微生物-常用培养基介绍
常用微生物培养基
常用微生物培养基分离真菌：注：抗生素所有培养基灭菌放置不烫手背时（温度约为40°C左右），同时加入氯霉素和链霉至终浓度为0.5 mg/mL（提前配置好，用0.22 µm微孔滤膜过滤，-20℃存储），混匀后倒平板，用于抑制细菌生长。
1.GPY培养基：葡萄糖20 g，蛋白胨10 g，酵母提取物10 g，海盐15 g，琼脂20 g，蒸馏水1 L，pH 7.5，115℃，30 min灭菌2.PDA培养基：Potato Dextrose Agar干粉39 g/L，海盐15 g，蒸馏水1 L，pH 6.5-7.0，121℃，15 min灭菌3.马丁培养基：葡萄糖10 g，蛋白胨5 g，磷酸二氢钾1 g，七水合硫酸镁0.5 g，孟加拉红0.03 g，海盐15 g，琼脂20 g，蒸馏水1 L，115℃、30 min灭菌4.MEA培养基：麦芽浸粉17g，蛋白胨3g，海盐15g，蒸馏水1L，121℃，20 min 灭菌5.YPD培养基：酵母提取物10 g/L，蛋白胨20 g/L，葡萄糖20 g/L，琼脂20 g/L，115℃，30 min灭菌6.沙氏葡萄糖琼脂培养基（SDA，每升培养基）：蛋白胨（peptone）10.0 g，葡萄糖（glucose）40.0 g，琼脂（agar）15.0 g，pH 4.0 - 6.0；7.酵母汁麦芽提取物琼脂培养基（YM，每升培养基）：麦芽浸粉（malt extract）3.0 g，酪蛋白胨（casein peptone）5.0 g，酵母提取物（yeast extract）3.0 g，葡萄糖（glucose）10.0 g，琼脂（agar）15 g，pH 6.0 - 6.5；8.察氏培养基（CDA，每升培养基）：硝酸钠（NaNO3）3. 0 g，氯化钾（KCl）0.5 g，蔗糖（sucrose）30. 0 g，七水合硫酸镁（MgSO4·7H2O）0.5 g，七水合硫酸亚铁（FeSO4·7H2O）0. 01 g，磷酸氢二钾（K2HPO4）1.0 g，琼脂（agar）15.0 g，pH 6.0 - 6.5；分离放线菌：注：抗生素所有培养基灭菌放置不烫手背时（温度约为40℃左右），同时加入制霉菌素（终浓度为100.0 μg/ml）和萘啶酮酸（终浓度为25.0 μg/ml）（提前配置好，用0.22µm 微孔滤膜过滤，于-20℃冻存），混匀后倒平板，分别用于抑制真菌和细菌生长。
微生物培养基名词解释
微生物培养基名词解释微生物培养基是用于培养和繁殖微生物的一种含有特定成分的培养介质。
微生物培养基主要由水、碳源、氮源、无机盐、生长因子等组成，目的是为了提供微生物所需的营养物质和环境条件，促进微生物的生长和繁殖。
常见的微生物培养基可以根据其成分和用途进行分类：一、基本培养基基本培养基是最常用的一类培养基，主要用于固定常见微生物的培养。
基本培养基一般包括碳源、氮源、无机盐和水等组分，常见的有肉汤、肽胨培养基、葡萄糖盐基培养基等。
1. 肉汤：肉汤是一种含有大量氨基酸和肽的培养基，常用于微生物的预培养和子域检测。
2. 肽胨培养基：肽胨培养基是含有胨、胨水解蛋白质、葡萄糖、无机盐和水的培养基，可用于大多数细菌和真菌的培养。
3. 葡萄糖盐基培养基：葡萄糖盐基培养基是一种以葡萄糖为碳源，含有无机盐和水的培养基，适用于许多细菌和酵母菌的培养。
二、选择性培养基选择性培养基是一种通过添加特定成分，以抑制或促进某些细菌生长的培养基。
选择性培养基通常用于分离和检测特定微生物，常见的有MacConkey琼脂培养基、巴氏培养基等。
1. MacConkey琼脂培养基：MacConkey琼脂培养基是一种可以选择性培养肠杆菌科细菌的培养基，通过添加胆盐和非发酵碳源能够抑制大多数革兰阳性菌的生长。
2. 巴氏培养基：巴氏培养基是一种用于培养厌氧菌的选择性培养基，其中添加了巴氏指示剂，可以通过颜色变化来检测菌落中的气体产生情况。
三、富营养培养基富营养培养基是一种含有较高浓度营养成分的培养基，常用于需要高营养条件下的微生物培养，例如快速生长的菌株的培养或微生物代谢产物的生产。
常见的富营养培养基有液体LB培养基和固体富植物营养琼脂培养基。
1. LB培养基：LB培养基是一种常用的富营养液体培养基，主要由酵母提取物、牛肉精、纤维素和水组成。
2. 富植物营养琼脂培养基：富植物营养琼脂培养基是一种富营养的固体培养基，常用于细菌和真菌的快速生长。
常见微生物培养基
常见微生物培养基Medium含有碳水化合物、含氮应用化学药品配成并标液体培养基不易长期保有不同。
一般培养基在对一些需严格灭菌的培2~6。
C的冰箱内。
1、细菌培养基配方一牛肉膏琼脂培养基牛肉膏0.3克 1.00.5 1.5水100毫升在烧杯内加水100火上加热。
待烧杯内各10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.27.6,30分钟。
配方二马铃薯培养基250500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。
在烧杯上做好2pH值调到7.5左右。
每支试管内加入10毫升配方三根瘤菌培养基葡萄糖10克磷酸氢二钾0.5克碳酸钙3克硫酸镁0.2克酵母粉0.4克琼脂20克水1000毫升1%结晶紫溶液1毫升2、放线菌培养基配方一可溶性淀粉2克硝酸钾0.1克磷酸氢二钾0.05克氯化钠0.05克硫酸镁0.05克硫酸亚铁0.001克琼脂2克水100毫升595使它溶解。
在烧杯外做好pH值到7.27.4备用。
配方二面粉琼脂培养基面粉60克琼脂20克水1000毫升50030分钟。
另取500pH值到7.43、真菌培养基配方一Sabouraud’s蛋白胨10克琼脂20克麦芽糖40克水1000毫升40本培养菌是培养许多种类真菌所常用的。
配方二马铃薯糖琼脂培养基2001000液中加入10煮沸溶解后加糖20用。
把这培养基的pH值调到7.27.4杆菌。
