植物生理指标检测方法

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植物生理学实验测试

植物生理学实验测试

植物生理学实验测试植物生理学是研究植物生长和发育等生理过程的科学学科,通过实验测试可以揭示植物对外界环境因素的响应和适应机制。

本文将介绍几种常见的植物生理学实验测试方法,包括植物生长实验、叶绿素测定实验和逆境胁迫实验等。

一、植物生长实验植物生长实验是研究植物对不同环境条件下的生长反应的一种常见方法。

可以通过改变光照、温度、水分等环境因素来观察植物生长的变化。

在实验中,选取相同种子并进行处理,如将一组种子暴露在高温环境下,另一组放置在低温环境中,然后记录植物的生长情况,并进行数据统计和分析。

通过这种实验方法可以了解植物对温度的适应性以及不同温度对植物生长的影响。

二、叶绿素测定实验叶绿素是植物中起着关键作用的色素,其含量可以反映植物光合作用的强弱。

叶绿素测定实验可以通过测量植物叶片中叶绿素的含量来评估光合作用的效率。

实验中,首先需要采集新鲜叶片样品,并将其研磨得到绿色叶汁,然后通过光度计等仪器测定叶绿素的吸光度值,并根据标准曲线计算叶绿素的含量。

通过叶绿素测定实验可以评估植物对不同环境因素(如光照强度、养分浓度)的响应和适应能力。

三、逆境胁迫实验逆境胁迫实验是模拟植物在环境恶劣条件下的生理反应,如盐胁迫、干旱胁迫、冷热胁迫等。

通过逆境胁迫实验,可以研究植物在逆境条件下的生理适应和耐受机制。

实验中,可以使用不同浓度的盐水浇灌植物或让植物在干旱条件下生长,然后观察植物的生长情况、生理指标的变化,并与正常生长的植物进行比较分析。

逆境胁迫实验可以揭示植物对逆境的敏感性和胁迫响应机制,为育种和改良耐逆植物品种提供理论依据。

总结:植物生理学实验测试是研究植物生理过程的重要手段,通过不同的实验方法可以揭示植物对环境因素的响应和适应机制。

植物生长实验、叶绿素测定实验和逆境胁迫实验是常见的植物生理学实验方法,分别用于研究植物生长、光合作用和逆境胁迫的情况。

通过这些实验测试的结果,可以进一步了解植物的适应性和耐受能力,为培育适应不同环境的优良植物品种提供理论基础。

植物组织中脂肪的检测方法

植物组织中脂肪的检测方法

植物组织中脂肪的检测方法
植物组织中脂肪含量的检测是研究植物营养和生理过程的重要手段之一。

准确测定植物组织中脂肪的含量可以帮助我们了解植物的能量储存和代谢过程。

以下是一些常用的植物组织中脂肪的检测方法:
1. 溶剂提取法:这是一种常见的脂肪提取方法,利用有机溶剂(如正己烷、乙醚等)将脂肪从植物组织中提取出来。

首先,将植物组织样品切碎并加入溶剂中,然后反复摇晃或搅拌,使脂肪溶解在溶剂中。

最后,通过离心将溶剂中的脂肪分离出来并干燥,得到脂肪含量的测定结果。

2. 比色法:这是一种常用的脂肪含量测定方法,可以利用底物在酶的作用下产生的色素与脂肪的含量成正比,实现对脂肪的定量测定。

常见的比色法包括乙酰丙酸酯酶法、甘油酸酯酶法等。

3. 气相色谱法:这是一种高效、准确的脂肪分析方法,常用于分析复杂的脂肪组分。

通过将植物组织样品中的脂肪转化为甲酯化脂肪酸,再通过气相色谱仪分析样品中各脂肪酸的含量和种类。

4. 超声波法:超声波法可以快速有效地破碎植物细胞膜,释放其中的脂肪。

该方法可以在不需要显微操作的条件下,提取植物组织中的脂肪,并利用其他方法进行后续的脂肪含量测定。

总结起来,植物组织中脂肪的检测方法主要包括溶剂提取法、比色法、气相色谱法和超声波法。

选择适合自己研究目的和样品特性的方法,能够准确测定植物组织中脂肪的含量,为进一步研究提供重要的数据基础。

植物生理衰老指标

植物生理衰老指标

课程名称:植物生理学及实验指导老师:周启发成绩:__________________ 实验名称:植物组织衰老的指标测定实验类型:综合同组学生姓名:朱张世昌一、实验目的和要求(必填)1.掌握可溶性蛋白测定的原理;2.掌握植物组织中丙二醛的测定方法;3.掌握植物组织中超氧物岐化酶(SOD)活性测定方法;4.了解植物衰老的原理。

二、实验内容和原理(必填)(1)可溶性蛋白测定:缓冲液提取后可溶性蛋白溶于上清液中,蛋白质提取液与考马斯亮蓝G-250反应呈蓝色。

在595nm处有最大吸收峰。

(2)丙二醇的测定:MDA在高温、酸性条件下与硫代巴比妥酸(TBA)反应,形成三甲基复合物该复合物最大吸收峰在532nm处;最小吸收峰600nm处消光系数为155 (mM)-1 cm-1(3)超氧物岐化酶(SOD)活性测定原理:四氮唑蓝(NBT)光照还原的分光光度法:核黄素受光照产生的O2.-能将NBT还原为蓝色的甲腙,甲腙在560nm波长有最大吸收,而SOD能清除O2.-,抑制甲腙的产生使吸收减小。

通过分光光度检测SOD对O2.-的抑制率,可以表征出SOD含量。

三、主要仪器设备(必填)材料:不同叶龄的同种植物叶片试剂:磷酸缓冲溶液,考马斯亮蓝,TBA与TCA混合液、NBT反应液设备:分光光度计,高速离心器四、操作方法和实验步骤(1)可溶性蛋白测定:称叶龄差异明显的叶片各0.5g ,加入5ml 磷酸缓冲液(50mmol,pH值为7.8)及少量石英砂,于冰浴中研磨提取,匀浆液以10000g 离心力作用下(4度)离心10min,其上清液即为蛋白提取液。

取40μL蛋白提取液和160μL磷酸缓冲液于玻璃试管中,加入4.8ml考马斯亮蓝溶液,混匀后放置2min,用10mm厚的比色杯在595nm下比色读取OD值。

对照为空白的磷酸缓冲液加上4.8ml考马斯亮蓝溶液。

(2)丙二醇的测定:取上清液1.0ml于7ml离心管中,加TBA与TCA混合液4.0ml,92ºC水浴保温30min空白管:1mL Pi-buffer +TBA与TCA混合液4.0ml (92ºC水浴30min)比色,冷却后,平衡,离心5min;5000g,测定A532, A450和A600。

植物生理学实验报告植物NR活力测定——体内法(活体法)

植物生理学实验报告植物NR活力测定——体内法(活体法)

实验报告课程名称:植物生理学及实验实验类型:探索、综合或验证实验项目名称:植物NR活力测定——体内法(活体法)一、实验目的和要求掌握体内法测定植物组织中的硝酸还原酶原理和方法,明确诱导酶含义。

