各种培养基的制作方法
培养基的制备实验报告
培养基的制备实验报告本次实验的目的是制备培养基，为细菌的分离、培养和纯化提供良好的条件。
下面将从实验的步骤、注意事项、结果及讨论等方面进行介绍。
一、实验步骤1、准备物质：本次实验需要的物质有蛋白胨、酵母提取物、氯化钠、琼脂、蔗糖、粉红色指示剂等。
2、称量：按照配方称取所需要的物质，放置于烧杯中。
3、加水：将溶液加到烧杯中，使用热水搅拌溶解。
4、调pH值：使用磁力搅拌器搅拌溶液，同时加入酸、碱溶液调整其pH值。
5、加入琼脂：琼脂在液态时将其加入培养基中，在0.5小时后，将烧杯放入水浴中，加热至琼脂溶解。
6、灭菌：将培养基热量至65℃进行灭菌处理。
二、注意事项1、称量精准：由于配方中各种物质的比例不同，所以在称量时应该特别注意精准。
2、调pH值准确：必须要根据实验要求，合理的加入酸、碱溶液，使pH值调整在适宜的范围内。
3、琼脂的加入和热力均匀：琼脂的加入需要在液态状态下进行，加入方法应该温和，慢慢地注入。
在加热的过程中也需要注意热力的均匀分布。
4、灭菌时间和方法：都应该根据实验要求进行相应的调整和安排，保证灭菌的效果。
三、结果及讨论培养基制备完成后，我们使用其进行实验，成功得到了所需的细菌菌落。
同时我们也根据实验结果对制备过程中的一些问题进行了总结和讨论。
1、物质的准确称量对实验结果影响较大。
2、pH值的调整应详细了解各个物质对呈酸、碱性的影响。
3、琼脂的加入要在合适的液态下进行，加热过程要均匀。
4、灭菌的方法和时间应根据实验要求进行相应的调整和安排。
综上所述，本次实验是制备培养基，为细菌的分离、培养和纯化提供良好的条件。
实验过程中我们按照步骤并严格注意了一些细节问题，最终得到了满意的结果，更加深入了我们对实验的了解。
如何制作母种培养基？
如何制作母种培养基？
母种培养基如何制作？
(1)马铃薯制备。
将马铃薯洗净，削去皮与芽眼，切成薄片。
加水1000毫升，煮沸后保持20分钟，用4~8层纱布过滤，取滤液补足水量至1000毫升。
(2)培养基制作。
继续用小火加热滤液，并准确称取其余各种药品。
过秤一种，校对一种，全部无误后，加入马铃薯汁中搅匀。
琼脂最后加入。
加入前先用冷水将琼脂条浸泡5~10分钟，捞起撕碎后慢慢加入锅中，边加入边搅动，直至完全溶化。
(3)分装试管。
将培养基趁热倒入漏斗中，分装试管。
每批要用大小一致的试管，装量要相同，约为试管长度的1/5。
分装时，注意不使管口沾上培养基。
分装好的试管立放在试管架上，待琼脂凝固后塞上棉塞。
然后每5~10支试管扎成一捆，棉塞部分用双层报纸包好防潮，竖着排放在手提式高压锅的消毒桶中准备灭菌。
(4)棉塞制作。
取一块完整的棉花，大小厚薄根据试管口直径而定。
做法是：左手握紧棉絮，从边缘往内卷成圆形，右手捏住棉絮光头，将毛头往试管口塞入2/3，外头留1/3，呈馒头形。
棉塞松紧适度，与管壁紧贴无缝隙。
- 1 -。
各种培养基的制作方法
配方一萨氏(Sabouraud's)培养基蛋白胨10克琼脂20克麦芽糖40克水1000毫升先把蛋白胨、琼脂加水后,加热,不断搅拌,待琼脂溶解后,加入40克麦芽糖(或葡萄糖),搅拌,使它溶解,然后分装,灭菌,备用。
1、营养肉汤培养基牛肉膏 0.3克蛋白胨 1.0克NaCl 0.5克水 100毫升pH 7、0～7、2在烧杯中加水,称取牛肉膏、蛋白胨与NaCl,加热溶化后,调节pH值至7、0～7、2。
分装,加棉塞,高压蒸汽灭菌即成。
常用于培养细菌。
2、营养琼脂培养基在营养肉汤培养基中增加20克琼脂即成。
常用于培养细菌。
3、肉汁蛋白胨液体培养基牛肉 500克蛋白胨 10克NaCl 5克pH 7、1～7、2取新鲜牛肉500克,去净脂肪、筋腱后,绞碎或剁碎,加水1000毫升浸泡,15℃下放置12小时或50℃下放置半小时。
用纱布将肉汁过滤,补足失水。
向肉汁中加入蛋白胨与食盐。
将肉汁加热,放入苏打(碳酸钠)至红色,调整pH值。
分装,高压蒸汽灭菌。
将上述已灭菌得培养基用棉花滤去凝集得蛋白质,制成液体培养基,如需制成固体培养基,可在每100毫升液体中加入2克琼脂,加热溶化后,分装,再次进行高压蒸汽灭菌。
常用于培养细菌。
4、高氏一号培养基(淀粉琼脂培养基)可溶性淀粉 2克K2HPO4 0.05克MgSO4·7H2O 0.05克KNO3 0.1克NaCl 0.05克FeSO4 0.001克琼脂 2克水 100毫升pH 7、2～7、4在烧杯中加水95毫升,加热至沸腾,取可溶性溶粉2克,用5毫升水调成糊状,倒入沸水中与匀。
再称取其它药品,陆续加入烧杯内(待一种药品溶解后,再加入第二种药品)。
待全部药品溶解后,停止加热,补足失水,调pH值至7、2～7、4。
分装后,高压蒸汽灭菌。
本培养基常用于培养放线菌。
5、马铃薯蔗糖培养基马铃薯 200克蔗糖 10克琼脂 20克水 1000毫升自然pH称取200克马铃薯片,加水1000毫升,煮沸半小时,用纱布过滤,补足失水。
36种常用微生物培养基配制汇总
