生化实验六酶的基本性质
生化基础实验报告
一、实验目的1. 了解生化实验的基本原理和操作方法。
2. 掌握常见生化试剂的制备和性质。
3. 学习并运用生化实验技术，进行物质的定性、定量分析。
二、实验原理生化实验是研究生物体内化学反应、生物分子结构与功能及其相互关系的实验方法。
本实验主要涉及以下内容：1. 蛋白质性质及鉴定：通过观察蛋白质在不同条件下的性质变化，如盐析、变性等，以及鉴定蛋白质的方法，如双缩脲试剂、酚试剂等。
2. 酶的性质及活性测定：通过观察酶催化反应的特点，如专一性、高效性等，以及酶活性测定方法，如比色法、电化学法等。
3. 糖类及脂肪的鉴定与测定：通过观察糖类、脂肪在特定条件下的性质变化，如糖的还原性、脂肪的皂化反应等，以及鉴定、测定方法，如费林试剂、苏丹Ⅲ染液等。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：鸡蛋清、淀粉、葡萄糖、果糖、蔗糖、脂肪、盐酸、氢氧化钠、硫酸铜、硫酸锌、氯化钠、碘液、苏丹Ⅲ染液等。
2. 仪器：试管、烧杯、量筒、滴定管、pH计、电炉、恒温水浴锅、显微镜、离心机等。
四、实验步骤1. 蛋白质性质及鉴定实验（1）观察蛋白质盐析现象：取鸡蛋清溶液，逐滴加入饱和硫酸铵溶液，观察蛋白质沉淀现象。
（2）观察蛋白质变性现象：取鸡蛋清溶液，加入少量氢氧化钠溶液，观察蛋白质变性现象。
（3）鉴定蛋白质：取鸡蛋清溶液，加入双缩脲试剂，观察颜色变化。
2. 酶的性质及活性测定实验（1）观察酶的专一性：取淀粉溶液，分别加入淀粉酶、蛋白酶，观察酶催化反应现象。
（2）测定酶活性：取淀粉溶液，加入淀粉酶，用碘液检测淀粉分解情况，计算酶活性。
3. 糖类及脂肪的鉴定与测定实验（1）观察糖的还原性：取葡萄糖、果糖溶液，加入费林试剂，观察颜色变化。
（2）观察糖的鉴定：取蔗糖溶液，加入苏丹Ⅲ染液，观察颜色变化。
（3）测定脂肪含量：取脂肪样品，加入碱液，加热皂化，测定皂化物的质量，计算脂肪含量。
五、实验结果与分析1. 蛋白质性质及鉴定实验（1）盐析现象：观察到鸡蛋清溶液中加入饱和硫酸铵溶液后，出现白色沉淀。
生物化学检验中酶的测定综述
定时法
通常是酶作用一段时间后，加入强酸、强碱、
蛋白沉淀剂等终止酶促反应，测定这段时间内 底物的减少量或产物的生成量，计算酶促反应 的平均速度。
定时法中酶促反应的过程
注意事项
用定时法测定酶活性浓度， 必须了解不同酶促反应速率和时间的关系， 应先做预试验找出酶促反应速率恒定的时期，
CK-MB
这些方法适用于临床自动化分析，具有测定时
间短（最快仅需7min）、灵敏性高（最低检测 限<µg/L）和准确性好的特点，明显优于其他 分析测定CK-MB的方法，1990年后逐渐被广泛 接受。 为使CK-MB质量分析标准化，AACC成立了专门 的标准化委员会，最近已研制成功采用重组基 因技术的CK-MB参考材料（Rck-2）。
由于同工酶（及其亚型同工型）一级结构的不
同，导致其在理化性质、催化性质、生物学等 方面有明显的性质差异，这些差异为同工酶的 分析和鉴定提供了理论基础。 临床同工酶的分析大致可分为两步，即首先精 确地分离出某酶的各同工酶组分，然后测定酶 的总活性和各同工酶组分的活性。
电泳法
在研究同工酶的所有方法中，电泳法的使用最
CK-MB
是诊断AMI、测定心肌梗塞面积的重要指标。 近年来，国外对AMI诊断效率评价时多采用测
定CK-MB质量，即测定CK-MB的酶蛋白质量浓度 （Mass）的方法。 CK-MB质量的测定通常是制备抗CK-M抗体和抗 CK-B抗体或采用CK-MB抗体，用CLIA、ELISA、 FEIA等方法测定。
同一种属中由不同基因或等位基因所编码的多
肽链单体、纯聚体或杂化体，具有相同的催化 作用，但其分子构成、空间构像、理化性质、 生物学性质以及器官分布或细胞内定位不同的 一组酶称为同工酶。 凡酶蛋白结构不同的同工酶称为原级同工酶， 而将经加工或修饰后的同工酶称为次级同工酶 或酶的多种形式。
《植物生理生化》实验指导
令狐采学《植物生理生化》实验指导（适用专业：农学类相关专业）黑龙江八一农垦大学植物科技学院生理生化教研室目录生物化学实验部分：实验一、氨基酸的纸层析 (1)实验二、蛋白质含量测定（设计性实验） (5)实验三、酶的基本性质 (7)实验四、维生素C含量的测定 (12)实验五、还原糖和总糖的测定 (14)实验六、淀粉酶活性的测定 (17)实验七、脂肪浸提——索氏脂肪浸提法 (20)实验八、一种简单实用的提取植物DNA的方法 (22)实验九、聚丙烯酰胺电泳法测定大麦、小麦种子纯度 (24)实验十、淀粉酶的诱导、提取和活性测定（综合性实验） (26)植物生理学实验部分:实验一、植物组织水势的测定（小液流法） (28)实验二、植物伤流量的测定 (30)实验三、根系活力的测定 (31)实验四、蒸腾强度的测定 (35)实验五、叶绿体色素的提取、分离、性质和定量测定（综合性实验） (37)实验六、光合强度的测定（改良半叶法） (39)实验七、呼吸强度的测定 (41)实验八、植物抗逆性的鉴定（电导仪法） (43)实验九、植物缺水程度的测定（脯氨酸法） (45)生物化学实验部分实验一氨基酸的纸层析一、目的：层析分析法已广泛用于氨基酸、核酸、激素、维生素、糖类的分离与分析。
其优点是能够分离与分析在组成、结构及性质上极为相似的物质；设备简单，操作容易，样品用量很少，结果也较明确。
本实验的目的在于要求学生掌握纸层析法的一般原理和操作技术。
二、原理：纸层析法是以滤纸作为支持物的分配层析法。
分配层析法是利用物质在两种不同混合溶剂中的分配系数不同，而达到分离的目的。
通常用α表示分配系数。
在一定条件下，一种物质在某溶剂系统中的分配系数是一个常数。
）溶质在流动相的浓度（）溶质在静止相的浓度（l s C C =α 层析溶剂是选用有机溶剂和水组成的。
由于滤纸纤维素对水有较强的亲和力（纸上有很多-OH 基与水以氢键相连），吸附很多水分子，一般达滤纸重的22%左右（其中约有6%的水与纤维素结合成复合物），因此使这一部分水扩散作用降低形成静止相；而有机溶剂与滤纸的亲和力很弱，可以在滤纸的毛细管中自由流动，便形成流动相。
生化实验总结
生化实验总结生化实验总结1.酶的活性中心：指在一级结构上可能相距甚远，甚至位于不同肽链上的少数几个氨基残基或这些残基上的基团通过肽链的盘绕折叠而在三维结构上相互靠近，形成一个能与底物结合并催化其形成产物的位于酶蛋白表面的特化的空间区域。
对需要辅酶的酶来说，辅酶分子或其上的某一部分结构常是活性中心的组成部分。
2.酶原：酶原是有催化活性的酶的前体。
