实验一斜面培养基制作-

固体斜面培养基用途

固体斜面培养基用途一、引言固体斜面培养基是微生物学中常用的培养基之一，其主要特点是在培养基表面形成斜面，可以方便地观察和分离微生物。

本文将详细介绍固体斜面培养基的制备方法、用途以及注意事项。

二、制备方法1. 准备所需材料：琼脂、蒸馏水、试管或烧杯、移液管或棉签。

2. 将琼脂加入烧杯中，并加入适量的蒸馏水，搅拌均匀。

3. 将烧杯放入水浴中，加热至琼脂完全溶解。

4. 取出烧杯并降温至50℃左右。

5. 取出试管或烧杯，倾斜45度角放置于支架上。

6. 使用移液管或棉签取出所需微生物菌株，在试管或烧杯表面涂抹均匀。

7. 放置于恒温箱中培养，待菌落生长后进行观察和分离。

三、用途1. 分离纯种菌株：固体斜面培养基可以有效地分离不同种类的微生物，避免混杂现象的发生，从而获得纯种菌株。

2. 观察菌落特征：固体斜面培养基可以在菌落生长后方便地观察其形态、颜色、大小等特征，有助于鉴定微生物种类。

3. 储存和保存：固体斜面培养基可以用于微生物的长期储存和保存，方便后续实验使用。

四、注意事项1. 制备过程中要注意卫生和无菌操作，避免外源性污染。

2. 使用前应检查琼脂是否均匀溶解，并消毒试管或烧杯。

3. 在涂抹微生物时要均匀涂抹，并避免压力过大导致琼脂变形或破裂。

4. 培养过程中应保持恒温箱温度稳定，并避免震动或移动试管或烧杯。

五、总结固体斜面培养基是微生物学中常用的培养基之一，其制备方法简单易行，用途广泛。

通过使用固体斜面培养基，可以方便地分离纯种菌株、观察菌落特征以及储存和保存微生物。

在使用过程中，需要注意卫生和无菌操作，保持琼脂均匀溶解，并稳定恒温箱温度。

细菌斜面接种实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 掌握细菌斜面接种的基本操作方法。

2. 熟悉斜面培养基的制作和保存方法。

3. 学习通过斜面接种法分离纯化细菌。

4. 了解细菌在不同培养基上的生长特性。

二、实验原理斜面接种法是一种常用的微生物接种方法，通过将细菌接种到含有营养成分的斜面培养基上，使细菌在适宜的环境中繁殖生长。

斜面培养基通常由琼脂、蛋白胨、牛肉膏等成分组成，提供细菌生长所需的碳源、氮源、生长因子等。

三、实验材料1. 细菌样品：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等。

2. 斜面培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂斜面。

3. 实验器材：接种环、酒精灯、无菌试管、无菌培养皿、无菌水、记号笔等。

四、实验步骤1. 斜面培养基制备- 称取25g牛肉膏蛋白胨琼脂，加入100ml蒸馏水，加热溶解。

- 将溶液煮沸10分钟，以去除杂菌。

- 待溶液冷却至50-60℃时，加入无菌水调整pH至7.0-7.2。

- 将溶液分装至无菌试管中，每管10ml。

- 将试管置于高压蒸汽灭菌锅中，121℃灭菌15分钟。

- 灭菌后，待培养基冷却至45-50℃时，将试管倾斜45°，使培养基沿试管壁流下，形成斜面。

- 待培养基凝固后，将试管倒置，置于无菌环境中保存。

2. 斜面接种- 将待接种的细菌样品接种环在酒精灯上灼烧灭菌。

- 待接种环冷却后，挑取适量细菌样品，沿斜面培养基壁涂抹。

- 重复上述步骤，接种第二管斜面培养基。

3. 培养- 将接种后的斜面培养基放入恒温培养箱中，37℃培养24小时。

4. 观察与记录- 观察斜面培养基上的细菌生长情况，记录菌落形态、颜色等特征。

五、实验结果与分析1. 金黄色葡萄球菌在牛肉膏蛋白胨琼脂斜面上生长良好，形成金黄色、表面光滑、边缘整齐的菌落。

2. 大肠杆菌在牛肉膏蛋白胨琼脂斜面上生长良好，形成白色、表面光滑、边缘整齐的菌落。

六、实验讨论1. 斜面接种法是一种常用的微生物接种方法，适用于分离纯化细菌。

2. 在斜面接种过程中，无菌操作至关重要，避免杂菌污染。

项目1配制斜面培养基

