母种培养基的制作
灵芝母种培养基配方有几种灵芝母种培养基如何制作
制作方法
将玉米芯、麸皮或米糠、 豆粕、石膏粉混合均匀， 加入适量的水拌匀，装瓶 灭菌。
特点
营养丰富，适合灵芝菌丝 生长，但成本较高。
麦麸培养基
配方
麦麸100%，蔗糖1%，石膏粉 1%，水分适量。
制作方法
将麦麸、蔗糖、石膏粉混合均匀 ，加入适量的水拌匀，装瓶灭菌
。
特点
营养丰富，适合灵芝菌丝生长， 但成本较高。
4. 用电子天平称取所需的培养基量，倒 入培养皿中。
2. 加入适量葡萄糖和琼脂，摇匀。
3. 加入适量水，摇匀至培养基完全溶解 。
灭菌操作
1. 将装有培养基的培 养皿放入高压蒸汽灭 菌锅中进行灭菌。
3. 灭菌完毕后取出培 养皿，放在超净工作 台上晾凉。
2. 设置灭菌温度为 121℃，灭菌时间为 20-30分钟。
如果PH值过高或过低，会影响 菌丝的生长和发育，甚至导致 菌丝死亡。
灭菌操作注意事项
在灭菌过程中，应使用高压蒸汽灭菌 法，以达到彻底灭菌的效果。
灭菌过程中要保持压力稳定，确保每 个角Fra bibliotek都能达到灭菌效果。
灭菌时要注意控制温度和时间，通常 温度要达到121℃以上，灭菌时间要 持续30分钟以上。
灭菌结束后，要缓慢降温，避免培养 基出现爆瓶现象。
灵芝母种培养基配方及制作
2023-11-08
contents
目录
• 灵芝母种培养基配方种类 • 灵芝母种培养基制作流程 • 制作过程中的注意事项 • 制作实例展示
01
灵芝母种培养基配方种类
棉籽壳培养基
配方
棉籽壳90%，麸皮或米糠8% ，蔗糖1%，石膏粉1%，水分
适量。
制作方法
将棉籽壳、麸皮或米糠、石膏粉混 合均匀，加入适量的水拌匀，装瓶 灭菌。
如何制作母种培养基
如何制作母种培养基母种培养基用于制备微生物的母种菌液，是微生物学实验中必不可少的基础实验操作。
下面将介绍如何制作母种培养基。
材料准备：1.蛋白胨：作为碳氮源，提供微生物生长所需的营养物质；2.洋葱提取液：洋葱经过搅拌或榨汁机榨汁后，过滤得到的提取液中含有富含维生素B群等对微生物生长有促进作用的物质；3.水解酵母提取物：提供微生物生长所需的氮源等营养物质；4.葡萄糖：提供微生物生长所需的碳源；5.磷酸二氢钾：作为缓冲溶液的成分，稳定pH值；6.硫酸镁：提供微生物生长所需的镁离子；7.水：用于稀释和溶解固体试剂。
操作步骤：1.称取适量蛋白胨和洋葱提取液。
蛋白胨的质量可根据实验需求适量调整，一般建议取10g。
洋葱提取液的用量一般为蛋白胨的1/100至1/10倍，可根据实验需求酌情调整。
2.将蛋白胨和洋葱提取液分别加入两个不锈钢锅或烧杯中。
3.加入适量的水，搅拌均匀溶解。
4.将其中一个容器中的溶液转移到另一个容器中，反复搅拌至均匀混合。
5.加入适量的磷酸二氢钾和硫酸镁，继续搅拌均匀。
6.加入适量的葡萄糖，再次搅拌均匀。
7.将锅或烧杯中的溶液加热至沸腾，持续煮沸1分钟，以去除可能存在的微生物污染物。
8.关火后，继续搅拌溶液，待其冷却至室温。
9.将制备好的母种培养基倒入已经消毒干净的试管或培养皿中。
试管可用瓶塞或铝箔封口，培养皿可用锡纸包裹封口。
11.将制备好的母种培养基存放在冰箱或低温冷藏室中，以延长其保鲜期。
注意事项：1.操作过程中需要注意无尘环境，以防止微生物污染。
2.蛋白胨和洋葱提取液的质量与用量可以根据具体实验需求进行调整。
3.母种培养基的制备过程中，需要进行高压灭菌以杀灭可能存在的微生物污染。
4.母种培养基制备完成后，需严格密封，避免污染和水分蒸发。
以上就是母种培养基的制备方法。
制备母种培养基是微生物学实验的基础步骤，掌握好制备方法可以为后续的微生物培养和研究提供良好的基础。
如何制作母种培养基？
如何制作母种培养基？
母种培养基如何制作？
(1)马铃薯制备。
将马铃薯洗净，削去皮与芽眼，切成薄片。
加水1000毫升，煮沸后保持20分钟，用4~8层纱布过滤，取滤液补足水量至1000毫升。
(2)培养基制作。
继续用小火加热滤液，并准确称取其余各种药品。
过秤一种，校对一种，全部无误后，加入马铃薯汁中搅匀。
琼脂最后加入。
加入前先用冷水将琼脂条浸泡5~10分钟，捞起撕碎后慢慢加入锅中，边加入边搅动，直至完全溶化。
