麦康凯琼脂培养基
各种培养基及部分结果判读 HHT
各种培养基及部分结果判读1、营养琼脂（NA）用于一般细菌或真菌的培养及传代，细菌或真菌可在该培养基上形成菌落。
（注：主要做院感监测）2、5%羊血琼脂培养基（SBA）用于分离标本中一般细菌及需要血液成分的部分苛氧菌，多数细菌能在该培养基上形成具有典型特征的菌落，部分细菌能形成溶血现象。
根据溶血特征分为α溶血、β溶血、γ溶血，溶血特征有助于细菌鉴定。
3、巧克力培养基（CA）由于培养基中的血液受热破坏，血红素（X）及辅酶（V）释放出来,适合嗜血杆菌、奈瑟菌等需特殊生长因子细菌的分离培养。
大多数苛氧菌在该培养基上生长良好。
4、麦康凯培养基（MAC）该培养基属于弱选择性培养基，胆盐抑制革兰氏阳性细菌及部分真菌生长，对大部分肠道细菌及非发酵菌无抑制作用。
常作为革兰氏阴性杆菌的分离和初步鉴别之用，发酵乳糖的细菌在培养基上产粉色菌落，不发酵乳糖的菌落呈无色。
结果判读：大肠埃希菌：粉红色大菌落鼠伤寒沙门菌：无色中等军菌落奇异变形菌：淡橙色大菌落5、伊红亚甲蓝琼脂（EMB）该培养基是一种含酸碱染料的弱选择性培养基，伊红亚甲蓝既是指示剂又是选择剂，对革兰氏阳性菌有抑制作用。
不分解乳糖的细菌为无色或者灰白色。
用于分离肠道细菌及非发酵菌。
结果判读：铜绿假单胞菌：无色小菌落大肠埃希菌：紫红色有金属光泽的大菌落伤寒沙门菌：灰白色中等菌落球菌：不生长6、SS培养基该培养基为常用的弱选择性肠道致病菌分离鉴定培养基，用于从粪便标本或者环境中分离鉴定沙门氏菌和志贺氏菌。
结果判读：大肠埃希菌：红色菌落痢疾志贺菌：无色透明中等菌落鼠伤寒沙门菌：无色菌落，有黑色中心金葡菌：不生长7、XLD培养基XLD培养基即木糖-赖氨酸-去氧胆酸盐培养基，用于从粪便标本或环境标本中分离鉴定沙门氏菌和志贺氏菌。
原理是加入去氧胆酸钠抑制某些肠道正常菌群来增加选择性。
正常肠道菌群因发酵木糖、蔗糖和乳糖呈黄色菌落，志贺和一些变形杆菌不发酵三种糖中的任何一种，而产生红色菌落。
几种常见培养基作用
1.中国蓝平板：含有牛肉粉、蛋白胨、乳糖、琼脂、氯化钠、中国蓝、玫瑰红等成份。
是一种弱选择性（亦有学者称为无抑制性）选择培养基。
成份中的中国蓝为指示剂，玫瑰红为弱抑制剂，仅能抑制革兰阳性菌生长，而对大肠杆菌没有抑制作用，发酵性革兰阴性杆菌因分解乳糖能力不同，在此平板上的菌落颜色不同，便于鉴别菌种。
根据菌落形态，可做出相应的处理或报告。
例如：大肠埃希菌菌落呈蓝色；痢疾志贺菌呈淡红色；鼠伤寒沙门菌呈淡红色。
2.巧克力平板：普通营养琼脂成份添加进氯化血红素，万古霉素，辅酶A。
用途：除可以分离奈瑟菌，嗜血杆菌外，由于加入了万古霉素，可抑制绝大多数的革兰阳性菌的生长，在分离培养上具有重要意义，不能用血平板来替代。
巧克力平板含有嗜血杆菌生长需要的营养因子X因子和V因子。
其原理为：绵羊血中的V因子通常处于被抑制状态，加热到80～90℃12Min即可破坏红细胞膜上的不耐热抑制物，可使V因子释放，故嗜血杆菌在加热的血琼脂培养基即巧克力琼脂培养基上生长较佳。
3. TCBS：含酵母膏粉蛋白胨氯化钠柠檬酸钠硫代硫酸钠胆酸钠牛胆粉蔗糖柠檬酸铁溴麝香草酚兰麝香草酚兰琼脂；其中：氯化钠可刺激弧菌的生长；蔗糖是可发酵的糖类；胆酸钠、牛胆粉、硫代硫酸钠和柠檬酸钠及较高的pH（8.6）可抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群；霍乱弧菌对酸性环境比较敏感，因此该pH值可增强其生长；硫代硫酸钠与柠檬酸铁反应作为检测硫化氢产生的指示剂；溴麝香草酚兰和麝香草酚兰是pH指示剂。
利用指示剂来区分是否发酵蔗糖：副溶血性弧菌不发酵蔗糖，菌落呈蓝绿色。
霍乱弧菌发酵蔗糖产酸，菌落呈黄色。
TCBS常用于致病性弧菌的选择性分离，是GB2008、SN标准指定培养基。
4.MAC平板：即麦康凯琼脂培养基，用于大肠杆菌和大肠菌群的分离培养(05药典)，主要成分：蛋白胨脙胨猪胆盐(或牛、羊胆盐) 氯化钠琼脂乳糖1%结晶紫水溶液0.5%中性红水溶液。
麦康凯平板的原理：利用胆盐来抑制革兰阳性细菌的生长，而对伤寒等沙门菌有促进生长的作用．利用乳糖发酵，中性红的颜色可把分解乳糖和不分解乳糖的细菌区别开．沙门菌及志贺菌呈无色菌落，大肠埃希菌呈桃红色菌落．SS培养基2.原理培养基中牛肉膏、蛋白胨等为营养物;煌绿、胆盐、硫代硫酸钠、枸橼酸钠等抑制非病原菌生长,而胆盐能促进某些病原菌生长。
常用平板