二、实验内容和原理实验原理:硝酸还原酶是植物氮元素代谢过程中的关键酶,与作物的吸收和利用氮元素有关,他们作用于硝酸根,使之还原为亚硝酸根:NRNO3-+NADH++H+ NO2-+NAD++H2O测定原理:根产生的亚硝酸根可以从组织内渗入到外界溶液中,从而测定溶液中亚硝酸根的含量的增加。

磺胺先与亚硝酸钠形成重氮盐,再与α-奈氨偶联形成紫色物质。

反应液的酸度和温度都会对反应产生影响。

三、主要仪器设备1.材料:在20℃蒸馏水培养一周小麦苗,实验前一天分两组,一组加KNO3,一组加0.5 mM CaCl2,在白天置光照下处理。

2.试剂:磺胺试剂、萘基乙烯二胺溶液,酶促反应液(PBs+KNO3)3.器材:分光光度计、注射器、试管、天平、烧杯、移液管、恒温箱四、操作方法与实验步骤1. 事先制作好NO 2-标准曲线。

2. 在20℃蒸馏水培养一周小麦苗,实验前一天分两组,一组加KNO 3,一组加0.5 mM CaCl 2,在白天置光照下处理。

3. 取各组苗地上部约0.5 g 左右,切成合适长度(1cm 左右),放入50mL 注射器中。

4. 加酶促反应液10ml,抽气直到材料完全下沉(一只手戴上手套,用戴手套的食指封住注射器头,另一只手反复推拉抽气减压,将叶片中的空气赶尽,直到材料完全下沉)。

5. 置恒温箱30℃ 20min ,取出后将反应液注射入烧杯中。

6. 取4ml 反应过的液体,加磺胺溶液2ml+萘基乙烯二胺溶液2ml,室温放置5min 后测540 nm OD 。

五、实验数据记录和处理1. NO 2-标准曲线2.六、实验结果与分析NO 2-标准曲线为: y = 0.0062x + 0.0283 (R 2 =0.9962)对照组NO 2-(nmol )= (0.115-0.0283)/0.0062 = 13.98处理组NO 2-(nmol )= (0.280-0.0283)/0.0062 = 40.60NR 活力(NO 2-生成nmol/(鲜重g.h ))= NO 2-(nmol )×3×(10/4) /实际重量g对照组NR 活力 = 13.98 * 3 * 2.5 /0.52 = 201.63(nmol/g.h ) 取苗上部重量 OD540值 对照组 0.52g 0.115 处理组 0.51g 0.280处理组NR活力 = 40.60 * 3 * 2.5 /0.51 = 597.06(nmol/g.h)七、讨论、心得1.比较KNO3诱导和加NH4Cl的NR活力大小,诱导时如用NaNO3替代KNO3结果会如何,为什么?如不进行光照,结果会怎么样,为什么?A.如用NaNO3替代KNO3,那么光合呼吸作用减弱,酶的活力降低,从而影响硝酸根转化为亚硝酸根,实验中可能两组紫红色的颜色差别很小,使测得的还原酶活力偏低。

植物生理指标测定

植物生理指标测定

植物生理指标测定1.叶绿素含量测定叶绿素是植物进行光合作用的关键分子,它的含量可以反映植物的光合能力和叶片的健康状况。

叶绿素含量的测定可以通过光谱分析或色度法进行。

其中,光谱分析通过测量叶片吸收和反射的可见光波段来计算叶绿素含量;色度法则是通过提取叶片中的叶绿素,然后用乙醇或乙酸乙酯进行溶解,最后通过比色法来测定其含量。

2.蒸腾速率测定蒸腾是植物通过叶片气孔释放水分的过程,蒸腾速率可以反映植物水分的利用和调节能力。

蒸腾速率的测定方法有多种,常用的有质量法和热法。

质量法是通过称量植物在不同时间段内的重量变化来计算蒸腾速率;热法则是利用蒸腾过程中产生的热量来测定蒸腾速率。

3.气孔导度测定气孔是植物调节气体交换的关键结构,气孔导度可以反映植物对环境中各种因素的响应和适应能力。

气孔导度的测定可以通过气体交换技术进行,常用的方法有蒸腾流速法和扩散阻力法。

蒸腾流速法通过测定气孔腔中水蒸气和二氧化碳的浓度来计算气孔导度;扩散阻力法则是通过测定气孔腔中水蒸气的扩散阻力来计算气孔导度。

4.抗氧化酶活性测定氧化应激是植物面临的常见环境胁迫,而抗氧化酶是植物对抗氧化应激的主要防御系统。

抗氧化酶活性的测定可以通过比色法、荧光法和电化学法等进行。

比色法是基于酶催化反应产生的物质的颜色变化来测定酶活性;荧光法是通过检测酶催化反应产生的荧光信号来测定酶活性;电化学法则是通过测量酶催化反应中释放或吸收的电荷来测定酶活性。

这些测定方法可以用于研究植物对不同环境因子的响应和适应能力,也可以用于评估植物的生长和发育状态。

通过测定植物生理指标,研究人员可以更好地了解植物的生理机制和适应策略,为植物的种植和管理提供科学依据。

植物生理学实验-光合、呼吸速率、荧光参数测定

植物生理学实验-光合、呼吸速率、荧光参数测定

注意:当TPS处于测量状态时,按N键返回到主菜单,
然后再关机。
.
1 SET PLC 1:BROAD
2:UNIVERSAL
1
N
1 REC:M/A 2 INT:0/n FLO:300
1REC 2CAL 3DMP 4CLR 5CLK 6DIAG
Y
N
1 LIGHT=SUN(or LED) 2 LEAF AREA=02.5
.
3、IRGA法测定光合速率的气路系统 红外线气体分析仪只能进行CO2浓度
和H2O浓度的测定,要测定光合速率必须 与气路系统相结合。
开放式气路系统 气路系统主要有
密闭式气路系统
.
(1)开放式气路系统 公式:Pn=F×△CO2/S
稳定CO2气体
F. 值已知
△CO2
开放式气路系统的优点:
1.长时间动态监测 2.恒态测定;维持CO2稳定值 3.测定光-光合曲线:同一叶片不同光强下的光合速率 4.测定CO2-光合曲线:同一叶片不同CO2下的光合速率 5.测定光呼吸:不同气体下光合速率之差:R=Pn2-Pn21
A +/-nn.n CI nnnn 2·s-1
.正值为光合速率,负值呼吸速率。
使用LED光源,先进行光照强度的选择:
光源电源的连接
在“测定菜单”CONTROL SETTINGS
下,按Y显示: 1CO2 2H2O 3LED
按3显示:
LED LEVEL 0=0000 PRESS 0-9 OR Y
按7显示:
●植物生理学、生态学、作物栽培学、作物育 种学、林学、植物营养、病理等研究工作中, 经常需要测定光合速率,根据实验材料选择 一种快速、准确而又简便的光合速率测定方 法,以满足科学研究的需要。

2010年植物生理实验内容

2010年植物生理实验内容

植物生理实验内容植物生理学实验是采用植物生理学的原理和方法探究植物生命活动规律的实验科学。

其内容大致分为两个方面:一是定性定量地分析检测植物体内的化学物质,如:氨基酸、植物色素等;二是观察植物生命活动现象,如:水分代谢、呼吸作用和抗逆性等,并测定生命活动指标(如各种代谢反应的速率和活力等)。