配方三黄豆芽汁培养基黄豆芽100克琼脂15克葡萄糖20克水1000毫升301000把这培养基的pH值调到7.27.4配方四豌豆琼脂培养基豌豆80粒琼脂5克水200毫升取801小4、食用菌菌种培养基配方一马铃薯—蔗糖--琼脂培养基20%马铃薯煮汁1000毫升蔗糖20克琼脂18克200100020分钟足水分到100020%pH配方二综合马铃薯培养基20%马铃薯煮汁1000 毫升磷酸二氢钾3克硫酸镁1.5克葡萄糖20克维生素10毫克琼脂18克先配制20%整pH值到6该培养基用于培养和保存灵芝、平菇、香菇等食用菌菌种。
微生物学实验常用培养基的
牛肉膏蛋白胨培养基（培养细菌用）121℃灭菌20min。
2、高氏（Gause）1号培养基（培养放线菌用）配制时，先用少量冷水将淀粉调成糊状，倒入煮沸的水中，在火上加热，边搅拌边加入其他成分，溶化后，补足水分至1000mL。
121℃灭菌20min。
3、查氏（Czapek）培养基（培养霉菌用）121℃灭菌20min。
4、马丁氏（Martin）琼脂培养基（分离真菌用）112℃灭菌30min。
临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL，使每毫升培养基中含链霉素30μg。
5、马铃薯培养基（简称PDA）（培养真菌用）培养基的配制：马铃薯去皮，切成块煮沸30min，然后用纱布过滤，再加糖及琼脂，熔化后补足水至1000mL。
121℃灭菌30min。
6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制：(1)、取大麦或小麦若干，用水洗净，浸水6—12小时，至15℃阴暗处发芽，上面盖纱布一块，每日早、中、晚淋水一次，麦根伸长至麦粒的两倍时，即停止发芽，摊开晒干或烘干，贮存备用。
(2)、将干麦芽磨碎，一份麦芽加四份水，在65℃水浴中糖化3—4小时，糖化程度可用碘滴定之。
加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤，滤液如混浊不清，可用鸡蛋白澄清，方法是将一个鸡蛋白加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(4)、将滤液稀释到5—6波美度，pH约6.4，加入2%琼脂即成。
121℃灭菌30min。
7、无氮培养基（自生固氮菌、钾细菌）113℃灭菌30min。
8、半固体肉膏蛋白胨培养基121℃灭菌20min。
9、合成培养基加12 mL0.04%的溴钾酚紫（pH5.2—6.8，颜色由黄变紫，作指示剂）。
121℃灭菌20min。
10、豆芽汁蔗糖（或葡萄糖）培养基培养基的配制：称新鲜豆芽100g，放入烧杯中，加入水1000mL，煮沸约30min，用纱布过滤。
用水补足原量，再加入蔗糖（或葡萄糖）50g，煮沸熔化。
几种常见培养基作用
几种常见培养基作用培养基是细菌学和微生物学实验的基础，用于培养、繁殖和研究细菌和其他微生物。
不同的培养基具有不同的特性和作用。
下面将介绍几种常见的培养基及其作用：1.营养琼脂基本培养基：这是最常用的培养基之一，它提供了细菌生长所需的各种营养物质，包括碳源、氮源、矿物质和维生素。
该培养基能够满足细菌的基本营养需求，促进其繁殖和生长。
2.差异性培养基：差异性培养基的作用是区分不同细菌的生长和代谢特点。
例如，大肠杆菌选择性培养基能够抑制其他菌群的生长，只允许大肠杆菌生长，从而帮助鉴定和分离大肠杆菌。
3.选择性培养基：选择性培养基的作用是选择性地培养其中一类细菌。
根据细菌对不同抑制剂和抗生素的敏感性，可以选择性地促进或抑制一些细菌的生长。
例如，巴氏杆菌选择性培养基会抑制大多数菌群的生长，只允许巴氏杆菌生长。
4.富集培养基：富集培养基的作用是加强其中一类细菌的生长。
富集培养基通常会包含一些特定成分，如特定营养物质或抗生素，以促使目标菌株的繁殖。
例如，革兰氏阳性杆菌富集培养基中含有高浓度的碳源和氮源，有助于改善革兰氏阳性杆菌的生长。
5.不含营养物质的培养基：不含营养物质的培养基还被称为无机培养基或基本盐蔗糖培养基(BSC)。
这种培养基只提供细菌生长所需的无机物质和一定浓度的蔗糖，不含有机营养物质。
这种培养基的作用是用于检测细菌对不同抗生素和化合物的敏感性，从而为抗生素临床应用提供参考。
6.非选择性培养基：非选择性培养基是一种通用的培养基，适用于不同种类的细菌。
它提供了细菌生长所需的各种营养物质，并不含有可能抑制菌群向生长的物质。
这种培养基通常用于分离和纯化未知细菌，以便进一步研究其特性和功能。
7.复合培养基：复合培养基是由多种不同成分组成的培养基，包括富集培养基、选择性培养基和差异性培养基等。
复合培养基的作用是兼顾多种细菌的营养需求和特性，为细菌的培养和研究提供全面的支持和条件。
总结起来，不同的培养基具有不同的作用，能够满足细菌的基本营养需求、区分不同细菌的生长和代谢特点、选择性地培养或抑制一些细菌、加强其中一类细菌的生长，或用于检测细菌对抗生素和化合物的敏感性。
微生物实验中常用到的培养基(包括英文缩写)
LST 月桂基硫酸盐胰蛋白胨
TSB 胰蛋白胨大豆肉汤
TCBS 硫代硫酸钠柠檬酸钠胆盐蔗糖琼脂
SC 亚西酸盐胱氨酸增菌液
NB 营养肉汤
NL 胆硫乳琼脂
SA 亚利桑那菌琼脂
BGLB 煌绿乳糖胆盐
EMB 伊红美蓝琼脂
VRBA 结晶紫中性红胆盐琼脂
SPB 氯化钠多粘菌素B
MS培养基 最普遍的培养基。其具有较高的无机盐浓度，能够保证组织生长所需的矿质营养还能加速愈伤组织的生长
EC肉汤
BP缓冲蛋白胨水
MM 氯化镁孔雀绿增菌液
TTB四硫磺酸钠煌绿增菌液
GN增菌液
BS亚硫酸铋琼脂
TSB 胰蛋白胨大豆肉汤 Tryptone Soya Broth
TSI 三糖铁琼脂 Triple Sugar Iron Agar
TTB 四硫磺酸钠煌绿增菌液
TTC TTC琼脂
VRBA 结晶紫中性红胆盐琼脂 Violet Red Bile Agar
HE琼脂
SS琼脂
WS琼脂
KI克氏双糖铁琼脂
TTC琼脂
胰酪胨大豆肉汤
