光的吸收光谱曲线或透过光谱曲线。
利用的是朗伯-比尔定律: A=abc（A为吸光度, a 为吸光系数, b是光路长度, c为浓度）通过吸收光谱曲线或透过光谱曲线可以判断材料在紫外光区和可见光区的光学特性, 为材料的应用作指导。
例如具有高的紫外光吸收性能, 则可作为保温吸热等材料；如具有高的紫外光反射特性, 则可作为好的抗老化材料。
三、实验方法及操作步骤1、实验方法在SPECORD200紫外可见分光光度计上进行粉体材料的紫外可见分光性能检测, 选用普通钛白、纳米钛白、纳米二氧化硅为实验对象, 分别用悬浮液和积分球法进行测量。
2.操作步骤一）开机1 插上墙上电源插头2 打开分光光度计后部开关, 此时光度计前面的左灯亮二）计算机界面软件设置1 启动计算机, 进入windows操作系统2 点击桌面上的winaspect图标, 启动软件系统3 执行measurement里面的initialize device进行初始化设备, 此时氙灯亮4 等待20分钟进行光源和设备的预热5 执行measurement里面的set parameters进行参数的设定A: title: 参数文件名B: operator: 操作者C: setting tabCycle mode: none（单次测量）Display：T（透射）, A（吸收）, R（反射）, 依据自己的要求确定Correction: reference（以参比为基准）D: device tabLamp change of：320, 选择D2E的时候, 即选择仅仅使用氘灯（短波, 波长范围是180-320nm）；选择halogen的时候, 即选择卤素灯（长波, 波长范围是320-1100nm）；选择320的时候, 到320nm时自动从氙灯切换到卤素灯Com-port: coml（光度计和计算机数据线连线的串口）Online display on wavelength: 500nm, 表示在主界面中显示哪一个波长的吸光度或者反射率Split：2nm或者5nm, 有积分球的时候选择5nm, 此数值越小, 单色性越好, 但是光的强度也随之下降E: model tab（scan mode）起止波长为190-1100nm波长间隔根据自己的需要进行选择扫描速度根据自己的选择进行选择, 一般选择50nm/s积分时间=波长间隔除于扫描速度也可以选择wavelength mode, 即对几个（小于10个）波长进行定点扫描F: accessories tab当从比色皿测定换为积分球测定的时候, 先从accessory下拉框中选择change position, 点ok, 再执行measurement中的set parameters, 选择accessory下拉框中的integrating sphere, 点ok当从积分球测定换为比色皿测定, 则先从accessory下拉框总选择change position, 点ok, 再执行measurement中的set parameters, 选择accessory 下拉框中的none, 点ok6 执行measurement中的standard correction进行标准校正此时光度计上面两个mount上必须没有任何样品。
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紫外可见分光光度计参数解读——————————————光学系统————————————————
一）检测器部分光学系统：
通常是指光学系统的结构形式，目前，国际国内光度计行业常采用的机构为自准式和CT式两种结构，通常有单光束和双光束两种；
二）光源系统：
1. 仪器波长范围指光度计所能进行测试的波长最大值和最小值之差；
2. 仪器波长准确度仪器显示波长与真实波长的接近程度，即仪器设定波长与实际波长的差值。
每台光度计都要在很多个波长点检查波长准确度；
3. 仪器波长重复性波长重复性是仪器返回原波长的能力。
它体现了波长驱动机械和整个仪器的稳定性；
4. 仪器光谱带宽(灵敏度，分辨力)指一个尖峰光谱带通过单色器出狭缝时，在检测器上所检测到的能量半宽度，用波长单位nm表示，从另一个角度理解这一概念会更通俗易懂：首先，单色器出狭缝不仅仅代表着狭缝的物理尺寸或几何尺寸，他还代表着光学意义，这就是光谱带宽，我们知道，来自单色器的光线不全是单一波长的光，而是一个狭窄的按波长大小顺序排列的光谱带，这一光谱带包含波长的多少，用光谱带宽来表示。
