生物药物分析与检验
生物药物检验相关岗位
生物药物检验相关岗位
生物药物检验相关的岗位包括：
1. 生物制剂检查员：负责对生物制剂进行外观、理化性质、微生物污染等方面的检查和测试，以确保产品质量符合相关标准。
2. 生物活性测定员：负责对生物制剂进行生物活性的测定和评价，如细胞增殖、细胞凋亡、细胞迁移等实验。
3. 蛋白质质量控制员：负责对生物制剂中的蛋白质进行质量控制，包括蛋白质含量测定、纯度分析、异质性分析等。
4. 生物药物分析员：负责对生物制剂进行药物分析，如药物含量、残留物、杂质等方面的分析和检测。
5. 抗原抗体检验员：负责对生物制剂中的抗原和抗体进行检验和测试，以评价产品的免疫原性和免疫反应。
6. 生物药物质量控制员：负责制定生物药物的质量控制标准和操作规范，监督和执行相关检验和测试工作，确保产品符合质量要求。
7. 生物药物研发实验员：负责生物药物研发相关实验的设计、实施和数据分析，研究产品的药效、安全性和稳定性。
8. GMP认证专员：负责对生物药物的生产过程和质量控制系
统进行GMP认证和审核，确保生产过程和产品符合GMP要
求。
以上仅为常见的生物药物检验相关岗位，具体岗位要求和职责可因不同的企业和岗位而有所差异。
生物药物分析与检验 高效液相色谱
背景
色谱法也称色层法，是1906年俄国植物学家Michael Tswett 发现并命名的。他将植物叶子的色素通过装填有吸附剂的柱 子，各种色素以不同的速率流动后形成不同的色带而被分开， 由此得名为“色谱法”（Chromatography) 。 后来无色物质也可利用吸附柱色谱分离。 英国生物学家Martin和Synge。他们首先提出了色谱塔板理 论，以及其远见卓识的预言。 1944年出现纸色谱以后，色谱法不断发展，相继出现薄层色 谱、亲和色谱、凝胶色谱、气相色谱、高压液相色谱（HPLC） 等。
色谱法的分类
按流动相状态的不同，可分为 气相色谱法 (GC) 液相色谱法 (LC) 超临界流体色谱 (SFC)
7
什么是气相色谱法？
以气体为流动相的色谱法 Gas Chromatography，简称GC 适合分离分析易汽化（在- 190℃-500℃范围内有 0.2-10mmHg的蒸气压的）稳定、不易分解、不易 反应的样品，特别适合用于同系物、同分异构体的 分离。
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检测原理： 朗伯－比尔 (Lambert-Beer) 定律，响应信号（吸光 度）与浓度成正比A=lg(1/T)=Kbc 特点： 灵敏度较高（10-6-10-9 g/ml），噪音低，线性范围宽， 稳定性好，适于梯度洗脱，不破坏样品，应用广（如 蛋白质、核酸、氨基酸、核苷酸、多肽、激素等均可 使用 ） 局限： 只能检测有紫外吸收的物质，流动相的截止波长应小 于检测波长
2．流动相
根据所使用的流动相和固定相的极性程 度，将其分为正相分配色谱和反相分配色谱。
正相分配色谱：流动相的极性小于固定相的极性， 它适用于极性化合物的分离。其 流出顺序是极性小的先流出，极 性大的后流出。
《生物药物分析与检验》课程教学大纲
《生物药物分析与检验》课程教学大纲一、课程性质本课程是生物工程专业本科学生的专业课，也是一门专业拓展课，在教学计划中占有重要的地位，本课程主要学习药物结构与药效的关系，药物的理化性质、鉴别方法、合成方法等，为后续课程如药剂学、药用分析化学等的学习打下基础，是全面掌握药学领域各学科知识的重要桥梁。
本课程需先修无机化学、有机化学、生物化学等课程。
二、教学目的通过生物药物分析与检验课程的教学，使学生掌握生物药物特有的一些分析思路和分析手段，能够设计生物药物的标准规格，培养学生独立思考工作的能力。
同时培养学生强烈的药物质量观念以及生物药物分析的基本知识和技能。
学习本门课程后，要求学生不仅能够熟练掌握普通生物药物分析的方法、而且能够独立设计药物质量标准、建立质量分析方法及方法学评价。
三、教材教参教材：《生物药物分析》，何华，化学工业出版社（第一版），2001年。
教参：《生物药物分析》，曾经泽，北京医科大学中国协和医科大学联合出版社，2000年；《生物药物分析》，白秀峰，中国医药科技出版社，1999年。
四、教学方式本课程以课堂讲授为主、自学和讨论为辅的方式组织教学，内容采用多媒体辅助手段。
五、教学内容及时数根据生物工程专业人才培养方案，本课程共1学分，总的教学时数为18学时，其中讲授18学时。
具体如下：1. 生物药物分析学概述 (1.5学时，其中讲授1.5学时)基本内容：药物分析的性质、任务、药品质量标准的内容、生物药品的分类和科学管理、生物药品分析检验的基本程序和检验内容、药物代谢与药物动力学中的分析方法。
重点：生物药物分析的性质、概念、应用范围、工作方法及有关内容。