项目1 配制斜面培养基微生物同其他生物一样，需要不断从外界吸收营养物质，经过一系列的生物化学作用，获得能量并形成新的细胞物质、代谢产物，同时排出副产物及废物。

不同的微生物对营养物质的需求也不一样。

培养基就是人工配制的供微生物或动植物细胞生长、繁殖、代谢和合成所需产物的营养物质和原料，当然，除此之外，培养基也为微生物等提供合适的生长环境条件。

常用的培养基都必须满足或符合一些基本要求，包括含有作为合成细胞成分的原料、满足生化反应的条件、一定的pH等。

因此，培养基的组成和配比是否恰当对微生物等的生长、繁殖、产物的形成、提取分离工艺的选择、产品质量和产量等都有很大的影响。

优良的培养基可以充分发挥微生物细胞的生物合成能力，产生最好的效果。

1 基础知识1.1 微生物细胞的化学组成及胞外代谢产物1.1.1 微生物细胞的化学组成微生物营养物质的确定，主要依据细胞的化学组成及所代谢产物的化学组成。

因此，分析微生物细胞的化学组成是了解微生物营养的基础。

表1-1列出了几种微生物细胞的化学组成。

由表可知，微生物细胞含有80％左右的水分和20％左右的干物质，它主要是由碳、氢、氧、氮等元素组成，约占全部干物质的90％～97％，此外，还含有各种无机矿物质。

而在微生物细胞的干物质中，碳约占45％～55％；氮在细菌和酵母中含量较高，约占7％～13％，在霉菌中含量较低，约占5％。

一般来说，碳和氮在微生物细胞化学组成中的比例大约为5：1。

而无机矿物质约占全部干重的3％～10％，其中以磷的含量最高，大多数微生物细胞中磷的含量可达全部灰分的50％，其次是钾、镁、钙、硫、钠等，铁、锌、锰、硼、钼、硅等的含量极微。

1.1.2 微生物胞外代谢产物微生物在生长过程中，除利用外源营养物质合成新的细胞外，还会产生一些有机化合物分泌到微生物的体外，这些胞外代谢产物的种类繁多，且因微生物的种类而异。

因此，了解这些代谢产物的化学组成，极有助于微生物培养时的营养物质的选择和代谢产物的积累。

斜面培养基的制作方法

斜面培养基制作方法(仅供参考)1斜面培养基斜面培养基（agarslantculture-medium ）：固体培养基（solid culture medium ）的一种形式；制作时应趁热定量分装于试管内，并凝固成斜面的称为斜面培养基，用于菌种扩大转管及菌种保藏。

其制作流程图如下图1.图12操作要点倒入培养基的体积以试管1/4左右为宜，斜面的长度不超过试管的一半，一般用15 ×150mm 试管，其容量为5ml。

2.1定型棉塞将制作松紧适宜的棉塞塞进试管，然后放进鼓风的干热灭菌箱中于160℃定型2小时。

定型后切记不能立即打开干热灭苗箱，否则棉塞易燃烧。

要让其冷至100℃以下才能打开，接近室温打开更理想。

这样制作的棉塞，便于培养基分装及接种，还有利于减少污染。

棉塞的制作方法见下图2.图2-a图2-b2.2分装试管将配制好的培养基按常规方法分装试管，在此过程中切勿将培养基沾到度管上部。

若沾到上部，一是影响试管的外观，二是易污染棉塞。

如下图3.图32.3捆扎试管管口堵入棉塞后7或9支试管扎一捆，棉塞部分用牛皮纸包扎。

在包装纸上标明培养基名称，制备组别和姓名、日期等。

如下图4.图42.4灭菌将手提式高压锅内的水换成干净的自来水，水按要求加入，不能过多。

将捆成把的试管立放装进高压锅的内桶中，在试管顶上放适量棉花使之成凸形，再在上面盖上一层牛皮纸，盖上盖进行高压灭菌，在灭苗放冷气的过程中，要尽量慢，以免减压过快，培养基沸腾，打湿棉塞。

冷气放彻底后，待压力达到灭苗要求时，稳压一定时间（培养基种类不同，灭苗时间要求不一样）。

当达到灭菌时间后、最好让压力自然下降至零时再打开高压锅。

打开高压锅时，移去试管上面的牛皮纸和棉花，然后盖上锅盖，并使锅留一条缝隙，让锅内余热烘干棉塞。

2.5摆斜面试管内的凝聚水主要是高温游离水在培养基凝固过程中遇外界温差过大形成的凝结水和摆放斜面时没有足够的热量烘干棉塞上的水分所致，要摆出高质量的斜面试管，必须在培养基凝固过程中避免温差过大，让其缓慢降温，使高温施离水被培养基所吸收，摆出的斜面才不会出现湿棉塞。