通过蛋白酶的有限水解，可以将无活性的酶原转变成有催化活性的酶。
3.同工酶：指催化同一种化学反应，而其酶蛋白本身的分子结构组成及理化性质有所不同的一组酶。
4.变构酶：一种一般具多个亚基，在结构上除具有酶的活性中心外，还具有可结合调节的别构中心的酶，活性中心负责酶对底物的结合与催化，别构中心负责调节酶反应速度。
5.竞争性抑制作用：竞争性抑制剂因具有与底物相似的结构所以与底物竞争酶的活性中心，与酶形成可逆的EI复合物，而使EI不能与S结合，从而降低酶反应速度的可逆抑制作用。
这种抑制作用可通过增加底物浓度来解除。
6.超二级结构：在球状蛋白质分子的一级结构的顺序上，相邻的二级结构常常在三维折叠中相互折叠，彼此作用，在局部区域形成的二级结构聚合体，就是超二级结构7.等电点：氨基酸所带静电荷为零，主要以两性离子存在时，在电场中，不向任何一级移动，此时溶液的PH叫做氨基酸的等电点8.酰胺平面：肽键主链的肽键C-N具有双键性质，因而不能自由转动，使连接在肽键上的六个原子共处于一个平面上，这个平面称酰胺平面9.分子杂交：在退火条件下，不同来源的DNA互补区域形成双链，或DNA单链和RNA单链的互补形成DNA-RNA杂合双链的过程称分子杂交10.透析：小分子可以通过半透膜，大分子不能透过半透膜。
这种分离物质的方法叫做透析。
11.Tm：当核酸分子加热变性时，其在260nm处的紫外吸收会急剧增加，当紫外吸收变化达到最大变化的一半时所对应的温度称作解链温度，用Tm表示12.Southern印迹法：将电泳分离的DNA片段从凝胶转移到适当的膜（如硝酸纤维素膜或尼龙膜）上，再进行杂交操作13.Northern印迹法：将电泳分离后的变性RNA吸引到适当的膜上再进行分子杂交的技术。
生化酶的实验报告
一、实验目的1. 理解生化酶的基本概念及其在生物体内的作用。
2. 掌握生化酶活性测定的基本原理和方法。
3. 通过实验，观察不同条件下酶活性的变化，加深对酶动力学性质的理解。
二、实验原理生化酶是生物体内一类具有催化功能的蛋白质，能够加速生物化学反应的速率，而不改变反应的平衡状态。
酶的活性受多种因素影响，如温度、pH值、抑制剂和激活剂等。
本实验主要采用紫外分光光度法测定酶活性。
在特定波长下，酶催化底物发生反应，生成产物，产物的生成会导致溶液吸光度发生变化。
通过测定吸光度变化，可以计算出酶的活性。
三、实验材料与仪器材料：1. 酶提取液2. 底物溶液3. 酶活性测定试剂盒4. pH缓冲液5. 温度控制装置仪器：1. 紫外分光光度计2. 恒温水浴锅3. 移液器4. 试管四、实验方法1. 酶活性测定：- 将酶提取液、底物溶液和pH缓冲液按比例混合，置于比色皿中。
- 在特定波长下，测定溶液的吸光度。
- 将吸光度变化与酶活性进行线性拟合，得到酶的活性。
2. 不同pH值对酶活性的影响：- 将酶提取液、底物溶液和不同pH值的缓冲液按比例混合，置于比色皿中。
- 在特定波长下，测定溶液的吸光度。
- 分析不同pH值对酶活性的影响。
3. 不同温度对酶活性的影响：- 将酶提取液、底物溶液和不同温度的水浴锅中按比例混合，置于比色皿中。
- 在特定波长下，测定溶液的吸光度。
- 分析不同温度对酶活性的影响。
五、实验结果与分析1. 酶活性测定：- 通过实验，得到酶的活性为X U/mg。
2. 不同pH值对酶活性的影响：- 在pH值为X时，酶活性最高，为Y U/mg。
- 随着pH值偏离最适值，酶活性逐渐降低。
3. 不同温度对酶活性的影响：- 在温度为X℃时，酶活性最高，为Y U/mg。
- 随着温度升高，酶活性逐渐增加，但超过一定温度后，酶活性反而降低。
六、结论1. 本实验成功测定了酶的活性，并分析了不同pH值和温度对酶活性的影响。
2. 酶的活性受多种因素影响，其中pH值和温度是影响酶活性的重要因素。
“酶”专题知识(知识+练习+问题详解)
“酶”专题知识一、酶的发现过程（略）二、酶的概念：活细胞产生的一类具有生物催化作用的特殊有机物。
1、来源：由活细胞产生。
（除某些没有细胞核的细胞外，如哺乳动物成熟的红细胞、血小板，植物筛管细胞）2、作用：催化生物化学反应（降低化学反应活化能）3、本质：绝大多数是蛋白质，少数是RNA（暂时还没有把DNA列入）。
三、酶的合成1、合成的原料：氨基酸或核糖核苷酸2、合成的场所：核糖体（与唾液淀粉酶等胞外酶合成和分泌有关的主要细胞结构有核糖体、内质网、高尔基体、线粒体和细胞膜。
）3、合成的过程：遵循中心法则，通过转录和翻译合成的4、合成的控制：酶的合成是在基因控制下进行的四、酶和激素的比较1、化学成分：前者主要是蛋白质，少数是RNA；后者有多肽及蛋白类、氨基酸衍生物、脂质等。
2、生理功能：前者对生化反应起催化作用；后者对生命活动起调节作用。
3、相互关系：能合成激素的细胞一定也能合成酶，但能合成酶的细胞不一定能合成激素。
要注意酶与激素、蛋白质、维生素、脂质的关系：维生素脂质激素蛋白质酶五、酶的类型1、按其发挥作用的场所不同分为：（1）胞外酶：消化酶、SOD（超氧化歧化酶）、基因工程中的工具酶（限制性核酸内切酶和DNA连接酶）等，在细胞外发挥作用。
注意限制性核酸内切酶和DNA连接酶的作用：DNA连接酶的作用是催化切割的DNA片段（黏性末端）形成化学键（磷酸二酯键）而拼接起来。
不是促使碱基配对形成氢键。
消化酶属于分泌蛋白如唾液淀粉酶（注意与生物膜和细胞器的联系）。
（2）胞内酶：在细胞内发挥作用。
如光合酶、呼吸酶、转氨酶、ATP酶、解旋酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、RNA聚合酶、逆转录酶、存在于微生物中的限制性核酸内切酶等。
2、具有酶活性的蛋白质分为简单蛋白质类和结合蛋白质类：（1）简单蛋白质类的酶只由氨基酸组成，不含任何其他物质，如胃蛋白酶。
（2）结合蛋白质类的酶（又称全酶）是由蛋白质与辅因子组成，其中蛋白质部分称为酶蛋白，辅因子部分称为辅酶或辅基。
认识酶的实验报告
认识酶的实验报告一、实验目的本实验旨在通过探究酶的性质和功能，加深对酶作用的认识，并进一步了解酶的作用机制。
二、实验原理1. 酶的定义：酶是一种能够加速生物体内生物化学反应速率的蛋白质。
2. 酶的特性：酶具有专一性、高效性和可逆性。
3. 酶促反应：酶与底物发生特异性结合，形成酶底物复合物，通过酶的催化作用，反应速率得到加快。
三、实验步骤1. 实验材料准备：酶溶液、底物溶液、试管、试管架、试管夹、显色剂等。
2. 实验步骤：- 步骤一：取两支试管，分别加入相同体积的酶溶液和底物溶液，并将其放入不同的试管架中。
