R A琼脂对照培养基使用说明

R2A琼脂培养基适用性验证方案

R2A琼脂培养基适用性验证方案目的：验证R2A琼脂培养基适合需氧菌计数的测定；验证同一厂家，不同批号，对培养基适用性无明显差异。

范围： R2A琼脂培养基。

内容：1. 概述培养基质量是影响微生物检验结果的重要环节。

计数测定用培养基的促生长能力是微生物限度检查结果判断的重要影响因素，对菌落数量、颜色、形态等指标存在较大差异，从而影响结果判断的客观性。

培养基适用性检查是通过检验用培养基与对照培养基的比较，以阳性菌的数量、生长状态或特征来评价判断检验用培养基是否符合检验要求。

2. 验证原因按2015版《中国药典》微生物限度检验要求。

3. 验证过程3.1 验证人员：组长：组员：3.2 验证时间年月日至年月日3.3 验证用仪器3.4 验证用培养基及试剂3.5 验证用菌种3.6 菌液制备分别接种铜绿假单胞菌,枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至50ml 胰酪大豆胨液体培养基中，在32℃培养24小时，然后用0.9%无菌氯化钠溶液10倍稀释至每1ml 含菌数小于100cfu 的菌悬液。

3.7 适用性检查3.7.1 向两个无菌平皿内分别注入1ml 上述铜绿假单胞菌菌悬液，加入菌液后立即倾注R2A 琼脂培养基；向两个无菌平皿内分别注入1ml 上述枯草芽孢杆菌菌悬液，加入菌液后立即倾注R2A 琼脂培养基；同时制备1个R2A 琼脂培养基平皿做无菌性检查，混匀，凝固，置32℃下倒置培养72小时，计数；3.7.2. 向两个无菌平皿内分别注入1ml 上述铜绿假单胞菌菌悬液，加入菌液后立即倾注R2A 琼脂对照培养基；向两个无菌平皿内分别注入1ml 上述枯草芽孢杆菌菌悬液，加入菌液后立即倾注R2A 琼脂对照培养基；同时制备1个R2A 琼脂对照培养基平皿做无菌性检查，混匀，凝固，置32℃下倒置培养72小时，计数；3.8 检查结果R2A琼脂培养基的适用性检查结果如下4. 结果判定根据上面的数据，可以看出R2A琼脂培养基平皿上的菌落数与R2A琼脂对照培养基平皿上的菌落数的比值为（应在0.5-2范围内），而且菌落形态大少与对照培养基平皿上的菌落，判定R2A琼脂培养基的适用性检查。

环凯 R2A琼脂培养基说明书

广东环凯微生物科技有限公司网址：地址：广州市黄埔区科学城神舟路788号邮编：510663传真：860288778876产品说明书Product Manual【产品名称】通用名称：R2A 琼脂培养基英文名称：R2A Agar 【产品编号与包装规格】产品编号产品类型包装规格028029P1颗粒250g/瓶【产品用途】用于纯水中微生物的计数。

【检验原理】酵母浸出粉、蛋白胨、酸蛋白水解物提供氮源、维生素、生长因子；葡萄糖、为可发酵糖类；可溶性淀粉可以吸收菌在复苏过程产生的有害物质；丙酮酸钠可增强细菌的复苏。

磷酸二氢钾为酸碱缓冲剂；无水硫酸镁提供二价阳离子；琼脂为凝固剂。

干粉培养基：称取本品干粉18.1g，加入蒸馏水或去离子水1L，搅拌加热煮沸至完全溶解，121℃高压灭菌15min。

【质量控制】贮存于避光、干燥处，用后立即旋紧瓶盖；保质期三年。

【注意事项】1、称量时注意粉尘，佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系统不适。

2、干粉培养基使用后立即旋紧瓶盖，避免吸潮结块。

贮存于避光、干燥处。

未开封产品保质期三年。

开封后根据存放条件的不同保质时间存在一定的差异。

3、质检报告可以登录环凯网站，打开“质检报告”页面，输入产品批号下载。

广东环凯微生物科技有限公司网址：地址：广州市黄埔区科学城神舟路788号邮编：510663传真：************-8619************8602************88778876【废物处理】检测之后带菌物品置于121℃下高压灭菌30分钟后处理。

【执行标准】Q/HKSJ 03-2011广东环凯微生物科技有限公司企业标准普通微生物培养基【说明版本】2019年11月22日【参考文献】《中华人民共和国药典》2015年版。

营养琼脂培养基配方及使用说明

营养琼脂培养基配方及使用说明022020 营养琼脂(普通肉汤琼脂培养基)(Nutrient Agar)营养琼脂培养基用途：营养琼脂培养基NA用于细菌总数测定、保存菌种及纯培养，也可用于消毒效果测定(GB/T4789.28-2003 中4.7 ，GB/T4789.2-2003，GB15979-2002和GB15981-1995，ISO标准)。