光谱带宽直接反应的是从单色器出来的光的单色性的好坏程度。
该指标与仪器的分辨力和灵敏度很相似，但又有所不同，他们从不同的侧面反应光度计性能的好坏。
分辨力是指仪器分辨两相邻波长大小的能力，假如，在相邻两波长处给仪器的输入端两个脉冲
输入，在仪器的检测器上检测到的模拟信号，若信号的最小值低于最大值的80%，根据罗雷(Rayleigh)判据，就认为这两个波长是可分辨的。
实际测量时通常是用苯蒸气来测量和间峰谷)。
灵敏度是指在做低浓度测量时，当浓度改变一个单位时在检测器上所引起信号的变化量，它受校正曲线(标准曲线浓度为横轴，吸光度为纵轴)和仪器本身精密度的限制。
两种测量方法精密度相同时，校正曲线斜率越大越灵敏，而斜率相等时，精密度越高灵敏度越好。
需要指出的是，为了得到准确的测试结果，仪器的光谱带宽(Spectral Bandwith简称SBW)和分析样品的自然带宽(Natural Bandwidth 简称NBW)之比应小于, 这样可以得到% 以上的测量准确度。
5. 仪器杂散光杂散光是非选择波长的光照射到检测器上产生的信号。
它是光度计分析误差的一个重要来源，杂散光大会限制高浓度溶液分析的准确性。
杂散光用T%
表示；
6. 仪器光度范围指光度计在满足各项技术指标下的测试范围，用A或T表示；仪器光学系统相关参数：
1光学系统：双光束测量
2.波长范围：150～1800nm
3.波长准确度：±
4.波长重复性：≤
5.光谱带宽：1nm
6.杂散光：≤%T
7.仪器光度准确度：±
8.仪器光度重复性：≤
9.光度噪声: ±h(500nm,P-P）
问题：
1）紫外的光学系统有哪些各自的特点是什么各自的优势
2）紫外最大波长和最小波长分别是多少波长范围越大越好还是越小越好
3）波长准确度最佳值是多少怎么计算的4）波长的重复性如何计算，在采购需要注意什么问题
5）光谱宽带涉及什么内容
6）光度计的光束是单光束稳定还是多光束稳定适用性又是哪一种比较适用
7）波长准确度怎么计算通常仪器厂家是怎么确定它的准确度的
8）波长的重复性怎么计算的实际怎么操作
9）对于波长来说，是波长范围越广的准确度要高一些还是波长范围越窄的准确
度要高一些或者是他们之间没有任何关系
10）仪器光谱带宽对仪器分析测试误差有什么影响
11）光谱带宽怎么去测试
12）测试仪器杂散光的方法和途径有那些13）仪器光度范围是越打越好还是越小越好
三）计算部分
10.基线平直度：±(200-1000nm)
11.基线漂移：≤h(500nm,0Abs
1. 仪器光度准确度(Photometric accuracy)指多次测定的平均值与真实值符合的程度；
2. 仪器光度重复性(Photometric precision)指在相同的条件下进行多次平行测定，各平行测定结果之间的符合程度；
3.仪器噪声指仪器检测到的非有用信号的总和，它是相对信号而言的。
通常，分光光度计中的噪声有两个来源，一是来自于光源，二是来自于仪器内部固有的电子噪声，比如：电源，放大器，AD转换器等。
要减少噪声，提高信噪比，必须有一个良好的电气设计。
噪声影响低浓度测试下的测量重复性，也影响测试准确度。
噪声可通过多次测量后取平均值部分消除；
4. 仪器飘移指仪器随时间推移偏离起始值的程度。
它取决于光源的稳定性，电气器件的稳定性等。
对单光束仪器而言，开机预热时间长短对漂移有很大影响。
5. 仪器基线平直度指全波长范围内仪器噪声的分布。
问题：
1）其中的多次测量，通常要测量多少次2）影响重复性的因素有哪些
3）紫外一般需要开机预热多少时间
4）仪器噪声测量通常怎么计算
5）仪器基线直度怎么计算
重复性：指在相同的条件下进行6次平行测定，各平行测定结果之间的RSD小于等于3%；影响重复性的因素很多，（个人认为）如待测样品的取样量、温度、湿度、仪器的稳定性等；进行紫外测定时，一般需开机预热30min
紫外最大波长和最小波长分别是多少波长范围越大越好还是越小越好
最大波长400nm，最小波长200nm，其实波长范围大小并不是衡量一个仪器好坏的标准，范围大则使用面广，但是测试不精准，范围小虽然使用面小，但是测试精准
§190~380nm紫外区
§380~780nm可见光区
§780~1100nm近红外区。