- 步骤二：将试管架放入恒温槽中，保持温度恒定。
- 步骤三：同时开始计时器，并在不同的时间点分别取出试管，加入显色剂。
- 步骤四：观察试管中颜色的变化，并记录下时间和变化情况。
四、实验结果根据实验过程中记录的数据计算得出的结果如下表所示：时间（秒）试管一颜色变化试管二颜色变化0 无变化无变化10 逐渐变淡无变化20 变得非常浅逐渐变淡30 几乎透明变得非常浅40 透明透明50 透明透明60 透明透明五、实验讨论通过实验我们可以得出以下结论：1. 酶的作用是加速生物体内生物化学反应的速率，同时具有专一性、高效性和可逆性。
2. 本实验中，试管中的酶溶液通过与底物的特异性结合，催化反应，使底物的颜色变淡或透明。
3. 随着时间的增加，试管一和试管二中的底物都逐渐变淡或透明，说明酶的催化作用随时间的增加而增强。
六、实验总结通过本次实验，我们更加深入地理解了酶的性质和功能。
酶作为生物体内的催化剂，在代谢和生产过程中起着非常重要的作用。
同时，我们也学会了如何进行酶的活性检测实验，通过观察底物的变化情况来评估酶的催化效果。
然而，本次实验的结果可能受到实验条件的限制，如实验温度、酶浓度等因素。
因此，在今后的实验中，我们应该更加精确地控制实验条件，以获取更准确的实验结果。
总之，通过认识酶的实验，我们进一步了解了酶的作用机制，提高了对酶的认识和理解，并为今后的研究和应用提供了基础。
生物化学实验
透光度 T= I/I0 吸光度 A=-lgT=lgI0/I
根据Lambert-Beer定律：
A=KCL( K:吸光系数；C：溶液的浓度；L：
光透过液层的厚度)
A1=K1C1L1
溶质 溶剂
A2=K2C2L2
K1=K2；L1=L2
A1/A2=C1/C2
有色溶液
22
（二） 血糖测定(0-TB)原理
酸性/△
3、 取小试管3支
试剂（滴）
1
2
3
0.5%淀粉
10
10
10
PH6.8缓冲液
3
3
3
0.85%NaCl
3
3
3
混匀，分别将1、2、3号试管依次置于沸水浴、温水浴 和冰水浴中5min。然后向各管加入稀唾液3滴，继续放 置5min。
12
4. 每管取出2滴试液在白瓷板上，加碘液1滴，观察颜色 5. 将1、3两试管改置37度水浴中5min，加碘液1滴，
抑制
琥珀酸脱氢酶
2H
HOOC CH
HC COOH
延胡索酸
18
本实验用甲烯蓝作受氢体，接受琥珀酸 脱下的氢，自身变为甲烯白。
MB + 2H
MB：2H
甲烯蓝（蓝色） 甲烯白（白色）
注意：甲烯白容易被空气氧化，所以需 要隔绝空气。
19
三. 实验操作
四. 注意事项：
1. 肌肉提取液混匀 2. 加液体石蜡前将试管混匀，加后勿混
离心：3000rpm、5min
上清液倒入另一小试管
按P9表操作，测定血糖浓度: 27
3、 血糖浓度的测定
试 液（ml） 正常 胰－ 肾－ 标准
上清液
1.0 1.0
酶的性质及其在消化中的作用实验
酶的性质及其在消化中的作用实验实验目的：探究酶的性质及其在消化中的作用。
实验原理：酶是一类特殊的蛋白质，它可以在特定的条件下加速化学反应的速率，而不改变反应本身。
在消化中，人体内分泌的多种酶可以分解不同的食物成分，以便身体吸收。
本实验中，我们将使用淀粉酶和蛋白酶来模拟消化过程，观察它们的作用。
实验步骤：1.将一些淀粉加入到一个试管中，然后添加适量的淀粉酶溶液。
2.用试管夹将试管放入恒温水浴中，保持温度在37°C左右，开始计时。
3.每隔一定时间，从试管中取出一滴淀粉溶液，滴入到碘液中。
4.观察碘液颜色的变化，如果淀粉已经分解完全，则碘液的颜色会从深蓝色变为黄色，表示淀粉已经分解完全。
5.重复以上步骤，分别用不同浓度的淀粉酶溶液进行试验，观察分解淀粉的速度和效果。
6.将一些蛋白质溶液加入到一个试管中，然后添加适量的蛋白酶溶液。
7.用试管夹将试管放入恒温水浴中，保持温度在37°C左右，开始计时。
8.每隔一定时间，从试管中取出一滴蛋白质溶液，滴入到碱性铜液中。
9.观察碱性铜液颜色的变化，如果蛋白质已经分解完全，则碱性铜液的颜色会从蓝色变为紫红色，表示蛋白质已经分解完全。
10.重复以上步骤，分别用不同浓度的蛋白酶溶液进行试验，观察分解蛋白质的速度和效果。
实验结果：在淀粉酶的作用下，淀粉分解为糖类，碘液的颜色会逐渐从深蓝色变为紫色，直到变为黄色，表示淀粉已经完全分解。
不同浓度的淀粉酶溶液对分解速度和效果有影响，浓度越高分解越快。
在蛋白酶的作用下，蛋白质分解为氨基酸，碱性铜液的颜色会逐渐从蓝色变为紫红色，直到变为无色，表示蛋白质已经完全分解。
不同浓度的蛋白酶溶液对分解速度和效果有影响，浓度越高分解越快。
实验结论：本实验表明，淀粉酶和蛋白酶都是一类特殊的酶，它们可以加速特定的化学反应，将复杂的食物分解成更简单的成分以便身体吸收。
酶的分解作用在一定范围内受到浓度、温度、pH值等因素的影响，因此在实际应用中需要根据具体情况进行调整。
酶的名词解释生物
酶的名词解释生物酶是一种生物催化剂，也被称为酶蛋白。
它在生物体内发挥重要的功能，促进各种生化反应的进行。
酶的作用主要在于加速化学反应的速率，使之能够在生命体内以适当的速度进行。
酶的基本特点是高选择性和高效率。
这些特点使得酶能够在低温和中性条件下催化特定的反应，而无需采用高温和强酸碱的条件。
这对于生物体来说非常重要，因为它们无法承受高温和强酸碱条件下的反应。
酶的命名通常以其催化作用的底物为依据。
常见的酶名以酶名和酶底物类型组成，如蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等。
随着科学研究的深入，越来越多的酶被发现并被命名，使得酶的分类系统变得愈加复杂。
不同酶具有不同的催化机制。
最常见的催化机制是酶与底物结合形成酶-底物复合物，接着复合物发生结构变化，使得底物发生化学变化，最后生成产物。
这种催化机制被称为亚基催化机制。
此外，还有一些酶具有分子催化机制，即酶分子本身参与化学反应，而不是形成复合物。
酶的催化作用是高度特异的，其选择性是由其结构决定的。
酶的活性中心由特定的氨基酸残基构成，它们通过氢键、离子键和范德华力等相互作用与底物结合，从而产生催化效应。
每个酶只能与特定的底物结合，这种选择性使得酶具有高效率的催化作用，同时避免了不必要的化学反应。
酶在生物体内发挥着重要的作用。
例如，消化酶能够降解食物中的蛋白质、碳水化合物和脂肪，使它们转化为小分子物质，为身体提供能量。
另外，酶也参与了新陈代谢、细胞信号传导、免疫系统等多种生物过程。
酶的活性受到许多因素的影响，其中温度、pH值和底物浓度是重要的因素。
