母种培养基的配制
简述母种培养基的配置流程
简述母种培养基的配置流程英文回答。
1. Sterilization of the medium and containers.Autoclave the agar medium at 121°C for 15 minutes.Autoclave the glass petri dishes or other containers at 121°C for 15 minutes.2. Preparation of the stock solution of antibiotics.Prepare a stock solution of antibiotics in distilled water.The concentration of the stock solution should be 1000 times higher than the final concentration in the medium.For example, if the final concentration of ampicillin is 100 µg/mL, the stock solution should be 100 mg/mL.3. Addition of antibiotics to the medium.Add the appropriate amount of antibiotics to the autoclaved agar medium.The final concentration of antibiotics in the medium should be the same as the desired concentration in the bacterial culture.4. Pouring the medium into the containers.Pour the agar medium into the autoclaved glass petri dishes or other containers.The thickness of the agar layer should be approximately 4-5 mm.5. Solidification of the medium.Allow the agar medium to solidify at room temperature.This will take approximately 1-2 hours.6. Storage of the plates.Store the plates at 4°C until use.The plates can be stored for up to 2 weeks.中文回答。
如何制作母种培养基
如何制作母种培养基母种培养基用于制备微生物的母种菌液,是微生物学实验中必不可少的基础实验操作。
下面将介绍如何制作母种培养基。
材料准备:1.蛋白胨:作为碳氮源,提供微生物生长所需的营养物质;2.洋葱提取液:洋葱经过搅拌或榨汁机榨汁后,过滤得到的提取液中含有富含维生素B群等对微生物生长有促进作用的物质;3.水解酵母提取物:提供微生物生长所需的氮源等营养物质;4.葡萄糖:提供微生物生长所需的碳源;5.磷酸二氢钾:作为缓冲溶液的成分,稳定pH值;6.硫酸镁:提供微生物生长所需的镁离子;7.水:用于稀释和溶解固体试剂。
操作步骤:1.称取适量蛋白胨和洋葱提取液。
蛋白胨的质量可根据实验需求适量调整,一般建议取10g。
洋葱提取液的用量一般为蛋白胨的1/100至1/10倍,可根据实验需求酌情调整。
2.将蛋白胨和洋葱提取液分别加入两个不锈钢锅或烧杯中。
3.加入适量的水,搅拌均匀溶解。
4.将其中一个容器中的溶液转移到另一个容器中,反复搅拌至均匀混合。
5.加入适量的磷酸二氢钾和硫酸镁,继续搅拌均匀。
6.加入适量的葡萄糖,再次搅拌均匀。
7.将锅或烧杯中的溶液加热至沸腾,持续煮沸1分钟,以去除可能存在的微生物污染物。
8.关火后,继续搅拌溶液,待其冷却至室温。
9.将制备好的母种培养基倒入已经消毒干净的试管或培养皿中。
试管可用瓶塞或铝箔封口,培养皿可用锡纸包裹封口。
11.将制备好的母种培养基存放在冰箱或低温冷藏室中,以延长其保鲜期。
注意事项:1.操作过程中需要注意无尘环境,以防止微生物污染。
2.蛋白胨和洋葱提取液的质量与用量可以根据具体实验需求进行调整。
3.母种培养基的制备过程中,需要进行高压灭菌以杀灭可能存在的微生物污染。
4.母种培养基制备完成后,需严格密封,避免污染和水分蒸发。
以上就是母种培养基的制备方法。
制备母种培养基是微生物学实验的基础步骤,掌握好制备方法可以为后续的微生物培养和研究提供良好的基础。
如何制作母种培养基?
如何制作母种培养基?
母种培养基如何制作?
