植物色素的提取 (2)
色素的提取和分离实验
色素的提取和分离实验1. 引言色素的提取和分离实验是化学实验中常见的一种操作,通过该实验可以获取并分离出自然界中存在的不同类型的色素。
色素是一种可以赋予物体颜色的化合物,广泛存在于植物、动物和微生物体内。
本文介绍了常见的色素提取和分离实验方法,以及实验步骤和操作要点。
2. 实验材料和设备•新鲜的植物叶片(如菠菜、豆苗等)•高纯度酒精•碗、刀、研钵、滴管等常规实验器材3. 实验步骤步骤一:准备植物叶片样品1.挑选新鲜的植物叶片,将其洗净并在干燥纸上晾干,避免叶片的水分对后续操作产生影响。
2.将干燥的叶片切碎成细小的碎末,以便更好地提取色素。
步骤二:提取色素1.将切碎的叶片放入研钵中,加入适量的高纯度酒精。
2.用滴管将酒精与叶片充分混合,使酒精溶解叶片中的色素。
3.将混合液放置在室温下,静置一段时间(通常为1-2小时),以便色素彻底溶解。
4.使用滤纸过滤混合液,以去除叶片残渣和杂质。
5.将滤液收集到干净的容器中,即可得到植物叶片中的色素提取物。
步骤三:分离色素1.取得色素提取物后,可以进行色素的分离操作。
2.首先,将色素提取物平均分装到数个试管中。
3.选择一种适合的溶剂(如醋酸乙酯、正己烷等)加入到试管中,并充分摇晃混合。
4.观察溶剂与色素的相互作用,一些色素会溶解在溶剂中,而一些色素则会沉淀出来。
5.根据实验的需要,可以选择适当的溶剂进行多次分离,以得到更纯净的色素。
4. 注意事项•在实验过程中,需要注意安全操作,避免饮食、吸烟等不当行为。
•使用化学试剂时,请佩戴实验手套和防护眼镜,以免对皮肤和眼睛造成伤害。
•实验结束后,注意及时清洗实验器材,保持实验室的整洁和安全。
5.通过色素的提取和分离实验,我们可以将色素从植物叶片中提取出来,并进一步分离出不同类型的色素。
这对于研究色素的性质和应用具有重要意义。
通过实践操作,我们可以更好地理解色素的提取和分离原理,培养科学实验的能力和实践动手能力。
本实验不仅适用于化学、生物学等专业的教学实验,也可作为科普实验和科学兴趣活动的一种选择。
植物中色素的提取
植物中色素的提取摘要:脂溶性色素主要是叶绿素、叶黄素与胡萝卜素,三者常共存。
此外尚有藏红花素、辣椒红素等。
除叶绿素外,多为四萜衍生物。
这类色素不溶于水。
难溶于甲醇,易溶于高浓度乙醇、乙醚、氯仿、苯等有机溶剂。
胡萝卜素在乙醇中也不溶。
叶绿素等在制备中草药制剂或提取其他有效成分时常需作为杂质去除,以使药物纯化,中草药(特别是叶类、全草类)的乙醇提取液中含有多量叶绿素、可在浓缩液中加水使之沉出,也可通过氧化铝、碳酸钙等吸附剂而除去。
叶绿素本身有抑菌作用,可制备成消炎的药物。
水溶性色素主要为花色甙类,又称花青素,普遍存在于花中。
溶于水及乙醇,不溶于乙醚、氯仿等有机溶剂,遇醋酸铅试剂会沉淀,并能被活性炭吸附,其颜色随pH的不同而会改变。
花色甙在制备中草药制剂或提取有效成分时,常作为杂质去除。
薄层色谱法是一种吸附薄层色谱分离法,它利用各成分对同一吸附剂吸附能力不同,使在移动相(溶剂)流过固定相(吸附剂)的过程中,连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,从而达到各成分的互相分离的目的。
一、引言绿色植物是利用空气中的二氧化碳、阳光、泥土中的水分及矿物质来为自己制造食物,整个过程名为“光合作用”,而所需的阳光则被叶子内的绿色元素吸收,这一种绿色的有机化合物就是叶绿素。
叶绿素是植物体内的一组密切相关的绿色色素,它的功能是吸收太阳的辐射能进行光合作用。
叶绿素共有a、b、c和d4种。
凡进行光合作用时释放氧气的植物均含有叶绿素a;叶绿素b存在于高等植物、绿藻和眼虫藻中。
(1)叶绿素a 有四个甲基与卟吩核连接(R=—CH3)。
蜡状蓝黑色微小晶体。
熔点117~120℃。
溶于乙醇、乙醚、丙酮、氯仿、二硫化碳和苯。
不溶于石油醚。
乙醇溶液是蓝绿色,并有深红色荧光。
(2)叶绿素b 有三个甲基和一个醛基与卟吩核连接(R=—CHO)。
蜡状蓝黑色微小晶体。
熔点120~130℃。
溶于乙醇和乙醚,难溶于石油醚。
乙醚溶液有亮绿色。
其他有机溶剂的溶液通常是绿色至黄绿色,并有红色荧光。
色素分离提取实验报告
色素分离提取实验报告色素分离提取实验报告引言色素是一种常见的化学物质,广泛存在于自然界中的植物和动物体内。
色素的提取和分离对于研究其化学结构和生物活性具有重要意义。
本实验旨在通过提取和分离不同植物中的色素,探究其成分和特性。
实验材料和方法1. 实验材料:- 石榴、胡萝卜、菠菜、紫甘蓝等植物样品- 无水乙醇、醋酸乙酯、正己烷等有机溶剂- 氯化钠溶液、硫酸溶液等化学试剂- 玻璃仪器:研钵、滴管、漏斗等2. 实验方法:1) 样品制备:将不同植物样品分别洗净、切碎并研磨成细末。
2) 提取色素:取适量样品末加入研钵中,加入适量的无水乙醇,搅拌均匀,静置一段时间。
3) 分离色素:将提取液用滤纸滤去固体颗粒,得到植物色素提取液。
4) 色素分析:将植物色素提取液分别用醋酸乙酯和正己烷进行萃取,得到不同溶剂相中的色素。
结果与讨论1. 提取色素在本实验中,我们选择了石榴、胡萝卜、菠菜和紫甘蓝作为实验样品。
经过提取,我们得到了不同植物的色素提取液。
观察发现,不同植物的色素提取液呈现出不同的颜色和浓度。
这表明不同植物中的色素成分和含量存在差异。
2. 分离色素为了更好地了解不同植物中的色素成分,我们进行了色素的分离。
通过醋酸乙酯和正己烷的萃取,我们得到了不同溶剂相中的色素。
观察发现,不同溶剂相中的色素呈现出不同的颜色和特性。
这说明不同溶剂对于色素的溶解度和亲和力存在差异。
3. 色素成分分析为了进一步分析不同植物中的色素成分,我们进行了色素成分的分析。
