绿叶色素提取和分离
绿叶中色素的提取与分离实验操作过程图文
绿叶中色素的提取与分离实验一、实验原理1、提取的原理：利用色素溶于有机溶剂无水乙醇而不溶于水的性质;2、分离的原理：利用各种色素在层析液中的溶解度不同,随着层析液在滤纸上扩散的速度不同;纸层析法二、目的要求1、进行绿叶中色素的提取和分离；2、探究绿叶中含有几种色素三、材料用具1、材料：新鲜的绿叶如菠菜、韭菜的绿叶;2、用具：剪刀、药匙、研钵、量筒、漏斗、试管、棉塞、尼龙纱布、盖玻片、试管架、干燥的定性滤纸、铅笔、直尺、烧杯、穿针的细线、滴管;3、试剂：无水乙醇、层析液、二氧化硅石英沙和碳酸钙;四、方法步骤1、提取绿叶中的色素1取深绿色的植物叶片,洗净,抹干水分,并称取5g,剪成小块置于研钵中;2在研钵中加入少许二氧化硅SiO2、碳酸钙CaCO3,再加入6ml无水乙醇;3迅速、充分地研磨成糊状;4在漏斗基部放一小块单层尼龙纱布,将研磨液迅速倒入玻璃漏斗中进行过滤;将滤液收集到试管中,及时用棉塞将试管口塞严;剪碎绿叶加二氧化硅、碳酸钙, 迅速研磨成糊状再加入10ml无水乙醇过滤收集滤液,棉塞封口2、制备滤纸条如下图3、画滤液细线如下图滤纸条：长6cm,宽1cm, 用盖玻片一端蘸取滤液,沿铅笔线画线,距一端1cm处用铅笔和直尺等滤液细线风干后,再画下一道细线,重复画一条细的横线; 2—3次;画线要求：细、直、齐;4、分离色素将3ml 层析液倒入小烧杯中,将滤纸条有滤液细线的一端朝下轻轻插入层析液中,随后用培养皿盖盖住小烧杯;注意：不能让滤液细线接触到层析液;5、观察与记录观察烧杯中滤纸条上出现了几条色素带,以及每条色素带的颜色和宽度; 将观察结果记录下来,并将层析结果的分离结果贴在上面;“培养皿法”五、讨论1、滤纸条上有几条不同颜色的色带其排序怎样宽窄如何这说明了什么2、滤纸条上的绿叶细线为什么不能触及层析液3、将有色素带的滤纸条夹在书里,几天后会出现什么现象这说明了什么4、到了秋天叶色变黄、变红的原因是什么注：无水乙醇-------------------溶解、提取色素二氧化硅SiO 2--------研磨充分碳酸钙CaCO 3--------防止色素破坏层析液----------------------分离色素 胡萝卜素叶绿素b叶绿素a叶黄素橙黄色 黄色 蓝绿色 黄绿色。
绿叶中色素的提取和分离实验报告
绿叶中色素的提取和分离实验报告
实验报告：绿叶中色素的提取和分离
一、实验目的：
1.了解植物绿叶中色素的类型和组成；
2.掌握绿叶中色素的提取和分离方法；
3.学习使用色谱技术进行色素的定性和定量分析。
二、实验原理：
1.植物绿叶中主要含有叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素等色素；
2.色素的提取可采用溶剂浸提法，利用极性溶剂可溶解色素并使其析出；
3.色素的分离可采用色谱技术，利用相互溶解度差异进行分离。
三、实验步骤：
1.将新鲜的绿叶放入研钵中，加入适量的酒精，用搅拌棒搅拌植物材料，使其溶解均匀；