(1)马铃薯制备。
将马铃薯洗净,削去皮与芽眼,切成薄片。
加水1000毫升,煮沸后保持20分钟,用4~8层纱布过滤,取滤液补足水量至1000毫升。
(2)培养基制作。
继续用小火加热滤液,并准确称取其余各种药品。
过秤一种,校对一种,全部无误后,加入马铃薯汁中搅匀。
琼脂最后加入。
加入前先用冷水将琼脂条浸泡5~10分钟,捞起撕碎后慢慢加入锅中,边加入边搅动,直至完全溶化。
(3)分装试管。
将培养基趁热倒入漏斗中,分装试管。
每批要用大小一致的试管,装量要相同,约为试管长度的1/5。
分装时,注意不使管口沾上培养基。
分装好的试管立放在试管架上,待琼脂凝固后塞上棉塞。
然后每5~10支试管扎成一捆,棉塞部分用双层报纸包好防潮,竖着排放在手提式高压锅的消毒桶中准备灭菌。
(4)棉塞制作。
取一块完整的棉花,大小厚薄根据试管口直径而定。
做法是:左手握紧棉絮,从边缘往内卷成圆形,右手捏住棉絮光头,将毛头往试管口塞入2/3,外头留1/3,呈馒头形。
棉塞松紧适度,与管壁紧贴无缝隙。
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食用菌栽培技术
食用菌栽培技术一、菌种制备菌种制备包括母种、原种、栽培种三级菌种。
1、母种培养基的制作。
常用的主要有以下几种:(1)马铃薯、葡萄糖、琼脂培养基(PDA培养基)。
马铃薯(去皮)200克,葡萄糖20克,琼脂18~20克,水1000毫升。
(2)猴头菌培养基。
黄豆芽250克加水1000毫升,煮沸15~20分钟,过滤取汁,补足失水至1000毫升。
加入葡萄糖30克、蛋白胨5克、酵母膏1克、琼脂20克,加热溶化,然后分装。
适用于猴头母种培养。
(3)玉米粉培养基。
玉米粉30克左右,葡萄糖20克,琼脂20克,磷酸二氢钾1克,硫酸镁0.5克、蛋白胨0.5克。
玉米粉煮至70℃左右保持1小时,然后加上其余的成分。
2、原种培养基的制作。
常用配方:(1)棉耔壳培养基。
棉耔壳100斤,麦麸15斤,石膏粉1.5斤,料水比1:1.1~1.2。
该培养基适合于大多数食用菌品种。
(2)木屑培养基。
干木屑100斤,麦麸20斤,蔗糖1斤,石膏粉1.5斤,硫酸镁0.5斤,料水比按1:1.1~1.2。
该培养基适合于银耳、黑木耳、猴头、金针菇、平菇等原种培养。
(3)粪草培养基。
稻草63斤,玉米粉4斤,大豆粉3斤,干牛粪25斤,过磷酸钙3斤,硫酸镁2斤,料水比1:1.1~1.3。
适合于双孢菇原种培养。
其中牛粪也可以鸡粪等等畜粪来代替,只是所加的量根据其所含氮量而定。
(4)谷粒培养基。
选新鲜、无虫、无霉变的小麦、(大麦、谷子、高粱、玉米粒均可),淘洗干净,按1:2.0比例加水,煮沸30分钟,闷4~6个小时,沥去水分,标准是“煮透晾干”,再加入干料1%的石膏粉,0.5%的石灰拌匀、装瓶。
适用于平菇、双孢菇原种培养。
该种培养基发菌快,在时间紧迫的情况下采用此培养基可以大大的节省时间。
3、培养基灭菌。
(1)高压蒸汽灭菌法。
主要用于母种,灭菌的条件是0.11~0.12千帕。
原种灭菌一般是0.12千帕,1.5小时。
(2)常压蒸汽灭菌。
主要用于原种和栽培种。
灭菌的条件一般是灭菌器内达到100℃后保持8~10个小时。
母种培养基实训报告
一、实训目的本次实训旨在通过学习母种培养基的配制及接种技术,掌握母种培养基的制备方法、培养基成分的选择与配比、接种操作步骤等,为后续食用菌的栽培和繁殖打下基础。
二、实训内容1. 母种培养基的配制(1)材料与仪器:马铃薯、葡萄糖、琼脂、水、天平、烧杯、三角瓶、玻璃棒、量筒、试管、棉塞、高压灭菌锅等。
(2)操作步骤:①称量:按照配方比例准确称取马铃薯、葡萄糖、琼脂等原料。
②制滤液:将马铃薯洗净去皮,切成小块,加水煮沸20-30分钟,过滤取滤液。
③化琼脂:将滤液加热至沸腾,加入琼脂,不断搅拌至琼脂完全溶化。
④调整pH值:用10%盐酸或10%氢氧化钠调整培养基的pH值,使其达到适宜范围。
⑤分装:将培养基分装至试管中,装量占试管高度的1/5-1/4。
⑥塞棉塞:在试管口塞入棉塞,用皮筋固定。
2. 接种操作(1)材料与仪器:菌种、接种针、酒精灯、接种箱、无菌操作台等。
(2)操作步骤:①准备:在接种箱内进行无菌操作,确保环境无菌。