实验一 缺素培养和生长测量1. 目的:主要学习溶液培养技术。

2.原理: 植物生长需要多种必需的矿质元素(理论教材上讲了17种,其中9种是大量元素,8种是微量元素),如果将这些元素按一定比例配成培养液,相当于平衡液,植物能正常生长发育。

如人为的去掉某种必需元素,则表现出相应的缺素症状并影响其生长速率和根冠比,用这种方法来研究植物的矿质营养就是溶液培养。

3.材料:玉米幼苗(2叶1心)3.方法:配制培养液—— 生长测量(株高、根长、整株鲜重)——移栽—— 管理。

思考题1、 为什么说无土培养法是研究植物矿质营养的重要方法。

应用无土培养技术可以观察矿质元素对植物生活的必需性,同时可以避免土壤里的各种复杂因素。

2、 根据缺素症状表现和生长结果,分析缺乏矿质元素对植物生长发育的影响。

可再利用的元素症状首先表现在老叶上,不能在利用的元素症状首先表现在新叶上;缺乏不同元素对植物的影响,从生长速率和根冠比都能反应出来。

应该结合不同元素具体分析说明。

3、缺素影响生长速率和根冠比,两者如何测定和计算?(相对生长速率和根冠比看P101)相对生长速率计算:121211111Q 1)(t t Q Q d g g d cm cm RGR --⨯=⋅⋅⋅⋅----或重量长度 式中 Q 1 —为原有长度(cm )或重量(g )、t 1—开始时间Q 2—为实验结束时的长度(cm )或重量(g )、 t 2—结束时间根冠比计算 地上部鲜重地下部鲜重=T R / 根据计算结果和缺素症表现,分析原因。

必须元素缺素症状缺N:植株矮小,叶小色淡(叶绿素含量少)或发红(氮少,用于形成氨基酸的碳水化合物也少,余下较多的碳水化合物形成较多花色素,故呈红色)。

植物的生理生化研究实验

植物的生理生化研究实验
实验步骤
准备实验材料,设置呼吸作用抑制剂处理组和对照组,观察并记录 植物的生长情况。
数据分析
对比处理组和对照组的植物生长数据,分析呼吸作用对植物生长的 影响及机制。
05
植物矿质营养与代谢实验
测定植物体内矿质元素含量
原子吸收光谱法
利用原子吸收光谱仪测定植物样品中矿质元素的含量,该方法具有灵敏度高、选 择性好、精密度高等优点。
应用价值
实验结果可为农业生产、生态环境保护等领域提供科学依据和技术支持。例如,通过了解植物对不同环境条件的 适应机制,可以指导农业生产中合理施肥、灌溉等措施的制定;同时,对于植物抗逆性、抗病性等方面的研究也 可为植物育种和病虫害防治提供新的思路和方法。
提出进一步研究的设想和建议
深入研究特定基因或蛋白质的功能
质壁分离观察
利用显微镜观察质壁分离后的细胞形 态,了解细胞壁的弹性和原生质体的 收缩情况。
分析水分在植物体内的运输途径
长距离运输
通过测定植物不同部位的水势和含水量,分析水分在植物体内的长距离运输途 径和机制。
短距离运输
利用显微技术观察植物细胞间的水分移动,了解水分在细胞间的短距离运输方 式和过程。
信号传导机制探讨
深入研究激素与受体结合后的信号传导过程,揭示激素调控植物生长发 育的分子机制。
03
激素互作分析
研究不同激素间的相互作用关系,探讨它们在植物生长发育中的协同或
拮抗作用。
07
实验结果分析与讨论
对实验数据进行统计分析
数据收集与整理
详细记录实验过程中的各项数据,包括植物的生长情况、生理生 化指标等,并进行分类整理。
分析环境因素对光合作用的影响
实验原理
研究光照强度、温度、CO2浓度等环境因素对光 合作用的影响。

植物生理指标

植物生理指标

植物生理指标1、植物酶液提取:1)PVPP(固体,PVP单体与金属元素结合) 酚类吸附剂,酚的羟基与蛋白质的羰基形成氢键,醌导致蛋白质聚合。

或polyclarAT(Polyclar-AT is insoluble PVP, also called as PVPP (PolyVinyl PolyPyrrolidine).It binds phenols etc more efficiently than PVP and is easilyremovable by filtration or a low speed spin)去除酚的毒害防止醌颜色干扰。

PVP的肽键中的氧与酚羟基上的质子牢固结合,防止酚与酶中肽键结合,保护了酶。

2)母液制备:0.1mol/L二硫苏糖醇DTT: 100mg至微量离心管,+650ul 水0.5mo/L EDTA : 93gEDTANa,10g NaOH,定容到500ml10mg/ml BSA:100mgBSA于9.5ml 水中2、可溶性总糖测定(蒽酮比色法)(1)原理:糖+硫酸—糠醛,其与蒽酮形成绿色络合物,620nm下显色。

本实验采用浓硫酸,倒入水中产生大量热,促进反应发生。

(2)标准曲线绘制:取略大于0.01g的葡萄糖,105度烘干至恒重,取0.01g 定容至100ml,配成100ug/ml的溶液。

取200mg蒽酮,溶于100ml 浓硫酸,冷却,保存于棕色瓶。

(注意:不需定容,量取100ml硫酸倒入烧杯即可,定容混匀时产气热溅出。

注意硫酸中是否存在杂质。

蒽酮非常敏感,不能用勺等挖取,只能直接倒,否则就会污染。

溶液配后呈亮黄色,放置620nm.实验结果:实际上并不理想,因abs均偏低,可试将标糖浓度适当升高。

葡萄糖含量ug 20 40 60 80 100abs 0.09 0.169 0.259 0.332 0.4273、电导率(DDS-11A)1)接通电源前观否指零,若有偏差调节表头下方凹孔,使其恰指零。

植物逆境胁迫下的生理生化指标研究

植物逆境胁迫下的生理生化指标研究

植物逆境胁迫下的生理生化指标研究随着全球气候变化的加剧,植物面临着越来越频繁和严重的逆境胁迫。

逆境胁迫对植物的生长发育、生理代谢、生物化学等方面都会产生重大的影响。

因此,研究植物在逆境胁迫下的生理生化指标,对于了解植物适应环境变化的机制,提高植物抗逆能力,具有重要的科学意义和实际价值。

一、植物生理生化指标的选择与意义逆境胁迫下的植物生理生化指标种类繁多,常见指标包括植物的抗氧化酶活性、膜脂过氧化程度、光合作用参数、叶绿素含量、非饱和脂肪酸含量等。

这些指标可以从不同的层面反映植物对逆境胁迫的响应和适应能力。

例如,抗氧化酶活性可以反映植物对逆境胁迫产生的氧化应激的抵抗能力;膜脂过氧化程度可以反映植物细胞膜的稳定性;光合作用参数可以反映植物光能利用的效率;叶绿素含量可以反映植物叶片的光合能力;非饱和脂肪酸含量可以反映植物细胞膜的可流动性。