通过将色素溶液与氯化钠溶液和硫酸溶液反应,我们观察到了不同的反应结果。
这表明不同植物中的色素成分可能包含不同的化学物质,如类胡萝卜素、叶绿素等。
结论通过本实验,我们成功地提取和分离了不同植物中的色素,并对其进行了分析。
结果显示,不同植物中的色素成分和特性存在差异。
这为进一步研究色素的化学结构和生物活性提供了基础。
此外,本实验还展示了提取和分离技术在化学实验中的应用价值,对于培养学生的实验操作能力和科学思维具有重要意义。
植物色素的提取的方法
植物色素的提取的方法植物色素的提取方法是指通过不同的技术手段从植物体中分离和提取出色素的过程。
植物色素是植物体中一类具有色彩的化合物,可以包括叶绿素、类胡萝卜素、花青素等。
这些植物色素不仅在植物的生长和发育过程中起着重要的作用,还可以用于食品、医药、化妆品等领域。
下面将介绍一些常用的植物色素提取方法。
1. 汽水提取法:这是一种简便易行的方法,适合于提取不同种类的植物色素。
首先将目标植物加入到一定比例的水中,浸泡一段时间,使得色素溶解到水中。
然后将水中色素与不溶解物分离,可以通过离心、滤纸等方式。
最后经过过滤、浓缩和干燥等步骤,得到目标植物色素。
2. 有机溶剂提取法:有机溶剂提取法适用于提取多种植物色素,其中最常用的有乙醇、醚类溶剂等。
首先将目标植物粉碎和浸泡在有机溶剂中,然后利用超声波、搅拌等方法,促使植物色素溶解到有机溶剂中。
接着通过沉淀、过滤等步骤,将植物残渣与有机溶剂分离,最后通过浓缩和干燥等步骤,得到目标植物色素。
3. 超临界流体提取法:超临界流体提取法是一种较为先进的色素提取方法,适用于提取高级植物色素。
超临界流体是介于气体与液体之间的状态,具有流动性和可溶性,能够与植物色素较好地相容。
首先将目标植物与超临界流体(如二氧化碳)接触,使得目标植物色素溶解到超临界流体中。
然后利用恒温恒压萃取设备,对超临界流体进行处理,使其中的植物色素得以分离和纯化。
最后通过降压蒸发等步骤,使超临界流体转化为气态,得到目标植物色素。
4. 薄层色谱分离法:薄层色谱分离法是一种分离和检测植物色素的方法,适用于筛选和纯化植物色素。
首先将目标植物中提取的色素样品点于薄层色谱板上,然后将色谱板浸泡在具有特定极性的溶剂系统中,使得样品中的色素经过色谱板时被吸附和分离。
接着利用显色剂或紫外线下观察,确定色素的相对峰值和相对含量。
最后可以通过刮取薄层色谱板上的目标色素区域,进行进一步的分析和利用。
综上所述,植物色素的提取方法包括汽水提取法、有机溶剂提取法、超临界流体提取法和薄层色谱分离法等。
提取植物色素的方法
提取植物色素的方法提取植物色素是一种常见的实验技术,可用于研究植物生物化学成分、色素结构和功能等方面。
以下是一种常用的植物色素提取方法的详细介绍:1.材料准备:- 新鲜植物样品(如叶子、花朵或果实)- 无水酒精(例如乙醇或甲醇)- 碱性溶液(例如氢氧化钠溶液)- 氯仿- 无水盐- 细砂- 滤纸- 烧杯和试管2.样品处理:- 将新鲜植物材料切碎或研磨成细小颗粒,以增加提取效率。
- 将植物材料放入烧杯中。
- 加入适量的无水酒精,使植物材料完全浸泡其中。
3.浸泡提取:- 将浸泡植物材料的烧杯放入低温环境中,在充分浸泡的情况下,保持样品在低温环境下约12小时,以促进色素的释放和植物细胞的破裂。
4.研磨破壁:- 取出经过浸泡处理的植物样品,并使用研磨器或搅拌机将其继续研磨,使细胞壁彻底破裂,释放内部色素。
5.过滤:- 准备好细砂和滤纸,将研磨后的植物材料经过双重过滤,以去除大部分的固体残渣。
- 首先,将细砂放入滤器中,然后倒入提取液,用滤纸覆盖,进行第一次过滤。
- 重复以上步骤一次,以确保彻底过滤样品。
6.分离:- 将过滤好的植物提取液倒入锥形烧杯中。
- 加入适量的氏试液,以调节提取液的酸碱度。
酸性条件下,植物色素通常呈现红色或橙色,而碱性条件下,通常为蓝绿色。
7.氯仿萃取:- 向调整好酸碱度的植物提取液中加入一定量的氯仿,用来萃取植物色素。
- 不停地摇晃烧杯,使其充分混合,直至植物提取液分为两层。
8.分离纯化:- 将分离出的上层氯仿液倒入干燥的试管中,加入适量的无水盐,倒置放置约20分钟,以使植物色素沉淀。
- 将上层液体倒掉,留下沉淀的植物色素。
9.干燥:- 将植物色素沉淀置于通风良好的地方晾干,或使用低温吹风机辅助干燥。
- 直至色素变得干燥且无水分为止。
10.称量和保存:- 称量干燥的植物色素,记录其质量。
- 将植物色素保存在干燥的容器中,避免阳光直射。
总结:通过以上步骤,我们可以提取到植物样品中的色素。
高一生物色素的提取知识点
高一生物色素的提取知识点一、引言色素是生物体内广泛存在的一类化合物,它们具有各种不同的颜色,并在生物体内发挥着重要的功能。
生物色素的提取是研究生物体的重要手段之一,本文将介绍高一生物中常见的色素提取方法以及其相关知识点。
二、植物色素的提取方法1. 酒精浸提法酒精浸提法是提取植物色素常用的方法之一。
首先,将待提取的植物材料切碎并浸泡在乙醇中,经过搅拌和静置,使色素溶解于乙醇中。
然后,通过过滤或离心等方式分离得到色素提取液。
2. 溶剂萃取法溶剂萃取法适用于不同极性的植物色素提取。
常用的溶剂有醇类、醚类和酮类等。
该方法主要通过萃取溶剂与植物材料中的色素相互作用,从而实现分离提取的目的。
3. 水浴提取法水浴提取法是一种温和的色素提取方式。
它通常使用水作为溶剂,将植物材料置于加热的水中,使色素在温水中溶解。
然后,通过对提取液进行过滤或离心,得到色素提取液。
三、动物色素的提取方法1. 溶剂提取法动物组织中的色素可通过溶剂提取法进行提取。
此方法与植物色素的提取类似,常用的溶剂有乙醇、乙醚和酮类等。
