斜面培养基的制作方法
固体斜面培养基用途
固体斜面培养基用途一、引言固体斜面培养基是微生物学中常用的培养基之一，其主要特点是在培养基表面形成斜面，可以方便地观察和分离微生物。
本文将详细介绍固体斜面培养基的制备方法、用途以及注意事项。
二、制备方法1. 准备所需材料：琼脂、蒸馏水、试管或烧杯、移液管或棉签。
2. 将琼脂加入烧杯中，并加入适量的蒸馏水，搅拌均匀。
3. 将烧杯放入水浴中，加热至琼脂完全溶解。
4. 取出烧杯并降温至50℃左右。
5. 取出试管或烧杯，倾斜45度角放置于支架上。
6. 使用移液管或棉签取出所需微生物菌株，在试管或烧杯表面涂抹均匀。
7. 放置于恒温箱中培养，待菌落生长后进行观察和分离。
三、用途1. 分离纯种菌株：固体斜面培养基可以有效地分离不同种类的微生物，避免混杂现象的发生，从而获得纯种菌株。
2. 观察菌落特征：固体斜面培养基可以在菌落生长后方便地观察其形态、颜色、大小等特征，有助于鉴定微生物种类。
3. 储存和保存：固体斜面培养基可以用于微生物的长期储存和保存，方便后续实验使用。
四、注意事项1. 制备过程中要注意卫生和无菌操作，避免外源性污染。
2. 使用前应检查琼脂是否均匀溶解，并消毒试管或烧杯。
3. 在涂抹微生物时要均匀涂抹，并避免压力过大导致琼脂变形或破裂。
4. 培养过程中应保持恒温箱温度稳定，并避免震动或移动试管或烧杯。
五、总结固体斜面培养基是微生物学中常用的培养基之一，其制备方法简单易行，用途广泛。
通过使用固体斜面培养基，可以方便地分离纯种菌株、观察菌落特征以及储存和保存微生物。
在使用过程中，需要注意卫生和无菌操作，保持琼脂均匀溶解，并稳定恒温箱温度。
罗氏瓶斜面制备方法
罗氏瓶斜面制备方法
罗氏瓶斜面的制备方法包括以下步骤：
1. 基础培养基制备：称取除全蛋液以外的成分，加热煮沸溶解于600mL纯化水中。
加热过程需不停搅拌以防止马铃薯粉凝成块或糊底。
然后进行121℃灭菌15min，冷却至55℃备用。
2. 全蛋液制备：将新鲜鸡蛋洗刷外壳后，浸于5%碳酸钠溶液中约30min，用清水冲洗后，浸泡于75%乙醇溶液中数分钟。
在无菌环境中用灭菌的镊
子或其他器具打破蛋壳，将蛋液倒入含玻璃珠的无菌锥形瓶中（可预先将玻璃珠放入锥形瓶中，121℃高压蒸汽灭菌15-30min），充分摇晃使蛋黄、
蛋白摇散混合均匀。
新鲜鸡蛋内的蛋液通常是无菌的，无须进行灭菌处理，操作过程应注意避免污染。
若蛋液中可能残存蛋壳碎渣，可将打散后的全蛋液用无菌纱布进行过滤。
3. 将1000mL全蛋液与600mL基础溶液混合充分摇匀，无菌分装于灭菌的试管中，每管5-7mL（视试管的大小调整装量），摆长斜面。
制备完毕后需要放置在恒温培养箱中进行培养。
如果还有其他疑问或需求，请随时询问专业人士。
项目1配制斜面培养基
项目1 配制斜面培养基微生物同其他生物一样，需要不断从外界吸收营养物质，经过一系列的生物化学作用，获得能量并形成新的细胞物质、代谢产物，同时排出副产物及废物。
不同的微生物对营养物质的需求也不一样。
培养基就是人工配制的供微生物或动植物细胞生长、繁殖、代谢和合成所需产物的营养物质和原料，当然，除此之外，培养基也为微生物等提供合适的生长环境条件。
常用的培养基都必须满足或符合一些基本要求，包括含有作为合成细胞成分的原料、满足生化反应的条件、一定的pH等。
因此，培养基的组成和配比是否恰当对微生物等的生长、繁殖、产物的形成、提取分离工艺的选择、产品质量和产量等都有很大的影响。
优良的培养基可以充分发挥微生物细胞的生物合成能力，产生最好的效果。
1 基础知识1.1 微生物细胞的化学组成及胞外代谢产物1.1.1 微生物细胞的化学组成微生物营养物质的确定，主要依据细胞的化学组成及所代谢产物的化学组成。
因此，分析微生物细胞的化学组成是了解微生物营养的基础。
表1-1列出了几种微生物细胞的化学组成。