通过对这些指标的研究,可以揭示植物适应逆境胁迫的机制,为培育抗逆品种、改善植物逆境胁迫抵抗能力提供理论依据。

二、逆境胁迫下植物生理生化指标的变化逆境胁迫下,植物的生理生化指标往往会发生明显的变化。

以抗氧化酶活性为例,逆境胁迫会导致植物体内活性氧的积累,进而激活一系列抗氧化酶,如超氧化物歧化酶、过氧化物酶等的活性增强。

同时,膜脂过氧化程度也会随之增加,导致细胞膜的功能和稳定性下降。

此外,光合作用参数的变化也是逆境胁迫下植物生理生化指标的重要表现形式。

在强光辐射和干旱等逆境条件下,光合作用的光抑制现象明显,表现为光合速率的下降和光系统II的损伤。

这些指标的变化往往与植物对逆境胁迫的响应和适应密切相关。

三、植物逆境胁迫下生理生化指标研究的方法和技术对于植物逆境胁迫下的生理生化指标研究,需要运用一系列的方法和技术进行分析和检测。

常用的方法包括酶活性测定、色谱分析、光合作用测定、光谱分析等。

例如,通过酶活性的测定,可以分析抗氧化酶活性的变化情况;通过色谱分析,可以测定植物中非饱和脂肪酸的含量;通过光合作用测定,可以评估植物的光合能力。

植物生理指标检测方法

植物生理指标检测方法

植物⽣理指标检测⽅法植物组织中可溶性糖含量的测定在作为营养物质主要是指可溶性糖和淀粉。

它们在营养中的作⽤主要有:合成纤维素组成细胞壁;转化并组成其他有机物如核苷酸、核酸等;分解产物是其他许多有机物合成的原料,如糖在呼吸过程中形成的有机酸,可作为NH 3 的受体⽽转化为氨基酸;糖类作为呼吸基质,为作物的各种合成过程和各种⽣命活动提供了所需的能量。

由于碳⽔化合物具有这些重要的作⽤,所以是营养中最基本的物质,也是需要量最多的⼀类。

Ⅰ蒽酮法测定可溶性糖⼀、原理糖在浓硫酸作⽤下,可经脱⽔反应⽣成糠醛或羟甲基糠醛,⽣成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应⽣成蓝绿⾊糠醛衍⽣物,在⼀定范围内,颜⾊的深浅与糖的含量成正⽐,故可⽤于糖的定量测定。

该法的特点是⼏乎可以测定所有的碳⽔化合物,不但可以测定戊糖与⼰糖含量,⽽且可以测所有寡糖类和多糖类,其中包括淀粉、纤维素等(因为反应液中的浓硫酸可以把多糖⽔解成单糖⽽发⽣反应),所以⽤蒽酮法测出的碳⽔化合物含量,实际上是溶液中全部可溶性碳⽔化合物总量。

在没有必要细致划分各种碳⽔化合物的情况下,⽤蒽酮法可以⼀次测出总量,省去许多⿇烦,因此,有特殊的应⽤价值。

但在测定⽔溶性碳⽔化合物时,则应注意切勿将样品的未溶解残渣加⼊反应液中,不然会因为细胞壁中的纤维素、半纤维素等与蒽酮试剂发⽣反应⽽增加了测定误差。

此外,不同的糖类与蒽酮试剂的显⾊深度不同,果糖显⾊最深,葡萄糖次之,半乳糖、⽢露糖较浅,五碳糖显⾊更浅,故测定糖的混合物时,常因不同糖类的⽐例不同造成误差,但测定单⼀糖类时,则可避免此种误差。

糖类与蒽酮反应⽣成的有⾊物质在可见光区的吸收峰为 620 nm ,故在此波长下进⾏⽐⾊。

⼆、实验材料、试剂与仪器设备(⼀)实验材料任何植物鲜样或⼲样。

(⼆)试剂1. 80 %⼄醇。

2. 葡萄糖标准溶液(100 µg/mL ):准确称取100 mg 分析纯⽆⽔葡萄糖,溶于蒸馏⽔并定容⾄100 mL ,使⽤时再稀释 10 倍( 100 µg/mL )。

植物生理学实验

植物生理学实验

一植物组织中ETH(乙烯)释放量的测定测定原理:ACC是乙烯合成的直接前体,为了更好地了解乙烯对植物的调节作用,有必要测定植物中ACC的含量,在冷却的Hg+存在下,NaClO专一地使ACC转化成乙烯。

ACC:1-氨基环丙烷-1-羧酸测定中气相色谱仪用的是氢火焰检测器FID。

色谱仪包括固定相和流动相。

由于固定相和流动相对各种物质的吸附或溶解能力不同,因此各物质的分配系数不一样。

当待测样(含ETH混合气体)加入固定相以后,不断通以流动相(通常为氮气、氢气)待测物不断再分配,最后按照分配系数大小顺序依次被分离,并进入检测系统被检测,检测信号的大小,反映出物质含量的多少,在记录仪上呈现色谱图。

判断气相色谱仪氢火焰检测器是否点燃的3种方法?如何判断检测器已工作?1、将不锈钢镊子接触到检测器的喷扣处,若镊子上有水珠证明氢气已被点燃;2、根据记录笔的位置来判断;3、微电流放大器的“引燃开关”切换“引燃”时,检测器如发出扑声火焰已被点燃。

结果分析:经冷冻的苹果ETH释放速率低于常温的乙烯释放速率。

经低温处理ACC合成酶的形成受到损伤和影响,从而降低乙烯的合成与释放。

3大温度3大气流量:基线成一直线表明稳定了柱温80度进样器温度120度检测器温度140度N2 流量35微升每分钟400 H2 流量45 微升每分钟55千帕空气流量350 微升每分钟40 千帕二植物组织中脂肪氧化酶活力测定原理根据基质浓度一定,反应体系中溶解氧浓度的变化与酶活力大小呈线性相关原理进行测定。

LOX氧化多元不饱和脂肪酸生成具有共轭双键的过氧化物时消耗氧气,溶液中氧浓度的减少速率与酶活力大小成正比,用氧电极可精确的测定酶活力。

结果:经过干旱处理的小麦组织中LOX活力低(受干旱条件的诱导LOX基因的表达)注意事项:1测定时,维持温度恒定,氧电极对温度变化非常敏感;2 反应杯中不应有气泡,否则会造成信号不稳3 进行试验时要保持磁转子的转动,以平衡氧气浓度4 电极使用一段时间后,在阳极上形成一层氧化膜,使电极的灵敏度下降,需要用清洁剂清洁阳极。