(3)分装试管。
将培养基趁热倒入漏斗中，分装试管。
每批要用大小一致的试管，装量要相同，约为试管长度的1/5。
分装时，注意不使管口沾上培养基。
分装好的试管立放在试管架上，待琼脂凝固后塞上棉塞。
然后每5~10支试管扎成一捆，棉塞部分用双层报纸包好防潮，竖着排放在手提式高压锅的消毒桶中准备灭菌。
(4)棉塞制作。
取一块完整的棉花，大小厚薄根据试管口直径而定。
做法是：左手握紧棉絮，从边缘往内卷成圆形，右手捏住棉絮光头，将毛头往试管口塞入2/3，外头留1/3，呈馒头形。
棉塞松紧适度，与管壁紧贴无缝隙。
- 1 -。
食用菌母种常用的培养基
食用菌母种常用的培养基
食用菌母种常用的培养基
常用培养基的配制方法
(一)母种常用的培养基
食用菌母种的培养基和分离菌种的培养基，一般都制成斜面试管，因此又常称为斜面培养基。
母种又叫斜面试管菌。
母种培养基常用的基本物质有马铃薯、葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、琼脂和维生素B1。
1，常见的母种培养基主要有以下几种
（1)马铃薯葡萄糖培养基马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂18-20g，水1000ml。
此培养基适合于—般食用菌的母种分离、培养和保藏，广泛地应用于绝大多数的食用菌，它是我们在生产中量常用的培养基，没有葡葡糖时，也可用蔗糖代替。
（2）马铃薯综合培养基马铃薯200g，葡萄糖2g，磷酸二氢钾3g，硫酸镁1.5g，琼脂18-20，维生素B110mg，水1000ml。
此培养基不仅适合于香菇菌种保藏，也适合于一般食用菌的母种分离、培养和保藏，如平菇、双孢菇、金针菇、猴头菌、灵芝、木耳等。
（3）木屑浸出培养基阔叶树木屑500g，米糠或麸皮100g，琼脂20g，葡萄糖20g，硫酸铵1g，水1000ml。
此培养基适于木腐菌类的菌种分离和培养。
（4）豆芽汁培养基黄豆芽200g，葡萄糖20g，琼脂20g，水1000ml。
此培养基主要适用于黑木耳、猴头菌、平菇等代料栽培的母种培养。
（5）棉籽壳煮汁培养基新鲜棉籽壳250g，葡萄糖20g，琼脂20g，水1000ml。
此培养基主要适用于猴头菌、木耳、平菇及代料栽培的母种。
母种培养基实训报告
一、实训目的本次实训旨在通过学习母种培养基的配制及接种技术，掌握母种培养基的制备方法、培养基成分的选择与配比、接种操作步骤等，为后续食用菌的栽培和繁殖打下基础。
二、实训内容1. 母种培养基的配制（1）材料与仪器：马铃薯、葡萄糖、琼脂、水、天平、烧杯、三角瓶、玻璃棒、量筒、试管、棉塞、高压灭菌锅等。
（2）操作步骤：①称量：按照配方比例准确称取马铃薯、葡萄糖、琼脂等原料。
②制滤液：将马铃薯洗净去皮，切成小块，加水煮沸20-30分钟，过滤取滤液。
③化琼脂：将滤液加热至沸腾，加入琼脂，不断搅拌至琼脂完全溶化。
④调整pH值：用10%盐酸或10%氢氧化钠调整培养基的pH值，使其达到适宜范围。
⑤分装：将培养基分装至试管中，装量占试管高度的1/5-1/4。
⑥塞棉塞：在试管口塞入棉塞，用皮筋固定。
2. 接种操作（1）材料与仪器：菌种、接种针、酒精灯、接种箱、无菌操作台等。
（2）操作步骤：①准备：在接种箱内进行无菌操作，确保环境无菌。
②点燃酒精灯：点燃酒精灯，保持火焰稳定。
③接种：用接种针蘸取菌种，在培养基表面划线或打点接种。
④盖塞：接种完成后，用无菌棉塞封口，并用皮筋固定。
三、实训结果与分析1. 母种培养基的制备通过本次实训，我们成功制备了母种培养基。
培养基的pH值、成分配比等均符合食用菌生长的要求，为后续的菌种繁殖提供了良好的条件。
2. 接种操作在无菌操作条件下，我们成功完成了菌种的接种。
接种后的培养基在适宜的温度、湿度条件下，菌丝生长旺盛，表明接种操作符合要求。
四、实训体会1. 母种培养基的制备是食用菌繁殖的关键环节，要求我们严格按照配方比例进行操作，确保培养基的质量。
2. 无菌操作是接种过程中的重要环节，要求我们在接种箱内进行操作，避免杂菌污染。