36种微生物常用培养基配制1.牛肉膏蛋白胨培养基（用于细菌培养）牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，水1000mL，pH7.4～7.6。
2.高氏1号培养基(用于放线菌培养)可溶性淀粉20g，KNO3 1g，NaCl 0.5g，K2HPO4•3H2O 0.5g，MgSO4•7H2O0.5g，FeSO4•7H2O0.01g，水1000mL，pH7.4～7.6。
配制时注意：可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。
3.马丁氏（Martin）培养基（用于从土壤中分离真菌）K2HPO41g，MgSO4•7H2O0.5g，蛋白胨5g，葡萄糖10g，1/3000孟加拉红水溶液100mL，水900mL，自然pH，121℃湿热灭菌30min。
待培养基融化后冷却55～60℃时加入链霉素(链霉素含量为30μg/mL)。
4.马铃薯培养基(PDA)(用于霉菌或酵母菌培养)马铃薯(去皮)200g，蔗糖(或葡萄糖)20g，水1000mL，配制方法如下：将马铃署去皮，切成约2cm2的小块，放入1500mL的烧杯中煮沸30min，注意用玻棒搅拌以防糊底，然后用双层纱布过滤，取其滤液加糖，再补足至1000mL，自然pH，霉菌用蔗糖，酵母菌用葡萄糖。
5.察氏培养基(蔗糖硝酸钠培养基)(用于霉菌培养)蔗糖30g，NaNO3 2g，K2HPO4 1g，MgSO4•7H2O0.5g，KCl 0.5g，FeSO4•7H2O0.1g，水1000mL，pH7.0～7.2。
6.Hayflik培养基(用于支原体培养)牛心消化液(或浸出液)1000mL，蛋白胨10g，NaCl 5g，琼脂15g，pH7.8～8.0，分装每瓶70mL，121℃湿热灭菌15min，待冷却至80℃左右，每70mL中加入马血清20mL，25%鲜酵母浸出液10mL，15醋酸铊水溶液2.5mL，青霉素G钾盐水溶液(20万单位以上)0.5mL，以上混合后倾注平板。
*注意：醋酸铊是极毒的药品，需特别注意安全操作。
各种培养基配方范文
各种培养基配方范文培养基是一种用于微生物培养的基础物质，能够为微生物提供所需的营养和环境条件。
不同的微生物在其生长过程中需要不同的养分和环境条件，因此培养基的配方需要根据微生物的需求来进行调整。
下面是几种常见的培养基配方。
1.大肠杆菌液体培养基配方：-蛋白胨或复合氮源：10g-酵母浸出物：5g-葡萄糖：1g-NaCl：5g-K2HPO4：2g-MgSO4：0.2g-pH调节至7.0后加水至1000mL2.牛心提取物琼脂糖培养基配方：-牛心提取物：3g-高级琼脂糖：15g-葡萄糖：10g-NaCl：5g-pH调节至7.0后加水至1000mL3.玉米浸出物琼脂糖培养基配方：-玉米浸出物：4g-高级琼脂糖：15g-酵母浸出物：1g-NaCl：5g-pH调节至7.0后加水至1000mL4.LB琼脂糖培养基配方：-液体LB培养基：10mL-高级琼脂糖：15g-NaCl：5g-pH调节至7.0后加水至1000mL 5.血寒养基配方：-羊血：50mL-肉浸出物：3g-酵母浸出物：3g-肉汤培养基：1L-红细胞素：5g-高级琼脂糖：3g-pH调节至7.0后加水至1000mL6.厌氧培养基配方：-肉浸出物：5g-酵母浸出物：5g-NaCl：5g-蒸馏水：900mL- 加入0.1%的L-cysteine：10mL-pH调节至7.0后用氮气替换空气注意事项：-培养基中的成分应严格按照配方比例加入，并保持无菌。
-配制好的培养基需要高温高压灭菌以保证无菌。
-不同的微生物可能对一些成分非常敏感，需要根据实际情况进行微调。
-培养基的pH值应根据微生物环境要求进行调整，一般在7.0左右。
-配好的培养基应存放在4℃的冰箱中，避免阳光直射以防止成分分解。
这只是一些常见的培养基配方，不同的微生物有不同的需求，可以根据具体的情况进行配方的调整。
在实际使用中，还需要根据微生物的特性和实验目的来选择合适的培养基。
实验室常用培养基的配制方法
实验室常用培养基的配制方法实验室中常用的培养基有很多种，包括通用培养基、选择性培养基、富集培养基等。
下面以常用的LB培养基和M9培养基为例，介绍它们的配制方法。
1. LB培养基（Luria-Bertani agar）LB培养基是一种通用培养基，适用于许多不同类型的细菌。
它由三种主要成分组成：蛋白胨、酵母提取物和氯化钠。
配方如下：-蛋白胨：10克-酵母提取物：5克-NaCl：10克-精制水：1000毫升步骤如下：1)在一个大容量烧杯中加入蛋白胨、酵母提取物和NaCl。
2)加入适量的精制水，搅拌溶解。
3) 将溶液移至一个继续器中，并用精制水补足至1000ml。
4)蓄满培养基的瓶子，盖上盖子，并使用自动压力灭菌器进行高压灭菌，或者将瓶子放入高压灭菌器中，将压力调至15磅（每平方英寸）。
2.M9培养基M9培养基是一种无机盐培养基，常用于细菌的生长和培养。
它的配方相对简单，由无机盐、葡萄糖和维生素B1组成。