2.将混合溶液过滤，收集过滤液；
3.将收集的过滤液分成两部分，分别用超离心机分离沉淀和上清液；
4.取上清液，利用色谱技术进行分离和定性分析。
四、实验结果：
1.在溶剂浸提法下，绿叶中的色素溶解于酒精中，并分为沉淀和上清
液两部分；
2.通过超离心机的处理，将色素沉淀进行分离；
3.使用色谱技术后，可得到单一的色素组分，通过比色计测定其最大
吸收波长。
五、实验讨论：
1.色素的提取效果可能受到植物材料浸提时间和酒精浓度的影响；
2.色素的相互溶解度差异是进行色谱分离的关键；
3.使用色谱技术可对色素进行定性和定量分析，使实验结果更加准确
可靠。
六、实验总结：
本实验通过溶剂浸提法和色谱技术，成功提取和分离了绿叶中的色素。
通过实验，我们了解到了植物绿叶中色素的类型和组成，并学习了色素的
提取和分离方法。
同时，通过色谱技术的应用，我们还能对色素进行定性
和定量分析。
这些实验技巧和方法对于进一步研究和应用植物色素具有重
要意义。
叶绿体色素提取与分离实验
类胡萝卜素 50
叶绿素b 叶绿素a
0
波长
二、捕获光能的色素和结构
（一）捕获光能的色素
色素
叶绿素a （蓝绿色）
叶绿素 叶绿素b
（黄绿色） 含量约占3/4
类胡萝卜素
叶黄素 （黄色） 胡萝卜素 （橙黄色）
含量约占卜素主 要吸收蓝紫光
叶绿素主要吸收 红光和蓝紫光
课堂检测
1、在叶绿体色素的提取和分离实验中在滤纸条上扩散速度 最快的色素是（ ） A、叶绿素a B、叶绿素b C、胡萝卜素 D、叶黄素
4、在圆形滤纸的中央点上，对叶绿体的色素进行色素分析， 会得到近似，同心的四个色素环，排到在最里圈的色素是 （） A、橙黄色 B、蓝绿色 C、黄色 D、黄绿色
练习
1、在植物实验室的暗室内，为了尽可能地降
低植物光合作用的强度，最好安装（ B）
A、红光灯 B、绿光灯 C、白炽灯 D、蓝光灯
2、为提高大棚蔬菜的产量，哪项措施更有效
5、下图是叶绿体色素的提取与分离实验中所用的材料与用具。请回答： 分别在A、B、C三个研钵中加入2克菠菜，经研磨、提取得到三种颜色的溶液： 深绿色、黄绿色（或褐色）、几乎无色。注：“+”表示加，“—”表示不加。
处理 二氧化硅（少量） 碳酸钙（少量） 95%乙醇（10ml） 蒸馏水（10ml）
ABC +++ —+ + + —+ —+ —
（ D）
A、安装红色透光薄膜 B、安装蓝紫色透光薄膜
C、安装绿色透光薄膜 D、安装无色透光薄膜
练习
3．在圆形滤纸的中央点上粘叶绿体的色素滤液， 进行色素分析，会得到近似同心环状的四个色素圈，
排在外圈的色素呈 [ A]
叶绿体中色素的提取与分离
A. ①②③④ C. ④②③①
B. ②④①③ D. ③②①④
捕获光能
色素
色素的种类与颜色：
色素 种类
含量
叶绿 约占 素 3/4
名称 叶绿素a 叶绿素b
颜色
吸收光
蓝绿色 主要吸收红 黄绿色 光和蓝紫光
类胡 萝卜 素
约占 黄色
主要吸收蓝 紫光
画滤液细线 毛细吸管沿铅笔线画一条直的 滤液细线 .