3. TCBS：含 酵母膏粉 蛋白胨 氯化钠 柠檬酸钠 硫代硫酸钠 胆酸钠 牛胆粉 蔗糖 柠檬酸铁 溴麝香草酚兰 麝香草酚兰 琼脂；其中：氯化钠可刺激弧菌的生长；蔗糖是可发酵的糖类；胆酸钠、牛胆粉、硫代硫酸钠和柠檬酸钠及较高的pH（8.6）可抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群；霍乱弧菌对酸性环境比较敏感，因此该pH值可增强其生长；硫代硫酸钠与柠檬酸铁反应作为检测硫化氢产生的指示剂；溴麝香草酚兰和麝香草酚兰是pH指示剂。利用指示剂来区分是否发酵蔗糖：副溶血性弧菌不发酵蔗糖，菌落呈蓝绿色。霍乱弧菌发酵蔗糖产酸，菌落呈黄色。TCBS常用于致病性弧菌的选择性分离，是GB2008、SN标准指定培养基。
PS:ss是 沙门氏菌 志贺氏菌的意思 .沙门 志贺氏培养基。
对于培养基的理解特别是鉴别性或选择性的培养基，关键的地方在于理解引起变色的原因（一般是对糖的利用引起）及起选择作用的原因（抑霍乱的传染性极强，易导致疾病大流行。一旦发生大流行，短时间出现的大量病人很快会摧毁我们的防治体系，严重危害社会安全，所以有疑似患者要及时上报。
4.MAC平板：即麦康凯琼脂培养基，用于大肠杆菌和大肠菌群的分离培养(05药典)，主要成分：蛋白胨 脙胨 猪胆盐(或牛、羊胆盐) 氯化钠 琼脂 乳糖 1%结晶紫水溶液 0.5%中性红水溶液。麦康凯平板的原理：利用胆盐来抑制革兰阳性细菌的生长，而对伤寒等沙门菌有促进生长的作用．利用乳糖发酵，中性红的颜色可把分解乳糖和不分解乳糖的细菌区别开．沙门菌及志贺菌呈无色菌落，大肠埃希菌呈桃红色菌落．
PS:中国蓝平板本身为淡紫色或淡红色（与PH值有关），在乳糖被发酵后，PH变低，因而中国蓝变蓝。
麦康凯琼脂对照培养基使用说明
麦康凯琼脂对照培养基麦康凯琼脂对照培养基用途：培养基适用性实验麦康凯琼脂对照培养基外观：本品为肉粉色均一粉末，加入水中混悬均匀，灭菌后融化状态为半透明棕红色液体麦康凯琼脂对照培养基酸度：本品灭菌后pH7.4，符合2010版中国药典灭菌后pH7.2±0.2的规定。
麦康凯琼脂对照培养基注意事项：1.检查平板内是否干裂或染菌，如长菌请勿使用；2.请在洁净的环境下操作，避免杂菌干扰；3.在冰箱储存很久的培养基容易出现一些冷凝水，请在洁净的环境下将水倒出，然后在培养箱放置10-30Min，待其表面干燥后再接种；或在使用前，提前一到两周放置室温即可；4.弃物处理：使用后应高压灭菌或焚烧后按一般垃圾处理，也可按专业技术人员指示方法处理。
保存：避光保存，放于阴凉干燥处。
麦康凯琼脂对照培养基其他相关对照培养基：硫乙醇酸盐流体对照培养基改良马丁对照培养基营养琼脂对照培养基营养肉汤对照培养基玫瑰红钠琼脂对照培养基胆盐乳糖对照培养基甘露醇氯化钠琼脂对照培养基沙氏葡萄糖肉汤对照培养基麦康凯琼脂对照培养基沙门、志贺菌属琼脂对照培养基4-甲基伞形酮葡萄苷酸（MUG)对照培养基沙氏葡萄糖琼脂对照培养基念珠菌显色对照培养基绿脓菌素测定用对照培养基基础梭菌增菌对照培养基哥伦比亚琼脂对照培养基溴化十六烷基三甲铵琼脂对照培养基基础四硫磺酸钠亮绿对照培养基基础乳糖发酵对照培养基酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂（YPD）对照培养基胰酪大豆胨琼脂对照培养基胰酪大豆胨肉汤对照培养基R2A琼脂对照培养基三糖铁琼脂对照培养基麦康凯液体对照培养基紫红胆盐葡萄糖琼脂对照培养基肠道菌增菌液体对照培养基木糖赖氨酸脱氧胆酸盐对照培养基。
微生物限度检验记录
检验日期
报告日期
培养基及批号
胰酪大豆胨琼脂培养基
沙氏葡萄糖琼脂培养基
胰酪大豆胨液体培养基
麦康凯液体培养基
麦康凯琼脂培养基
pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液
供试品溶液制备
取供试品10g，加pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，混匀，作为1：10的供试液，取上液1ml，加pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液至9ml，混匀，作为1：100的供试液。
麦康凯液体培养基
麦康凯琼脂培养基
pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液
供试品溶液制备
取供试品，用开孔面积为20cm2的消毒过的金属模板压在内层面上，将无菌棉签用氯化钠注射液稍蘸湿，在板孔范围内擦抹5次，换1支棉签再擦抹5次，每个位置2支棉签共擦抹10次，共擦抹5个位置100cm2。每支棉签抹完后剪断，放入盛有30ml氯化钠注射液的锥形瓶中，将所有棉签放入瓶中后迅速摇晃1分钟，即得供试品溶液。
供试品
阳性对照
阴性对照
结果
□检出大肠埃希菌□未检出大肠埃希菌（规定：不得检出）
检验项目
四、沙门菌
胰酪大豆胨液体培养基增菌培养
（33℃，24h）
RV沙门菌增菌液体培养基选择培养