Baird-Parker氏培养基
7.5％氯化钠肉汤
SPS亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂
FT液体硫乙醇酸盐培养基
PDA马铃薯葡萄糖琼脂
7.5％氯化钠肉汤 7.5 NaCl Broth
BGLB 煌绿乳糖胆盐 Brilliant Green Bile 2% Broth
EMB 伊红美蓝琼脂 Eosin Methylene Blue Lactose Agar
FT 液体硫乙醇酸盐培养基
微生物常用的培养基配方
微生物常用的培养基配方1、用于细菌培养——LB(Luria-Bertani)培养基LB培养基分为液体及固体两种形态的培养基，主要在分子生物学中应用。
(1) LB液体培养基，在90mL双蒸馏水中加入：胰蛋白胨1g氯化钠1g酵母提取物0.5g摇动容器直至溶质溶解后，用1当量NaOH调节pH至7.0，再用双蒸馏水定容至100mL。
而后进行高压蒸汽灭菌。
(2) LB固体培养基在100mL液体培养基的基础上，加入1.5g琼脂粉。
2、用于细菌培养——牛肉膏蛋白胨培养基牛肉膏 1.5g蛋白胨5g氯化钠 2.5g水500mL，pH调至7.4~7.6。
3、用于霉菌或酵母菌培养——马铃薯培养基(PDA)马铃薯（去皮）200g蔗糖（葡萄糖）20g水1000mL将马铃薯去皮切成小块放入锅中，加水至1000mL，煮至沸腾后维持20-30min，注意不时用玻璃棒搅拌防止糊底。
用可用2层纱布趁热在量杯上过滤，弃去滤渣。
取滤液加糖（培养霉菌用加蔗糖，培养酵母菌用加葡萄糖），补充水至1000mL，自然pH。
4、用于V.P.反应和甲基红试验——葡萄糖蛋白胨水培养基蛋白胨0.5g葡萄糖0.5g磷酸氢二甲0.2g水100mL，调节pH至7.2~7.4，115℃湿热灭菌20min。
5、用于吲哚实验——蛋白胨水培养基蛋白胨10g氯化钠5g水1000mL，调节pH至7.2~7.4，121℃湿热灭菌20min。
6、用于厌氧菌培养——RCM培养基（强化梭菌培养基）酵母粉3g牛肉膏10g蛋白胨10g可溶性淀粉1g葡萄糖5gL-半胱氨酸盐酸盐0.5g氯化钠5g醋酸钠3g琼脂0.5水1000mL，调节pH至6.8±0.1，121℃高压灭菌15min。
实验室36种微生物培养基配制方法
实验室36种微生物培养基配制方法实验室养菌基是为微生物的培养和研究提供合适营养和条件的培养基质。
不同微生物对培养基的要求各不相同，因此实验室通常需要配制多种不同的培养基。
下面是36种常用的微生物培养基的配制方法。
一、通用培养基1. 营养琼脂培养基（Nutrient Agar）营养琼脂培养基是一种通用的培养基，适用于大多数微生物的培养。
其配方为：蛋白胨10克、葡萄糖5克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2，加入琼脂，高压灭菌，倒入平皿中，待凝固后用。
2. 营养肉膏培养基（Nutrient Broth）营养肉膏培养基是一种通用的液体培养基，适用于大多数微生物的培养。
其配方为：蛋白胨10克、牛肉提取物5克、葡萄糖5克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2，高压灭菌，分装，即可使用。
3. 大肠杆菌选择性培养基（MacConkey Agar）大肠杆菌选择性培养基是一种常用的培养基，用于选择和鉴定大肠杆菌。
其配方为：蛋白胨17克、葡萄糖1.5克、恶瓜胆汁5克、硼酸紫0.5克、亮矾0.09克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2，加入琼脂，高压灭菌，倒入平皿中，待凝固后用。
4. Sabouraud脱氧胆汁蔗糖琼脂培养基（Sabouraud Dextrose Agar）Sabouraud脱氧胆汁蔗糖琼脂培养基是用于真菌的培养和鉴定。
其配方为：脱氧胆汁10克、蔗糖40克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至5.6-6.4，高压灭菌，倒入平皿中，待凝固后用。
二、选择性培养基1. VC菌属选择性平皿培养基（Vogel-Johnson Agar）VC菌属选择性平皿培养基是用于选择和鉴定Voges-Proskauer菌属（如克雷伯菌）的培养基。
其配方为：葡萄糖1克、琼脂15克、盐酸75克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、加热煮沸，冷却至55-60°C，加入胆盐酯高压灭菌，倒入平皿中，待凝固后用。
微生物-常用培养基介绍
3号麦康凯琼脂平板
• PO0495A 90mmX10 PO0495F 70mmX10 • 均匀淡红色，无斑点，无裂纹 • 选择性分离肠杆菌和大肠埃希菌，用来检测不同标本中的肠杆菌 • 通过颜色变红来检测乳糖发酵
乳糖（＋）：粉红到红色菌落 乳糖（－）：无色或浅褐色菌落
24
SS琼脂平板
• PO5022A 90mmX10 PO5022F 70mmX10 • 分离沙门氏、志贺氏菌属细菌 • 强选择性培养基 • 沙门氏、志贺氏半透明菌落 • 大肠杆菌呈红色菌落 • 产硫化氢的菌属可形成黑色中心 • 避光保存
α溶血、β溶血、γ溶血 • 卫星试验 • CAMP试验
8
哥伦比亚血琼脂平板
• 均匀红色，无斑点，无裂纹，无血和纤维凝块 • 传代培养 • 观察溶血
α溶血、β溶血、γ溶血 • 卫星试验、协同溶血（CAMP）试验 • 肺炎链球菌等苛养菌生长极好 • 在国外一般加抑菌剂作为培养阳性球菌的选择性培养基用 • 供分离葡萄球菌或其他营养要求较高的细菌及进行培养、鉴定
4
Oxoid制成培养基
医院常用品项： • 滋养性：营养琼脂、血平板、巧克力平板 • 肠道菌：麦康凯、中国蓝玫红酸、
伊红美蓝、 SS平板 • 分隔平板：血琼脂/麦康凯琼脂、
血琼脂/中国蓝玫红酸琼脂等 • 真菌：沙保氏葡萄糖 • 显色：念珠菌显色培养基、
尿路感染显色培养基