难点：药物代谢与药物动力学中的分析方法。
新知识点：药品质量标准的内容。
2. 生物药物分析信息的获取（自学）3. 药物分析方法的选择、建立和认证（1.5学时，其中讲授1.5学时）基本内容：分析质量控制、标准、标准物质等概念、质量控制图、实验室内外部的质量控制、准确度、精密度、线性范围等参数的概念、考察方法。
生物药的分析工作总结
生物药的分析工作总结
生物药是一类利用生物技术制备的药物，包括蛋白质药物、抗体药物、基因治
疗药物等，具有高效、靶向性强、副作用低等优点，是当前药物研发领域的热点之一。
生物药的分析工作是确保药物质量和安全性的重要环节，下面我们就来总结一下生物药的分析工作。
首先，生物药的分析工作需要对药物的成分进行分析。
生物药通常是由蛋白质、多肽或核酸等大分子构成，因此需要利用高效液相色谱、质谱等技术对药物的成分进行分析和鉴定，确保药物的纯度和成分的一致性。
其次，生物药的分析工作需要对药物的活性进行评价。
生物药的活性是其发挥
药效的关键，需要通过细胞实验、动物实验等方法对药物的活性进行评价，确保药物的有效性和稳定性。
此外，生物药的分析工作还需要对药物的微生物污染进行监测。
生物药的生产
过程中容易受到微生物的污染，因此需要对药物的微生物污染进行监测和控制，确保药物的纯度和安全性。
最后，生物药的分析工作还需要对药物的稳定性进行评估。
生物药在生产、储
存和使用过程中容易受到温度、光照等因素的影响，因此需要对药物的稳定性进行评估，确保药物的质量和有效期。
总之，生物药的分析工作是确保药物质量和安全性的重要环节，需要对药物的
成分、活性、微生物污染和稳定性等方面进行全面的分析和评估，以保障患者的用药安全和疗效。
希望未来能有更多的技术和方法应用于生物药的分析工作，推动生物药领域的发展和进步。
生物药物分析与检验基因工程药物检验
2、有限代次的生产
提供培养生产浓度与产量恒定性的数据； 依据宿主细胞-载体系统稳定性，确定最高 允许传种代数和细胞倍增数，并应提供最适 培养条件的详细资料。
3、连续培养生产
应提供经长期培养后所表达基因的分子 完整性资料，以及宿主细胞的表型和基因 型特征。
4、纯化
对于收获、分离和纯化的方法应详细记 述，应特别注意污染病毒、核酸以及有害抗 原性物质的去除。
基因工程产物的杂质包括蛋白质和非蛋 白质两类。
蛋白类杂质： 残留宿主细胞蛋白 采用 免疫分析的方法
非蛋白质类杂质：
①病毒污染检查 ②无菌试验 ③热原质试验 ④残余细胞DNA测定。 ⑤抗原性物质检查 ⑥其他外源性物质
常用检测方法：
杂质和污染物
内毒素 宿主细胞蛋白 其它蛋白杂质 残余DNA 蛋白变异
3.表达
应详细叙述在生产过程中，启动和控制克 隆基因在宿主细胞中的表达所采用的方法及 表达水平。
(二)生产的控制
在工程菌的贮存中，要求种子克隆纯而稳定；
在培养过程中，要求工程菌所含的质粒稳定， 始终无突变；
在重复生产发酵中，工程菌表达稳定；
始终能排除外源微生物污染。
1、原始细胞库
应详细记述种子材料的来源、方式、保存 及预计使用寿命；应提供在保存和复苏条件 下宿主载体表达系统的稳定性证据；采用新 的种子批时，应重新作全面检定。
4.稳定性考察
药品的稳定性是评价药品有效性和安 全性的重要指标之一，也是确定药品贮 藏条件和使用期限的主要依据。
5、 产品一致性的保证
只有对从原料、生产到产品的每一步 骤都进行严格的控制和质量检定，才能 确保各批最终产品都是安全有效、含量 和杂质限度一致并符合标准。
第三节 基因工程药物的检验
生物药物分析与检测学习小结(免疫放射分析RIA)
《生物药物分析与检验》学习小结指导老师：…………生物工程09-2班学号：姓名：生物药物分析与检测学习小结—关于放射免疫分析法（RIA）随着在生物制药领域发挥重要作用的生物技术的研究与应用日趋成熟，生物制药也迎来了极好的发展机遇，在医药产业中将发挥越来越重要的作用。
作为生物工程专业的学生，学习这门课程不仅有利于我们进一步加深对生物工程专业课的学习，也有利于我们独立分析解决实际问题的能力的提升。
学习这门课程，我对免疫分析法尤为感兴趣。
免疫分析法是以特异性抗原-抗体反映为基础的分析方法。
在药物分析中，免疫分析法主要应用于在以下几方面：(1)在实验药物动力学和临床药物学中测定生物利用度和药物代谢动力学参数等生物药剂学中的重要数据，以便了解药物在体内的吸收、分解、代谢和排泄情况；(2)在药物的临床检测中，对治疗指数小、超过安全剂量易发生严重不良反应或最佳治疗浓度和毒性反应浓度有交叉的药物血液浓度进行监测；(3)在药物生产中从发酵液或细胞培养液中快速测定有效组分的含量，以实现对生产过程的在线监测；(4)对药品中是否存在特定的微量有害杂质进行评价。
其中放射免疫分析法是最早建立的经典免疫分析方法。