斜面培养基的名词解释

斜面培养基的名词解释斜面培养基是一种常用于细菌培养和细菌菌落计数的实验工具。

它是在实验室中广泛使用的一种培养细菌的方法，用于观察菌落形态、生长情况和菌群变化等。

一、斜面培养基的构成和制备斜面培养基由培养基和琼脂组成。

培养基是供细菌生长和繁殖所需的营养物质，通常包括碳源、氮源、无机盐以及其他必要的营养成分。

琼脂则是一种固化剂，用于将培养基变成半固态，以方便菌落的生长和观察。

制备斜面培养基的过程相对简单，首先将适量的培养基加入适量的纯净水中，在搅拌的同时加热溶解。

然后加入适量的琼脂，继续搅拌溶解，最后将溶液倒入具有倾斜表面的试管或培养皿中。

待溶液凝固后，使用无菌技术将所需菌株均匀刷在斜面上。

二、斜面培养基的优势和应用1. 均匀性：倾斜的表面可以使菌株在培养基上均匀生长，以保证观察和研究的准确性。

通过斜面培养基，可以更容易地观察和计数菌落数量。

2. 空间节省：相比于平板培养基，斜面培养基在同样的培养皿中可以容纳更多的细菌。

这种节省空间的特性使其在实验室中非常受欢迎。

3. 快速生长：斜面培养基提供了细菌生长所需的适宜环境，并且借助于通气孔或开放的一侧，菌落可以更快地生长和繁殖，节省实验时间。

斜面培养基广泛应用于微生物实验中。

它可以用于细菌数量的计数，以评估食品和饮水中的微生物污染程度。

此外，在临床实验中，斜面培养基也被用于分离细菌，进行微生物鉴定和敏感性测试。

三、斜面培养基的维护和注意事项1. 温度控制：斜面培养基在制备后应迅速放置在合适的温度下，以避免培养基的变质和污染。

大多数细菌生长的适宜温度为37°C，但也有一些特殊细菌需要较低或较高的温度来生长。

2. 无菌操作：斜面培养基的制备和使用都需要严格的无菌操作，以防止外源性菌落的污染。

3. 存储条件：制备好的斜面培养基应放置于冰箱中保存，避免阳光直射，以延长其有效期。

斜面培养基作为一种常用实验工具，为科学家们提供了便利和准确的观察和研究细菌的方法。

实验一斜面培养基制作-

实验一母种培养基配制及棉塞制作
一.实验目的 1、掌握食用菌固化培养基的配制。 2、学会棉塞
的制作方法。
二、基本原理
食用菌母种分离、移接和斜面保存菌种都必须要制作相应的培养基，以备食用菌的培养、分离和保存之用。
培养基是根据各种食用菌在生长繁殖过程中对营养物质需求制成的，它可供给食用菌的C源、N 源、水分、各种无机盐及生长物质等。
四、实验内容
过程：制马铃薯滤液→融化琼脂→培养基的分装 →棉塞的制作
方法步骤：
精选2021版课件
2
1．配方（PDA）：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂15~20g，自来水1000ml，pH自然。
2．制作方法
（1）制滤液：马铃薯刮去粗皮，去芽眼，切成碎块，称量后放锅中，加水 1200~1300ml，将其煮沸20min。用双层纱布过滤，取1000ml滤液。
培养基的种类很多，本实验学习斜面培养基（PDA）制作。
精选2021版课件
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三.实验准备
1.器具：天平、称量纸、牛角匙、精密pH试纸、量筒、刻度搪瓷杯、试管、三角瓶、漏斗、漏斗架、玻璃棒、烧杯、试管架、铁丝筐、剪刀、棉花、线绳、牛皮纸、皮筋、纱布、电炉、菜刀、菜板、小铝锅等。
2．材料：马铃薯、葡萄糖或蔗糖、琼脂、水。
（4）制棉塞棉花以白色长绒脱脂棉为宜。根据试管口大小取棉，将其卷成棉塞，最好外包一层纱布。将棉塞塞入试管口。棉塞塞入试管2/3。制做棉塞要求外表光滑，外包的纱不能折、松紧适宜等。精选2 Nhomakorabea21版课件
5
A.正确; B.不正确
精选2021版课件
6
（5）包扎：管口堵入棉塞后7或9支试管扎一捆，棉塞部分用牛皮纸包扎。在包装纸上标明培养基名称，制备组别和姓名、日期等。

大肠杆菌的斜面扩大培养实验报告

大肠杆菌的斜面扩大培养实验报告
一、实验简介
本实验旨在通过斜面扩大培养的方法，探究大肠杆菌的生长特性，并对其进行初步鉴定。

二、实验材料与方法
1. 实验材料
（1）大肠杆菌液体培养基
（2）琼脂平板培养基
（3）斜面培养基
2. 实验方法
（1）制备斜面培养基：将琼脂平板培养基煮沸后冷却至50℃左右，倒入试管中，倾斜试管使其形成斜面，待凝固后储存备用。