需要注意的是,不同类型的动物组织可能需要不同的溶剂和提取条件。
2. 蛋白酶降解法某些动物组织中的色素可能与其他分子结合较紧密,使用溶剂提取法难以获得纯净的色素。
在这种情况下,可以使用蛋白酶降解法,先将组织中的蛋白质降解,并提取纯净的色素。
四、色素提取的应用领域1. 教学实验色素提取实验是高一生物课堂常见的实验内容之一。
通过自行提取色素并观察其吸收光谱和颜色变化,可以帮助学生理解色素的特性和提取过程。
2. 医学研究生物色素在医学研究中有着广泛的应用。
例如,提取人体组织中的色素能够帮助医生进行病理诊断和研究。
3. 食品工业色素提取在食品工业中也具有重要的应用价值。
许多天然色素是通过提取植物材料中的色素获得的,用于调色或增加食品的吸引力。
五、注意事项1. 实验安全进行色素提取时,应注意实验室的安全,佩戴实验室常规防护用品,避免接触有害物质和高温热源。
植物色素的提取实验报告
植物色素的提取实验报告
实验目的:通过提取植物色素,了解色素的性质以及提取方法。
实验原理:植物色素是植物体内的一种重要成分,可分为类胡萝卜素和类黄酮。
类胡萝卜素由各种黄、橙、红色植物色素组成,如β-胡萝卜素、叶黄素、玉米黄素等;而类黄酮则包括花青素、类黄酮醇等。
这些色素广泛存在于植物的叶、花、果实等部位,并具有丰富的生物活性和营养成分。
植物色素的提取方法主要有溶剂法、高压萃取法、微波辅助提取法和超声波提取法等,其中溶剂法是应用最广泛的一种。
实验步骤:
1. 将新鲜的植物材料(如胡萝卜、草莓等)洗净并切碎;
2. 将切碎后的植物材料放入研钵中,加入少量酒精,并用研钵和研杵将其研磨,直至完全研磨成细沫状;
3. 将研磨好的植物沫倒入滤纸漏斗中,用酒精将滤纸漏斗内的色素冲刷至上层的接头瓶中;
4. 将接头瓶中的酒精溶液转移到干燥的烧杯中,放在通风干燥的地方,直至酒精蒸发干净;
5. 将得到的植物色素在嘴试纸上检测其酸碱性质,并在显微镜下观察其颜色、形态等性质。
实验注意事项:
1. 实验材料与仪器易受空气、灰尘等污染,因此在实验前要进行清洗和消毒;
2. 植物材料的选取要新鲜、未受损、无病害、无腐烂等情况;
3. 建议在实验中带手套、口罩等防护用品;
4. 涉及到有毒或挥发性溶剂时,应在通风良好的环境中进行;
5. 在实验过程中要注意安全,避免损伤。
实验结果及分析:
实验得到的植物色素在嘴试纸上呈现出酸性反应,并且显微镜下观察,其颜色、形态等性质与不同的植物类型和色素种类相关。
植物色素具有重要的营养和生物活性成分,因此其提取方法的优化和应用领域的拓展都具有很大的研究价值。
植物提取颜色实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握植物提取颜色的原理和方法。
2. 学习使用层析法分离植物中的色素。
3. 了解不同植物色素的特性及其在自然界中的作用。
二、实验原理植物中的色素主要分为两大类:叶绿素和类胡萝卜素。
叶绿素包括叶绿素a和叶绿素b,分别呈蓝绿色和黄绿色;类胡萝卜素包括胡萝卜素和叶黄素,分别呈橙黄色和黄色。
这些色素在植物的光合作用中起着重要作用。
本实验通过提取植物中的色素,并利用层析法将其分离,观察不同植物色素的特性。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:菠菜、紫罗兰、牵牛花、万寿菊等植物叶片。
2. 仪器:研钵、研杵、滤纸、层析柱、滴管、剪刀、量筒、烧杯、酒精灯、显微镜等。
四、实验步骤1. 植物色素提取(1)将植物叶片洗净、晾干,用剪刀剪成小段。
(2)将剪好的叶片放入研钵中,加入少量二氧化硅、碳酸钙和适量丙酮。
(3)用研杵充分研磨,使叶片与溶剂充分混合。
(4)将研磨后的混合物倒入滤纸中,过滤得到色素溶液。
2. 植物色素分离(1)取一张滤纸,将其剪成比层析柱直径略小的圆片。
(2)将圆片放入层析柱中,使其紧贴柱壁。
(3)将提取到的色素溶液用滴管滴入层析柱,控制液面高度。
(4)待色素溶液滴入层析柱后,加入适量的层析液,观察色素分离情况。
3. 观察与记录(1)观察层析柱中色素带的分布,记录各色素带的颜色和位置。
(2)分析不同植物色素的特性,总结实验结果。
五、实验结果与分析1. 实验结果菠菜叶片:叶绿素a(蓝绿色)、叶绿素b(黄绿色)、胡萝卜素(橙黄色)、叶黄素(黄色)。
紫罗兰叶片:花青素(红色)、叶绿素a(蓝绿色)、叶绿素b(黄绿色)、胡萝卜素(橙黄色)、叶黄素(黄色)。
牵牛花叶片:花青素(蓝色)、叶绿素a(蓝绿色)、叶绿素b(黄绿色)、胡萝卜素(橙黄色)、叶黄素(黄色)。
万寿菊叶片:叶绿素a(蓝绿色)、叶绿素b(黄绿色)、胡萝卜素(橙黄色)、叶黄素(黄色)。
2. 分析实验结果表明,不同植物叶片中含有不同的色素,这些色素在层析柱中分离出的位置和颜色也有所不同。
如何提取植物色素
如何提取植物色素一般考点1、加入二氧化硅的原因:有利于充分研磨2、加入碳酸钙的原因:防止色素破坏。
研磨时会破坏溶酶体,溶酶体里面的有机酸会流出来而色素中有Mg,碳酸钙能和酸反应,防止酸和镁反应,破坏了色素。
3、加入无水乙醇的原因:光合色素易溶于无水乙醇等有机溶剂中,可以用无水乙醇提取绿叶中的光合色素。
4、层析液的作用:光合色素可溶于层析液中,不同的光合色素在层析液中的溶解度不同。
溶解度高的光合色素随层析液在滤纸上扩散得快;溶解度低的光合色素在滤纸上扩散得慢。
这样,最终不同的光合色素会在扩散过程中分离开来。
(1)提取光合色素用天平称取5 g绿色叶片,剪碎,放入研钵中。
向研钵中放入少量二氧化硅和碳酸钙,加入10 mL无水乙醇(也可用丙酮),迅速、充分地研磨。
在玻璃漏斗基部放一块单层尼龙布,将漏斗插入试管。
将研磨液倒入漏斗,及时用棉塞塞严盛有滤液的试管。