色素分离
干燥后， 重复一两 次 将滤纸条轻轻插入 层析液 中
滤纸条上呈 现四条颜色、 宽度不同的 色素带
用培养皿盖住烧杯
胡萝卜素： 橙黄 色 叶黄素： 黄 色 叶绿素a： 蓝绿 色 叶绿素b： 黄绿 色
1.在提取绿叶中的色素时，研磨绿叶碎片需要
加入碳酸钙，目的是 （ B ）
捕获光能
色素
色素的吸收光谱
延伸拓展
色素的分布： 叶绿体的类囊体薄膜上
色素的作用： 吸收、传递、转化光能
不同颜色的大棚对光和效率的影响： ① 无色透明大棚光和效率最高； ② 绿色塑料大棚光和效率最低。 ③ 在农业生产中，有些温室中悬挂红色或蓝 色光的灯，可有效提高蔬菜产量。
甲＞乙＞丙＞丁
叶绿体中色素
实验目的：
提取和分离
1) 进行绿叶中色素的提取和分离； 2) 探究绿叶中含有几种色素。
材料用具：
新鲜的绿叶、干燥的定性滤纸、无 水乙醇、层析液、二氧化硅、碳酸 钙、毛细吸管、研钵、剪刀、量筒 等。
一、提取绿叶中的色素
1.取材： 5g绿叶+剪碎+研钵 2.研磨： 二氧化硅+碳酸钙+10ml无水乙醇 3.过滤： 玻璃漏斗+单层尼龙布
绿叶中色素的提取和分离
实验原理：
1.提取：绿叶中的色素都能溶解于有机溶剂无水乙醇 中，所以可以用无水乙醇提取绿叶中的色素。
2.分离：纸层析法
绿叶中的色素不止一种，它们都能溶解在层析液中。 然而，它们在层析液中的溶解度不同。溶解度高的随 层析液在滤纸上扩散得快；反之则慢。这样滤液中不 同的色素就随着层析液在滤纸上的扩散而分离开。
光能→ATP中活跃的化学能 ATP中活跃的化学能→(CH2O)中稳 定的化学能
①光反应为暗反应提供还原剂[H]、能量ATP；暗反应为光反应提供
关系 ADP和Pi；
小结：
叶绿体是进行光合作用的场所。它内部的 巨大膜表面上，不仅分布着许多吸收光能 的色素分子，还有许多进行光合作用所必 需的酶。
与生活的联系
根据不同色素对不同波长的光的吸收不同 的特点，想一想温室或大棚种植蔬菜时， 应选择什么颜色的玻璃、塑料薄膜或补充 光源？
无色最好，其次是红光或蓝紫光， 最次是绿光
1．研磨绿叶时要加入碳酸钙，其目的是
(C)
A．使各种色素溶解在丙酮中 B．使研磨充分
C．防止色素分子被破坏 D．加速研磨
2．对“叶绿体中色素的提取和分离”实验中，下列描
－
＋
－
注：“＋”表示加；“－”表示不加。试回答： （1）A处理得到的溶液颜色是_黄_绿__色，原因是_部__分__叶__绿__素__受__到__破_。坏 （2）B处理得到的溶液颜色是___ __，原因是_叶__绿__素__不__溶__于__水__。
（3）C处理得到的溶液颜色_深__绿_ 色__，原因是大__量__叶__绿__素__溶__于__乙__醇。中
铅笔线
画铅笔细线
剪角的目的：防止两侧色素扩散快，色素带不整齐
高一生物必修一实验绿叶中色素的提取和分离知识点总结
实验：绿叶中色素的提取和分离
1、实验原理
（1）、提取：相似相溶（色素可以溶解在无水乙醇中）
（2）、分离：溶解度不同（色素在层析液中的溶解度不同）
2、材料用具
（1）、叶片要新鲜，颜色要深绿
（2）、无水乙醇（或95%乙醇加入无水碳酸钠去水），
层析液（可用93号汽油代替），二氧化硅SiO2，碳酸钙CaCO3。
2、步骤：
（1）、提取：
剪碎+ SiO2 + CaCO3 + 无水乙醇过滤
加SiO2的目的：使研磨充分。
加CaCO3的目的：防止色素被破坏。
研磨要迅速、充分：迅速是为了防止无水乙醇挥发。
充分时使叶绿体充分被破坏，使色素完全释放出来。
过滤时要用单层尼龙布而不用滤纸的原因：
①、色素分子较大，不易通过滤纸
②、滤纸有较强的吸附能力而使色素吸附在滤纸上，从而降低色素浓度影响实验
效果。