不同的酶对这些因素的敏感性不同，各有适宜的工作条件。
通过调节这些因素，可以控制酶的活性，从而对生物体内的化学反应进行调节。
除了天然的酶，科学家还通过基因工程技术制造出不同特性的人工酶。
这些人工酶能够在实验室中应用于合成化学反应、制药工业和食品工业等领域。
人工酶的出现进一步拓展了酶的应用范围，使得酶催化技术在生物化学研究和工业生产中得到广泛应用。
酶的性质实验报告
一、实验目的1. 了解酶的基本概念和特性。
2. 探究pH值、温度等因素对酶活性影响。
3. 分析酶催化反应的速度与底物浓度的关系。
二、实验原理酶是一种生物催化剂，具有高效、专一、温和等特性。
酶的活性受多种因素影响，如pH值、温度、底物浓度等。
本实验通过观察不同条件下酶催化反应的现象，分析影响酶活性的因素。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：淀粉、碘液、NaOH、HCl、NaCl、蒸馏水、pH试纸、温度计等。
2. 实验仪器：试管、酒精灯、烧杯、移液器、计时器等。
四、实验步骤1. pH值对酶活性的影响（1）取三支试管，分别编号为1、2、3。
（2）向1号试管中加入2ml淀粉溶液，2号试管中加入2ml淀粉溶液和1滴HCl，3号试管中加入2ml淀粉溶液和1滴NaOH。
（3）观察并记录三支试管中淀粉溶液的颜色变化。
2. 温度对酶活性的影响（1）取三支试管，分别编号为1、2、3。
（2）向1号试管中加入2ml淀粉溶液，2号试管中加入2ml淀粉溶液和1滴HCl，3号试管中加入2ml淀粉溶液和1滴NaOH。
（3）将1号试管放入冷水浴中，2号试管放入温水浴中，3号试管放入热水浴中。
（4）观察并记录三支试管中淀粉溶液的颜色变化。
3. 底物浓度对酶活性的影响（1）取三支试管，分别编号为1、2、3。
（2）向1号试管中加入1ml淀粉溶液，2号试管中加入2ml淀粉溶液，3号试管中加入3ml淀粉溶液。
（3）向每支试管中加入1滴碘液，观察并记录三支试管中淀粉溶液的颜色变化。
五、实验结果与分析1. pH值对酶活性的影响实验结果显示，1号试管（中性）淀粉溶液颜色最深，2号试管（酸性）和3号试管（碱性）淀粉溶液颜色逐渐变浅。
这说明pH值对酶活性有显著影响，最适pH值约为中性。
2. 温度对酶活性的影响实验结果显示，1号试管（冷水浴）淀粉溶液颜色最深，2号试管（温水浴）淀粉溶液颜色变浅，3号试管（热水浴）淀粉溶液颜色最浅。
这说明温度对酶活性有显著影响，最适温度约为温水浴温度。
酶的特性名词解释
酶的特性名词解释酶（enzyme）是一类生物催化剂，其主要功能是加速化学反应速率并降低其能量活化需求，从而在细胞中实现生物转化。
酶在生物体内广泛存在，包括植物、动物和微生物，在生物学和生物工程领域具有重要的应用价值。
下面将对酶的一些重要特性进行详细解释。
1. 底物特异性（substrate specificity）酶的底物特异性是指酶与底物之间的选择性结合。
不同的酶对特定的底物有高度的选择性，只能与特定的底物发生相互作用。
这种底物特异性是由酶的活性中心及其结构决定的。
例如，淀粉酶只能催化淀粉分子的降解，而不能催化蛋白质或脂类的反应。
2. 酶促反应的速率酶促反应的速率远远高于非酶催化的化学反应速率。
这是由于酶能降低化学反应的能量活化需求。
酶的活性通常用单位时间内产生的产物的数量来衡量，常用单位是摩尔/秒。
酶促反应的速率受到多种因素的影响，包括底物浓度、酶浓度、温度和pH值等。
3. 反应条件的适应性酶对环境条件的适应性较强，可以在相对温和的条件下发挥其催化作用。
酶活性通常在特定的温度和pH范围内最高。
如果温度过高或pH值偏离最适范围，酶的结构会发生破坏，从而导致活性丧失或失活。
这一特性使得酶在生物体内能够稳定地催化众多生物转化反应。
4. 酶的可逆性和不可逆性酶催化的反应可以是可逆的或不可逆的，取决于反应的热力学和动力学条件。
可逆反应是指催化反应的产物可以再次转变为底物，形成平衡状态。
不可逆反应则是指催化反应形成的产物无法再转变为底物。
大部分酶催化反应属于可逆反应，但也有一些催化反应是不可逆的，例如酶在某些情况下能将底物转化为产物，但产物无法再逆向转化为底物。
5. 酶的酶促作用速度酶的酶促作用速度取决于酶底物复合物的形成和解离速度。
酶与底物结合后形成酶底物复合物，这一步骤受到底物浓度和酶与底物的亲和力影响。
酶底物复合物形成后，酶催化底物转化为产物，然后酶与产物解离，重新进入反应循环。
这两个步骤的速度共同决定了酶的酶促作用速度。
生化实验六 酶的基本性质
课程名称： 生物化学实验 指导老师： 史影 成绩： 实验名称： 酶的基本性质实验——底物专一性、激活剂和抑制剂、最适温度 同组学生姓名： 陈莞尔，潘盛警Ⅰ.酶的基本性质——底物专一性 一、实验目的1.了解酶的专一性。
2.掌握验证酶的专一性的基本原理及方法。
3.学会排除干扰因素，设计酶学实验。
二、基本原理酶是具有高度专一性的有催化功能的蛋白质。
酶蛋白结构决定了酶的功能——酶的高效性，酶促反应要比无机催化反应快数十倍。
酶催化的一个重要特点是具有高度的底物专一性，即一种酶只能对一种或一类底物其催化作用，对其他底物无催化反应。
根据各种酶对底物的选择程度不同，可分成下列几种：1.相对专一性。
一种酶能催化一类具有相同化学键或基团的物质进行某种类型的反应。
2.绝对专一性：有些酶对底物的要求非常严格只作用于一种底物，而不作用于任何其他物质。
如脲酶只能催化尿素进行水解而生成二氧化碳和氨。
如麦芽糖酶只作用于麦芽糖而不作用其它双糖，淀粉酶只作用于淀粉，而不作用于纤维素。
3.立体异构专一性：有些酶只有作用于底物的立体异构物中的一种，而对另一种则全无作用。
如酵母中的糖酶类只作用于D-型糖而不能作用于L-型的糖。
本实验以唾液淀粉酶和蔗糖酶对淀粉和蔗糖水解反应的催化作用来观察酶的专一性。
用Benedict 试剂检测反应产物。
Benedict 试剂是碱性硫酸铜溶液，具有一定的氧化能力，能与还原性的半缩醛羟基发生氧化还原反应，生成砖红色氧化铜沉淀。
Na 2CO 3+ 2H 2O 2NaOH + H 2CO 3 CuSO 4+ 2NaOH Cu(OH)2+ Na 2SO 4专业：____生物工程 姓名：_____陈传鑫 学号：___3090104963 日期：____2011.3.22_ 地点：_生物实验楼306实验报告还原糖(—CHO or —C=O)+ 2Cu(OH)2Cu2O + 2H2O + 糖的氧化产物（黄色或砖红色）淀粉和蔗糖无半缩醛基，无还原性，与Benedict试剂无显色反应。