配方如下：-Na2HPO4：6克-KH2PO4：3克-NaCl：0.5克-NH4Cl：1克-葡萄糖：0.4克-维生素B1：0.1克-精制水：1000毫升步骤如下：1)在一个大容量烧杯中加入Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和NH4Cl。
2)加入一部分的精制水，搅拌溶解。
3)加入葡萄糖和维生素B1，搅拌均匀。
4) 将溶液移至一个继续器中，并用精制水补足至1000ml。
5)蓄满培养基的瓶子，盖上盖子，并使用自动压力灭菌器进行高压灭菌，或者将瓶子放入高压灭菌器中，将压力调至15磅（每平方英寸）。
以上是LB培养基和M9培养基的配制方法的简要介绍。
当然，实验室中还有很多其他种类的培养基，它们的配制方法也各有不同，需要根据具体的实验目的和细菌类型进行调整。
在培养基配制过程中，应当注意严格按照配方比例配制，保持清洁卫生，避免污染，并注意高压灭菌的操作安全。
实验室36种微生物培养基配制方法
实验室36种微生物培养基配制方法实验室养菌基是为微生物的培养和研究提供合适营养和条件的培养基质。
不同微生物对培养基的要求各不相同，因此实验室通常需要配制多种不同的培养基。
下面是36种常用的微生物培养基的配制方法。
一、通用培养基1. 营养琼脂培养基（Nutrient Agar）营养琼脂培养基是一种通用的培养基，适用于大多数微生物的培养。
其配方为：蛋白胨10克、葡萄糖5克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2，加入琼脂，高压灭菌，倒入平皿中，待凝固后用。
2. 营养肉膏培养基（Nutrient Broth）营养肉膏培养基是一种通用的液体培养基，适用于大多数微生物的培养。
其配方为：蛋白胨10克、牛肉提取物5克、葡萄糖5克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2，高压灭菌，分装，即可使用。
3. 大肠杆菌选择性培养基（MacConkey Agar）大肠杆菌选择性培养基是一种常用的培养基，用于选择和鉴定大肠杆菌。
其配方为：蛋白胨17克、葡萄糖1.5克、恶瓜胆汁5克、硼酸紫0.5克、亮矾0.09克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2，加入琼脂，高压灭菌，倒入平皿中，待凝固后用。
4. Sabouraud脱氧胆汁蔗糖琼脂培养基（Sabouraud Dextrose Agar）Sabouraud脱氧胆汁蔗糖琼脂培养基是用于真菌的培养和鉴定。
其配方为：脱氧胆汁10克、蔗糖40克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至5.6-6.4，高压灭菌，倒入平皿中，待凝固后用。
二、选择性培养基1. VC菌属选择性平皿培养基（Vogel-Johnson Agar）VC菌属选择性平皿培养基是用于选择和鉴定Voges-Proskauer菌属（如克雷伯菌）的培养基。
其配方为：葡萄糖1克、琼脂15克、盐酸75克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、加热煮沸，冷却至55-60°C，加入胆盐酯高压灭菌，倒入平皿中，待凝固后用。
培养基制作方法
(一)肉汤培养基肉汤培养基是常用的液体培养基，也是制备常用的细菌分离培养基及其他某些培养基的基础。
【材料】鲜牛肉(去脂肪和肌腱)、蛋白胨、氯化钠、pH试纸、10％碳酸氢钠、试管、三角烧瓶、蒸馏水等。
【方法】1．将新鲜牛肉500g切碎或搅碎，加水1000ml，放4℃冰箱或冷处浸泡过夜，然后煮沸30min，放凉，使残余的脂肪凝固，再用绒布或滤纸过滤，将滤液补足为原量。
此溶液称为肉水或肉浸液。
2．1000ml肉水中加入蛋白胨10g、氯化钠5g，加热溶解，放凉。
3．用精密pH试纸测酸碱度，用10％碳酸氢钠校正pH为7.2左右。
过碱时，可用10％醋酸校正之。
4．分装于试管中或三角烧瓶中，15磅(121℃)高压蒸气灭菌20～30min。
如用市售的牛肉膏代替新鲜肉水时，可将牛肉膏溶成0.3～0.5％的水溶液，再如上法制成培养基。
(二)普通琼脂培养基普通琼脂培养基是常用的固体培养基，包括普通琼脂平板和普通琼脂斜面两种，前者用于分离纯种细菌，后者用于增殖纯种细菌或保存菌种。
【材料】①肉水200ml ②蛋白胨2g ③氯化钠1g ④琼脂5g ⑤无菌平皿、灭菌试管、三角烧瓶等。
【方法】1．按上记数量把肉水、蛋白胨、氯化钠和琼脂放到三角烧瓶中，加热溶化。
2．趁热用pH试纸测酸碱度，用10％碳酸氢钠校正pH为7.2左右。
3．15磅高压蒸气灭菌20～30min。
4．趁热将溶化的培养基倒入灭菌平皿内，每个平皿倒入约15ml，凝固后即成普通琼脂平板培养基；如趁热将培养基倒入灭菌试管内，再将试管斜放试验台上，凝固后即成普通琼脂斜面培养基。
琼脂系由海藻中提取的一种多糖，俗称洋粉，具有100℃溶化，40℃凝固的特性。
细菌不能分解琼脂，故无营养作用，仅是固体培养基的赋形剂。
普通琼脂培养基也可用市售的营养琼脂粉(含有普通琼脂培养基的各种成分并已调好pH)制备，用法见产品说明书。
