母种培养基的制作PPT课件

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《培养基的制备》课件

《培养基的制备》课件

在制备培养基时,需要将 培养基中的气泡排除,以 确保培养基的质量。
3 除菌
必须对培养基进行严格的 除菌处理,以避免外源性 的微生物污染。
6. 结语
培养基的重要性
培养基是细胞培养和微生物研究的基础,对于科学 研究和产业应用具有重要意义。
经验总结
制备培养基时要注意操作规范,保持实验环境的清 洁,确保培养基的质量。
4. 培养基的贮存
1
贮存时间
不同类型的培养基有不同的贮存期限,要根据需要及时更新。
2
贮存温度
培养基应该在指定的温度下储存,避免因温度过高或过低而导致变质。
3
细菌培养
使用培养基时,必须遵循无菌操作,确保细菌的纯度和培养环境的卫生。
5. 培养基的常见问题
1 氧化
2 消泡
培养基暴露在空气中会发 生氧化反应,影响培养效 果,需在贮存时防止氧化。
《培养基的制备》PPT课 件
这是一个关于培养基制备的PPT课件,课件内容包括前言、培养基的组成、培 养基的配制、培养基的贮存、培养基的常见问题以及结语。
1. 前言
培养基是一种用于细菌、真菌和细胞培养的人工培养环境。它提供了细胞生长所需的营养物质和调节因子。
2. 培养基的组成
基Hale Waihona Puke 成分包括碳源、氮源、矿物质和生长因子等。
辅助成分
提供额外的营养物质和调节剂,如洋菜、琼脂和血清等。
酸碱度调节剂
控制培养基的酸碱度,维持适宜的生长环境。
3. 培养基的配制
1
操作步骤
按照特定的步骤和顺序,将不同成分加
器材准备
2
入适量的溶液中,并进行搅拌和消毒处 理。
准备好所需的培养皿、量杯、瓶子、搅

培养基成分及配制课件

培养基成分及配制课件

2
硼酸
3
硫酸锰
4
硫酸锌
5
钼酸钠
6
硫酸铜
7
氯化钾
KI H3BO3 MnSO4.4H2O ZnSO4.7H2O Na2MoO4.2H2O CuSO4.5H2O CoCL2.6H2O
用量(mg/L)
0.83 6.2 22.3 8.6 0.25 0.025 0.025
培养基成分及配制课件
1.大量元素
2021/8/25 培养基成分及配制课件
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2021/8/25 培养基成分及配制课件
3. 肌醇(环己六醇)
促进糖类物质的相互转化和活性物质作用的发挥 促进愈伤组织生长以及胚状体和芽的形成 对组织细胞繁殖、分化的促进作用 使用浓度100 mg/L
注:用量过多则促褐变
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2021/8/25 培养基成分及配制课件
4. 氨基酸
是很好的有机氮源,可直接被细胞吸收利用。 培养基中最常用的氨基酸是甘氨酸,其他的如精氨酸、
在离体培养条件下,不同种植物的组织对营养有不 同的要求,甚至同一种植物不同部位的组织对营养 的要求也不相同,只有满足了它们各自的特殊要求, 它们才能很好地生长。因此,没有一种培养基能够 适合一切类型的植物组织或器官。
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2021/8/25 培养基成分及配制课件
在建立一项新的培养系统时,首先必须找 到一合适的培养基,培养才有可能成功。在植 物组织培养历史进程中,事实上也紧密地伴随 着培养基的研制史。
谷氨酸、谷酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、丙氨酸等也常 用。
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2021/8/25 培养基成分及配制课件
5. 天然复合物
为了特殊的培养目的,在一部分培养基中还添加了 一些特殊成分,如水解酪蛋白,水解乳蛋白,酵母提取 物,胰蛋白胨,椰乳,西红柿汁,香蕉粉,橘子汁,可 可汁等天然复合物以及活性炭,渗透调节剂等。

食用菌制种—母种培养基制作(食用菌生产课件)

食用菌制种—母种培养基制作(食用菌生产课件)