（33℃，24h）
木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基分离培养（33℃，48h）
三糖铁琼脂培养基
鉴别（33℃，24h）
供试品
阳性对照
麦康凯液体培养基选择培养
（42℃，48h）
麦康凯琼脂培养基分离培养
（33℃，72h）
供试品
阳性对照
阴性对照
结果
□检出大肠埃希菌□未检出大肠埃希菌（规定：不得检出）
检验项目
四、金黄色葡萄球菌
临床医学检验技师初级(师)微生物学及检验(细菌感染的病原学诊断)-试卷1
临床医学检验技师初级【师】微生物学及检验【细菌感染的病原学诊断】-试卷1(总分：60分，做题时间：90分钟)一、 A1型题(总题数：30，score:60分)1.下列革兰染液成分不包括【score:2分】【A】稀释复红【B】结晶紫【C】95％酒精【D】卢戈碘液【E】5％石炭酸复红【此项为本题正确答案】本题思路：革兰染液成分有结晶紫、95％酒精、卢戈碘液、稀释复红。
2.临床上最常见的真菌培养基是【score:2分】【A】脑心浸膏琼脂【B】沙保琼脂【此项为本题正确答案】【C】尿素琼脂【D】马铃薯葡萄糖琼脂【E】玉米粉聚山梨酯一80琼脂本题思路：本题考查真菌的临床培养。
真菌培养常用的培养基有沙保琼脂、脑心浸膏琼脂、米粉吐温琼脂、蔡氏培养基、马铃薯葡萄糖琼脂等，其中沙保琼脂适用于分离绝大多数真菌，应用广泛。
3.下列关于培养基性能试验说法不正确的是【score:2分】【A】分离培养基应每周测试1次【B】鉴别培养基需每批及每月测试1次【C】如需观察多项性能，可使用多种菌株完成【D】每批新购、新配的培养基，均应用已知性质的标准菌株进行预测【E】用于测试分离培养基性能的菌株，原则上应使用预期最容易生长的细菌菌种，并且应多量生长【此项为本题正确答案】本题思路：本题考查对培养基性能试验的理解。
用于测试分离培养基性能的菌株，原则上应使用预期最难生长的细菌菌种，并且应少量生长，其余均正确。
4.专性需氧菌经人工液体培养基培养后，可观察到的生长现象是【score:2分】【A】液体表面形成菌膜【此项为本题正确答案】【B】液体底部有沉淀【C】液体变色【D】可闻到腐败性的恶臭【E】液体分层本题思路：专性需氧菌在液体培养基中培养时，因生长代谢时需要氧气，故呈表面生长，常在液体表面形成菌膜。
5.中国蓝培养基属于【score:2分】【A】基础培养基【B】营养培养基【C】鉴别培养基【D】选择培养基【此项为本题正确答案】【E】增菌培养基本题思路：中国蓝平板可抑制革兰阳性菌，有选择地促进革兰阴性细菌生长，是很好的弱选择培养基。
鉴别培养基
麦康凯琼脂麦康凯可能是世界上常用的一种鉴别培养基，它主要通过乳糖发酵鉴别肠道致病菌，还能抑制革兰氏阳性菌生长，发酵乳糖的细菌能使培养基变红，这是因为细菌发酵乳糖产酸而使培养基的PH值变成酸性的。
不发酵乳糖的细菌没有颜色的变化。
麦康凯抑制阳性菌的生长，是因为其中加了结晶紫。
MACCONKEY AGARMacConkey agar is probably the most popular solid differential medium in the world. It is mainly used in identification of lactose fermenting, Gram-negative enteric pathogens and for inhibiting growth of Gram-positive organisms. Bacterial colonies that can ferment lactose turn the medium red. This red color is due to the pH indicators response to the acidic environment created by fermenting lactose. Organisms that do not ferment lactose do not cause a color change.配方g/l蛋白胨 20.0 乳糖 10.0 胆盐 5.0 氯化钠 5.0 中性红 0.075 琼脂 12.0 pH 7.4±0.配制取52克CM7，加1升蒸馏水，加热至溶解完全，121℃灭菌15分钟。
待琼脂表面变干方可接种。
特点CM7符合世界卫生组织（WHO）推荐的培养基。
工业用于检测水、乳制品和生物标本的大肠菌群和肠道致病菌，临床用于分离肠细菌。
此培养基可抑制革兰氏阳性菌，可区分乳糖发酵性和非发酵性菌。
常见微生物培养基
常见微生物培养基1. 肉汤培养基（Nutrient Broth）：这是一种常用的基础培养基，适用于多种微生物的生长。