(三)血液琼脂培养基有些细菌其营养要求较高，在普通琼脂培养基上生长不良，可用血液琼脂培养基进行培养。
36种常用微生物培养基配制汇总
36种微生物常用培养基配制1.牛肉膏蛋白胨培养基（用于细菌培养）牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，水1000mL，pH7.4～76。
2.高氏1号培养基(用于放线菌培养)可溶性淀粉20g，KNO3 1g，NaCl 0.5g，K2HPO4•3H2O 0.5g，MgSO4•7H2O0.5g，FeSO4•7H2O0.01g，水1000mL，pH7.4～76。
配制时注意：可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。
3.马丁氏（Martin）培养基（用于从土壤中分离真菌）K2HPO41g，MgSO4•7H2O0.5g，蛋白胨5g，葡萄糖10g，1/3000孟加拉红水溶液100mL，水900mL，自然pH，121℃湿热灭菌30min。
待培养基融化后冷却55～60℃时加入链霉素(链霉素含量为30μg/mL)。
4.马铃薯培养基(PDA)(用于霉菌或酵母菌培养)马铃薯(去皮)200g，蔗糖(或葡萄糖)20g，水1000mL，配制方法如下：将马铃署去皮，切成约2cm2的小块，放入1500mL的烧杯中煮沸30min，注意用玻棒搅拌以防糊底，然后用双层纱布过滤，取其滤液加糖，再补足至1000mL，自然pH，霉菌用蔗糖，酵母菌用葡萄糖。
5.察氏培养基(蔗糖硝酸钠培养基)(用于霉菌培养)蔗糖30g，NaNO3 2g，K2HPO4 1g，MgSO4•7H2O0.5g，KCl 0.5g，FeSO4•7H2O0.1g，水1000mL，pH7.0～72。
6.Hayflik培养基(用于支原体培养)牛心消化液(或浸出液)1000mL，蛋白胨10g，NaCl 5g，琼脂15g，pH7.8～8.0，分装每瓶70mL，121℃湿热灭菌15min，待冷却至80℃左右，每70mL中加入马血清20mL，25%鲜酵母浸出液10mL，15醋酸铊水溶液2.5mL，青霉素G钾盐水溶液(20万单位以上)0.5mL，以上混合后倾注平板。
*注意：醋酸铊是极毒的药品，需特别注意安全操作。
培养基制备
微生物的接种技术
微生物接种技术是进行微生物实验和相关研 究的基本操作技能。 无菌操作是微生物接种技术的关键。斜面接 种、液体接种、固体接种和穿刺接种操作均以获 得生长良好的纯种微生物为目的。 由于接种方法不同，采用的接种工具也有区 别，如固体斜面培养体转接时用接种环；穿刺接 种时用接种针，液体转接用移液管等。
试管拔塞后过火灭菌和取菌
8)塞管塞 取出接种环，灼烧试管口，并在火 塞管塞 取出接种环，灼烧试管口， 焰旁将管塞旋上。 不要用试管去迎棉塞， 焰旁将管塞旋上 。 不要用试管去迎棉塞 ， 以免试管在移动时纳入不洁空气。 以免试管在移动时纳入不洁空气。 9)将接种环灼烧灭菌。放下接种环，再将棉 将接种环灼烧灭菌。 将接种环灼烧灭菌 放下接种环， 花塞旋紧。 花塞旋紧。
分装量的要求
• 琼脂平板： 脂平板： –先将灭菌琼脂融化后冷却至50℃左右，以无菌 先将灭菌琼脂融化后冷却至50℃左右， 先将灭菌琼脂融化后冷却至50℃左右 操作倾注于灭菌平皿内，水平旋转平皿， 操作倾注于灭菌平皿内，水平旋转平皿，待琼 脂凝固后将平皿翻转， 4℃保存备用。 脂凝固后将平皿翻转，置4℃保存备用。 保存备用
消毒和灭菌
采用强烈的理化因素使任何物体内外所有的微 生物永远丧失其生长繁殖能力的措施称之为灭菌。 生物永远丧失其生长繁殖能力的措施称之为灭菌 。 灭菌是要进行微生物纯培养的需要。 灭菌是要进行微生物纯培养的需要。 实验室最常用的灭菌方法是利用高温处理达到 杀菌效果。 杀菌效果 。 高温主要是使微生物的蛋白质和核酸等 重要生物大分子发生变性。 重要生物大分子发生变性 。 高温灭菌分为干热灭菌 和湿热灭菌两大类。 和湿热灭菌两大类 。 湿热灭菌的效果比优于干热灭 湿热下热量易于传递， 菌 。 湿热下热量易于传递 ， 更容易破坏保持蛋白质 稳定性的氢键等结构， 加速其变性。 此外， 稳定性的氢键等结构 ， 加速其变性 。 此外 ， 过滤除 射线灭菌和消毒、 菌 、 射线灭菌和消毒 、 化学药物灭菌和消毒等也是 微生物学操作中不可缺少的常用方法。 微生物学操作中不可缺少的常用方法。
常用培养基配方范文
常用培养基配方范文培养基配方是微生物学研究的基础，它们提供了养分和条件，促进微生物的生长和繁殖。
常用培养基配方有多种，以下是几个常用的配方范文。
一、莱文斯坦－鲍德尔培养基（Luria-Bertani agar）配方：成分：1.蛋白胨：10克2.酵母提取物：5克3.食盐：10克4.琼脂：15克5.蒸馏水：1000毫升6.高氯酸钠（0.1M）：2毫升（pH7.2）制备方法：1.将蛋白胨、酵母提取物和食盐加入蒸馏水中，加热至溶解。
2.加入琼脂并搅拌均匀，再加入高氯酸钠调节pH值。
3.煮沸1~2分钟，然后分装入培养皿中。