3. 接种操作要熟练，掌握正确的接种方法，以确保菌种在培养基上生长良好。
4. 通过本次实训，我们提高了对食用菌繁殖技术的认识，为今后从事食用菌生产奠定了基础。
五、总结本次母种培养基实训，使我们掌握了母种培养基的配制、接种技术，提高了我们的实际操作能力。
制做母种培养基的简易方法
制做母种培养基的简易方法
制做母种培养基的简易方法
菇农在制作食用菌母种培养基时，一般要用到琼脂。
但琼脂价格较高，有些地区还不易买到，而且用琼脂来固化培养基，工序也较繁琐。
为此，下面介绍几种简易母种培养基的制作方法。
绿豆粉培养基
将新鲜、干燥、无霉变的绿豆粉放入锅内，加入适量的水煮沸，调成糊状，装入试管，装入量为试管容量的1／4--1／3，然后塞好棉塞，在15磅的压力下灭菌45分钟，取出后趁热摇散备用。
麦粒培养基
将小麦粒用温水浸泡2小时，捞出放入竹筛，每4小时淋浇1次清水。
经约24小时，当麦粒萌发出0．50厘米长的小芽时，放入锅内煮透(煮沸半小时)取出沥干，均匀拌入1％的石膏粉，再装入试管，装入量为试管的1／3--1／2，塞好棉塞，在15磅压力下灭菌45分钟，取出后趁热摇散备用。
大米饭培养基
将大米除杂后淘洗干净，加入1％的糖，按常规煮成米饭。
选用硬度大的饭粒，均匀拌入1％的米糠或干马粪，将米饭搓成粒状，再装入试管中，装入量为试管的1／3--1／2，塞好棉花，在15磅的压力下
灭菌45分钟。
玉米粒培养基
将玉米粒粉碎(或切碎)成绿豆大小，用水泡透，捞出沥干水分，拌入1％的碳酸钙粉晾散后装入试管，装入量为试管的1／3--1／2，塞好棉塞，在15磅压力下灭菌45分钟，取出后趁热摇散备用。
如果没有高压灭菌锅，可用家用高压锅蒸2小时或用普通锅蒸6小时灭菌，效果也很好。
以上几种培养基适合作蘑菇、风尾菇、平菇母种的培养基。
绣球菌栽培：母种制备工艺
绣球菌栽培：母种制备工艺母种是指经规范方法选育后而获得的，具有结实性的菌丝体纯培养物及其继代培养物，以玻璃试管为培养容器和使用单位，通常又称为一级种或者试管种。
关于绣球菌原始母种的来源，在有条件的地方可以从子实体上自行提取，但是由于制作过程要求严谨，难度较高，所以一般的生产单位都是从国家认可的研究单位购买而来的。
买回后直接进行母种的扩繁就可以，首先来看一下母种培养基的制作。
母种培养基的制作制作母种培养基时所采用的配方为：复合糖蛋白30克，蛋白胨1克，大豆粉1克，KH2PO4（磷酸二氢钾）1克，琼脂粉20克，水1000毫升。
上面的材料都准备好以后，就可以制作了。
将准备好的培养基配方依次倒入锅内，琼脂粉先不要放入，边加热边搅拌，等到沸腾的时候再加入琼脂粉，并不断搅拌，直到琼脂粉完全融化，然后再将煮好的培养基倒入塑料杯内，这时需要注意的是，如果体积不足1000毫升还要加水补足。
试管分装整理好以后，要趁热将培养基倒入固定在铁架台上的漏斗内，用量筒量取10毫升的蒸馏水，倒入一支空试管内，做分装试管的对照。
将漏斗软管下端的玻璃管插入试管口约3厘米深处，用右手捏紧橡胶软管的止水夹，使培养基缓缓流入空试管内，直到液面与蒸馏水的液面持平为止，然后松开止水夹，让培养基停止流入，并将试管下移离开软管。
接下来，依次重复，直到将培养基全部分装到试管内，分装试管时需要注意的是，动作要迅速连贯，以防止培养基在漏斗内凝固。
分装完成后，每支试管都要用硅胶塞住。
接下来还要将试管进行扎捆。
试管包扎一般情况下，每7支试管作为一扎，先用橡皮筋将试管下端扎紧，再用牛皮纸将试管口处进行包裹，并用橡皮筋进行困扎。
下面就要进行灭菌的工作了。
培养基灭菌将包扎好的培养基试管垂直放入灭菌框内，再将灭菌框放入灭菌锅内，在120摄氏度的高温下进行灭菌30分钟。
待灭菌锅温度降至60摄氏度左右时，要及时取出试管，并将它们摆放成斜面。
摆放斜面斜面的长度以试管长度的1/2—2/3为好，当试管内培养基完全凝固后才可以将试管收起，制作好的母种培养基应放置在阴凉、通风、干燥处保存，留作备用。
母种培养基的配制流程
母种培养基的配制流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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②称量溶解：精确称取各种原料，加入适量蒸馏水，在电炉上加热搅拌，直至完全溶解，形成透明溶液。