（2）制备大肠杆菌液体培养基：按照说明书加入适量的培养基粉末和水，混合均匀后灭菌。

（3）接种：将大肠杆菌接种于液体培养基中，摇晃孵育12小时。

（4）制备斜面扩大培养：将液体培养物均匀地涂布于斜面上，垂直放置于恒温箱内孵育24小时。

（5）观察：观察并记录菌落形态、颜色等特征。

三、实验结果与分析
1. 实验结果
经过斜面扩大培养后，大肠杆菌在琼脂平板上形成了圆形、平整的菌
落，直径约为2-3mm，表面光滑、无色透明。

在显微镜下观察，可见到细长的杆状细胞。

2. 实验分析
大肠杆菌是一种常见的肠道细菌，在自然界中广泛存在。

其生长速度较快，在液体培养基中可以迅速繁殖。

而通过斜面扩大培养，则可以促进其单个菌落的生长和分化，使其更容易被观察和鉴定。

通过本次实验，我们成功地制备了斜面扩大培养，并对大肠杆菌进行了初步鉴定。

四、实验总结
通过本次实验，我们掌握了斜面扩大培养的方法，并成功地对大肠杆菌进行了初步鉴定。

我们还发现，在不同培养基条件下，同一种细菌可能会表现出不同的特征。

在进行细菌鉴定时，需要综合考虑多种因素，并采用多种方法进行鉴定，以确保结果的准确性。

斜面培养基的制作方法

斜面培养基的制作方法
斜面培养基是一种常用于细菌培养的培养基。

它的特点是表面呈斜面形状，使得细菌在培养过程中能够自然地向上生长。

这样可以使得细菌在培养过程中更容易被观察和检测。

制作斜面培养基的方法如下：
1.准备所需的原料：培养基粉末、蒸馏水、烧杯、烧杯架、烧瓶、
温度计、制备烧瓶的抗菌膜。

2.将培养基粉末加入蒸馏水中，按照说明书上的比例进行配制。

一
般情况下，每克培养基粉末需要加入50-100毫升的蒸馏水。

3.将配制好的培养基倒入烧杯中，用烧杯架将烧杯放在烧瓶中。

4.用温度计测量培养基的温度，当培养基温度降到40-50°C时，放
入制备好的抗菌膜。

5.将烧瓶盖上，并在烧瓶上方用胶带粘贴一个斜面模板。

6.将烧瓶放置在37°C的恒温槽中，使培养基保持在37°C的温度
下进行培养。

7.在培养过程中，定期观察细菌的生长情况，并记录下来。

斜面培养基的制备

斜面培养基的制备1、配制溶液向容器内加入所需水量的一部分，按照培养基的配方，称取各种原料，依次加入使其溶解，最后补足所需水分。

对蛋白胨、肉膏等物质，需加热溶解，加热过程所蒸发的水分，应在全部原料溶解后加水补足。

2、配制固体培养基时，先将上述已配好的液体培养基煮沸，再将称好的琼脂加入，继续加热至完全融化。

并不断搅拌，以免琼脂糊底烧焦。

2、调节pH值用pH试纸（或pH电位计、氢离子浓度比色计）测试培养基的pH值，如不符合需要，可用10%HCl或10%NaOH进行调节，直到调节到配方要求的pH值为止。

3、过滤用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好的培养基过滤。

用纱布过滤时，最好折叠成六层，用滤纸过滤时，可将滤纸折叠成瓦棱形，铺在漏斗上过滤。

4、分装已过滤的培养基应进行分装。

如果要制作斜面培养基，须将培养基分装于试管中。

如果要制作平板培养基或液体、半固体培养基，则须将培养基分装于锥形瓶内。

分装时，一手捏松弹簧夹，使培养基流出，另一只手握住几支试管或锥形瓶，依次接取培养基。

分装时，注意不要使培养基粘附管口或瓶口，以免浸湿棉塞引起杂菌污染。

装入试管的培养基量，视试管和锥形瓶的大小及需要而定。

一般制作斜面培养基时，每只15×150毫米的试管，约装3～4毫升（1/4～1/3试管高度），如制作深层培养基，每只20×220毫米的试管约装12～15毫升。

每只锥形瓶装入的培养基，一般以其容积的一半为宜。

5、加棉塞分装完毕后，需要用棉塞堵住管口或瓶口。

堵棉塞的主要目的是过滤空气，避免污染。

棉塞应采用普通新鲜、干燥的棉花制作，不要用脱脂棉，以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用。

制作棉塞时，要根据棉塞大小将棉花铺展成适当厚度，揪取手掌心大小一块，铺在左手拇指与食指圈成的圆孔中，用右手食指插入棉花中部，同时左手食指与拇指稍稍紧握，就会形成1个长棒形的棉塞。