注意事项：1.注意消毒操作，以防止污染。
2.琼脂的煮沸时间通常为15~20分钟。
二、营养琼脂培养基（Nutrient agar）配方：成分：1.蛋白胨：5克2.细胞色素：1克3.维生素B1：0.1克4.卵黄：10克5.食盐：5克6.琼脂：15克7.蒸馏水：1000毫升制备方法：1.将蛋白胨、细胞色素、维生素B1、卵黄和食盐加入蒸馏水中并加热溶解。
2.加入琼脂并搅拌均匀。
3.煮沸1~2分钟，然后分装入培养皿中。
注意事项：1.注意消毒操作，以防止污染。
2.煮沸时间可根据需要适当延长，但不要超过20分钟。
三、马尿素琼脂培养基（MacConkey agar）配方：成分：1.蛋白胨：17克2.硼砂：1.5克3.细胞色素：2.5克4.氯化钠：5克5.水合甲基红：0.03克6.钴绿：0.015克7.红绿二色砂：0.15克8.琼脂：13.5克9.蒸馏水：1000毫升制备方法：1.将蛋白胨、硼砂、细胞色素、氯化钠、水合甲基红、钴绿和红绿二色砂加入蒸馏水中并加热溶解。
2.加入琼脂并搅拌均匀。
3.煮沸1~2分钟，然后分装入培养皿中。
注意事项：1.注意消毒操作，以防止污染。
2.此培养基适用于选择肠道革兰氏阴性杆菌。
以上是常用的几个培养基配方范文，供参考使用。
在制备培养基时，需要注意消毒操作，以防止污染。
另外，不同微生物对培养基的要求也有所不同，可以根据实际需要进行配方的修改和优化。
各种培养基的制作方法
配方一萨氏（Sabouraud's）培养基蛋白胨10克琼脂20克麦芽糖40克水1000毫升先把蛋白胨、琼脂加水后，加热，不断搅拌，待琼脂溶解后，加入40克麦芽糖（或葡萄糖），搅拌，使它溶解，然后分装，灭菌，备用。
1. 营养肉汤培养基牛肉膏0.3克蛋白胨1.0克NaCI 0.5 克水100毫升pH 7.0 〜7.2在烧杯中加水，称取牛肉膏、蛋白胨和NaCI，加热溶化后，调节pH值至7.0〜7.2。
分装，加棉塞，高压蒸汽灭菌即成。
常用于培养细菌。
2. 营养琼脂培养基在营养肉汤培养基中增加20克琼脂即成。
常用于培养细菌。
3. 肉汁蛋白胨液体培养基牛肉500克蛋白胨10克NaCl 5 克pH 7.1 〜7.2取新鲜牛肉500克，去净脂肪、筋腱后，绞碎或剁碎，加水1000毫升浸泡，15C下放置12小时或50C下放置半小时。
用纱布将肉汁过滤，补足失水。
向肉汁中加入蛋白胨和食盐。
将肉汁加热，放入苏打（碳酸钠）至红色，调整pH值。
分装，高压蒸汽灭菌。
将上述已灭菌的培养基用棉花滤去凝集的蛋白质，制成液体培养基，如需制成固体培养基，可在每100毫升液体中加入2克琼脂，加热溶化后，分装，再次进行高压蒸汽灭菌。
常用于培养细菌。
4. 高氏一号培养基（淀粉琼脂培养基）可溶性淀粉2克K s HPO 0.05 克MgSQ 7f0 0.05 克KNO 0.1 克NaCI 0.05 克FeSQ 0.001 克琼脂2克水100毫升pH 7.2 〜7.4在烧杯中加水95毫升，加热至沸腾，取可溶性溶粉2克，用5毫升水调成糊状，倒入沸水中和匀。
再称取其它药品，陆续加入烧杯内（待一种药品溶解后，再加入第二种药品）待全部药品溶解后，停止加热，补足失水，调pH值至7.2〜7.4。
分装后，高压蒸汽灭菌。
本培养基常用于培养放线菌。
5. 马铃薯蔗糖培养基马铃薯200克蔗糖10克琼脂20克水1000毫升自然pH称取200克马铃薯片，加水1000毫升，煮沸半小时，用纱布过滤，补足失水。
各种培养基的配方
各种培养基的配方在微生物学中，培养基是为微生物提供营养和生长所必需的营养物质的混合物，可以根据微生物的特性和需求来设计不同成分的培养基。
不同种类的微生物需要不同的培养基来生长和繁殖，为了获得最佳的生长效果，需根据微生物的特性制备相应的培养基。
下面介绍几种常用的培养基及其配方。
1. 加尔沙基培养基（Luria-Bertani，LB培养基）LB培养基是一种常用的细菌培养基，适用于大多数细菌的培养。
其成分包括牛肉浸出物、酵母提取物和氯化钠，PH为7.0。
配方：- 水：1000ml-氯化钠：10g-酵母提取物：5g-牛肉浸出物：10gLB培养基的主要特点是富含氨基酸和碳源，适合于细菌的快速生长。
2. PDA培养基（Potato Dextrose Agar）PDA培养基是一种适合真菌和霉菌生长的培养基，成分简单易得。
它主要包括马铃薯提取物、葡萄糖和琼脂。
PDA培养基是一种半固体培养基，适合于真菌的产孢。
配方：-马铃薯提取物：200g-葡萄糖：20g-琼脂：20g-静置180s后，灭菌PDA培养基适合于真菌和霉菌的生长，常用于菌落计数和生长的研究中。
3.营养琼脂培养基营养琼脂培养基是一种通用的培养基，适用于多种微生物的培养。
它主要包括蛋白水解物、酵母提取物、氯化钠和琼脂。
配方：-蛋白水解物：5g-酵母提取物：1g-氯化钠：5g-琼脂：15g- 水：1000ml-蒸馏后灭菌营养琼脂培养基适合于大多数微生物的生长，是最常用的培养基之一4. 马尼特尔-梅尔特培养基（Mannitol-Salt Agar，MSA）MSA培养基是一种选择性培养基，主要用于金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）的分离和鉴定。