尽管由于其需要严格的废物处理手续和特殊的实验室，曾很早就被认为会从市场上消失，但目前仍被广泛应用，且在相当长时间内仍将保留。
它的基本原理是使放射性标记抗原和未标记抗原（待测物）与不足量的特异性抗体竞争性地结合，反应后分离并测量放射性而求得未标记抗原的量。
由于放射性同位素核衰变是，所放射出的各种射线都很容易用仪器探测出来，并且灵敏度很高，因此在放射免疫测定中，主要就用这些同位素作示踪原子。
目前，放射免疫分析中常用的标记物采用最多的是125I标记物和氚标记物，最成熟且采用最多的是氯胺T法，主要则是用于对蛋白质、多肽激素和含碘氨基酸的标记。
分离结合或游离的放射性物质，进而进行测定时放射免疫分析的关键，目前采用的分离方法有以下几种：固相法、微孔滤膜法、抗抗体法、吸附法、柱层析法和电泳法。
107649-生物药物分析与检验-第六章 生物检定法
• 肝素钠作为天然抗凝血物质受到世界各 国的重视. 也是我国主要的出口药物之一。
• 人们发现肝素钠不但有抗凝、抗血栓形 成和调节血脂的作用, 还具有抗炎、抗过
敏、抗病毒、抗癌等功能。
• 肝素钠效价测定采用羊血浆法 . 即将肝素 钠标准品和供试品加入柠檬酸羊血浆中, 钙化一定时间后观察两者的凝固程度, 如
• 青霉素终于在1943年问世，自此，青霉 素被广泛应用，创造了一个绿色的医学 奇迹，他击败了战时最可怕的杀手—— 伤口感染。
• 1944年，青霉素因治好了英国首相丘吉 尔的肺炎而闻名于世。
• 青霉素对人类最显著的贡献是在第二次 世界大战规模最大的登陆战——诺曼底 战役中，它救治了无数迎着德军炮火登 陆而负伤的盟军士兵。
法
三剂量法（3·3法）
日常使用多采用二剂量法，对于有争议结果， 必须使用三剂量法测定的结果仲裁。
抗生素的效价和单位
抗生素的含量用效价和单位表示。该词有 时不加区别统称为效价单位。
效价（ｐotency）：指检品的实际单位数 与其标示量的比值。常表示为效价的百分数。 效价是从比较检品与标准品的生物活性而得。
① 高剂量抗生素溶液所形成的抑菌圈直径 在20～24 mm，个别抗生素的抑菌圈可在 18～24 mm；
② 高、低剂量所形成的抑菌圈之差最好大 于2 mm，有些抗生素的差数可较小；
③ 高、低剂量之比一般用2:1，当高、低 剂量所致的抑菌圈差别较小时，可用高低 剂量之比为4:1的比率。
• 抗生素产生很多不良反应，这是大家
屡见不鲜的。比如小孩使用了庆大霉素、 丁胺卡那霉素出现了耳聋，以后会成为 聋哑儿童，成人使用可能会有肾脏的问 题。还有红霉素里面的四环素，大量使 用会造成肝脏的损害，小孩使用会影响 牙齿和骨骼的发育问题。
2020年秋冬智慧树知道网课《生物药物分析与检验(山东联盟)》课后章节测试答案
第一章测试1【判断题】(10分)生物药物分析是药物分析的一个分支，是运用运用化学、物理化学或生物化学的方法和技术研究生物药物及其制剂质量控制方法的学科。
A.错B.对2【判断题】(10分)药典是国家对药物质量标准及其检验方法所做的技术规定，是药物生产、监控、供应、使用及管理部门共同遵循的法令。
A.错B.对3【判断题】(10分)2015版《中国药典》分为三部，首次将通则、药用辅料单独作为《中国药典》第三部。
A.错B.对4【单选题】(10分)为了保证药品临床试验资料的科学性、可靠性和重现性，涉及新药临床研究的所有人员都必须执行哪一项规定？A.GSPB.GCPC.GLPD.GMP5【判断题】(10分)天然生化药物指的是从生物体中获得的天然存在的生化活性物质。
A.错B.对6【单选题】(10分)抗生素属于哪一类药物？A.核酸类药物B.微生物药物C.多糖类药物D.天然生化药物7【判断题】(10分)生物药物检验工作的基本程序一般为取样、鉴别、检查、含量测定，最后完成检验报告。
A.错B.对8【判断题】(10分)分析任何药品，首先是取样，要从大量的样品中取出少量样品进行分析，可以由检验人员随意抽取。
A.对B.错9【判断题】(10分)药品检验过程及结果必须要有完整的原始记录，实验数据也必须真实，不得涂改。
A.对B.错10【判断题】(10分)生物药物对酸、碱、重金属、热等理化因素的变化较为敏感，各种理化因素的变化容易对其生物活性产生影响。
A.错B.对第二章测试1【判断题】(10分)酶分析法包括酶法分析和酶活力测定两种类型。
A.对B.错2【判断题】(10分)在通常的酶活力测定时总要先制备酶反应进程曲线和酶浓度曲线两条曲线。
A.错B.对3【判断题】(10分)在实际酶活测定中一般以测定底物的减少量为准。
A.对B.错4【判断题】(10分)酶活力测定过程中，检验酶反应和测定系统是否正确的标准是测得的反应速度必须和反应时间有线性的比例关系。
生物体内药物分析方法的选择及应用(精选)
生物体内药物分析方法的选择及应用(精选)生物体内药物分析方法的选择及应用(精选)药物分析方法是对生物体内药物的浓度及代谢产物进行检测和定量的重要手段。