营养琼脂培养基检测原理：蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;氯化钠能维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。

营养琼脂培养基配方(每升)：蛋白胨 10g牛肉膏粉 3g氯化钠 5g琼脂 15g最终pH 7.3±0.2培养基使用方法：1、称取营养琼脂培养基NA 33g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min，备用。

2、(食品)以无菌操作称取检样25克(或25mL)，放入含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的玻璃三角瓶中(瓶内预置适当数量的玻璃珠)，充分振摇，即为1：10的均匀稀释液。

依次做1：100，1：1000……稀释液。

3、根据对样品污染情况的估计，选择2—3个合适的稀释度，分别在做10倍稀释的同时，吸取1mL稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做2个平皿。

4、稀释液移入平皿后应及时将凉至46℃左右的培养基注入平皿约15mL，并转动平皿使混合均匀，同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照。

待琼脂凝固后，倒置于36±1℃温箱中培养48±2h。

5、观察结果。

6、菌落计数方法：做平板菌落计数时，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏，在计下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。

MRSA显色培养基使用说明书

法国科玛嘉MRSA显色培养基使用说明书此培养基用于耐甲氧西林金葡的分离和鉴定。

一、组分琼脂15.0g/L蛋白胨﹑酵母浸出物及盐分65.0g/L色素 2.5g/LpH 6.9±0.2根据需要，可以进行经典配方的调整或补充。

二、操作1．取瓶内干粉，每8.25 g溶于100ml蒸馏水或纯水中，可以根据需要按照比例扩大、缩小。

2．将上述干粉缓慢倒入蒸馏水中，充分搅拌溶解。

3．加热至100℃，并按常规不断搅拌。

如果使用高压锅，无需加压，加热不能超过100℃。

混合物也可以在微波炉中加热，用此法加热，煮沸后混合物立即移出微波炉并轻轻搅拌，而后移入微波炉再加热，直至琼脂完全溶解（大量气泡代替泡沫产生，大约需要2分钟）。

4．取增补剂一瓶加入20ml无菌水中（可根据需要按照基础培养基的比例扩大或缩小）使其完全溶解。

5．★使用倾注程序：将培养基水浴冷却至50℃左右，然后把混匀后的增补剂加入到冷却好的基础培养基中，轻轻混匀，准备无菌带盖培养皿，每个培养皿接种1ml 样品，然后倾注10ml上述溶解的培养基，混匀使其凝固，倒置，37℃培养24小时。

★如果用表面接种程序：将混匀后的培养基倾注于无菌培养皿中，使其凝固，在室温可保存一天或在冰箱里贮存数天（避光，2-8℃）。

划线接种（在冰箱中贮存的培养皿/试管应先恢复至室温才可以接种），倒置，37℃培养24小时。

三、储存1．干粉需保存在15-30℃，干燥环境中。

2．增补剂需保存在2-8℃环境下。

四．结果初筛微生物菌落色彩耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）青霉素敏感金葡菌（MSSA）其他紫红色不生长被抑制、无色或兰色注：最后的鉴定必须做补充实验。