②点燃酒精灯:点燃酒精灯,保持火焰稳定。
③接种:用接种针蘸取菌种,在培养基表面划线或打点接种。
④盖塞:接种完成后,用无菌棉塞封口,并用皮筋固定。
三、实训结果与分析1. 母种培养基的制备通过本次实训,我们成功制备了母种培养基。
培养基的pH值、成分配比等均符合食用菌生长的要求,为后续的菌种繁殖提供了良好的条件。
2. 接种操作在无菌操作条件下,我们成功完成了菌种的接种。
接种后的培养基在适宜的温度、湿度条件下,菌丝生长旺盛,表明接种操作符合要求。
四、实训体会1. 母种培养基的制备是食用菌繁殖的关键环节,要求我们严格按照配方比例进行操作,确保培养基的质量。
2. 无菌操作是接种过程中的重要环节,要求我们在接种箱内进行操作,避免杂菌污染。
3. 接种操作要熟练,掌握正确的接种方法,以确保菌种在培养基上生长良好。
4. 通过本次实训,我们提高了对食用菌繁殖技术的认识,为今后从事食用菌生产奠定了基础。
五、总结本次母种培养基实训,使我们掌握了母种培养基的配制、接种技术,提高了我们的实际操作能力。
制做母种培养基的简易方法
制做母种培养基的简易方法
制做母种培养基的简易方法
菇农在制作食用菌母种培养基时,一般要用到琼脂。
但琼脂价格较高,有些地区还不易买到,而且用琼脂来固化培养基,工序也较繁琐。
为此,下面介绍几种简易母种培养基的制作方法。
绿豆粉培养基
将新鲜、干燥、无霉变的绿豆粉放入锅内,加入适量的水煮沸,调成糊状,装入试管,装入量为试管容量的1/4--1/3,然后塞好棉塞,在15磅的压力下灭菌45分钟,取出后趁热摇散备用。
麦粒培养基
将小麦粒用温水浸泡2小时,捞出放入竹筛,每4小时淋浇1次清水。
经约24小时,当麦粒萌发出0.50厘米长的小芽时,放入锅内煮透(煮沸半小时)取出沥干,均匀拌入1%的石膏粉,再装入试管,装入量为试管的1/3--1/2,塞好棉塞,在15磅压力下灭菌45分钟,取出后趁热摇散备用。
大米饭培养基
将大米除杂后淘洗干净,加入1%的糖,按常规煮成米饭。
选用硬度大的饭粒,均匀拌入1%的米糠或干马粪,将米饭搓成粒状,再装入试管中,装入量为试管的1/3--1/2,塞好棉花,在15磅的压力下
灭菌45分钟。
玉米粒培养基
将玉米粒粉碎(或切碎)成绿豆大小,用水泡透,捞出沥干水分,拌入1%的碳酸钙粉晾散后装入试管,装入量为试管的1/3--1/2,塞好棉塞,在15磅压力下灭菌45分钟,取出后趁热摇散备用。
如果没有高压灭菌锅,可用家用高压锅蒸2小时或用普通锅蒸6小时灭菌,效果也很好。
以上几种培养基适合作蘑菇、风尾菇、平菇母种的培养基。
绣球菌栽培:母种制备工艺
绣球菌栽培:母种制备工艺母种是指经规范方法选育后而获得的,具有结实性的菌丝体纯培养物及其继代培养物,以玻璃试管为培养容器和使用单位,通常又称为一级种或者试管种。
关于绣球菌原始母种的来源,在有条件的地方可以从子实体上自行提取,但是由于制作过程要求严谨,难度较高,所以一般的生产单位都是从国家认可的研究单位购买而来的。
买回后直接进行母种的扩繁就可以,首先来看一下母种培养基的制作。
母种培养基的制作制作母种培养基时所采用的配方为:复合糖蛋白30克,蛋白胨1克,大豆粉1克,KH2PO4(磷酸二氢钾)1克,琼脂粉20克,水1000毫升。
上面的材料都准备好以后,就可以制作了。
将准备好的培养基配方依次倒入锅内,琼脂粉先不要放入,边加热边搅拌,等到沸腾的时候再加入琼脂粉,并不断搅拌,直到琼脂粉完全融化,然后再将煮好的培养基倒入塑料杯内,这时需要注意的是,如果体积不足1000毫升还要加水补足。
试管分装整理好以后,要趁热将培养基倒入固定在铁架台上的漏斗内,用量筒量取10毫升的蒸馏水,倒入一支空试管内,做分装试管的对照。
将漏斗软管下端的玻璃管插入试管口约3厘米深处,用右手捏紧橡胶软管的止水夹,使培养基缓缓流入空试管内,直到液面与蒸馏水的液面持平为止,然后松开止水夹,让培养基停止流入,并将试管下移离开软管。
接下来,依次重复,直到将培养基全部分装到试管内,分装试管时需要注意的是,动作要迅速连贯,以防止培养基在漏斗内凝固。
分装完成后,每支试管都要用硅胶塞住。
接下来还要将试管进行扎捆。
试管包扎一般情况下,每7支试管作为一扎,先用橡皮筋将试管下端扎紧,再用牛皮纸将试管口处进行包裹,并用橡皮筋进行困扎。
下面就要进行灭菌的工作了。
