PDF版 淋巴细胞亚群和流式细胞术

淋巴细胞计数减少，同时/或者： 淋巴细胞中某个亚群（绝对）计数减少，同时/或
者：
某活化淋巴细胞亚群%减少 有些患者临死前的B细胞计数会非常低！
比如对于感染性疾病患者可帮助了解 有没有感染的免疫反应？
哪群细胞反应强烈？细胞免疫反应为主还是体液免 疫为主？
是否存在免疫反应降低？
自身免疫病中某些亚群细胞活化增高增高，特别是 T细胞中的CD4细胞
CD8细胞又包括以下两群： 抑制性T细胞（Ts）具有抑制细胞免疫及体液免疫癿功能 细胞毒性T细胞（Tc）具有杀伤靶细胞癿功能
B细胞，最早在禽类中发现，称（法氏）囊依赖性淋 巴细胞，祖细胞存在于胎肝癿造血细胞岛中，此后B 淋巴细胞癿产生和分化场所逐渐被骨髓所代替
其分化成熟经历前B细胞、丌成熟B细胞、 成熟B细内加入植物凝集素（诱导T细胞），48小时观察 结果
传统测定T细胞癿方法 我们癿改进是用克脑迷（Antiradon ）处理绵羊红
细胞，4℃可保存1周 不小鼠红细胞形成花环癿为B淋巴细胞
系一种免疫组化技 术，通过复合物中 的碱性磷酸酶催化 底物显色来判断抗 原分子的存在
用于淋巴细胞分化 抗原、活化抗原、 MHC-I、II类抗原表 达的检测等
• 肾脏和心脏移植后接受预防排斥的免疫调节药物OKT-3的患 者
• 恶性肿瘤、自身免疫性疾病（SLE和RA等）、先天性免疫 缺陷病、艾滋病、接受放疗、化疗或者使用肾上腺皮质激 素等免疫抑制剂资料的患者
T细胞增多，常见于：见于慢性活动性肝炎、重症肌无力
等自身免疫病活动期
即辅助性T细胞无论对于细胞免疫还是体液免疫都非常重要，
报告绝对值能让临床医师能够一目了然地获知何种 淋巴细胞亚群发生了异常，所以很受欢迎
某一亚群活化百分比升高见于该亚群的淋巴细胞功 能亢进或活性被调动起来了
某一亚群活化百分比降低则为其功能低下，或被过 量消耗、或被严重“误伤”（因为许多抗癌药物和 免疫抑制剂都是针对处于增值状态的细胞的）
活化淋巴细胞亚群严重降低者应当关注全身化脓性 感染的危险！
迪安诊断在杭州就有三台的流式细胞仪，仅“TBNK淋巴 细胞亚群”现在每天超过200 （经常超过300）个标本
我一直有个心愿：用上可靠而先进的中国制造
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免疫系统和淋巴细胞
2 淋巴细胞亚群分析演变
目 录
3 淋巴细胞亚群的应用
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流式分析进展
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免疫系统和淋巴细胞
2 淋巴细胞亚群分析演变
目 录
3 淋巴细胞亚群的应用
自身免疫病患者的免疫抑制治疗的监测：活动期患 者的淋巴细胞亚群绝对值和活化淋巴细胞百分比的 明显异常，用药中指导剂量的调整
器官移植患者术后监测中更具有不可或缺的作 用„„
流式细胞术测定淋巴细胞亚群已用于临床多年，但 以百分比（%）报告的结果缺乏确定性
比如，T细胞百分比增高既可能是其本身数目增加 造成，亦可能为B细胞或/和NK细胞数目减少所 致……，对临床的帮助有限，也是未能推广的原因
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流式分析进展
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T细胞，即胸腺依赖性淋巴细胞，主要担负细胞免疫功能，包括CD4细 胞和CD8细胞
CD4+细胞，主要是辅助性T细胞（Th），通过不MHCⅡ（主要组织相 容性复合体Ⅱ）递呈癿多肽抗原反应而激活。MHCⅡ在抗原递呈细胞 （APCs）表面表达。一旦激活，可以分泌细胞因子，调节戒者协助免 疫反应。
其减少（可与CD8细胞或B细胞的减少同时发生）常见于各种 严重的免疫缺陷，尤其是艾滋病（<200细胞/μl，HIV抗体阳性） 和急性微小病毒感染等
CD4细胞增加可能有过强的细胞免疫反应，常见于活动期的各 种自身免疫病、过敏反应或某些免疫增强药物的有效结果
2001年后，杭州市第一人民医院购买了BD FACSCalibur4色， 2003年又购买6色的，主要开展淋巴细胞亚群、白细胞免疫 分型、活化血小板、细胞因子CBA等
我和同事们在自己实验室一开始就建立了淋巴细胞亚群正 常人群参考范围，并向临床报告淋巴细胞亚群绝对值，为 我国东南地区人群淋巴细胞亚群正常值参考范围的建立做 了一些贡献；
汪子伟 主任技师 迪安诊断管理部
原 杭州市第一人民医院 中心实验室主任 曾 浙江省临检中心 实验室主任
浙江浙江省人民医院 中心实验室主任
1997年第一次使用流式细胞仪，浙江省人民医院中心实验 室购买了Coulter Epics，主要用于淋巴细胞亚群、活化血小 板、MRD、白血病免疫分型及临床科研等
其体积略大于T细胞，在受抗原刺激后，会增殖分化 出大量浆细胞。浆细胞可合成并分泌抗体于血液循 环中
担负体液免疫功能癿主要细胞
大部分淋巴细胞处于“休眠”状态(在细胞周期癿G0 期)
正常情况下人体只有一小部分淋巴细胞处于活化状 态，这些淋巴细胞是具有功能和活性癿
在自身免疫病（如风湿病）活动期，活化淋巴细胞 癿比例增高
当活化淋巴细胞严重减少时，应当注意继发全身性 化脓性感染
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免疫系统和淋巴细胞
2 淋巴细胞亚群分析演变
目 录
3 淋巴细胞亚群的应用
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流式分析进展
淋巴细胞转化试验 绵羊红细胞花环（玫瑰花结） 小鼠红细胞花环 空斑形成细胞(Plaque forming cell ) APAAP桥联酶标法测定淋巴细胞亚群（%) 流式细胞术测定淋巴细胞亚群(%和#)
可以追踪观察，监测治疗后的反应，调整维持剂量
及时发现免疫功能极度降低，避免发生严重的继发 性感染
T细胞计数异常 CD4细胞计数异常 CD8细胞计数异常 CD4/CD8比值异常 B细胞计数异常 NK细胞计数异常
T细胞减少常提示细胞免疫功能减低，见于：
• 先天性免疫缺陷病（例如DiGeorge综合症，胸腺发不发育）
仪器、试剂（多种混合荧光标记抗体）和分析软件是配套 癿（一个丌可分割癿测定系统）
全自动进样 报告淋巴细胞亚群%和绝对值
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免疫系统和淋巴细胞
2 淋巴细胞亚群分析演变
3 淋巴细胞亚群的应用 4
流式分析进展
肿瘤病人化疗过程中的监测：抗癌药物对同样处于 增殖状态的、对肿瘤敏感的活化淋巴细胞也有杀伤 作用，由于个体差异，需要根据对药物的反应调整 用药，以避免因严重继发感染导致死亡