由表可知，微生物细胞含有80％左右的水分和20％左右的干物质，它主要是由碳、氢、氧、氮等元素组成，约占全部干物质的90％～97％，此外，还含有各种无机矿物质。
而在微生物细胞的干物质中，碳约占45％～55％；氮在细菌和酵母中含量较高，约占7％～13％，在霉菌中含量较低，约占5％。
一般来说，碳和氮在微生物细胞化学组成中的比例大约为5：1。
而无机矿物质约占全部干重的3％～10％，其中以磷的含量最高，大多数微生物细胞中磷的含量可达全部灰分的50％，其次是钾、镁、钙、硫、钠等，铁、锌、锰、硼、钼、硅等的含量极微。
1.1.2 微生物胞外代谢产物微生物在生长过程中，除利用外源营养物质合成新的细胞外，还会产生一些有机化合物分泌到微生物的体外，这些胞外代谢产物的种类繁多，且因微生物的种类而异。
因此，了解这些代谢产物的化学组成，极有助于微生物培养时的营养物质的选择和代谢产物的积累。
斜面培养基的名词解释
斜面培养基的名词解释斜面培养基是一种常用于细菌培养和细菌菌落计数的实验工具。
它是在实验室中广泛使用的一种培养细菌的方法，用于观察菌落形态、生长情况和菌群变化等。
一、斜面培养基的构成和制备斜面培养基由培养基和琼脂组成。
培养基是供细菌生长和繁殖所需的营养物质，通常包括碳源、氮源、无机盐以及其他必要的营养成分。
琼脂则是一种固化剂，用于将培养基变成半固态，以方便菌落的生长和观察。
制备斜面培养基的过程相对简单，首先将适量的培养基加入适量的纯净水中，在搅拌的同时加热溶解。
然后加入适量的琼脂，继续搅拌溶解，最后将溶液倒入具有倾斜表面的试管或培养皿中。
待溶液凝固后，使用无菌技术将所需菌株均匀刷在斜面上。
二、斜面培养基的优势和应用1. 均匀性：倾斜的表面可以使菌株在培养基上均匀生长，以保证观察和研究的准确性。
通过斜面培养基，可以更容易地观察和计数菌落数量。
2. 空间节省：相比于平板培养基，斜面培养基在同样的培养皿中可以容纳更多的细菌。
这种节省空间的特性使其在实验室中非常受欢迎。
3. 快速生长：斜面培养基提供了细菌生长所需的适宜环境，并且借助于通气孔或开放的一侧，菌落可以更快地生长和繁殖，节省实验时间。
斜面培养基广泛应用于微生物实验中。
它可以用于细菌数量的计数，以评估食品和饮水中的微生物污染程度。
此外，在临床实验中，斜面培养基也被用于分离细菌，进行微生物鉴定和敏感性测试。
三、斜面培养基的维护和注意事项1. 温度控制：斜面培养基在制备后应迅速放置在合适的温度下，以避免培养基的变质和污染。
大多数细菌生长的适宜温度为37°C，但也有一些特殊细菌需要较低或较高的温度来生长。
2. 无菌操作：斜面培养基的制备和使用都需要严格的无菌操作，以防止外源性菌落的污染。
3. 存储条件：制备好的斜面培养基应放置于冰箱中保存，避免阳光直射，以延长其有效期。
斜面培养基作为一种常用实验工具，为科学家们提供了便利和准确的观察和研究细菌的方法。
实训四液体、半固体、平板、斜面等培养基的制备
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液体培养基
优点是能够提供充足的营养 物质和氧气，适用于大规模 生产；缺点是需要搅拌或摇 动以保持悬浮状态。
半固体培养基
优点是能够观察微生物的运 动性，适用于研究微生物的 运动规律；缺点是操作较为 繁琐。
平板培养基
优点是能够形成单菌落，适 用于分离纯种微生物；缺点 是操作较为繁琐，需要无菌 操作。
斜面培养基
琼脂 葡萄糖
酵母膏
培养基原料
水等 各种维生素和矿物质
灭菌设备
01
高压蒸汽灭菌锅
02
电热恒温培养箱
03
干热灭菌器
04
紫外线灭菌灯
微生物菌种
大肠杆菌 酵母菌
枯草芽孢杆菌 霉菌等
其他辅助材料
玻璃器皿（试管、培养皿、 吸管等）
塑料器皿（培养皿、吸管等）
02
01 03
胶塞或棉塞
滤纸
04
05
标签和记号笔等
04
实训结果与分析