它含有牛肉浸膏、酵母提取物和蛋白胨等成分，提供了丰富的氮源、维生素和生长因子。
2. 肉汤琼脂（Nutrient Agar）：在肉汤培养基的基础上添加琼脂，使其成为固体培养基。
这种培养基常用于分离和鉴定微生物，因为固体培养基可以形成单个菌落，便于观察和计数。
3. 血琼脂（Blood Agar）：在肉汤琼脂中加入5%的脱纤维羊血或马血。
这种培养基对于需要氧气和营养丰富的环境的微生物（如链球菌和肺炎球菌）特别有效。
4. 麦康凯琼脂（MacConkey Agar）：这是一种选择性培养基，用于分离和鉴定肠道杆菌。
它含有胆盐和结晶紫，可以抑制革兰氏阳性菌的生长，同时促进革兰氏阴性菌的生长。
5. 沙保罗琼脂（Sabouraud Agar）：这是一种用于培养真菌的培养基，含有葡萄糖、蛋白胨和琼脂。
它还含有抗生素氯霉素，可以抑制细菌的生长。
6. 鲁哥氏碘液（Lugol's Iodine）：这是一种用于检测细菌的染色剂，通常与革兰氏染色法一起使用。
它可以帮助区分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
7. 马铃薯葡萄糖琼脂（Potato Dextrose Agar）：这是一种用于培养真菌的培养基，含有马铃薯提取物和葡萄糖。
它为真菌提供了丰富的碳水化合物和氮源。
8. 三糖铁琼脂（Triple Sugar Iron Agar）：这是一种用于鉴定肠道杆菌的培养基，含有乳糖、蔗糖和葡萄糖。
通过观察细菌在培养基上的生长情况和产酸情况，可以区分不同的肠道杆菌。
9. 革兰氏染色法（Gram Stain）：这是一种用于区分细菌的染色法，通过观察细菌在染色后的颜色，可以区分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
10. 荧光染色法（Fluorescent Stain）：这是一种用于检测细菌的染色法，通过观察细菌在染色后的荧光颜色，可以区分不同的细菌种类。
大肠埃希菌检查用培养基适用性检查验证方案
1.概述:培养基是微生物试验的基础，直接影响微生物试验结果。
适宜的培养基制备方法、贮藏条件和质量控制是提供优质培养基的保证。
供试品微生物限度检查中所使用的培养基应进行适用性检查。
2.验证目的：本次验证的目的是确认大肠埃希菌检查用的麦康凯琼脂培养基、麦康凯液体培养基的质量，以及其制备程序、保存条件等是否满足微生物限度检查用要求。
3.验证依据：《中国药典》2015年版四部“1106非无菌产品微生物限度检查：控制菌检查法”、“9203药品微生物实验室质量管理指导原则”。
4.验证项目：麦康凯琼脂培养基、麦康凯液体培养基的适用性检查。
5.适用范围：成品培养基、由脱水培养基或按处方配制的培养基均应进行培养基适用性检查。
6.验证周期：除另有规定外，在实验室中，若采用已验证的配制和灭菌程序制备培养基且过程受控，那么同一批脱水培养基的适用性检查试验可以只进行一次。
如果培养基的制备过程未经验证，那么每一灭菌批培养基均要进行适用性检查试验。
7.验证小组人员及职责:7.2验证人员职责及要求7.2.1按验证方案及相关文件实施验证。
7.2.2认真观察并做好验证原始记录。
7.2.3对实施验证的结果负责。
7.3验证中各部门的职责7.3.1验证领导组职责7.3.1.1制订验证总计划，负责全公司验证工作的管理。
7.3.1.2确定验证项目及验证项目负责人。
7.3.1.3负责验证方案的批准工作。
7.3.1.4负责验证资料及结果的审核工作。
7.3.1.5负责验证报告的批准工作。
7.3.2验证项目小组职责7.3.2.1负责验证方案的起草工作。
7.3.2.2参与验证方案的讨论、确认工作。
7.3.2.3负责验证方案的实施。
7.3.2.4负责验证结果的分析、统计、报告工作。
7.3.2.5参与验证结果的评价工作。
7.3.3质量部职责7.3.3.1负责公司验证日常管理工作。
7.3.3.2负责验证方案的审核工作。
7.3.3.3负责验证过程中仪器、仪表、计量器具的校验工作。
2015版微生物检测步骤(1)