植物生理学的研究方法

植物生理学的研究方法

植物生理学的研究方法植物生理学是研究植物的生长、发育和生理功能的科学领域。

通过了解植物生理学的研究方法,我们可以更好地理解植物的生存机制和适应环境的能力。

本文将介绍几种常用的植物生理学研究方法,包括解剖学观察、生物化学分析、分子生物学技术和生理实验。

一、解剖学观察解剖学观察是通过对植物的组织结构和细胞形态进行观察,来研究植物的生理过程和功能的方法之一。

常用的解剖学观察方法包括光学显微镜观察、电子显微镜观察和石蜡切片等。

光学显微镜观察可以直接观察到植物的细胞和组织,电子显微镜观察则可以观察到更小的细胞结构。

石蜡切片是将植物组织固定在石蜡块中,然后用切片机切成薄片,通过染色和显微镜观察来获取更详细的组织结构信息。

二、生物化学分析生物化学分析是通过分析植物组织和细胞中的化学成分,研究植物的生理代谢和分子机制的方法之一。

常用的生物化学技术包括蛋白质电泳、核酸杂交、聚合酶链式反应(PCR)等。

蛋白质电泳可以分离和检测植物组织和细胞中的蛋白质,从而研究植物的代谢途径和蛋白质功能。

核酸杂交可以检测植物组织和细胞中的基因表达水平,聚合酶链式反应则可以扩增和检测植物DNA序列,帮助我们理解植物的遗传信息和基因功能。

三、分子生物学技术分子生物学技术是通过研究植物的基因和DNA序列,来揭示植物的生理机制和遗传特性的方法之一。

常用的分子生物学技术包括基因克隆、基因表达分析和转基因技术等。

基因克隆可以从植物组织和细胞中分离和复制特定的基因序列,用于后续的研究。

基因表达分析可以定量和检测植物基因在不同生理状态下的表达水平,帮助我们理解基因的功能和调控机制。

转基因技术可以将外源基因导入植物中,以改变植物的性状和增强植物的适应能力。

四、生理实验生理实验是通过设计和实施一系列试验,直接观测和测量植物的生理功能和响应的方法之一。

常用的生理实验包括测量植物的生长速率、水分利用效率、叶绿素含量等。

通过对植物在不同环境条件下的生理变化进行实验分析,可以研究植物对逆境的响应和适应机制。

植物生理生化实验原理和技术

植物生理生化实验原理和技术

植物生理生化实验原理和技术植物生理生化实验旨在研究植物生命过程中的生理和生化相关現象,改进对植物的了解及应用。

以下是实验原理和常用技术。

1. 光合作用测定:光合作用是植物生理的重要过程之一,可使用光合速率仪测量光合速率。

原理是通过测量植物叶片释放或吸收的氧气量,来间接测定光合速率。

2. 蒸腾作用测定:蒸腾作用是植物水分代谢的关键环节。

可利用蒸腾速率仪测量植物叶片释放的水蒸气量,从而确定植物的蒸腾速率。

3. 细胞呼吸测定:细胞呼吸是植物细胞产能的主要途径,可以通过测量释放的二氧化碳量来测定细胞呼吸速率。

常用的测定方法有测量呼吸速率的气体分析仪或密闭系统测定二氧化碳的累积。

4. 酶活性测定:酶是植物生物化学过程中的重要催化剂。

酶活性的测定可以通过测量糖类、蛋白质、核酸等底物的代谢速率,或通过测量底物与产物之间的光学、电化学变化来实现。

常用的方法有光谱法、酶促反应连续监测法等。

5. 色素提取:植物体内的色素对光合作用和其他生化过程至关重要。

常用的色素提取方法包括酒精提取、乙醚提取等。

提取后的色素溶液可以通过紫外-可见光谱仪进行定量测定。

6. 蛋白质测定:蛋白质是植物细胞内的重要有机物。

常用的蛋白质测定方法包括巴雷特试剂法、劳氏试剂法、比色试剂法等。

通过测定样品和标准溶液的吸收值,可以计算出蛋白质的含量。

7. 酶动力学测定:酶动力学是研究酶催化作用速度的科学。

可以通过测定底物浓度、酶浓度、反应时间等因素对酶活性的影响来研究酶的催化机理。

常用的测定方法有Michalis-Menten曲线法、双倒数法等。

8. 膜透性测定:膜透性是指物质穿过细胞膜的能力。

可以通过测定溶液中离子浓度的变化,来评估膜透性的改变。

常用的测定方法有电导率法、吸光度法等。

9. RNA/DNA提取和定量:RNA/DNA是植物遗传信息的主要表达形式。

可以使用相关试剂盒从植物样品中提取RNA/DNA,然后通过紫外-可见光谱仪或荧光定量仪测定其浓度。

植物体内脯氨酸含量测定

植物体内脯氨酸含量测定

植物体内脯氨酸含量测定植物体内脯氨酸含量测定是评估植物生理状态的重要方法,也是研究植物逆境适应性的关键指标。

脯氨酸是一种氨基酸,能够调节植物的生长发育和逆境响应。

因此,准确测定植物体内脯氨酸含量对于探究植物生理机制和优化植物生长具有重要意义。

脯氨酸是一种含有羧基和氨基的氨基酸,通常以游离态的形式存在于植物体内。

衡量植物体内脯氨酸含量的方法有多种,其中较常用的是酸水解法和直接检测法。

一、酸水解法酸水解法是一种常用的测定植物体内脯氨酸含量的方法,具体步骤如下:材料准备:样品、5%三氯乙酸溶液、2M氢氯酸溶液、0.2M醋酸钠缓冲液、酚酞指示液。

1. 取适量样品,磨碎成粉末,并过筛筛掉颗粒均匀的样品。

2. 取约0.2g的样品加入10ml 5%三氯乙酸溶液中,放在80℃恒温水浴中加热1小时。

酸水解旨在将脯氨酸从蛋白质中释放出来。

3. 将样品冷却后,在离心管中以8000rpm的速度进行离心5分钟。

4. 从上层液体中取出约1ml的提取液,放在烧杯中加入1.2ml的2M氢氯酸溶液,并在水浴中加热沸腾10分钟,旨在保持脯氨酸的游离态。

5. 再将烧杯中的液体冷却后,在其中加入1ml醋酸钠缓冲液和2滴酚酞指示液,并加入1ml 1M氢氧化钠溶液,旨在使酸碱度中和。

6. 最后,以0.1M硼酸溶液进行稀释,将反应液稀释至适宜的浓度,使用分光光度计测量脯氨酸的吸光度值,然后按一定的公式计算出样品中的脯氨酸浓度。

二、直接检测法材料准备:样品、4%硫酸溶液、10%二氧化硫溶液、巴氏试剂。

1. 取适量样品,磨碎成粉末,并称取约0.1g的样品加入10ml的4%硫酸溶液中,放在温度为80℃的恒温水浴中加热5分钟。

3. 从上层液体中取出约2ml的提取液,放在试管中,并加入10%二氧化硫溶液和巴氏试剂。

在这个过程中,二氧化硫旨在使脯氨酸分子与巴氏试剂分子结合,使过氧化氢水平升高。

4. 然后,将试管振荡混合,并用分光光度计测量波长为550nm处的吸光度值。

水稻植株氮磷钾含量测定

水稻植株氮磷钾含量测定

水稻植株氮磷钾含量测定
水稻植株的氮、磷、钾含量可以通过以下步骤进行:
样品准备:从田间选取代表性的水稻植株,将其清洗干净并晾干,然后将其研磨成粉末状样品。

氮含量测定:可以使用凯氏氮测定法、凯氏硫酸铵氮测定法或者Kjeld ahl法来测定水稻植株中的氮含量。