5
PPM TOP10
1 PB0123A/F 哥伦比亚血平板 2 PO0480B 胰蛋白胨大豆琼脂平板（三层无菌包装、辐照） 3 PO0155A 营养琼脂平板 4 PO8060A 玫红酸中国蓝乳糖琼脂平板 5 PB8001A/F 万古霉素巧克力琼脂平板 6 PO0152A MH平板 7 PO0262D 胰蛋白胨大豆琼脂接触平板（三层无菌包装、辐照） 8 PO0479D 卵磷脂吐温胰蛋白胨大豆琼脂接触平板(三层无菌包装、辐照） 9 PO0161F 沙保氏氯霉素琼脂平板 10 PO0495F 3号麦康凯琼脂平板
微生物培养基基础知识简介
SS琼脂(沙门氏 和志贺氏 菌)
注：G+:革兰氏阳性菌，G-:革兰氏阴性菌。
培养基名称 多粘菌素B-吖啶黄氯化锂-头孢拉定-七 叶苷-甘露醇 (PALCAM)琼脂
添加成分 氯化锂、苯基乙醇、 甘氨酸酐、多粘菌 素B、头孢拉定、七 叶苷、柠檬酸铁胺
选择原理 氯化锂、苯基乙 醇、甘氨酸酐可 抑制G+和G-生 长，头孢拉定和 多粘菌素B抑制标 本中污染的G-。 高浓度NaCl抑制 除葡萄球属菌以 外的大多数细菌 卵黄乳液可检测 卵磷脂酶活性， 多粘菌素B抑制标 本中污染的G-。
鉴别特征 检测七叶苷 水解反应， 酚磺酞指示 剂反映甘露 醇发酵试验 甘露醇发 酵，菌落由 黄变红，pH 值下降 不发酵甘露 醇而呈现溴 麝香草酚蓝 的蓝色。
用途 用于分离和培 养单核细胞增 多性李斯特氏 菌。
甘露醇盐琼脂
7.5%NaCl、甘露醇 和中性红的结合物
用于分离金黄 色葡萄球菌
多粘菌素B、丙酮酸 多粘菌素B-丙酮酸 盐、卵黄-甘露醇、 盐-卵黄-甘露醇-溴 麝香草酚蓝(PEMBA) 溴麝香草酚蓝 琼脂 月桂基硫酸盐胰蛋 白胨(LST)肉汤 Skirrow’s培养基 月桂基硫酸钠
按物理性质可分为 液体培养基
适用范围：广泛用于细菌的增菌和检验，也是制备其他培 养基的基础成分。
固体培养基
适用范围：微生物的分离培养、菌种鉴定、菌落计数和菌 种保藏。
半固体培养基
适用范围： 琼脂含量为0.2%~0.7%，低于固体培养基所 含比例，常用于观察细菌的运动、菌种鉴定及测定噬菌体 的效价等。
常用的生化试验培养基
糖发 酵试 验培 养基 糖醇发酵试验培养基 血清菊糖试验培养基 胆汁七叶苷试验培养基 氨基酸脱羧酶试验培养基 耐热DNA酶培养基 DNA酶试验培养基 氧化酶试验 酶类 测定 培养 基和 试剂 尿素酶试验培养基 磷酸酶试验培养基 马尿酸盐试验培养基 触酶试验培养基 ß-半乳糖苷(ONPG)试验培养基 苯丙氨酸试验培养基 淀粉培养基 粘液酸利用试验培养基 碳源 和氮 源利 用试 验培 养基 丙二酸盐试验培养基 醋酸盐试验培养基 葡萄糖酸盐试验培养基 枸橼酸盐试验培养基 碳源利用试验培养基 检查细菌对不同糖(醇)类的发酵能力，达到鉴定细菌的目的 用于肺炎链球菌与其它链球菌鉴别。 要用于鉴别D群链球菌与其它链球菌的区别，以及肠杆菌科的某些种、某些厌氧菌（如脆弱拟杆菌等） 的初步鉴别。 检查细菌使氨基酸脱羧基形成胺使培养基变碱的能力。常用的氨基酸有赖氨酸、鸟氨酸和精氨酸。 用于检测细菌所产生的耐热脱氧核糖核酸酶 供细菌DNA酶测定用。 区别假单胞菌与氧化酶阴性的肠杆菌科细菌。 用于细菌尿素酶测定。 测定细菌产生磷酸酶的能力。用于区别葡萄球菌有无致病性，致病性葡萄球菌呈阳性。还有助于克 雷伯菌属与肠杆菌属的鉴定。 测定细菌水解马尿酸钠能力。该培养基常用方法有2种：三氯化铁法和茚三酮法 用于链球菌及革兰阳性球菌初步分群。 用于乳糖迟缓发酵菌和不发酵菌的鉴别。 苯丙氨酸脱氨酶是变形杆菌属、普罗威登斯菌属和摩根菌属所特有，可与肠杆菌科及其它细菌区别。 也有助于种的鉴别，如苯丙酮酸莫拉菌呈阳性，其它莫拉菌属的菌种呈阴性。 用于链球菌和白喉棒状杆菌的分型鉴定。 用于无动力不产气不发酵乳糖的大肠埃希菌与志贺菌属的鉴别。前者多数为阳性，后者均为阴性。 主要用于下述菌属的鉴定：阳性菌有粪产碱杆菌、亚利桑那菌、克雷伯菌；阴性菌有不动杆菌属、 沙门菌属、放线菌属；特别是枸橼酸杆菌，用于属内种的鉴定如弗劳地、异型枸橼酸杆菌呈阳性， 而丙二酸盐阴性枸椽酸杆菌呈阴性。 用于肠杆菌科的鉴定 帮助属间鉴别、种间鉴别和沙雷菌属菌种的鉴定。 鉴定细菌对枸橼酸盐及无机铵的利用能力。 测定细菌利用碳源的能力。
各种培养基的配方
各种培养基的配方在微生物学中，培养基是为微生物提供营养和生长所必需的营养物质的混合物，可以根据微生物的特性和需求来设计不同成分的培养基。
不同种类的微生物需要不同的培养基来生长和繁殖，为了获得最佳的生长效果，需根据微生物的特性制备相应的培养基。
下面介绍几种常用的培养基及其配方。
1. 加尔沙基培养基（Luria-Bertani，LB培养基）LB培养基是一种常用的细菌培养基，适用于大多数细菌的培养。
其成分包括牛肉浸出物、酵母提取物和氯化钠，PH为7.0。
配方：- 水：1000ml-氯化钠：10g-酵母提取物：5g-牛肉浸出物：10gLB培养基的主要特点是富含氨基酸和碳源，适合于细菌的快速生长。
2. PDA培养基（Potato Dextrose Agar）PDA培养基是一种适合真菌和霉菌生长的培养基，成分简单易得。
它主要包括马铃薯提取物、葡萄糖和琼脂。
PDA培养基是一种半固体培养基，适合于真菌的产孢。
配方：-马铃薯提取物：200g-葡萄糖：20g-琼脂：20g-静置180s后，灭菌PDA培养基适合于真菌和霉菌的生长，常用于菌落计数和生长的研究中。
3.营养琼脂培养基营养琼脂培养基是一种通用的培养基，适用于多种微生物的培养。
它主要包括蛋白水解物、酵母提取物、氯化钠和琼脂。
配方：-蛋白水解物：5g-酵母提取物：1g-氯化钠：5g-琼脂：15g- 水：1000ml-蒸馏后灭菌营养琼脂培养基适合于大多数微生物的生长，是最常用的培养基之一4. 马尼特尔-梅尔特培养基（Mannitol-Salt Agar，MSA）MSA培养基是一种选择性培养基，主要用于金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）的分离和鉴定。