药品需氧菌总数、霉菌酵母菌总数、大肠埃希菌、耐胆盐革兰阴性菌、沙门菌测定以一批需要检测微生物五项为例进行讲解：第一天一、所需物品的准备：1、胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA） 6×20ml；2、沙氏葡萄糖琼脂培养基（SDA） 6×20ml；3、培养皿 2×6个4、胰酪大豆胨液体培养基（TSB） 5×100ml；1×90ml；2×9ml；2+2+10ml5、肠道增菌液体培养基 6×10ml：10-13支，10-21支，10-31支，空白1支6、1ml枪头若干，5ml枪头2个二、操作步骤（一）取10g样品到90ml TSB中制成1：10的供试液（10-1）1、分别取1ml至4个平皿，3支肠道增菌液体培养基中（其中一支管中待加入1ml铜绿假单胞菌菌液，一支待加入1ml大肠埃希菌菌液）；2、分别取10ml至2瓶100ml TSB中（其中1瓶待加入1ml大肠埃希菌菌液）；3、取1ml至9ml TSB中，得1：100供试液（10-2）A、分别取1ml至4个平皿，1支肠道增菌液体培养基中；B、取1ml至9ml TSB中，得1：1000供试液（10-3）a、取1ml至1支肠道增菌液体培养基中；（二）空白TSB液：1、分别取1ml至4个平皿中，1支肠道增菌液体培养基中；2、取10ml至1瓶100ml TSB液中；（三）另分别取10g样品，分别至100ml TSB液中（其中1瓶待加入1ml沙门菌菌液）三、后续步骤（一）12个平皿平均分成两份，分别包括【空白2个，1：10供试液2个（10-1），1：100供试液2个（10-2）】一份倾注TSA，摇匀，30-35℃培养5天后计数；一份倾注SDA，摇匀，20-25℃培养7天后计数；（二）进入阳性对照室，加入相应的菌液（提前一天制备）1ml；均置30-35℃培养第二天 24小时后一、所需物品的准备：1、麦康凯液体培养基 3×100ml；(取1ml→100ml）2、RV沙门增菌液体培养基 3×10ml；（取0.1ml→10ml）3、1ml枪头若干；二、操作步骤（一）大肠埃希菌：分别取大肠埃希菌的三个供试液（+供试品，+供试品和菌液，空白）1ml 至100ml麦康凯液体培养基中；（二）沙门菌：分别取沙门菌的三个供试液（+供试品，+供试品和菌液，空白）0.1ml至10mlRV沙门增菌液体培养基中；三、后续步骤（一）大肠埃希菌：置42-44℃中培养基48小时；（二）沙门菌：置30-35℃培养24小时；第三天 48小时后一、所需物品的准备：1、紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基 6×20ml（不需灭菌）2、木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基 3×20ml（不需灭菌）二、操作步骤：（一）耐胆盐革兰阴性菌分别取少量肠道增菌液体培养基培养物划线于紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基平皿上（二）沙门菌分别取少量RV沙门增菌液体培养基培养物划线于木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基平皿上三、后续步骤（一）耐胆盐革兰阴性菌置30-35℃培养24小时；（二）沙门菌置30-35℃培养48小时第四天一、所需物品准备：1、麦康凯琼脂培养基 3×20ml二、操作步骤（一）大肠埃希菌分别取少量麦康凯液体培养基培养物划线于麦康凯琼脂培养基平皿上三、后续步骤（一）大肠埃希菌置30-35℃培养72小时（二）耐胆盐革兰阴性菌判定结果第五天沙门菌判定结果或者穿刺接种第六天需氧菌总数计数第七天大肠埃希菌判断结果第八天霉菌酵母菌总数计数。
麦康凯琼脂培养基成分
麦康凯琼脂培养基成分
一、介绍
麦康凯琼脂培养基是一种常用的微生物培养基，广泛应用于细菌、真
菌等微生物的培养和检测。
其成分复杂，包括多种营养成分和添加剂，能够提供微生物所需的各种营养物质和环境条件，促进其生长繁殖。
二、主要成分
1. 蛋白胨：是麦康凯琼脂培养基中最主要的营养成分之一，含有大量
氨基酸和肽类化合物，能够为微生物提供必需的氮源和碳源。
2. 水解酪蛋白：含有大量氨基酸和肽类化合物，也是一种重要的氮源
和碳源。
3. 酵母提取物：富含多种维生素、核酸、核苷酸等营养成分，能够促
进微生物的生长繁殖。
4. 葡萄糖：为微生物提供必需的碳源，并且还能够调节培养基pH值。
5. 麦芽糊精：是一种复杂多糖，能够为微生物提供能量和营养物质。
6. 氯化钠：是一种重要的电解质，能够维持细胞内外的渗透压平衡。
7. 磷酸二氢钾：能够缓冲培养基pH值，使其保持在适宜范围内。
8. 麦康凯琼脂：是一种富含多糖的天然胶体，具有较好的凝胶性和稳
定性，可以使培养基成为半固体状态，便于微生物生长。
三、其他添加剂
1. 镁硫酸：是一种重要的电解质，能够促进微生物的生长和代谢活动。
2. 硫酸铁：含有丰富的铁元素，对某些微生物具有特殊的营养作用。
3. 青霉素：是一种广谱抗菌素，在麦康凯琼脂培养基中加入可以抑制
细菌污染。
4. 氯霉素：也是一种广谱抗菌素，在麦康凯琼脂培养基中加入可以抑
制细菌污染。
四、制备方法
1. 将蛋白胨、水解酪蛋白、酵母提取物、。
麦康凯培养基产品使用说明书
2. 121 ℃灭菌15 min。
麦康凯琼脂配制方法：