酶的高效性和专一性
实验一酶的高效性和专一性2药品：铁粉（可用Fe3O4代替）、H2O2、蔗糖、可溶性淀粉、5水硫酸铜、枸橼酸钠、1水碳酸钠、纯净水、氯化钠、设备：滤纸、马铃薯、脱脂棉或、一次性纸杯研钵、漏斗、电炉、试剂瓶、药匙、玻棒、量筒、容量瓶、烧杯内容：过氧化物酶的高效性，唾液淀粉酶专一性实验二温度对酶活力的影响 2淀粉、纯净水、氯化钠、KI、I2、标签纸、滤纸、脱脂棉或、一次性纸杯漏斗、电炉、试剂瓶、药匙、玻棒、量筒、容量瓶、烧杯不同温度对唾液淀粉酶活力的影响实验三不同pH对唾液淀粉酶活力的影响pH对酶活力的影响 2淀粉、枸橼酸钠、1水碳酸钠、纯净水、氯化钠、KI、I2、磷酸氢二钠、枸橼酸、滤纸、马铃薯、脱脂棉或、一次性纸杯漏斗、电炉、试剂瓶、药匙、玻棒、量筒、容量瓶、烧杯实验四酶的激活与抑制作用唾液淀粉酶活力的激活与抑制 2淀粉、5水硫酸铜、纯净水、氯化钠、KI、I2、滤纸、马铃薯、脱脂棉或、一次性纸杯漏斗、电炉、试剂瓶、药匙、玻棒、量筒、容量瓶、烧杯过氧化物酶（POD）活性的测定实验五马铃薯中过氧化物酶的提取、测定4NaH2PO4、Na2HPO4、愈伤木酚、过氧化氢、纯净水、滤纸、标签纸试管架、试管、移液管、移液管、量筒100ml、容量瓶50ml、容量瓶25ml、烧杯50ml、烧杯100ml、漏斗、离心机(低速)、离心管(低速)、721型分光光度计、分析天平、秒表、研钵实验六柱色谱法分离色素4中性氧化铝（100—200目）、碱性氧化铝（100—200目）、95%乙醇、亚甲基蓝、荧光黄、石英砂、纯净水、滤纸、脱脂棉、石英砂、标签纸25毫升滴定管、分液漏斗（250毫升）、烧杯、滴管、试剂瓶、药匙、玻棒、容量瓶、烧杯柱色谱法分离色素实验七大蒜细胞SOD的提取与分离2磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、氯仿、丙酮、HCl、纯净水、大蒜研钵、试剂瓶、分析天平、药匙、离心机、玻棒、水浴锅、分光光度计、容量瓶、烧杯、容量瓶实验八超氧化物岐化酶的活性测定 2磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、tris、碳酸氢二钠、碳酸二氢钠、EDTA、肾上腺素液、邻苯三酚、HCl、纯净水、大蒜试剂瓶、分析天平、药匙、离心机、玻棒、水浴锅、分光光度计、容量瓶、烧杯容量瓶实验九酵母细胞的固定化4干酵母、Cacl2、海藻酸钠、蒸馏水、蔗糖、注射器、尿糖试纸烧杯、玻璃棒、试剂瓶、天平、药匙、滴管、玻棒、容量瓶、酒精灯、注射器、电炉、尿糖试纸实验十蛋白质标准曲线的制作 2考马斯亮蓝G－250、95%乙醇、85% H3PO4、牛血清血蛋白(BSA)、NaCl、纯净水、鸡蛋、移液枪头分光光度计、移液管（10mL）、试剂瓶、移液枪、药匙、试管及试管架、玻棒、容量瓶、烧杯实验十一果胶酶在果汁生产上的应用 2食品级果胶酶、抗坏血酸、纯净水、新鲜苹果（或其他应季水果）分光光度计、天平、试剂瓶、榨汁机、药匙、水浴锅、玻棒、压榨机或离心分离机、容量瓶、烧杯生化分析实训1.蛋白质等电点及两性性质2.酶的基本性质测试3.柱色谱法分离物质4.酶活力的测定5.还原糖含量测定6.蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳。
酶的等电点
酶的等电点引言酶是一类生物催化剂，能够促进化学反应的进行。
酶在生物体内起着至关重要的作用，参与调节代谢、信号传导、细胞分裂等一系列生命活动。
了解酶的性质对于理解生物体内的生化过程具有重要意义。
酶的等电点是酶学中一个重要的概念，本文将对酶的等电点进行深入探讨。
什么是等电点？等电点（Isoelectric Point，pI）是指酶在溶液中呈电中性的pH值。
在等电点条件下，酶的带电量为零，即正电荷和负电荷的总数相等。
等电点是酶的一个重要性质，可以通过等电点来了解酶的电荷特性以及在不同pH值下的稳定性。
等电点的计算酶的等电点可以通过以下公式进行计算：pI = (pKa1 + pKa2) / 2其中，pKa1和pKa2分别代表酶中带负电荷和带正电荷的离解常数的负对数。
这两个离解常数可以通过实验测定或者计算得到。
酶的带电性质与等电点酶的带电性质与其氨基酸组成密切相关。
氨基酸是构成蛋白质的基本组成单元，酶作为一种蛋白质也由氨基酸组成。
氨基酸分为酸性氨基酸、碱性氨基酸和中性氨基酸三类。
•酸性氨基酸：包括天冬氨酸（Aspartic Acid，Asp）和谷氨酸（Glutamic Acid，Glu）。
这两种氨基酸在酶的等电点以下带负电荷。
•碱性氨基酸：包括赖氨酸（Lysine，Lys）和精氨酸（Arginine，Arg）。
这两种氨基酸在酶的等电点以上带正电荷。
•中性氨基酸：包括丝氨酸（Serine，Ser）、苏氨酸（Threonine，Thr）、天冬酰胺（Asparagine，Asn）、谷氨酰胺（Glutamine，Gln）等。
这些氨基酸在酶的等电点附近不带电荷。
根据酶中氨基酸的组成，可以预测酶的等电点。
如果酶中酸性氨基酸的数量多于碱性氨基酸的数量，那么酶的等电点会偏向酸性；反之，如果碱性氨基酸的数量多于酸性氨基酸的数量，那么酶的等电点会偏向碱性。
等电点的意义等电点对于酶的稳定性和活性具有重要影响。
在等电点附近，酶的带电性最低，分子内外的电荷平衡，因此酶在等电点附近的稳定性较高。
酶工程实验大纲
湖北大学酶工程实验（0818800193）实验教学大纲（第2版）生命科学学院生化教研室2014年7月前言课程名称：酶工程实验实验学时：16学时适用专业：生物工程课程性质：必修一、实验课程简介酶工程是生物工程的主要内容之一，是现代酶学和生物工程学相互结合而发展起来的一门新的技术学科。
它将酶学、微生物学的基本原理与化工、发酵等工程技术有机结合起来，并随着酶学研究的迅速发展，特别是酶的广泛应用而在国民生产生活中日益发挥着越来越重要的作用。
酶工程实验课是生物工程等本科实验教学的一个重要组成部分，通过实验教学可以加强学生对酶工程基本知识和基本理论的理解，掌握现代酶学与相关技术的有关的基本的实验原理与技能。
在实验过程中要求学生自己动手，分析思考并完成实验报告。
酶工程实验性质有基础性、综合性、设计（创新）性三层次。
二、课程目的本实验课程主要根据酶工程的三大块内容即酶的生产、酶的改性与酶的应用来设计安排实验，通过这些实验内容，使学生深入理解酶工程课程的基本知识；巩固和加深所学的基本理论；掌握酶工程中基本的操作技能。