• 2.原种(二级种) 原种是由母种扩大培养而成的菌种。这一级菌种是 为了加快食用菌繁殖速度,满足大面积栽培时生 产栽培种的需要而设置。 原种使用基质通常与栽培基质相同或相似,原种繁 殖培养过程也是生理驯化过程。
• 在培养时应当认真检查菌丝的纯培养程度和菌 丝的长势,保持纯种培养。原种制作所用容器 要求使用透明度好的玻璃瓶。
接种
母种的扩 大培养
培养与检验
常压 高压
蒸汽灭菌
原种 接种
培养与检验
菌种生产工艺流程
确定生产出 发菌株
摇瓶培养基 灭菌
菌株保藏
液体菌种3基
装发酵罐3基
栽培种
灭菌 发酵罐培养
灭菌 液体菌种
(四)培养基的制作技术 1.母种培养基的制作技术 • 母种培养基常用马铃薯葡萄糖琼脂培养基,配方
为马铃薯(去皮)200~250g,葡萄糖20~ 25g,琼脂18~20g,水1000ml。马铃薯要求 新鲜、无霉烂,去皮、去芽点。
1)配制步骤
试管培养基 配制步骤
(1)按配方要求称取各种营养物质。 (2)将去皮的马铃薯切块加水,用文火煮沸30分钟
,过滤取滤液。 (3)加入葡萄糖,并补足水量。 (4)搅拌均匀,自然pH值或调节至适宜的酸碱度

(5)加入琼脂,用文火加热使之熔化,并趁热分装 试管或三角瓶中,分装量为试管长度的1/5~ 1/4(保藏用多些,生产用少些)。
3.栽培种(三级种) 这是指直接用于生产栽培的菌种,多由原种扩
大培养而成,常以菌瓶或菌袋作为容器。
(三)菌种生产的流程Байду номын сангаас食用菌的固体菌种生产与液体菌种生产的设
备选型和场所要求是大不相同的。固体菌种生产 也因各级菌种生产所使用基质不同而操作过程的 条件和步骤也有所差异,但作为一种生产工艺流 程来说是大致相同的。

第二章培养基配置PPT课件

第二章培养基配置PPT课件

(2)细胞分裂素类(cytokinin,CTK)
✓ 腺嘌吟的衍生物,包括6-BA、Kt、Zt 等。其中Zt活 性最强,但非常昂贵,常用的是6-BA。
• 6—BA(6—苄基腺嘌呤) Kt (kinetin 激动素) • Zt (zeatin 玉米素) ✓ 作用:
• 诱导芽的分化 • 促进侧芽萌发生长 • 促进细胞分裂与扩大(茎增粗),抑制根的分化,延缓
成分大多不清楚,一般尽量避免使用。
➢ 椰乳 使用最多、效果最大。用量为10%—20%(愈伤、细胞培养)。
➢ 香蕉汁 用量为150-200ml/L,缓冲pH值(兰花组培)。
➢ 马铃薯 用量为150—200g/L,缓冲pH值。
➢ 其他 酵母提取液、麦芽提取液、苹果和番茄的果汁等。遇热较稳定,
大多在培养困难时使用,有时有效。
第二章 培养基及其配制
定义:
培养基(culture medium)——根据植物生长所需 营养成分,配制成的供植物生长的人工制作的营养物 质。是植物组织培养的重要基质。
•不同植物的组织对营养有不同的要求,甚至同一种植物不同部 位的组织对营养的要求也不相同 •没有一种培养基能够适合一切类型的植物组织或器官 •找到一合适的培养基,是培养成功的基础。
• (2)活性炭(active carbon) 目的:是利用其吸附能力,减少一些有毒物质的影响; 利于生根。
• 使用浓度:1—5g/L。
• 它的颗粒大小决定着吸附能力:粒度越小,吸附能力越 大;温度低吸附力强,温度高吸附力减弱,甚至不吸附。
优点:操作简便,通气问题易解决,便于观察研究。 缺点:培养物与培养基的接触(即吸收)面积小,各
(1)糖类(碳水化合物 )
碳源,维持培养基的渗透压在1.5-4.1MPa。多使 用蔗糖。

培养基的制备-PPT课件

培养基的制备-PPT课件

四、培养基成分配比的选择


培养基的组分、配比、缓冲能力、黏度、 消毒是否彻底、消毒后营养破坏的程度及 原料中杂质的含量都对菌体生长和产物形 成有影响。 理论+经验 数学分析方法
• 正交实验设计,方差分析
正交表因素水平
因素水 平
1 2 3
玉米粉 (%) A 0.5
1.0 1.5
豆饼粉 (%) B 4
③ 淀粉、糊精 使用条件:微生物必须能分泌水解淀粉、糊精的酶类 缺点:难利用、 发酵液比较稠、一般>2.0%时加入一定的α-淀粉酶 成分比较复杂,有直链淀粉和支链淀粉等等。 优点:来源广泛、价格底 难利用,可以解除葡萄糖效应
(半纤维素酶)
(1.5g麸皮)
李江华,无锡轻工大学学报,2019
二、氮源
斜面培养基

作用:这是供微生物细胞生长繁殖用的, 包括细菌,酵母等的斜面培养基以及霉菌、 放线菌生孢子培养基或麸曲培养基等。这 类培养基主要作用是供给细胞生长繁殖所 需的各类营养物质。