磷含量测定:可以使用酸解-钼酸铵比色法或者ICP-OES等方法来测定水稻植株中的磷含量。

钾含量测定:可以使用火焰原子吸收光谱法(FAAS)或者ICP-OES等方法来测定水稻植株中的钾含量。

数据处理:根据测定结果计算出水稻植株中氮、磷、钾的含量,并进行数据统计和分析。

在进行实验时,需要注意样品的处理和测定方法的选择,确保实验操作的准确性和结果的可靠性。

植物sod测定方法

植物sod测定方法

植物sod测定方法一、植物SOD测定的重要性。

1.1 植物的健康指标。

植物SOD(超氧化物歧化酶)就像是植物体内的小卫士。

它的含量和活性对植物健康有着至关重要的意义。

如果把植物比作一个小王国,那SOD就是守护这个王国免受自由基侵害的英勇战士。

自由基就像一群小坏蛋,到处搞破坏,而SOD能把这些自由基转化为无害的物质,让植物茁壮成长。

1.2 研究植物生理的关键。

在植物生理学的研究领域里,SOD测定那可是相当重要的一环。

就好比我们要了解一个人的身体状况,得先看看他身体里的免疫系统强不强一样。

对于植物来说,SOD 的情况就是了解其生理状态的一个关键窗口。

通过测定SOD,我们可以知道植物在不同环境下的适应能力,是被干旱折磨得奄奄一息,还是在肥沃土壤里生机勃勃。

二、常见的植物SOD测定方法。

2.1 邻苯三酚自氧化法。

这种方法有点像一场化学魔术。

邻苯三酚在一定条件下会自氧化,产生超氧阴离子自由基,这就像是魔法里召唤出了小恶魔。

而SOD呢,它能抑制这个自氧化的过程,就像正义的魔法师出手阻止恶魔作恶。

我们通过测量不同反应体系中邻苯三酚自氧化的速率,就能算出SOD的活性。

这就好比看魔法师出手的速度和力度,来判断他的魔法能力有多强。

不过呢,这个方法也有点小脾气,对实验条件要求比较严格,就像娇贵的大小姐,稍有不慎就可能得出不准确的结果。

2.2 氮蓝四唑法。

氮蓝四唑法也是个挺常用的办法。

在这个方法里,SOD就像是个神秘的画家。

在有光的情况下,植物的叶绿体或者其他相关物质会产生超氧阴离子自由基,这个自由基会和氮蓝四唑发生反应,让溶液变色,就像画布被涂上了颜色。

而SOD会阻止这个变色的过程,我们根据溶液颜色变化的程度就能确定SOD的活性。

这就好比看画家阻止画布被乱涂乱画的能力,来判断他的绘画功力。

这个方法相对来说比较稳定,就像老实可靠的老黄牛,虽然可能没有那么多花哨的地方,但能稳稳地给出结果。

2.3 化学发光法。

化学发光法那可有点高大上了。

植物抗逆性检测方法及流程

植物抗逆性检测方法及流程

植物抗逆性检测方法及流程植物抗逆性就是植物对不良环境的适应能力啦。

那咱们怎么检测它呢?一、外观观察法。

这是最直接的办法。

咱就像看小伙伴今天状态好不好一样去看植物。

如果植物在干旱环境下,叶子还能保持一定的鲜绿,没有很快就耷拉下来,那它可能抗旱性就不错。

要是在盐碱地旁边的植物,叶子没有发黄、干枯,那也许它抗盐碱能力比较强。

不过这个方法比较粗略,只能大概判断。

比如说,我看到邻居家种的一种小花,大太阳晒了好几天,别的花叶子都卷起来了,它虽然有点蔫但还能挺住,我就觉得这小花抗旱性还是有点厉害的。

二、生理指标检测。

这就稍微专业一点喽。

1. 测叶绿素含量。

叶绿素可是植物进行光合作用的关键呢。

如果植物在逆境下叶绿素含量能保持稳定,说明它抗逆性好。

可以用专门的仪器来测量。

像那些在低温环境下,叶绿素含量没有大幅度下降的植物,就比较耐寒。

2. 测定脯氨酸含量。

脯氨酸在植物应对逆境时会大量积累。

我们可以通过化学实验的方法来测定。

当植物处于干旱或者盐碱环境时,脯氨酸含量蹭蹭往上升的植物,可能更能抵抗这种不良环境。

三、分子生物学检测。

这个就更高级啦。

1. 基因表达分析。

我们可以看看在逆境下,某些和抗逆性相关的基因有没有大量表达。

比如说,有的植物在水淹的时候,和耐涝相关的基因会变得超级活跃,这就表示这个植物可能很耐涝。

现在有很多高科技的技术,像实时荧光定量PCR就可以用来检测基因表达量的变化。

2. 蛋白质组学分析。

植物在逆境下,蛋白质的种类和含量也会发生变化。

我们可以分析这些变化来判断抗逆性。

通过一些复杂的技术手段,看看哪些蛋白质是在逆境下才出现或者增加的,这些蛋白质可能就和抗逆性有关。

盆栽植物的检测原理

盆栽植物的检测原理

盆栽植物的检测原理一、引言盆栽植物是人们室内装饰中常见的一种绿植,它们不仅能美化环境,还能提供氧气,并吸收有害气体。

然而,盆栽植物的品质对于室内空气质量有着重要影响。

因此,开展盆栽植物的检测显得十分必要。

本文将介绍盆栽植物的检测原理及其重要性。

二、检测方法1. 环境因素检测盆栽植物的生长需要适宜的环境条件,因此,环境因素的检测是盆栽植物检测的首要步骤。

主要包括光照、温度、湿度和通风等方面的检测。

通过光照、温度计、湿度计和通风仪器可以获得准确的数据。

2. 植物生理指标检测盆栽植物的生理指标反映了其生长状况和健康程度。

常用的植物生理指标检测方法包括叶片色素含量、叶绿素荧光参数检测和叶片水分检测等。

色素含量和叶绿素荧光在光谱仪的测量下可以获得准确数据,而叶片水分的检测则可以通过电子称或水分计进行。

3. 检测有害物质残留盆栽植物所处的室内环境可能存在有害物质残留,如苯、甲醛等。

为保证室内空气质量,检测有害物质残留是必要的。

苯、甲醛等有害物质的检测可以使用气相色谱法或者其他专用的检测仪器。

这些仪器可以精确测量室内空气中有害物质的浓度。

三、重要性1. 确保盆栽植物的健康生长盆栽植物的检测可以及时发现环境不良因素,如光照不足、过度湿润或通风不良等问题。

通过对环境因素的检测,可以及时调整和改善种植环境,以保证盆栽植物的健康生长。

2. 提高室内空气质量盆栽植物可以吸收有害气体,并释放氧气,从而提高室内空气质量。

但如果盆栽植物自身受到污染或生长不良,那么它们对净化空气的作用将大大减弱。

通过对植物生理指标和有害物质残留的检测,可以保证盆栽植物的健康程度,进而提高室内空气质量。

3. 保护居民健康植物是人们生活中的重要组成部分,与人们的健康密切相关。

如果盆栽植物受到污染,会对居民的健康造成潜在威胁。

通过对盆栽植物的定期检测,可以及早发现并解决植物的问题,从而保护居民的健康。

四、结论盆栽植物的检测对于保证植物的健康生长、提高室内空气质量以及保护居民健康具有重要作用。

特定环境温度条件下植物生长特征参数检测

特定环境温度条件下植物生长特征参数检测