观察微生物在不同类型培养基上的生长情况
液体培养基
微生物在液体培养基中 生长良好，形成均匀的
菌落。
半固体培养基
微生物在半固体培养基 中生长，形成半透明的
菌膜。
平板培养基
斜面培养基
微生物在平板培养基上 生长，形成圆形、凸起
的菌落。
微生物在斜面培养基上 生长，形成连续的菌苔。
分析不同类型培养基对微生物生长的影响
将各种成分按比例混合后加热溶解， 调节pH值，加入琼脂粉并搅拌均匀， 分装于培养皿中，灭菌。凝固后即可 使用。
大肠杆菌的斜面扩大培养实验报告
大肠杆菌的斜面扩大培养实验报告
一、实验简介
本实验旨在通过斜面扩大培养的方法，探究大肠杆菌的生长特性，并对其进行初步鉴定。
二、实验材料与方法
1. 实验材料
（1）大肠杆菌液体培养基
（2）琼脂平板培养基
（3）斜面培养基
2. 实验方法
（1）制备斜面培养基：将琼脂平板培养基煮沸后冷却至50℃左右，倒入试管中，倾斜试管使其形成斜面，待凝固后储存备用。
（2）制备大肠杆菌液体培养基：按照说明书加入适量的培养基粉末和水，混合均匀后灭菌。
（3）接种：将大肠杆菌接种于液体培养基中，摇晃孵育12小时。
（4）制备斜面扩大培养：将液体培养物均匀地涂布于斜面上，垂直放置于恒温箱内孵育24小时。
（5）观察：观察并记录菌落形态、颜色等特征。
三、实验结果与分析
1. 实验结果
经过斜面扩大培养后，大肠杆菌在琼脂平板上形成了圆形、平整的菌
落，直径约为2-3mm，表面光滑、无色透明。
在显微镜下观察，可见到细长的杆状细胞。
2. 实验分析
大肠杆菌是一种常见的肠道细菌，在自然界中广泛存在。
其生长速度较快，在液体培养基中可以迅速繁殖。
而通过斜面扩大培养，则可以促进其单个菌落的生长和分化，使其更容易被观察和鉴定。
通过本次实验，我们成功地制备了斜面扩大培养，并对大肠杆菌进行了初步鉴定。
四、实验总结
通过本次实验，我们掌握了斜面扩大培养的方法，并成功地对大肠杆菌进行了初步鉴定。
我们还发现，在不同培养基条件下，同一种细菌可能会表现出不同的特征。
在进行细菌鉴定时，需要综合考虑多种因素，并采用多种方法进行鉴定，以确保结果的准确性。
PDA培养基的配制及试管斜面制作
PDA培养基的配制及试管斜面制作PDA（Potato Dextrose Agar）是一种常用的培养基，用于微生物的培养和鉴定。
下面将详细介绍PDA培养基的配制方法以及试管斜面的制作步骤。
一、PDA培养基的配制方法：-马铃薯提取物：200g-葡萄糖：20g-琼脂：15g- 蒸馏水：1000ml1.将马铃薯削皮并切成小块，然后放入锅中加入足够的蒸馏水，煮沸30分钟，使马铃薯溶解。
2. 用纱布或过滤纸过滤烧开的马铃薯，收集滤液，将滤液浓缩至1000ml。
3.将浓缩后的马铃薯提取物与葡萄糖混合，搅拌均匀。
4.将琼脂加入马铃薯提取物和葡萄糖混合物中，加入足够的蒸馏水。
5.在烧杯中加热混合物，使琼脂完全溶解。
6.用自动调节器调节pH值为7.0-7.27.将混合物分装至试管或琼脂培养皿中。
8.将试管或琼脂培养皿密封并高压灭菌，高压灭菌时间为121°C，15-20分钟。
二、试管斜面的制作步骤：1.配制好的PDA培养基倒入装有试管的架子中，大约倒满1/3左右。
2.将试管架放入预热至沸腾状态的水浴中。
3.等待试管内的培养基开始沸腾，并保持沸腾状态2-3分钟。
4.将试管架从水浴中取出，让试管内的培养基冷却至接近凝固的状态。
5.倾斜试管架，使试管内的培养基斜倒在试管壁上，形成斜面。
6.等待培养基凝固完全。
7.使用无菌的环针或棉签，在斜面上划线隔离待培养的微生物。
8.将试管密封，高压灭菌。
PDA培养基配制和试管斜面制作之后，可以用于各种微生物的培养和鉴定。
在使用PDA培养基时，要注意严格无菌操作，避免外界的污染。
在制作试管斜面时，也要确保试管和培养基的完全无菌，以保证培养的准确性和可靠性。
斜面培养基的制作方法
斜面培养基的制作方法