棉塞作成后，应迅速塞入管口或瓶口中，棉塞应紧贴内壁不留缝隙，以防空气中微生物沿皱折侵入。

微生物实验

实验一、培养基的制备和消毒灭菌培养基的配制1.培养基：人工配制的供微生物生长繁殖或积累代谢产物所需的营养基质。

2.培养基的配制原则（1）目的明确：不同微生物所需营养基质不同，配制培养基的目的也有不同。

（2）营养协调：营养成分的比例和浓度要适当。

（3）理化适宜：渗透压、pH和氧化还原电位。

（4）经济节约。

实验步骤---斜面培养基的制备和灭菌计算→称量→加热溶化→调pH →过滤（可省略）→分装→加塞（附棉塞制作）→包扎(皮筋或绳子)→灭菌→摆斜面→无菌检查。

1.称量按照配方，准确称量各成份放于烧杯中。

对于不是粉状药品（如牛肉膏），应用烧杯和玻璃棒称量。

2.配制（1）向烧杯中加入适量的水，搅拌，使其溶解（可加热助溶）。

（2）如果配制固体培养基，在琼脂熔化时，需不断搅拌，并控制火力不要使培养基溢出或烧焦。

一般要求琼脂沸腾3次，完全熔化后，补足所失水分。

3.调节pH值培养基溶解后，用pH试纸测pH，然后根据要求加酸或碱（一般用1M HCl和1M NaOH），要缓慢少量且多加搅拌。

培养基配方为自然pH时，不用调节。

4.过滤用滤纸或多层纱布，无特殊要求时可省去。

5.分装（1）将培养基分装入试管内或三角瓶内，管（瓶）口塞上棉塞。

固体培养基要趁热装。

（2）分装量①斜面：装量为管长的1/5。

②液体培养基：装量为管长的1/4。

③半固体培养基：装载量为管长的1/3。

（3）注意分装时要避免培养基粘染管（瓶）口，引起污染。

6.灭菌塞棉塞，包扎，灭菌。

培养基做完后，要求在2-4小时内灭菌，否则会被污染。

7.摆斜面灭菌完毕，冷却到60℃左右再摆斜面，以免产生过多冷凝水。

配制培养基时注意事项1.称量要准确，取药品的角匙不能混用。

2.加热融化时要不断搅拌，以免糊底和溢出,（每加热30s关掉电源，开盖看一次）。

3.蛋白胨极易吸湿，称取时动作要迅速。

5.节约药品。

实验二细菌的简单染色和革兰氏染色革兰氏染色法的基本步骤是：先用初染剂结晶紫进行初染，再用碘液媒染，然后用乙醇(或丙酮)脱色，最后用复染剂(如番红)复染。

(完整版)斜面培养基的制作方法

斜面培养基制作方法(仅供参考)1斜面培养基斜面培养基（agarslantculture-medium ）：固体培养基（solid culture medium ）的一种形式；制作时应趁热定量分装于试管内，并凝固成斜面的称为斜面培养基，用于菌种扩大转管及菌种保藏。

其制作流程图如下图1.图12操作要点倒入培养基的体积以试管1/4左右为宜，斜面的长度不超过试管的一半，一般用15 ×150mm 试管，其容量为5ml。

2.1定型棉塞将制作松紧适宜的棉塞塞进试管，然后放进鼓风的干热灭菌箱中于160℃定型2小时。

定型后切记不能立即打开干热灭苗箱，否则棉塞易燃烧。

要让其冷至100℃以下才能打开，接近室温打开更理想。

这样制作的棉塞，便于培养基分装及接种，还有利于减少污染。

棉塞的制作方法见下图2.图2-a图2-b2.2分装试管将配制好的培养基按常规方法分装试管，在此过程中切勿将培养基沾到度管上部。

若沾到上部，一是影响试管的外观，二是易污染棉塞。

如下图3.图32.3捆扎试管管口堵入棉塞后7或9支试管扎一捆，棉塞部分用牛皮纸包扎。

在包装纸上标明培养基名称，制备组别和姓名、日期等。

如下图4.图42.4灭菌将手提式高压锅内的水换成干净的自来水，水按要求加入，不能过多。

将捆成把的试管立放装进高压锅的内桶中，在试管顶上放适量棉花使之成凸形，再在上面盖上一层牛皮纸，盖上盖进行高压灭菌，在灭苗放冷气的过程中，要尽量慢，以免减压过快，培养基沸腾，打湿棉塞。

冷气放彻底后，待压力达到灭苗要求时，稳压一定时间（培养基种类不同，灭苗时间要求不一样）。

当达到灭菌时间后、最好让压力自然下降至零时再打开高压锅。

打开高压锅时，移去试管上面的牛皮纸和棉花，然后盖上锅盖，并使锅留一条缝隙，让锅内余热烘干棉塞。

2.5摆斜面试管内的凝聚水主要是高温游离水在培养基凝固过程中遇外界温差过大形成的凝结水和摆放斜面时没有足够的热量烘干棉塞上的水分所致，要摆出高质量的斜面试管，必须在培养基凝固过程中避免温差过大，让其缓慢降温，使高温施离水被培养基所吸收，摆出的斜面才不会出现湿棉塞。

试管斜面制备标准

作业指导书
斜面低温保藏
此法为实验室工作用菌种的最常用的保藏方法．操作简单，使用方便，不得特殊设备，操作时，将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上，待菌生长充分以后，转移至2-8℃冰箱中保藏。

此法的缺点是菌种容易变异，因为培养基的物理、化学特性不是严格恒定的，传代过多会使微生物的性状和代谢发生变异，在传代过程中，污染杂菌的机会也较多。

因此，此法仅能用于工作用菌种的短期保藏，并应随时检查其污染杂菌和变异等情况，传代代数超过5代的菌种应灭菌处理后抛弃。

一、目的
菌种初步活化。

二、操作方法
三、菌株及对应培养基
表一各菌株斜面活化基本方法
146种常用培养基配
方.doc
四、斜面保藏时间及传代次数
每个菌株在活化时，必须同时转接3支斜面以上。