特定环境温度条件下植物生长特征参数检测在特定环境温度条件下检测植物生长的特征参数是一项重要的研究内容。

通过准确测量和分析植物的生长特征参数,可以深入了解植物对不同温度条件的适应性,从而为提高农作物产量和改善植物生长环境提供科学依据。

一、温度对植物生长的影响温度是植物生长中的重要环境因素之一,对植物的生长发育和代谢过程起着关键作用。

不同植物对温度的适应性不同,不同的温度条件会对植物的生长特征产生不同的影响。

在特定环境温度条件下,研究植物生长的特征参数可以帮助我们更好地理解植物在极端温度下生存的机制。

二、植物生长特征参数检测的意义1. 生长速率:生长速率是描述植物生长快慢的重要指标,可以通过测量植物的高度、重量等参数来评估植物的生长速率。

在特定环境温度条件下,生长速率的变化可以反映植物对温度的适应性和生长状态。

2. 叶绿素含量:叶绿素是植物进行光合作用的关键色素,可以通过测量叶片中叶绿素的含量来评估植物光合能力的强弱。

在特定环境温度条件下,叶绿素含量的变化可以反映植物对温度的适应性和光合作用效率。

3. 叶片温度:叶片温度是植物生长过程中的重要参数,影响植物的水分蒸腾、光合作用和生长发育等过程。

通过测量叶片温度的变化,可以评估植物在特定环境温度条件下的蒸腾量、温度适应性和生理状态。

4. 根系生长:根系生长是植物吸收水分和养分的关键过程,对植物整体生长和发育起着重要作用。

在特定环境温度条件下,根系生长的变化可以反映植物对温度的适应性和根系吸收水分能力的变化。

三、植物生长特征参数检测的方法1. 生长速率检测:生长速率可以通过定期测量植物的高度、重量等指标来评估。

可以使用纸尺、称重器等传统测量工具,也可以借助数字设备和计算机软件进行自动测量和分析。

2. 叶绿素含量检测:叶绿素含量可以通过叶片取样后使用光谱仪、色差计等设备来测量。

利用特定波长的光线照射叶片后的反射光谱变化可以反映叶绿素含量的多少。

3. 叶片温度检测:叶片温度可以通过红外测温仪等设备来测量。

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植物组织中可溶性糖含量的测定在作为营养物质主要是指可溶性糖和淀粉。

它们在营养中的作用主要有:合成纤维素组成细胞壁;转化并组成其他有机物如核苷酸、核酸等;分解产物是其他许多有机物合成的原料,如糖在呼吸过程中形成的有机酸,可作为NH 3 的受体而转化为氨基酸;糖类作为呼吸基质,为作物的各种合成过程和各种生命活动提供了所需的能量。

由于碳水化合物具有这些重要的作用,所以是营养中最基本的物质,也是需要量最多的一类。

Ⅰ蒽酮法测定可溶性糖一、原理糖在浓硫酸作用下,可经脱水反应生成糠醛或羟甲基糠醛,生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物,在一定范围内,颜色的深浅与糖的含量成正比,故可用于糖的定量测定。

该法的特点是几乎可以测定所有的碳水化合物,不但可以测定戊糖与己糖含量,而且可以测所有寡糖类和多糖类,其中包括淀粉、纤维素等(因为反应液中的浓硫酸可以把多糖水解成单糖而发生反应),所以用蒽酮法测出的碳水化合物含量,实际上是溶液中全部可溶性碳水化合物总量。

在没有必要细致划分各种碳水化合物的情况下,用蒽酮法可以一次测出总量,省去许多麻烦,因此,有特殊的应用价值。

但在测定水溶性碳水化合物时,则应注意切勿将样品的未溶解残渣加入反应液中,不然会因为细胞壁中的纤维素、半纤维素等与蒽酮试剂发生反应而增加了测定误差。

此外,不同的糖类与蒽酮试剂的显色深度不同,果糖显色最深,葡萄糖次之,半乳糖、甘露糖较浅,五碳糖显色更浅,故测定糖的混合物时,常因不同糖类的比例不同造成误差,但测定单一糖类时,则可避免此种误差。

糖类与蒽酮反应生成的有色物质在可见光区的吸收峰为 620 nm ,故在此波长下进行比色。

二、实验材料、试剂与仪器设备(一)实验材料任何植物鲜样或干样。

(二)试剂1. 80 %乙醇。

2. 葡萄糖标准溶液(100 μg/mL ):准确称取100 mg 分析纯无水葡萄糖,溶于蒸馏水并定容至100 mL ,使用时再稀释 10 倍( 100 μg/mL )。

3 .蒽酮试剂:称取 1.0 g 蒽酮,溶于 80% 浓硫酸(将 98% 浓硫酸稀释,把浓硫酸缓缓加入到蒸馏水中) 1000 mL 中,冷却至室温,贮于具塞棕色瓶内,冰箱保存,可使用 2 ~ 3 周。

(三)仪器设备分光光度计,分析天平,离心管,离心机,恒温水浴,试管,三角瓶,移液管( 5 、 1 、0.5 mL ),剪刀,瓷盘,玻棒,水浴锅,电炉,漏斗,滤纸。

三、实验步骤1. 样品中可溶性糖的提取称取剪碎混匀的新鲜样品0.5 ~ 1.0 g (或干样粉末 5 ~100 mg ),放入大试管中,加入15 mL 蒸馏水,在沸水浴中煮沸20 min ,取出冷却,过滤入100 mL 容量瓶中,用蒸馏水冲洗残渣数次,定容至刻度。

2. 标准曲线制作取 6 支大试管,从 0 ~ 5 分别编号,按表 24-1 加入各试剂。

表 24-1 蒽酮法测可溶性糖制作标准曲线的试剂量将各管快速摇动混匀后,在沸水浴中煮10 min ,取出冷却,在620 nm 波长下,用空白调零测定光密度,以光密度为纵坐标,含葡萄糖量( μg )为横坐标绘制标准曲线。

3 .样品测定取待测样品提取液 1.0 mL 加蒽酮试剂 5 mL ,同以上操作显色测定光密度。

重复 3 次。

四、结果计算溶性糖含量(%)=从标准曲线查得糖的量(μg)×提取液体积(ml)×稀释倍数/[测定用样品液的体积(ml)×样品重量(g)×106]×100式中: C ——从标准曲线查得葡萄糖量, μg 。

V T ——样品提取液总体积 , mL 。

V 1 ——显色时取样品液量, mL 。

W ——样品重( g )。

植物体内可溶性蛋白质含量的测定植物体内的可溶性蛋白质大多数是参与各种代谢的酶类,测其含量是了解植物体总代谢的一个重要指标。

在研究每一种酶的作用时,常以比活(酶活力单位/mg蛋白)表示酶活力大小及酶制剂纯度。

因此,测定植物体内可溶性蛋白质是研究酶活的一个重要项目。

常用测定方法有Lowry法和考马斯亮蓝G-250染料结合法。

本实验将分别介绍这两种方法。

1.考马斯亮蓝法一、实验原理考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。

考马斯亮蓝G-250在游离态下呈红色,当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在465 nm,后者在595 nm。