它的成分包括马尼托尔、氯化钠、酵母提取物和琼脂。
配方：-马尼托尔：5g-氯化钠：75g-酵母提取物：1g-琼脂：15g- 水：1000ml-蒸馏后灭菌MSA培养基在金黄色葡萄球菌的生长过程中，可以通过红色菌落的形成来进行识别。
微生物常用培养基介绍
微生物常用培养基介绍常用的培养基可根据最基本的组成成分分为以下两种类型：化学合成培养基和复合物培养基。
化学合成培养基是通过将纯化学物质溶解在水中制备而成，能精确控制培养基的成分。
复合物培养基则是以天然有机物质如糖、蛋白等为主要碳源和氮源制备的培养基，营养成分相对复杂。
以下将对常用的培养基进行介绍：1. 营养琼脂培养基（Nutrient Agar）：是最常用的通用培养基之一、它由水、肉提取物、酵母提取物和琼脂组成。
适用于大多数常见细菌和真菌的培养。
3. MacConkey琼脂培养基：是一种选择性培养基，用于分离和鉴定肠道革兰氏阴性菌，如大肠杆菌和克雷白杆菌。
它添加了碱性红和液体胆盐，以抑制革兰氏阳性菌的生长。
4. Sabouraud葡萄糖琼脂培养基：是一种常用的真菌培养基，含有葡萄糖和琼脂作为碳源，以及抗生素如氯霉素和青霉素，以抑制细菌的生长。
5. Mannitol盐琼脂培养基：是一种选择性培养基，可鉴定耐盐菌和致病菌如金黄色葡萄球菌。
它含有高浓度的盐和麦芽糖，以及琼脂作为凝胶化剂。
6. TCBS琼脂培养基（Thiosulfate Citrate Bile Salt Sucrose Agar）：是一种用于分离和鉴定卡介菌属细菌的培养基，含有碱性盐、胱硫酸盐、柠檬酸盐和蔗糖。
7. TSB液体培养基（Tryptic Soy Broth）：是一种通用的液体培养基，适用于多种微生物的培养。
它由胰胨和大豆胨制备而成。
8. BHI液体培养基（Brain Heart Infusion Broth）：是用于培养多种微生物的液体培养基，以动物脑和心脏组织为基础材料，提供丰富的营养。
9. 铁琼脂培养基（TSI Agar）：是一种含有红霉素、蛋白质胨、蔗糖和乳糖等成分的复合物琼脂培养基，用于鉴定肠道革兰氏阴性杆菌。
10. 阿曼氏琼脂培养基（Mannitol Salt Agar，MSA）：是一种选择性培养基，用于鉴定耐盐菌，如金黄色葡萄球菌。
微生物检验学之培养基
培养基培养基是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养物制品。
适宜的培养基不仅可用于细菌的分离纯化培养、传代、菌种保存，还可用于研究细菌的生理、生化特性，是病原菌分离鉴定的重要环节和必不可少的手段。
一、培养基的组成成分二、培养基种类三、分离培养基的选择一、培养基的组成成分（一）营养物质细菌需要的基础营养物质应含有氮源、碳源、无机盐类和生长因子等，常用的营养物质如下：1.蛋白胨提供氮源。
是动物或植物蛋白质经酶或酸碱分解而成。
含胨、多肽和多种氨基酸，为大多数细菌生长所利用，尤其是含大量色氨酸的胰蛋白胨，更适于测靛基质用的蛋白胨。
蛋白胨易溶于水，遇酸不沉淀，不因受高温而凝固，并对两性电解质有缓冲作用。
但吸水性强，应注意干燥密封保存。
2.肉浸液是用新鲜牛肉浸泡、煮沸而制成的肉汁。
其中含有可溶性含氮浸出物（肌酸、黄嘌呤、腺嘌呤、次黄嘌呤核苷酸、谷氨酸、甘氨酸等）和非含氮浸出物（肝糖、乳酸、琥珀酸、磷酸己糖、脂肪、无机盐类等）。
还有一些生长因子。
肉浸液提供氮源和碳源，但肉浸液中所含氮物质过少而不能满足细菌的需要，因此在制备培养基时应再加入1%～2%的蛋白胨和0.5%氯化钠。
3.牛肉膏由肉浸液经长时间加热浓缩而制成。
糖类在加热过程中被破坏，所以其营养价值低于肉浸液，但因无糖可用作肠道杆菌鉴别培养基的基础成分。
由于使用方便，常用于制备培养基。
4.糖类、醇类提供碳源和能源。
制备培养基所用的糖类、醇类有多种，常用的糖类有单糖（葡萄糖、阿拉伯糖等）、双糖（乳糖、蔗糖等）和多糖（淀粉、菊糖等）；常用的醇类有甘露醇、卫茅醇等。
除葡萄糖、蔗糖主要作为碳源和能源的基本成分外，其他糖类和醇类主要用于鉴定细菌所做的发酵反应。
6.无机盐类提供细菌生长的各种元素，如：钾、钠、铁、镁、钙、磷、硫等。
用于制备培养基的无机盐类有多种，其中最常用的有氯化钠和磷酸盐，前者对维持酶的活性、调节菌体内外的渗透压非常重要，后者是细菌良好的磷源，并在培养基中具有缓冲作用。
微生物培养常用培养基配方
溶液名称用途吕氏碱性美蓝染色液美蓝染色法吕氏碱性美蓝染色液美蓝染色法吕氏碱性美蓝染色液美蓝染色法结晶紫染色液革兰氏染色法革兰氏碘液革兰氏染色法沙黄复染液革兰氏染色法石炭酸品红染色液耐酸性染色法（萋-倪染色法）3%盐酸-乙醇耐酸性染色法（萋-倪染色法）复染液吕氏碱性美蓝染色液柯氏染色液柯氏染色法奥尔特氏染色液奥尔特氏荚膜染色法瑞氏染色液瑞士染色法鞭毛染色法染色液（甲液）鞭毛染色法鞭毛染色法鞭毛染色法染色液（乙液）鞭毛染色法鞭毛染色法碱性复红染色液碱性复红染色法甲基红实验甲基红（MR）实验氧化酶试验细胞色素氧化酶试验过氧化氢酶试验过氧化物酶试验磷酸盐缓冲液（储存液）磷酸盐溶液（稀释液）明胶磷酸盐缓冲液乳酸-苯酚溶液检查真菌形态硝酸盐还原试剂（甲液）硝酸盐还原试剂（乙液）靛基质试剂（柯凡客试剂）靛基质试剂（欧-波试剂）美蓝95%乙醇0.01%氢氧化钠溶液结晶紫95%乙醇1%草酸水溶液碘碘化钾蒸馏水沙黄95%乙醇蒸馏水碱性品红95%乙醇5%酚水溶液浓盐酸95%乙醇0.5%沙黄液0.5%孔雀绿液沙黄蒸馏水瑞氏色素甲醇单宁酸氯化高铁蒸馏水1%氢氧化钠溶液15%甲醛溶液硝酸银蒸馏水浓氢氧化铵溶液碱性复红溶液甲基红试剂1%盐酸二甲基对苯二胺1%α-萘酚-乙醇溶液1%盐酸二甲基对苯二胺1%α-萘酚-乙醇溶液3%过氧化氢溶液2%茶酚溶液3%过氧化氢溶液磷酸二氢钾1mol/L氢氧化钠溶液蒸馏水储存液稀释至1000ML 明胶蒸馏水苯酚乳酸甘油蒸馏水对氨基苯磺酸乙酸甲萘胺乙酸对二甲氨基甲醛戊醇浓盐酸对二甲氨基苯甲醛乙醇浓盐酸。