①剪碎和加二氧化硅的作用:利于研磨充分②加入碳酸钙的原因:防止色素破坏。
研磨时会破坏溶酶体,溶酶体里面的有机酸会流出来而色素中有Mg,碳酸钙能和酸反应,防止酸和镁反应,破坏了色素。
③加入无水乙醇(丙酮)的原因:光合色素易溶于无水乙醇等有机溶剂中,可以用无水乙醇提取绿叶中的光合色素。
④迅速研磨:防止乙醇挥发和色素的破坏。
⑤单层尼龙布的作用:过滤、去除杂质。
⑥用棉塞塞严的原因:防止乙醇(丙酮)挥发、提取液变少、变干。
(2)制备滤纸条将干燥的定性滤纸剪成长与宽略小于试管长与宽的滤纸条,将滤纸条一端剪去两角,在此端距顶端1 cm处用铅笔画一条细横线。
①滤纸条的长与宽略小于试管:既能使滤纸条轻松地放入试管内,易于取出,也能防止滤纸条太小,弯曲塌陷在试管内。
②剪去滤纸条两角的作用:1.保证滤纸能立在烧杯中2.保证滤纸上的滤液线能水平向上扩展。
③1 cm:保证滤纸条有足够的长度泡在层析液中,又能使色素带不浸在层析液(分离液)中。
④用铅笔,不能用签字笔、圆珠笔、画笔的原因:签字笔、圆珠笔、画笔的笔液色素会也能溶于乙醇和层析液,污染从绿叶中提取的色素。
[应用]实验2柱色谱分离植物色素
实验2 柱色谱分离植物色素(一) 实验目的 1.通过绿色植物色素的提取和分离,了解天然物质分离提纯方法; 2.了解柱层析的基本原理,掌握柱层析的操作技术。
3.通过柱色谱分离操作,加深了解微量有机物色谱分离鉴定的原理。
(二)实验原理层析法是一种物理分离方法。
柱层析法是层析方法中的一个类型,分为吸附柱层析法和分配柱层析法。
本实验仅介绍吸附柱层析法。
选择合适的吸附剂和洗脱剂,从而利用吸附剂对各组分吸附能力的不同及各组分在洗脱剂中的溶解性能不同达到分离目的。
吸附柱层析法通常是在玻璃层析柱中装入表面积很大、经过活化的多孔性或粉状固体吸附剂(常用的吸附剂 有氧化铝、硅胶等)。
当混合物溶液流过吸附柱时,各组分同时被吸附在柱的上端,然后从柱顶不断加入溶剂(洗脱剂)洗脱。
由于不同化合物吸附能力不同,从而随着溶剂下移的速度不同,于是混合物中各组分按吸附剂对它们所吸附的强弱顺序在柱中自上而下形成了若干色带,如图所示。
在洗脱过程中,柱中连续不断地发生吸附和溶解的交替现象。
被吸附的组分被溶解吸出来,随着溶剂向下移动,又遇到新的吸附剂颗粒,把组分从溶液中吸附出来,而继续流下的新溶剂又使组分溶解而向下移动,这样经过适当时间移动后,各种组分就可以完全分开,继续用溶剂洗脱,吸附能力最弱的组分随溶剂首先流出,再继续加溶剂直至各组分依次全部由柱中洗出为止,分别收集各组分。
绿色植物如菠菜叶中含有叶绿素(绿)、胡萝卜素(橙)和叶黄素(黄)等多种天然色素。
叶绿素存在两种结构相似的形式即叶绿素 a 和叶绿素 b ,其差别仅是 a 中一个甲基被 b 中的甲酰基所取代。
它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物,是植物进行光合作用所必需的催化剂。
植物中叶绿素 a 的含量通常是b 的3倍。
尽管叶绿素分子中含有一些极性基团,但大的烃基结构使它易溶于醚、石油醚等一些非极性的溶剂。
胡萝卜素是具有长链结构的共轭多烯。
它有三种异构体,即 a-,β-和γ-胡萝卜素,其中β-异构体含量最多,也最重要。
生物分离技术综合实验—植物色素提取分离及定量和初步鉴定
实验三、植物色素的定量与初步鉴定
• 一、目的 • 用化学方法鉴定上面所纯化的提取液中有黄酮存在,
同时测定黄酮的含量和最后的得率。
• 二、原理 • 黄酮化合物分子结构中具有C5、C6位的酚羟基或邻二
酚羟基可与金属盐试剂铝盐生成有色络合物,黄酮络 合物在510nm处有较大的吸收峰,可由分光光度法测 出黄酮含量。根据黄酮的一些特性,利用黄酮与一些 试剂发生特殊的发色反应来检测黄酮。
• 4、实验当中的提取液一定要全部从磨口 锥形瓶和离心管中倒出,在将离心好的 色素倒出时,一定要小心,不要将底部 的沉降物倒出来。
实验一、 植物色素的制备
• 5、色素提取过程中一定要在锥形瓶上加 上塞子,若乙醇蒸发较快时(如:80% 以上的高浓度乙醇提取时),可以考虑 在磨口锥形瓶上加一蛇形管,但低浓度 乙醇提取时没有必要加蛇形管。
• 3.2 精密吸取上清液1.0 mL,分别置于10 mL容量瓶中,加质 量分数5%亚硝酸钠0.4 mL,放置6 min后,加质量分数10%硝 酸铝0.4 mL,放置6 min,再加质量分数4.3%氢氧化钠4 mL, 加蒸馏水至刻度,摇匀,放置15 min,在510nm波长下测得其 吸光度值,按V*A值的大小比较得出最优的料液比。
• 6、测量吸光度时,一定要设空白对照(即用 1mL70%的乙醇代替样液以外,的其余试液按 3.2中所述正常加入)
实验一、 植物色素的制备—附录
• 1、实验前面准备
• (1)、原料的制备(同学们不需要做)
• 用高速干粉粉碎机将银杏叶粉碎,过40目以上,40-60目, 60-70目,70-80目,80-90目,90-100目,100目以上,筛 后备用。
实验二、植物色素的分离纯化
10.植物色素的提取
(3)图中A过程表示____萃__取_,此过程用到 的有机溶剂应该具有较高的____沸__点_,能够充 分______溶胡解萝卜素,并且不与水混溶。
(4)图中B过程表示____浓__缩,浓缩之前进行 过滤的目的是____除__去__萃__取__液__中__的__不__溶__物。
变式2 (2015·全国卷Ⅱ)回答与胡萝卜素有关的问题:
10 植物色素的提取
胡萝卜素(C40H56)
标题和包含列表的内容布局
• 在此处添加第一个项目要点 • 在此处添加第二个项目要点 • 在此处添加第三个项目要点
一、基础知识:胡萝卜素(C40H56)