★使用过的培养基需要在121℃灭菌至少20分钟才可以按照有关规定丢弃。

CHROM agar公司中国区特约经销商：北京赛为思生物技术开发中心。

R2A琼脂培养基适用性检查方案

R2A琼脂培养基适用性检查方案清晨的阳光透过窗帘，洒在了我的书桌上，一股莫名的动力涌上心头。

十年的方案写作经验告诉我，此刻正是沉浸在创意的海洋中，挥洒文字的最佳时刻。

那么，就让我们来谈谈R2A琼脂培养基适用性检查方案吧。

一、方案背景近年来，微生物实验室在科研和生产中的应用越来越广泛，培养基作为微生物生长繁殖的基础物质，其质量直接关系到实验结果的准确性。

R2A琼脂培养基作为一种常用的培养基，其适用性检查显得尤为重要。

二、方案目标1.评估R2A琼脂培养基的质量，确保其适用于微生物实验室的各项实验。

2.为实验室人员提供一套完整的R2A琼脂培养基适用性检查方案。

三、方案内容1.培养基的外观检查我们要对R2A琼脂培养基的外观进行检查。

观察其颜色、透明度、有无杂质等。

合格的R2A琼脂培养基应为淡黄色，透明度好，无杂质。

2.培养基的溶解性检查将R2A琼脂培养基加入蒸馏水中，观察其溶解性。

合格的R2A琼脂培养基应在短时间内完全溶解，无沉淀。

3.培养基的PH值检查使用PH计对R2A琼脂培养基的PH值进行测定。

合格的R2A琼脂培养基的PH值应在6.8-7.2之间。

4.培养基的微生物生长情况检查将R2A琼脂培养基接种到已知微生物菌种中，观察其在培养基上的生长情况。

合格的R2A琼脂培养基应能支持目标微生物的生长。

5.培养基的稳定性检查将R2A琼脂培养基在室温下放置一定时间，观察其是否发生变质。

合格的R2A琼脂培养基应在一定时间内保持稳定，不发生变质。

6.培养基的保存期检查对R2A琼脂培养基的保存期进行测定，确保其在有效期内使用。

合格的R2A琼脂培养基的保存期一般不应低于6个月。

四、方案实施1.准备实验材料实验所需材料包括：R2A琼脂培养基、蒸馏水、PH计、微生物菌种、培养皿等。

2.实施检查按照方案内容逐项进行检查，详细记录实验数据。

3.数据分析对实验数据进行分析，评估R2A琼脂培养基的适用性。

4.结果报告将实验结果整理成报告，提交给实验室负责人。

R2A琼脂培养基产品说明书

化学品安全技术说明书第一部分化学品及企业标识产品中文名称：R2A琼脂培养基产品英文名称：R2A Agar产品编号：022029企业名称：广东环凯微生物科技有限公司地址：广东省广州市黄埔区广州开发区科学城神舟路788号邮编：510663公司网址电子邮件地址：*********************传真号码：************销售热线：************-8602技术热线：************-8877/8876推荐用途和限制用途：生化研究/分析第二部分危险性概述GSH危害性类别非危险物质或混合物GSH标签要素非危险物质或混合物其它危害（健康危害、环境危害）未见报道第三部分成分/组成信息混合物化学品成分：参考培养基使用说明。

有害物质成分：无第四部分急救措施一般信息：无特殊的措施要求。

皮肤接触：立即用清水彻底清洗。

眼睛接触：立即提起眼睑，用大量流动清水冲洗15min。

如不适就医。

吸入：如果吸入，将人员移动到新鲜空气处，如果没有呼吸，进行人工呼吸操作，并联系医生。

食入：如误食，用水冲洗口腔，如不适就医。

就医信息：出示产品使用说明或者此SDS。

第六部分泄露应急处理个人防护：穿个人实验服,佩戴手套和口罩,避免吸入干粉。

环境保护措施：用湿布和地拖擦拭干净。

清洁/收集措施：保持干燥。

迅速清洗弄脏的区域。

第七部分操作处置与储存安全操作注意事项：防止粉尘扬起，应提供通风设备。

储存注意事项：贮存于避光、干燥处，用后立即旋紧瓶盖。

第八部分接触控制/个人防护职业接触限值没有已知的国家规定的暴露极限。

工程控制：提供安全淋浴和洗眼设备个人保护措施呼吸系统防护：在通风橱里称取产品，佩戴口罩。

眼睛防护：佩戴安全眼镜。

身体防护：穿实验室服。

手防护：戴防化学品手套。

其他防护：常规的工业卫生操作，工作后及时清洗双手。

第九部分理化特性外观：粉末 pH 值： 7.2±0.2 颜色：淡黄色气味：特征性熔点：无数据资料沸点：无数据资料燃点：无数据资料闪点：无数据资料爆炸限度下限：无数据资料上限：无数据资料热分解：无数据资料溶解性：按产品使用说明上的用量比例加蒸馏水，加热煮沸至完全溶解，溶液呈黄色澄清无沉淀。