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
1. 称取51.5 g 培养基，加蒸馏水至1 L；
2. 121 ℃灭菌15 min；冷却后倒平板； 3. 接种以下质控菌株，放置30-35℃需氧培养18-24小时。
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菌名 大肠埃希氏菌 弗氏柠檬酸盐杆菌 鼠伤寒沙门氏菌
菌号 ATCC8739 ATCC43864 ATCC14028
麦康凯培养基产品使用说明书
麦康凯肉汤（MacConkey Broth）是一种初步鉴定培养基，用于检测或验证水、乳品和其它材料中的
大肠菌群滴度。 蛋白胨提供氨基酸和维生素。胆盐促进几种肠道菌的生长，抑制革兰氏阳性菌的生长。
35°C 培养24-48h 后，乳糖发酵产气可由德拉姆管中的气泡观察到。产酸可以培养基的样色由橙色变红色
成分
麦康凯肉汤 PM0800
麦康凯琼脂 PM0801
蛋白胨
20
17
月示蛋白胨
-
3
乳糖
10
10
胆盐
5
1.5
氯化钠
5
5
中性红
0.075
0.03
结晶紫
-
0.001
琼脂
-
15
合计
40.075
51.531
pH（25℃）
7.4±0.2
7.1±0.2
麦康凯肉汤配制方法：
1. 称取40g 培养基，加蒸馏水至1 L，溶解后调节 pH 值至所需，分装10ml 到含有倒置的发酵管的容器中；
生长情况 +++ +++ +++
接种量（CFU） 10-100 10-100 10-100
麦康凯琼脂培养基产品说明书
化学品安全技术说明书第一部分化学品及企业标识产品中文名称：麦康凯琼脂培养基产品英文名称：MacConkey Agar产品编号：022143企业名称：广东环凯微生物科技有限公司地址：广东省广州市黄埔区广州开发区科学城神舟路788号邮编：510663公司网址电子邮件地址：*********************传真号码：************销售热线：************-8602技术热线：************-8877/8876推荐用途和限制用途：生化研究/分析第二部分危险性概述GSH危害性类别非危险物质或混合物GSH标签要素非危险物质或混合物其它危害（健康危害、环境危害）未见报道第三部分成分/组成信息混合物化学品成分：参考培养基使用说明。
有害物质成分：无第四部分急救措施一般信息：无特殊的措施要求。
皮肤接触：立即用清水彻底清洗。
眼睛接触：立即提起眼睑，用大量流动清水冲洗15min。
如不适就医。
吸入：如果吸入，将人员移动到新鲜空气处，如果没有呼吸，进行人工呼吸操作，并联系医生。
食入：如误食，用水冲洗口腔，如不适就医。
就医信息：出示产品使用说明或者此SDS。
第五部分消防措施危险特性：不助燃。
有害燃烧产物：一氧化碳，二氧化碳，氮的氧化物。
灭火方法及灭火剂：选用适合周围火源的灭火器。
水，泡沫，二氧化碳，沙土。
灭火注意事项：防止气体吸入。
第六部分泄露应急处理个人防护：穿个人实验服,佩戴手套和口罩,避免吸入干粉。
环境保护措施：用湿布和地拖擦拭干净。
清洁/收集措施：保持干燥。
迅速清洗弄脏的区域。
第七部分操作处置与储存安全操作注意事项：防止粉尘扬起，应提供通风设备。
储存注意事项：贮存于避光、干燥处，用后立即旋紧瓶盖。
第八部分接触控制/个人防护职业接触限值没有已知的国家规定的暴露极限。
工程控制：提供安全淋浴和洗眼设备个人保护措施呼吸系统防护：在通风橱里称取产品，佩戴口罩。
眼睛防护：佩戴安全眼镜。
身体防护：穿实验室服。
控制菌检查用培养基的适用性检查记录
控制菌检查用培养基的适用性检查记录培养基名称：培养基来源：培养基批号：培养基配制批号：检验依据：1. 检查内容与方法1.1 液体培养基□麦康凯液体培养基促生长能力接种≤100cfu大肠埃希菌，42～44℃,≤24h抑制能力接种≥100cfu的金黄色葡萄球菌，42～44℃,≥48h□RV沙门菌增菌液体培养基促生长能力接种≤100cfu沙门菌，30～35℃，≤18h抑制能力接种≥100cfu的金黄色葡萄球菌，30～35℃，≥24h□沙氏葡萄糖液体培养基促生长接种≤100cfu白色念珠菌，30～35℃,≤24h1.2琼脂培养基□麦康凯琼脂培养基促生长、指示能力接种≤100cfu的大肠埃希菌，30～35℃，≤18h□木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂培养基促生长、指示能力接种≤100cfu的沙门菌，30～35℃，≤18h□溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基促生长能力接种≤100cfu的铜绿假单胞菌，30～35℃，≤18h抑制能力接种≥100cfu的大肠埃希菌，30～35℃，≥72h□甘露醇氯化钠琼脂培养基促生长、指示能力接种≤100cfu的金黄色葡萄球菌，30～35℃，≤18h 