它的成分包括马尼托尔、氯化钠、酵母提取物和琼脂。
配方：-马尼托尔：5g-氯化钠：75g-酵母提取物：1g-琼脂：15g- 水：1000ml-蒸馏后灭菌MSA培养基在金黄色葡萄球菌的生长过程中，可以通过红色菌落的形成来进行识别。
培养基的配制与灭菌技术
一、培养基的配制与灭菌技术培养基是将微生物生长繁殖所需要的各种营养物质，用人工的方法配制而成的用于培养微生物的营养基质。
培养基种类很多，不同的微生物所需培养基不同。
就培养基中营养物质的来源可分为天然培养基、合成培养基和半合成培养基。
按培养基特殊用途可分加富培养基，选择培养基、鉴别培养基。
按培养基制成后的物理状态可分为固体培养基，液体培养基和半固体培养基。
固体培养基是在液体培养基中加入1.5 %-2.0 %琼脂作凝固剂; 半固体培养基则加入0.5 %-0.8 %的琼脂。
一般培养基除含有大量水分外, 还含有碳素、氮素、无机盐类和维生素等。
此外, 由于徽生物生长繁殖必须在最适的酸碱度范围内, 才能表现出最大的生命活力, 因此应根据不同种类的徽生物. 将培养基调节到一定的pH值范围。
培养基配制后还必须进行灭菌, 灭菌是指杀死或消灭所有微生物, 包括营养体、孢子和芽孢。
灭菌的方法很多，可分为物理方法与化学方法两大类。
物理方法包括湿热灭菌、干热灭菌、紫外线灭菌、过滤除菌等; 化学方法主要是利用化学药品对接种室空间、用具和其它物体表面进行灭菌与消毒。
消毒一般是指消灭有害微生物的营养体和病原菌。
(一) 培养基的配制方法一般培养基的配制方法如下 (各种天然培养基的配制方法略有不同)：l. 按照配方的组分及用量先分别称量并配成液体；2. 根据要求调到一定的酸碱度(pH值)；3. 若要制成固体则加入2%琼脂并加热融化；4. 根据需要的数量分装入试管或三角瓶中, 加上棉塞或盖上纱布；5. 包扎好灭菌后备用。
配制斜面培养基的一般操作步骤为：称量→ 溶解→ 调pH值→ 加琼脂→ 过滤→ 分装→ 加棉塞→ 包扎→ 灭菌→ 摆斜面→ 无菌检查。
(图9-7)(二) 培养基及常用器皿的灭菌培养微生物常用的玻璃器具主要有试管、三角瓶、培养皿、吸管等, 在使用前必须先进行灭菌, 使容器中不含任何杂菌；培养微生物用的营养基质(培养基), 在接入纯种前也必须先行灭菌, 使培养基呈无菌状态。
pda培养基的配方及制作过程
pda培养基的配方及制作过程
PDA培养基的配方：
土豆200g、葡萄糖20g、琼脂15-20g、水1000mL、pH值自然。
PDA培养基的配制：
1、称量和熬煮。
按培养基配方逐一称取去皮土豆。
土豆切成小块放入锅中，加水1000m1，在加热器上加热至沸腾，维持20-30min，用可用2层纱布趁热在量杯上过滤，滤渣弃取。
滤液补充水分到1000ml。
2、加热溶解。
把滤液放入锅中，加入葡萄糖20g，琼脂15-20g(提前搞碎)，然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，待琼脂完全溶解后，再补充水分至所需量。
3、分装。
按实训要求，将配制的培养基分装入试管或500m1三角瓶内。
分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。
分装量:固体培养基约为试管高度的5分之1，灭菌后制成斜面，分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的3分之1为宜，灭菌后垂直待凝。
4、加棉塞。
培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等)，以阻止外界微生物进入培养基内造成污染，并
保证有良好的通气性能。
5、包扎。
加塞后，将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道线绳或橡皮筋扎好，用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。
实验二常用基础培养基的制备
实验二常用基础培养基的制备同学们大家好欢迎来到微生物检验课堂今天我们做的实验是常用基础培养基的制备。
这节课我们一起来学习三种不同的培养基制备的操作;好那我们开始，这节课的实验原理是：培养基是人工合成的一种混合营养料，用以分离细菌。
基础培养基中含有大多数常见菌生长繁殖所需要的营养物质，并可制成液体、半固体、固体三种不同的性状。
实验项目是细菌培养基的制备，最常见的培养基包括：肉汤培养基的制备普通琼脂平板培养基的制备半固体斜面培养基的制备等三种方法实验目的是：掌握培养基制备方法实验材料有：牛肉膏、蛋白胨，氯化钠、蒸馏水琼脂粉，10%NaOH pH试纸、三角烧瓶量筒，天平酒精灯、等培养基的制备步骤：配料→熔化→测定pH→滤过+分装→灭菌→备用。
肉汤培养基:取1000ml蒸馏水,加人牛肉膏3-5g,蛋白胨10g,氯化钠5g,混合加热溶解，调整pH至7.4-7.6,分装于烧瓶中，可供一般细菌生长。