微生物常用培养基介绍
微生物常用培养基介绍微生物培养基是为了满足微生物生长和繁殖的营养和生理需求而制备的一种复杂的化学和物理组合。
培养基的选择是微生物实验室工作中非常重要的一步，因为不同微生物对于营养物质的需求是不同的。
下面将介绍几种常用的微生物培养基。
1.营养琼脂培养基营养琼脂培养基是一种基础的培养基，用于培养常见的微生物。
它主要由肉汤、胰蛋白胨、琼脂、盐类等组成。
营养琼脂培养基可以满足绝大多数微生物的生长需求，是最常见的培养基之一2.马尿培养基马尿培养基主要用于分离和鉴定大肠杆菌等大肠埃希菌科细菌。
它由酵素消化的马肉精制的冻干物和一些特殊的肥料和盐类组成。
马尿培养基中含有氧和无氧生长所需的营养物质，因此非常适合于肠道细菌的生长。
3.血琼脂培养基血琼脂培养基是一种含有血液的琼脂培养基。
它可以促进细菌和真菌的生长，并可以区分不同微生物的产生溶解酶的能力。
血琼脂培养基常用于耐药性的细菌和分离和鉴定病原微生物。
4.马尿西杰林培养基马尿西杰林培养基是一种用于分离和鉴定大肠杆菌的选择性培养基。
它主要由马尿、氯化钠、柠檬酸钠、琼脂、培养基和蔗糖组成。
马尿西杰林培养基通过选择性抑制其他细菌的生长，提供了大肠杆菌生长的有利条件。
5.大肠埃希菌选择性琼脂培养基大肠埃希菌选择性琼脂培养基是一种含有红松籽酸、氯化碱、鹽、柠檬酸钠、亚硝酸钠等抑制非大肠杆菌的选择性琼脂培养基。
它主要用于大肠埃希菌的分离和鉴定。
6.牛肉浸提液琼脂培养基牛肉浸提液琼脂培养基是一种富含氨基酸和其他有机营养物质的培养基。
它主要用于快速生长和温和微生物的培养。
以上是几种常用的微生物培养基介绍，每种培养基都有其特殊的适应细菌生长和分离鉴定的功能。
在微生物实验室中，选择适当的培养基对于微生物的研究和应用具有重要的意义。
同时，在培养过程中还应注意操作规范，采取严格的无菌措施，以保证实验结果的准确性。
146种常见培养基的配方
146种常见培养基的配方培养基是微生物学实验中常用的一种重要实验工具，通过调配合适的培养基，可以提供微生物生长所需的营养物质，从而促进微生物菌落的繁殖和生长。
下面将介绍一些常见的培养基配方，涵盖了常用的总结培养基、选择性培养基和不同微生物类群的专用培养基。
1.琼脂肉汤培养基（NB）-牛肉脱脂粉5g-酵母提取物2.5g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml2.大肠杆菌复合培养基（LB）-液体培养基-蛋白胨10g-酵母提取物5g-NaCl5g- 蒸馏水 1000ml-琼脂板-蛋白胨10g-酵母提取物5g-NaCl5g-琼脂15g- 蒸馏水 1000ml3. 肠杆菌选择性琼脂培养基（MacConkey琼脂培养基）-蛋白胨17g-紫胆汁盐1.5g-普鲁士蓝盐1.5g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml4. 脱氧胆盐琼脂培养基（Deoxycholate Agar）-脱氧胆酸钠20g-普鲁士蓝盐0.8g-蛋白胨7.5g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml5.阿米巴选择性琼脂培养基（KV培养基）- 鸡蛋清 20ml- 中性红溶液 12ml-NaCl0.5g-纤维素0.25g- 盐酸 1ml-琼脂15g- 蒸馏水 1000ml6. 革兰氏阳性菌选择性琼脂培养基（Mannitol Salt Agar）-蔗糖10g-氯化钠75g-酵母提取物5g-麦芽提取物1g-琼脂15g- 蒸馏水 1000ml7. 维生素富集琼脂培养基（Burkholder's Basal Salt Medium）-NaNO31g-KCl0.5g-MgSO4·7H2O0.2g-CaCl2·2H2O0.02g-FeSO4·7H2O0.01g-琼脂14g- 蒸馏水 1000ml8. 三氯化铁琼脂培养基（Cetrimide Agar）-硫酸镁0.8g-氯化钴0.05g-氯化锌0.01g-氯化亚铁0.03g-三氯化铁0.03g-比色琼脂糖15g- 过滤蒸馏水 1000ml9. 库氏四甲基铵琼脂培养基（Chapman Agar）-高氯酸钠5g-脲7.5g-酵母提取物2g-海藻酸钠20g-紫胆汁盐0.25g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml10. 还原格兰氏琼脂培养基（Reduced Gram-negative Broth）-蛋氨酸0.5g-异亮氨酸0.5g-半胱氨酸0.5g-菜碱0.5g-胀氨酸0.5g-琼脂7g- 蒸馏水 1000ml这些是其中的一部分常见的培养基配方，涵盖了常用的总结培养基、选择性培养基和不同微生物类群的专用培养基。
常见微生物培养基
常见微生物培养基培养基Medium是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐包括微量元素以及维生素和水等。
有的培养基还含有抗菌素和色素。
按所用原料不同可分为两类应用肉汤、马铃薯汁等天然成分配制的称为天然培养基应用化学药品配成并标明成分的称为合成培养基或综合培养基。
化学试剂中的培养基大多为合成培养基。
由于液体培养基不易长期保管现在均改制成粉末。
培养基由于配制的原料不同使用要求不同而贮存保管方面也稍有不同。
一般培养基在受热、吸潮后易被细菌污染或分解变质因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。
对一些需严格灭菌的培养基如组织培养基较长时间的贮存必须放在2~6。
C的冰箱内。
常见培养基有1、细菌培养基配方一牛肉膏琼脂培养基牛肉膏0.3克蛋白胨1.0克氯化钠0.5克琼脂 1.5克水100毫升在烧杯内加水100毫升放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠用蜡笔在烧杯外作上记号后放在火上加热。