在临床医学、药物研发等领域中，了解药物在生物体内的代谢过程和浓度变化对于评估药物安全性和疗效至关重要。
因此，正确选择适合的药物分析方法，并将其应用于科学研究和临床实践中，对于保障药物治疗的有效性和安全性具有重要意义。
一、药物分析方法的选择选择合适的药物分析方法对于准确测定药物在生物体内的浓度至关重要，不同的药物具有不同的物理化学性质和生物转化途径，因此需要根据具体药物的特点和分析要求进行选择。
1. 色谱分析法色谱分析法是一种常用的分离和定量药物的方法，其中气相色谱和液相色谱是最常用的两种技术。
气相色谱适用于其他分析方法无法满足需求的挥发性化合物的定量分析，如大多数麻醉药；液相色谱则适用于大多数药物的分析，包括水溶性和非水溶性化合物。
2. 质谱分析法质谱分析法能够提供分析物的分子量和结构信息，是药物分析中常用的方法之一。
质谱联用技术如液相质谱联用和气相质谱联用能够使分析更为灵敏和准确，适用于对特定代谢产物或药物的定量分析。
3. 免疫学方法免疫学方法主要包括放射免疫分析和酶联免疫分析等技术，通过检测药物与抗体的结合来定量分析药物浓度。
这些方法具有高灵敏度、高特异性和快速的优点，适用于药物浓度较低的检测。
二、药物分析方法的应用选择合适的药物分析方法后，将其成功应用于科学研究和临床实践中，能够为药物治疗的有效性和安全性提供可靠的数据支持。
1. 药代动力学研究药代动力学研究是了解药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄过程的方法。
通过选择合适的药物分析方法，可以准确测定药物在不同时间点的浓度变化，揭示药物动力学特性，为药物剂量设计提供依据。
2. 药物相互作用研究药物相互作用可以改变药物在体内的吸收、代谢和排泄过程，影响药物的疗效和安全性。
通过选择适当的药物分析方法，可以定量测定药物在相互作用情况下的浓度变化，评估药物相互作用的程度，为临床合理用药提供依据。
药物分析与检验的目的、任务与性质
情境一：认识药品检验 任务一：认识药物分析
课程：药品检验技术
一、药品分析在药学学科中的地位
保证用药 安全、合理、有效
研制 质量研究
生产 质量控制
储藏 质量考察
使用 体内分析
生物学、药理学
分析检验
化学、物理学、 物理化学
微生物学
一、药品分析与检验在药学学科中的地位
静态: 药品的常规理化检验；药品质量标准的研究。与制定 总之其任务 动态: 药物进入生物体内的综合评价。
如生物利用度;生物等效性等。
四、药品分析的任务
基本任务：
（1）药物制成品的质量检验 （2）药物生产过程的质量监控
四、药品分析的任务
药品质量检验 —— 基本任务：
（1）药物制成品的质量检验 （2）药物生产过程的质量监控
药学四大主干学科: 药理学、药物化学、
药物制剂、药物分析
药物分析发展概况：
分支学科
体外静态分析
体内动态分析
工业药物分析
药物质量控制
为相
方法：高灵敏、高精度、快速、多种手段联用 药物光谱分析
六、药物分析的发展概况
药物检验：是利用分析测定手段，发展药物分析方法，研究药物质量规律，对药物进行全面检验与控
药物研究、生产 单位、供应管理 部门、临床用药
新药研制：
药动学、生物利 用度、药物体内 分布、及其在体 内的代谢转化．
三、药品分析的任务
药物分析工作不是一项消极的质量监督工作或分析检验 工作，应该与：
1）与生产单位紧密配合控制药品生产过程中的质量。 2）与管理部门密切协作考察药品在贮藏过程中的稳定性。 3）在临床实践中，开展治疗药物监测。
生物药物分析与检验
1. 凡例（General Notices）
把一些与标准有关的、共性的、需要 明确的问题，以及采用的计量单位、 符号与专门术语等，用条文加以规定， 以避免在全书中重复说明。
凡例是标准的一部分，同样具 有法律约束力。
2. 正文（Monographs）
是药典的主要内容，收载药品及其制 剂的质量标准。
• 举例：简介细胞因子 •
二、生物药物的质量标准
• 药品质量标准是药品生产、供应、 使用和监督管理部门共同遵循的法定 技术依据，也是药品生产和临床用药 水平的重要标准。
世界上第一本药典
• 唐朝《新修本草》 • 苏敬等人编著 • 比世界上有名的欧洲纽伦堡药典要早800余
年。
• 我国药典的全称为《中华人民共和国药典》， 其后以括号注明是哪一年版，可以简称为 《中国药典》 （2005年版），英文缩写为 CHP。
(2)溶解度是药品的一种物理性质。
2.检验方法和限度
按规定检验方法进行检验。
标准中规定的各种限度数值的规定, 系包括上限和下限两个数值本身及中 间数值。
未规定上限,指不超过101.0%
3、对比解析：标准品 对照品