保藏时间依微生物的种类而有所不同：
a)霉菌、放线菌及芽胞的菌保存2--4个月，移种一次；
b)酵母菌两个月移种一次；
c)细菌每月移种一次。

五、记录保存
每只斜面菌株转接后，需对试管做好标注，包含：姓名，菌株名称，日期。

每只菌株斜面转移至培养箱后，需对过程进行拍照，培养结束后，需对其中一只斜面进行镜检检查，并保留照片。

表二各菌株斜面培养检查点。

发酵工程实验

实验五、变温发酵对目的产物产量的影响
一、实验目的初步了解不同温度对菌体生长和抗生素发酵效价的影响，理解变温发酵对提高目的产物的意义。
二、实验原理微生物在发酵过程中，首先要进行菌丝体的生长，对于分批发酵或实验室三角瓶发酵来说，随着营养物质的消耗、其他有害因素的积累，其生长由对数期进入稳定期，菌丝体生长量达到最大，此时微生物便通过次级代谢途径，迅速将初级代谢产物转变为次级代谢产物。对于许多微生物产生的抗生素来说，此时发酵温度适度降低，将大大提高目的产物的产量。
2．接种与培养：将生长良好的种子液按 15%的接种量进行接种，接完种后置于 28℃、180 rpm的摇床上进行培养，培养时间为6d。 3．发酵产物初步提取：发酵结束后，将发酵液进行超声破壁30min，加入乙酸乙酯 30ml，100rpm摇床振荡20min，再用滤纸滤去菌丝体，滤液用分液漏斗将乙酸乙酯相分离出来，进行减压浓缩至4~5ml液体。
三、实验材料菌种：摇瓶培养48 h一株链霉菌的种子液。培养基成分：大米，大豆粉，米糠。其他材料、设备仪器：乙酸乙酯等有机试剂、灭菌锅，超净工作台，酒精灯，三角瓶，紫外分光光度计，层析缸等。
四、实验步骤 1．培养基的配制与灭菌：大米50 g，大豆粉30 g，米糠20 g，H2O 100 mL，装入500 mL三角瓶；采用高压蒸汽灭菌，温度121℃，时间 60min，灭完菌后趁热将培养基振散。 2．接种：将生长良好的种子液接入固体发酵培养基中，每瓶接种量为25ml。接完种后置于28℃恒温培养箱内进行静置培养。
4．目的组分提取：将发酵物加入乙酸乙酯 50ml超声破壁30min，再置于100rpm摇床上振荡30min，用滤纸过滤，滤液用分液漏斗将乙酸乙酯相取出，进行减压浓缩，浓缩液加乙酸乙酯进行定容。 5．发酵效价检测：取0.2 ml样品溶液，进行划线点样，待样品干后进行展层，将目的组分条带刮下，用一定体积溶剂浸泡，取上清液进行吸光度检测。 6．根据吸光度，计算两个样品中的目的组分的发酵效价。

斜面培养基的操作方法

斜面培养基的操作方法
斜面培养基是一种常用的微生物培养方法，适用于细菌、真菌等微生物的分离和培养。

以下是斜面培养基的操作方法：
1. 准备培养基：根据所需的培养基配方，称取适量的培养基粉末加入适量的蒸馏水中，充分搅拌溶解，然后加热至沸腾使其变为透明溶液。

2. 滤过消毒：将溶液倒入塑料瓶或试管中，用滤纸或滤棉塞过滤去除杂质。

然后用自动压力锅或高压灭菌锅将培养基加热至121，压力达到15磅/平方英寸（psi），保持20分钟以上消毒。

3. 加入琼脂：在溶液冷却到50-60时，加入适量的琼脂粉末，并充分搅拌溶解。

4. 倒入培养容器：将培养基液倒入蠕动瓶、试管或培养皿中，倒入量不宜过多，约倒满容器的1/3至1/2处。

5. 摊平斜面：将容器倾斜成斜面，使培养基液均匀覆盖斜面，然后静置等待培养基凝固。

6. 灭菌：将培养容器盖好，包裹或包装好，并放入高压灭菌锅中，经121高温高压灭菌20-30分钟。

7. 接种：将需要培养的微生物用无菌火焰消毒好的接种环或接种针接种于培养基斜面的一侧或中央，然后用迅速的画圆或画线方法在斜面上均匀分布微生物。

8. 培养：将培养容器盖好，放入恒温培养箱或恒温培养箱中，在适宜的温度下进行培养，根据不同微生物有不同的培养条件。

以上就是斜面培养基的操作方法。

根据具体需要，培养基的配方和操作方法可能会有所不同，建议根据具体要求调整方法。

斜面培养基的制作方法

斜面培养基的制作方法斜面培养基相对和并列的概念是：平面培养基、高层培养基。

固体培养基倒在培养皿内，凝固成平面的称为平板培养基，用于菌种分离及研究菌类的某些特性；分装在试管内，直立凝固而制成的称为高层培养基，这样接入菌种后虽然发育的面小了一点，但培养基的厚度增大，营养丰富，时间长些也不容易干燥、开裂，常用于保存菌种。

1、配制溶液向容器内加入所需水量的一部分，按照培养基的配方，称取各种原料，依次加入使其溶解，zui后补足所需水分。

对蛋白胨、肉膏等物质，需加热溶解，加热过程所蒸发的水分，应在全部原料溶解后加水补足。

配制固体培养基时，先将上述已配好的液体培养基煮沸，再将称好的琼脂加入，继续加热至完全融化。

并不断搅拌，以免琼脂糊底烧焦。

2、调节pH值用pH试纸（或pH电位计、氢离子浓度比色计）测试培养基的pH值，如不符合需要，可用10%HCl或10%NaOH进行调节，直到调节到配方要求的pH值为止。