琼脂的用法与用量

琼脂的用法与用量
琼脂是一种用于细胞培养的培养基，它是一种由糖、蛋白质和矿物质组成的凝胶，可以支持细胞的生长和繁殖。

琼脂的用法与用量取决于实验的目的，以及实验中使用的细胞类型。

琼脂的用法主要有两种：一种是用于细胞培养，另一种是用于细胞分离。

在细
胞培养中，琼脂可以提供细胞所需的营养，促进细胞的生长和繁殖。

在细胞分离中，琼脂可以帮助细胞形成凝胶，从而使细胞分离更加容易。

琼脂的用量取决于实验的目的，以及实验中使用的细胞类型。

一般来说，用于
细胞培养的琼脂用量为1-2克/升，而用于细胞分离的琼脂用量为2-4克/升。

在使用琼脂时，应该注意控制琼脂的温度，以免影响细胞的生长和繁殖。

此外，在使用琼脂时，应该注意控制琼脂的pH值，以确保细胞的正常生长和
繁殖。

琼脂的pH值一般在7.2-7.4之间，如果pH值过高或过低，可能会影响细胞的生长和繁殖。

总之，琼脂是一种用于细胞培养和细胞分离的重要培养基，它的用法与用量取
决于实验的目的，以及实验中使用的细胞类型。

在使用琼脂时，应该注意控制琼脂的温度和pH值，以确保细胞的正常生长和繁殖。

营养琼脂对照培养基使用说明

营养琼脂对照培养基营养琼脂对照培养基产品说明：本品是一种最基本的非选择性培养基，含有氮源、碳源和微量无机盐适合一般细菌的生长繁殖。

因含有动、植物两种蛋白质，苛养菌也可利用其中的营养进行增殖。

营养琼脂对照培养基用途：细菌计数培养基适用性试验或检验营养琼脂对照培养基注意事项：1.检查平板内是否干裂或染菌，如长菌请勿使用；2.请在洁净的环境下操作，避免杂菌干扰；3.在冰箱储存很久的培养基容易出现一些冷凝水，请在洁净的环境下将水倒出，然后在培养箱放置10-30Min，待其表面干燥后再接种；或在使用前，提前一到两周放置室温即可；4.弃物处理：使用后应高压灭菌或焚烧后按一般垃圾处理，也可按专业技术人员指示方法处理。

保存：避光保存，放于阴凉干燥处。

营养琼脂对照培养基其他相关对照培养基：硫乙醇酸盐流体对照培养基改良马丁对照培养基营养琼脂对照培养基营养肉汤对照培养基玫瑰红钠琼脂对照培养基胆盐乳糖对照培养基甘露醇氯化钠琼脂对照培养基沙氏葡萄糖肉汤对照培养基麦康凯琼脂对照培养基沙门、志贺菌属琼脂对照培养基4-甲基伞形酮葡萄苷酸（MUG)对照培养基沙氏葡萄糖琼脂对照培养基念珠菌显色对照培养基绿脓菌素测定用对照培养基基础梭菌增菌对照培养基哥伦比亚琼脂对照培养基溴化十六烷基三甲铵琼脂对照培养基基础四硫磺酸钠亮绿对照培养基基础乳糖发酵对照培养基酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂（YPD）对照培养基胰酪大豆胨琼脂对照培养基胰酪大豆胨肉汤对照培养基R2A琼脂对照培养基三糖铁琼脂对照培养基麦康凯液体对照培养基紫红胆盐葡萄糖琼脂对照培养基肠道菌增菌液体对照培养基木糖赖氨酸脱氧胆酸盐对照培养基。

