生物英文文献的讲解和梳理
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C2C12:小鼠骨骼成肌细胞系 MYB01:小鼠成肌细胞 3~8h:细胞粘附,24、48、72h:定量检测细胞增殖
在不同基底硬度上未分化的成肌细胞在PCL 膜上的增殖和粘附 基底硬度对成肌细胞分化的影响 细胞融合是成肌细胞分化的基本条件 生化信号对成肌细胞的分化十分重要
Undifferentiated myoblasts functionally adhere to PCL films
Substrate stiffness affects skeletal myoblast differentiation in vitro
by Sara Romanazzo1,2, Giancarlo Forte3, Mitsuhiro Ebara3, Koichiro Uto3,Stefania Pagliari3, Takao Aoyagi3, Enrico Traversa4and Akiyoshi Taniguchi1
实验结论
01 02 03
基底的硬度对细胞分化起着重要作用
成肌细胞更易在软基质上分化
生物因子和细胞间接触对细胞成熟起着关 键作用,但生物分子的作用方式有待阐明
黏着斑的结构和功能
细胞的力学信号转导以这一结构网络为载体,其特殊的性质和 作用方式赋予了这种转导方式如下特点:其一,骨架网络具有对细胞内外应力进 行传递和分散的作用,而应力分布呈现的区域化特征,使细胞不同区域相关信号 强度不均一;其二,骨架网络在传递细胞内外应力的过程中,通过胞内外骨架协 同重组可对外力进行平衡,最终使骨架动力学变化整合为细胞张力水平,细胞张 力水平变化又可通过对胞内信号分子的活性调控,而影响细胞行为的各个方面; 其三,因许多酶和控制蛋白质合成、能量转换及细胞生长的物质都是以物理方式 被固定在细胞支架上,因此改变细胞的几何形状和骨架受力状态就可影响胞内信 号分子的活性,使细胞即时做出响应,故细胞力学信号的直接传递作用应快于对生 化信号的响应。
研究背景 紧密连接 细胞与生物材料表面的附着是一个复杂过程,包括细 粘着带 胞的初期粘附、铺展、细胞骨架组装、黏着斑的形成和细 粘着连接 胞外基质的分泌和重组。细胞的粘附过程和细胞信号传导 通路有关,黏着斑和细胞骨架的形成是成熟细胞信号传导 黏着斑 细胞连接 斑块连接 的前提。黏着斑是一组胞浆内蛋白质形成的复合物。整合 素与细胞外基质结合,再与黏着斑形成复合物,传导细胞 外基质以及生长因子的信号,引起细胞骨架的变化,继而 桥粒连接 引起细胞的形态和一系列功能变化。 间隙连接(动物) 通讯连接 胞间连丝(植物)
24h后,免疫荧光染色观察细胞形态和粘附过程的形成 A:红色:鬼笔环肽染色肌动蛋白,绿色:黏着斑蛋白的表达 B:粘着斑形成的详细过程 C:扫描电镜观察粘附细胞未分化的形态
Myogenic differentiation of myoblasts on PCL layers. C2C12 cells were seeded on PCL polymers and switched to differentiationmedium for 3 and 5 days
AlamarBlue® 定量分析细胞增殖状况
免疫荧光染色和共聚焦显微镜观察细胞形态 、骨架和蛋白质表达
Properties of cross-linked PCL films
Effect of substrate stiffness on myoblast adhesion and proliferation
SCIENCE AND TECHNOLOGY OF ADVANCED MATERIALS Volume 13(6) nov 13, 2012 IF=3.752 SCI 分区:SCI 2区 汇报人:田洁 2013年12月10日
Fra Baidu bibliotek 材料和方法
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制备四种不同硬度的聚已内酯膜(PCL)
培养大鼠成肌细胞、小鼠骨骼成肌细胞系、 人皮肤纤维原细胞、鼠胚胎纤维原细胞
Feeder layer systems. C2C12 cells pre-stained with redVybrantTMvital dye were cultured directly over a feeder layer ofnon-proliferating MYB01, MEF and NHDF in 3 distinct co-culture systems
MyoD expression in myoblasts cultured on PCL films
Myotube formation occurred only on upper layer of cells
Graphical representation of the feeder-layer setup