（2）、制备滤纸条
在滤纸条的一端减去两角的目的：防止边缘效应
用铅笔画一细线的目的：其标记作用（以便每次重复画的滤液细线在同一位置）（3）、画滤液细线
①细、齐、直（色素在同一起跑线出发）
②重复2~3次
（4）、分离
将有滤液细线的一段朝下
不能让滤液细线直接接触到层析液：防止色素溶解在层析液中，影响实验效果（5）、结果
顺序（由上到下）：胡叶a b
宽度：代表色素含量。
叶绿素的提取和分离实验
叶绿素的提取和分离实验
叶绿素的提取：称取5 g的绿叶，剪碎，放入研钵中→加入少量二氧化硅、碳酸钙和10 mL无水乙醇→研磨→过滤→收集到试管内并塞严试管口。
准备过滤纸条：将过滤纸条剪成略小于试管长度和直径的过滤纸条，将滤纸条的一端剪去两角，在距离剪角一端1cm处用铅笔画一条细的横线。
画滤细线：用毛细管吸取少量滤液，并沿铅笔线均匀划出一条细线，待滤液干后再画1~2次。
叶绿素分离：在试管中倒入适量层析液。
得到滤纸上的四种颜色、不同宽度的色素带。
叶绿素提取注意事项：
准备滤纸时，要将滤纸的一端剪去两角，这样可使色素扩散到滤纸上，以便于观察实验结果。
过滤时不用滤纸过滤而用单层尼龙布过滤是因为滤纸对色素具有吸附作用，若用其过滤，会导致收集到的滤液色素含量少，使实验效果不明显或失败。
高一生物必修一绿叶中色素的提取和分离
高一生物必修一绿叶中色素的提取和分离
绿叶中色素的提取和分离是生物学中常见的实验。
这些色素包括叶绿素和类胡萝卜素等，它们在植物中扮演着重要的角色。
这里我们将介绍一种用酒精提取绿叶中色素的实验方法。
实验材料：
绿叶片、95%酒精、滤纸、试管、注射器、酒精灯、热水浴
实验步骤：
1.取一片新鲜的绿叶，用滤纸将叶面的水分吸干。
2.将绿叶放置于试管中，加入适量的95%酒精，使酒精淹没叶片。
3.用注射器搅拌试管中的溶液，使绿叶中的色素充分溶解到酒精中。
4.将试管放置于酒精灯上，加热使溶液沸腾，继续加热2-3分钟。
5.将试管从酒精灯上取下，放入热水浴中冷却。
6.待溶液冷却后，用滤纸过滤，将滤液收集到干净的试管中。
7.观察滤液的颜色，可以看到其中含有绿色的叶绿素和黄色的类胡萝卜素等色素。
实验原理：
绿叶中的色素可溶于有机溶剂如酒精中，通过加热使其溶解速度加快。
经过过滤等步骤，可将色素分离出来并得到纯净的溶液。
实验注意事项：
1.实验中要注意安全，避免烧伤或其他意外。
2.使用的酒精必须是95%的，以保证溶解效果。
3.加热时要注意控制温度，避免溶液沸腾溢出。
4.过滤时要用干净的滤纸，避免杂质进入溶液中。
总结：
本实验通过酒精提取的方法，成功地从绿叶中分离出了色素，可以观察到叶绿素和类胡萝卜素等色素。
这种方法简单易行，是初学生物实验的一种不错的选择。
绿叶中色素的提取和分离
C
（P40、2）在下图中，图1、图2为不同材料叶绿体中色素的层 P40、 在下图中， 析结果（示意图）， ），图 析结果（示意图），图3、图4为不同条件下水稻光合作用强度的 变化曲线，其中正确的是 变化曲线，
A
（P40、12）分别在A、B、C三个研钵中加2克剪碎的新鲜菠菜绿叶， P40、12）分别在A 三个研钵中加2克剪碎的新鲜菠菜绿叶， 并按下表所示添加试剂，经研磨、过滤得到三种不同颜色的溶液， 并按下表所示添加试剂，经研磨、过滤得到三种不同颜色的溶液， 深绿色、黄绿色（或褐色），几乎无色。试回答： ），几乎无色 即：深绿色、黄绿色（或褐色），几乎无色。试回答： 处理 SiO2（少量） 少量） CaCO3（少量） 少量） A ＋ — B ＋ ＋ — ＋ C ＋ ＋ ＋ —