特点: 1.富含有机氮源,少含或不含糖分。有机氮有 利于菌体的生长繁殖,能获得更多的细胞。 2.对于放线菌或霉菌的产孢子培养基,则氮源 和碳源均不宜太丰富,否则容易长菌丝而较少 形成孢子。 3.斜面培养基中宜加少量无机盐类,供给必要 的生长因子和微量元素。
2、硫酸镁


镁是某些细菌的叶绿素的组成成分。虽不参 加任何细胞结构物质的组成,但它的离子状 态是许多重要的酶的激活剂。 硫,含硫蛋白质的组分;酶的活性基。
• 硫酸镁
2、钾盐

钾不参加细胞结构物质的组成,但它是许多 酶的激活剂。
3、微量元素


铜、锰、锌、钼、碘、溴等。 避免有害离子加入到培养基中。

组织分离制食用菌母种PPT课件

组织分离制食用菌母种PPT课件
75%酒精及酒精棉球等 培养箱等。
复习上一节 母种培养基的配制步骤
• 1.按配方称量:见下面的配方 • 2.煮制 • 3.分装 • 4.灭菌 • 5.排斜面
母种培养基配方:
1.土豆200g、糖20g、琼脂20g、水1000ml
2.去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g、 水1000ml、PH值自然,另外添加:麸皮20g、 玉米面5g或黄豆粉5g、磷酸二氢钾2g,硫酸 镁2g,VB11片(10mg)。 此配方适用于大多数菌种,金针菇、黑木耳、 灵芝生长尤其茁壮。 可作黑木耳、香菇的复壮培养基,效果显著。
2.记录你制作的母种的生长状态; 3.是否有杂菌污染,如有分析其原因.
再见!
写在最后
成功的基础在于好的学习习惯
The foundation of success lies in good habits
37
谢谢聆听
·学习就是为了达到一定目的而努力去干, 是为一个目标去 战胜各种困难的过程,这个过程会充满压力、痛苦和挫折
人操作; 第二大组可在无菌室内操作;
第一大组采用菌盖与菌柄交界处组织进 行分离,第二大组采用菌盖带菌褶部分 进行组织分离,作对比观察。
分组辅导
注意同学们的操作; 及时纠正不规范动作。 接种操作完毕,收集试管进行培养。
数显式恒温培养训第三大部分
结果观察
培养基的高压灭菌
使用高压蒸汽灭菌锅应注意的事项? (提问同学) (1)锅内装物品不应过紧; (2)注意排出冷气,否则不能保证灭菌效果; (3)加热排冷气后,使温度达到121.3℃,压
力在0.1-0.15 MPa之间维持30 min; (4)不耐高热高压之物品,不能用此法灭菌。
(四)组织分离操作的主要步骤:

菌种繁育—母种制作(食用菌生产技术课件)