斜面培养基是一种常用于细菌培养的培养基。
它的特点是表面呈斜面形状，使得细菌在培养过程中能够自然地向上生长。
这样可以使得细菌在培养过程中更容易被观察和检测。
制作斜面培养基的方法如下：
1.准备所需的原料：培养基粉末、蒸馏水、烧杯、烧杯架、烧瓶、
温度计、制备烧瓶的抗菌膜。
2.将培养基粉末加入蒸馏水中，按照说明书上的比例进行配制。
一
般情况下，每克培养基粉末需要加入50-100毫升的蒸馏水。
3.将配制好的培养基倒入烧杯中，用烧杯架将烧杯放在烧瓶中。
4.用温度计测量培养基的温度，当培养基温度降到40-50°C时，放
入制备好的抗菌膜。
5.将烧瓶盖上，并在烧瓶上方用胶带粘贴一个斜面模板。
6.将烧瓶放置在37°C的恒温槽中，使培养基保持在37°C的温度
下进行培养。
7.在培养过程中，定期观察细菌的生长情况，并记录下来。
葡萄球菌斜面培养基特征
葡萄球菌斜面培养基特征一、前言葡萄球菌斜面培养基是一种常用的细菌培养基，主要用于分离和鉴定葡萄球菌属的细菌。
本文将从葡萄球菌斜面培养基的组成、特点、制备方法、使用方法等多个方面进行详细介绍。
二、葡萄球菌斜面培养基的组成1. 蛋白胨：提供氮源和碳源，促进细菌生长。
2. 酵母提取物：提供氮源和其他必需元素。
3. 葡萄糖：提供碳源，促进细菌生长。
4. 磷酸二氢钾：调节pH值。
5. 氯化钠：调节渗透压。
6. 红色亚甲基蓝：指示剂，显示酸性反应。
三、葡萄球菌斜面培养基的特点1. 选择性强：对大多数非葡萄球菌属的细菌具有抑制作用，有利于分离和鉴定葡萄球菌属的细菌。
2. 显示性好：通过红色亚甲基蓝指示剂，可以直观地看到细菌的酸性反应。
3. 适用范围广：不仅适用于分离和鉴定人体葡萄球菌，还适用于分离和鉴定动物和植物葡萄球菌。
四、葡萄球菌斜面培养基的制备方法1. 精确称取所需试剂，并加入适量的去离子水中。
2. 加热并搅拌至完全溶解。
3. 调节pH值至7.4±0.2。
4. 加入红色亚甲基蓝指示剂并均匀混合。
5. 灭菌后倒入培养皿中，倾斜培养皿使其形成斜面。
五、葡萄球菌斜面培养基的使用方法1. 取出一支待测细菌涂抹在培养皿上。
2. 放置在恒温箱中，在37℃下孵育24-48小时。
3. 观察红色亚甲基蓝指示剂变化情况，如有黄色环，则表示细菌产生了酸性代谢产物，为葡萄球菌属的细菌。
六、注意事项1. 制备过程中应注意卫生和消毒，避免细菌污染。
2. 使用前应检查培养基是否有裂纹或变色现象，如有则不宜使用。
3. 培养皿上的细菌涂抹应均匀，避免产生假阳性结果。
七、结语葡萄球菌斜面培养基是一种常用的细菌培养基，具有选择性强、显示性好、适用范围广等特点。
制备和使用时需要注意卫生和消毒，并遵循正确的方法操作，以获得准确可靠的结果。
斜面培养基的制备
斜面培养基的制备1、配制溶液向容器内加入所需水量的一部分，按照培养基的配方，称取各种原料，依次加入使其溶解，最后补足所需水分。
对蛋白胨、肉膏等物质，需加热溶解，加热过程所蒸发的水分，应在全部原料溶解后加水补足。
2、配制固体培养基时，先将上述已配好的液体培养基煮沸，再将称好的琼脂加入，继续加热至完全融化。
并不断搅拌，以免琼脂糊底烧焦。
2、调节pH值用pH试纸（或pH电位计、氢离子浓度比色计）测试培养基的pH值，如不符合需要，可用10%HCl或10%NaOH进行调节，直到调节到配方要求的pH值为止。
3、过滤用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好的培养基过滤。
用纱布过滤时，最好折叠成六层，用滤纸过滤时，可将滤纸折叠成瓦棱形，铺在漏斗上过滤。
4、分装已过滤的培养基应进行分装。
如果要制作斜面培养基，须将培养基分装于试管中。
如果要制作平板培养基或液体、半固体培养基，则须将培养基分装于锥形瓶内。
分装时，一手捏松弹簧夹，使培养基流出，另一只手握住几支试管或锥形瓶，依次接取培养基。