培养基灭菌将包扎好的培养基试管垂直放入灭菌框内,再将灭菌框放入灭菌锅内,在120摄氏度的高温下进行灭菌30分钟。
待灭菌锅温度降至60摄氏度左右时,要及时取出试管,并将它们摆放成斜面。
摆放斜面斜面的长度以试管长度的1/2—2/3为好,当试管内培养基完全凝固后才可以将试管收起,制作好的母种培养基应放置在阴凉、通风、干燥处保存,留作备用。
简述母种培养基的配置流程
简述母种培养基的配置流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
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母种培养基的配制流程
母种培养基的配制流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
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②称量溶解:精确称取各种原料,加入适量蒸馏水,在电炉上加热搅拌,直至完全溶解,形成透明溶液。
③pH调节:使用pH试纸或酸碱计检测溶液pH值,根据菌种生长需求调整至适宜范围,通常为5.0-7.0之间,通过添加稀盐酸或氢氧化钠溶液进行调节。
④灭菌处理:将配制好的培养基倒入已灭菌的培养瓶中,封口后放入高压灭菌锅内,按菌种要求设定温度(一般121°C)和时间(约15-30分钟),进行高温高压灭菌。
⑤冷却分装:灭菌完成后,待培养基自然冷却至50-60°C,避免烫伤菌种,可在此温度下进行无菌条件下分装至试管或小培养瓶中,准备接种。
⑥无菌检查:分装前后的培养基需进行无菌性检查,可设置对照组观察是否污染。
⑦接种培养:在无菌操作台上,将目标菌种接入培养基中,然后放置于恒温培养箱内,根据菌种特性设定适宜温度和培养时间。
⑧观察记录:定期观察菌丝生长情况,记录生长速度、形态特征等,为后续使用或扩大培养提供依据。
母种培养基制作实验
实验三食用菌母种培养基制作一、实验目的掌握食用菌母种培养基制作原理和方法。
二、实验原理根据食用菌菌丝生长对碳、氮等营养物质的需求,将原料按照一定比例配制成适合食用菌生长的母种培养基。
采用高压灭菌杀灭培养基中的杂菌和孢子,使培养基保持无菌状态。
利用琼脂的特性,制作成斜面培养基。
三、操作步骤(一)培养基配方马铃薯、蔗糖、琼脂培养基(PSA培养基):马铃薯(去皮)200克,蔗糖20克,琼脂20克,水1000毫升。
(二)称量按照培养基配方,根据配制培养基的数量,计算所需各种营养物质的数量,准确称取各种物质。
(三)土豆汁液制取选取无芽土豆,如已发芽剜去芽眼,削皮,切薄片。
称取切成薄片的去皮马铃薯200g放在加有1000毫升水的搪瓷缸内,煮沸20分钟至熟而不烂的程度,用四层纱布滤去马铃薯,注意勿用手挤。
(四)加琼脂和蔗糖将滤液放入缸内,加入适量水使其达到1000毫升,将琼脂放入加热,用玻璃棒不断搅动使其完全融化,然后加入蔗糖。
补足水分至1000毫升。
(五)分装使用15×150毫米的试管。
每组(8人)装50支试管。
将制好的培养基分装入试管内,装液量为试管的1/5(约3厘米)。
注意不要使培养基沾在管口上以免浸湿棉塞,引起污染。
多余的培养基装入三角瓶中,装量以不超过其容积的1/3为宜。
(六)塞胶塞试管装好后用胶塞塞住试管口。
(七)灭菌试管塞好后,装入布袋中,交到203。
在0.103兆帕(121o C)灭菌30分钟。
(八)摆斜面地下放1厘米厚的木板,将灭过菌的试管摆放其上,冷却后即成斜面培养基。
(九)灭菌效果检验将灭过菌的培养基置于37 o C下放置3天以上,如没有杂菌菌落说明培养基灭菌彻底。
确保斜面培养基无菌时再进行接种。
与实验室老师沟通一下,15×150毫米的试管需要装多少毫升培养基,以便实验时计算制作培养基的量。
制作试管数量要比原来多,因为还有一个组织分离实验,需要使用斜面培养基。
母种培养基的配方及制作流程
母种培养基的配方及制作流程以母种培养基的配方及制作流程为题,本文将介绍母种培养基的配方以及制作流程。
一、母种培养基的配方母种培养基是一种特殊的培养基,用于培养细菌、酵母等微生物的初始种群。
它为后续的实验提供了足够的菌液,因此其配方十分重要。