3、过滤用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好的培养基过滤。

用纱布过滤时，zui好折叠成六层，用滤纸过滤时，可将滤纸折叠成瓦棱形，铺在漏斗上过滤。

4、分装已过滤的培养基应进行分装。

如果要制作斜面培养基，须将培养基分装于试管中。

如果要制作平板培养基或液体、半固体培养基，则须将培养基分装于锥形瓶内。

分装时，一手捏松弹簧夹，使培养基流出，另一只手握住几支试管或锥形瓶，依次接取培养基。

分装时，注意不要使培养基粘附管口或瓶口，以免浸湿棉塞引起杂菌污染。

装入试管的培养基量，视试管和锥形瓶的大小及需要而定。

一般制作斜面培养基时，每只15×150毫米的试管，约装3～4毫升（1/4～1/3试管高度），如制作深层培养基，每只20×220毫米的试管约装12～15毫升。

每只锥形瓶装入的培养基，一般以其容积的一半为宜。

5、加棉塞分装完毕后，需要用棉塞堵住管口或瓶口。

堵棉塞的主要目的是过滤空气，避免污染。

棉塞应采用普通新鲜、干燥的棉花制作，不要用脱脂棉，以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用。

斜面培养基实验报告

一、实验目的1. 掌握斜面培养基的制备方法。

2. 了解斜面培养基在微生物培养中的应用。

3. 熟悉斜面培养基的接种方法。

二、实验原理斜面培养基是一种固体培养基，其主要成分是琼脂。

琼脂是一种天然的多糖，具有良好的生物相容性和生物降解性，可以提供微生物生长所需的营养物质。

斜面培养基在微生物培养中主要用于菌种扩大、纯化和保藏。

三、实验材料1. 琼脂：2.0g2. 蒸馏水：100mL3. pH试纸4. 灭菌锅5. 灭菌接种环6. 微生物培养箱7. 试管四、实验步骤1. 配制培养基：称取2.0g琼脂，加入100mL蒸馏水，搅拌均匀后煮沸，使琼脂完全溶解。

用pH试纸测试培养基的pH值，如不符合要求，可用10%HCl或10%NaOH 进行调节。

2. 灭菌：将配制好的培养基分装到试管中，每管约10mL。

将试管口用棉花塞住，放入灭菌锅中，进行高压蒸汽灭菌，压力为0.11MPa，灭菌时间为15分钟。

3. 冷却：将灭菌后的试管取出，待培养基冷却至约60℃时，进行斜面接种。

4. 接种：用灭菌接种环挑取适量菌种，从培养基底部向上划一道直线，然后以蛇形划线接种在琼脂斜面上。

5. 培养：将接种后的试管放入微生物培养箱中，培养温度为37℃，培养时间为24小时。

五、实验结果与分析1. 成功制备斜面培养基，培养基呈透明状，表面光滑。

2. 接种后的斜面培养基上出现了明显的菌落，说明菌种已成功接种。

3. 通过观察菌落形态、颜色和生长速度，可以初步判断菌种的特征。

六、实验总结1. 本实验成功制备了斜面培养基，并掌握了斜面培养基的接种方法。

2. 斜面培养基在微生物培养中具有重要作用，可以用于菌种扩大、纯化和保藏。

3. 在进行斜面培养基实验时，应注意以下几点：a. 培养基的配制要准确，避免误差；b. 灭菌过程要严格，确保培养基的无菌性；c. 接种时要避免污染，保证菌种的纯度。

七、实验反思1. 在本实验中，我掌握了斜面培养基的制备方法，提高了自己的实验技能。

斜面的接种实验报告

一、实验目的1. 熟悉斜面培养基的基本特性及其在微生物培养中的应用。

2. 掌握斜面接种法的操作步骤，提高无菌操作技能。

3. 通过实验，学习微生物的纯培养方法。

二、实验原理斜面培养基是一种在微生物学实验中常用的培养基，其特点是培养基的琼脂含量较高，凝固后形成斜面，有利于微生物的生长和观察。

斜面接种法是一种将微生物从一种培养基接种到另一种培养基上的方法，通过无菌操作，确保接种过程的无菌性，从而获得纯培养。

三、实验材料1. 菌种：金黄色葡萄球菌2. 斜面培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂3. 接种工具：接种环、酒精灯、无菌操作台4. 其他：无菌生理盐水、无菌棉塞、无菌培养皿等四、实验步骤1. 无菌操作台的准备在无菌操作台内，将实验材料、接种工具等放置在无菌操作台上，确保实验环境的无菌性。