③pH调节：使用pH试纸或酸碱计检测溶液pH值，根据菌种生长需求调整至适宜范围，通常为5.0-7.0之间，通过添加稀盐酸或氢氧化钠溶液进行调节。
④灭菌处理：将配制好的培养基倒入已灭菌的培养瓶中，封口后放入高压灭菌锅内，按菌种要求设定温度（一般121°C）和时间（约15-30分钟），进行高温高压灭菌。
⑤冷却分装：灭菌完成后，待培养基自然冷却至50-60°C，避免烫伤菌种，可在此温度下进行无菌条件下分装至试管或小培养瓶中，准备接种。
⑥无菌检查：分装前后的培养基需进行无菌性检查，可设置对照组观察是否污染。
⑦接种培养：在无菌操作台上，将目标菌种接入培养基中，然后放置于恒温培养箱内，根据菌种特性设定适宜温度和培养时间。
⑧观察记录：定期观察菌丝生长情况，记录生长速度、形态特征等，为后续使用或扩大培养提供依据。
食用菌制种—母种培养基制作(食用菌生产课件)
• 2.原种（二级种） 原种是由母种扩大培养而成的菌种。这一级菌种是 为了加快食用菌繁殖速度，满足大面积栽培时生 产栽培种的需要而设置。 原种使用基质通常与栽培基质相同或相似，原种繁 殖培养过程也是生理驯化过程。
• 在培养时应当认真检查菌丝的纯培养程度和菌 丝的长势，保持纯种培养。原种制作所用容器 要求使用透明度好的玻璃瓶。
接种
母种的扩 大培养
培养与检验
常压 高压
蒸汽灭菌
原种 接种
培养与检验
菌种生产工艺流程
确定生产出 发菌株
摇瓶培养基 灭菌
菌株保藏
液体菌种3基
装发酵罐3基
栽培种
灭菌 发酵罐培养
灭菌 液体菌种
（四）培养基的制作技术 1.母种培养基的制作技术 • 母种培养基常用马铃薯葡萄糖琼脂培养基，配方
为马铃薯（去皮）200～250g，葡萄糖20～ 25g，琼脂18～20g，水1000ml。马铃薯要求 新鲜、无霉烂，去皮、去芽点。
1）配制步骤
试管培养基 配制步骤
（1）按配方要求称取各种营养物质。 （2）将去皮的马铃薯切块加水，用文火煮沸30分钟
，过滤取滤液。 （3）加入葡萄糖，并补足水量。 （4）搅拌均匀，自然pH值或调节至适宜的酸碱度
。
（5）加入琼脂，用文火加热使之熔化，并趁热分装 试管或三角瓶中，分装量为试管长度的1/5～ 1/4（保藏用多些，生产用少些）。
3.栽培种（三级种） 这是指直接用于生产栽培的菌种，多由原种扩
大培养而成，常以菌瓶或菌袋作为容器。
（三）菌种生产的流程Байду номын сангаас食用菌的固体菌种生产与液体菌种生产的设
备选型和场所要求是大不相同的。固体菌种生产 也因各级菌种生产所使用基质不同而操作过程的 条件和步骤也有所差异，但作为一种生产工艺流 程来说是大致相同的。
母种培养基的配方及制作流程
母种培养基的配方及制作流程以母种培养基的配方及制作流程为题，本文将介绍母种培养基的配方以及制作流程。
一、母种培养基的配方母种培养基是一种特殊的培养基，用于培养细菌、酵母等微生物的初始种群。
它为后续的实验提供了足够的菌液，因此其配方十分重要。
一般而言，母种培养基的配方包括以下几个关键成分：1. 碳源和能量源：常用的碳源包括葡萄糖、蔗糖、麦芽糖等，能量源包括氨基酸、脂肪酸等。
2. 氮源：常用的氮源包括氨基酸、蛋白胨、酵母浸出物等。
3. 矿物质和微量元素：包括钠、钾、钙、镁等矿物质，以及铁、锌、锰等微量元素。
4. 缓冲剂：如磷酸盐缓冲剂，用于维持培养基的酸碱平衡。
5. 基质：如琼脂、琼脂糖等，用于固化培养基。
具体的配方可以根据不同微生物的要求进行调整，以满足其生长和繁殖的需要。
二、母种培养基的制作流程1. 准备培养基所需的原料和器材：碳源、氮源、矿物质和微量元素等原料，以及烧杯、培养皿、试管等器材。
2. 称取和混合原料：按照配方比例，将所需的碳源、氮源、矿物质和微量元素等原料称取出来，并混合均匀。
3. 加入适量的水：将混合好的原料加入适量的蒸馏水中，搅拌均匀，直至原料完全溶解。
4. 调节pH值：使用酸碱试纸或pH计，调节培养基的pH值至适宜范围内，一般为pH 7.0左右。