分装时，注意不要使培养基粘附管口或瓶口，以免浸湿棉塞引起杂菌污染。
装入试管的培养基量，视试管和锥形瓶的大小及需要而定。
一般制作斜面培养基时，每只15×150毫米的试管，约装3～4毫升（1/4～1/3试管高度），如制作深层培养基，每只20×220毫米的试管约装12～15毫升。
每只锥形瓶装入的培养基，一般以其容积的一半为宜。
5、加棉塞分装完毕后，需要用棉塞堵住管口或瓶口。
堵棉塞的主要目的是过滤空气，避免污染。
棉塞应采用普通新鲜、干燥的棉花制作，不要用脱脂棉，以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用。
制作棉塞时，要根据棉塞大小将棉花铺展成适当厚度，揪取手掌心大小一块，铺在左手拇指与食指圈成的圆孔中，用右手食指插入棉花中部，同时左手食指与拇指稍稍紧握，就会形成1个长棒形的棉塞。
棉塞作成后，应迅速塞入管口或瓶口中，棉塞应紧贴内壁不留缝隙，以防空气中微生物沿皱折侵入。
培养基配方及配制方法
培养基配方1 斜面菌种保存培养基1。
1PDA培养基(马铃薯葡萄糖琼脂培养基)称取200g马铃薯，洗净去皮切碎,加水1000ml煮沸0.5h，纱布过滤，滤液补足1000ml,再加15g葡萄糖和15—20g琼脂，充分溶解后趁热纱布过滤，分装试管，每试管约5-10ml（视试管大小而定）,121℃灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面，冷却后贮存备用. 1.2麦芽汁琼脂培养基麦芽汁的制备：干麦芽首先进行粉碎（不能太粗，也不必太细。
太粗影响糖化效率，过细影响过滤速度），按麦芽重量的3~4倍加水，搅拌均匀后，37℃左右浸泡1小时，然后缓缓加温至55～63℃(在升温过程中应不断搅拌使温度均匀），保温4～6小时（用0.02摩尔/升碘液测定为黄色至无色时），糖化结束。
在糖化过程中，应每小时搅拌一次.取过滤后的清液,加1.8%琼脂，分装试管，每试管约5—10ml （视试管大小而定),121℃灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面,冷却后贮存备用.2基菌落总数检测2。
1平板计数琼脂培养基将胰蛋白胨5.0g、酵母浸膏2.5g、葡萄糖1.0g、琼脂15.0g加入蒸馏水1000ml中，煮沸溶解后，调pH,然后在121℃下灭菌15min,取出,稍微冷却后，带热倒入培养皿中。
3志贺氏菌检测3.1 GN增菌液成分:胰蛋白胨：20g，葡萄糖：1g，甘露醇：2g，柠檬酸钠：5g，去氧胆酸钠0。
5g，磷酸二氢钾4g，磷酸氢二钾1。
5g，氯化钠5g,蒸馏水1000ml。
pH7.0制法：将上述物品加入蒸馏水中，加热溶解煮沸,调pH为7.0，分装，在115℃高压灭菌15min。
3。
2 HE琼脂成分：胨：12g，牛肉膏3g,乳糖12g，蔗糖12g，水杨素2g，胆碱20g，氯化钠5g,琼脂18~20g，蒸馏水1000ml0，0。
4%溴麝香草酚蓝溶液16ml，Andrade指示剂20ml.，甲液20ml,乙液20ml。
pH7.5制法:将上述前七种成分加入400ml蒸馏水中作为基础液,将琼脂加入到600ml蒸馏水中加热溶解,加入甲液乙液到基础液中，调pH，再加入指示剂,并与琼脂液合并，待冷却至50～55℃，倾注浇平板.注1：此培养基不能高温灭菌。
实训四 液体、半固体、平板、斜面等培养基的制备
一、目的
1、掌握各类培养基制备方法及注意事项； 2、掌握各类培养基的主要成分及各成分含量。
二、内容
1、液体培养基
1.2组－200ml； 2、半固体培养基 3.4组－200ml； 3、斜面培养基（固体） 5.6组－200ml； 4、固体培养基 1~6组－40作倒板， 故同学需要保持严谨、认真的态度。
三、步骤
1、称量