实验： 实验：绿叶中色素的提取和分离 实验原理： 实验原理： 绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中， 绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中， 所以，可以用无水乙醇提取绿叶中的色素。 所以，可以用无水乙醇提取绿叶中的色素。 绿叶中的色素不只一种， 绿叶中的色素不只一种，它们都能溶解在层析液 然而，它们在层析液中的溶解度不同： 中。然而，它们在层析液中的溶解度不同：溶解 度高的随层析液在滤纸上扩散得快；反之则慢。 度高的随层析液在滤纸上扩散得快；反之则慢。 这样，几分之后，绿叶中的色素就会随着层析液 这样，几分之后， 在滤纸上的扩散而分离开。 在滤纸上的扩散而分离开。
胡萝卜素（橙黄色） 胡萝卜素（橙黄色）
类胡萝卜素
1 /4
叶黄素（黄色） 叶黄素（黄色） 叶绿素a (蓝绿色 叶绿素a (蓝绿色) 蓝绿色)
叶绿素
3 /4
叶绿素b 黄绿色） 叶绿素b（黄绿色）
色素含量：叶绿素a 叶绿素b 叶黄素﹥ 色素含量：叶绿素a﹥叶绿素b ﹥叶黄素﹥胡萝卜素
5.4.1绿叶中色素的提取和分离实验
思考：
• 3.色素带的宽窄代表什么？ 色素带越宽，代表色素含量越
多，反之越少
• 4.色素带在滤纸条上的排布是怎样的？
从上到下分别是：胡萝卜素、 叶黄素、叶绿素a、叶绿素b 在层析液中的溶解度：胡＞黄＞a＞b
巩固练习
因为叶绿素中吸收最多的 是蓝紫光和红光
• 为什么不使用发绿色光 的灯管作补充光源？
叶绿素对绿光吸收最少
红色日光灯
现代温室大棚的“神器”
红色/蓝色LED灯
二氧化碳发生器
捕获光能的结构——叶绿体
外膜 内膜 基粒
类囊体 基质
★捕获光能的色素分布在_类__囊__体__的__薄__膜__上__ ★酶分布在类__囊__体__薄__膜__和__基__质_ 上
D．色素分子是有机物，不溶于水，所以研磨过程中加
入丙酮是为了溶解色素
2．在圆形滤纸的中央滴上叶绿体的色素滤液进 行色素分离，要看到近似同心环状的四个色素 圈，排列在最外圈的一个呈（ ）。
A. 蓝绿色 B. 黄绿色 C. 黄色 D. 橙黄色
胡萝卜素
叶黄素
叶绿素a
D
叶绿素b
二、色素的作用
➢为什么植物的叶片通常呈绿色？
（2）分离原理: 不同色素在层析液中_溶__解__度__的不同,溶解度__高__的随 层析液在滤纸上扩散得快,反之则慢。
（所以可以用层析液来分离色素）
2.实验的步骤是怎样？
（1）提取绿叶中的色素 （2）制备滤纸条
（3）画滤液细线
（4）分离绿叶中的色素
（5）观察和记录
3.怎样提取色素？提取过程中需要加入哪些试剂？各自 具有什么作用？
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绿叶色素提取和分离
实验原理
1.色素提取的原理：绿叶中色素不溶于水，但易溶于无水乙醇等有机溶剂，因此可用无水乙醇把色素提取出来。
2.色素分离的原理：不同色素在层析液中的溶解度不同，溶解度高的随层析液在滤纸上扩散的快，反之则慢，这样绿叶中的色素就会随着层析液在滤纸上的扩散而分离开。
方法步骤及结果
1.提取色素
称取5g绿色叶片并剪碎，放入少量二氧化硅、碳酸钙和10mL无水乙醇;放入研钵研磨，过滤，收集到试管内并塞住试管口。
2.制备滤纸条
将干燥的定性滤纸剪成略小于试管长与直径的绿纸条，并减去滤纸条一端的两个角;在距离剪角一端一厘米处用铅笔画一条细的横线。
3.画滤液细线
用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀的画一条直的滤液细线，在滤液干后再重复画一两次。
4.色素分离
将适量的层析液倒入试管中，将滤纸条轻轻插入层析液中，用棉塞塞紧试管口。
观察现象。