2. 菌种复苏将保存的菌种接种到牛肉膏蛋白胨琼脂斜面培养基上，在37℃恒温培养箱中培养24小时，待菌落生长后，用无菌生理盐水洗下菌苔，制成菌悬液。

3. 斜面接种将菌悬液用接种环取少量，在酒精灯火焰上灼烧，待接种环冷却后，蘸取菌悬液，在斜面培养基上划线接种。

4. 无菌操作在接种过程中，严格遵循无菌操作原则，确保接种过程的无菌性。

5. 培养与观察将接种后的斜面培养基在37℃恒温培养箱中培养24小时，观察菌落生长情况。

五、实验结果接种后的斜面培养基上，金黄色葡萄球菌菌落生长良好，菌落呈金黄色，形态规则，边缘整齐。

六、实验分析1. 斜面培养基的琼脂含量较高，凝固后形成斜面，有利于微生物的生长和观察。

2. 斜面接种法是一种将微生物从一种培养基接种到另一种培养基上的方法，通过无菌操作，确保接种过程的无菌性，从而获得纯培养。

3. 在实验过程中，严格遵循无菌操作原则，是获得纯培养的关键。

七、实验总结本次实验成功完成了斜面接种操作，掌握了斜面培养基的基本特性及其在微生物培养中的应用，提高了无菌操作技能。

在实验过程中，应严格遵守无菌操作原则，确保实验结果的准确性。

斜面培养基的制作方法

斜面培养基制作方法(仅供参考)1斜面培养基斜面培养基（agarslantculture-medium ）：固体培养基（solid culture medium ）的一种形式；制作时应趁热定量分装于试管内，并凝固成斜面的称为斜面培养基，用于菌种扩大转管及菌种保藏。

其制作流程图如下图1.图12操作要点倒入培养基的体积以试管1/4左右为宜，斜面的长度不超过试管的一半，一般用15 ×150mm 试管，其容量为5ml。

2.1定型棉塞将制作松紧适宜的棉塞塞进试管，然后放进鼓风的干热灭菌箱中于160℃定型2小时。

定型后切记不能立即打开干热灭苗箱，否则棉塞易燃烧。

要让其冷至100℃以下才能打开，接近室温打开更理想。

这样制作的棉塞，便于培养基分装及接种，还有利于减少污染。

棉塞的制作方法见下图2.图2-a 图2-b2.2分装试管将配制好的培养基按常规方法分装试管，在此过程中切勿将培养基沾到度管上部。

若沾到上部，一是影响试管的外观，二是易污染棉塞。

如下图3.图32.3捆扎试管管口堵入棉塞后7或9支试管扎一捆，棉塞部分用牛皮纸包扎。

在包装纸上标明培养基名称，制备组别和姓名、日期等。

如下图4.图42.4灭菌将手提式高压锅内的水换成干净的自来水，水按要求加入，不能过多。

将捆成把的试管立放装进高压锅的内桶中，在试管顶上放适量棉花使之成凸形，再在上面盖上一层牛皮纸，盖上盖进行高压灭菌，在灭苗放冷气的过程中，要尽量慢，以免减压过快，培养基沸腾，打湿棉塞。

冷气放彻底后，待压力达到灭苗要求时，稳压一定时间（培养基种类不同，灭苗时间要求不一样）。

当达到灭菌时间后、最好让压力自然下降至零时再打开高压锅。

打开高压锅时，移去试管上面的牛皮纸和棉花，然后盖上锅盖，并使锅留一条缝隙，让锅内余热烘干棉塞。

2.5摆斜面试管内的凝聚水主要是高温游离水在培养基凝固过程中遇外界温差过大形成的凝结水和摆放斜面时没有足够的热量烘干棉塞上的水分所致，要摆出高质量的斜面试管，必须在培养基凝固过程中避免温差过大，让其缓慢降温，使高温施离水被培养基所吸收，摆出的斜面才不会出现湿棉塞。

实验1(PDA培养基的制备)ppt课件

8
5、熬琼脂、定容在沸腾状态下加入琼脂10g，直到琼脂完全溶化为止，
定容至500ml。
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6、营养液分装（1）用注射器分装（直接分装）（2）分装标准:分装量为试管长度的1/4~1/5。注意培养基不能沾污试管口。
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（3）塞棉塞棉塞松紧适度，1/3在管外，2/3在管内。
（4）扎捆 5~6支试管捆在一起，棉塞上包好防水纸，直立放入高压灭菌锅中。
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③灭菌处理在1.0~1.5 kg/cm2压力下维持20min。
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高压灭菌锅：
（1）手提式（2）立式（3）卧式
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④ 摆斜面
灭菌结束后锅盖开1/5的小缝，用余热烘干报纸和棉塞，然后摆斜面。斜面长是试管总长的1/2。
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7、检查灭菌效果 28℃培养2~3天。
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3
三、培养基的制作
1、营养液制作（1）准备工作
条状
粉状4
5
2、称量、材料预处理按配方准确称量各营养物质。将马铃
6
3、熬煮将切好的马铃薯块加适量水后放入电饭锅中，煮至酥而不烂。
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4、过滤、加可溶药物用3层沙布过滤，取滤汁，放在电饭锅中加入糖10g。
自然ph粉状条状三培养基的制作1营养液制作1准备工作2称量材料预处理按配方准确称量各营养物质
实验一 PDA斜面培养基的制备
1
一、实验目标： 1、掌握PDA斜面培养基的制备。 2、了解培养基的多样性。二、仪器设备与材料电磁炉、锅、高压灭菌锅；葡萄糖、琼脂、马铃薯。
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三、PDA培养基的配方马铃薯 200克；葡萄糖 20克；琼脂 15~20克；自来水 1000毫升；自然PH 。