(2) 普通琼脂培养基:取1000ml肉汤培养基，加入2% ~3%琼脂，加热溶化，过滤,分装于烧瓶或试管中。
(3)半固体培养基:取1000ml肉汤培养基，加人3-5g琼脂，分装于烧瓶或试管中，主要用于保存菌种或观察细菌动力三种培养基分装好后均在全自动高压灭菌器中高压。
高压灭菌的主要方法：首先把制备好的培养基放入灭菌器里，把盖子盖好，温度调制121.3摄氏度，时间调制30分钟，开始高压灭菌，好，灭菌时间到了，取出培养基，待冷却后即可以使用。
利用PPT照片展示结果：一下就是三种培养基制备好后的形态。
注意：通过今天的实验我们已经学到了固体培养基，液体培养基，半固体培养基等三种不同培养基的制备，下课后希望大家可以分组讨论本次实验收获。
好同学们，今天的课程就讲到这里，下节课再见。
制作培养基的一般步骤
制作培养基的一般步骤
1、配料：在容器中加入少量水，按照配方称取各种药品，加足所需水量（一药一勺，取药后立即盖上瓶盖）。
2、溶解：淀粉溶解：少量冷水调成糊状，加热溶解，特别是加有琼脂的培养基，一定要煮沸，琼脂的熔解温度95-97℃，且需要边加热边搅拌以防止烧焦。
3、调PH：用1N的盐酸或1N的 NaOH把培养基调节到所要求的值。
4、过滤：滤纸或棉花进行过滤。
5、分装：一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。
(1)三角瓶
若作静置培养，则100ml培养基/250ml的三角瓶，最多不能超过150ml培养基/250ml 的三角瓶，否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞，造成染菌；若作摇瓶培养，则15-20ml 培养基/250ml的三角瓶，保证通气良好。
(2)试管分装
液体培养基一般装4-5ml，约试管的1/4高度。
固体斜面培养基一般装3-4ml，约试管的1/5高度。
6、包扎：分装好后，塞上棉塞，在用牛皮纸将棉塞包裹好，防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。
7、灭菌：按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。
如果灭菌的温度太高，营养成分会被破坏，培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。
8、摆斜面：灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放，使其凝固成为一个斜面，约占试管长度的1/2。
9、贮存：培养基在30℃下放置一天，无污染的即可使用。
一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。
培养基制作过程
培养基制作过程
培养基是微生物培养的一种重要基础工具，制作过程如下：
材料：
1. 细菌培养基原料：蛋白胨、牛肉膏、酵母浸膏等
2. 溶液：碳酸钠、氯化钠、氯化钾、磷酸二氢钾等
制作过程：
1. 将蛋白胨、牛肉膏、酵母等原料精确称重并混合，加入适量的蒸馏水，搅拌均匀。
2. 将溶液加入匀称好的原料中，搅拌均匀。
3. 转移到蒸馏器中，加入蒸馏水，加热至95°C左右煮沸，持续30分钟。
4. 将培养基倒入千分瓶或试管中，杀菌灭菌处理后贮存。
以上为通用的菌落计数培养基制作方法，不同类型的培养基原料不同，制作方法也会根据菌种不同而作出相应的调整。
在制作过程中需要注意操作环境卫生，防止污染。
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配方一萨氏（Sabouraud's）培养基
蛋白胨10克琼脂20克麦芽糖40克水1000毫升
先把蛋白胨、琼脂加水后，加热，不断搅拌，待琼脂溶解后，加入40克麦芽糖（或葡萄糖），搅拌，使它溶解，然后分装，灭菌，备用。
1.营养肉汤培养基
牛肉膏 0.3克
蛋白胨 1.0克
NaCl 0.5克
水 100毫升
pH 7.0～7.2
在烧杯中加水，称取牛肉膏、蛋白胨和NaCl，加热溶化后，调节pH值至7.0～7.2。
分装，加棉塞，高压蒸汽灭菌即成。
常用于培养细菌。
2.营养琼脂培养基
在营养肉汤培养基中增加20克琼脂即成。
常用于培养细菌。
3.肉汁蛋白胨液体培养基
牛肉 500克
蛋白胨 10克
NaCl 5克
pH 7.1～7.2
取新鲜牛肉500克，去净脂肪、筋腱后，绞碎或剁碎，加水1000毫升浸泡，15℃下放置12小时或50℃下放置半小时。
用纱布将肉汁过滤，补足失水。
向肉汁中加入蛋白胨和食盐。
将肉汁加热，放入苏打（碳酸钠）至红色，调整pH值。
分装，高压蒸汽灭菌。
将上述已灭菌的培养基用棉花滤去凝集的蛋白质，制成液体培养基，如需制成固体培养基，可在每100毫升液体中加入2克琼脂，加热溶化后，分装，再次进行高压蒸汽灭菌。
常用于培养细菌。
4.高氏一号培养基（淀粉琼脂培养基）
可溶性淀粉 2克
K2HPO4 0.05克
MgSO4·7H2O 0.05克