一般而言,母种培养基的配方包括以下几个关键成分:1. 碳源和能量源:常用的碳源包括葡萄糖、蔗糖、麦芽糖等,能量源包括氨基酸、脂肪酸等。
2. 氮源:常用的氮源包括氨基酸、蛋白胨、酵母浸出物等。
3. 矿物质和微量元素:包括钠、钾、钙、镁等矿物质,以及铁、锌、锰等微量元素。
4. 缓冲剂:如磷酸盐缓冲剂,用于维持培养基的酸碱平衡。
5. 基质:如琼脂、琼脂糖等,用于固化培养基。
具体的配方可以根据不同微生物的要求进行调整,以满足其生长和繁殖的需要。
二、母种培养基的制作流程1. 准备培养基所需的原料和器材:碳源、氮源、矿物质和微量元素等原料,以及烧杯、培养皿、试管等器材。
2. 称取和混合原料:按照配方比例,将所需的碳源、氮源、矿物质和微量元素等原料称取出来,并混合均匀。
3. 加入适量的水:将混合好的原料加入适量的蒸馏水中,搅拌均匀,直至原料完全溶解。
4. 调节pH值:使用酸碱试纸或pH计,调节培养基的pH值至适宜范围内,一般为pH 7.0左右。
5. 灭菌处理:将调好pH值的培养基装入烧瓶或试管中,用高压灭菌器或高压蒸汽灭菌锅进行灭菌处理,一般为121℃下压力为15磅的条件下灭菌20-30分钟。
6. 固化培养基:待灭菌的培养基稍微降温后,可以加入适量的基质如琼脂、琼脂糖等,搅拌均匀后倒入培养皿中,静置冷却,待基质凝固后即可使用。
7. 储存:将制备好的母种培养基储存在低温、避光和干燥的条件下,以延长其保存期限。
三、总结母种培养基的配方和制作流程对于后续的实验工作至关重要。
通过合理的配方和严格的制作流程,可以确保培养基的质量和稳定性,为后续的实验提供可靠的菌液来源。
因此,在实验过程中,我们应该严格按照配方和流程要求进行操作,以确保实验数据的准确性和可靠性。
怎样用大米配制食用菌母种培养基
怎样用大米配制食用菌母种培养基
食用菌母种培养基,通常用PDA琼脂培养基,而配制PDA培养基需要琼脂、硫酸镁、磷酸二氢甲、葡萄糖和马铃薯等原料以及玻璃试管等,其成本高,配制方法繁琐,且具有较高的专业性,不适于普通菌农制作。
笔者经过多年实践,探索出一种用大米配制的食用菌母种培养基,兹作如下介绍。
材料:大米、磷酸二氢钾、硫酸镁、小输液瓶等。
配制方法:营养液配制。
取磷酸二氢钾10克,硫酸镁5克,溶于1000毫升凉开水中;取适量大米盛于小输液瓶中,注意加至瓶高1/3出即可,倒入营养液,使营养液没过大米上方1厘米,塞好棉塞,棉塞外包裹一层牛皮纸,置高压蒸汽灭菌器中灭菌,灭菌结束,待瓶温降至25℃左右即可接种。
使用大米培养基,菌种接种后菌萌发快,生长健壮,具有复壮作用,每瓶大米母种培养基,可以扩种原种40~50瓶,适宜于大量繁育原种之用,也可以用作保存菌种,且制作工序简单,原料易得,成本低廉,极适于普通食用菌种植户。
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羊肚菌母种培养基的制作技术
羊肚菌母种培养基的制作技术羊肚菌母种培养基最好采用黄豆芽、玉米粉、麦麸、蔗糖、苹果汁等多种营养成分配成的综合培养基,不能单单使用PDA培养基,避免营养成分单一化。
从许多单位试验明显表示,常见的PDA培养基的母种菌丝增长速度,比起综合培养基慢2倍,而且菌丝长势细弱,菌丝干重量也相差1.2倍。
准备的材料:豆芽200克(煮汁),葡萄糖20克,琼脂20克,硫酸镁0.3克,磷酸二氢钾1.5克,维生素B8克,水1000毫升培养基制备:1.将黄豆芽200克洗净放水中烧煮,将营养成分都煮出来。
2.在玻璃或金属容器内加1200ml水,煮沸20min,用4层纱布进行过滤并洗涤,挤压固体物后得到滤液1000ml。
3.将葡萄糖或蔗糖、琼脂、硫酸镁、磷酸二氢钾,维生素B等加入溶解,都溶化后,分装到试管中。
4.分装的高度可以是试管总长度的1/7~1/6、1/5~14、1/3,试管口先用棉塞塞上,粘到管口的培养基须擦干净,然后盖紧硅胶塞。
5.灭菌锅为手提式高压灭菌锅的,装锅时要10支扎成一把,竖立排放整齐。
盖锅盖时,要对角拧紧螺丝。
当压力达到0.05MPa时,打开排气阀缓慢排净冷气;当压力达到0.12MPa时,123~125℃保持30min。
灭菌期间须人不离锅,发现异常立即停火检查并消除隐患。
6.冷却:灭菌结束后自然冷却,压力归零即可打开锅盖。