5. 灭菌处理：将调好pH值的培养基装入烧瓶或试管中，用高压灭菌器或高压蒸汽灭菌锅进行灭菌处理，一般为121℃下压力为15磅的条件下灭菌20-30分钟。
6. 固化培养基：待灭菌的培养基稍微降温后，可以加入适量的基质如琼脂、琼脂糖等，搅拌均匀后倒入培养皿中，静置冷却，待基质凝固后即可使用。
7. 储存：将制备好的母种培养基储存在低温、避光和干燥的条件下，以延长其保存期限。
三、总结母种培养基的配方和制作流程对于后续的实验工作至关重要。
通过合理的配方和严格的制作流程，可以确保培养基的质量和稳定性，为后续的实验提供可靠的菌液来源。
因此，在实验过程中，我们应该严格按照配方和流程要求进行操作，以确保实验数据的准确性和可靠性。
母种培养基的制备流程
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食用菌菌种的制作与培养
食用菌菌种的制作与培养----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------一、母种制作（一）母种培养基制作1.母种培养基的种类母种是菌种生产的关键，要求纯度高，不能混生杂菌，同时母种的菌丝体较为纤细，分解培养料的能力较弱。
因此，母种菌丝体需要培养在营养丰富，易被吸收，表面光滑易于鉴别有无杂菌感染的琼脂培养基上。
适合母种菌丝生长的琼脂培养基种类很多，常用的有下列几种：（1）马铃薯—葡萄糖—琼脂培养基马铃薯（去皮）200克琼脂20克葡萄糖（或蔗糖）20克水1000毫升（2）麦芽汁—葡萄糖—琼脂培养基干麦芽250克琼脂15～20克葡萄糖（或蔗糖）10克水1000毫升（3）胡萝卜—葡萄糖—琼脂培养基胡萝卜100克琼脂20克葡萄糖（或蔗糖）20克水1000毫升（4）蘑菇汁—葡萄糖一琼脂培养基（适用于蘑菇）鲜蘑菇250克琼脂20克葡萄糖（或蔗糖）20克水1000毫升（5）蛋白胨—葡萄糖—琼脂培养基蛋白胨2克葡萄糖20克磷酸氢二钾2克维生素B1（硫胺素）0.5毫克磷酸二氢钾0.5克琼脂18克硫酸镁0.5克水l000毫升2.母种培养基的制法以最常用的马铃薯—葡萄糖—琼脂培养基的制法为例介绍如下：先将马铃薯去皮，洗涤，切成小块加水1000毫升，煮沸15～20分钟，取双层纱布过滤，取其滤液，加入琼脂和葡萄糖（或蔗糖），用文火加热使其溶化，最后补足水分，使其容量仍为1000毫升。
趁热分装于试管中，装量约为试管长度的1/5左右，装管时要注意不使培养基沾污试管壁和试管口。
试管口塞上大小合适的棉花塞，塞入试管口内的长度为棉塞总长的3/5。
塞好棉塞后，每10支作一捆，用牛皮纸包扎好后，置铁丝网笼中，然后进行高压灭菌。
如作为孢子分离用，则将培养基分装于三角瓶或培养皿中，然后高压灭菌。
食用菌实验-培养基制作
食用菌实验-培养基制作第一篇：食用菌实验-培养基制作实验二母种培养基制作一、实验目的掌握斜面试管培养基的配制、消毒与灭菌等制作过程，为菌种转管、组织分离制作母种打下基础。
二、常用培养基配方1．马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)去皮马铃薯200克，葡萄糖20克，琼脂20克，水1000毫升，pH自然。
2.PDA综合培养基去皮马铃薯200克，葡萄糖20克，琼脂20克，磷酸二氢钾3.0克，硫酸镁1.5克，维生素B10.05克，水1000毫升，pH自然。
三、实验材料和用具天平、电炉，18×180毫米试管，止水夹。
纱布，棉塞，牛皮纸，皮筋，手套、菜板、刀、恒温箱，三角漏斗、支架（每组一套）。
手提式高压灭菌锅。
马铃薯、葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、琼脂等。
四、实验步骤与方法 1．PDA培养基的配制 2．装管、捆把 3．灭菌锅内加适量水→ 灭菌物品放内锅→加热→ 压力表0.05Pa 时放气→压力表1.15Pa(121-126℃)时计时30分钟。
4.摆斜面。
灭菌后将试管取出斜放在一根1厘米左右厚的木板条上，使试管内斜面的长度为试管长度的3／5。
放置凝固后备用。