(1) 标准品 指用于生物检定、抗生素或生物药品中含 量或效价测定的标准物质，以效价单位(U) 表示。
ＵＳＰ收载药物及其制剂 ＮＦ收载药用辅料，两种用途相兼 者收载于ＵＳＰ
二者合并为一册，缩写为 USP(31)NF(26)，已于2008年5月生效。
2．英国药典 British Pharmacopoeia，缩写BP， 目前为2008 年版，即BP（2008）
3．日本药局方 缩写JP，目前 为15 版，即JP（15），2002年版。
谱 分 析
谱 分
生物药物分析与检验糖类、脂类和核酸类药物分析
➢ 红外光谱（IR）
4.检查
➢ 溶液的澄清度与颜色（溶液的透光率） 取本品0.5g，加水50ml使溶解，照分光光度法在430nm 的波长处测定透光率，不得低于98.0％(供注射用)。
➢ 干燥失重 取本品，在105℃干燥至恒重，减失重量不得过1.0
➢ 炽灼残渣 不得过0.1％(供注射用),或不得过0.2％(供口服用
c%
100
20 D
l
100 0.5128
195 1
✓ 滴定法：甘露醇的含量测定 ✓ 高效液相色谱法：硫酸软骨素的效价测定 ✓ 生物法：肝素的效价测定
第三节 核酸类药物的分析
➢ 1869年核酸最早分离自外科绷带脓细胞的细胞核，当时发现这种物质含磷量之高超过当时发现 的任何一种有机物，并且含有很强的酸性，故得名核酸。
3.鉴别
➢ 取0.01％供试品溶液适量,加等体积的3,5-二羟基甲苯溶液(取3，5-二羟基甲苯与三氯 化铁各0.1g，加盐酸使成100ml)，混匀，在水浴中加热约10分钟，即显绿色。---苔 黑酚反应
➢ 取本品1％水溶液，加氨制硝酸银试液数滴，即产生白色胶状沉淀。---嘌呤碱基
➢ 取含量测定项下的溶液,照分光光度法测定，在248nm的波长处有最大吸收，在 222nm的波长处有最小吸收。
7.用法与用量口服，一次0.2～0.6g一日0.6～1.8g 8.贮藏 遮光，密闭保存。 9.制剂(1)肌苷口服溶液 (2)肌苷片 (3)肌苷注射液 (4)肌苷胶囊(5)肌苷颗粒剂
（二）三磷酸腺苷二钠（ATP）的质量分析
拼音名：Sanlinsuanxiangan‘erna 英文名：Adenosine Disodium Triphosphate C10H14N5Na2O13P3 551.15
药物分析与检测技术研究
药物分析与检测技术研究药物分析与检测技术是药物研究和生产中至关重要的一环，它涉及到药物的质量控制、药效评价以及药物剂量的确定等方面。
随着科技的不断发展和创新，药物分析与检测技术也在不断完善与更新。
本文将就药物分析与检测技术的研究进行探讨和分析。
一、药物分析技术1.传统药物分析技术传统药物分析技术是现代药物分析技术的基础，它主要包括重力滤液、萃取、蒸发、显色反应等方法。
这些方法具有简单易操作、成本相对较低等特点，但也存在分析速度较慢、对药物成分的选择性较弱等问题。
2.色谱分析技术色谱分析技术是近年来药物分析研究的热点之一。
色谱分析技术包括气相色谱、液相色谱和超高效液相色谱等。
这些技术具有分离能力强、分析速度快、对多种样品适用等优势，在药物分析中有着广泛的应用。
3.质谱分析技术质谱分析技术是一种高灵敏度、高选择性的药物分析方法。
它可以通过药物样品中分子的质量和荷电状态进行分析和鉴定。
质谱分析技术包括质谱仪和质谱成像两个方面，它们在药物分析中的应用正日益广泛。
二、药物检测技术1.药物纯度检测技术药物纯度检测技术是保证药物质量的重要手段。
药物纯度检测技术包括色谱法、光谱法和电泳法等。
这些技术可以检测药物的杂质含量以及药物分子结构，从而对药物的纯度进行准确评估。
2.药物含量检测技术药物含量检测技术是评估药物效果的关键。
传统的药物含量检测常常使用溶解度测定法和滴定法等，但这些方法存在着测定速度慢、精确性差等问题。
近年来，高效液相色谱、紫外光谱以及核磁共振等先进技术在药物含量检测中得到了广泛应用。
3.生物药物检测技术随着生物技术的发展，越来越多的生物药物被开发和生产。
对于这类药物的检测，传统的分析方法常常无法满足要求。
因此，近年来研究人员提出了利用酶联免疫吸附试验和核磁共振等技术进行生物药物的检测，以改善传统分析方法的不足。
三、药物分析与检测技术的应用领域药物分析与检测技术广泛应用于医药研究、药物生产和药物监测等方面。
生物药物分析与检验