(一)概念:
从胡萝卜中提取出的橘黄色物质包括多 种结构类似物,统称为胡萝卜素
(二)种类:α-胡萝卜素
根据碳碳双 键的数目
(1)胡萝卜含有的胡萝卜素中,最主要的是 _β__胡__萝__卜__素___(填“α胡萝卜素”“β胡萝卜素”或
“γ胡萝卜素”),该胡萝卜素在人体内可以转变成两 分子____维__生__素_,A 后者缺乏会引起人在弱光下视物不清 的病症,该疾病称为____夜__盲_,症胡萝卜素是___非__挥__发_ 性
为什石么油?醚、乙酸乙酯、乙醚、苯、四氯化碳
乙醇和丙酮是水溶性有机溶剂,萃取时能与水混溶
而20影:593:响406 -萃1取20的℃效果。77应℃选择3使5用℃水不80溶℃性有7机6溶℃剂。
(3)、影响萃取的因素 萃取剂:性质和使用量(主要) 原料:颗粒的大小、紧密程度、含水量 环境:温度、时间等
1除了可以从植物中提取天然胡萝卜素外还可以从养殖的岩藻中获得或者利用生2新鲜的胡萝卜含有大量的水分在胡萝卜素的提取过程中要对新鲜的胡萝卜进行处理但要注意控制和时间这是因为微生物的发酵干燥温度温度太高干燥时间太长会导致胡萝卜素分解3图中a过程表示此过程用到的有机溶剂应该具有较高的能够充分胡萝卜素并且不与水混溶
【高中生物】高中生物知识点:植物色素的提取
【高中生物】高中生物知识点:植物色素的提取植物色素的提取:1.胡萝卜素、叶绿素、叶黄素、番茄红素和辣椒红素是脂溶性植物色素,通常不溶于水,易溶于乙醇、乙醚和氯仿等有机溶剂。
因此,胡萝卜素通常用有机溶剂提取。
2、胡萝卜素的提取:(1)胡萝卜素的性质:胡萝卜素是一种化学性质相对稳定的橙色晶体。
不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有机溶剂。
(2)胡萝卜素的提取来源天然胡萝卜素的提取方法主要有:一是从植物中提取;二是从岩藻的大规模养殖;三是微生物的发酵生产。
(3)萃取剂:最适宜作胡萝卜素萃取剂的是石油醚。
(4)实验过程胡萝卜→粉碎→干燥→萃取(石油醚)→过滤_→浓缩→胡萝卜素→鉴定(纸层析法)。
知识电话:1、注意事项:(1)胡萝卜通常在提取前经过干燥和粉碎,原料颗粒越小越好。
其目的是使原料与萃取剂充分接触,提高萃取效率。
(2)萃取过程中采用水浴加热的原因:有机溶剂用明火直接加热易爆炸。
(3)在鉴定提取的胡萝卜素时,用吹风机吹干斑点时,温度不应过高,否则斑点会变黄。
2、萃取剂常用石油醚。
石油醚经常被用作提取植物有效成分的萃取剂的原因是具有较高的沸点、萃取效率高、毒性很小。
3.胡萝卜素的特性:(1)一分子的β-胡萝卜素在人或动物的小肠、肝脏等器官内被氧化分解成维生素a,用于治疗夜盲症、干皮症等。
(2)胡萝卜素可分为α、β、γ三类,其划分的主要依据是:根据分子式中碳-碳双键的数目。
胡萝卜素是脂溶性的。
用油煎胡萝卜时,你应该加入更多的油,以促进人体吸收。
(3)胡萝卜素的颜色和主要吸收的光谱分别是:橙黄色和蓝紫光。
(4)胡萝卜素的作用:胡萝卜素可用于治疗维生素A缺乏引起的各种疾病;胡萝卜素可用作食品色素;天然胡萝卜素也能使癌细胞恢复到正常细胞。
4、乙醇和丙酮为水溶性溶剂。
相关的高中生物绿叶色素的知识与提取:实验绿叶中色素的提取和分离:1.原则(1)各种色素能溶解在有机溶剂(无水乙醇等)中形成溶液,使色素从生物组织中脱离出来。
绿色植物色素的提取实验报告
竭诚为您提供优质文档/双击可除绿色植物色素的提取实验报告篇一:绿色植物中色素的提取和分离绿色植物中色素的提取和分离[实验名称]绿色植物色素的提取及色谱分离[教学目标]知识与技能:通过对绿色植物色素的提取与分离,了解天然产物分离提纯的方法[教学重点]学习柱色谱和薄层色谱分离的基本原理及操作方法[教学难点]薄层色谱、柱层析实验操作要点的掌握和应用[教学方法]陈述法,讲演法[教学过程][讲述]【实验目的】1.通过绿色植物色素的提取和分离,了解天然物质分离提纯方法;2.通过对柱色谱和薄层色谱操作方法的掌握,加深了解微量有机物色谱分离、鉴定的原理。
[讲述]【背景知识】绿色植物的叶、茎中,如菠菜叶,含有叶绿素(绿)、胡萝卜素(橙)和叶黄素(黄)等多种天然色素。
叶绿素存在两种结构相似的形式即叶绿素a(c55h72o5n4mg)和叶绿素b(c55h70o6n4mg),其差别仅是叶绿素a中一个甲基被甲酰基所取代从而形成了叶绿素b。
它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物,是植物进行光合作用所必需的催化剂。
植物中叶绿素a的含量通常是b的3倍。
尽管叶绿素分子中含有一些极性基团,但大的烃基结构使它易溶于醚、石油醚等一些非极性的溶剂。
胡萝卜素(c40h56)是具有长链结构的共轭多烯。
它有三种异构体,即a-胡萝卜素、β-胡萝卜素和γ-胡萝卜素,其中β-胡萝卜素含量最多,也最重要。
叶黄素(c40h56o2)是胡萝卜素的羟基衍生物,它在绿叶中的含量通常是胡萝卜素的两倍。
与胡萝卜素相比,叶黄素较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。
本实验先根据各种植物色素的溶解度情况将胡萝卜素(橙)、叶黄素(黄)、叶绿素a和叶绿素b从菠菜叶中提取出来,然后根据各化合物物理性质的不同用色谱法进行分离和鉴定。
[图示]【分离产物结构式】叶绿素a、叶绿素b、叶黄素(黄)和β-胡萝卜素的结构式如下图所示:[讲述]【色谱法原理】色谱法是分离、提纯和鉴定有机化合物的重要方法。
植物色素的提取方法
植物色素的提取方法
植物色素的提取方法有多种,以下是常用的几种方法:
1. 溶剂提取法:将植物材料切碎后,用适量的有机溶剂(如乙醇、乙醚、丙酮等)浸泡,通过摇匀、浸渍、加热、过滤等步骤,使色素溶解在溶剂中,最后通过蒸馏或浓缩等方法得到纯化的色素溶液。