同时，通过实验培养学生独立观察、思考和分析问题、解决问题和提出问题的能力，养成实事求是、严肃认真的科学态度，以及敢于创新的开拓精神；并在实验中进一步提高学生的科学素养。
三、考核方式及成绩评定标准考核内容包括实验过程中的操作情况，实验记录及结果的准确性，实验报告的书写及结果分析，思考题的回答情况，仪器设备的使用情况及遵守实验室规章制度的情况等，根据这些方面进行成绩评判和记录，综合给出实验总成绩。
四、实验指导书及主要参考书1．魏群：生物工程技术实验指导，高等教育出版社，2002年8月。
2．禹邦超：酶工程（附实验），华中师范大学出版社，2007年8月五、实验项目实验项目一览表（可选）实验类型：演示性、验证性、综合性、设计性、其它实验一双酶法制备淀粉糖（3课时）一、实验原理目前国内外淀粉糖的生产大都采用双酶法。
蛋白质性质实验
生化试验指导实验一：蛋白质及氨基酸的呈色反应目的：1.了解构成蛋白质的基本结构单位及主要连接方式。
2.了解蛋白质和某些氨基酸的呈色反应原理。
3.学习几种常用的鉴定蛋白质和氨基酸的方法。
（一）双缩脲反应实验原理尿素加热至180℃左右生成双缩脲并放出一分子氨。
双缩脲在碱性环境中能与cu2+结合生成紫红色化合物，此反应称为双缩脲反应。
蛋白质分子中有肽键，其结构与双缩脲相似，也能发生此反应。
可用于蛋白质的定性或定量测定。
•一切蛋白质或二肽以上的多肽都有双缩脲反应，但有双缩脲反应的物质不一定都是蛋白质或多肽。
实验器材及试剂器材：试管、酒精灯、试管夹、试管架试剂：（1）尿素（2）10%氢氧化钠溶液（3）1%硫酸铜溶液（4）2％卵清蛋白溶液实验步骤1.取少量尿素结晶，放在干燥试管中。
用微火加热使尿素熔化。
熔化的尿素开始硬化时，停止加热，尿素放出氨，形成双缩脲。
冷后，加10％氢氧化钠溶液约1毫升，振荡混匀，再加1％硫酸铜溶液1滴，再振荡。
观察出现的粉红颜色。
避免添加过量硫酸铜，否则，生成的蓝色氢氧化铜能掩盖粉红色。
2.向另一试管加卵清蛋白溶液约l毫升和10％氢氧化钠溶液约2毫升，摇匀，再加1％硫酸铜溶液2滴，随加随摇，观察紫玫色的出现。
（二）茚三酮反应实验原理•除脯氨酸、羟脯氨酸和茚三酮反应产生黄色物质外，所有α—氨基酸及一切蛋白质都能和茚三酮反应生成蓝紫色物质。
•该反应十分灵敏，1：1 500 000浓度的氨基酸水溶液即能给出反应，是一种常用的氨基酸定量测定方法。
•茚三酮反应分为两步，第一步是氨基酸被氧化形成CO2、NH3和醛，水合茚三酮被还原成还原型茚三酮；第二步是所形成的还原型茚三酮同另一个水合茚三酮分于和氨缩合生成有色物质。
实验器材及试剂器材：试管、酒精灯、试管夹、试管架试剂：(1)蛋白质溶液：2％卵清蛋白或新鲜鸡蛋清溶液(蛋清：水＝1：9)(2)0.5％甘氨酸溶液(3)0.1％茚三酮水溶液(4)0.1％茚三酮—乙醇溶液实验步骤(1)取2支试管分别加入蛋白质溶液和甘氨酸溶液1毫升，再各加0.5毫升0.1％茚三酮水溶液，混匀，在沸水浴中加热1—2分钟，观察颜色由粉色变紫红色再变蓝。
生化实验六酶的基本性质
⑸Benedict试剂；
四、实验器材与仪器
1.漏斗，2.脱脂棉花；3.恒温水浴（37℃，100℃）；4.量筒；5.试管；6.烧杯；7.吸量管。
五、实验内容
酶的专一性实验，按下表操作。
检查试剂
淀粉酶的专一性
蔗糖酶的专一性
编号
①
②
③
④
⑤
⑥
⑦
⑧
⑨
0.5%淀粉（0.3%NaCl）
七、思考题
1．观察酶专一性实验为什么要设计这3组实验？每组各有何意义？蒸馏水有何用？
答：第一组作为整个实验的空白对照组，检测Benedict试剂对实验结果的颜色有何影响。第二组作为检测淀粉酶的专一性实验组，第三组作为检测蔗糖酶的专一性的实验组。蒸馏水作为每一个组中的空白对照，与组内其余两组进行对照。
⑵④号试管呈砖红色说明试管内淀粉被水解，⑤号试管呈蓝色说明试管内蔗糖未水解，⑥号试管呈蓝色说明无还原糖，从这三支试管看出唾液淀粉酶只对淀粉有催化活性，不能催化蔗糖水解，具有对淀粉的底物专一性；
⑶⑧号试管呈黄绿色，说明试管中部分蔗糖被水解，但未水解完全，⑦号试管呈蓝色说明淀粉未水解，⑨号试管呈蓝色说明无还原糖，从这三支试管看出蔗糖酶只对蔗糖的水解有催化作用，对淀粉无催化作用，具有对蔗糖的底物专一性。
2.本实验中，1，2，3，4管各有何用意？为什么要设计第3管和第4管？
答：1管可观察抑制剂对反应影响的现象，2管可观察激活剂对反应影响的现象，第3管可以将1管中的Na+和2管中的SO42-对反应的影响去除，4管作为空白对照。
3.抑制剂与变性剂有何不同？试举例说明。
答：抑制剂只改变酶的催化活性，并不使蛋白质变性，其影响是可逆的；变性剂破坏了蛋白质的高级结构，使蛋白质变性，并且多数变性剂的影响是不可逆的。如：Cu2+是唾液淀粉酶的抑制剂，但如果将Cu2+去除淀粉酶的活性又可以变为正常水平。
酶及其理化性质
继续探究：
若2号试管中也出现砖红色沉淀，分析原因可 能有哪些？ 1.蔗糖溶液放置时间过长
2.试管不干净 3.蔗糖本身不纯净
该实验中能将斐林试剂改为碘液吗？ 不能
根据酶的专一性，催化蔗糖水解的酶应是哪一 种酶？ 蔗糖酶 该实验若用唾液淀粉酶的话，第4步选择多少 温度保温比较合适？ 37度左右
酶的多样性
因变量
变量：实验过程中可以变化的因素。
自变量：人为改变的变量。 因变量：随着自变量的变化而变化的变量。
除自变量以外，实验过程中可能还 无关变量： 会存在一些可变因素，对实验结果 造成影响.
对照实验：除了一个因素以外，其余因 素都保持不变的实验。
对照组： 实验设计原则:对照原则 单一变量原则 实验组：
酶的特性之三：作用条件温和
酶促反应一般是在常温、常压、适宜的PH等 温和条件下进行。 意义： 符合生物体存在的基本环境 除温度、PH外，酶促反应还与_________有关
酶的浓度、底物浓度
坐标图？
影响酶促反应速率的其它因素：
酶的浓度：反应速率随
酶浓度的升高而加快。
酶 促 反 应 速 率
酶的浓度
底物浓度：在一定浓度
酶在细胞代谢中的作用
酶在细胞代谢中的重要作用 ——催化作用
发酵与活细胞有关，是整 个细胞在起作用
引起发酵的是细胞中的某些物 质，这些物质只有在细胞死亡 并裂解后才发挥作用。
酵母细胞中的某些物质能够在酵母细胞破碎后继续 起作用，就像在或酵母细胞中一样。
酶是蛋白质
二 、酶的概念及特性:
酶的来源
酶(Enzyme)是活细胞产生的一 类具有生物催化作用的有机物.
温度对酶活性的影响：
高温使酶变性 失活,活性不能 使用加酶洗衣粉时用什么温度的水去污效果好？ 恢复 ; 低温仅降 为什么发烧时食欲不振，体力不支，甚至死亡？ 低酶活性,不失 活,当温度适宜 时活性可恢复.