（注意：3～5g应取5g；称量后瓶塞 盖好，防止粉剂潮解；称量要准确，熟练使 用砝码天平）； 2、溶化 电炉100℃充分完全溶化（注意：溶 化前记号笔画好水线作标记；反复4～5次沸 腾达到完全溶化，看不到大的颗粒物质，呈 澄清透明状态）；
3、调整pH到7.4
培养基若偏酸，加入1d NaOH， 若偏碱，加入1d HCl；pH试纸滴加试样后立即 观察，不可长时间等待； 4、分装 液体、半固体和固体培养基需要先 分装入试管后高压灭菌，量约在试管1/3高度 为准，选好合适的塞子塞好，塞子大小要合 适，忌大忌小。
3、斜面培养基
成分：牛肉膏3～5g，蛋白胨10g，NaCl 5g， 2～3％琼脂粉，蒸馏水1000ml； 4、固体培养基（营养琼脂或普通琼脂） 成分：牛肉膏3～5g，蛋白胨10g，NaCl 5g， 2～3％琼脂粉（20～25g较好），蒸馏水1000ml； 5、血液琼脂（血平板） 成分：普通琼脂100ml，加入无菌脱纤维羊 血8～10％。
5、高压灭菌 15磅20min（15磅压力下温度为 121.3℃）； 6、倒板 固体培养基高压灭菌后倒板，严格 遵守无菌操作技术操作，防止培养基被污染； 7、鉴定 37℃24h，如培养后随即选中平板无 细菌生长则实验成功； 8、保存 4℃冰箱保存。
(完整版)斜面培养基的制作方法
斜面培养基制作方法(仅供参考)1斜面培养基斜面培养基（agarslantculture-medium ）：固体培养基（solid culture medium ）的一种形式；制作时应趁热定量分装于试管内，并凝固成斜面的称为斜面培养基，用于菌种扩大转管及菌种保藏。
其制作流程图如下图1.图12操作要点倒入培养基的体积以试管1/4左右为宜，斜面的长度不超过试管的一半，一般用15 ×150mm 试管，其容量为5ml。
2.1定型棉塞将制作松紧适宜的棉塞塞进试管，然后放进鼓风的干热灭菌箱中于160℃定型2小时。
定型后切记不能立即打开干热灭苗箱，否则棉塞易燃烧。
要让其冷至100℃以下才能打开，接近室温打开更理想。
这样制作的棉塞，便于培养基分装及接种，还有利于减少污染。
棉塞的制作方法见下图2.图2-a图2-b2.2分装试管将配制好的培养基按常规方法分装试管，在此过程中切勿将培养基沾到度管上部。
若沾到上部，一是影响试管的外观，二是易污染棉塞。
如下图3.图32.3捆扎试管管口堵入棉塞后7或9支试管扎一捆，棉塞部分用牛皮纸包扎。
在包装纸上标明培养基名称，制备组别和姓名、日期等。
如下图4.图42.4灭菌将手提式高压锅内的水换成干净的自来水，水按要求加入，不能过多。
将捆成把的试管立放装进高压锅的内桶中，在试管顶上放适量棉花使之成凸形，再在上面盖上一层牛皮纸，盖上盖进行高压灭菌，在灭苗放冷气的过程中，要尽量慢，以免减压过快，培养基沸腾，打湿棉塞。
冷气放彻底后，待压力达到灭苗要求时，稳压一定时间（培养基种类不同，灭苗时间要求不一样）。
当达到灭菌时间后、最好让压力自然下降至零时再打开高压锅。
打开高压锅时，移去试管上面的牛皮纸和棉花，然后盖上锅盖，并使锅留一条缝隙，让锅内余热烘干棉塞。
2.5摆斜面试管内的凝聚水主要是高温游离水在培养基凝固过程中遇外界温差过大形成的凝结水和摆放斜面时没有足够的热量烘干棉塞上的水分所致，要摆出高质量的斜面试管，必须在培养基凝固过程中避免温差过大，让其缓慢降温，使高温施离水被培养基所吸收，摆出的斜面才不会出现湿棉塞。
实验一斜面培养基制作
2．制作方法 （1）制滤液： 马铃薯刮去粗皮，去芽眼，切成碎块，称量后放锅中，加水
1200~1300ml，将其煮沸20min。用双层纱布过滤，取1000ml滤液。
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（2）化琼脂： 将滤液加热至将沸腾时加入琼脂，不断搅拌，注意控制火力不要 使培养基溢出或烧焦。待琼脂完全融化后加入剩余原料，并使其溶解（用热水补 足水量）.