r2a琼脂培养基用途

r2a琼脂培养基用途引言：r2a琼脂培养基是一种广泛应用于微生物学实验室的培养基，它具有多种用途。

本文将详细介绍r2a琼脂培养基的组成、制备方法以及其在微生物学实验中的应用。

一、r2a琼脂培养基的组成r2a琼脂培养基主要由牛肉膏、酵母浸出物、淀粉、葡萄糖、琼脂和蒸馏水等成分组成。

其中，牛肉膏和酵母浸出物提供了微生物所需的氨基酸、维生素和其他营养物质，淀粉和葡萄糖则为微生物提供能量来源。

琼脂的加入使得培养基具有固体的形态，方便微生物的生长和观察。

二、r2a琼脂培养基的制备方法制备r2a琼脂培养基的方法较为简单。

首先，将适量的牛肉膏和酵母浸出物溶解在蒸馏水中，并加热至完全溶解。

然后，将淀粉和葡萄糖加入溶液中，搅拌均匀。

最后，加入适量的琼脂并搅拌至完全溶解。

将制备好的培养基分装到培养皿中，并在高压灭菌器中进行高压灭菌。

待培养基冷却后，即可使用。

三、r2a琼脂培养基的应用1. 微生物定量：r2a琼脂培养基广泛应用于微生物的定量研究中。

由于其成分的合理配置和琼脂的添加，r2a琼脂培养基能够提供丰富的营养物质，使得微生物在上面能够迅速生长形成可见的菌落。

通过对菌落数量的计数，可以对微生物的种类和数量进行定量分析。

2. 环境微生物研究：r2a琼脂培养基也常用于环境微生物的研究中。

环境中存在着各种各样的微生物，而r2a琼脂培养基提供的丰富营养物质可以满足不同微生物的生长需求，从而促进其生长和繁殖。

通过在不同环境样品上使用r2a琼脂培养基进行培养，可以获得环境中微生物的种类和数量信息，对环境微生物进行研究。

3. 食品卫生检测：在食品卫生检测中，r2a琼脂培养基也被广泛应用。

食品中可能存在各种微生物，而r2a琼脂培养基提供的适宜的营养物质能够促进微生物的生长。

将食品样品接种在r2a琼脂培养基上进行培养，可以检测食品中是否存在致病微生物或食品污染。

4. 高需氧微生物研究：r2a琼脂培养基对高需氧微生物的研究也具有重要意义。

R2A琼脂培养基即用型平板说明书

R2A琼脂培养基即用型平板说明书【产品名称】通用名称：R2A琼脂英文名称：R2A Agar【型号规格】Φ90mm，10皿/包。

【预期用途】用于纯化水中菌落总数的测定。

【检验原理】蛋白胨、酵母浸出粉、酪蛋白水解物提供氮源及生长因子；葡萄糖、可溶性淀粉提供碳源亦可吸收细菌代谢过程中产生的废物；丙酮酸钠有利细菌生长；磷酸盐是pH稳定剂；琼脂是凝固剂。

【组成成份】由蛋白胨、酵母浸出粉、酪蛋白水解物、葡萄糖、可溶性淀粉、丙酮酸钠、磷酸盐和琼脂等组成。

【使用方法】样本按药典标准规定进行前处理后接种于培养基，30～35℃培养18～24h 后，观察结果。

【检验结果】枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌生长良好。

【注意事项】1.该培养基仅用于科研研究。

2.采集的标本必须尽快接种培养，以保证结果准确。

3.所用标本及其培养废弃物应视为有潜在传染性的物质，应按传染病实验室操作规范处理。

【贮存条件】2～25℃，避光保存。

【有效期】有效期6个月。

【参考文献】1.中国药典2020年版2.SN/T1538.1-2005培养基制备指南第1部分：实验室培养基制备质量保证通则3.SN/T1538.2-2007培养基制备指南第2部分：培养基性能测试实用指南4.WS/T232-2002商业性微生物培养基质量检验规程5.GB4789.28-2013食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求【基本信息】生产企业名称：上海申启生物科技有限公司住所：上海市普陀区绥德路118弄60号4层、56号2层联系方式：电话：************************传真：************生产地址：上海市普陀区绥德路118弄62号4层邮编：200331网址：/。

R2A琼脂培养基适用性检查方案

R2A 琼脂培养基培养基适用性检查方案文件编号：VP-QC-2015-05R2A 琼脂培养基适用性检查方案文件编号： VP-QC-2015-05起草人：审核人：批准人：批准日期：年月日R2A 琼脂培养基培养基适用性检查方案文件编号：VP-QC-2015-05目录1概述12验证目的及范围13验证小组人员组成及职责14验证依据25验证前准备26验证的实施27偏差处理58验证数据及评估59 验证报告及评审510再验证及周期511验证文件及归档512附件51验证目的及范围2015 版《中华人民共和国药典》中规定纯化水的微生物限度检查采用的培养基为R2A 琼脂培养基。

为了保证纯化水微生物限度检查的准确性和可靠性，需对该R2A 琼脂培养基进行适用性检查实验。

2验证方法照 2015 版药典非无菌产品产品微生物限度检查：微生物计数法（通则1105）中“计数培养基适用性检查”的胰酪大豆胨琼脂培养基的适用性检查方法进行，试验菌株为铜绿假单胞菌和枯草芽孢杆菌，应符合规定。

3.验证小组人员组成及职责：3.1 验证小组由以下部门人员组成：质量部、QC、生产部。

3.2验证小组组成及职责列表组成职责1.负责起草验证方案的起草2.负责本方案的培训3.仪器仪表校验确认QC 4.负责验证的实施5.负责数据的收集和整理6.负责数据分析7.负责完成验证报告质量部1.负责验证方案、验证报告的审核与批准2.负责验证现场的监督审查生产部1.负责保障设备、器具的完好2.负责动力系统的保障4验证接受标准4.1 被检固体培养基上的菌落平均数与对照培养基上的菌落平均数的比值应在0.5~2范围内，且菌落形态大小应与对照培养基上的菌落一致；4.2 被检液体培养基管与对照培养基管比较，试验菌应生长良好。

5.验证前准备5.1 验证人员培训：验证报告起草人有责任在方案批准后（且在验证实施前）对本次验证相关人员进行培训。

培训人员记录见附件1。

5.2 将所有的平皿和稀释剂都应该严格按照相关的灭菌程序消毒，以确保其对试验的结果没有影响。

061-00 R2A琼脂培养基培养基适用性检查记录

第1页共2页检品培养基名称培养基来源批号配制编号检验日期
R2A琼脂培养基
检验人：复核人：
检品培养基名称培养基来源批号配制编号检验日期R2A琼脂培养基
第2页共2页
与对照培养基上的菌落阴性皿1皿2平均A阴性皿1皿2平均B
铜绿假单胞菌□一致□不一致
枯草芽孢杆菌□一致□不一致
标准判定
被检固体培养基上的菌落平均数与对照培养基上的菌落平均数的比值应在0.5～2范围内，且菌落形态大小应与对照培养基上一致。