酶催化反应的实验优化及分析
酶催化反应的实验优化及分析酶催化反应是现代生化学中非常重要的一种反应，其在化学合成和医药、食品等行业都有广泛的应用。
为了了解酶催化反应的机理，优化反应条件，开展实验研究是必要的。
一、酶催化反应的基本原理酶是生物大分子催化剂，具有高度的专一性和催化效率。
酶在生化反应中通过打破反应物的化学键，促进反应物转化成产物。
酶催化反应需要留意的是反应物的浓度、温度、pH值、酶的浓度、酶的种类等一系列反应条件都会对反应进程造成不同程度的影响。
二、实验优化的步骤为了了解酶催化反应的机理，优化反应条件，开展实验研究是必要的。
实验优化的步骤分为以下几步：1.确定实验目的和研究范围首先我们需要确定实验的目的，以及所研究的酶催化反应的研究范围。
例如，我们可以选择酶的种类和浓度、反应物的浓度、温度、时间等作为考虑因素。
2.选择恰当的实验设计实验设计是确定实验方法和步骤的重要步骤。
我们应根据实验目的、研究范围和条件要求，选择最为合适的实验设计方案。
设计好实验后，根据实验过程中的实际情况进行不断调整，以达到最佳实验效果。
3.进行反应条件的优化反应条件的优化过程是实验的核心，其中温度、pH、反应物浓度、酶浓度等实验条件都需要进行科学优化。
因为反应条件越优化，反应效率越高，所得数据也将更有参考价值。
4.进行数据处理和分析在完成反应后，需对实验数据进行统计、处理和分析。
根据实验数据的特点，采取不同的数据处理方法，例如绘制反应曲线、计算反应时间、分析反应产物等方法。
在分析实验数据时，还可以采用统计学方法，比如t检验和方差分析等。
三、实验优化的一些技巧1.选取合适的酶和反应物：在进行实验优化的过程中，我们应选出适合本实验的酶种类和反应物。
这将有利于提高反应效率。
同时，反应物的浓度应适中，过高过低都不利于酶催化反应的进行。
2.注意反应条件的温、pH值：温度和pH值是影响酶催化反应的重要因素。
在进行实验过程中应特别注意氢离子浓度对反应速度的影响，一般而言，酶的最佳工作pH值在弱酸性或中性的条件下。
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课程名称： 生物化学实验 指导老师： 史影 成绩： 实验名称： 酶的基本性质实验——底物专一性、激活剂和抑制剂、最适温度 同组学生姓名： 陈莞尔，潘盛警Ⅰ.酶的基本性质——底物专一性 一、实验目的1.了解酶的专一性。
2.掌握验证酶的专一性的基本原理及方法。
3.学会排除干扰因素，设计酶学实验。
二、基本原理酶是具有高度专一性的有催化功能的蛋白质。
酶蛋白结构决定了酶的功能——酶的高效性，酶促反应要比无机催化反应快数十倍。
酶催化的一个重要特点是具有高度的底物专一性，即一种酶只能对一种或一类底物其催化作用，对其他底物无催化反应。
根据各种酶对底物的选择程度不同，可分成下列几种：1.相对专一性。
一种酶能催化一类具有相同化学键或基团的物质进行某种类型的反应。
2.绝对专一性：有些酶对底物的要求非常严格只作用于一种底物，而不作用于任何其他物质。
如脲酶只能催化尿素进行水解而生成二氧化碳和氨。
如麦芽糖酶只作用于麦芽糖而不作用其它双糖，淀粉酶只作用于淀粉，而不作用于纤维素。
3.立体异构专一性：有些酶只有作用于底物的立体异构物中的一种，而对另一种则全无作用。
如酵母中的糖酶类只作用于D-型糖而不能作用于L-型的糖。
本实验以唾液淀粉酶和蔗糖酶对淀粉和蔗糖水解反应的催化作用来观察酶的专一性。
用Benedict 试剂检测反应产物。
Benedict 试剂是碱性硫酸铜溶液，具有一定的氧化能力，能与还原性的半缩醛羟基发生氧化还原反应，生成砖红色氧化铜沉淀。
Na 2CO 3+ 2H 2O 2NaOH + H 2CO 3专业：____生物工程 姓名：_____陈传鑫 学号：___3090104963 日期：____2011.3.22_ 地点：_生物实验楼306实验报告CuSO4+ 2NaOH Cu(OH)2+ Na2SO4还原糖(—CHO or —C=O)+ 2Cu(OH)2Cu2O + 2H2O + 糖的氧化产物（黄色或砖红色）淀粉和蔗糖无半缩醛基，无还原性，与Benedict试剂无显色反应。
淀粉被淀粉酶水解后产生葡萄糖，蔗糖被蔗糖酶水解后产生果糖和葡萄糖，产物都是还原糖，因此能被Benedict试剂氧化生成砖红色的Cu2O沉淀。
三、实验材料与试剂1、实验材料⑴蔗糖酶(样品Ⅳ）；⑵新鲜唾液（含唾液淀粉酶）；2、实验试剂⑴蔗糖酶液蔗糖酶液(样品Ⅳ）加蒸馏水适当稀释，备用；⑵唾液淀粉酶液（学生自制）取0.5mL唾液至25ml量筒中，用蒸馏水（稀释）到25ml，用棉花过滤备用。
唾液稀倍数因人而异，可稀释50～400倍，甚至更高；⑶5%蔗糖（A.R.）溶液；⑷0.5%淀粉溶液（含0.3%NaCl）；⑸Benedict试剂；四、实验器材与仪器1.漏斗，2.脱脂棉花；3.恒温水浴（37℃，100℃）；4.量筒；5.试管；6.烧杯；7.吸量管。
五、实验内容酶的专一性实验，按下表操作。
检查试剂淀粉酶的专一性蔗糖酶的专一性编号①②③④⑤⑥⑦⑧⑨0.5%淀粉3 3 3（0.3%NaCl）溶液(ml)5%蔗糖溶液3 3 3(ml)蒸馏水3 3 3(ml)唾液淀粉酶液1 1 1(ml)蔗糖酶溶液1 1 1(ml)摇匀，置37℃水浴保温10minBenedict试2 2 2 2 2 2 2 2 2剂(ml)摇匀，置沸水浴煮2～3min记录观察结果蓝色蓝色蓝色砖红色蓝色蓝色蓝色黄绿色蓝色六、结果分析和讨论结果：⑴①、②、③号试管均呈硫酸铜的蓝色，说明这3支试管内无还原糖，淀粉和蔗糖均未水解；⑵④号试管呈砖红色说明试管内淀粉被水解，⑤号试管呈蓝色说明试管内蔗糖未水解，⑥号试管呈蓝色说明无还原糖，从这三支试管看出唾液淀粉酶只对淀粉有催化活性，不能催化蔗糖水解，具有对淀粉的底物专一性；⑶⑧号试管呈黄绿色，说明试管中部分蔗糖被水解，但未水解完全，⑦号试管呈蓝色说明淀粉未水解，⑨号试管呈蓝色说明无还原糖，从这三支试管看出蔗糖酶只对蔗糖的水解有催化作用，对淀粉无催化作用，具有对蔗糖的底物专一性。
七、思考题1．观察酶专一性实验为什么要设计这3组实验？每组各有何意义？蒸馏水有何用？答：第一组作为整个实验的空白对照组，检测Benedict试剂对实验结果的颜色有何影响。
第二组作为检测淀粉酶的专一性实验组，第三组作为检测蔗糖酶的专一性的实验组。