开始摆放试管斜面时,须保证液面顶端距硅胶塞内端大于2cm,防止液体粘到硅胶塞上。
在摆好的试管上覆盖毛巾,防止出现冷凝水。
注意:不要使用刚刚灭菌后摆成的斜面试管培养基,因为培养基表面有大量的冷凝水水珠,接种物如孢子、组织块、菌丝块很容易被淹没,菌丝容易死亡,特别是一旦接种物有细菌污染会导致全试管的污染,造成操作失败。
食用菌母种(一级种)培养基的调制及其组方范例
食用菌母种(一级种)培养基的调制及其组方范例食用菌母种(一级种)培养基的调制及其组方范例----母种培养基实用配方集锦培养基是食用菌生长的“土壤”,是其生命活动的“食粮”。
一个好的培养基必须具备三个条件:第一,含有被培养菌株生长所需的物质(水份;营养;适宜的酸碱度);第二,具有强烈的生长反应;第三,经过严格的灭菌处理,保持无菌状态。
生产,实验中常用的培养基有:琼脂培养基;固体培养基;液体培养基。
这里主要介绍常用的琼脂培养基(母种培养基)及其调制技术。
一、母种培养基材料的基本常识和调制技术1、琼脂的性质和使用方法:琼脂是制备微生物培养基的凝固剂。
它是从海生红藻(主要是石花菜)中提炼的冻胶状物质,98℃时溶化,45℃时又恢复成凝胶状。
琼脂的主要成分是半乳糖及少量葡萄糖醛酸,因此不能成为真菌的碳源营养。
所以在没有添加营养物质的水琼脂培养基上菌丝不能生长!琼脂的主要作用在于使培养基呈凝胶状态,起支持菌丝生长的作用。
每升培养基内琼脂的含量一般为17克~22克,在自然气温较高,酸度较低和某些特殊情况下,琼脂的用量可以增加到25克/升。
超过这一水平培养基容易炸裂并对菌丝生长不利!2、马铃薯淀粉的制取方法:马铃薯淀粉是制备培养基的主要材料。
在生产或者实验中应用马铃薯淀粉有两种方法:一种方法是将新马铃薯(土豆)洗净并挖去芽眼,削除表皮之后称重,取马铃薯2 00克,切成丝,在1000毫升水中煮沸15分钟~30分钟,稍冷却,后用四层纱布过滤,取滤清液并补充水分足1000毫升!这种利用马铃薯淀粉的方法应根据需要在制种时现制现用。
另外一种方法是将去皮去芽眼的马铃薯打成细浆,盛在容器中加水调匀并用四层纱布过滤2~3次,将滤液自然沉淀,沉淀结束后除去上清夜,然后,将得到的淀粉薄摊于玻璃板上干燥。
最终将充分干燥的淀粉密封在容器中,这样便可在今后需要制种时随时取用。
制种时称淀粉20克,加水1000毫升即可。
用这种方法制取的马铃薯淀粉的营养成分几乎不受破坏。
六种香菇母种培养基传统配制配方
六种香菇母种培养基传统配制配方香菇菌种通常分为三级。
用香菇的孢子或子实体组织分离培养出来的第一次纯菌丝体称为母种,也称为一级菌种;将分离培养到的母种用试管扩大菌种,将其接种到木屑培养基上培养出来的菌丝体称为原种,也称为二级菌种;用于栽培的为栽培种,也称为三级菌种,它是通过二级菌种再次扩大到木屑培养基上进行繁殖、扩大面积栽培需要,这样培养出来的称为栽培种,一般来讲,每瓶原种可接种栽培种60~80瓶。
分离培育母种较实用的培养基,有以下几种配方可供参考:配方1:去皮马铃薯250克,葡萄糖或蔗糖25克,琼脂或洋菜20克,清水1000毫升。
制作方法:选择质量好的马铃薯洗净去皮,若已发芽要挖去芽及周围小块后切成薄片,放进铝锅加入1000毫升,煮沸30分钟,用4层纱布过滤,提起汁液,若滤汁不足1000毫升,则要加水补足,然后将浸水后的琼脂加入马铃薯汁液中,继续文火加热至全部融化为止。
加热过程中要用筷子不断搅拌,以防溢出和焦底,最后加入葡萄糖并调节酸碱度为ph值5.6,趁热分装入试管,塞上棉花塞。
配方2:黄豆粉40克,葡萄糖20克,琼脂20克,清水1000毫升。
制作方法:将黄豆粉加冷水调成糊状,再加水至1000毫升,搅拌均匀后,文水煮沸20分钟,用4层纱布过滤取汁,再把琼脂葡萄糖等加入全部融化后,分装入试管,操作方法同前一种。
配方3:玉米粉60克,蔗糖10克,琼脂20克,清水1000毫升。
制作方法:把玉米粉加冷水调成糊状,再加清水500毫升稀释煮沸20分钟,用纱布过滤取出液汁,另将琼脂加500毫升清水煮沸液化,然后将两液混合后分装入试管。
配方4:去皮马铃薯200克,琼脂20克,磷酸二氢钾3克,葡萄糖20克,清水1000毫升。
制作方法:与第1种配方相似,不同的是此法将磷酸二氢钾同葡萄糖一起加入,文水煮溶后,趁热分装入管。