判该培养基的适用性检查符合规定。

结论□符合规定□不符合规定
检验人：复核人：。

营养琼脂培养基配方及使用说明2页

营养琼脂培养基配方及使用说明2页
以下是一种常见的营养琼脂培养基的配方和使用说明:
营养琼脂培养基配方:
1. 蛋白胨：5克
2. 羊肉提取物：3克
3. 酵母提取物：3克
4. 胆盐：1.5克
5. 硫酸镁：0.2克
6. 琼脂：15克
7. 蒸馏水：1000毫升
使用说明:
1. 将蛋白胨、羊肉提取物、酵母提取物、胆盐和硫酸镁加入蒸馏水中，充分溶解。

2. 加热溶液至沸腾，然后煮沸2分钟。

3. 将琼脂添加到热溶液中，搅拌均匀。

4. 冷却至40-45°C，然后倒入培养皿中。

5. 等待琼脂凝固并变为固态后，即可用于细菌的培养。

营养琼脂培养基是一种常用的通用培养基，适用于各种细菌的生长。

制备过程中需要严格控制温度和时间，以确保培养基的质量稳定。

使用时要注意无菌操作，避免细菌的污染。

营养琼脂培养基说明书

营养琼脂培养基说明书你有没有注意到那些看起来像小透明果冻的东西，放在实验室里，啥也不做却很重要的样子？对了，就是“营养琼脂培养基”！这种东西在实验室里可真是个小小的明星，虽然它静静地躺在那儿，不显山不露水，但一旦发挥起来，那可真是事半功倍，事关生命的大事。

讲个小故事吧。

你知道我第一次接触营养琼脂培养基的时候，差点没傻眼。

那时候我刚进实验室，手忙脚乱的，什么都不懂。

一开始根本没意识到它有多重要，直到有一次老师让我自己做个培养基。

说实话，听到这任务的时候，我还真是觉得这事儿不难，琼脂不就像果冻吗？弄个啥料混进去就行了吧？结果，情况完全不是我想的那样。

老师给我的是一个大大的玻璃瓶，里面满满的琼脂粉末。

琼脂，听名字像是和什么海藻有关的东西，其实它就是一种从红藻中提取的物质，可以用来“培养”细菌、真菌等微生物。

你想，细菌都小到你肉眼看不见，得靠这种“培养基”来给它们提供生存的环境。

你想象过细菌和它们的营养生活条件吗？比我还挑食，得让他们吃得“精致”一点，才会乖乖长大。

老师告诉我，首先得把琼脂粉末和一些营养物质溶解在水里，接着用火煮沸，像煮粥一样。

但别小看这个“煮”的过程。

琼脂可不是随便溶解的，它有点“傲娇”，必须加热到一定的温度才能完全溶解。

如果火候不到，琼脂没融化，培养基就像吃了硬块一样，根本没法提供细菌生长的好环境。

那时候，我还傻乎乎地以为随便搅拌一下就能搞定，结果弄了半天，琼脂表面都结成了厚厚的壳，一点都不均匀，简直就是个“科幻灾难现场”。

我记得当时特别尴尬，班里其他人都已经准备好了一批完美的培养基，自己却还在那儿翻腾着。

老师走过来看到我一脸困惑，微微一笑，轻描淡写地说：“你得慢慢加热，让它完全溶解，不然细菌是不会喜欢住在不合格的家里。

”这话说得我都觉得自己对细菌有点不好意思了。

所以说，营养琼脂培养基的“魔力”就藏在它能为微生物提供舒适生活环境的这点小细节里。

经过熬煮之后，琼脂变得清透、黏稠，慢慢冷却后，它会变得坚硬，像果冻一样，但是又不是那种吃的果冻，它得保持适当的硬度，这样微生物才有空间在上面生长。

RA培养基适用性检查方案

RA培养基适用性检查方案批准页1. 验证目的2. 参照标准3. 验证项目4. 验证人员及职责5. 判定标准6. 实验材料7. 菌液制备8. 菌液计数9. 适用性检查10. 阴性对照附件1.检测记录1. 验证目的纯化水微生物计数用的培养基应进行培养基的适用性检查。