KNO3 0.1克
NaCl 0.05克
FeSO4 0.001克
琼脂 2克
水 100毫升
pH 7.2～7.4
在烧杯中加水95毫升，加热至沸腾，取可溶性溶粉2克，用5毫升水调成糊状，倒入沸水中和匀。
再称取其它药品，陆续加入烧杯内（待一种药品溶解后，再加入第二种药品）。
待全部药品溶解后，停止加热，补足失水，调pH值至7.2～7.4。
分装后，高压蒸汽灭菌。
本培养基常用于培养放线菌。
5.马铃薯蔗糖培养基
马铃薯 200克
蔗糖 10克
琼脂 20克
水 1000毫升
自然pH
称取200克马铃薯片，加水1000毫升，煮沸半小时，用纱布过滤，补足失水。
在上述滤汁中加入10克蔗糖、20克琼脂，加热使琼脂熔化。
分装后，高压蒸汽灭菌。
常用于培养酵母菌。
6.麦芽汁培养基
将从啤酒厂买来加有啤酒花的麦芽汁，装入锥形瓶中，加塞高压蒸汽灭菌。
常用于培养酵母菌。
7.察氏培养基
NaNO3 2克
K2HPO4 1克
KCl 0.5克
MgSO4 0.5克
FeSO4 0.01克
蔗糖 30克
琼脂 15～20克
水 1000毫升
自然pH
分装，加棉塞，高压蒸汽灭菌。
常用于培养霉菌。
8.豆芽汁葡萄糖（或蔗糖）培养基
黄豆芽 100克
葡萄糖 50克
琼脂 15克
水 1000毫升
称取新鲜黄豆芽100克，放入烧杯中，加1000毫升水，煮沸30分钟，用纱布过滤，补足失水。
再加葡萄糖（或蔗糖）50克，琼脂15克，加热至融化，补足失水。
分装，加棉塞，高压蒸汽灭菌。
常用于培养霉菌。
9.伊红美蓝培养基（E、M、B培养基）
乳糖 10克
蛋白胨 5克
NaCl 5克
K2HPO4 2克
2%伊红水溶液 20毫升
0.35%美蓝水溶液 20毫升
琼脂 20克
水 1000毫升
pH 7.2
1.配制溶液
向容器内加入所需水量的一部分，按照培养基的配方，称取各种原料，依次加入使其溶解，最后补足所需水分。
对蛋白胨、肉膏等物质，需加热溶解，加热过程所蒸发的水分，应在全部原料溶解后加水补足。
配制固体培养基时，先将上述已配好的液体培养基煮沸，再将称好的琼脂加入，继续加热至完全融化。
并不断搅拌，以免琼脂糊底烧焦。
2.调节pH值
用pH试纸（或pH电位计、氢离子浓度比色计）测试培养基的pH值，如不符合需要，可用10%HCl或10%NaOH进行调节，直到调节到配方要求的pH值为止。
3.过滤
用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好的培养基过滤。
用纱布过滤时，最好折叠成六层，用滤纸过滤时，可将滤纸折叠成瓦棱形，铺在漏斗上过滤。
4.分装
已过滤的培养基应进行分装。
如果要制作斜面培养基，须将培养基分装于试管中。
如果要制作平板培养基或液体、半固体培养基，则须将培养基分装于锥形瓶内。
分装时，一手捏松弹簧夹，使培养基流出，另一只手握住几支试管或锥形瓶，依次接取培养基。
分装时，注意不要使培养基粘附管口或瓶口，以免浸湿棉塞引起杂菌污染。
装入试管的培养基量，视试管和锥形瓶的大小及需要而定。
一般制作斜面培养基时，每只15×150毫米的试管，约装3～4毫升（1/4～1/3试管高度），如制作深层培养基，每只20×220毫米的试管约装12～15毫升。
每只锥形瓶装入的培养基，一般以其容积的一半为宜。
5.加棉塞
分装完毕后，需要用棉塞堵住管口或瓶口。
堵棉塞的主要目的是过滤空气，避免污染。
棉塞应采用普通新鲜、干燥的棉花制作，不要用脱脂棉，以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用。
制作棉塞时，要根据棉塞大小将棉花铺展成适当厚度，揪取手掌心大小一块，铺在左手拇指与食指圈成的圆孔中，用右手食指插入棉花中部，同时左手食指与姆指稍稍紧握，就会形成1个长棒形的棉塞。
棉塞作成后，应迅速塞入管口或瓶口中，棉塞应紧贴内壁不留缝隙，以防空气中微生物沿皱折侵入。
棉塞不要过紧过松，塞好后，以手提棉塞、管、瓶不下落为合适。
棉塞的2/3应在管内或瓶内，上端露出少许棉花便于拔取。
塞好棉塞的试管和锥形瓶应盖上厚纸用绳捆札，准备灭菌。
6.制作斜面培养基和平板培养基
培养基灭菌后，如制作斜面培养基和平板培养基，须趁培养基未凝固时进行。
(1)制作斜面培养基。
在实验台上放1支长0.5～1米左右的木条，厚度为1厘米左右。
将试管头部枕在木条上，使管内培养基自然倾斜，凝固后即成斜面培养基。
(2)制作平板培养基。
将刚刚灭过菌的盛有培养基的锥形瓶和培养皿放在实验台上，点燃酒精灯，右手托起锥形瓶瓶底，左手拔下棉塞，将瓶口在酒精灯上稍加灼烧，左手打开培养皿盖，右手迅速将培养基倒入培养皿中，每皿约倒入10毫升，以铺满皿底为度。
铺放培养基后放置15分钟左右，待培养基凝固后，再5个培养皿一叠，倒置过来，平放在恒温箱里，24小时后检查，如培养基末长杂菌，即可用来培养微生物。
改良的Fries氏液体培养液：蔗糖30g、酒石酸铵5g、NH4NO3 0.5g、KH2PO4 1g、
MgSO4·7H2O 0.5g、CaCl2 0.1g、酵母浸汁0.5g、蒸馏水1000mL。