五、作业思考题1．制作PDA培养基过程中，为什么要用牛皮纸将整捆的棉塞部分封盖灭菌? 2．灭菌时，加热水沸后，在锅内压力升至0.5Pa 时，为什么要打开放气阀? 3．写出试管培养基制作的工艺流程。
4．消毒与灭菌是同一概念吗?为什么?实验三原种培养基制作原种即二级种，就是将试管中的母种，接入菌种瓶内，等菌丝长满后形成的菌种。
一、实验目的通过实验初步掌握原种培养基的配料、装瓶(袋)、灭菌、消毒、接种、培养等生产工艺流程。
并了解原种培养基的不同配方及不同的制作方法。
二、实验材料和用具天平，立式或卧式高压灭菌锅，菌种瓶或菌种袋(菌种瓶口径3厘米，容积750毫升)，塑料套环，塑料绳，擦布，锥形捣木。
称，大盆麦粒，麦麸，棉籽壳，不锈钢锅，石膏，碳酸钙，白糖，牛皮纸，皮筋，三、培养基配方1．木屑米糠培养基(适用于香菇、木耳、猴头菇、杨树菇等木腐生类食用菌)：木屑(锯木屑)78千克，米糠或麦麸20千克，石膏1千克，蔗糖(俗称白糖)1千克。
母种培养基的配制
母种培养基的配制
母种培养基的配制
1.器具：试管刀天平铝锅棉塞纱布漏斗烧杯量筒
2.常用的母种培养基配方
①马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）：马铃薯（去皮）200g，葡萄糖20g。
琼脂20g，水1000ml，{如果需要配制250ml的培养基，那么马铃薯、葡萄糖、琼脂的比例是50:5:5}，也可用蔗糖取代葡萄糖，即为PSA培养基。
还可以添加磷酸二氢钾3g，硫酸镁1.5g，维生素B110㎎，即为马铃薯综合培养基。
广泛适用于各种食用菌母种的分离，培养和保藏。
②马铃薯玉米粉培养基：马铃薯（去皮）200g，蔗糖20g，玉米粉50g，琼脂20g，磷酸二氢钾1g，硫酸镁0.5g，水1000ml。
本配方适合于香菇、黑木耳、猴头菌的培养。
③马铃薯黄豆粉培养基：马铃薯200g，蔗糖20g，琼脂20g，黄豆粉20g，碳酸钙10g，磷酸二氢钾1g，硫酸镁0.5g，水1000ml。
适用于蘑菇、草菇。
④葡萄糖蛋白胨琼脂培养基：葡萄糖20g，蛋白胨20g，琼脂20g，水1000ml。
⑤蛋白胨、酵母、葡萄糖琼脂培养基：蛋白胨2g，酵母膏2g，硫酸镁0.5g，磷酸二氢钾0.5g，磷酸氢二钾1g，葡萄糖20g，维生素B120㎎，琼脂20g，水1000ml。
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母种培养基的配置实验原理
母种培养基的配置实验原理母种培养基的配置是一种用于获得纯种菌种的实验方法，主要用于细菌和真菌等微生物的培养。
其配置的目的是为了提供合适的营养物质和环境条件，使微生物能够生长和繁殖。
母种培养基的配置需要考虑以下几个方面：1. 营养成分：母种培养基需要提供微生物生长所需的碳源、氮源、矿物质等营养物质。
常用的碳源包括葡萄糖、麦芽糊精等，氮源包括氨基酸、胨等。
矿物质可以通过某些盐类的添加来提供。
2. pH值：不同微生物对pH值有一定的要求，一般在6-8之间。
为了维持合适的pH值，可以使用缓冲溶液或添加酸碱调节剂。
3. 温度：不同微生物对温度有不同的适应性，一般在30-37摄氏度之间。
选择合适的温度，可以促进微生物的生长。
4. 溶解度和透明度：母种培养基应具有良好的溶解度和透明度，以便于溶解和观察微生物的生长情况。
配置母种培养基的步骤如下：1. 准备所需的原料和试剂：包括碳源、氮源、矿物质盐等。
2. 称取和称量：按照一定的比例和配方，将需要的原料和试剂称取和称量。
3. 溶解和混合：将称取好的原料和试剂加入适量的蒸馏水中，搅拌溶解，并混合均匀。
4. 过滤和消毒：将溶解好的母种培养基通过滤纸等方式进行过滤，以去除杂质和微生物。
5. 调节pH值：使用缓冲溶液或酸碱调节剂，将培养基的pH值调节到合适的范围。
6. 加热消毒：将调节好pH值的培养基加热至沸腾，保持一定的时间，以杀灭其中的微生物。
7. 静置冷却：将加热的培养基静置冷却，达到适宜温度后，可用于接种微生物。
配置母种培养基的关键点：1. 配方：根据目标微生物的生长特性和环境要求，合理选择营养物质的配比和比例。