本次验证的目的是确认 R2A培养基适合纯化水中总需氧菌总数测定。

2. 参照标准2015版中国药典二部1105微生物限度检查法。

3. 验证项目R2A 培养基的适用性检查。

4. 验证小组人员及职责验证小组人员：的审核工负责验证报告的批准工作验证工作小组职责负责验证方案的起草工作。

参与验证方案的讨论、确认工作。

负责验证方案的实施。

负责验证结果的分析、统计、报告工作参与验证结果的评价工作。

质量部职责负责公司验证日常管理工作。

负责验证方案的审核工作验证人求验证中责负责验员职责及要各部门的职证资料及结果负责验证过程中仪器、仪表、计量器具的校验工作证过程中的各项检验工作负责5. 判定标准被检培养基上的菌落平均数与对照培养基上的菌落平均数的比值应在的范围内，且菌落形态大小与对照培养基上的菌落一致。

6. 试验材料被验证产品：R2A琼脂培养基仪器设备压力蒸汽灭菌器HF1200LC型生物安全柜DNP-9160BS型培养箱DHG90型鼓风干燥箱微波炉验证用培养基验证用菌株：（第代）7. 菌液制备分别取铜绿假胞杆菌、与枯草芽抱杆菌的新鲜培养物至胰酪大豆胨液体培养基中，于30?35C培养不超过18-24h。

取经30?35C培养18-24h的铜绿假单胞菌、与枯草芽抱杆菌的新鲜培养物1ml加入到％无菌氯化钠溶液中，倍稀释获得约为50~100cfu / ml的菌悬液备用。

8. 菌液计数：（每种菌液接种2个平皿）分别取铜绿假单胞菌与枯草芽抱杆菌菌悬液1ml分别注入无菌平皿中，立即倾注R2A琼脂培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，置30?35 °C培养不少于5天；菌落计数结果（2个平皿计数取平均值）见下表菌落计数结果（cfu / ml）9. 适用性检查分别取铜绿假单胞菌与枯草芽抱杆菌菌悬液1ml分别注入无菌平皿中，立即倾注R2A琼脂对照培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，置30?35 °C培养不不少于5天；菌落计数结果（2个平皿计数取平均值）见下表）菌落计数结果（cfu / ml为确认试验条件是否符合要求，应进行阴性对照试验，阴性对照试验应无菌生长。

营养琼脂培养基配方及使用说明

营养琼脂培养基配方及使用说明022020 营养琼脂(普通肉汤琼脂培养基)(Nutrient Agar)营养琼脂培养基用途：营养琼脂培养基NA用于细菌总数测定、保存菌种及纯培养，也可用于消毒效果测定(GB/T4789.28-2003 中4.7 ，GB/T4789.2-2003，GB15979-2002和GB15981-1995，ISO标准)。

营养琼脂培养基检测原理：蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;氯化钠能维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。

营养琼脂培养基配方(每升)：蛋白胨 10g牛肉膏粉 3g氯化钠 5g琼脂 15g最终pH 7.3±0.2培养基使用方法：1、称取营养琼脂培养基NA 33g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min，备用。

2、(食品)以无菌操作称取检样25克(或25mL)，放入含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的玻璃三角瓶中(瓶内预置适当数量的玻璃珠)，充分振摇，即为1：10的均匀稀释液。

依次做1：100，1：1000……稀释液。

3、根据对样品污染情况的估计，选择2—3个合适的稀释度，分别在做10倍稀释的同时，吸取1mL稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做2个平皿。

4、稀释液移入平皿后应及时将凉至46℃左右的培养基注入平皿约15mL，并转动平皿使混合均匀，同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照。

待琼脂凝固后，倒置于36±1℃温箱中培养48±2h。

5、观察结果。

6、菌落计数方法：做平板菌落计数时，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏，在计下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。

玫瑰红钠琼脂培养基

编号：021011中文名称：玫瑰红钠琼脂培养基英文名称：Rose Bengal AgarⅡ用途：供药品和生物制品中霉菌和酵母菌的计数、分离和培养用(《中华人民共和国药典》2010年版)。

原理：胨提供碳源和氮源;葡萄糖提供能源;磷酸二氢钾为缓冲剂;硫酸镁提供必须的微量元素;玫瑰红钠作为选择性抑菌剂可抑制细菌的生长，并可减缓某些霉菌因生长过快而导致菌落漫延生长;琼脂是培养基的凝固剂。

图鉴:配方(每升)：胨 5g葡萄糖 10g磷酸二氢钾 1g硫酸镁 0.5g玫瑰红钠 0.0133g琼脂 14g最终pH 6.0±0.2使用方法(计数用法)：1、称取本品30.5g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌20min。

2、检样的稀释处理，略。

3、根据对样品污染情况的估计，选择3个合适的稀释度，分别在做10倍稀释的同时，吸取1mL稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做2—3个平皿。

4、将凉至45℃左右的培养基约15mL注入平皿中，待琼脂凝固后，倒置于20—25℃温箱中培养72h，对于菌落微小点计困难的平板可延续培养到4—5d再进行观察计数。