配方5:干麦芽250克,琼脂15克,清水1000毫升。
制作方法:将甘麦芽粉碎成细末加清水倒入锅中,以60~65℃不超过70℃的温度加热1~2小时使之糖化,然后抽取少量用碘液检查是否残留淀粉,如含有淀粉糖脂会变蓝色,这时应继续加热至蓝色完全消失,糖脂的浓度以10~12%较为实用。
一母种培养基配制及棉塞制作
三、实验准备 1.材料:空白斜面培养基(无菌检验 )、母 种等 2.器具:酒精灯、接种环、火柴、尖头镊、 酒精棉球、大镊子、接种箱、超净工作台、 高锰酸钾、37%甲醛溶液、紫外灯、2%来 苏水、标签纸等。 四、实验内容 1、 接种环境的处理 2、母种的转管技术
五、方法步骤 1.接种环境的处理 (1)接种箱的熏蒸: 先用2%来苏清洁接种 箱内外,放入接种所需的物品,用甲醛熏 蒸。每立方米空 间 一般用甲醛10ml,加 半量高锰酸钾(5~7g)使甲醛氧化挥发。 先将高锰酸钾放入接种箱内的容器中,再 注入甲醛,立即产生强烈刺激的甲醛气体。 熏蒸25--30min。
实验一母种培养基配制及棉塞制作
一.实验目的 1、 掌握食用菌固化培养基的配制。 2、学会棉塞 的制作方法。 二、基本原理 食用菌母种分离、移接和斜面保存菌种都必须 要制作相应的培养基,以备食用菌的培养、分离 和保存之用。 培养基是根据各种食用菌在生长繁殖过程中对 营养物质需求制成的,它可供给食用菌的C源、N 源、水分、各种无机盐及生长物质等。 培养基的种类很多,本实验学习斜面培养基 (PDA)制作。
母种转管过程
六、作业 1、何谓无菌操作、消毒?消毒分哪几种类型?
2、同学相互评比接种结果 分析自己接种成败的原因。
实验三、食用菌母种制作分离技术 一、目的要求 1、明确食用菌无菌操作技术要点。 2、掌握食用 菌母种分离技术。 二、基本原理:食用菌母种分离方法较多,但主要 采用组织和孢子分离,所不同的是前者取子实体 某块组织,后者取子实体的孢子经过培养形成的 纯菌丝体(纯种)。 三、实验准备 1.材料:空白斜面培养基(空白培养无菌).食用菌子 实体等 2.器具: 酒精灯、接种环、火柴、尖头镊、酒精棉 球、大镊子、接种箱、超净工作台、高锰酸钾 37%甲醛溶液、紫外灯、2%来苏水、标签纸等。
母种培养基的配制
母种培养基的配制
母种培养基的配制
1.器具:试管刀天平铝锅棉塞纱布漏斗烧杯量筒
2.常用的母种培养基配方
①马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA):马铃薯(去皮)200g,葡萄糖20g。
琼脂20g,水1000ml,{如果需要配制250ml的培养基,那么马铃薯、葡萄糖、琼脂的比例是50:5:5},也可用蔗糖取代葡萄糖,即为PSA培养基。
还可以添加磷酸二氢钾3g,硫酸镁1.5g,维生素B110㎎,即为马铃薯综合培养基。
广泛适用于各种食用菌母种的分离,培养和保藏。
②马铃薯玉米粉培养基:马铃薯(去皮)200g,蔗糖20g,玉米粉50g,琼脂20g,磷酸二氢钾1g,硫酸镁0.5g,水1000ml。
本配方适合于香菇、黑木耳、猴头菌的培养。
③马铃薯黄豆粉培养基:马铃薯200g,蔗糖20g,琼脂20g,黄豆粉20g,碳酸钙10g,磷酸二氢钾1g,硫酸镁0.5g,水1000ml。
适用于蘑菇、草菇。
④葡萄糖蛋白胨琼脂培养基:葡萄糖20g,蛋白胨20g,琼脂20g,水1000ml。
⑤蛋白胨、酵母、葡萄糖琼脂培养基:蛋白胨2g,酵母膏2g,硫酸镁0.5g,磷酸二氢钾0.5g,磷酸氢二钾1g,葡萄糖20g,维生素B120㎎,琼脂20g,水1000ml。
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母种培养基的配置实验原理
母种培养基的配置实验原理母种培养基的配置是一种用于获得纯种菌种的实验方法,主要用于细菌和真菌等微生物的培养。
其配置的目的是为了提供合适的营养物质和环境条件,使微生物能够生长和繁殖。
母种培养基的配置需要考虑以下几个方面:1. 营养成分:母种培养基需要提供微生物生长所需的碳源、氮源、矿物质等营养物质。
常用的碳源包括葡萄糖、麦芽糊精等,氮源包括氨基酸、胨等。
矿物质可以通过某些盐类的添加来提供。
2. pH值:不同微生物对pH值有一定的要求,一般在6-8之间。