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A.正确; B.不正确
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（5） 包扎： 管口堵入棉塞后7或9支试管扎一捆，棉塞 部分用牛皮纸包扎。在包装纸上标明培养基名称，制备 组别和姓名、日期等。
（6）、灭菌 （7）、摆斜面 （8）、存放冰箱（4-6C） 六、作业 1、简述高压灭菌锅的使用。 2、何谓灭菌？简述热力灭菌的类型和原理。 3.何时加入琼脂？融化时注意什么问题？分装的技术要
（3分装 :通过漏斗装置，趁热将培养基分装于试管 中，装量约占试管高度的1/4（分装三角瓶，其
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装量以不超过其容积的一半为宜）。注意管口或瓶口不要沾染培养基。 （4）制棉塞 棉花以白色长绒脱脂棉为宜。根据试管口大小取棉，将其卷成棉塞，
最好 外包一层纱布。将棉塞塞入试管口。棉塞塞入试管2/3。制做棉塞要求外 表光滑，外包的纱不能折、松紧适宜等。
求有哪些？ 4. 棉塞的作用有哪些和技术要求？菌种培养时管口堵胶 塞或软木塞行吗？为什么？
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斜面培养基的操作方法
斜面培养基的操作方法
斜面培养基是一种常用的微生物培养方法，适用于细菌、真菌等微生物的分离和培养。
以下是斜面培养基的操作方法：
1. 准备培养基：根据所需的培养基配方，称取适量的培养基粉末加入适量的蒸馏水中，充分搅拌溶解，然后加热至沸腾使其变为透明溶液。
2. 滤过消毒：将溶液倒入塑料瓶或试管中，用滤纸或滤棉塞过滤去除杂质。
然后用自动压力锅或高压灭菌锅将培养基加热至121，压力达到15磅/平方英寸（psi），保持20分钟以上消毒。
3. 加入琼脂：在溶液冷却到50-60时，加入适量的琼脂粉末，并充分搅拌溶解。
4. 倒入培养容器：将培养基液倒入蠕动瓶、试管或培养皿中，倒入量不宜过多，约倒满容器的1/3至1/2处。
5. 摊平斜面：将容器倾斜成斜面，使培养基液均匀覆盖斜面，然后静置等待培养基凝固。
6. 灭菌：将培养容器盖好，包裹或包装好，并放入高压灭菌锅中，经121高温高压灭菌20-30分钟。
7. 接种：将需要培养的微生物用无菌火焰消毒好的接种环或接种针接种于培养基斜面的一侧或中央，然后用迅速的画圆或画线方法在斜面上均匀分布微生物。
8. 培养：将培养容器盖好，放入恒温培养箱或恒温培养箱中，在适宜的温度下进行培养，根据不同微生物有不同的培养条件。
以上就是斜面培养基的操作方法。
根据具体需要，培养基的配方和操作方法可能会有所不同，建议根据具体要求调整方法。
斜面培养基的制作方法
斜面培养基的制作方法斜面培养基相对和并列的概念是：平面培养基、高层培养基。
固体培养基倒在培养皿内，凝固成平面的称为平板培养基，用于菌种分离及研究菌类的某些特性；分装在试管内，直立凝固而制成的称为高层培养基，这样接入菌种后虽然发育的面小了一点，但培养基的厚度增大，营养丰富，时间长些也不容易干燥、开裂，常用于保存菌种。
1、配制溶液向容器内加入所需水量的一部分，按照培养基的配方，称取各种原料，依次加入使其溶解，zui后补足所需水分。
对蛋白胨、肉膏等物质，需加热溶解，加热过程所蒸发的水分，应在全部原料溶解后加水补足。
配制固体培养基时，先将上述已配好的液体培养基煮沸，再将称好的琼脂加入，继续加热至完全融化。
并不断搅拌，以免琼脂糊底烧焦。
2、调节pH值用pH试纸（或pH电位计、氢离子浓度比色计）测试培养基的pH值，如不符合需要，可用10%HCl或10%NaOH进行调节，直到调节到配方要求的pH值为止。
3、过滤用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好的培养基过滤。
用纱布过滤时，zui好折叠成六层，用滤纸过滤时，可将滤纸折叠成瓦棱形，铺在漏斗上过滤。
4、分装已过滤的培养基应进行分装。
如果要制作斜面培养基，须将培养基分装于试管中。
如果要制作平板培养基或液体、半固体培养基，则须将培养基分装于锥形瓶内。
分装时，一手捏松弹簧夹，使培养基流出，另一只手握住几支试管或锥形瓶，依次接取培养基。
分装时，注意不要使培养基粘附管口或瓶口，以免浸湿棉塞引起杂菌污染。
装入试管的培养基量，视试管和锥形瓶的大小及需要而定。
一般制作斜面培养基时，每只15×150毫米的试管，约装3～4毫升（1/4～1/3试管高度），如制作深层培养基，每只20×220毫米的试管约装12～15毫升。
每只锥形瓶装入的培养基，一般以其容积的一半为宜。