待烧杯内各组分溶解后加入琼脂不断搅拌以免粘底。
等琼脂完全溶解后补足失水用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.27.6,分装在各个试管里加棉花塞用高压蒸汽灭菌30分钟。
配方二马铃薯培养基取新鲜牛心除去脂肪和血管250克用刀细细剁成肉末后加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。
在烧杯上做好记号煮沸转用文火炖2小时。
过滤滤出的肉末干燥处理滤液pH值调到7.5左右。
每支试管内加入10毫升肉汤和少量碎末状的干牛心灭菌备用。
配方三根瘤菌培养基葡萄糖10克磷酸氢二钾0.5克碳酸钙3克硫酸镁0.2克酵母粉0.4克琼脂20克水1000毫升1%结晶紫溶液1毫升先把琼脂加水煮沸溶解然后分别加入其他组分搅拌使溶解后分装灭菌备用。
2、放线菌培养基配方一淀粉琼脂培养基高氏培养基可溶性淀粉2克硝酸钾0.1克磷酸氢二钾0.05克氯化钠0.05克硫酸镁0.05克硫酸亚铁0.001克琼脂2克水100毫升先把淀粉放在烧杯里用5毫升水调成糊状后倒入95毫升水搅匀后加入其他药品使它溶解。
培养基制备
培养基制备一、概述培养基是生物实验中必不可缺的基础设施，它为微生物、细胞等生物种群的繁殖和生长提供了必要的营养物质。
本文将介绍常用的培养基配方和制备方法，以及如何根据中国国情进行优化。
二、常用培养基1.大肠杆菌培养基（LB）配方：10克蛋白胨、5克酵母提取物、10克氯化钠、加水至1L。
特点：优点是制备方便、易于培养，多数菌株生长良好。
缺点是含有大量营养物质，若用于长期贮存菌株，容易导致突变风险增加。
2.液体麦康凯发酵培养基（BHI）配方：将500克肉汤蛋白胨培养基、10克氯化钠、2克二氢磷酸氢二钠、2克葡萄糖溶解在1L蒸馏水中。
特点：适合多种微生物的生长，包括厌氧微生物。
BHI较LB富含营养物质，可提供较好的生长环境，适合繁殖菌株。
3.青霉素酸糖盐地衣芽孢杆菌培养基（PDA）配方：20克琼脂、4克葡萄糖、0.75克潮霉素、0.125克青霉素钾盐、0.05克维生素B1、加水至1L。
特点：适用于分离和培养种类繁多的真菌、放线菌等微生物，能有效地防止杂菌的污染。
三、优化培养基由于中国的气候、温度等环境条件与西方国家有所不同，因此需要进行针对性的优化，以满足不同微生物的生长需求。
1.调整pH值许多微生物生存和生长所需的pH值范围在7.0-7.5之间。
但是，我们在制备培养基时应从当地水质的酸碱性入手，适当调整pH值，以便营养物质的有效吸收。
2.添加一些特殊成分在中国有些地区，水质有问题，例如含有高浓度的重金属和有机物污染，这些都会影响微生物的生长和繁殖。
因此，在制备培养基时，要添加些许抗菌剂和抗氧化剂，保证培养环境的纯净度和稳定性。
3.注意制备温度对于不同的菌株，其适宜的生长温度也有所不同。
在制备培养基时，应根据菌株的特点，以及所处的生态环境，调整制备温度，将传统的37度下的浸渍式消毒改为高温滤器灭菌法，避免纳米材料产生自拍。
四、结论在国内微生物学、生物医学和生物工程研究领域中，培养基是至关重要的实验基础设施。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
• 供分离葡萄球菌或其他营养要求较高的细菌及进行培养、鉴定
9
α溶血、β溶血、γ溶血
10
肺炎链球菌在血平板上的生长
11
化脓性链球菌在血平板上的生长
12
金黄色葡萄球菌的β 溶血
13
化脓性链球菌的β 溶血
14
溶血
1 PB0123A/F 2 PO0480B
哥伦比亚血平板 胰蛋白胨大豆琼脂平板（三层无菌包装、辐照）
3
4
PO0155A
PO8060A
营养琼脂平板
玫红酸中国蓝乳糖琼脂平板 万古霉素巧克力琼脂平板
5 PB8001A/F 6 PO0152A 7 8 PO0262D PO0479D
MH平板
胰蛋白胨大豆琼脂接触平板（三层无菌包装、辐照） 卵磷脂吐温胰蛋白胨大豆琼脂接触平板(三层无菌包装、辐照）
乳糖（－）：无色或浅褐色菌落
24
SS琼脂平板
• PO5022A 90mmX10 PO5022F 70mmX10 • 分离沙门氏、志贺氏菌属细菌
• 强选择性培养基 • 沙门氏、志贺氏半透明菌落 • 大肠杆菌呈红色菌落
• 产硫化氢的菌属可形成黑色中心 • 避光保存
25
中国蓝琼脂平板
• PO8060A 90mmX10 PO8060F 70mmX10 • 弱选择性培养基 ，抑制阳性球菌的生长
7
血琼脂平板
• 均匀红色，无斑点，无裂纹，无血和纤维凝块 • 供分离葡萄球菌或其他营养要求较高的细菌及进行培养、鉴定 • 传代培养
• 观察溶血 α溶血、β溶血、γ溶血
• 卫星试验 • CAMP试验
8
哥伦比亚血琼脂平板
• 均匀红色，无斑点，无裂纹，无血和纤维凝块 • 传代培养
• 观察溶血 α溶血、β溶血、γ溶血 • 卫星试验、协同溶血（CAMP）试验
3
DCM Top 10
1
2
CM0337B CM0309B
MH琼脂
WL营养琼脂
3
4
CM0657B
CM0331B
橙血清琼脂
哥伦比亚血琼脂基础
5
6
CM0325B
CM0651B
平板计数琼脂
普通啤酒琼脂
7
8
CM1055B
CM0003B
阪崎肠杆菌显色琼脂
营养琼脂
9Байду номын сангаас
10
CM0115B
CM0041B
3号麦康凯琼脂
• 用于分离沙门氏、志贺氏菌属细菌 • 沙门氏、志贺氏菌属细菌半透明状
• 大肠菌群细菌呈蓝色，深蓝色核心 • 中国蓝碱性无色，酸性蓝色
• 玫红酸碱性时呈红色，酸性时黄色
• 成品PH7.4淡紫红色，过高呈鲜红色，过低暗紫色
26
分格平皿培养基
• 分格平皿培养基专为一个标本同时接种两种不同的培养基来分离各种致
32
苛氧菌分离现状
• 不具备苛氧菌分离的培养基
• 未建立标本送检指南，送检标本与接种标本相隔时间太长
• 无CO2培养环境 • 不能辨别菌落 • 无鉴别试剂
33
平板培养基出水