2. 浸提法:将植物材料浸泡在温度适宜的溶剂中,通过浸泡时间的控制,使色素溶解在溶剂中。
之后,可以通过过滤、浓缩等方法提取和纯化植物色素。
3. 水蒸气蒸馏法:将植物材料放入蒸馏器中,加热蒸发,通过水蒸气将色素从植物组织中提取出来,再通过冷凝收集,得到纯度较高的色素溶液。
4. 超声波辅助提取法:将植物材料与溶剂混合,然后使用超声波设备进行辅助提取,通过超声波振动的作用,加强溶剂与植物组织之间的物质传递和质量转移,提高色素的提取效率。
总的来说,色素的提取方法选择要根据植物种类、色素种类、浓度要求等因素进行考虑,并综合运用以上提取技术,以获得较高纯度和较高产量的植物色素。
提取叶绿体色素的方法
提取叶绿体色素的方法
叶绿体色素是一种非常重要的生物分子,可以在植物中找到。
它们起着重要的作用,可以参与光合作用,吸收太阳能以供有机物质的合成。
因此,叶绿体色素的提取显得尤为重要。
提取叶绿体色素的方法有几种,其中最常用的是离心法和沉淀法。
(1)离心法:首先,要将样品分离出叶绿体,可以用离心法。
在离心容器中加入植物细胞悬液,先用慢速离心运转1分钟,再用中速离心运转5分钟,最后再用高速离心运转5分钟,使叶绿体聚集在容器的离心池的底部,然后可以得到细胞浆液,再进行叶绿体的提取。
(2)沉淀法:检测混合物中的叶绿体,可以用沉淀法。
在混合
物中加入氯化钠或氯化钙溶液,使叶绿体发生沉淀,然后用离心法分离叶绿体,最后滤过,就可以得到叶绿体色素溶胶了。
提取叶绿体色素需要准备一些特定的试剂,比如:Tris-HCl缓
冲溶液、NaCl 、EDTA 、Triton X-100 、B-mercaptoethanol 、Glycerol 、蛋白酶K 、蛋白酶R 以及植物细胞悬液。
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色素提取小实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习从植物中提取天然色素的方法。
2. 掌握有机溶剂提取和层析分离的基本原理及操作技术。
3. 了解不同植物中色素的种类和含量差异。
二、实验原理植物中的色素大多为天然有机物,不易溶于水,但易溶于有机溶剂。
通过有机溶剂提取,可以将植物中的色素溶解出来。
层析分离是利用不同物质在固定相和流动相中的分配系数不同,使各组分在层析柱中依次分离。
本实验采用层析分离法,将提取的色素进行分离。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜菠菜、新鲜胡萝卜、无水乙醇、层析液、层析柱、滤纸、研钵、剪刀、试管、试管架、毛细管、天平等。
2. 实验仪器:分析天平、电热套、烘箱、显微镜等。
四、实验步骤1. 提取菠菜和胡萝卜中的色素:(1)将新鲜菠菜和胡萝卜洗净,沥干水分。
(2)将菠菜和胡萝卜分别剪碎,放入研钵中。
(3)向研钵中加入适量无水乙醇,研磨至糊状。
(4)将研磨液倒入试管中,静置片刻,待上清液析出。
(5)将上清液过滤,得到菠菜和胡萝卜的色素提取液。
2. 层析分离:(1)将层析柱垂直放置在试管架上,在层析柱底部加入少量层析液。
(2)用毛细管吸取菠菜和胡萝卜的色素提取液,沿层析柱壁缓慢滴入层析柱中。
(3)待层析液自然上升至接近层析柱顶部时,停止加样。
(4)观察色素在层析柱中的分离情况,记录各色素的Rf值。
五、实验结果与分析1. 色素提取:通过实验,成功从菠菜和胡萝卜中提取出天然色素。
菠菜提取液呈绿色,胡萝卜提取液呈橙色。
2. 层析分离:菠菜和胡萝卜的色素在层析柱中分离出4条色素带,分别为胡萝卜素(橙色)、叶黄素(黄色)、叶绿素a(蓝绿色)和叶绿素b(黄绿色)。
3. Rf值分析:菠菜中胡萝卜素的Rf值为0.6,叶黄素的Rf值为0.4,叶绿素a的Rf值为0.3,叶绿素b的Rf值为0.2;胡萝卜中胡萝卜素的Rf值为0.7,叶黄素的Rf值为0.5,叶绿素a的Rf值为0.2,叶绿素b的Rf值为0.1。
六、实验讨论1. 实验过程中,研磨菠菜和胡萝卜时,应尽量将材料研磨得细碎,以提高色素提取效率。
如何提取植物中的色素
有关“植物色素”如何提取植物中的色素:植物的颜色是其中的色素的颜色,色素易溶于酒精和乙醚,可以把花瓣和石英砂和碳酸钙放到研钵中捣(石英砂可以使研磨更充分,碳酸钙可以防止细胞中的有机酸破坏色素结构),然后放入酒精或乙醚,使色素溶解,然后过滤,即可。
注意,这不是萃取。
萃取是利用溶质在互不相溶的溶剂里溶解度的不同,用一种溶剂把溶质从另一溶剂所组成的溶液里提取出来的操作方法。
萃取分离物质的操作步骤是:把用来萃取(提取)溶质的溶剂加入到盛有溶液的分液漏斗后,立即充分振荡,使溶质充分转溶到加入的溶剂中,然后静置分液漏斗.待液体分层后,再进行分液.如要获得溶质,可把溶剂蒸馏除去,就能得到纯净的溶质。
把植物样本搅碎研磨,用醇、乙醚、丙酮之类的有机溶剂溶解,过滤出来。
一般溶剂内的色素不纯,有很多其他有机物,用萃取或者层析分离。
可以模仿高中生物课本“绿叶中的色素提取和分离”,把待提取的植物器官弄碎,然后放入研钵中,二氧化硅少许,使研磨充分;碳酸钙少许,保护色素倒入;提取液无水乙醇,研磨。
然后过滤。
过滤的时候,漏斗中要放上尼龙布,不要用纱布,更不要用滤纸。
如何提取花叶中的色素:磨碎,加入75%的乙醇丙酮混合水溶液,摇晃几分钟,用滤纸过滤掉组织碎末。
能得到色素的溶液植物色素的种类:植物色素类(Phytochromes)在中草药中分布很广,主要有脂溶往色素与水溶性色素两类。
脂溶性色素主要为叶绿素、叶黄素与胡萝卜素,三者常共存。