2. 消毒：配置好的培养基必须进行适当的消毒处理，以避免其中的其他微生物污染，并杀灭已经存在的微生物。
3. pH调节：pH值的合适范围有助于微生物的生长和繁殖，需要注意及时调节。
4. 温度：培养基的温度应适应目标微生物的生长要求，可在培养箱中进行温度控制。
母种培养基制作
实验二武陵山野生食用菌母种的制作与培养一.目的1.了解食用菌菌种的来源，菌种的分离方法。
2.掌握PDA培养基的配制、分装、灭菌的方法和食用菌菌种的培养方法。
3.熟悉和掌握无菌操作的原理和操作方法。
二.原理首先是制作菌种，即通过孢子或组织分离出菌丝体，菌丝体扩大繁殖成为生产菌种；其次是将菌种接种于基质中，生产出食用菌的子实体。
食用菌菌种是食用菌菌种生产和科研工作的基本材料。
食用菌生产的菌种来源于野生食用菌资源，我国丰富的食用菌资源为我国食用菌产业的发展奠定了坚实的基础。
食用菌菌种的最初来源是来自于野生食用菌资源，采用孢子或组织分离法分离得到食用菌菌种，然后把该菌种进行人工驯化、菌种选育，得到具有生产价值的食用菌菌种。
母种是食用菌生产的经菌丝体，菌丝体扩大繁殖成为生产菌种；而该过程必须在无菌环境中以无菌操作进行，以防杂菌污染。
一般在接种箱，无菌室或超净工作台上进行接种。
接种前要对环境进行消毒，一般是用37%~40%甲醛溶液于接种前按5ml/m3 的量熏蒸半小时。
也可用紫外灯照射半小时，以杀死空气中的微生物。
适合食用菌生长繁殖的混合培养料称培养基，由于不同的食用菌生长繁殖需要相应的营养条件及适宜的酸碱度。
因此，在配制培养基时，还要根据所使用的配方，按次序配制培养基，并调节pH等。
在液体培养基中加入琼脂等凝固剂后，就可制成试管斜面或在培养皿内倒成平板，成为用途广泛的食用菌母种培养基。
三.实验材料1.野生食用菌标本。
2.量筒、试管、玻棒、铝锅、电炉、天平、高压灭菌锅、超净工作台、接种钩、酒精灯、火柴、蒸发皿、甲醛、高锰酸钾、70%酒精、无菌平皿3.培养基配方（1）PDA培养基马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂18~25g 和水1000ml（2）完全培养基蛋白胨2.0g、酵母膏2.0g、葡萄糖20g 、MgSO4H2O 0.5g、K2HPO4 1.0g、KH2PO4 1.0g、琼脂20g、水1000ml 四.方法与步骤（一）培养基的配制1.把马铃薯洗干净，去皮，挖掉芽眼，切成大约1cm3 的小方块，在天平上称取200g。
母种培养基制作实验
实验三食用菌母种培养基制作一、实验目的掌握食用菌母种培养基制作原理和方法。
二、实验原理根据食用菌菌丝生长对碳、氮等营养物质的需求，将原料按照一定比例配制成适合食用菌生长的母种培养基。
采用高压灭菌杀灭培养基中的杂菌和孢子，使培养基保持无菌状态。
利用琼脂的特性，制作成斜面培养基。
三、操作步骤（一）培养基配方马铃薯、蔗糖、琼脂培养基（PSA培养基）：马铃薯（去皮）200克，蔗糖20克，琼脂20克，水1000毫升。
（二）称量按照培养基配方，根据配制培养基的数量，计算所需各种营养物质的数量，准确称取各种物质。
（三）土豆汁液制取选取无芽土豆，如已发芽剜去芽眼，削皮，切薄片。
称取切成薄片的去皮马铃薯200g放在加有1000毫升水的搪瓷缸内，煮沸20分钟至熟而不烂的程度，用四层纱布滤去马铃薯，注意勿用手挤。
（四）加琼脂和蔗糖将滤液放入缸内，加入适量水使其达到1000毫升，将琼脂放入加热，用玻璃棒不断搅动使其完全融化，然后加入蔗糖。
补足水分至1000毫升。
（五）分装使用15×150毫米的试管。
每组（8人）装50支试管。
将制好的培养基分装入试管内，装液量为试管的1/5（约3厘米）。
注意不要使培养基沾在管口上以免浸湿棉塞，引起污染。
多余的培养基装入三角瓶中，装量以不超过其容积的1/3为宜。
（六）塞胶塞试管装好后用胶塞塞住试管口。
（七）灭菌试管塞好后，装入布袋中，交到203。
在0.103兆帕（121o C）灭菌30分钟。
（八）摆斜面地下放1厘米厚的木板，将灭过菌的试管摆放其上，冷却后即成斜面培养基。
（九）灭菌效果检验将灭过菌的培养基置于37 o C下放置3天以上，如没有杂菌菌落说明培养基灭菌彻底。