5、加棉塞分装完毕后，需要用棉塞堵住管口或瓶口。
堵棉塞的主要目的是过滤空气，避免污染。
棉塞应采用普通新鲜、干燥的棉花制作，不要用脱脂棉，以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用。
斜面培养基实验报告
一、实验目的1. 掌握斜面培养基的制备方法。
2. 了解斜面培养基在微生物培养中的应用。
3. 熟悉斜面培养基的接种方法。
二、实验原理斜面培养基是一种固体培养基，其主要成分是琼脂。
琼脂是一种天然的多糖，具有良好的生物相容性和生物降解性，可以提供微生物生长所需的营养物质。
斜面培养基在微生物培养中主要用于菌种扩大、纯化和保藏。
三、实验材料1. 琼脂：2.0g2. 蒸馏水：100mL3. pH试纸4. 灭菌锅5. 灭菌接种环6. 微生物培养箱7. 试管四、实验步骤1. 配制培养基：称取2.0g琼脂，加入100mL蒸馏水，搅拌均匀后煮沸，使琼脂完全溶解。
用pH试纸测试培养基的pH值，如不符合要求，可用10%HCl或10%NaOH 进行调节。
2. 灭菌：将配制好的培养基分装到试管中，每管约10mL。
将试管口用棉花塞住，放入灭菌锅中，进行高压蒸汽灭菌，压力为0.11MPa，灭菌时间为15分钟。
3. 冷却：将灭菌后的试管取出，待培养基冷却至约60℃时，进行斜面接种。
4. 接种：用灭菌接种环挑取适量菌种，从培养基底部向上划一道直线，然后以蛇形划线接种在琼脂斜面上。
5. 培养：将接种后的试管放入微生物培养箱中，培养温度为37℃，培养时间为24小时。
五、实验结果与分析1. 成功制备斜面培养基，培养基呈透明状，表面光滑。
2. 接种后的斜面培养基上出现了明显的菌落，说明菌种已成功接种。
3. 通过观察菌落形态、颜色和生长速度，可以初步判断菌种的特征。
六、实验总结1. 本实验成功制备了斜面培养基，并掌握了斜面培养基的接种方法。
2. 斜面培养基在微生物培养中具有重要作用，可以用于菌种扩大、纯化和保藏。
3. 在进行斜面培养基实验时，应注意以下几点：a. 培养基的配制要准确，避免误差；b. 灭菌过程要严格，确保培养基的无菌性；c. 接种时要避免污染，保证菌种的纯度。
七、实验反思1. 在本实验中，我掌握了斜面培养基的制备方法，提高了自己的实验技能。
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斜面培养基制作方法(仅供参考)
1斜面培养基
斜面培养基（agarslantculture-medium ）：固体培养基（solid culture medium ）的一种形式；制作时应趁热定量分装于试管内，并凝固成斜面的称为斜面培养基，用于菌种扩大转管及菌种保藏。
其制作流程图如下图1.
图1
2操作要点
倒入培养基的体积以试管1/4左右为宜，斜面的长度不超过试管的一半，一般用15 ×150mm 试管，其容量为5ml。
2.1定型棉塞
将制作松紧适宜的棉塞塞进试管，然后放进鼓风的干热灭菌箱中于160℃定型2小时。
定型后切记不能立即打开干热灭苗箱，否则棉塞易燃烧。
要让其冷至100℃以下才能打开，接近室温打开更理想。
这样制作的棉塞，便于培养基分装及接种，还有利于减少污染。
棉塞的制作方法见下图2.
图2-a图2-b
2.2分装试管
将配制好的培养基按常规方法分装试管，在此过程中切勿将培养基沾到度管上部。
若沾到上部，一是影响试管的外观，二是易污染棉塞。
如下图3.
图3
2.3捆扎试管
管口堵入棉塞后7或9支试管扎一捆，棉塞部分用牛皮纸包扎。
在包装纸上标明培养基名称，制备组别和姓名、日期等。
如下图4.
图4
2.4灭菌
将手提式高压锅内的水换成干净的自来水，水按要求加入，不能过多。
将捆成把的试管立放装进高压锅的内桶中，在试管顶上放适量棉花使之成凸形，再在上面盖上一层牛皮纸，盖上盖进行高压灭菌，在灭苗放冷气的过程中，要尽量慢，以免减压过快，培养基沸腾，打湿棉塞。
冷气放彻底后，待压力达到灭苗要求时，稳压一定时间（培养基种类不同，灭苗时间要求不一样）。
当达到灭菌时间后、最好让压力自然下降至零时再打开高压锅。
打开高压锅时，移去试管上面的牛皮纸和棉花，然后盖上锅盖，并使锅留一条缝隙，让锅内余热烘干棉塞。
2.5摆斜面
试管内的凝聚水主要是高温游离水在培养基凝固过程中遇外界温差过大形成的凝结水和摆放斜面时没有足够的热量烘干棉塞上的水分所致，要摆出高质量的斜面试管，必须在培养基凝固过程中避免温差过大，让其缓慢降温，使高温施离水被培养基所吸收，摆出的斜面才不会出现湿棉塞。
具体做法为：首先让培养基在高压锅内把棉塞烘干，待试管冷却至50℃左右时取出摆斜面，然后覆盖保温物，让其自然冷却至室温。
如下图5.
图5
2.6接种
经无菌检验，确认无菌后方可进行接种。
接种方法见下图6.
图6。