为了维持合适的pH值,可以使用缓冲溶液或添加酸碱调节剂。
3. 温度:不同微生物对温度有不同的适应性,一般在30-37摄氏度之间。
选择合适的温度,可以促进微生物的生长。
4. 溶解度和透明度:母种培养基应具有良好的溶解度和透明度,以便于溶解和观察微生物的生长情况。
配置母种培养基的步骤如下:1. 准备所需的原料和试剂:包括碳源、氮源、矿物质盐等。
2. 称取和称量:按照一定的比例和配方,将需要的原料和试剂称取和称量。
3. 溶解和混合:将称取好的原料和试剂加入适量的蒸馏水中,搅拌溶解,并混合均匀。
4. 过滤和消毒:将溶解好的母种培养基通过滤纸等方式进行过滤,以去除杂质和微生物。
5. 调节pH值:使用缓冲溶液或酸碱调节剂,将培养基的pH值调节到合适的范围。
6. 加热消毒:将调节好pH值的培养基加热至沸腾,保持一定的时间,以杀灭其中的微生物。
7. 静置冷却:将加热的培养基静置冷却,达到适宜温度后,可用于接种微生物。
配置母种培养基的关键点:1. 配方:根据目标微生物的生长特性和环境要求,合理选择营养物质的配比和比例。
2. 消毒:配置好的培养基必须进行适当的消毒处理,以避免其中的其他微生物污染,并杀灭已经存在的微生物。
3. pH调节:pH值的合适范围有助于微生物的生长和繁殖,需要注意及时调节。
4. 温度:培养基的温度应适应目标微生物的生长要求,可在培养箱中进行温度控制。
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母种培养基的配制
1.器具
试管刀天平铝锅棉塞纱布漏斗烧杯量筒
2.常用的母种培养基配方
①马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA):马铃薯(去皮)200g,葡萄
糖20g。
琼脂20g,水1000ml,{如果需要配制250ml的培养
基,那么马铃薯、葡萄糖、琼脂的比例是50:5:5},也可用蔗糖
取代葡萄糖,即为PSA培养基。
还可以添加磷酸二氢钾3g,硫
酸镁1.5g,维生素B1 10㎎,即为马铃薯综合培养基。
广泛适
用于各种食用菌母种的分离,培养和保藏。
②马铃薯玉米粉培养基:马铃薯(去皮)200g,蔗糖20g,玉米
粉50g,琼脂20g,磷酸二氢钾1g,硫酸镁0.5g,水1000ml。
本配方适合于香菇、黑木耳、猴头菌的培养。
③马铃薯黄豆粉培养基:马铃薯200g,蔗糖20g,琼脂20g,黄
豆粉20g,碳酸钙10g,磷酸二氢钾1g,硫酸镁0.5g,水1000ml。
适用于蘑菇、草菇。
④葡萄糖蛋白胨琼脂培养基:葡萄糖20g,蛋白胨20g,琼脂20g,
水1000ml。
⑤蛋白胨、酵母、葡萄糖琼脂培养基:蛋白胨2g,酵母膏2g,
硫酸镁0.5g,磷酸二氢钾0.5g,磷酸氢二钾1g,葡萄糖20g,维生素B1 20㎎,琼脂20g,水1000ml。
具体步骤
1.计算。
按照选定的培养基配方,计算各种成分的用量。
2.称量。
用天平秤取各种物质,马铃薯去皮去芽眼,削掉青绿部分,
对不易称量的成分,可用玻棒和烧杯称重,微量元素等需要量少,难以称准时,可先配成较浓的原液,再从中取出需要的量。
3.配制。
若配制合成培养基,先量取蒸馏水,加入琼脂,加热溶化;
再加入称好的其他物质。
为避免发生沉淀造成营养损失,加入的顺序一般是先加缓冲剂,再依次加入主要元素、微量元素和维生素等;
若各种成分均不发生沉淀,也可一起加入。
4.煮汁,去滤液。
马铃薯切成1㎝见方的小块或2~3㎜厚的薄片,加
水约1200ml煮沸,再用文火保持20~30分钟、并适当搅拌,使营养物质充分溶解出来,然后用4层预湿的纱布过滤,取其滤液。
5.补足水量,加药品溶化。
补足水量至1000ml,然后往滤液中加入琼
脂,小火加热,搅拌至琼脂完全溶解,再加入葡萄糖和其他营养物质使其溶化后,用PH试纸检测其PH值,可根据需要使用氢氧化钠和盐酸,调整适宜的酸碱度,进行分装。
注意开锅搅拌,防止溢出或焦底。
6.分装试管。
制备好的培养基应趁热分装,可用玻璃试管,首先把较
大的玻璃漏斗固定在滴定架上,下接一段乳胶管和玻璃管,用弹簧夹夹住胶管。
手拿试管,分装量掌握在试管长度的四分之一。
注意分装时,培养基不能粘在试管口壁上,否则会污染棉塞。
7.赛棉塞。
注意要松紧适度8.高压锅灭菌30分钟。