确保斜面培养基无菌时再进行接种。
与实验室老师沟通一下，15×150毫米的试管需要装多少毫升培养基，以便实验时计算制作培养基的量。
制作试管数量要比原来多，因为还有一个组织分离实验，需要使用斜面培养基。
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第一单元：母种培养基的制作
母种，即由组织分离（由食用菌实体的组织直接分离菌种的方法）或孢子分离 （将食用菌的孢子接种在培养基上，让其萌发成菌丝而获得菌种的方法）等方 法获得的菌丝体，又称一级菌种，由于菌丝生长在试管的斜面培养基上，因此 又称试管种或斜面种。 生产上的母种实际上是再生母种。母种既可繁殖原种，又适用于菌种保藏。
母种斜面培养基的制作
三、实验材料：马铃薯40g、琼脂4g、葡萄糖或白糖4g、水200mL。
琼脂
母种斜面培养基的制作
四、方法步骤： 1、称取材料：将马铃薯洗干净， 去皮，称取40g，切成薄片；称 取琼脂4g和葡萄糖（或白糖） 4g；量取水200mL。 2、将40g马铃薯薄片放入铝锅，加 入200mL水，加热煮沸30分钟， 趁热用6层纱布过滤。 3、马铃薯的滤液用开水补足到 200mL，倒回铝锅，加入4g琼 脂和4g葡萄糖（或白糖），用小 火继续加热并不断搅拌至全部熔 化为止，最后补水至200mL。
琼脂是由麒麟菜、石花菜或江篱（属红 藻）经加热至溶化后，加以冷却凝固而 成的海藻精华。琼脂含有丰富的膳食纤 维（含量为80.9%），蛋白质含量高， 热量低，具有排毒养颜、泻火、润肠、 降血压、降血糖和防癌作用。
母种斜面培养基的制作
二、实验用具：天平1台、小刀1把、搪瓷量杯2个、铝锅1个、电炉1个、 玻璃分液漏斗1个、试管16支、试管架1个、高压灭菌锅1个（共用）、 棉花塞16粒、漏斗架1个、纱布1块。
母种培养基的制作
德化鹏祥中学
食用菌栽培
食用菌栽培
食用菌在分类上属于真菌。 食用菌靠不断生长着的菌丝体，从它们着生的基质中吸收营养，当积累 了足够的养分，达到生理成熟后形成形形色色的子实体（也称菇体）。 食用菌的可食用部分绝大多数是子实体。
食用菌栽培
食用菌不仅味美，而且营养丰富，富含蛋白质、多种维生素和大量糖类。
母种斜面培养基的制作
4、趁热分装入试管内，每支试管装 至其长度的五分之一（试管口的内 外3cm内粘附的培养基，必须擦拭 干净），塞入棉塞（棉塞总长4cm， 要求松紧适宜，塞入长度为棉塞长 度的2/3）。然后以每7~10支为一捆， 棉塞外再包上牛皮纸，并用绳扎好。 5、将高压锅盖拧开，加入适量的水， 把包扎好的试管直立放入高压锅的 内桶（不能装太紧，防止阻碍蒸气 流通），盖上锅盖（依此、对称旋 紧螺丝），进行灭菌。 6、待高压锅内压力达0.5千克/平方厘 米时，打开放气阀门放气，待压力 表指示为“0”时，关放气阀门。在 压力达1.5千克/平方厘米时，用小火 维持温度126℃（灭菌期间应专人看 守），30分钟后停止加热，当压力 下降到接近“0”时，移入无菌室， 先打开放气阀，再打开高压锅盖。
食用菌栽培
菌种，即食用菌生产中的“种子”。 优良菌种的制备是食用菌栽培中极其重要的环节。
食用菌栽培
食用菌菌种的制备一般需要经过母种、原种和栽培种三个培养步骤。
菌种 又称 培养容器 培养基
母种 一级种、试管种、斜面种 试管 固体（斜面）
原种 二级种、瓶装种 菌种瓶 固体（或液体）
栽培种 三级种、袋装种、生产种 塑料袋、菌种瓶 固体
第一单元：母种培养基的制作
培养基是用人工方法配置的、供食用菌生长繁殖所需营养的基质。 母种培养基，是专门用来培养母种的营养基质，一般用试管作容器，故 又称试管斜面培养基，常用于菌种分离、提纯及转管、保存菌种。
母种 试管斜面培养基
母种斜面培养基的制作
按200mL水的比例称取各种材料，配制16支试管培养基，以备制种用。 一、母种培养基（常用的马铃薯葡萄糖培养基）配方：马铃薯200g、琼 脂18~22g、葡萄糖或白糖20g、水1000mL。
母种斜面培养基的制作
7、培养基冷却到60 ℃左右，从高压锅中取出，趁热摆成斜面，并使斜 面长度约是试管长度的1/2，待培养基凝固，即成试管斜面培养基。
德化鹏祥中学