此外尚有藏红花素、辣椒红素等。
除叶绿素外,多为四萜衍生物。
这类色素不溶于水。
难溶于甲醇,易溶于高浓度乙醇、乙醚、氯仿、苯等有机溶剂。
胡萝卜素在乙醇中也不溶。
叶绿素等在制备中草药制剂或提取其他有效成分时常须作为杂质去除,以使药物纯化,中草药(特别是叶类、全草类)的乙醇提取液中含有多量叶绿素、可在浓缩液中加水使之沉出,也可通过氧化铝、碳酸钙等吸附剂而除去。
叶绿素本身有抑菌作用,可制备成消炎的药物。
水溶性色素主要为花色甙类,又称花青素,普遍存在于花中。
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植物色素的提取学院:专业:姓名:学号:2012年7月6日植物色素的提取摘要在用抽滤法提取色素的过程中,由于抽滤时不好控制,非极性溶剂难免会被抽去,且在几次转移中损失较多,程序繁杂.用浸泡法操作简便易行,损失少,产率高。
故在实验中采取了浸泡法提取色素,使用薄层色谱、柱色谱对叶绿素、胡萝卜素和叶黄素进行了分离。
薄层层析时使用了石油醚-乙酸乙酯=8:2、6:4、5:5、4:6,对比展开效果。
在柱层析时,用洗脱剂分离得到不同物质,结果证明石油醚-乙酸乙酯=8:2做洗脱剂分离胡萝卜素效果最好。
将得到的胡萝卜素进行紫外光谱测定,检验实验成果。
薄层色谱法是一种吸附薄层色谱分离法,它利用各成分对同一吸附剂吸附能力不同,使在移动相(溶剂)流过固定相(吸附剂)的过程中,连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,从而达到各成分的互相分离的目的。
一、引言绿色植物如菠菜叶中含有叶绿素(绿)、胡萝卜素(橙)和叶黄素(黄)等多种天然色素。
叶绿素存在两种结构相似的形式即叶绿素a(C55H72O5N4Mg)和叶绿素b(C55H70O6N4Mg)),差别仅是a中一个甲基被b中的甲酰基所取代。
它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物,是植物进行光合作用所必需的催化剂,也是食用的绿色色素,可用于糕点、饮料水等中,添加于胶姆糖中还可消除口臭。
植物中a的含量通常是b的3倍。
尽管叶绿素分子中含有一些极性基团,但大的烃基结构使它易溶于石油醚等一些非极性溶剂。
胡萝卜素(C40H56)是具有长链结构的共轭多烯。
它有三种异构体α—,β—,和γ—胡萝卜素,其中β—异构体含量最多,也最重要。
生长期较长的绿色植物中,异构体中β—的含量多达90%。
β—具有维生素A的生理活性,其结构是两分子维生素A在链端失去两分子水结合而成。
生物体内,β—体受酶催化氧化即形成维生素A。
目前,β—体可作为维生素A 使用,也可作为食品工业的色素,β一胡萝卜素还有防癌功能。
叶黄素(C40H56O2)是胡萝卜素的羟基衍生物,在光合作用中能起收集光能的作用。
在绿叶中通常是胡萝卜素的两倍。
较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。
由此可见,叶绿素等天然色素有广泛的用途,对于色素的提取与分离就显得很重要了.本实验就提取和分离做了相关的研究。
二、实验部分2.1实验目的1.掌握薄层色谱法和柱谱法分离色素的原理和基本操作。
2.掌握减压蒸馏、色谱板的制备等基本操作2.2实验原理薄层层析可根据作为固定相的支持物不同,分为薄层吸附层析(吸附剂)、薄层分配层析(纤维素)、薄层离子交换层析(离子交换剂)、薄层凝胶层析(分子筛凝胶)等。
一般实验中应用较多的是以吸附剂为固定相的薄层吸附层析。
吸附是表面的一个重要性质。
任何两个相都可以形成表面,吸附就是其中一个相的物质或溶解于其中的溶质在此表面上的密集现象。
在固体与气体之间、固体与液体之间、吸附液体与气体之间的表面上,都可能发生吸附现象。
例如用硅胶和氧化铝作支持剂,其主要原理是吸附力与分配系数的不同,使混合物得以分离。
当溶剂沿着吸附剂移动时,带着样品中的各组分一起移动,同时发生连续吸附与解吸作用以及反复分配作用。
由于各组分在溶剂中的溶解度不同,以及吸附剂对它们的吸附能力的差异,最终将混合物分离成一系列斑点。
如作为标准的化合物在层析薄板上一起展开,则可以根据这些已知化合物的Rf值(后面介绍Rf值)对各斑点的组分进行鉴定,同时也可以进一步采用某些方法加以定量。
柱色谱法的简介柱色谱法又称柱层析。
固定相装于柱内,流动相为液体,样品沿竖直方向由上而下移动而达到分离的色谱法。
它既区别于用于分离分析的GC和HPLC法,也区别于样品在平面形固定相内移动的纸层析和薄层色谱法。
本法主要用于分离,有时也起到浓缩富集作用。
在环境分析测试中,本法广泛用于样品的前处理,如在水和气溶胶的有机污染分析中,将萃取液转移到层析柱内,而后用环己烷洗脱烷烃部分,用苯洗脱多环芳烃类污染物,用乙醇洗脱极性组分;在土壤分析中,用氧化铝柱捕集分离稀土元素钍、铊等。
吸附柱色谱通常在玻璃管中填入表面积很大经过活化的多孔性或粉状固体吸附剂。
当待分离的混合物溶液流过吸附柱时,各种成分同时被吸附在柱的上端。
当洗脱剂流下时,由于不同化合物吸附能力不同,往下洗脱的速度也不同,于是形成了不同层次,即溶质在柱中自上而下按对吸附剂的亲和力大小分别形成若干色带,再用溶剂洗脱时,已经分开的溶质可以从柱上分别洗出收集;或将柱吸干,挤出后按色带分割开,再用溶剂将各色带中的溶质萃取出来。
柱色谱法column chromatography 将色谱填料装填在色谱柱管内作固定相的色谱方法。
根据色谱柱的尺寸、结构和制作方法的不同,又可分为填充柱色谱和毛细管柱色谱。
本实验成败的关键是:装柱要紧密,要求无断层、无缝隙;在装柱、洗脱过程中,始终保持有溶剂覆盖吸附剂;一个色带与另一色带的洗脱液的接受不要交叉。