菌种繁育—母种制作(食用菌生产技术课件)
母种分离选育
目录
一、 采集种源 二、 培养基配制琼脂培养基 三、 分离与适温培养 四、 一级种转接 五、 注意事项
母种主要采用人工选择、诱 变育种、杂交育种和原生质 融合等手段获得。作为一般 制种专业户,可以采用人工 选择方式分离培育母种。
菌种
野生 担孢子或子囊孢子或组织体 栽培 扩大繁殖后的纯次生菌丝体
①选择种菇:前已述及。 ②种菇消毒:在种菇中部取最大的3-4张菇片,
用70%的酒精轻擦表面后置于接种箱内消毒;
③菇肉接种:将菇片纵向撕开,在每个裂面靠近菇片边缘处取一 米粒大小的菇肉组织接于PDA培养基上。每张菇片共撕10个裂面 ,接10支试管,一次分离共接30~40支试管;
④培养:将试管置于15~30℃下培养; ⑤纯化 : 培养期间每天都要检查发菌情况,从中选择菌丝浓白粗
孢子的特点:菌龄小、生命力强、变异率高。
孢子 分离法
单孢分离 多孢分离
难度较大 较简易
单孢分离
多孢分离
概念 步骤
使许多孢子在同一培养基上, 萌发后自由交配成次生菌丝的方法
种菇消毒 采收孢子 接种孢子 出菇试验
整菇插种法 钩悬法 孢子印法
(1) 种菇消毒
菌柄去2/3
苞被
有:75%酒精棉球擦试
➢ 一般操作流程
野生菌驯化 原菌株改良 生物技术创新
优良 菌株
扩大 繁殖Leabharlann 实行纯培养基要 本求
不含任何杂菌
用于 生产
一、采集种源
从野生或人工栽培群体中,选择有代表性的优良菇体作为种源 。在菇床、菌墙中选择出菇早、无杂菌侵染、株型紧凑、圆整 肉厚、色泽美观、七八成熟的第一潮菇的肥壮菇体作种菇(茯苓 类选择菌核或菌索);
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脂18~22g、葡萄糖或白糖20g、水1000mL。
琼脂是由麒麟菜、石花菜或江篱(属红
藻)经加热至溶化后,加以冷却凝固而
成的海藻精华。琼脂含有丰富的膳食纤
维(含量为80.9%),蛋白质含量高,
热量低,具有排毒养颜、泻火、润肠、
降血压、降血糖和
二、实验用具:天平1台、小刀1把、搪瓷量杯2个、铝锅1个、电炉1个、 玻璃分液漏斗1个、试管16支、试管架1个、高压灭菌锅1个(共用)、 棉花塞16粒、漏斗架1个、纱布1块。
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母种斜面培养基的制作
三、实验材料:马铃薯40g、琼脂4g、葡萄糖或白糖4g、水200mL。
琼脂
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母种斜面培养基的制作
四、方法步骤: 1、称取材料:将马铃薯洗干净,
去皮,称取40g,切成薄片;称 取琼脂4g和葡萄糖(或白糖) 4g;量取水200mL。 2、将40g马铃薯薄片放入铝锅,加 入200mL水,加热煮沸30分钟, 趁热用6层纱布过滤。 3、马铃薯的滤液用开水补足到 200mL,倒回铝锅,加入4g琼 脂和4g葡萄糖(或白糖),用小 火继续加热并不断搅拌至全部熔 化为止,最后补水至200mL。
母种培养基的制作
德化鹏祥中学
1
食用菌栽培
2
食用菌栽培
食用菌在分类上属于真菌。 食用菌靠不断生长着的菌丝体,从它们着生的基质中吸收营养,当积累
了足够的养分,达到生理成熟后形成形形色色的子实体(也称菇体)。 食用菌的可食用部分绝大多数是子实体。
3
食用菌栽培
食用菌不仅味美,而且营养丰富,富含蛋白质、多种维生素和大量糖类。
7、培养基冷却到60 ℃左右,从高压锅中取出,趁热摆成斜面,并使斜 面长度约是试管长度的1/2,待培养基凝固,即成试管斜面培养基。
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德化鹏祥中学
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母种斜面培养基的制作
4、趁热分装入试管内,每支试管装 至其长度的五分之一(试管口的内 外3cm内粘附的培养基,必须擦拭 干净),塞入棉塞(棉塞总长4cm, 要求松紧适宜,塞入长度为棉塞长 度的2/3)。然后以每7~10支为一捆, 棉塞外再包上牛皮纸,并用绳扎好。
5、将高压锅盖拧开,加入适量的水, 把包扎好的试管直立放入高压锅的 内桶(不能装太紧,防止阻碍蒸气 流通),盖上锅盖(依此、对称旋 紧螺丝),进行灭菌。
4
食用菌栽培
菌种,即食用菌生产中的“种子”。 优良菌种的制备是食用菌栽培中极其重要的环节。
5
食用菌栽培
食用菌菌种的制备一般需要经过母种、原种和栽培种三个培养步骤。
菌种 又称 培养容器 培养基
母种 一级种、试管种、斜面种
试管 固体(斜面)
原种 二级种、瓶装种
菌种瓶 固体(或液体)
栽培种 三级种、袋装种、生产种
塑料袋、菌种瓶 固体
6
第一单元:母种培养基的制作
母种,即由组织分离(由食用菌实体的组织直接分离菌种的方法)或孢子分离 (将食用菌的孢子接种在培养基上,让其萌发成菌丝而获得菌种的方法)等方 法获得的菌丝体,又称一级菌种,由于菌丝生长在试管的斜面培养基上,因此 又称试管种或斜面种。
生产上的母种实际上是再生母种。母种既可繁殖原种,又适用于菌种保藏。
7
第一单元:母种培养基的制作
培养基是用人工方法配置的、供食用菌生长繁殖所需营养的基质。 母种培养基,是专门用来培养母种的营养基质,一般用试管作容器,故
又称试管斜面培养基,常用于菌种分离、提纯及转管、保存菌种。
母种
试管斜面培养基
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母种斜面培养基的制作
按200mL水的比例称取各种材料,配制16支试管培养基,以备制种用。 一、母种培养基(常用的马铃薯葡萄糖培养基)配方:马铃薯200g、琼
6、待高压锅内压力达0.5千克/平方厘 米时,打开放气阀门放气,待压力 表指示为“0”时,关放气阀门。在 压力达1.5千克/平方厘米时,用小火 维持温度126℃(灭菌期间应专人看 守),30分钟后停止加热,当压力 下降到接近“0”时,移入无菌室, 先打开放气阀,再打开高压锅盖。
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母种斜面培养基的制作
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