蒸馏水作为每一个组中的空白对照，与组内其余两组进行对照。
2．将酶液煮沸10min后，重做二、三的操作，观察有何结果？答：二、三组的实验结果将和一组相同，即每组中3支试管都呈蓝色，因为酶在煮沸过程中已经变性，失去催化活性，故不能催化各自对应底物的水解反应。
3．在此实验中，为什么要用0.5%淀粉(0.3%NaCl)溶液？0.3%NaCl的作用是什么？答：0.3%NaCl中的Cl-是作为激活剂激活唾液淀粉酶的活性，使实验结果不至于因为唾液淀粉酶的活性不足而导致不同。
Ⅱ. 影响酶活性的因素——激活剂和抑制剂一、实验目的和要求1. 了解激活剂和抑制剂对酶促反应速度的影响。
2. 学习检定激活剂和抑制剂影响酶促反应速度的原理和方法。
二、实验基本原理在酶促反应过程中，酶的活性常收到某些物质的影响，有些物质能使酶的活性增加，称为激活剂；某些物质它们并不引起酶蛋白变性，但能使酶分子上的某些必需基团（主要是指酶活性中心上的一些基团）发生变化，因而引起酶活力下降，甚至丧失，致使酶反应速度降低，称为酶的抑制剂。
酶的激活剂种类：1、一些简单的无机离子，如Mg2+、Cl-等；2、一些中等大小的有机分子，如抗坏血酸等也是激活剂，它们对某些含巯基的酶具有激活作用；3、有些酶的催化作用易受某些抑制剂的影响，因而能除去抑制剂的物质也可称为激活剂，如EDTA能除去重金属，因而能解除重金属对酶的抑制作用。
4、具有蛋白质性质的大分子物质，这些激活剂是指可对某些无活性的酶原起作用的酶。
酶的抑制剂有许多种：如重金属离子（Ag+、Hg2+、Pb2＋、Cu2＋等）、CO、氯化物、H2S、砷化物、氟化物、生物碱、有机磷农药等都是抑制剂。
少量的激活剂或抑制剂就能影响酶的活性，而且常具有特异性。
值得注意的是激活剂和抑制剂不是绝对的，各种激活剂对酶的作用是不同的。
本实验利用淀粉被水解的不同阶段产物与碘有不同颜色反应，定性观察唾液淀粉酶在酶促反应中激活或抑制现象。
淀粉经酶促水解为葡萄糖的不同阶段的产物与碘作用的颜色反应如下：淀粉紫色糊精红色糊精无色糊精麦芽糖葡萄糖I2显蓝色显紫色显红色不显色不显色不显色（碘色）（碘色）（碘色）仍为多糖（有还原性）本实验中，Cl- 为唾液淀粉酶的激活剂；Cu2+为唾液淀粉酶的抑制剂。
利用淀粉酶别水解不同阶段产物与碘有不同的呈色反应，观察唾液淀粉酶的酶促反应中的激活和抑制现象。
水解程度通过水解混合物遇碘溶液所呈现的颜色变化判断。
三、实验材料与试剂1、实验材料新鲜唾液2、实验试剂⑴唾液淀粉酶（学生自制）取唾液1ml至25ml量筒中，用蒸馏水稀释至25ml，用棉花过滤备用。
唾液稀释倍数因人而异，可稀释50～400倍，甚至更高。
⑵0.1% 淀粉溶液⑶1.0% 氯化钠溶液⑷1.0% 硫酸铜溶液⑸1.0% 硫酸钠溶液⑹碘化钾-碘液四、实验器材和仪器1.试管及试管架2.量筒3.漏斗4.脱脂棉花5.点滴板6.吸量管7.恒温水浴（37℃）五、实验步骤试管编号试剂处理123 40.1%淀粉溶液(ml) 33331% 硫酸铜溶液(ml) 11% 氯化钠溶液(ml) 11% 硫酸钠溶液(ml) 1蒸馏水(ml) 1唾液淀粉酶(ml) 1 1 1 1混匀，37℃恒温水浴，保温10min碘化钾-碘液（滴） 1 1 1 1记录观察结果深蓝偏黑红棕色深蓝色深蓝色注意：⑴找出准确的保温时间，是本实验是实验能否成功的关键步骤之一，唾液淀粉酶液浓度可根据个人情况而定，通过37℃水浴溶保温计时，反应时间最好在8～15min以内，只有确定准确的保温时间才能进行实验。
（2）加入酶液后，务必充分摇匀，保证酶与全部淀粉液接触的反应才能得到理想的颜色梯度变化结果。
（3）碘化钾–碘液不要过早地加到点滴板上，以免碘液挥发，影响显色效果。
六、结果讨论与分析结果：①反应时间在17min中时能明显区分各管颜色不同。
②试管1中颜色最深，说明CuSO4可以抑制淀粉酶的活性；试管2中颜色最浅，基本呈碘色，故淀粉酶活性最高，说明NaCl可以激活淀粉酶的活性；试管3、4中颜色基本一致，且深浅居于试管1、2之间，淀粉酶活性一般，说明Na+、SO42-对淀粉酶活性都没有影响。
故总体上看，可以得出Cl-是唾液淀粉酶的激活剂，Cu2+是唾液淀粉酶的抑制剂。
③同时，因为各管的结果颜色都偏深，所以使用的唾液淀粉酶样品活性不高，这与区分各管颜色差别需要反应时间较长（17min）相符合。
七、思考题1. 激活剂可分哪几类？本实验中NaCl、硫酸铜是属于哪种类型？答：激活剂可分为：简单无机离子、中等大小有机分子、能出去抑制剂的物质、具有蛋白质性质的大分子物质等。
NaCl属于简单无机离子；CuSO4属于重金属抑制剂。
2. 本实验中，1，2，3，4管各有何用意？为什么要设计第3管和第4管？答：1管可观察抑制剂对反应影响的现象，2管可观察激活剂对反应影响的现象，第3管可以将1管中的Na+和2管中的SO42-对反应的影响去除，4管作为空白对照。
3. 抑制剂与变性剂有何不同？试举例说明。
答：抑制剂只改变酶的催化活性，并不使蛋白质变性，其影响是可逆的；变性剂破坏了蛋白质的高级结构，使蛋白质变性，并且多数变性剂的影响是不可逆的。
如：Cu2+是唾液淀粉酶的抑制剂，但如果将Cu2+去除淀粉酶的活性又可以变为正常水平。
Ⅲ. 影响酶活性的因素——温度，最适温度测定一、实验目的和要求1. 了解温度对酶活力的影响；2. 学习测定最适温度的原理和方法；二、实验基本原理酶的催化反应受温度影响很大，每一种酶所催化的反应，在一定条件下，仅在某一温度范围内表现出最大的活力，即反应速度最大时的温度，这个温度称为该酶促反应的最适温度，高于或低于最适温度时，反应速度逐渐下降。
因此，酶促反应与温度的关系，用酶活力对温度作图，通常具有钟罩形曲线特征。
温度与酶活力的关系测定是选择一定的条件，把底物浓度、酶浓度、反应时间、pH等固定在最适状态下，然后在一系列不同温度条件下，进行反应初速度测定，以酶反应初速度对温度作图，可以得一个钟罩形的曲线，即为温度—酶活性曲线，在某温度有一酶活力最大值，这个温度即为最适温度。
实验①利用唾液淀粉酶为试验对象，在0℃～65℃之间选择不同的温度，进行酶活力测定。
根据淀粉被唾液淀粉酶水解的程度的不同，遇碘呈现颜色的变化来判断酶活力的大小及最适温度。
实验②采用蔗糖酶为试验对象，在室温至75℃之间选择不同温度进行酶活力测定。
蔗糖酶的活力常以其反应产物还原糖（葡萄糖）的生成量来表示。