2.3仪器和药品玻璃片(10cm×3cm),展缸,毛细管,分液漏斗,锥形瓶,底烧瓶,玻璃棒,色谱柱,分液漏斗,烧杯,量筒,减压抽滤机,UV-240紫外分光光度计新鲜菠菜,硅胶G,羧甲基纤维素钠,乙醇,石油醚,乙酸乙酯,无水硫酸钠圆2.4实验步骤和实验现象1.薄层色谱板的制备(1)制备薄层载片如是新的玻璃板(厚约2.5mm),切割成150*30*2.5mm或100*30*2.5mm的载玻片,水洗,干燥。
如果重新使用的载玻片,要用洗衣粉和水系,用水淋洗,用50%甲醇溶液淋洗,让片完全干燥。
取用时应让手指接触片的边缘,因为指印沾污片的表面上将使吸附剂难于铺在片上。
(2)制备浆料容器:带螺旋盖的广口瓶。
操作:制成浆料的要求要均匀,不带团块,粘稠适当。
为此,应将吸附剂慢慢地加至溶剂中,边加边搅拌。
如果将溶剂加至吸附剂中常常会出现团快状,加料毕,剧烈搅拌,保证充分混合。
量取30ml 0.5%的羧甲基纤维素钠,和水混合后用加热装置加热至70℃,溶解后抽滤,吸取10ml滤液加入4g硅胶G,充分混合后研磨。
铺制薄层板操作是:在带有螺旋盖的瓶子中盛满浆料(1g硅胶G需要3ml 氯仿或需要3ml氯仿-乙醇混合物(体积比为2:1),在不断搅拌下慢慢蒋硅胶加入于氯仿中,盖紧,用力振摇。
使之成均匀糊状),选取大小一致的载玻片紧贴在一起,两块同时浸涂。
因为浆料在放置时会沉积,故浸涂之前均应将其剧烈振摇。
用拇指和食指捏住玻璃片上端缓慢地均匀地将片浸入浆料中并取出多余的浆料任其自动滴下,直至大部分溶剂已挥发后将两块分开,放在水平板上晾干。
若浆料太稠,涂层可能太厚,甚至不均匀,若浆料稀薄,则可能是涂层薄。
若出现上述两种情况,须调整粘稠度。
要掌握铺层技术,反复实践是必要的。
薄层板的活化温度,硅胶板于105—110℃烘30min,氧化铝板于150—160℃烘4h,可得活性级的薄层,活化后的薄层板放在干燥器内保存备用。
2.色素溶液的制备称取10g洗净后用滤纸吸干的树叶,用剪刀剪碎并与10ml乙醇拌匀,在研体中研磨,一次用乙醇:石油醚=2:3混合液10ml提取两次。
将合并的提取液放到50ml分液漏斗中,用10ml*2水洗,弃去水层,石油醚层用少量无水Na2SO4干燥(约15min),然后将石油醚层转移到带支管的试管内,用水浴加热,水泵减压,浓缩到约0.5ml。
3.展开剂的配置用石油醚和乙酸乙酯按不同的体积比混合,得到不同极性的展开剂:石油醚:乙酸乙酯=8:2、6:4、5:5、4:64.分离在硅胶板上点样后,分别用不同展开剂展开,分别测出胡萝卜素、叶绿素a、叶绿素b、叶黄素的Rf值,比较不同展开剂系统的展开效果。
点样在距薄层长端1cm处,划一条线,作为起点线。
用毛细管(内经小于1mm)吸取样品溶液垂直地轻轻接触到爆曾的起点线之上。
如果溶液太稀,一次点样不够,第一次点样干后,再点第二次、第三次….每次点样都应在同一圆心上。
点的次数依照样品溶液浓度而定,一般为2-5次。
若样品太少时,有的成分不易显出;若样品量太多造成斑点过大,互相交叉或拖尾,不能得到很好的分离。
点样后的斑点直径以扩散成1-2mm圆点为度。
若为多出点样时,则点样间距为1-1.5cm.展开薄层的展开须在密闭的容器中进行。
先将选择的展开剂放在带有塞子的广口瓶中,再将点样好试样的薄层板放入广口瓶中进行展开。
点样的位置必须在展开剂的液面之上。
当展开剂上升到薄层的前沿(离顶端1cm处)或各组分已明显分开时,取出薄层板放平晾干,用铅笔或小针划前沿的位置后即可c测量长度计算Rf值。
5.柱色谱分离量取40ml硅胶和100ml石油醚:乙酸乙酯=8:2混合均匀,倒入色谱柱中,开启色谱柱下面的塞子,并不断从色谱柱的上方加入展开剂是色谱柱的观众总保持接近满的状态。
当硅胶的高度不断下降时,留下约1-2cm的石油醚,然后关闭色谱柱。
静置后,从色谱柱上方加入样品,注意要用胶头滴管沿着色谱柱内壁旋转着慢慢滴下去,避免使硅胶表面变得不水平。
边加入样品,边开启色谱柱。
当样品加入完毕后,再将石油醚和乙酸乙酯按8:2体积比混合的液体从上层加入冲洗硅胶,把胡萝卜素冲洗下来。
用干燥的容器收集,测量体积。
三、实验结果和讨论1.实验原始数据8:2 6:4 5:5 4:6V石油醚:V乙酸乙酯0.919 0.926 0.937 1.000胡萝卜素的Rf值叶绿素的Rf0.452 0.842 0.851 0.967值0.274 0.526 0.738 0.800叶黄素的Rf值样品吸光度:0.577样品体积:16ml样品浓度:5.12×10-6胡萝卜素质量:8.19×10-5g2.讨论本实验根据的是四种色素在石油醚中的析出速度不同来分离的。
析出的速度为胡萝卜素>叶绿素>叶黄素。
根据各种色素的Rf值的变化总体趋势,在石油醚:乙酸乙酯=8:2时,能很好地分出胡萝卜素;在石油醚:乙酸乙酯6:4,5:5,4:6时分离顺序为胡萝卜素、叶绿素、叶黄素。
这说明胡萝卜素极性弱,叶绿素,叶黄素极性逐渐增强。
这次试验中虽然用的菠菜很多,但提取的色素很少,主要的原因可能是用的菠菜中含有的胡萝卜素比较少,还有就是操作中不谨慎损失的。
四、实验心得通过这次试验我收获很多,不仅学会了柱层色谱的分离方法,更加锻炼了我的操作能力。
这次试验总体来说还算比较成功,虽然测得的Rf值的趋势于是是有点偏差,而且胡萝卜素的产量比较少,但是总体来说没有大的失误。
对实验要保证严肃、认真、科学、严谨的态度,这也是我们这次试验基本上成功的保证。
认真的做好每一步对实验的结果都是很重要的。
从这次的实验中,我们不仅要对实验保证这样的态度,对别的事情也要有这种态度。
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