生物药物分析与检验生物药物分析与检验的特点：1.需要进行相对分子质量的测定、2.需要检查生物活性3.需做安全性检查4.需做效价测定5.要用生化法确证结构终点测定法的条件：1.必须有专一地作用该被测物质的酶，并能得到它的制品；2.能够确定使这种酶反应接近进行完全的条件；3.反应中底物的减少、产物的增加、辅酶物质的改变等可以借助简便的方法进行测定高效液相色谱法的定性分析1.利用已知物质定性的方法①利用保留特性②利用不同柱比较2.色谱法与其他方法结合定性①利用化学反应定性②利用选择性检测器定性③液相色谱-质谱联用技术、液相色谱-核磁共振联用技术生物检定的范围:1.药物的效价测定2.体内微量生物活性物质的测定3.中药质量的控制4.某些有害杂质的限度检查基因工程药物的特点：1.分泌量极低而生理、药理活性极高2.具有细胞和组织特异性3.多数细胞生长因子具有多功能性4.细胞因子间存在复杂的相互作用5.具有低免疫原性特殊杂质检查方法：物理化学区分方法一、物理法“1. 臭味及挥发性的差异2. 颜色上的差异3. 溶解行为上的差异二、化学分析法1. 酸碱反应2. 呈色或沉淀反应3. 产生气体4.氧化还原反应免疫电泳技术：将琼脂电泳与免疫扩散结合起来，即利用电场作用下带电蛋白质在琼脂凝胶中具有不同的迁移率，以及相同的蛋白质具有完整的抗原性的特点，用于分析抗原或抗体性质的一种技术。
电泳：带电颗粒在电场的作用下，向着与其电性相反的电极移动的现象。
终点测定法：先借助酶反应（单独的反应或几种酶构成的偶数酶反应）使被测物质定量地进行转变，然后在转化完成后，测定底物、产物或辅酶物质（第二底物）等的变化量生物检定：利用生物体（整体动物、离体组织/器官、细胞和微生物等）的作用以测定其效价或生物活性的一种方法。
质反应：当一定剂量的药物注入动物体内后，观察某一反应或反应的某一程度出现与否，只有质的变化。
量反应：药物对生物体所引起的反应随着药物剂量的增加产生的量变可以测量者。
生物药物分析实验报告
生物药物分析实验报告摘要：生物制药就是把生物工程技术应用到药物制造领域的过程,生物药物最主要应用的方法就是基因重组原理.生物药物分析是生物材料中的药物分析,应用于药物的体内与临床研究.生物样品中药物浓度的测定是否准确,不仅关系到临床用药的安全性和有效性,还涉及到新药的药代动力学和生物利用度等体内参数的准确性,所以必须对生物药物分析方法进行质量控制。
关键词：生物药物分析;质量控制1.分析方法质量控制的必要性生物制药过程中的药物分析可以理解为是检测制药原料以及制剂总药物及其有关杂质含量的专用手段，其主要作用是控制生物药物从生产制造再到临床应用的总体质量。
生物药物分析作为生物药物研发与临床治疗应用的重要组成部分，必须保证生物药物检测的实施质量，国内当前的临床治疗用药相对缺乏安全性以及时效性，为保证我国临床治疗的综合质量，医学领域着力研讨临床用药的安全性及其时效性，生物药物分析在这种背景下应运而生，国内医学领域的专家学者将生物药物分析致力于控制临床用药的安全性及其时效性，因此生物药物分析法是国内生物制药领域中常见到的质量控制手段之一。
目前，生物药物分析法正处于试运行状态，各项控制技术尚未成熟，自身的创新研发也存在着较大的进步空间。
国内当前的临床用药需要安全性与时效性的支撑，而生物药物分析方法作为检测生物制药原料的基本手段，必须创新自身检测方式，拓宽研发思路，以此为基础，凸显自身对国内临床用药的必要性。
2.须考核的方法和内容2.1须考核的方法目前，国家卫生局具备明确规定，新药申报资料、动物及人体药代动力学、生物利用度所应用的分析方法都必须经过严格的考核。
现阶段，在国内新药申报资料、动物及人体药代动力学、生物利用度三个方面上最常见到的就是仪器分析法和生物学分析法，其中，仪器分析法具体包括光谱法（比色法、UV发以及荧光法）、色谱法以及联用（HPLC、GC、GCMS），而生物学方法的具体应用有免疫分析法（RIA、ELA、FLA）以及微生物测定法。
107652-生物药物分析与检验-第四章电泳技术
• 迁移率：带电颗粒在电场中的泳动速度。
➢电泳迁移率（m）是指单位电场强度下的 迁移速度，即m＝v/E＝q/ 6πrη，m与q成 正比，而与r,η成反比
• 影响迁移率的因素 • 1、带电颗粒的性质； • 2、缓冲液的性质； • (1), pH值；（2），离子强度； • 3、电场强度； • 4、溶液的温度和黏度； • 5、电渗作用； • 6、分子筛效应。
三、PAGE的浓度与孔径的关系
PAGE孔径的大小主要由Acr和Bis这两种 单体的浓度决定。可以根据要分离物质分子 的大小，选择合适的单体浓度。 Acr/Bis：20~40 完全透明且有弹性；
＜10 很脆，易碎，不透明； ＞100 糊状不成形，易破碎。
凝胶总浓度T——100ml凝胶溶液中含有Acr和 Bis的总克数。
琼脂糖凝胶电泳
➢ 可以分离长度为100bp至近60kb的 DNA分子
➢ 琼脂糖凝胶电泳不仅可以分离不同 相对分子质量的DNA，也可以分离
相对分子质量相同，但构型不同的 DNA分子
OCDNA LDNA
CCCDNA
➢ EB：即溴化乙锭，它能够插入DNA 分子中的碱基对之间而与DNA结合。 由于EB分子的插入，在紫外光的照 射下，凝胶电泳中的DNA条带呈现
缓冲液
聚合成小孔胶
分离原理
1. 浓缩效应 1）凝胶层的不连续性
