脂肪酸酯化方法
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脂肪酸极性很强,是一种热敏性物质,在高温下容易发生聚合、脱羧、裂解等副反应。直接进行分析,柱温很高,高温固定相难以选择,色谱峰易拖尾,保留时间不重复,有时有假峰出现等。对脂肪酸的色谱分析,一般都需要进行前处理。C5以下的脂肪酸可先转变为乙酯、丙酯或苯甲酯,C6以上的脂肪酸可先转变为甲酯,这样除可降低脂肪酸的极性外,还有利于选择固定相和色谱分析操作。
甲酯化方法:
取500mg脂肪酸样品于酯化烧瓶中,加入7mL BF3甲醇溶液(14%BF3甲醇溶液),装上冷凝器,沸腾2分钟后,从冷凝器上部加入5mL己烷,再沸腾1min,停止加热,将酯化瓶取下,加入氯化钠饱和溶液至己烷达到瓶口,取出约1mL己烷溶液于试管中,加入少量的无水硫酸钠,取上层液体直接注入色谱仪。
当样品中有C6及C8脂肪酸时,按上述方法酯化后,加入50mL 氯化钠饱和溶液,盖上瓶塞,振动20次,放置1min后,分离出上层己烷液,在下层中加入5mL己烷,同上操作。合并己烷溶液,加入无水硫酸钠干燥后,取己烷溶液直接注入色谱仪。