在一定蛋白质浓度范围内(0-100 μg/mL),蛋白质-色素结合物在595 nm波长下的光吸收与蛋白质含量成正比。

故可用于蛋白质的定量测定。

蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2 min左右的时间内达到平衡,完成反应十分迅速,其结合物在室温下1 h内保持稳定。

该反应非常灵敏,可测微克级蛋白质含量,所以是一种比较好的蛋白质定量法。

二、实验材料、仪器和试剂1.材料小麦叶片或其他植物组织2.仪器设备分光光度计,离心机,研钵,25 mL容量瓶1个,刻度吸管0.5 mL 2支,2 mL 1支,10 mL 试管3支。

3.试剂(1)牛血清白蛋白配成1000 μg/mL和100 μg/mL。

(2)考马斯亮蓝G-250:称取100 mg考马斯亮蓝G-250溶于50 mL 90%乙醇中,加入85%(W/V)磷酸100 mL,最后用蒸馏水定容至1000 mL。

此溶液在常温下可放置一个月。

(3)90%乙醇(4)磷酸(85%,W/V)三、实验步骤:1.可溶性蛋白的提取称取新鲜植物叶片0.5 g置于研钵中,加入5 mL 4o C下预冷的浓度为50 mmol/L,pH 7.0磷酸缓冲液和少量石英砂研磨成匀浆后,转入10 mL离心管中,在4 o C冰箱中静置10 min,于15000 rpm/min下冷冻离心25 min,上清液即为过氧化物粗提液。

4 o C下保存备用。

2.标准曲线的绘制(1)0-100 μg/mL标准曲线的制作取6支试管,按下表数据配制0-100 μg/mL 血清白蛋白液各1 mL 。

准确吸取所配各管溶液0.1 mL ,分别放入10 mL 具塞试管中,加入5 mL 考马斯亮蓝G-250试剂,盖塞,反转混合数次,放置2 min 后,在595 nm 下比色,绘制标准曲线。

配制0-100 μg/mL 血清白蛋白液管号1 2 3 4 5 6 100 μg/mL 牛血清蛋白量(mL) 蒸馏水量(mL) 蛋白质含量(mg)0 1.0 00.2 0.8 0.020.4 0.6 0.040.6 0.4 0.060.8 0.2 0.081.0 0 0.10(2) 0-1000 μg/mL 标准曲线的制作另取6支试管,按表10-2数据配制0-1000 μg/mL 牛血清白蛋白溶液各1 mL 。

与步骤(1)操作相同,绘出0-1000 μg/mL 的标准曲线。

配制0-1000 μg/mL 血清蛋白血液管号7 8 9 10 11 12 1000 μg/mL 牛血清白蛋白(mL ) 蒸馏水量(mL) 蛋白质含量(mg)0 1.0 00.2 0.8 0.20.4 0.6 0.40.6 0.4 0.60.8 0.2 0.81.0 0 1.03. 样品提取液中蛋白质浓度的测定吸取样品提取液0.1 mL (样品提取见各酶活测定),放入具塞刻度试管中(设两个重复管),加入5 mL 考马斯亮蓝G-250试剂,充分混合,放置2min 后在595 nm 下比色,记录吸光度值,通过标准曲线查得蛋白质含量。

四、 结果计算与分析样品蛋白质含量(mg/g 鲜重)=式中 C -查标准曲线所得每管蛋白质含量(mg );V -提取液总体积(mL );a -测定所取提取液体积(mL ); W -取样量(g )。

叶绿素测定方法1、 称取剪碎叶片0.2g ,放入容量瓶。

2、 加50ml 95%的乙醇。

3、 遮光浸提48-72小时,中间摇晃一次。

(保证各批次浸提时间一致)4、 分光光度计测吸光值,三波长(649,665,470),分别对应叶绿素a 、b 和其他。

空白为95%乙醇。

总叶绿素含量为三者之和。

一般叶绿素a/b 为3:1至4:1选择的波长不一样,计算公式就不一样,网上也有其他的波长方法,计算公式里的系数响应也有差异。

WaV C淀粉含量的测定原理淀粉是由葡萄糖残基组成的多糖,在酸性条件下加热使其水解成葡萄糖,测定葡萄糖含量,根据葡萄糖含量换算成淀粉含量(C6H12O6 )n→ ( C6H10O5) n + nH2O糖在硫酸作用下生成糠醛,糠醛再与蒽酮作用形成绿色络合物,颜色的深浅与糖含量有关。

在625 nm 波长下的OD值与糖含量成正比。

由于蒽酮试剂与糖反应的呈色强度随时间变化,故必须在反应后立即在同一时间内比色仪器用具和试剂1.仪器用具:移液枪、10ml离心管、试管、50ml容量瓶、试管架、棕色瓶(>=500ml)、螺口瓶(>=500ml)、烧杯、移液管(连续加样器)、离心机、分光光度计;2.试剂:葡萄糖标准液Ⅰ:精确称取0.1000g蔗糖(分析纯),于小烧杯中加水溶解,定容至100ml,加2-3滴浓H2S04,该溶液可长期保存;葡萄糖标准液Ⅱ:准确吸取1mg/ml的蔗糖标准液5ml,加水定容量50ml,得到浓度为0.1mg/ml蔗糖标准液;蒽酮溶液:100mg蒽酮溶于50ml浓H2S04(化学纯)中,避光保存,当天配制当天使用;3mol/L NaOH溶液:12g氢氧化钠溶于100ml蒸馏水;3mol/L Hcl溶液:25ml浓盐酸与75ml蒸馏水混匀。

测定方法1.植物淀粉相关溶液的提取:向测可溶性糖所剩残渣中加入7ml3mol/L的盐酸,在沸水浴中煮沸45分钟,取出冷却,4000转/分离心15分钟,取上清到50ml容量瓶中,加入7ml 3mol/L NaOH,用蒸馏水定容到50ml,作为待测样品。

3.准确吸取待测液1.0ml,加蒽酮4.0ml,在45℃水浴中显色10-15分钟,各管在加入蒽酮试剂时要迅速,加完后用力振荡混匀。

4.取出后避光冷却,在 625 nm处测OD值,从标准曲线上得到提取液中可溶性总糖含量。

结果计算葡萄糖糖含量(%)=标准曲线对应含糖量×定容体积×100/(样品质量×显色吸取液体积×103)粗淀粉含量(%)=葡萄糖含量×0.9强酸溶液,注意安全超氧化物歧化酶(SOD)的测定一、实验原理超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD,EC 1.15.1.1)普遍存在于动、植物体内,是一种清除超氧阴离子自由基的酶。

本实验依据超氧物歧化酶抑制氮蓝四唑(NBT)在光下的还原作用来确定酶活性大小。

在氧化物质存在下,核黄素可被光还原,被还原的核黄素在有氧条件下极易再氧化而产生氧自由基O2·ˉ,可将氮蓝四唑还原为蓝色的甲腙,后者在560 nm处有最大吸收。

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