两层凝胶T与C不同孔径不同 浓缩胶孔径大，分离胶孔径小，蛋白质在大 孔径浓缩胶中移动，受阻力小，移动速度快。
2）缓冲液离子成分的不连续性
甘氨酸（pI=6.0）在pH8.3带负电，朝正极移 动，进入浓缩胶（pH6.7），甘氨酸解离度 （）很小，有效迁移率（M ）很低，移 动速度较慢，称为慢离子。
五、实验操作
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生物药物分析与检验
生物药物分析与检验的特点：
1.需要进行相对分子质量的测定、
2.需要检查生物活性
3.需做安全性检查
4.需做效价测定
5.要用生化法确证结构
终点测定法的条件：
1.必须有专一地作用该被测物质的酶，并能得到它的制品；
2.能够确定使这种酶反应接近进行完全的条件；
3.反应中底物的减少、产物的增加、辅酶物质的改变等可以借助简便的方法进行测定
高效液相色谱法的定性分析
1.利用已知物质定性的方法
①利用保留特性
②利用不同柱比较
2.色谱法与其他方法结合定性
①利用化学反应定性
②利用选择性检测器定性
③液相色谱-质谱联用技术、液相色谱-核磁共振联用技术
生物检定的范围:
1.药物的效价测定
2.体内微量生物活性物质的测定
3.中药质量的控制
4.某些有害杂质的限度检查
基因工程药物的特点：
1.分泌量极低而生理、药理活性极高
2.具有细胞和组织特异性
3.多数细胞生长因子具有多功能性
4.细胞因子间存在复杂的相互作用
5.具有低免疫原性
特殊杂质检查方法：物理化学区分方法
一、物理法“1. 臭味及挥发性的差异
2. 颜色上的差异
3. 溶解行为上的差异
二、化学分析法
1. 酸碱反应
2. 呈色或沉淀反应
3. 产生气体
4.氧化还原反应
免疫电泳技术：将琼脂电泳与免疫扩散结合起来，即利用电场作用下带电蛋白质在琼脂凝胶中具有不同的迁移率，以及相同的蛋白质具有完整的抗原性的特点，用于分析抗原或抗体性质的一种技术。
电泳：带电颗粒在电场的作用下，向着与其电性相反的电极移动的现象。
终点测定法：先借助酶反应（单独的反应或几种酶构成的偶数酶反应）使被测物质定量地进行转变，然后在转化完成后，测定底物、产物或辅酶物质（第二底物）等的变化量
生物检定：利用生物体（整体动物、离体组织/器官、细胞和微生物等）的作用以测定其效价或生物活性的一种方法。
质反应：当一定剂量的药物注入动物体内后，观察某一反应或反应的某一程度出现与否，只有质的变化。
量反应：药物对生物体所引起的反应随着药物剂量的增加产生的量变可以测量者。
杂志：指药物中存在的无治疗作用、或影响药物稳定性和疗效、甚至对人体健康有害的物质
药典主要包括凡例、正文、附录和索引四部分组成
生物药物常用的定量分析法：酶法、电泳法、免疫分析法、理化测定法、生物检定法
酶分析法包括酶法分析和酶活力测定
酶联免疫吸附分析法包括直接法和夹心法
电泳法分为自由界面电泳、区带电泳和高效毛细管电泳。
指示液：溴酚蓝用于指示电泳终点；甘油比重大，使样品下沉
SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的三种效应：分子筛效应、浓缩效应、电荷效应
高效液相色谱法的优点：速度快、分辨率高、灵敏度高、柱子可反复使用、样品容易回收
要获得较好色谱分离有两个途径：一是最大峰间的距离要大，二是色谱峰要窄
常用的脱气方法：真空脱气法、煮沸脱气法、溶剂的滤过
微生物检定法测定抗生素效价：稀释法，浊度法，管碟法。
其中我国是管碟法。
氯化物检查法：用硝酸，硝酸银
硫酸盐检查法：用盐酸，氯化钡，标准对照液：标准硫酸钾溶液
铁盐检查法：中国药典和美国药典采用硫氰酸盐，英国药典采用巯基醋酸法
重金属检查常用的显色剂：硫代乙酰胺、硫化钠
澄清：不超过0.5号浊度标准液的浊度时；几乎澄清：介于0.5号至1号浊度标准液之间
胰岛素的含量测定：高效液相色谱法；
生物活性检查：生物测定法；
生物检定法：小鼠血糖法、小鼠惊厥法、家兔血糖法
氨基酸药物分析的含量测底
1.酸碱滴定法——谷氨酸、天冬氨酸、赖氨酸
2.非水溶液滴定法——甘氨酸、丝氨酸、亮氨酸、、、、、
3.定氮法——精氨酸和天冬酰胺
4.碘量法或溴量法——盐酸半胱氨酸、L-胱氨酸
5.HPLC或氨基酸自动分析仪：谷丙甘氨酸胶囊等复方制剂
蛋白质药物分析的含量测定
1.定氮法——人胎盘的蛋白质测定
2.电泳法——人血白蛋白的纯度测定
3.高效液相色谱法——胰岛素含量测定
4.生物检定法——硫酸鱼精蛋白的效价测定
葡萄糖酸钙中蔗糖或还原糖类检查用的试剂是碱性酒石酸铜试液
蔗糖加硫酸煮沸后，用氢氧化钠试液中和，再加亚硫酸钠试液，产生红色沉淀
葡萄糖中存在的特殊杂质为糊精
取乳糖5.0g，加热水25ml溶解，放冷，加硝酸汞试液5ml，5分钟内不得产生白色絮状沉淀，这是检查蛋白质类杂质