抑制能力接种≥100cfu的大肠埃希菌，30～35℃，≥72h控制菌检查用培养基的适用性检查记录□梭菌增菌培养基、哥伦比亚琼脂培养基促生长能力接种≤100cfu的生孢梭菌，30～35℃,≤48h□沙氏葡萄糖琼脂培养基促生长、指示能力接种≤100cfu的白色念珠菌，30～35℃,≤24h □念珠菌显色培养基促生长、指示能力接种≤100cfu的白色念珠菌，30～35℃,≤24h 抑制能力接种≥100cfu的大肠埃希菌，30～35℃，≥72h □三糖铁琼脂培养基指示能力接种≤100cfu的沙门菌，30～35℃,18～48h，≤18h2. 检查观察记录2.1促生长能力□需要检查□不需检查培养箱型号：培养箱编号：培养温度：结论：该培养基的促生长能力。
控制菌检查用培养基的适用性检查记录2.2抑制能力□需要检查□不需检查培养箱型号：培养箱编号：培养温度：结论：该培养基的抑制能力。
培养基适用性 SOP
目的制定培养基适用性检查标准操作规程。
范围本规程适用于微生物培养基适用性测定。
责任人文件起草、审核、签批、使用、归档、保管人员。
执行标准《中国药典》2010版一部附录ⅩⅢ培训对象检验人员、QC主管内容1. 计数培养基的适用性检查1.1 适用范围细菌、霉菌及酵母菌计数用的培养基应进行培养基的适用性，成品培养基、由脱水培养基或按处方配置的培养基均应检查。
1.2菌种试验用菌株的传代数不得超过5代（从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0代），并采用适宜的菌种保藏技术进行保存，以保证试验菌株的生物学特征。
1.3菌液的制备1.5结果判定若被检培养基上的菌落平均数不小于对照培养基的菌落平均数的70%，且菌落形态大小与对照培养基上的菌落一致，判该培养基的适用性检查符合规定。
2控制菌检查用培养基的适用性检查2.1 适用范围控制菌检查用的培养基应进行培养基的适用性检查，成品培养基、由脱水培养基或按处方配制的培养基均应检查。
2.2 菌种试验用菌株的传代数不得超过5代（从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0代），并采用适宜的菌种保藏技术进行保存，以保证试验菌株的生物学特征。
2.3菌液制备2.4 适用性检查控制菌检查用培养基的适用性检查项包括促生长能力、抑制能力及指示能力的检查。
各培养基的检测项目及所用菌株表1。
表1 控制菌检查用培养基的促生长能力、抑制能力及指示能力检查2.5 液体培养基促生长能力检查分别接种不大于100cfu的试验菌（表1）于被检培养基和对照培养基中，在相应控制菌检查规定的培养温度（30~35℃）及最短培养时间下培养。
增菌培养基多为澄清液体培养基，与对照培养基比较，被检培养基中试验菌应生产良好，表现为液体培养基变浑浊。
2.6 固体培养基促生长能力检查取试验菌液各0.1ml（含菌数50~100cfu）分别涂布与被检培养基和对照培养基平板上，在相应控制菌检查规定的培养温度（30~35℃）及最短培养时间下培养。
麦康凯琼脂培养基
编号：022142
中文名称：麦康凯琼脂培养基药典
英文名称：MacConkey Agar
用途：
供分离发酵乳糖的革兰氏阴性肠道杆菌;中华人民共和国药典2010年版
原理：
胨提供碳氮源、维生素和生长因子;牛胆盐可抑制革兰氏阳性菌的生长;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;乳糖为可发酵的糖类;中性红是pH指示剂,细菌发酵乳糖产酸时菌落呈粉红色并在菌落周围出现胆盐沉淀的浑浊圈;
微生物图鉴：
配方每升：
胨 20.0g
牛胆盐5.0g
氯化钠 5.0g
琼脂 14.0g
乳糖10.0g
中性红0.03g
最终pH ±
使用方法：
1、称取本品54.0g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min;
2、待培养基冷至50～55℃倾注灭菌平皿,待凝固后,备用;
3、取待检样品划线接种于麦康凯平板;
4、将平板置培养箱于30～35℃培养18～24h;
5、观察结果;在做致泻大肠埃希氏菌时,观察结果不但要注意乳糖发酵的菌落,同时也要注意不发酵和迟缓发酵的菌落;
质量控制：
下列菌株经30～35℃培养18～24h,生长情况如下表：
菌名菌号生长状况菌落特征
大肠埃希氏菌CMCCB44102 良好粉红或红,周围有混浊胆盐沉淀圈
弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864 良好粉红或红,周围有混浊胆盐沉淀圈
鼠伤寒沙门氏菌CMCCB50115 良好无色半透明
金黄色葡萄球菌CMCCB26003 不长或差——
贮存：贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖;贮存期三年; 规格：250g。
培养基配方及配制方法
培养基配方1 斜面菌种保存培养基1.1PDA培养基（马铃薯葡萄糖琼脂培养基)称取200g马铃薯，洗净去皮切碎，加水1000ml煮沸0.5h，纱布过滤，滤液补足1000ml，再加15g葡萄糖和15-20g琼脂,充分溶解后趁热纱布过滤,分装试管,每试管约5—10ml（视试管大小而定)，121℃灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面，冷却后贮存备用。
1。
2麦芽汁琼脂培养基麦芽汁的制备:干麦芽首先进行粉碎（不能太粗，也不必太细。
太粗影响糖化效率,过细影响过滤速度）,按麦芽重量的3~4倍加水，搅拌均匀后，37℃左右浸泡1小时,然后缓缓加温至55~63℃（在升温过程中应不断搅拌使温度均匀），保温4～6小时（用0.02摩尔/升碘液测定为黄色至无色时），糖化结束。
在糖化过程中，应每小时搅拌一次.取过滤后的清液，加1.8％琼脂，分装试管，每试管约5—10ml(视试管大小而定），121℃灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面,冷却后贮存备用.2基菌落总数检测2。
1平板计数琼脂培养基将胰蛋白胨5。
0g、酵母浸膏2。
5g、葡萄糖1。
0g、琼脂15。
0g加入蒸馏水1000ml中，煮沸溶解后，调pH，然后在121℃下灭菌15min,取出，稍微冷却后，带热倒入培养皿中。
3志贺氏菌检测3。
1 GN增菌液成分：胰蛋白胨:20g，葡萄糖：1g，甘露醇:2g，柠檬酸钠：5g，去氧胆酸钠0。
5g，磷酸二氢钾4g,磷酸氢二钾1。
5g，氯化钠5g,蒸馏水1000ml。
pH7.0制法：将上述物品加入蒸馏水中，加热溶解煮沸，调pH为7.0，分装，在115℃高压灭菌15min。
3.2 HE琼脂成分：胨:12g,牛肉膏3g，乳糖12g，蔗糖12g，水杨素2g，胆碱20g，氯化钠5g，琼脂18～20g，蒸馏水1000ml0,0。
4%溴麝香草酚蓝溶液16ml，Andrade指示剂20ml。
，甲液20ml,乙液20ml。
pH7。
5制法：将上述前七种成分加入400ml蒸馏水中作为基础液，将琼脂加入到600ml蒸馏水中加热溶解，加入甲液乙液到基础液中，调pH，再加入指示剂,并与琼脂液合并,待冷却至50～55℃，倾注浇平板。
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编号：022142
中文名称：麦康凯琼脂培养基（药典）
英文名称：MacConkey Agar
用途：
供分离发酵乳糖的革兰氏阴性肠道杆菌。
（《中华人民共和国药典》2010年版）原理：
胨提供碳氮源、维生素和生长因子;牛胆盐可抑制革兰氏阳性菌的生长; 氯化钠维持均衡的渗透压；琼脂是培养基的凝固剂；乳糖为可发酵的糖类；中性红是pH指示剂，细菌发酵乳糖产酸时菌落呈粉红色并在菌落周围出现胆盐沉淀的浑浊圈。
微生物图鉴：
配方（每升）：
胨20.0g
牛胆盐5.0g
氯化钠5.0g
琼脂14.0g
乳糖10.0g
中性红0.03g
最终pH 7.2 ± 0.2
使用方法：
1、称取本品54.0g，加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121T高压灭菌15mi n。
2、待培养基冷至50〜55°C倾注灭菌平皿，待凝固后，备用。
3、取待检样品划线接种于麦康凯平板。
4、将平板置培养箱于30〜35 C培养18〜24h。
5、观察结果。
在做致泻大肠埃希氏菌微生物检验时，观察结果不但要注意乳糖发酵的菌落，同时也要注意不发酵和迟缓发酵的菌落。
质量控制：
下列菌株经30〜35C培养18〜24h，生长情况如下表：
菌名菌号生长状况菌落特征
大肠埃希氏菌CMCC(B)44102 良好粉红或红，周围有混浊胆盐沉淀圈
弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864 良好粉红或红，周围有混浊胆盐沉淀圈
鼠伤寒沙门氏菌CMCC(B)50115 良好无色半透明
金黄色葡萄球菌CMCC(B)26003 不长或差
贮存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。
贮存期三年
规格：250g。