• 出水问题是困扰成品培养基的严重问题，不仅严重影响品质，且是造成 培养基污染的罪魁祸首 • 最主要的原因为存放过程中的温度变化造成平板培养基冷热波动而凝结 出水 • 只能尽量减轻，尚无法完全避免 • 尽量减少平板培养基的存货期
• 平板培养基出水
• 平板培养基污染 • 平板培养基冷冻
平板培养基出血水
平板培养基溶血，发黑 平板培养基琼脂靠近冰柜壁的一侧或两侧变白 平板培养基琼脂表面不平，有裂纹
30
平板培养基运输保存注意事项
• 平板培养基保存于2～10℃冷库或冰箱内，避光存放。避免靠近冷库或冰 箱的壁、门、风机口等温度不稳定的部位。 • 平板培养基运输和存放时——倒置（标签正置）。
• 平板培养基运输时置于泡沫箱内并加冰块，冰块用吸水纸或废报纸包三 层以上，避免阳光曝晒，避免剧烈振动。
• 尽量减少公司和代理商的存货期。
• 不要用冰柜保存。
31
血平板α、β溶血，苛养菌检出
• 金黄色葡萄球菌的某些株溶血不明显
• 溶血观察与个人经验有关
• 协同溶血试验 • 苛养菌与标本的采集、运输、接种、培养辨认等因素密切相关
34
平板培养基污染
• 运输保存不当，造成出水是平板培养基污染的主要原因
• 动物血污染造成平板培养基污染
• 杀菌失败造成平板培养基污染 • 除菌失败造成平板培养基污染 • 生产环境不合格引起平板培养基污染
• 生产操作引入平板培养基污染
35
OXOID一次性平板培养基
36
9
10
PO0161F
PO0495F
沙保氏氯霉素琼脂平板
3号麦康凯琼脂平板
6
血琼脂平板
• 血琼脂平板 PB0115A PB0115F
90mmX10 70mmX10
• 哥伦比亚血琼脂平板 PB0123A 90mmX10 PB0123F 70mmX10 • 厌氧血琼脂平板 PB8111A 90mmX10 PB8111F 70mmX10
PB8013A 90mmX10 PB8013F 70mmX10 • 巧克力GC选择性琼脂平板（培养淋球菌）
添加复合抗生素，用于生殖道、尿道标本中分离淋球菌
PB8136A 90mmX10 PB8136F 70mmX10
19
巧克力琼脂平板原理
• 特殊的变色工艺破碎血细胞，释放出Ⅹ因子、Ⅴ因子，破坏血中不稳定的 抑制细菌生长的成分，保留热稳定的营养物质 • 补加完整的氨基酸及生长因子 • 模拟细菌最有利的生长缓冲系统
• 平板培养基污染
28
血平板颜色深 ，发黯，发黑
• 色深问题也就是效期问题
• 羊血红细胞也会存在个体差异
• 同一批产品由于前期与后期受热时间不同也会出现颜色差异 • 另外运输保存不当也会造成未达到效期时颜色会变深 • 存货期长，保存条件不当
• 生产操作失误
29
运输保存不当危害
• 平板培养基琼脂脱落
• HTM(嗜血杆菌)
• MH+羊血(肺炎链球菌和其它链球菌) • 真菌药敏
23
3号麦康凯琼脂平板
• PO0495A 90mmX10 PO0495F 70mmX10
• 均匀淡红色，无斑点，无裂纹
• 选择性分离肠杆菌和大肠埃希菌，用来检测不同标本中的肠杆菌 • 通过颜色变红来检测乳糖发酵 乳糖（＋）：粉红到红色菌落
病菌而设计
• 只需一次接种即可完成，方便、省时省力、且便于编号及对照。
哥伦比亚血琼脂/伊红美蓝琼脂 哥伦比亚血琼脂/中国蓝玫瑰红琼脂
哥伦比亚血琼脂/3号麦康凯琼脂
27
平板培养基主要问题
• 血平板颜色深 ，发黯，发黑
• 运输保存不当危害
• 平板培养基运输保存注意事项 • 血平板α、β溶血，苛养菌生长 • 平板培养基出水
应用：在链球菌中，B群链球菌、C群、F群都可出现CAMP试验阳性，故可 作为鉴定依据之一。其它细菌也可出现CAMP试验阳性，比如李斯特菌，摩 根菌等。
17
协同溶血（CAMP）试验
18
巧克力琼脂平板
• 巧克力琼脂平板（普通）
不加抗生素，用于无菌标本的培养、分离、鉴定(脑脊液、关节液、穿刺液等)
沙保氏葡萄糖琼脂
4
Oxoid制成培养基
医院常用品项：
• 滋养性：营养琼脂、血平板、巧克力平板
• 肠道菌：麦康凯、中国蓝玫红酸、 伊红美蓝、 SS平板 • 分隔平板：血琼脂/麦康凯琼脂、
血琼脂/中国蓝玫红酸琼脂等 • 真菌：沙保氏葡萄糖
• 显色：念珠菌显色培养基、 尿路感染显色培养基
5
PPM TOP10
PB8124A 90mmX10 PB8124A 70mmX10 • 万古霉素巧克力琼脂平板（培养嗜血杆菌）
添加万古霉素，用于痰标本中流感嗜血杆菌的检出
PB8001A 90mmX10 PB8001F 70mmX10 • 巧克力双抗琼脂平板（培养脑膜炎奈瑟氏菌）
添加万古霉素和多粘菌素（双抗），用于鼻咽部标本脑膜炎奈瑟氏菌的检出
金黄色葡萄球菌 （β溶血）
β溶血性链球菌
肺炎链球菌 （α溶血）
15
卫星试验
16
协同溶血（CAMP）试验
• 原理： B群链球菌能产生CAMP因子，可 促进葡萄球菌的B-溶血素溶解红细 胞的活性，因此在两菌（B群链球 菌和葡萄球菌）的交界处溶血力增 加，出现矢形（半月形）的溶血区 。
方法：先以产B-溶血素的金黄色葡萄球菌划一横线接种于血琼脂平板上，再 将被检菌与前一划线作垂直划线接种，两线不能相交，相距0.5～lcm，于 37℃培养18～24h，观察结果。每次试验都应设阴性和阳性对照。
常用培养基介绍
临床检验常用的成品培养基
• 分离用培养基
• 鉴定用培养基 • 药敏用培养基 • 院内感染控制用培养基 • 血培养
• 显色培养基
2
Oxoid干粉培养基
• CM：基础干粉，含有丰富的碳源、氮源、生长因子、选择性抑制因子，
显色剂
• SR：添加剂，通常包装10小瓶/盒，每瓶通常可配制500ml或225ml添加 的培养基，成分通常是抗生素和热敏感的营养成分
• 均匀的巧克力色外观
• 合理的抗生素设计，能够抑制标本中的大部分杂菌，提高淋球菌的检出率
20
流感嗜血杆菌在巧克力色血平板上的生长
21
淋球菌在巧克力色血平板上的生长
22
MH琼脂平板
• PO0152A 90mmX10 PO1043SA 140mmX5
• 无色或微黄色