葡萄糖注射液的含量测定方法为旋光度法
用旋光度测定法测定葡萄糖氯化钠注射液时，加入氨试液的作用加速D—葡萄糖α和β两种互变异构体互变平衡的到达
葡萄糖的Fehling反应所需要的试剂是碱性酒石酸铜
Keller-Kiliani反应α-去氧糖的反应洋地黄毒苷、地高辛（靛蓝色）
Kedde反应不饱和内酯的反应去乙酰毛花苷（红紫色）
纸色谱地高辛
1、葡萄糖注射液的鉴别反应是Fehling反应
2、洋地黄毒苷的鉴别是Keller-Kiliani反应
3、去乙酰毛花苷的鉴别反应是Kedde反应
4、用于地高辛鉴别和特殊杂质检查的方法PC
特殊杂质检查
洋地黄毒苷洋地黄皂苷（灵敏度法）
地高辛洋地黄毒苷（PC）
脂类药物含量测定方法
1.酸碱滴定法——熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸，用氢氧化钠滴定液
2.重量法——谷固醇含量测定，加入洋地黄皂苷
3.紫外分光光度法——大豆磷脂中磷，比色法；胆红素，牛黄
4.气相色谱法——鱼油多不饱和酸
基因工程药物的指控要点和主要方法（论述）
1.1 原材料：主要是对目的基因、表达载体及宿主细胞（如细菌、酵母、哺乳细胞和昆虫细胞）的检查，以及使用它们时制订严格要求
1.2 培养过程
无论是发酵还是细胞生产，关键是保证基因的稳定性、一致性和不被污染。
主要控制的有生产用细胞库、有限代次的生产、连续培养过程。
1.3 纯化工艺过程
要求能保证去除微量DNA、糖类、残余宿主蛋白质、纯化过程带入的有害化学物质、致热原，或者将这类杂质减少至允许量。
1.4 最终产品
主要表现在生物学效价测定、蛋白质纯度检查、蛋白质的比活性、蛋白质的性质鉴定几个方面。
1.5 杂质检测
蛋白类，由于降解、聚合或者错误折叠而造成的目的蛋白变构体在体内往往会导致抗体的产生；非蛋白类，主要有细菌、病毒、热原质和DNA几种类型，往往在极低的水平就可以产生严重的危害作用。
1.6 安全性试验
其中的无菌试验、热原试验、安全性和毒性试验按我国新颁布的《中国生物制品规程》进行。
2.1 蛋白质含量
常用的方法有光吸收法、双缩脲法、福林-酚法等。
2.2 蛋白质纯度
是一个重要的指标。
常用的方法有聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）、等电聚焦（IEF）、毛细管电泳（HPCE）、高效液相色谱（HPLC）等。
2.3 蛋白质的分子量测定
常用的方法有SDS-PAGE、HPCE、质谱法等。
2.4 蛋白质等电点的测定
理论上，一种蛋白质只有一个等电点。
常用的方法有等电聚焦法等。
2.5 氨基酸组成分析
常用的方法有水解蛋白质或多肽、氨基酸衍生方法（茚三酮法、荧光胺法）等
2.6 部分氨基酸序列分析
首先将氨基酸一个一个依次从蛋白质或者多肽的末端（N端或C端）切割下来，有化学法和酶法（化学法用得较多）；然后在氨基酸残基上衍生一个生色基团，通过HPLC法进行分离测定。
包括N端氨基酸分析和C端氨基酸分析。
2.7 肽图分析
根据蛋白质分子量大小以及氨基酸组成特点，使用专一性较强的蛋白水解酶作用于特殊的肽链位点，将蛋白质裂解成较小的片断，通过一定的分离检测手段形成特征性的指纹图谱来进行分析。
例：在同一根色谱柱上测出：正庚烷，正辛烷和未知物的调整保留时间分别为14.08s ，25.11s 和16.32s ，试计算它们的保留指数I 。
解：由定义可知：
I 庚=100×7=700 I 辛=100×8=800
由求出保留指数与文献保留指数对照可知未知物为甲苯。
杂志限量计算题
杂质限量%=杂志最大允许量/供试品量*100%
=标准溶液的体积*标准溶液的浓度/供试品量*100%]
即L=V*c/S*100%
例1：检查某药物中的砷盐，取标准
砷溶液2mL （每1mL 相当于1g 的As ）制备 标准砷斑，砷盐限量为0.0001％，应取供试品的量为 B
A. 0.20g
B. 2.0g C ．0.020g D. 1.0g E. 0.10g
检查维生素C 中的重金属时，
若取样量为1.0g ，要求含重金属不得过百万分之十，问应吸取标准铅溶液（每1ml ＝0.01mg 的Pb ）多少ml ？ D
A. 0.2ml
B. 0.4ml C ．2ml D. 1ml E. 20ml )lg lg lg lg (')(')(')(')(')(')(')(Z t t t t I t t t Z R Z R Z R X R X Z R X R Z R +--=>>++11100726)708.14lg 11.25lg 08.14lg 32.16lg (100)lg lg lg lg (100')(')1(')(')(=+--=+--=+Z t t t t I Z R Z R Z R X R X。