5、计数、报告：(1) 计数：一般情况下，玫瑰红钠平板计点霉菌或酵母菌数，如在该平板上生长的细菌菌落数多于营养琼脂平板上生长的菌落数时，则应同时点计细菌数，并将该菌数作为供试品的细菌数报告。

固体供试品在玫瑰红钠琼脂平板上点计霉菌落数，液体供试品则需在玫瑰红钠琼脂平板上点计霉菌与酵母菌菌数;含蜂蜜及王浆的合剂需以玫瑰红钠平板的霉菌菌落数加上酵母膏粉胨葡萄糖琼脂平板的酵母菌菌落数作为供试品的霉菌、酵母菌总数。

(2) 报告：通常选择菌落数在30-100之间的稀释级的平板计数，以该稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数报告。

质量控制：本品倾注平皿后呈玫瑰红色，下列菌株接种后20—25℃培养72h生长情况如下表。

菌名菌号生长状况菌落特征黑曲霉 CMCC(F)98003 良好菌丝白色孢子黑色，底部玫瑰红色白色念珠菌CMCC(B)98001 良好菌落表面呈奶油色大肠埃希氏菌CMCC(B)44102 被抑制——贮存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。

r2a琼脂培养基成分

R2A琼脂培养基成分
R2A琼脂培养基是一种常用的微生物培养基，用于富集和培养环境中的微生物。

它的成分主要包括以下几个方面：
1.酵母提取物（Yeast Extract）：酵母提取物是由酵母细胞经过破碎、提取
而得到的，含有大量的氨基酸、维生素和微量元素。

酵母提取物提供了微
生物生长所需的营养物质。

2.蛋白胨（Peptone）：蛋白胨是一种由动植物蛋白质经过酶解得到的混合
物。

它提供了微生物所需要的氨基酸、多肽和其他有机物，是细菌和真菌
生长的重要源泉。

3.葡萄糖（Glucose）：葡萄糖是一种简单的单糖，是微生物培养的碳源。

微生物可以利用葡萄糖进行能量代谢和生物合成。

4.可溶性淀粉（Soluble Starch）：可溶性淀粉是一种多糖，是微生物培养
的碳源之一。

它可以被微生物产生的淀粉酶分解为葡萄糖，并参与微生物
的能量代谢。

5.海藻酸钠（Sodium Alginate）：海藻酸钠是一种天然的多糖，它可以提
供微生物所需的微量元素和能量源。

6.氯化镁（Magnesium Chloride）：氯化镁是一种含有镁离子的无机盐。

镁离子对于微生物的生长和代谢具有重要作用。

7.硫酸亚铁（Ferrous Sulfate）：硫酸亚铁是一种含有亚铁离子的无机盐。

亚铁离子在微生物的生长和代谢中起到了重要的辅酶和酶活化剂的作用。

以上是R2A琼脂培养基的主要成分及其作用。

这种培养基的配方经过科学调配，能够提供微生物生长所需的营养物质和环境条件，从而促进微生物的繁殖和生长。

结晶紫中性红胆盐琼脂使用

编号：022221品种名称：结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA)(Violet Red Bile Agar)用途：用于水或食品中大肠菌群平板菌落计数(GB 4789.3-2008和SN0169-92)。

原理：蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;乳糖是可发酵的糖类;氯化钠可维持均衡的渗透压;3号胆盐和结晶紫抑制革兰氏阳性菌，特别抑制革兰氏阳性杆菌和粪链球菌;中性红为pH指示剂。

图鉴：配方(每升)：蛋白胨7g酵母膏粉 3g乳糖10g氯化钠5g3号胆盐1.5g中性红0.03g结晶紫0.002g琼脂15g最终pH 7.4±0.2使用方法：1、称取本品41.5g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，备用(不得超过3h)。

2、以无菌手续取样品25g或25mL，加入含225mL无菌磷酸盐缓冲液(或生理盐水)的三角瓶内，充分振摇或用均质器均质1min成1：10稀释液，然后以1：10继续稀释，选择三个适宜的连续稀释度，每个稀释度接种两个平皿，倾注加热溶解并冷至45℃左右的培养基，琼脂凝固后再加3-4mL培养基覆盖平板表层。

3、36±1℃培养18—24h。

4、观察结果。

质量控制：质控菌株接种后于36±1℃培养18—24h结果如下：菌名菌号生长状况培养特征大肠埃希氏菌ATCC25922 良好深红色菌落，周围有红色沉淀产气肠杆菌CMCC(B)45103 良好红色菌落，周围可有淡红色沉淀金黄色葡萄球菌ATCC6538 受抑制-----贮存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。

贮存期三年。

规格：250g来源：环凯微生物。